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© 2007. Elsevier Masson SAS. Tous droits réservés Rev Neurol (Paris) 2007 ; 163 : 11, 1031-1038 1031 L. DEMANGE et coll. Mémoire Analyse phénotypique de 154 patients porteurs d’une mutation constitutionnelle du gène NF2 L. Demange 1 , C. de Moncuit 2 , G. Thomas 3 , S. Olschwang 4 1 Centre René-Huguenin, Saint-Cloud, France. 2 Hôpital Saint-Antoine, Paris, France. 3 NCI/NIH, Gaithersburg, États-Unis. 4 INSERM, U599, Institut Paoli-Calmettes, Marseille, France. Reçu le : 19/10/2006 ; Reçu en révision le : 23/02/2007 ; Accepté le : 17/04/2007. RÉSUMÉ Introduction. La neurofibromatose de type 2 est associée à une mutation constitutionnelle du gène NF2 dans 80 p. 100 des formes typi- ques. La plupart des mutations entraînent la synthèse d’une protéine tronquée ; quelques mutations faux sens ont été observées. Afin d’étudier le phénotype, les données cliniques de 154 patients, chez qui une mutation constitutionnelle avait été identifiée, ont été collectées et analysées. Méthodes. Un questionnaire rétrospectif a été envoyé aux cliniciens référents. L’analyse statistique descriptive des génotypes et phénotypes a été faite par comparaison des valeurs moyennes et des tests de corrélation. Résultats. Les mutations faux sens ont une expression plus tardive et moins sévère. Les mutations non sens ou les courtes insertions/délétions provoquent plus fréquemment des méningiomes et des tumeurs spinales, mais il existe une variabilité intrafamiliale importante et les différences observées ne sont pas sta- tistiquement significatives. Le type de mutation est comparable chez les hommes et chez les femmes et ne varie pas avec le mode de présentation (sporadique ou familial). Conclusion. Le nombre et le type de tumeurs, bien que déterminés par le type de mutation du gène NF2, restent variables chez des patients apparentés, suggérant le maintien d’une prise en charge identique pour tous les patients. L’exis- tence de formes atypiques souligne la nécessité d’élargir les critères cliniques diagnostiques de la neurofibromatose de type 2, et l’intérêt de poursuivre les analyses génétiques constitutionnelles avec les indications actuelles. Mots-clés : Neurofibromatose de type 2 • Mutation constitutionnelle • Phénotype • Génotype • Risque SUMMARY Phenotype-Genotype study in 154 French NF2 mutation carriers. L. Demange, C. de Moncuit, G. Thomas, S. Olschwang, Rev Neurol (Paris) 2007; 163: 11, 1031-1038 Introduction. Germline mutations in the NF2 gene are responsible for 80 p.cent of neurofibromatosis type 2 typical cases. Mutations are mainly truncating mutations or deletions, missense mutations having been reported in few cases. An important phenotypic variability is observed among gene carriers. To assess whether the phenotypic variability of neurofibromatosis 2 could be linked to genotype, clinical data of 154 patients whose NF2 germline alteration had been identified in our laboratory have been collected. Methods. A retrospective questionnaire was sent to the physicians in charge of these patients. Statistical analyses regarding genotypic and phenotypic data were performed by comparisons of average values and correlation tests. Results. In French patients, type of mutation was correlated neither with patients’ sex, nor with disease occurrence mode (de novo or inherited mutation). Disease associated with missense mutations occurred later, with a less severe symptomatology. Patients with nonsense or frameshift mutations were more frequently affected with meningiomas and spinal tumours, in addition to VIII nerve schwannomas, an observation that underlies the genetic determination of the number and type of NF2-related tumours. Conclusion. Results from the literature as well as from our study tend to show that only few correlations exist between genotype and phenotype in the NF2 disease. It also recognizes that missense mutations have a lower level of evolution, severity and mortality risk. Nonsense and frameshift mutations seem to be associated with a higher number of meningiomas and spinal tumours. Therefore, NF2 gene screening keeps its indications in both typical and moderate forms of the disease. Mutations are responsible of 80 p.cent of typical forms; in moderate forms, identification of a missense mutation seems linked to a lower disease evolution. In any case, assessment and supervision should be identical. Finally, in a small number of cases, the NF2 gene appears to be implicated in clinical forms different from those defined by NIH and it might be of interest to enlarge the clinical features suggestive of the disease. Keywords: Neurofibromatosis type 2 • Germline mutation • Phenotype • Genotype • Risk assessment Correspondance : S. OLSCHWANG, Institut Paoli-Calmettes, INSERM UMR599, 232, boulevard Sainte-Marguerite, 13009 Marseille, France. E-mail : [email protected]

