CECOS FRANCHE-COMTE – BOURGOGNE

SITE BESANÇON CENTRE D’ETUDE ET DE CONSERVATION DES ŒUFS

ET DU SPERME HUMAINS.

Dr Oxana Blagosklononov

Service de Génétique biologique-Histologie-Biologie

du Développement et de la Reproduction, CECOS

Nouvelle loi relative à la bioéthique Article L 2141-11

En vue de la réalisation ultérieure d’une

assistance à la procréation, toute personne peut

bénéficier du recueil et de la conservation de ses

gamètes ou du tissu germinal, avec son

consentement et, le cas échéant, celui de l’un des

titulaires de l’autorité parentale, ou du tuteur….,

lorsqu’une prise en charge médicale est

susceptible d’altérer sa fertilité, ou lorsque sa

fertilité risque d’être prématurément altérée.

Obligation de moyens??

Possibilités actuelles de prévention d’une infertilité

post-thérapeutique en fonction du sexe et de l’âge

des patients :

- Après la puberté

- Avant la puberté

1- Autoconservation de gamètes:

- dès la puberté (Spermatozoïdes, ovocytes)

2- Autoconservation de tissus gonadiques:

- ovaire (adulte ou prépubère)

- testicule (adulte ou prépubère)

2 sexes inégaux : congélation ovocytaire donne des résultats très inferieurs à la congélation du sperme en terme de survie à la décongélation et de potentiel de fécondation

Conditions générales

Le consentement du patient

"consentement éclairé" loi de Bioéthique de 1994:

La demande de conservation est strictement personnelle,

Les gamètes ne seront remises qu’au patient(e) lui(elle)-

même, présent(e) et consentant(e).

Le patient (la patiente) est informé qu'il(elle) sera interrogé

tous les ans sur son souhait de continuer ou d'annuler la

cryoconservation.

Si le patient est mineur, l'autorisation parentale est

nécessaire.

- Conditions sanitaires pré-requises +++ c Bilan sanitaire avant la congélation

- HIV 1 et 2

- HTLV 1 et 2

- Hépatite B (Ag HBs + Ac HBc + Ac Hbs)

- Hépatite C

- CMV (IgG + IgM)

- Syphilis

Le coût de la cryoconservation :

B 150 = 40,50 € par an

Frais de congélation en fonction du type de

prélèvement:

sperme B 350 = environ 100 €

PRATIQUÉE EN FRANCE DEPUIS 1973.

• EN 1980 < 400 PATIENTS/ AN

• EN 2011 > 4000 PATIENTS/ AN

1.1 -AUTOCONSERVATION DE SPERME

1. CONGELATION DE GAMETES

A Besançon

AVANT UN TRAITEMENT POTENTIELLEMENT

STÉRILISANT :

• plus de 1000 spermes sont toujours cryoconservés :

• 33 500 « paillettes » qui représentent souvent la

seule chance de devenir père.

• conservation à long terme:

- une grossesse après 17 ans de conservation

-une demande après 24 ans de conservation (1986-

2010)

•Près de 100 grossesses.

0

10

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AUTOCONSERVATION AVANT UN TRAITEMENT

POTENTIELLEMENT STÉRILISANT 1

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CRYOCONSERVATION DE SPERME

QUI? Tout homme jeune, devant subir un traitement stérilisant

quel que soit son statut matrimonial

QUAND? Avant tout ttt potentiellement stérilisant

protéger la fertilité masculine.

protéger le patrimoine génétique paternel du futur embryon d'effets

mutagènes, clastogènes de la chimiothérapie et / ou de la radiothérapie.

COMMENT? RdV au CECOS 03.81.21.80.21

Fiche de renseignement rempli par le médecin

Accompagné d’un parent si patient mineur

Risque élevé d’infertilité

- Irradiation corps entier avant greffe de moelle

- Chimiothérapie avant greffe de moelle

- Radiothérapie pelvienne et/ou testiculaire

- Tumeurs des tissus mous métastatiques

- Maladie de Hodgkin : Agents alkylants

Quand faut-il adresser le patient au CECOS ?

Dès l'évocation du diagnostic :

Urgence : patients toujours reçus rapidement,

pour permettre plusieurs prélèvements si

nécessaire. NB. Risque de difficultés pour le prélèvement en raison d'une

fatigue liée à la maladie, ou "barrage psychologique

Si la thérapeutique ne peut attendre, un seul

prélèvement sera congelé (le conditionnement de plvt adaptée

au volume, à la concentration des gamètes et la technique de réutilisation

éventuelle)

Démarche psychologiquement

TRES importante pour le patient.

