BIOCHIMIE, 1972, 54, 257-260.

Action des plaquettes sur la prophospholipase plasmatique.

Marie-Jos6phe DUCHESNE, Jacque l ine ETIENNE, Annick GRi2BER et J 'acques POLONOVSKI.

C.H.U. S a i n t - A n t o i n e , F acn l t d de M 6 d e c i n e , 27 rue C h a l i g n y , Par i s 12 "~. (20-9-1971).

Summary . - - Plasma contains a prophospholipase which may be activated a factor presents in crude trypsin.

Rat platelets con.lain an acti~a.tor having the same role as crude .trypsin and convert the zymogen to active phospholipase.

This factor - - may be dissolved : by detergents (sodium deoxycholate) by CaCI~. (10-1 M) by successive congelations and decongelations. by ultra-sounds.

- - activates the prophospholipase of Rat plasma, of Man and Rabit plasma and serum and of human globular lysate.

- - is heat sensitive.

INTRO,DUC~ON.

Dans nos derni6res publ ica t ions [1, 2], nous avons mis en 6vidence dans le s6rum et le p lasma h6parin6 de rat une phosphol ipase qui agit sur les phospha t idy l6 thanolamines (PE) et sur la phos- pha t idy lg lyc6ro l (PG) en donnant tes d6riv6s monoacyl6s correspondants . En comparan t l 'acti- vit6 phosphol ipas ique du s6rum et du plasma, nous avons constat6 :

- - q u e le s6rum cont ient une phosphol ipase tr6s active, un iquement sous forlue l ibre ;

- - que le plasma renfe rme une phosphol ipase l ibre fa iblement act ive et une phosphol ipase acti- vable par la t ryps ine brute O). L'act ivi t6 totale du plasma est toujours inf6r ieure h celle du s6ruin. Ces r6sultats ont 6t6 obtenus avec des plasmas recuei l l is sur h6parine, doric d6pourvus de pla- quettes ; nous avons poursuiv i cette 6tude sur des plasmas r iches en plaquettes et sur les plaquet tes isol6es.

Nos exp6riences ont montr6 que si le plasma r iche en plaquet tes est beaucoup plus actif que le plasma pauvre en plaquettes, cette diff6rence n'est pas imputable A l 'act ivi t6 phosphol ipas ique pro- pre des plaquettes, mats h leur act ion t ryps ine- l ike sur la p rophosphol ipase . Nous avons v6rifi6 que les plaquet tes ont la m6me action sur les pro-

(*) Un CravaH en cours a montr6 que le faeteur acti- vateur pr6sent clans la trypsine (trypsine pancr~atique brute (< Sigma >>) est distinct de la ,trypsine propre- merit dile.

phosphol ipases d 'autres or igines : p lasma et s6rum humain, globulaire. La nature enzymat ique de ce facteur p laquet ta i re est envisag6e.

TECHNIQUES.

1 °) PRt~PARATION de p lasma r iche en plaquettes (PRP) de p lasma d6pourvu de plaquettes (PDP) de plaquettes.

Nous uti l isons des rats rnhles ou femelles, pesant de 200 h 300 g, de race Sprague-Dawley. Apr~s anesth6sie du rat par l '6ther, le sang est pr61ev6 dans l 'aor te abdominale h l ' a ide d 'une ser ingue et est recuei l l i en tube silicon6 contenant une solu- tion de complexon h 1 p. cent ou d'ACD. Quel- ques minutes plus tard le sang est centrifug6 5 mn h 2 000 t / in in et le PRP pr61ev6 h l ' a ide d 'une pipet te Pasteur silicon6e. Le PRP est ensuite cen- trifug6 20 fi 30 mn h 8 000 t / m i n ; apr~s ~limina- t ion du PDP, le culot de plaquettes est lay6 2 fois par le l iquide de Piette ; les th romboeytes sont ensuite mis en suspension dans 1 volume d 'une solution de tr is 0,05 M pH 7,4 ou de s6rum phys io logique co r respondan t au volume du PRP initial.

2 °) PRI~PARATION DE PHOSPHATIDYLETHANOLAMINES MARQUISES AU 32p (a2pE) (*).

Nous uti l isons la t echnique pr6c6demment d6- cri te (3).

(*) Ce travail a b6n6fici~ d'une subvention du Com- missariat ~ l'Energie Atomique pour l'achat des mol6- cules marquees.

2 5 8 M.-J. Duchesne, J. Et ienne, A. Griiber et J. Polonovski .