Analyse phénotypique de 154 patients porteurs d’une mutation constitutionnelle du gène NF2

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Page 1: Analyse phénotypique de 154 patients porteurs d’une mutation constitutionnelle du gène NF2

© 2007. Elsevier Masson SAS. Tous droits réservés

Rev Neurol (Paris) 2007 ; 163 : 11, 1031-1038

1031

L. DEMANGE et coll.

Mémoire

Analyse phénotypique de 154 patients porteurs d’une mutation

constitutionnelle du gène

NF2

L. Demange

1

, C. de Moncuit

2

, G. Thomas

3

, S. Olschwang

4

1

Centre René-Huguenin, Saint-Cloud, France.

2

Hôpital Saint-Antoine, Paris, France.

3

NCI/NIH, Gaithersburg, États-Unis.

4

INSERM, U599, Institut Paoli-Calmettes, Marseille, France. Reçu le : 19/10/2006 ; Reçu en révision le : 23/02/2007 ; Accepté le : 17/04/2007.

RÉSUMÉ

Introduction.

La neurofibromatose de type 2 est associée à une mutation constitutionnelle du gène

NF2

dans 80 p. 100 des formes typi-ques. La plupart des mutations entraînent la synthèse d’une protéine tronquée ; quelques mutations faux sens ont été observées. Afind’étudier le phénotype, les données cliniques de 154 patients, chez qui une mutation constitutionnelle avait été identifiée, ont été collectéeset analysées.

Méthodes

. Un questionnaire rétrospectif a été envoyé aux cliniciens référents. L’analyse statistique descriptive des génotypeset phénotypes a été faite par comparaison des valeurs moyennes et des tests de corrélation.

Résultats.

Les mutations faux sens ont uneexpression plus tardive et moins sévère. Les mutations non sens ou les courtes insertions/délétions provoquent plus fréquemment desméningiomes et des tumeurs spinales, mais il existe une variabilité intrafamiliale importante et les différences observées ne sont pas sta-tistiquement significatives. Le type de mutation est comparable chez les hommes et chez les femmes et ne varie pas avec le mode deprésentation (sporadique ou familial).

Conclusion.

Le nombre et le type de tumeurs, bien que déterminés par le type de mutation du gène

NF2

, restent variables chez des patients apparentés, suggérant le maintien d’une prise en charge identique pour tous les patients. L’exis-tence de formes atypiques souligne la nécessité d’élargir les critères cliniques diagnostiques de la neurofibromatose de type 2, et l’intérêtde poursuivre les analyses génétiques constitutionnelles avec les indications actuelles.

Mots-clés :

Neurofibromatose de type 2 • Mutation constitutionnelle • Phénotype • Génotype • Risque

SUMMARY

Phenotype-Genotype study in 154 French NF2 mutation carriers.

L. Demange, C. de Moncuit, G. Thomas, S. Olschwang, Rev Neurol (Paris) 2007; 163: 11, 1031-1038

Introduction.

Germline mutations in the NF2 gene are responsible for 80 p.cent of neurofibromatosis type 2 typical cases. Mutations aremainly truncating mutations or deletions, missense mutations having been reported in few cases. An important phenotypic variability isobserved among gene carriers. To assess whether the phenotypic variability of neurofibromatosis 2 could be linked to genotype, clinicaldata of 154 patients whose NF2 germline alteration had been identified in our laboratory have been collected.

Methods.

A retrospectivequestionnaire was sent to the physicians in charge of these patients. Statistical analyses regarding genotypic and phenotypic data wereperformed by comparisons of average values and correlation tests.

Results.

In French patients, type of mutation was correlated neitherwith patients’ sex, nor with disease occurrence mode (de novo or inherited mutation). Disease associated with missense mutations occurredlater, with a less severe symptomatology. Patients with nonsense or frameshift mutations were more frequently affected with meningiomasand spinal tumours, in addition to VIII nerve schwannomas, an observation that underlies the genetic determination of the number and typeof NF2-related tumours.

Conclusion.

Results from the literature as well as from our study tend to show that only few correlations existbetween genotype and phenotype in the NF2 disease. It also recognizes that missense mutations have a lower level of evolution, severityand mortality risk. Nonsense and frameshift mutations seem to be associated with a higher number of meningiomas and spinal tumours.Therefore, NF2 gene screening keeps its indications in both typical and moderate forms of the disease. Mutations are responsible of80 p.cent of typical forms; in moderate forms, identification of a missense mutation seems linked to a lower disease evolution. In any case,assessment and supervision should be identical. Finally, in a small number of cases, the NF2 gene appears to be implicated in clinicalforms different from those defined by NIH and it might be of interest to enlarge the clinical features suggestive of the disease.

