Article Phytothérapie Fredolia

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  • 7/23/2019 Article Phytothrapie Fredolia

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    Composition chimique et activit antioxydantedextraits organiques des racines de Fredoliaaretioides de la rgion de Bchar en Algrie

    ARTICLE FEBRUARY 2014

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    998

    1 AUTHOR:

    Boucherit Otmani Zahia

    Abou Bakr Belkaid University of Tlemcen

    41 PUBLICATIONS 67 CITATIONS

    SEE PROFILE

    Available from: Boucherit Otmani Zahia

    Retrieved on: 01 December 2015

    http://www.researchgate.net/profile/Boucherit_Zahia?enrichId=rgreq-68c8ae23-06e3-4e8c-8632-b7c10ade9eb1&enrichSource=Y292ZXJQYWdlOzI2MDM2NDY3OTtBUzo5ODgwMzk0ODQ1Nzk4NEAxNDAwNTY4MTA1NDY4&el=1_x_4http://www.researchgate.net/?enrichId=rgreq-68c8ae23-06e3-4e8c-8632-b7c10ade9eb1&enrichSource=Y292ZXJQYWdlOzI2MDM2NDY3OTtBUzo5ODgwMzk0ODQ1Nzk4NEAxNDAwNTY4MTA1NDY4&el=1_x_1http://www.researchgate.net/profile/Boucherit_Zahia?enrichId=rgreq-68c8ae23-06e3-4e8c-8632-b7c10ade9eb1&enrichSource=Y292ZXJQYWdlOzI2MDM2NDY3OTtBUzo5ODgwMzk0ODQ1Nzk4NEAxNDAwNTY4MTA1NDY4&el=1_x_7http://www.researchgate.net/institution/Abou_Bakr_Belkaid_University_of_Tlemcen?enrichId=rgreq-68c8ae23-06e3-4e8c-8632-b7c10ade9eb1&enrichSource=Y292ZXJQYWdlOzI2MDM2NDY3OTtBUzo5ODgwMzk0ODQ1Nzk4NEAxNDAwNTY4MTA1NDY4&el=1_x_6http://www.researchgate.net/profile/Boucherit_Zahia?enrichId=rgreq-68c8ae23-06e3-4e8c-8632-b7c10ade9eb1&enrichSource=Y292ZXJQYWdlOzI2MDM2NDY3OTtBUzo5ODgwMzk0ODQ1Nzk4NEAxNDAwNTY4MTA1NDY4&el=1_x_5http://www.researchgate.net/profile/Boucherit_Zahia?enrichId=rgreq-68c8ae23-06e3-4e8c-8632-b7c10ade9eb1&enrichSource=Y292ZXJQYWdlOzI2MDM2NDY3OTtBUzo5ODgwMzk0ODQ1Nzk4NEAxNDAwNTY4MTA1NDY4&el=1_x_4http://www.researchgate.net/?enrichId=rgreq-68c8ae23-06e3-4e8c-8632-b7c10ade9eb1&enrichSource=Y292ZXJQYWdlOzI2MDM2NDY3OTtBUzo5ODgwMzk0ODQ1Nzk4NEAxNDAwNTY4MTA1NDY4&el=1_x_1http://www.researchgate.net/publication/260364679_Composition_chimique_et_activit_antioxydante_dextraits_organiques_des_racines_de_Fredolia_aretioides_de_la_rgion_de_Bchar_en_Algrie?enrichId=rgreq-68c8ae23-06e3-4e8c-8632-b7c10ade9eb1&enrichSource=Y292ZXJQYWdlOzI2MDM2NDY3OTtBUzo5ODgwMzk0ODQ1Nzk4NEAxNDAwNTY4MTA1NDY4&el=1_x_3http://www.researchgate.net/publication/260364679_Composition_chimique_et_activit_antioxydante_dextraits_organiques_des_racines_de_Fredolia_aretioides_de_la_rgion_de_Bchar_en_Algrie?enrichId=rgreq-68c8ae23-06e3-4e8c-8632-b7c10ade9eb1&enrichSource=Y292ZXJQYWdlOzI2MDM2NDY3OTtBUzo5ODgwMzk0ODQ1Nzk4NEAxNDAwNTY4MTA1NDY4&el=1_x_2
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    Article original

    Pharmacognosie

    Composition chimique et activit antioxydante d extraitsorganiques des racines de Fredolia aretioides de la rgionde Bchar en Algrie

    N. Bentabet, Z. Boucherit-Otmani, K. Boucherit

    Laboratoire antibiotiques antifongiques : physicochimique, synthse et activit biologique, facult des sciences de la nature et de la vie, sciences de et de lunivers, universit Abou-Bekr-Belkaid, BP 119, Imama, Tlemcen, AlgrieCorrespondance : [email protected]