3 °) ])OSAGE DE L'AGTIVIT]~ ]PHOSPHOLIPASIQUE,

P o u r 6 v a l u e r l ' a c t i v i t 6 p h o s p h o l i p a s i q u e , n o u s m e s u r o n s la q u a n t i t 6 de l y s o p h o s p h a t i d y l 6 t h a n o l - a m i n e s ( L P E ) f o r m 6 e au c o u r s de l ' i n c u b a t i o n de l ' e n z y m e a v e c s o n s u b s t r a t d a n s les c o n d i t i o n s d6jh p r 6 c i s 6 e s ( v o i r 16gende du t a b l e a u I). P E et L P E s o n t s 6 p a r 6 e s p a r c h r o m a t o g r a p h i e e n cou- c h e m i n c e , s u i v i e d ' a u t o r a d i o g r a p h i e [3] ; le c o m p - t age de la r a d i o a c t i v i t 6 de l ' a c i d e s i l i c i q u e c o r r e s - p o n d a n t h P E et L P E r e c n e i l l i en c o u p e l l e s p e r m e t de c a l c u l e r le n o m b r e de mi, m o l b P E f o r m 6 e s e n 15 m n d ' i n c u b a t i o n h 37 ° p a r 10'0 ~l de p l a s m a . P o u r O r e s t i r de n o u s t r o u v e r d a n s la z o n e de c o n c e n t r a t i o n en e n z y m e p r o p o r t i o n n e l l e h la q u a n t i t 6 de L P E f o r m 6 e n o u s f a i s o n s s y s t 6 m a t i - q u e m e n t les d i f f 6 r e n t e s m e s u r e s a v e c 3 doses dif- f 6 r e n t e s de p l a s m a ou de s 6 r u m di lu6. P a r a i l l e u r s n o u s c o n t r 6 1 o n s la r e p r o d u c t i b i l i t 6 des m e s u r e s e n les e f f e c t u a n t s u r 2 6 c h a n t i l l o n s i d e n t i q u e s . Ces 2 p r 6 c a u t i o n s n o u s p e r m e t t e n t d ' 6 v a l u e r l ' a c t i v i t 6 a v e c u n e p r 6 c i s i o n r e l a t i v e de l ' o r d r e de 10 p. c e n t p o u r les a c t i v i t 6 s s u p 6 r i e u r e s h 50 m ~ m o l / 1 5 nan.

R t ~ S U L T A T S E X P t ~ R I M E N T A U X .

10) COMPARAISON DE L~ACTIVITE PHOSPHOLIPASIQUE

D~UN PLASMA, RICHE OU PAUVRE EN PLAQUETTES ET DES PLAQUETTES.

Nous c o m p a r o n s l ' a c t i v i t 6 p h o s p h o l i p a s i q u e d ' u n p l a s m a r i c h e en p l a q u e t t e s ( P R P ) de ce m 6 m e

TABLEAU I.

- - ( + t - - t + t - - t + t - t + t

PDP . . . . . . . . . . . . . . t ol S01t aee ll00/ 151 501 01 Plaquettes . . . . . . . . . ] 10] 15/ - - I 15[ 251 2 0 t - - I - -

Nombre de m~mol LPE form6es pendan t 15 inn d ' in- cuba t ion h 37°C de PE avec 100 i~1 de p lasma riche en p laque t tes (PRP). pauvre en p laquet tes (PDP).

Les plaque' t tes isol6es h p a r t i r de 100 ilxl de PRP en absence de ~rypsine (-- t ) en pr4sence de t ryps ine (+.t). La eoncentrati ,on de la t ryps ine b ru t e est de 3 p. 1000 pa r r appor t aux pro- t6ines du p lasma.

Condi t ions d ' i ncuba t ion ; une quant i t~ de PE ~quiva- lente h 0,5 ~xg P incub4e h 37 ° avec 10 .~xl de p l a sma ou de plaquet tes , en mi l ieu t ampon t r is 0,05 M pH 7,4 dans un volume final de 2 m], en pr6sence de CaClu, concen- t r a t i on finale 10-3 M.

Ce t a b l e a u m o n t r e :

- - q u e la r i c h e s s e du P R P e n p h o s p h o l i p a s e a c t i v e est t r6s s u p 6 r i e u r e "~ ee l le d u PD'P, m a t s i n f 6 r i e u r e h ce l le d u s 6 r u m (100 !,1 de s 6 r u m de r a t de m 6 m e r a c e et de m 6 m e ~ge l i b 6 r e n t de 300 400 m~unol L P E en 15 m i n d ' i n c u b a t i o n ~ 37°C). L ' a c t i o n de la t r y p s i n e b r u t e es t nu l l e d a n s le cas d u P R P ; la to t a l i t6 de l ' e n z y m e est sous f o r m e ac t ive .