Keywords:

Neurofibromatosis type 2 • Germline mutation • Phenotype • Genotype • Risk assessment

Correspondance :

S. O

LSCHWANG

, Institut Paoli-Calmettes, INSERM UMR599, 232, boulevard Sainte-Marguerite, 13009 Marseille, France.E-mail : [email protected]

Page 2: Analyse phénotypique de 154 patients porteurs d’une mutation constitutionnelle du gène NF2

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Rev Neurol (Paris) 2007 ; 163 : 11, 1031-1038

L. DEMANGE et coll.

INTRODUCTION

La neurofibromatose de type 2 (NF2) est une maladiehéréditaire à transmission autosomique dominante, qui pré-dispose au développement de tumeurs du système nerveuxcentral et périphérique. L’incidence est estimée à 1 cas pour35 000 naissances, et les premiers symptômes apparaissentgénéralement à l’adolescence ou chez l’adulte jeune, lapénétrance étant complète à 60 ans (Evans

et al.

, 1992a).Des critères cliniques diagnostiques ont été définis par uneconférence de consensus du National Institute of Health en1988, puis ont été progressivement modifiés en 1990 et en1997 (Gutmann

et al

., 1997). Les mutations constitutionnel-les du gène NF2 sont responsables de cette affection. Ellessont sporadiques dans environ la moitié des cas. La plupartdes mutations conduisent à la synthèse d’une protéine tron-quée, et 13 mutations faux-sens ont été décrites (Rouleau

etal.

, 1993 ; Mérel

et al.

, 1993). Le gène NF2 code une pro-téine appelée schwannomine qui présente une forte homolo-gie avec les protéines de la famille ERM, en particulier dansla partie N-terminale. C’est une protéine cytoplasmique quiinteragit avec différents composants du cytosquelette, enparticulier les filaments d’actine. Elle a également un rôlesuppresseur de tumeur, en intervenant dans le contrôle de lacroissance cellulaire et les jonctions intercellulaires.

Deux formes cliniques ont été individualisées selon l’âged’apparition des symptômes et la sévérité de l’atteinte tumo-rale (Evans

et al.

, 1992b). Cette observation a conduit à pro-poser la distinction entre deux sous-types cliniques de lamaladie (Evans

et al.

, 1992a). Cette classification est fondéesur l’âge d’apparition des symptômes et sur le nombre et letype de tumeurs qui se développent. La forme sévère, appeléeforme de Wishart, se caractérise par la survenue précoce(avant 25 ans) de nombreuses tumeurs du système nerveux(méningiomes multiples, schwannomes, épendymomes) enplus des schwannomes vestibulaires bilatéraux. Les patientsatteints de la forme moins sévère, ou forme de Gardner, sontasymptomatiques avant 25 ans et développent le plus souventdes schwannomes vestibulaires bilatéraux tardifs associés àune ou deux autres tumeurs de progression lente. Cependant,la majorité des patients présentent des atteintes polymorphesqui sont difficilement classables dans l’une des catégories.Une étude récente de corrélation phénotype-génotype, réaliséeen Angleterre, a suggéré que certaines mutations du gène NF2étaient associées avec des manifestations spécifiques de lamaladie (Baser

et al.

, 2004). Parallèlement, nous avons menéune étude collaborative rétrospective avec le concours de30 cliniciens français dans une série de 154 patients chez quiune mutation constitutionnelle du gène NF2 a été identifiée.

PATIENTS ET MÉTHODES

Analyse moléculaire

De mai 1992 à juillet 2002, l’analyse moléculaire consti-tutionnelle du gène NF2 a été réalisée chez les patients dont

la pathologie évoquait une neurofibromatose de type 2,adressés par 30 équipes cliniques françaises, après consulta-tion d’oncogénétique et signature d’un consentement éclairéspécifique. L’utilisation de l’électrophorèse en gradientdénaturant (DGGE) comme méthode de précriblage, pro-gressivement relayée par un séquençage systématique des17 exons codants et des séquences consensuelles d’épissage,a permis de rechercher les mutations ponctuelles. La recher-che d’anomalies génomiques complexes a été réalisée parune adaptation au gène NF2 de la technique d’amplificationmultiplex semi-quantitative QMPSF développée dans lelaboratoire de génétique du CHU de Rouen (Charbonnier

etal.

, 2000). Elle a été utilisée pour les patients chez qui l’ana-lyse initiale n’avait pas permis d’identifier une mutationponctuelle. Afin de couvrir l’intégralité de la séquencecodante, deux amplifications multiplex ont été réaliséespour 9 et 10 fragments respectivement

(Tableau I)

, en utili-sant l’enzyme Multiplex Taq Polymerase (Qiagen France) etles recommandations du fournisseur.