    Rsum : La recherche actuelle porte essentiellement surltude de molcules antioxydantes dorigine naturelle. Cettetude sinscrit dans cette optique et consiste faire dans unpremier temps un criblage phytochimique de quelques extraitsdes racines de Fredolia aretioides, une plante endmique de largion de Bchar (Algrie). Dans un second temps, nous avonsvalu lactivit antioxydante de ces extraits. Ltude phytochi-mique a permis de mettre en vidence lexistence dalcalodes,de tanins et de saponines dans les racines. Les coumarines sontgalement prsentes mais en faible quantit. De plus, lextraitmthanolique des racines contient une teneur leve en ph-nols totaux estime 971,05 mg/100 g GAE ( gallic acid equi-valent ). Lactivit antioxydante des diffrents extraits a t va-lue par deux mthodes : la rduction du fer et le pigeage duradical libre DPPH (2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl). Lextraitaqueux et lextrait des alcalodes prsentent une bonne capacitde rduction au fer. La capacit de pigeage du radical libreDPPH est trs intressante avec une IC50 = 0,54 mg/ml ; cettedernire reste suprieure la capacit du pigeage du radicalDPPHde lacide ascorbique, dont lIC50 = 0,08 mg/ml.

    Mots cls : Fredolia aretioides Mtabolites secondaires Activit antioxydante FRAP DPPH

    Phytochemical Study and Evaluation of the AntioxidantActivity of Fredolia aretioides Root Extracts of Algeria

    Abstract: The current research concerns essentially the study of antioxidant molecules of natural origin. This study falls intothis context and consists in making at first a phytochemicalscreening of some extracts of the roots of Fredolia aretioides,an endemic plant of the region of Bchar (Algeria). Secondly,we estimated the antioxidant activity of these extracts. Thephytochemical study allowed to highlight the existence of alka-loids, tanins and saponines in the roots. Coumarins were alsopresent but in small quantities. In addition, the methanol

    extract of the roots contained a high content of total phenolsestimated at 971.05 mg/100 g GAE (gallic acid equivalent). Theantioxidant activity of different extracts was evaluated btwo methods, the reduction of iron and free radical scavenginof DPPH (2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl). Reduction capacitof iron is remarkable in the aqueous extract and alkaloidsScavenging capacity of DPPH free radical is very interestinwith an IC50 = 0.54 mg/ml, the latter is greater than thecapacity of DPPH radical-scavenging ascorbic acid whoIC50 = 0.08 mg/ml.

    Keywords: Fredolia aretioides

    Antioxidant activity

    Secondary metabolites FRAP DPPH

    Introduction

    La part de plantes inexplores la fois en chimie et en bilogie est encore immense. Ce qui offre lespoir de dcouvrirdes traitements pour des maladies encore dvastatrices et dproposer des alternatives thrapeutiques peu onreuses avemoins deffets indsirables. Les tudes actuelles portant su

    les mtabolites secondaires s

    attachent bien videmment explorer surtout leurs activits pharmacologiques [10,40].La flore algrienne regorge de plusieurs espces de plan

    tes encore peu ou pas tudies, mais dotes de relles proprits pharmacologiques [7,14,15]. La matrise totale eparfaite des diffrentes proprits de ces plantes, qui passpar la dtermination de lensemble des groupes physicochi-miques capables dengendrer un ou plusieurs effets pharma-cologiques, est aujourdhui un objectif qui occupe un ordrede premire place [1].

    Cest pourquoi nous nous sommes intresss effectueune tude phytochimique de la plante Fredolia aretioides dela rgion de Bchar (Algrie) et valuer lactivit

    Phytothrapie Springer-Verlag France 2014DOI 10.1007/s10298-014-0834-x

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    antioxydante de ses extraits. Lespce Fredolia aretioidesendmique du Sud-Ouest algrien et du Sud-Est marocainappartient la famille des chnopodiaces, une famille lar-gement rpandue dans les habitats salins temprs, en par-ticulier dans les rgions littorales de la mer mditerrane, lessteppes arides et les dserts [28]. De point de vue botanique,

    Fredolia aretioides a la forme d

    un arbuste vigoureux cylin-drique, de 1 m de hauteur. Les branches sont trs impactesdans le sable. Les petites feuilles nombreuses, trs serres etcoriaces, sont de couleur bleu-vert et de formes charnues, nedpassant pas 5 mm. Le fruit est un akne entour par depetites ailes transparentes du prianthe persistant. Il estcomprim dorsalement. La floraison a lieu en automne. Ellese trouve sur les rochers et plateaux caillouteux (reg ethamada). Elle pousse rarement dans loued ou des dpres-sions argileuses [3,31,37].

    Cette plante est trs utilise en mdecine traditionnelle. Lesfeuilles et les racines sont prpares sous forme dinfusion ou dedcoction. Elle est utilise comme antirhumatismal, diurtique,hypoglycmiant et antidote des poisons. Lcorce de la racine estutilise comme bois de chauffage [12].