- - que le P D P p o s s 6 d e p e u ou p a s de p h o s p h o - l i p a s e ac t ive , m a t s u n p r 6 c u r s e u r a c t i v a b l e p a r la t r y p s i n e b r u t e , ce qu i est e n a c c o r d a v e c ce q u i a d6jh 6t6 ufis en 6 v i d e n c e d a n s le p l a s m a h 6 p a r i n 6 .

- - - q u e les p l a q u e t t e s p o s s 6 d e n t u n e ac t i v i t 6 p h o s p h o l i p a s i q u e p e u i m p o r t a n t e . L e u r p r 6 s e n c e d a n s le P R P n ' e x p l i q u e d o n c p a s le p l u s g r a n d n o m b r e de m,~moles L P E f o r m 6 e s p a r a c t i o n de ce lu i -c i . Les p l a q u e t t e s j o u e n t c e p e n d a n t u n r61e d a n s le P R P , m a t s en t a n t q u ' a c t i v a t e u r d u p ro - e n z y m e ; e l les o n t d o n c u n r61e a n a l o g u e h la t r y p - s i n e b r u t e .

2 °) MISE E~ EVI.DENCE DE L'ACTION ACT'IVATRICE DES PLAQUETTES.

a) sur la prophospholipase du plasma de ral.

L o r s q u ' u n P D P est a d d i t i o n n 6 d ' u n e s u s p e n s i o n p l a q u e t t a i r e ( d a n s le s 6 r u m p h y s i o l o g i q u e o u d a n s le t a m p o n t r i s 0,05 M p H 7,4 en c o n c e n t r a t i o n rel ic q u ' e l l e soi t i d e n t i q u e ~ ce l le d ' u n P D P n o r m a l ) , n o u s c o n s t a t o n s que l ' a c t i v i t 6 p h o s p h o l i p a s i q u e d u P D P d e v i e n t la m 6 m e que ce l le d u P R P et q u ' i l n ' y a p l u s d ' a c t i v a t i o n p a r la t r y p s i n e b r u t e .

TABLEAU II .

PRP. . PDP . . . . . . . . . . . . . . . . . PDP additionn6 d 'nne suspension de plaquet- tes . . . . . . . . . . . . . . . . . .

- - t

160 30

160

! 2

160 1401160 lOO] 1511oo

180 150 140

3

- - t + t

1001110 0/ 50

,1101 - -

4

- - t + t

1401140

10 l 80

1601140

Mise en ,6vidence de l ' ac t ion des p laquet tes de ra t s.ur la p rophosphol ipase du PDP.

Les r6sul ta ts sont exprim6s en Irrl~mol LPE form6es au cours de l ' i ncuba t ion h 37°C pendan t 15 mn.

Les condi t ions sont celles d6crites sous le t ab leau I. Le tem.ps de contact du PDP et de la suspension de

plaquet tes , h l'a t emp6ra tu re du labara to i re , avan t Pin- cubat ion avec le subst ra t , est de 15 ran.

p l a s m a d 6 b a r r a s s 6 de ses p l a q u e t t e s (PDP) et des p l a q u e t t e s e l l e s -m6mes . Les r 6 s u l t a t s s o n t r 6 u n i s d a n s le t a b l e a u I.

Les r 6 s u l t a t s r 6 u n i s d a n s le t a b l e a u I I m o n t r e n t que les p l a q u e t t e s on t u n e a c t i o n e n c o r e p lu s e f f i cace que la t r y p s i n e b r u t e p u i s q u e u n PD'P

BIOCHIMIE, 1972, 54, n ° 2.

Action des plaquet tes sur la prophosphol ipase plasmatique. 259

t r a i t 6 p a r la t r y p s i n e b r u t e n ' a t t e i n t j a m a i s l ' a c t i - v i t6 d ' u n PRP .

b) sur la prophospholipase d'orgines diff~- rentes.

Nous a v o n s 6 tud i6 F a c t i o n d ' u n e s u s p e n s i o n de t h r o m b o c y t e s s u r la p r o p h o s p h o l i p a s e d u p l a s m a et d u s 6 r u m h u m a i n , d u p l a s m a de l a p i n et d u l y s a t de g lobu l e s r o u g e s h u m a i n s , t i s sus qu i con - t i e n n e n t le p r 6 c u r s e u r ~3, 4].