Recueil des données cliniques

Un questionnaire d’une page a été élaboré afin de collec-ter les informations cliniques de manière homogène. Cequestionnaire demandait des éléments documentés par ima-gerie (par résonance magnétique ou scanner X) sur la pré-sence ou l’absence de schwannomes vestibulaires, leurcaractère uni- ou bilatéral, la présence ou l’absence d’autrestumeurs, telles que les méningiomes, les tumeurs intra- etextra-médullaires intra-durales, les tumeurs du systèmenerveux périphérique, et la présence ou l’absence d’opaci-tés du cristallin. L’histoire familiale, l’âge aux premierssymptômes, au diagnostic et la classification clinique enforme sévère ou modérée étaient également demandés. Lequestionnaire a été envoyé aux 30 centres médicaux réfé-rents des 154 patients chez qui la présence d’une altérationconstitutionnelle du gène

NF2

avait pu être documentée.Un questionnaire complété a été retourné pour 137 d’entreeux.

Analyse statistique

Les données cliniques et génétiques ont été saisies et ana-lysées en utilisant le programme STATA, pour le calcul desvaleurs moyennes et les tests de corrélation entre les diffé-rentes mutations et les caractéristiques phénotypiques despatients.

RÉSULTATS

Informations génotypiques

Les 137 patients, pour lesquels un questionnaire cliniqueétait disponible, étaient issus de 88 familles apparentées

(Tableau II)

. Ils étaient porteurs d’une mutation faux sens

Page 3: Analyse phénotypique de 154 patients porteurs d’une mutation constitutionnelle du gène NF2

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Mémoire

• Analyse phénotypique de 154 patients porteurs d’une mutation constitutionnelle du gène NF2

1033

L. DEMANGE et coll.

dans 2 cas, d’une mutation entraînant la synthèse d’uneprotéine tronquée dans 73 cas, dont 24 courtes insertions oudélétions nucléotidiques, 26 mutations non sens et 23 muta-tions dans les sites consensuels d’épissage. Ces mutationsont été communiquées à M. Baser en vue d’une intégrationà la base internationale des mutations du gène NF2 (http://uwcmml&s.uwcm.ac.uk/uwcm/mg/nf2). Une délétion géno-mique de grande taille a été trouvée dans 13 cas, dont 8emportaient la totalité du gène, contribuant aux altérationsconstitutionnelles du gène NF2 à hauteur de 15 p. 100, ainsique précédemment décrit sur une série initiale plus res-treinte de patients (Zucman-Rossi

et al.

, 1998).

Caractéristiques cliniques

Les 137 patients se répartissaient en 63 hommes et74 femmes. L’existence d’une histoire familiale a étédocumentée pour 58 d’entre eux. Les premiers symptômes

sont apparus en moyenne à 19,5 ans, avec des valeursextrêmes à 2 et 67 ans. Le diagnostic clinique a été portéentre 3 et 81 ans, en moyenne à 27,6 ans. Dix-huit patientsn’avaient pas de schwannome vestibulaire, parmi 133 pourlesquels cette information était disponible sur la base d’unexamen radiologique de type résonance magnétique ouscanner X. Les 13 patients porteurs d’un schwannome ves-tibulaire unilatéral avaient un antécédent parental de neuro-fibromatose de type 2 à l’exception d’un patient, dont lalésion a été révélée par une hypoacousie à l’âge de 67 ansdans un contexte familial de méningiomes. Dans ce derniercas, aucune autre lésion tumorale n’a été mise en évi-dence par les examens cliniques et radiologiques. Quinzedes 18 patients sans schwannome vestibulaire avaient unantécédent familial de NF2, 10 d’entre eux, âgés de 3 à81 ans, étaient asymptomatiques au diagnostic génétique.Les 3 autres patients n’avaient pas d’antécédent familial ;l’un avait des tumeurs intra-médullaires et 2 avaient plu-sieurs méningiomes.

Tableau I. – Conditions expérimentales d’analyse génomique par PCR multiplex semi-quantitative.Tableau I. – Experimental conditions of quantitative multiplex-PCR.

Exon (μM)2 Taille (pb) Amplimères1 Conc.