    La prsente tude a pour objectif la valorisation de la florelocale afin de dvelopper de nouveaux composs ou princi-pes actifs intrts thrapeutiques. Pour cela, nous avonsenvisag de raliser une tude phytochimique qui comporteles tests phytochimiques et les dosages des polyphnolstotaux, ainsi que la prparation de diffrents extraits (brutset spcifiques) pour une valuation de lactivit antioxy-dante des racines de Fredolia aretioides en utilisant deux mthodes, savoir la technique de DPPH (2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl) et celle de FRAP ( ferric reducing

    antioxydant power ; pouvoir antioxydant rducteur du fer).

    Matriels et mthodes

    Matriel vgtal Ltude phytochimique et lvaluation de lactivit antioxy-dante ont ncessit un matriel vgtal reprsent par lesracines de Fredolia aretioides rcolte en dcembre 2011dans la rgion de Bchar (Algrie). La plante utilise a tidentifie au sein du laboratoire dcologie vgtale de luni- versit Abou-Bekr-Belkaid de Tlemcen. Les racines schesont t pulvrises et utilises pour la prparation des diff-rents extraits.

    tude phytochimiqueLexamen phytochimique est ncessaire pour identifier lesgrandes familles de mtabolites secondaires existants dansles racines de la plante tudie. Nous avons caractris laprsence de ces derniers (saponosides, alcalodes, flavono-des, tanins, coumarines et composs rducteurs) en prpa-rant trois extraits de polarit croissante (ther dithylique,thanol et eau) 10 % chaud et sous agitation continue,

    pendant 30 minutes selon les protocoles exprimentaux dede Karumi et al. [21], de Ciulel [11], de Trease et Evans [38et de Benmehdi [5].

    Dosage des polyphnols totaux

    L

    extrait eau/mthanol (macration 48 heures et vapora-tion sec) est solubilis dans le mthanol une concentra-tion de 1 g/l pour le dosage des polyphnols totaux. Le tauxde polyphnols totaux des racines est dtermin par spec-trophotomtrie en utilisant le ractif de Folin-Ciocalteu. Lacoloration produite, dont labsorption maximum est com-prise entre 700 et 760 nm, est proportionnelle la quantitde polyphnols prsente dans les extraits vgtaux [8]. Ledosage de ces polyphnols est ralis selon la mthodedcrite par Vermerius et Nicholson [39]. 0,1 ml de lchan-tillon est mlang avec 2 ml dune solution de carbonate desodium 2 %. Aprs agitation et dincubation de cinq minu-tes, 100 l du ractif de Folin-Ciocalteu 1 N sont addition-ns ; aprs 30 minutes dincubation temprature ambiante,la lecture des densits optiques (DO) est faite 700 nmcontre un blanc. Une courbe dtalonnage est ralise enparallle dans les mmes conditions exprimentales en uti-lisant lacide gallique comme contrle positif concentra-tions finales allant de 0,1 1 mg/ml par palier de 0,1.

    tude de l activit antioxydante

    Prparation des diffrents extraits de Fredolia aretioidesPour lvaluation de lactivit antioxydante des racines de

    Fredolia aretioides, nous avons utilis deux extraits : l

    extraitbrut et les extraits spcifiques (tanins et alcalodes).

    Extraits bruts

    Lextrait aqueux et lextrait hydromthanolique (70 %) sontprpars par dissolution de 1 g de la matire vgtale dans20 ml de solvant. Aprs une macration de 24 heures sousagitation continue temprature ambiante, le mlange estfiltr. Lopration est rpte trois fois avec renouvellementdu solvant toutes les 24 heures. Les trois fractions filtresont regroupes et vapores sec [17].

    Extraits spcifiquesLextraction des tanins est ralise selon le protocole deZhang et al. [40]. Pour les alcalodes, nous avons suivi lprotocole de Hughes et al. [18].

    Rduction du fer : FRAP

    Le pouvoir rducteur dun extrait est associ son pouvoirantiradicalaire. Cette technique permet de mesurer la capa-cit des extraits tests rduire le fer ferrique (Fe3+ ) prsentdans le complexe K3 Fe(CN)6 en fer ferreux (Fe2+ ) [29].Le protocole exprimental suivi est celui de Karagzleet al. [20]. Un millilitre de lchantillon diffrentes

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    concentrations dilu dans leau distille est mlang avec2,5 ml dune solution tampon phosphate (0,2 M ; pH : 6,6)et 2,5 ml dune solution de ferricyanure de potassium K3 Fe(CN)6 1 %, puis on incube les tubes 50 C pendant20 minutes. Aprs refroidissement des tubes tempratureambiante, 2,5 ml dacide trichloractique (ATC, TCA ; tri-

    chloracetic acid ) 10 % sont ajouts pour stopper la rac-tion. Les tubes sont centrifugs 3 000 tours/minute pen-dant dix minutes. Nous prlevons 2,5 ml du surnageantauxquels nous ajoutons 2,5 ml deau distille. Nous addi-tionnons ensuite au mlange 500 l dune solution de chlo-rure de fer (FeCl3 , 6H2 O) 0,1 % frachement prpare. Lalecture des absorbances se fait contre un blanc 700 nm laide dun spectrophotomtre. Lacide ascorbique est utiliscomme contrle positif dans cette exprience dans lesmmes conditions.