Le t a b l e a u I I I m o n t r e que d a n s c h a q u e cas les p l a q u e t t e s j o u e n t le m6Ine r61e que la t r y p s i n e b r u t e et a c t i v e n t le p r 6 c u r s e u r .

TABLEAU I l l .

Plasma humain

S6rum humain Plasma lapin

l .ysat globulaire humain

Traitement

par la par les tupslnehr~te plaquettes

65 90 80 120

120 150 120 120 125 180 400 400

Sslls Iraitement

0 5 5

20 5

20

Action d.es p laque t tes de ra t sur le pr6curseur du p lasma et du s6rum d 'homme, du p lasma de lap in et de lysat de globules rouges humains .

Les r6sul ta ts sont exprim6s en mlxmol LPE form6es pa r 100 it~l de sdrum, de p lasma ou de lysa t globulaire , apr~s aet ' ivation pa r les plaquet tes , pendan t 15 m n d ' ineuba t ion h 37 °.

Les condi t ions sont celles d6crites sous le t ab leau I.

c) lraitement par les ultrasons.

La s u s p e n s i o n des p l a q u e t t e s d a n s le t a m p o n t r i s 0,05 M p H 7,4 es t s o u m i s e a u x u l t r a s o n s p e n - d a n t 15 m i n u t e s sous 250 w a t t s d a n s u n R a y t h 6 o n avec u n e f r 6 q u e n c e de 10 k i l o c y c l e s . Les ce l lu l e s s o n t 61imin6es p a r c e n t r i f u g a t i o n ( t a b l e a u IV) et seul le s u r n a g e a n t est ac t i f .

d) cong~lations el d~cong~lations successives.

Les t h r o m b o c y t e s e n s u s p e n s i o n d a n s le t a m p o n I r i s s o n t p l o n g 6 s s u c c e s s i v e m e n t d a n s u n m61ange

- - 6 0 ° (m61ange de m 6 t h a n o l et de n e i g e e a r b o - n i q u e ) et d a n s u n b a i n d ' e a u h 37°C.

L ' o p 6 r a t i o n est r6p6 t6e u n e d i z a i n e de fois .

,Les d 6 b r i s c e l l u l a i r e s s o n t 6 g a l e m e n l s 6 p a r 6 s p a r c e n t r i f u g a t i o n .

Le t a b l e a u IV m o n t r e que l ' a d d i t i o n d ' u n e x t r a i t p l a q u e t t a i r e p r 6 p a r 6 s u i v a n t l ' u n e de s q u a l r e t e c h n i q u e s d 6 c r i t e s p e r m e t de t r a n s f o r m e r la p ro - p h o s p h o l i p a s e en e n z y m e aet i f .

TABLEAU IV.

PRP PDP

160 tr. 160 - - 140 tr . 120 15 10o 160 100 10 160 20

PDP trait6 par extrait plaquettaire

A B C D

160 160 140 130

160 100 160

200 160

90

120 200

180

90

100

140

160

80 140

170

3 ° ) SOLUBILISATION DE L'ACTIVATEUR A PARTIR DES PLAQUETTES.

I1 est p o s s i b l e de s o l u b i l i s e r eet a e t i v a t e u r d ' o r i - g ine p l a q u e t t a i r e h l ' a i d e des d 6 t e r g e n t s ou p a r des t r a i t e m e n t s p r o v o q u a n t l ' 6 c l a t e m e n t ce l l u l a i r e .

a) traitement par le d~soxycholate de sodium.

Les p l a q u e t t e s t r a i t 6 e s p a r u n e s o l u t i o n de d6s- o x y c h o l a t e de s o d i u m , h la c o n c e n t r a t i o n f ina le de 1 p. c e n t d o n n e n t u n e s o l u t i o n a c t i v e et l i i n p i d e .

b) traitement par CaCti.

Si les p l a q u e t t e s e n s u s p e n s i o n clans u n e solu- t i o n de t r i s 0,05 M p H 4, s o n t t r a i t 6 e s p a r u n e solu- t i o n de CaCI._, de i n a n i b r e h ce que la c o n c e n t r a - t i o n f ina le d a n s le m i l i e u so i t 10 -1 M, n o u s ob te - n o n s a p r 6 s 6 1 i m i n a t i o n des f r a g m e n t s c e l l u l a i r e s , u n e s o l u t i o n a y a n t l ' a c t i v i t 6 r e c h e r c h 6 e (ta- b l e a u IV).