1 1 225 GGCTAAAGGGCTCAGAGTGC, CTTCCACCTCGACTGTCACC 0.2

2 2 222 ATTTTTGCTCACAGTGTCCTTCC, ACTGGAAAGCTCACGTCAGCC 0.25

3 2 179 GTCTTTTGCTCTGCAATTCTGC, AGAACTGGGGGGTAGCCTTGA 0.27

4 1 170 AGTATCATGTCTCCCTTGTTGCT, CCATGACCCAAATTAACGCCCA 0.27

5 2 159 CTTTAGAATCTCAATCGCCTGC, CCACATATCTGCTATGTCTTCCT 0.25

6 2 261 GTGACTATCTCCCTGGGTGTA, CCCCATAAAGGAATGTAAACCAAC 0.4

7 1 180 GATTTGGTGCCCACCCGCTC, ACACAAGGAGCTCAGAGAGGTT 0.17

8 1 187 GTAGCTGTTCTTATTGGATCCAC, CATCTGCAGTACACACATGTCC 0.33

9 1 256 GTGTGGTTGCGCATTTGTGGAA, CACAAGATGTCACTCTGATATCC 0.27

10 2 230 TGGGCCAGTAGGCAGTGAAG, AGGACTGACCACACAGTGACA 0.25

11 2 214 CTCGAGCCCTGTGATTCAATG, AGTCCCCAAGTAGCCTCCTG 0.27

12 2 286 CCCACTTCAGCTAAGAGCACT, CTCCTCGCCAGTCTGGTGC 0.23

13 1 203 ACCTGCCCTCTTCTGTGAAGC, AGAACATCACCAGGACTAAGGC 0.27

14 1 213 TGACCCAAGCTCCTAATCCGA, AGTCTAGTTCACAGCTGCCCA 0.25

15 2 254 GTCTCACTGTCTGCCCAAGC, GGTCCTGATCAGCAAAATACAAG 0.25

16 2 188 CATTTTGCAATGGCACTTATGGC, CGGGTTAGTATCACAGAGGGC 0.4

17 1 268 CTCTCAGCTTCTTCTCTGCTTT, ACAGGGTCGTAGTTCAAGGCA 0.25

C3 1,2 238 CAGGTGGAAAACCATGAATTCC, GTCATCATCTTGGGGACAGGG 0.271 Un décamère a été ajouté en 5’ de la séquence spécifique (CGTTAGATAG pour l’amplimère sens et GATAGGGTTA pour l’amplimère antisens, T. Frebourg,communication personnelle) ; 2 volume final def 30 μl ; 3 contrôle interne (exon 9 du gène MSH2). Un total de 24 cycles d’amplification a été réalisé, comportantchacun 3 étapes (94 °C pendant 20 sec, 54 °C pendant 20 sec, 72 °C pendant 20 sec). Les amplifications multiples ont été regroupées comme indiqué par lesnombres 1 et 2 qui suivent les numéros d’exons.

1 A 10-mer was added 5’ to the specific sequence (CGTTAGATAG for the forward primer and GATAGGGTTA for the reverse primer, T. Frebourg, personalcommunication); 2In a final volume of 30 μl; 3c: internal control (exon 9 of the MSH2 gene). A total of 24 3-steps cycles was done (94 °C for 20 sec, 54 °C for20 sec, 72 °C for 20 sec). Multiplex PCR were organized according to the number mentioned after each exon.

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Rev Neurol (Paris) 2007 ; 163 : 11, 1031-1038

L. DEMANGE et coll.

Tableau II. – Altérations constitutionnelles du gène NF2 chez 88 patients non génétiquement liés.Tableau II. – Germline NF2 alterations in 88 unrelated French patients.

Patients Mutation

1512N00095 E1 c.100dup p.Glu34LysfsX14

1484N00167 E1 c.109del p.Cys37AlafsX2

2864N00499 E1 c.114+1G>A

1578N10070 E1 c.41_42del p.Leu14GlnfsX33

1631N00012 E1 c.66del p.Phe22LeufsX2

3507N00593 E1 c.82_83del p.Thr28HisfsX94

1538N00290 E2 c.115-2A>T

1508N00216, 1577N00360 E2 c.164_180del p.Gly55ValfsX24

1569N00518, 1587N00070, 1626N00102, 1771N00019, 1876N00039, 3667N00617 E2 c.169C>T p.Arg57X

2923N00512 E2 c.191C>T p.Leu64Pro

1898N00486 E2 c.203_206del p.Ile68ArgfsX33

1491N00146, 1513N00213 E2 c.240+1G>T

2346N00594 E3 c.247dup p.Asp83GlyfsX2

2929N00515 E3 c.356_361+1del p.Phe119?