    Test de pigeage du radical libre DPPH Le DPPH est un radical libre stable de couleur violace quiabsorbe 517 nm. En prsence de composs antiradicalai-res, le radical DPPH est rduit et change de couleur en virantau jaune. Les absorbances mesures servent calculer lepourcentage dinhibition du radical DPPH, qui est propor-tionnel au pouvoir antiradicalaire de lchantillon [30].Cette mthode est base sur la mesure de la capacit desantioxydants piger le radical DPPH. Le pourcentage depigeage du radical est calcul selon lquation suivante :[(A1 A2)/A1] 100

    A1 : absorbance du contrle (solution du DPPH sans extrait).A2 : absorbance en prsence dextrait.Leffet de chaque extrait sur le DPPH est mesur par la

    procdure dcrite par Sanchez-Moreno, et al. [34]. Un volume de 50 l de diffrentes concentrations de chaqueextrait est ajout 1,95 ml de la solution mthanolique duDPPH (0,025 g/l) frachement prpare. En ce qui concernele contrle ngatif, ce dernier est prpar en parallle enmlangeant 50 l du mthanol avec 1,95 ml dune solutionmthanolique de DPPH. Aprs incubation lobscurit pen-dant 30 minutes et temprature ambiante, la lecture desabsorbances est effectue 515 nm laide dun spectropho-tomtre, contre un blanc pour chaque concentration quicontient 50 l de chaque concentration de lextrait et1,95 ml du mthanol.

    Calcul des concentrations 50 IC50

    LIC50 (inhibitory concentration 50% ; concentration inhibi-trice 50 %) permet de calculer la concentration de lchan-tillon test ncessaire pour rduire 50 % des radicaux DPPH.Elle est calcule graphiquement par la rgression linaire desgraphes tracs, pourcentages dinhibition en fonction de dif-frentes concentrations des fractions utilises en utilisant lelogiciel SigmaPlot [6,13,26,35].

    Rsultats et discussion

    tude phytochimique

    Tests phytochimiques

    Les tests phytochimiques consistent dtecter les diffrentefamilles de mtabolites secondaires existants dans la partitudie de la plante par des ractions qualitatives de caractrisation. Ces ractions sont bases sur des phnomnes dprcipitation ou de coloration par des ractifs spcifiques chaque famille de composs [16]. Les rsultats des tests phtochimiques effectus sur lextrait aqueux, lextrait thano-lique et lextrait dther dithylique des racines de Fredo-lia aretioides sont regroups dans le Tableau 1.

    Nous remarquons que les alcalodes, les tanins (taningalliques) et les flavonodes sont prsents en quantitimportantes dans lextrait aqueux par rapport aux deux autres extraits. Les saponosides sont prsents uniquemendans lextrait aqueux. Nous remarquons galement la pr-sence des composs rducteurs avec une faible intensitdans les racines de Fredolia aretioides.

    Dosage des polyphnols totaux

    Le dosage des polyphnols totaux est ralis selon mthode de Folin-Ciocalteu. Nous avons utilis lacide gal-lique comme standard [24]. En se basant sur la valeur dab-sorbance de la solution de lextrait, ayant ragi avec le ractif de Folin-Ciocalteu et compare la solution talon en qu valence dacide gallique, les rsultats de lanalyse colorim-trique des composs phnoliques totaux sont reprsents sules Figures 1, 2. Les rsultats obtenus sont exprims en miligramme quivalent dacide gallique par 100 g de la matire vgtale sche (mg GAE/g), en utilisant lquation de largression linaire de la courbe dtalonnage trace delacide gallique.

    Tableau 1. Rsultats des ractions de caractrisation des diff-rents groupes chimiques recherchs dans les diffrents extraitsde Fredolia aretioides.

    Classesrecherches

    Extraitaqueux

    Extraitthanolique

    Extrait ther dithylique

    Alcalodes ++ + +Flavonodes + Tanins ++ ++ +Coumarines Saponosides +++ Compossrducteurs

    +

    +++ : raction fortement positive ; ++ : raction moyennementpositive ; + : raction faiblement positive ; : raction ngative.

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    Nous constatons que les racines de Fredolia aretioidessont trs riches en polyphnols avec une teneur de lordrede 971,05 0,83 mg GAE/g.