Activist6 des ex t ra i t s plaquet.taires. A ---- solut ion d6soxyeholate. B = solut ion apr6s t r a i t e m e n t pa r CaCl~. C = solut ion apr6s u l t r a sona t ion . D = solut ion apr~s 10 eong61ations A- d6cong6lat ions

b ru t a l e s sur la p rophospho l ipase du PDP. 1 ml de PDP est t ra i t6 par 0,1 ml de solut ion p laquet -

ta i re cor respondant h 1 ml de PRP ini t ial . Les condi t ions d ' ineuba t ion sont eelles d6crites sous

le tab leau I. Les r~sul ta ts sont exprimds en m~xmol LPE form6es

pendan t 15 mn d ' incuba t ion h 37~C.

4 °) ACTION DE LA TEMPERATURE SUR LE FACTEUR

PLAQUETTAIRE.

Le f a c t e u r p l a q u e t t a i r e est r e l a t i v e m e n t t h e r m o - l a b i l e ; c h a u f f 6 10 m n h des t e m p e r a t u r e s com- p r i s e s e n t r e 40 et 100 ° ; il c o n s e r v e i n t 6 g r a l e m e n t ses p r o p r i 6 t 6 s a c t i v a t r i c e s j u s q u ' h 50 °, p u t s a p p a - r a i t u n e b a i s s e e n t r e 50 et 55 ° qu i se p o u r s u i t j u s q u ' h 60 ° oh ]a p o r t e d ' a c t i v i t ~ est to ta le .

BIOCHIMIE, 1972, 54, n ° 2.

260 M.-J. D u c h e s n e , J. E t i e n n e , A. Gri iber et J. P o l o n o v s k i .

DISCUSSION.

Les r 6 s u l t a t s o b t e n u s p e r m e t t e n t de p r 6 c i s e r que l s rS les j o u e n t r e s p e c t i v e m e n t le p l a s m a et les p l a q u e t t c s dams l ' a p p a r i t i o n d ' u n e ac t iv i t6 p h o s - p h o l i p a s i q u e dams le P R P de ra t .

- - le PD,P c o n t i c n t la p r o p h o s p h o l i p a s e (dams c e r t a i n s 6 c h a n t i l l o n s n o u s n o t o n s u n e f a i b l e ac t i - v i t6 p h o s p h o l i p a s i q u e l i b r e due h u n d 6 b u t d ' a c t i - v a t i o n d u z y m o g 6 n e p a r les p l a q u e t t e s q u a n d ce l l es -c i n ' o n t p a s 6t6 s 6 p a r 6 e s assez r a p i d e m e n t d u p l a s m a ; n o u s a v o n s v6r i f i6 que le P D P es t tou- j o u r s d 6 p o u r v u de p h o s p h o l i p a s e q u a n d le P R P est c e n t r i f u g 6 i m m 6 d i a t e m e n t a p r 6 s s on pr616ve- m e n t ) .

- - les p l a q u e t t e s qu i p o s s 6 d e n t d ' a i l l e u r s e l les- m 6 m e s u n e p h o s p h o l i p a s e p e u ac t ive , r e n f e r m e n t u n a c t i v a t e u r qu i t r a n s f o r l n e le p r o e n z y m e a c t i f c o m m e le f a i t le f a c t e u r p r 6 s e n t dams la t r y p s i n e et m 6 m e p l u s e f f i c a c e m e n t .

Cet a c t i v a t e u r t h r o m b o c y t a i r e n ' a p a s u n e a c t i o n a c t i v a t r i c e s u r la seu le p r o p h o s p h o l i p a s e d u p l a s m a de r a t : n o u s a v o n s m o n t r 6 q u ' e l l e e x e r c e la i n 6 m e a c t i o n v i s -h -v i s de la p r o p h o s p h o - l i p a s e des g lobu l e s r o u g e s de r a t , d u p l a s m a e t d u s 6 r u m h u m a i n s et de l a p i n .

N o u s a v o n s c o n s t a t 6 ( r6 su l t a t s n o n p u b l i 6 s ) q u c ce f a c t e u r de n a t u r e p r o t 6 i q u e es t i n 6 g a l e m e n t r 6 p a r t i s e l o n les e s p6ces p u i s q u e n o t a m m e n t les p l a q u e t t e s d ' h o m m e , d o n t le s 6 r u m et les g lobu le s r o u g e s r e n f e r m e n t u n e p r o p h o s p h o l i p a s e , e n s o n t p r e s q u e t o t a l e m e n t d 6 p o u r v u e s .