2552N00124 E3 c.363G>C p.Gln121X

4198N00697 E4 c.364-1G>T

2701N00473 E4 c.432C>G p.Tyr144X

2756N00485, 3498N00592, 2791N00488 E5 c.448-2A>G

1629N10168 E5 c.493C>T p.Gln165X

2612N00136 E5 c.507del p.Leu169LeufsX4

3598N00605 E6 c.517-2A>G

3121N00540 E6 c.522_525del p.Ile174IlefsX4

1901N00054 E6 c.525dup p.Asn175LysfsX34

3310N00568 E6 c.528_529del p.Leu176LeufsX25

3894N00656 E6 c.586C>T p.Arg196X

3396N00580 E6 c.592C>T p.Arg198X

4011N00676 E6 c.599+2del

2838N00493 E6 c.599+2T>G

2625N00258, 2178N00082 E7 c.600-1G>A

4071N00684 E7 c.624del p.Leu208LeufsX2

1520N00228 E7 c.645_648del p.Tyr217AspfsX11

1498N00188 E7 c.648del p.Met216IlefsX3

1492N00155 E7 c.650_654del p.Tyr217CysfsX8

1501N00195 E7 c.675+1G>T

1622N00598 E8 c.676-1G>A

1541N00295 E8 c.737_738ins17

p.Pro246ProfsX10

1537N00287 E8 c.757insG p.Lys253GlufsX7

1543N00302, 1547N00310, 1607N10129, 2709N00392 E8 c.784C>T p.Arg262X

1493N00164 E8 c.790del p.Ile264SerfsX31

Page 5: Analyse phénotypique de 154 patients porteurs d’une mutation constitutionnelle du gène NF2

© 2007. Elsevier Masson SAS. Tous droits réservés

Mémoire

• Analyse phénotypique de 154 patients porteurs d’une mutation constitutionnelle du gène NF2

1035

L. DEMANGE et coll.

Corrélations génotype-phénotype

Les différentes mutations constitutionnelles ont été ana-lysées pour leur répartition en fonction du sexe des patients,de l’histoire familiale de NF2, de l’âge de début, de l’âgeau diagnostic et de la sévérité de l’atteinte

(Tableau III)

.L’âge de début était connu pour 103 patients, avec une

moyenne de 20,6 ans, et variait en fonction du type demutation : 14,7 ans pour les courtes insertions ou délétionsnucléotidiques ; 19,4 ans pour les mutations non sens ;20,8 ans pour les mutations d’épissage ; 27,3 ans en cas dedélétion génomique ; 26,3 ans pour les mutations faux sens.

L’âge au diagnostic, connu pour 133 patients, était enmoyenne de 27,4 ans, et observait la même progression :17,9 ans pour les courtes insertions ou délétions nucléotidi-ques ; 21,3 ans pour les mutations non sens ; 28,5 ans pourles mutations d’épissage ; 34,7 ans en cas de délétion géno-mique ; 43,5 ans pour les mutations faux sens. Un écartimportant entre les patients avec mutation faux sens(43,5 ans) et les autres (24,3 ans) était observé, mais lagrande différence des effectifs n’a pas permis une analysestatistique. Chez les patients porteurs d’une mutation fauxsens, il existait également une fréquence faible de schwan-nomes vestibulaires bilatéraux, de méningiomes et de

Tableau II. – Altérations constitutionnelles du gène NF2 chez 88 patients non génétiquement liés. (Suite)Tableau II. – Germline NF2 alterations in 88 unrelated French patients. (Followed)

Patients Mutation

2884N00507 E9 c.811-1G>T

3885N00647 E10 c. 998_998+19dup

3476N00582 E11 c.1013G>A p.Arg338Gln

2729N00476, 1632N00013, 1502N00000 E11 c.1021C>T p.Arg341X

2892N00508 E11 c.1069G>T p.Glu357X

3194N00554 E11 c.1096G>T p.Glu366X

3262N00567 E12 c.1135G>T p.Glu379X

2043N00060 E12 c.1165C>T p.Gln389X

1548N00315 E12 c.1181G>T p.Gln394X

1545N00304 E12 c.1222del p.Glu408LysfsX17

3743N00624 E12 c.1340+1G>T

4021N00680 E13 c.1396C>T p.Arg466X

1563N00342 E14 c.1447-2del

1561N00338 E14 c.1449del p.Pro483ProfsX1

1872N00033 E14 c.1574+1G>A

1873N00036 E14 c.1574+1G>T

3299N00570 E15 c.1575-1G>C

1494N00169 E15 c.1575-2A>G

2677N00389 E15 c.1599del p.Lys533AsnfsX16

3798N00637 E15 c.1609del p.Glu537SerfsX12

2695N00532, 3252N00562 E15 c.1612C>T p.Gln538X

2124N00098 E15 c.1737G>A p.Lys579?