    Ces rsultats expliquent en partie les rsultats de laFigure 3 o nous avons enregistr des rendements relative-ment levs des extraits bruts, ce qui prouve la richesse decette partie de la plante en polyphnols savoir les tanins.Ce rsultat ne va pas dans le mme sens que ceux de Rachedet al. [32] qui ont montr que la teneur des phnols totaux dans les racines de Fredolia aretioides est de lordre de110,92 6,34 mg GAE/g. Cela peut tre d la priode dercolte qui a t faite pendant le mois de juin pour les tudesde Rached et al., alors que notre plante est rcolte au moisde dcembre. Le contenu polyphnolique varie qualitative-ment et quantitativement dune plante lautre, cela peuttre attribu plusieurs facteurs : facteurs climatiques et environnementaux : la zone gogra-

    phique, scheresse, sol, agressions et maladies, etc. ; le patrimoine gntique, la priode de la rcolte et le stade de

    dveloppement de la plante [27] ;

    la mthode dextraction et la mthode de quantification peu- vent galement influencer lestimation de la teneur des ph-nols totaux [23].

    tude de l activit antioxydante

    Rendements en extraits secs

    Les extractions des diffrents composs les plus abondantsdans notre plante nous ont permis de calculer le rendementde chaque extrait, notamment les extraits bruts aqueux, eau/mthanol, tanins (fraction actate dthyle et 1-butanol) etles alcalodes. Le rendement, qui a t dtermin par rapport 100 g de matire vgtale sche et broye, est exprim epourcentage. Les rsultats obtenus sont reprsents dans le

    Tableau 2.Il ressort de ces rsultats que le rendement le plus levest obtenu dans lextrait brut aqueux des racines de Fredo-lia aretioides (38,87 %) suivi de lextrait brut eau/mthanol(13,70 %). Nous avons observ aussi que le rendementtrouv dans lextraction des tanins est important dans lesracines.

    Les diffrents rendements illustrs sur la Figure 3 vien-nent confirmer les intensits des rsultats des tests phyto-chimiques, et nous pouvons dire que lextrait brut des raci-nes est essentiellement constitu en polyphnols.

    Les extraits vapors qui sont tests pour leurs activits antioxydantes par la mthode de FRAP et DPPH sont : lextrait brut

    Fig. 1. Courbe dtalonnage de lacide gallique pour le dosage des polyphnols totaux

    Fig. 2. Teneurs en polyphnols totaux des racines de la plante tudie

    Fig. 3. Rendements en extraits obtenus partir des deux parties de la plante. exbAR : exaqueux racine ; exsTAR : fraction tanins actate dthyle racine ; exbMeOHR : extrait brut eau/Meracine ; exTBR : fraction butanolique racine ; exsAR : alcalode racine

    Tableau 2. Les rendements en extraits obtenus pour les deux par-ties de la plante.

    Les extraits Solvants utiliss Rendements (%)

    Extrait brut Eau 38,875Extrait brut Eau/mthanol 13,70Tanins : fraction actatedthyle

    Actate dthyle 5,096

    Tanins : fraction 1-butanol

    1-butanol 10,30625

    Alcalodes Chloroforme 2,395

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    aqueux et mthanolique, lextrait des alcalodes dans la phasechloroformique et lextrait des tanins de la phase actate dthyleet 1-butanol. Lacide ascorbique est utilis comme contrle posi-tif pour sa grande activit antioxydante.

    Rduction du fer : FRAP

    Cest une mthode de mesure de la puissance des substancesde nos extraits rduire le fer ferrique Fe3+ en fer ferreux Fe2+ qui est lun des mcanismes antioxydants. Cest une tech-nique rapide, facile et reproductible [20]. La capacit rduc-trice dun compos peut servir comme un indicateur signi-ficatif de son activit antioxydante potentielle. Beaucoup depublications actuelles ont indiqu quil y a une relationdirecte entre les activits antioxydantes et la puissance derduction des composants de quelques plantes.

    Dans notre travail, nous avons test, par la mthode deFRAP, diffrents extraits des racines de la plante, et lesrsultats obtenus nous ont permis de tracer des courbes

    pour chaque extrait. D

    aprs ces rsultats, nous remarquonsque la capacit de rduction du fer est proportionnelle laugmentation de la concentration des chantillons [25,36].

    Tous nos extraits prsentent des activits antioxydantesnettement infrieures que celle de la rfrence (acide ascor-bique), pour ce dernier la rduction est presque totale par-tir dune concentration de 0,75 mg/ml (Fig. 4).

    Les rsultats obtenus montrent que la capacit de notreextrait de rduire le fer est largement infrieure celle delacide ascorbique. Cette rduction est beaucoup plusimportante dans lextrait des alcalodes (DO = 0,892) quiest presque gale celle de lextrait brut aqueux (DO =0,891). Nous pouvons dduire que tous les extraits des raci-nes de Fredolia aretioides ont la capacit pour rduire le fer,mais elle reste toujours infrieure celle de lacide ascor-bique (DO = 3,700). Si nous classons nos extraits selon lapuissance de rduction de fer par rapport lacide ascor-bique, nous obtiendrons lordre suivant : acide ascorbique

    > alcalodes racines > aqueux racines > tanins frac-tion 1-butanol racines > tanins fraction actate dthyle racines > brut mthanol racines.