L a t h e r m o l a b i l i t 6 r e l a t i v e de ce f a c t e u r es t en f a v e u r d ' u n e n a t u r e e n z y m a t i q u e ; l ' 6 t u d e de s o n m o d e d ' a c t i o n p e r m e t t r a on n o n de c o n f i r m e r ce t t e h y p o t h 6 s e .

L a l i b 6 r a t i o n p o s s i b l e de ce t a c t i v a t e u r h p a r t i r des p l a q u e t t e s sugg6 r e 2 h y p o t h 6 s e s : ou ce f a c t e u r i n t e r v i e n t au c o u r s de l a c o a g u l a t i o n e t a sa p l a c e dams la s u c c e s s i o n des f a c t e u r s ac t iv6s e n c h a l n e s ou s o n rS le es t l i m i t 6 h s o n a c t i o n s u r la p r o p h o s - p h o l i p a s e et n ' e s t p a s e s s e n t i e l h l a c o a g u l a t i o n . Cet te s e c o n d e h y p o t h 6 s e s ' a c c o r d e m i e u x a v e c les d i f f 6 r e n c e s o b s e r v 6 e s e n t r e les s a n g s d ' h o m m e et de ra t . Q u e l q u e sp i t le m 6 c a n i s m e , la lyse p l a q u e t - t a i r e au c o u r s de la f o r m a t i o n d u ca i l l o t c h e z le r a t l i b 6 r e v r a i s e n l b l a b l e m e n t l ' a c t i v a t e u r et p e r - m e t la t r a n s f o r m a t i o n e n p h o s p h o l i p a s e d u p r6 -

c u r s e u r d u p l a s m a ce qu i e x p l i q u e r a i t la p r 6 s e n c e d ' u n e n z y m e i n a c t i f dams le p l a s m a d e v e n u a c t i f dams le s 6 r u m .

On p e u t 6 g a l e m e n t se d e m a n d e r s i ce t t e p h o s - p h o l i p a s e a i n s i d 6 r a a s q u 6 e ag i t su r les p h o s p h a - t i d y l 6 t h a n o l a m i n e s des p h o s p h o l i p i d e s des t h r o m - b o c y t e s qu i i n t e r v i e n n e n t dams lcs p r e m i 6 r e s 6 t apes de la c o a g u l a t i o n et dams ce ca s que l p o u r - r a i t O r e le r61e de l ' e n z y m e dams le p h 6 n o m 6 n e de la lyse p l a q u e t t a i r e .

Le p lasma ren fe rme une p rophosphol ipase act ivable pa r la t ryps ine bru te .

Les p laquet tes de r a t con t i ennen t un ac t iva teur qui joue le m~me rSle que la t ryps ine b r u t e et t r ans fo rme le zymog6ne en phosphol ipase active.

Ce fac teur p l aque t t a i r e : - - peut 4tre solubil is6 par t r a i t e m e n t

• p a r les d6tergents (d6soxycholate de sodium) • pa r CaCl~ (10-1 M) • pa r cong61ations et d6eong61ations successives • pa r les nl.trasons

- - active la pro phosphol ipase du p l a sma de rat , celle du p lasma et du s4rum d ' homme et de l ap in et cel].e du lysa t g lobula i re h u m a i n

- - est thermosens ib le .

ZUSAMMENFASSUNG.

Das Blu tp lasma entt~il t eine Prophosphol ipase , die durch rohes Tryps in ak t iv i e rba r isit.

Die Bht tp l i i t tchen der Rat te bes i tzen einen Akt ivator , der die gleiche Rolle vcie alas r ob Tryp~sin spiel¢ und das Zymogen in akt ive Phosphol ipase umformt .

D.ieser pl 'St tchenbi ldende Faktor . - - Kann gel6st werden :

• mi t Detergent ien (Natr ium-desoxychola t ) • dureh Behand lung re.it CaOl: (10-1 M) • du tch aufe inander fo lgendes E in f r i e ren und

Auf taven • m i t UKraschal l

- - ak t iv ie r t die P rophospho l ipase des Ra t tenp lasmas , die des Blu tp las lnas u n d Serums des Menschen und Hasen und die des Lysats im mensch l ichen Blue.

- - ist w~irmeempfindlich.

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