1495N00045, 1499N00192, 1500N00337, 1564N00346, 2790N00489, 3131N00542, 4174N00693, 4372N00709

complete deletion

1506N00209 deletion of exon 12

1562N00340 deletion of exon 4

2735N00477 deletion of exons 1 to 9

1612N00136 deletion of exons 15 and 16

2847N00498 deletion of exons 2 to 8

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Rev Neurol (Paris) 2007 ; 163 : 11, 1031-1038

L. DEMANGE et coll.

tumeurs du système nerveux périphérique. Ces patientsn’ont pas développé de tumeur intra-durale ni d’opacités ducristallin. Parmi les autres patients, une plus grande fré-quence de méningiomes était observée en cas de mutationnon sens ou de courtes insertions ou délétions nucléotidi-ques. Soixante-trois patients ont été classés par les méde-cins référents en 41 atteints d’une forme sévère et 22 d’uneforme modérée.

DISCUSSION

Depuis l’identification du gène NF2, plusieurs équipesont tenté de trouver des corrélations entre le génotype etl’expression phénotypique de la neurofibromatose detype 2. Parry

et al.

(1996) et Ruttledge

et al.

(1996) ont éta-bli que les patients porteurs de mutations non sens ou decourtes insertions ou délétions nucléotidiques dévelop-paient une forme sévère (dite de Wishart), alors que ceuxporteurs de mutations faux sens, d’épissage ou de délétiongénomique étaient atteints d’une forme modérée (dite deGardner). Une agressivité de la maladie a par ailleurs étérapportée pour les mutations d’épissage, qui variait enfonction du site altéré (Kluwe

et al.

, 1998). Baser

et al.

(2002a) ont décrit une mortalité moindre en cas de mutationfaux sens. Patronas

et al.

(2001) ont observé que lespatients porteurs de mutations non sens ou de courtes inser-tions ou délétions nucléotidiques avaient un nombre impor-tant de tumeurs spinales, en particulier intra-médullaires.Parry

et al.

(1996) ont par ailleurs décrit une associationentre la présence d’hamartomes de la rétine et les mutations

non sens. Sanson

et al.

(1993) et Watson

et al.

(1993) notai-ent également une association entre la forme modérée et lesdélétions génomiques. Bourn

et al.

(1994), Kluwe et Mau-tner (1996), et Scoles

et al.

(1996) quant à eux ont décritd’authentiques formes sévères associées à des mutationsfaux sens.

Bien que l’âge aux premiers symptômes en cas de courtesinsertions ou délétions nucléotidiques soit très variable, demême que l’âge à l’apparition de la surdité en cas de muta-tion non sens, et le nombre de méningiomes en cas demutations d’épissage (Zhao

et al.

, 2002), les mêmes muta-tions sont associées à des phénotypes variés, que ce soitchez des patients apparentés ou issus de familles différentes(Baser

et al.

, 1996, 2002b) ; dans le même sens, une étudede jumeaux homozygotes a montré une discordance phéno-typique (Baser

et al.

, 1006).Dans notre population d’étude, nous avons comptabilisé

41 patients avec une forme sévère, 22 patients avec uneforme modérée, mais aucune relation avec le type de muta-tion. Cependant, la taille de l’échantillon initial a été réduitedu fait du manque du suivi clinique pour la moitié despatients (74 parmi 137), ce qui soulève le problème de laméthodologie utilisée ici, basée sur un questionnaire rétros-pectif. Les six patients porteurs d’une mutation faux sensavaient tous une forme modérée, mais aucune évaluationstatistique n’a été réalisée du fait de la taille de l’effectif.Une hypothèse pour la faible représentation des mutationsfaux sens dans l’échantillon serait le biais de recrutementdes patients, l’indication d’une analyse génétique constitu-tionnelle n’étant quasiment posée qu’en cas de forme typi-que. En accord avec les observations de Patrona

et al.

Tableau III. – Caractéristiques phénotypiques des patients porteurs d’une mutation constitutionnelle du gène NF2 en fonction du type demutation.

Tableau III. – Phenotypic data of NF2 gene-carriers according to the mutation subgroup.

Phénotype/Génotype DEL FS NS SP MS

Hommes 12 15 2 16 18

Femmes 14 18 4 16 22

Histoire familiale 10 (25) 22 (31) 1 (5) 14 (27) 13 (35)

Schwannome vestibulaire bilatéral 22 (25) 28 (31) 24 (31) 27 (40) 1(6)

Autres tumeurs :

– méningiomes 7 (22) 20 (30) 15 (23) 9 (34) 1 (3)

– tumeurs spinales 9 (21) 23 (29) 19 (25) 15 (32) 0 (3)

• intra médullaires 5 (20) 13 (25) 14 (25) 8 (32) 0 (3)

• extra médullaires intra durales 5 (20) 14 (21) 8 (16) 10 (25) 0 (3)