Quelles informations fournir au patient ?

•Information sur le risque d'infertilité

Risque d'hypofertilité / stérilité

Risque de transmissions d'anomalies à l'enfant

conçu pendant le traitement (1 à 2 ans de contraception)

sperme normal

sperme déficient

FIV (Fécondation in vitro)

Fécondation Assistée avec ICSI

La seule impossibilité pour une

autoconservation de sperme est

l'azoospermie.

Il est important de se rappeler que l'on ne

sait pas et ne peut savoir quel patient

risque une stérilité définitive.

La Cryoconservation de sperme est

la "PRÉCAUTION" nécessaire.

Le conditionnement du sperme

• cryoprotecteur à base de glycérol.

• paillettes de plastique: identifiées au nom du patient.

• La congélation par paliers dans un congélateur programmable

Stockage à - 196°C (Azote liquide)

Constitution d'un stock de paillettes La durée de la conservation est sans influence sur la

mobilité après décongélation, ni sur le pouvoir

fécondant du sperme conservé

pratiquer un spermogramme de contrôle

2 ans après arrêt du ttt

Une reprise de la spermatogenèse est possible,

dans des délais très variables.

Elle est IMPREVISIBLE au plan INDIVIDUEL.

Pat. Cong. Azoo. / % Echec Rec. / % Pail.

Hodgkin 312 334 15 4.8 12 3.8 7 565

LMNH 196 196 8 4,08 17 8,67 4 806

Autres

Hémato.

259 235 24 9.26 21 8,93 4 928

K. Test. 1 042 1073 48 4.6 27 2,59 29 004

Autres uro 210 212 15 7.14 12 5,71 4 253

Indic. Néphro. 17 22 1 5.88 0 0,0 526

Autres

cancers

364 364 13 3,57 22 6,04 8 597

Affect. Non

Cancéreuses 312 320 12 3,75 6 1,87 7 124

Total 2 712 2 756 136 5,01 117 4,31 66 803

Indications Autoconservations 2006 (Fédération CECOS)

2007 2 889 patients = 66 049 pt

• Enfant : préservation de la fertilité

– A partir de 13-14 ans : spermatozoïdes

– Avant 13-14 ans

• Pas de spermatozoïdes éjaculés

• Cellules souches germinales mâles :

spermatogonies

la cryoconservation de matériel testiculaire pour de jeunes

patients prépubères avant traitement

le but :

- replacement de spermatogonies,

- spermatogenèse in vitro...

(non encore validée dans l’espèce humaine)

TECHNIQUES EN COURS DE VALIDATION

ET PROTOCOLES DE RECHERCHES

Vitrification des ovocytes (autorisé par la loi de bioéthique du 7 juillet 2011 – dans le cadre de l’AMP et de la préservation de fertilité)

Cryoconservation du tissus ovarien

Cryoconservation du tissus testiculaire des garçons pré pubères

Plusieurs options permettent de préserver la fertilité chez les patientes dont la réserve ovarienne est menacée:

la cryopréservation des embryons

la cryopréservation des ovocytes

la cryopréservation du tissu ovarien

Le choix dépend de plusieurs paramètres :

le type et l'urgence de la chimiothérapie

le type de cancer

l'âge de la patiente et la présence ou non d'un partenaire.

depuis 1984 > 800 publications

chez l’animal >> chez l’homme

AMP-intraconjugale

AMP-avec don d’ovocytes

Manque de recule en terme de

préservation de fertilité +++

Nombre moyen d’ovocytes à congeler

pour obtenir une grossesse ?

Vitrification des ovocytes

Principales indications:

- irradiation corporelle totale (leucémies…)

- agents alkylants à doses importantes

(thalassémies, lupus…)

- association radio-chimiothérapie (Hodgkin…)

- ovariectomies bilatérales

Cryopréservation du tissu ovarien

QQ PROBLEMES PRATIQUES

AGE:<35 ans

Au-delà: réserve folliculaire largement réduite

Perte folliculaire liée à cryopréservation

Enfant: technique très intéressante

Quantité ovaire à prélever?

Grande variabilité interindividuelle post traitement

Femme:1 ovaire entier

Enfant : 1/2 ovaire

Balance perte folliculaire liée au traitement/ perte

liée à la cryopréservation

Cryopréservation du tissu ovarien

Greffe

Autogreffe orthotopique

Greffe hétérotopique

Ponction ovocytaire

F I V et transfert d ’embryon Fertilité naturelle