    Pigeage du radical libre DPPH

    Lactivit antioxydante dun compos correspond sa capa-cit rsister loxydation [33]. De nombreuses mthodessont utilises actuellement pour valuer cette activit. Lradical DPPH a t largement utilis pour ltude de lacti- vit antiradicalaire des diffrents extraits vgtaux. Le compos chimique 2,2-diphnyl-1-picrylhydrazyle fut lun despremiers radicaux libres utiliss pour tudier la relationstructure activit antioxydante des composs phnoliques[9]. Il possde un lectron non appari sur un atome du pondazote. La rduction de ce radical saccompagne par sonpassage de la couleur violette caractristique de la solutiode DPPH la couleur jaune mesurable par spectrophotomtrie 514 518 nm. La mesure de labsorbance (ou DO) a t

    effectue par spectrophotomtrie 514 nm. partir des valeurs obtenues, nous avons calcul les pourcentages din-hibition en utilisant la formule donne auparavant. Le valeurs obtenues ont permis de tracer des courbes reprsentes sur les Figures 5 9, qui montrent la variation du pour-centage dinhibition en fonction des concentrations de nosextraits. Nous avons dtermin graphiquement la concen-tration correspondante 50 % dinhibition (IC50 ).

    Calcul des IC 50La capacit antioxydante de nos diffrents extraits est dtemine partir des IC50 . Cest la concentration en extraitncessaire pour rduire 50 % du radical DPPH. LIC50 etlactivit antioxydante de lextrait test sont inversementproportionnelles. Les valeurs des IC50 trouves pour tousles extraits tests sont reprsentes dans le Tableau 3. L valeur dIC50 de lacide ascorbique que nous avons trouv(0,08 mg/ml) est proche de celle trouve par Rached et a

    Fig. 4. Histogramme des DO des extraits tudis par FRAP en fonction de diffrentes concentrations

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    [32] qui est de lordre de 0,07 mg/ml. En comparant les IC50des diffrents extraits tests des racines de Fredolia aretioidespar rapport celle de lacide ascorbique, nous remarquons

    que l

    activit antiradicalaire de tous nos extraits est inf-rieure la capacit du pigeage du radical DPPH de lasubstance de rfrence. Cette capacit est plus importantedans lextrait des alcalodes (0,54 0,794), comme elle enest de mme pour lextrait brut eau/mthanol des racineset la fraction actate dthyle qui reprsentent une activitantioxydante presque similaire, et intressante par rapportau contrle positif. Nous remarquons aussi, pour le reste desextraits restants, une activit similaire entre eux avec uneIC50 toujours suprieure ou gale 1. Il est vident que laforte activit des extraits bruts est attribue sa richesse aux composs phnoliques, qui possdent la plus forte teneur enmolcules doses (polyphnols, flavonodes et tanins). Une

    tude faite par Kang et al. [19] a suggr que les molculepolaires prsentes dans les extraits vgtaux contribuent laugmentation de lactivit antiradicalaire.

    Dans lhistogramme (Fig. 4), nous pouvons classer les extraitspar ordre de ractivit dcroissante : acide ascorbique > extraides alcalodes racines > extrait brut eau/mthanol racines> tanins fraction actate dthyle racines > extrait brutaqueux racines > tanins 1-butanol racines. Le classementdes extraits selon la mthode du pigeage du radical DPPHestotalement diffrent du classement obtenu par la mthode derduction du fer. En gnral, les activits de nos extraits son bonnes , sauf lextrait des alcalodes qui prsente une grandeactivit, cela suggre que cette partie de notre plante est riche en

    Fig. 5. Pourcentages dinhibition du radical DPPH en fonction des diffrentes concentrations utili-ses pour les extraits bruts aqueux des racines de Fredolia aretioides

    Fig. 6. Pourcentages dinhibition du radical DPPH en fonction des diffrentes concentrations utili-ses pour les extraits bruts eau/mthanol des racines de Fredolia aretioides

    Fig. 7. Pourcentages dinhibition du radical DPPH en fonction des diffrentes concentration

    ses pour les extraits des alcalodes des racines de Fredolia aretioides

    Fig. 8. Pourcentages dinhibition du radical DPPH en fonction des diffrentes concentrationses pour les extraits des tanins (fraction actate dthyle) des racines de Fredolia aretioides

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    composants phnoliques qui sont responsables de lactivitantioxydante selon de nombreuses tudes [22]. Les autresextraits prsentent une activit infrieure lextrait eau mtha-nol, bien que le contenu en composs phnoliques soit impor-tant, cela est d gnralement la synergie entre les diffrentscomposs antioxydants existants [2]. Si nous comparons nosrsultats avec une autre espce de la mme famille des chnopo-diaces : Atriplex halimus (une espce majeure de cette famille,aussi trouve dans le Sahara algrien), on trouve que lIC50 delextrait mthanolique des racines est de 3,24 0,23 mg/ml, cequi est une valeur suprieure celle de notre extrait. Atri- plex halimus prsente donc une faible activit par rapport

    notre Fredolia aretioides. L

    extrait des alcalodes des racinesd Atriplex halimus a montr une faible capacit de pigeage duradical libre DPPH par rapport notre extrait dalcalode [4].Cela est montr par lIC50 de cette plante qui est de 9,06 0,45 mg/ml, par contre lIC50 de Fredolia aretioides de lextraitdes alcalodes a t de lordre de 0,54 0,794 mg/ml pour lesracines.