– système nerveux périphérique 10 (20) 12 (18) 12 (21) 14 (39) 1 (4)

Opacités du cristallin 5 (13) 4 (10) 7 (13) 6 (21) 0 (3)

Les mutations sont classées en fonction de leur conséquence prévisible sur la structure de la protéine : DEL pour délétion, FS pour décalage du cadre de lecture(courtes insertions ou délétions nucléotidiques), NS pour non sens, SP pour défaut d’épissage et MS pour faux sens. Le nombre de patients porteurs du phé-notype observé est décliné en fonction du type de mutation, suivi, entre parenthèses, du nombre de patients de la catégorie pour lesquels l’information étaitconnue.

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Mémoire

• Analyse phénotypique de 154 patients porteurs d’une mutation constitutionnelle du gène NF2

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L. DEMANGE et coll.

(2001), les patients avaient un plus grand nombre detumeurs spinales (intra- et extra-médullaires) en cas demutations non sens ou de courtes insertions ou délétionsnucléotidiques. Le phénotype observé variait de la formesévère à des cas totalement asymptomatiques à l’intérieurd’une même famille, et ce, à des âges comparables. Quatredes patients porteurs d’une mutation

de novo

ne remplis-saient pas les critères cliniques diagnostiques retenus parle NIH au moment de la demande d’analyse génétiqueconstitutionnelle. Un patient avait un schwannome vestibu-laire unilatéral, une des tumeurs intra-médullaires et deuxdes méningiomes multiples. Par ailleurs, une étude du gèneNF2 chez 50 patients porteurs de méningiomes multiplesou de schwannomes périphériques sans schwannome cen-tral n’a identifié aucune altération constitutionnelle du gèneNF2 (Olschwang, données non publiées), ce qui permetprobablement d’écarter l’implication du gène NF2 dans cesaffections. Cependant, l’existence des 4 mutations

de novo

citées plus haut soulève à nouveau la question d’un élargis-sement des critères d’indication de l’analyse génétique,voire même des critères cliniques définissant la NF2, ainsique l’avaient déjà formulé Baser

et al.

(2002b). L’hypothèsealternative serait l’existence de mosaïques post-zygotiques,comme c’est le cas pour le gène NF1, mais aucune étudemoléculaire ne l’a pour l’instant documentée.

CONCLUSION

Les observations de la littérature comme les nôtres ten-dent à montrer qu’il n’existe qu’une faible relation entre legénotype et le phénotype de la NF2. Elles indiquent égale-ment que les patients porteurs de mutations faux sens ontdes risques d’évolution défavorable faibles. Les mutationsnon sens et les courtes insertions ou délétions nucléotidi-ques sont associées à un nombre élevé de méningiomes etde tumeurs spinales (Baser

et al.

, 2004). Par conséquent, lesindications d’analyse génétique gardent toute leur valeurdans les formes modérées comme dans les formes sévères.Des mutations sont identifiées dans 80 p. 100 des formessévères ; dans les formes modérées, la présence d’unemutation faux sens est un élément d’évolutivité faible. Iln’est cependant pas indiqué d’adapter la surveillance clini-que et le dépistage au type de mutation. Enfin, dans un petitnombre de cas, le gène NF2 semble être impliqué dans desformes cliniques de NF2 distinctes de celles définies par leNIH et il semble désormais important d’élargir les critèrescliniques de la maladie.

Remerciements.

Nous sommes reconnaissants aux cliniciens quiont répondu au questionnaire clinique, les docteurs Berger (StEtienne), Brassier (Rennes), Brun (Suisse), Calvas (Toulouse), Colli-gnon (Toulon), Cophignon (Paris), Creange (Créteil), Dieux-Coeslier(Lille), Doco-Fenzy (Reims), Dufour (Orléans), Drouin-Garraud(Rouen), Faivre (Dijon), Grill (Villejuif), Moraine (Tours), Marlin(Paris), Martin (Paris), Martin-Coignard (Le Mans), Martelli (LeKremlin-Bicêtre), Mortemousque (Tours), Moncla (Marseille),Odent (Rennes), Philip (Marseille), Pinson (Lyon), Prieur (Saint-

Etienne), Sanson (Paris), Sarda (Montpellier), Sigaudy (Marseille),Sterkers (Paris), Wardi (Saintes). Nous remercions également leDr Baser pour ses utiles commentaires à propos de notre travail, etparticulièrement le Dr Kalamarides (Paris) pour son aide dans l’éla-boration de la fiche clinique et sa mise en œuvre. Ce travail a été réa-lisé grâce au soutien financier du ministère de la Santé (DHOS) et del’Institut national du cancer.

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