Colonisation et Infections pulmonaires nosocomiales : étude de la virulence et de la sensibilité...

Recherche en pneumologie 883

permettra de mieux caractériser la différenciation pro-fibrosantedes fibroblastes pulmonaires.Déclaration d’intérêts Les auteurs n’ont pas transmis de décla-ration d’intérêt.

http://dx.doi.org/10.1016/j.rmr.2014.06.016

11Effet protecteur des cellules souchesmésenchymateuses sur les cellulesépithéliales alvéolaires hypoxiquespar modulation de la balanceoxydant/antioxydantF. Jeny , C. Planès ∗, N. DardEA 2363, Bobigny — Paris XIII, 125, rue de Stalingrad, 93009Bobigny cedex, France∗ Auteur correspondant.Adresse e-mail : carole.planes@avc.aphp.fr (C. Planès)

Organisation Travail réalisé sous la direction de C. Planès etN. Dard.Introduction L’hypoxie alvéolaire marquée notamment dans lesphases d’exacerbation de la fibrose pulmonaire idiopathique (FPI)pourrait s’avérer délétère en favorisant l’apoptose et le proces-sus de fibrogenèse. Il a été montré que le milieu conditionné decellules souches mésenchymateuses humaines (MC-hCSM) avait uneffet cytoprotecteur, notamment en limitant l’apoptose de cel-lules épithéliales alvéolaires (CEA). Nous formulons l’hypothèse queles hCSM pourraient par un mécanisme paracrine limiter l’effetdélétère de l’hypoxie sur les CEA via une modulation de la signa-lisation antioxydante de ces dernières, permettant de limiterl’accumulation des espèces réactives de l’oxygène (ROS).Matériels et méthodes Des CEA de rats cultivées en fond de puitsont été exposées à une hypoxie sévère (HX, 1,5 % O2) ou à la nor-moxie pendant 24 h, en présence ou non de MC-hCSM. L’expressionet l’activité des enzymes antioxydantes, catalase, glutathion per-oxidase (GPX) et superoxyde dismutase (SOD) ont été analysées. Laquantification des ROS et des dommages de l’ADN par l’expressiondu gammaH2AX ont été recherchés.Résultats L’activité des enzymes antioxydantes (catalase, GPXet SOD totale) des CEA exposées à l’Hx est augmentée en pré-sence de MC-hCSM (p < 0,05). En revanche l’expression des enzymesantioxydante des CEA exposées à l’Hx (n = 7) ne semble pas êtremodifiée par le MC-hCSM. Des résultats préliminaires montrent quel’HX génère des ROS et augmentent l’expression du gammaH2AX. LeMC-hCSM semble prévenir cette accumulation de ROS et diminuerl’expression du gamma H2AX.Discussion Nos résultats suggèrent fortement que le MC-hCSMlimite l’accumulation de ROS en hypoxie, en majorant l’activitédes enzymes antioxydantes, ce qui pourrait expliquer en par-tie l’effet cytoprotecteur des hCSM vis-vis des CEA soumises àl’hypoxie. La modulation des activités enzymatiques dans notremodèle semble être essentiellement due à un(des) mécanisme(s)post-traductionnel(s).Conclusion En conclusion, cette étude in vitro montre que lescellules souches mésenchymateuses augmentent, par une voie para-crine, l’activité d’enzymes antioxydantes des CEA de rats exposéesà l’hypoxie.Déclaration d’intérêts Les auteurs n’ont pas transmis de décla-ration d’intérêt.

http://dx.doi.org/10.1016/j.rmr.2014.06.017

12Colonisation et Infections pulmonairesnosocomiales : étude de la virulenceet de la sensibilité à la chlorhexidinedes souches d’Escherichia coliresponsablesB. La Combe , J.-D. Ricard ∗UMR 722 INSERM et Université Paris Diderot avec le soutien de laFondation du Souffle/Fonds de Dotation Recherche en SantéRespiratoire, 5, rue Thomas Mann, 75013 Paris, France∗ Auteur correspondant.Adresse e-mail : jean-damien.ricard@lmr.aphp.fr (J.-D. Ricard)

Organisation Travail réalisé sous la direction de J.-D. Ricard.Introduction E. coli est la première entérobactérie impliquéedans la survenue de pneumonies acquises sous ventilation méca-nique (PAVM), et la plus fréquente des entérobactéries productricesd’une �-lactamase à spectre élargi (BLSE). Notre objectif étaitd’étudier, à large échelle, les caractéristiques antibiotypiques, phy-logénétiques et génomiques des isolats d’E. coli responsables dePAVM, ainsi que leur sensibilité à la chlorhexidine, utilisée lors dessoins oropharyngés en réanimation.Matériels et méthodes Nous avons réalisé une étude multicen-trique, prospective, avec recueil des isolats respiratoires d’E. colides patients sous ventilation invasive. Pour chaque isolat, nousavons caractérisé l’antibiotype, et, déterminé par PCR, les groupeset sous-groupes phylogénétiques, le O-type et le contenu en fac-teurs de virulence. La sensibilité à la chlorhexidine (CHX) étaitanalysée à travers l’élaboration de courbes de croissance, ainsi quela réalisation de temps de contact.Résultats Parmi les 84 isolats d’E. coli recueillis chez 80 patients,59 étaient responsables de pneumonies, et 25 de colonisationsimple. 13 % des isolats étaient sécréteurs de BLSE. Les isolats dugroupe B2 étaient majoritaires (57 %). Ils présentaient alors desscores de résistance aux antibiotiques inférieurs aux isolats non-B2,et leur score de virulence était supérieur. Les isolats présentaientdes temps de croissance maximaux à la CHX variées, corrélés àla résistance aux antibiotiques. Les concentrations de CHX 12 et2 mg/L étaient très peu efficaces sur un inoculum bactérien de109 UFC/mL.Discussion Ces résultats, s’ils confirment l’implication des isolatsdu groupe phylogénétique B2 et leur fort potentiel d’invasion res-piratoire, montrent que d’autres groupes phylogénétiques, moinssensibles aux antibiotiques, sont également responsables de PAVM.L’émergence de souches sécrétrices de BLSE est un aspect nouveauet préoccupant. Enfin, cette étude remet en cause la pertinence dessoins oropharyngés à la CHX, tels qu’ils sont réalisés actuellementen prévention des PAVM.Conclusion L’augmentation d’isolats sécréteurs de BLSE, et larichesse en facteurs de virulence des isolats respiratoires d’E. coli,rendent nécessaire l’amélioration de la prévention des PAVM, ainsique le développement de nouvelles voies thérapeutiques pourcontrecarrer à la fois la virulence des isolats sensibles aux anti-biotiques et les isolats multirésistants.Déclaration d’intérêts Les auteurs n’ont pas transmis de décla-ration d’intérêt.

http://dx.doi.org/10.1016/j.rmr.2014.06.018