    Conclusion

    Dans lindustrie pharmaceutique, sachant que les antioxy-dants contribuent de manire significative la prvention

    des maladies, le dveloppement de nouvelles mthodologiede synthse et la prparation de molcules usage thrapeutique constituent un objectif majeur et une proccupationpermanente pour de nombreux chercheurs. Dans cecontexte, nous nous sommes intresss ltude phytochi-mique et lvaluation du pouvoir antioxydant des diff-

    rents extraits de Fredolia aretioides rcolts dans la rgionde Bchar. Le criblage (screening ) phytochimique ralis laide de ractions de caractrisation rvle la richesse dnotre plante en mtabolites secondaires. Lextraction desdiffrents composs secondaires les plus abondants danles racines de notre plante nous a permis de calculer le rendement de chaque extrait. Ainsi, notre travail nous permede confirmer les utilisations traditionnelles de Fredolia are-tioides. Selon les rsultats obtenus dans cette tude, noupouvons dire que cette analyse trouvera une importanteapplication dans lindustrie pharmaceutique ainsi quuneutilit potentielle dans lindustrie alimentaire.

    Conflit d intrt :

    les auteurs dclarent ne pas avoir de conflit dintrt.

    Rfrences1. Abdelwahed A, Bouhlel I, Skandrani I, et al. (2007) Study of antimu

    genic and antioxidant activities of gallic acid and 1,2,3,4, pentagalloylglucose from Pistacia lentiscus Confirmation by microarexpression profiling. Chemico-Biol Interact 165: 1 13

    2. Attou A (2011) Contribution l tude phytochimique et activits biologi-ques des extraits de la plante Ruta chalepensis (Fidjel) de la rgion d AinTmouchent. Thse de magister de l universit de Tlemcen, pp. 65 6

    3. Baba-Aissa F (1999) Encyclopdie des plantes utiles. Flore d Algrie et du Maghreb. dition Edas, p. 368

    4. Benhammou N, Atik Bekkara F, Kadifkova Panovska T (2009) Antiodant activity of methanolic extracts and some bioactive compounds Atriplex halimus. C R Chimie 12: 1259 66

    5. Benmehdi H (2000) Synthse des molcules double activit anti-Pet anti-VIH. Thse de doctorat l universit de Bchar

    6. Bertoncelj J, Dobersek U, Jamnik M, Golob T (2007) Evaluation of phenolic content, antioxidant activity and colour of Slovenian honFood Chem 105: 822 8

    7. Bnouham M, Mekhfi H, Legssyer A, Ziyyat A (2002) Medicinal plaused in the treatment of diabetes in Morocco. Int J Diabetes Metab 33 50

    8. Boizot N, Charpentier J (2006) Mthode rapide d

    valuation du contenuen composs phnoliques des oranges d un arbre forestier. Mthodes et outils pour l observation et l valuation des milieux forestiers, prairiauxet aquatiques, INRA, pp. 79 82

    9. Brand-Williams W, Cuvelier ME, Berset C (1995) Use of a free radimethod to evaluate antioxidant activity. Lebensmitel-Wissenschauft uTechnologie 28: 25 30

    10. Cai YZ, Sun M, Corke H (2003) Antioxidant activity of betalains fr plants of the Amaranthaceae. J Agric Food Chem 51: 2288 94

    11. Ciulel I (1982) Methodology for analysis of vegetable drugs. Ed IPARomania, 67p

    12. El Mansouri L, Ennabilli A, Bousta D (2011) Socioeconomic interand valorization of medicinal plants from the Rissani oasis (SE Morocco). Boletn Latinoamericano y del Caribe de Plantas Medicinay Aromticas 1: 30 45

    Fig. 9. Pourcentages dinhibition du radical DPPH en fonction des diffrentes concentrations utili-ses pour la fraction 1-butanol (tanins) des racines de Fredolia aretioides

    Tableau 3. Valeurs des IC50 trouves pour les extraits des racinesde la plante.

    L extrait/IC 50 Racines (mg/ml)

    Aqueux 1,81 0,841Eau/MeOH 1,06 0,839Alcalodes 0,54 0,794Tanins 1-butanol 1,90 0,978Tanins actate dthyle 1,61 0,577

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    13. Fabri RL, Nogueira MS, Braga FG, et al. (2009) Mitracapus frigidusaerial parts exhibited potent antimicrobial, antileishmanial, and antioxi-dant effects. Bioresour Technol 100: 428 33

    14. Gonzalez-Tejero MR, Casares-Porcel M, Sanchez-Rojas CP, et al. (2008)Medicinal plants in the Mediterranean area: synthesis of the results of the project Rubia. J Ethnopharmacol 116: 341 57

    15. Graham JG, Quinn ML, Fabricant DS, Farnsworth NR (2000) Plantsused against cancer extension of the work of Jonathan Hartwell. J Eth-nopharmacol 73: 347 77

    16. Hagerman AE, Muller-Harvey I, Makkar HPS (2000) Quantification of tanins in tree foliage. Joint FAO/IAEA Division of Nuclear Techniquesin Food and Agriculture. Vienna, 26p

    17. Harbone JB (Ed) (1998) Phytochemical methods: a guide to moderntechniques of plant analysis, Chapman and Hall, London, p. 302

    18. Hughes JB, Sousa JS, Barreto RA, et al. (2005) Cytotoxic effects of anextract containing alkaloids obtained from Prosopis juliflora Sw. DC(Algaroba) pods on glioblastoma cells. Rev Bras Sau de Prod Ann 6:31 41

    19. Kang DG, Yun CK, Lee HS (2003) Screening and comparison of antio-xidant activity of extracts of herbal medicines used in Korea. J Ethno- pharmacol 87: 231 6

    20. Karagzler A, Erdag CS, almaz Emek Y (2008) Antioxydant activityand proline content of leaf extracts from Dorystoechas hastate. FoodChem 111: 400 7

    21. Karumi Y, Onyeyili PA, Oyugbuaja VO (2004) Identification of active principals of M. Balsamia (Balsam Apple) leaf extract. J Med Sci 4:179 182

    22. Khady B, Emmanuel T, Jacqueline D, et al. (2009) tude comparativedes composs phnoliques, du pouvoir antioxydant de diffrentes vari-ts de sorgho sngalais et des enzymes amylolytiques de leur malt. Bio-technol Agron Soc Environ 14: 131 9

    23. Lee KW, Kim YJ, Lee HJ, Lee CY (2003) Cocao has more phenolic phytochemicals and a higher antioxidant capacity than teas and redwine. Food Chem 51: 7292 5

    24. Li HB, Cheng KW, Wong CC, et al. (2007) Evaluation of antioxidant capacity and total phenolic content of different fraction of selectedmicroalgae. Food Chem 102: 771 6

    25. Liuk L, Sun Y, Laura T, et al. (2009) Determination of polyphenoliccontent and antioxydant activity of Kudingcha made from Ilex kuding-cha C.J. Tseng. Food Chem 112: 35 41

    26. Marxen K, Vanselow KH, Lippermeir S, et al. (2007) Determination DPPH radical oxidation caused by methanolic extracts of some microagal species by linear regression analysis of spectrophotometric measurements. Sensors 7: 2080 95

    27. Miliauskas G, Venskutonis PR, Van Beek TA (2004) Screening of radcal scavenging activity of some medicinal and aromatic plant extracFood Chem 85: 231 7

    28. Mulas M (2004) Potentialit d utilisation stratgique des plantes des gen-res Atriplex et Opuntia dans la lutte contre la dsertification. Short anMedium, Term Priority Environmental Action Programme (SMAPfvrier, 91p

    29. Oyaizu M (1986) Studies on products of browning reaction preparefrom glucose amine. Jpn J Nutr 44: 307 15

    30. Parejo I, Viladomat F, Bastida J, et al. (2003) Investigation of Bolivia plant extracts for their radical scavenging activity and antioxidant acvity. Life Sci 73: 1667 81

    31. Quzel P, Santa S (1962 1963) Nouvelle flore de l Algrie et desrgions dsertiques mridionales. CNRS, Paris, 2e vol. 1170p

    32. Rached W, Benamar H, Bennaceur M, Marouf A (2010) Screening the antioxidant potential of some Algerian indigenous plants. J Biol S10: 316 24

    33. Rice-Evans CA, Miller NJ, Bolwell PG, et al. (1995) The relative antxidant activities of plant derived polyphenolic flavonoids. Free RadicRes 22: 375 83

    34. Sanchez-Moreno C, Larrauri JA, Saura-Calixto F (1998) A procedure measure the antiradical efficiency of polyphenols. Sci Food Agr 76: 27

    35. Scherer R, Goboy HT (2009) Antioxidant activity index (AAI) by th2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl method. Food Chem 112: 654 8

    36. Su MS, Shyu YT, Chien PJ (2008) Antioxydant activities of citrus herb product extracts. Food Chem 111: 892 6

    37. Trabut L (1935) Rpertoires des noms indignes des plantes spontanecultives et utilises dans le Nord de l Afrique. Collection du Centenairede l Algrie, Alger, 355p

    38. Trease E, Evans WC (1987) Pharmacognosy, Billiare Tindall, London39. Vermerius W, Nicholson R (2006) Phenolic compound biochemistry

    Springer, Dordrecht. ISBN:101-4020-5163-840. Zhang M, Hongfei J, Aiti A, et al. (2008) A tree sequence alignme

    based tree-to-tree translation model. ACLHLT 08: 559 67

    8