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Chromolith fait preuve devitesse et de précision àl'Université des Sciences agri-coles de Suède
pages 4 - 5
EZChrom Elite™ prend encharge les stations de travailmono poste et les systèmesserveur/client
pages 12 - 13
NUMÉRO3 - SEPTEMBRE 2007Produits pour chromatographistes
ChromJournal
vwr.com
Vous pouvez utiliserles solvants VWRProlabo quand vous levoulez
page 19
Système fermé réutilisablepour solvants HPLC
page 20
Nouvelles colonnesAcroSep™ pour la chro-matographie d'échanged'ions de Pall Life Sciences
pages 22 - 23
Recevez les dernières informations et les offresspéciales via notre bulletin d'informationélectronique VWR Inscrivez-vous sur vwr.comVous y trouverez également le CHROMJournal !
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EditorVWR International Europe bvbaHaasrode Researchpark Zone 3Geldenaaksebaan 4643001 LeuvenBelgium
CopywritingVWR International Europe bvba
Layout and typesettingMarketing Services VWR
PrintingPRT, Paris, FranceNo part of this publication may be reproduced or copied withoutprior permission by writing of VWR International Europe.
Run45.000 copiesPublication date: September 2007
Dans ce numéro
Bienvenue dans l'édition d'automne du CHROMJournal de VWR. Après un
été qui, nous l'espérons, a été excellent, les jours raccourcissent, le temps
devient plus frais, et la pluie fait son apparition. Le chromjournal est là pour
illuminer votre journée en vous proposant des informations et des exemples
d'application pour tout type de chromatographie. Si vous souhaitez con-
tribuer à la revue ou apporter des commentaires ou suggestions concernant
des sujets que vous souhaiteriez voir traités dans les prochains numéros,
envoyez-nous un courrier électronique à l'adresse
Système SPOTFLASH pour chromatographie flash 03
Chromolith : séparation rapide des anthocyanines de baies 04
Colonnes HPLC Chromolith et vos systèmes HPLC standards deviennent devrais pur-sangs 06
Colonnes Purospher STAR® HPLC 08
Nouvelles colonnes HPLC Hamilton PRP-h1 10
Validation Manager - rapide & fiable 11
Logiciel EZChrom Elite™ Solution logiciel standard & évolutive 12
Système navigateur pour des méthodes HPLC optimales 14
VWR, L-2130i la nouvelle pompe inerte 16
VWR, détecteur de conductibilité CD-5 - Nouveau 17
Logiciel Chromeleon pour LaChrom Elite 18
Solvants 19
Flacon de laboratoire Schott Duran® HPLC 20
Nouvelle colonne FORTE de SGE 21
Nouvelles colonnes de chromatographie d'échanges d'ions AcroSep™ 22
Flacons de stockage VWR collection - NOUVEAU 24
VWR C h r o m J o u r n a l Numéro 3 S e p t e m b r e 2 0 0 72
ChromJournal éditorial
VWR C h r o m J o u r n a l Numéro 3 S e p t e m b r e 2 0 0 7 3
La chromatographie Flash est une
technique de séparation rapide et
économique pour la purification
de produits de synthèse
organique, d'extraits biologiques
et également pour les échantillons
alimentaires et
environnementaux. La nouvelle
génération du système SPOT
FLASH créé de nouvelles échelles
dans la chromatographie Flash et
offre un grand potentiel à son
utilisateur.
>> Pompe• Pompe à double piston en série hautes
performances avec un débit pouvantatteindre 300 ml/min avec un gradient bassepression binaire ou quaternaire et une plagede pression pouvant atteindre 25 bars
• Réglage automatique du débit lié à la contre-pression maximale réglée
>> Injection d'échantillons• Injection directe de l'échantillon en solution
au dessus de la colonne sans volume mort ouavec une pré-colonne, ou à l'aide d'une valved'injection à boucle
• Injection solide de l'échantillon au dessus dela colonne ou avec une colonneadditionnelle.
>> Colonne• Toutes les colonnes disposant des accessoires
appropriés peuvent être connectées: lescolonnes emballées avec des absorbants enphase normale ou inversées comprises entre2,5 g et 600 g (ou plus)
• VWR propose une vaste gamme de colonnesprêtes à l'emploi présentant un bon rapportqualité-prix. Cartouches en polypropylènehaute pureté et compatibles avec tous lessolvants en phase normale et inversée,remplies d'absorbants Merck ou d'autrefournisseur.
>> DétecteurTrois détecteurs différents sont disponibles • Photomètre à filtre• Photomètre mono longueur d'onde• Photomètre à double longueur d'onde
>> Collecteur de fraction• Collection de fraction par volume, temps,
seuil de signal et mode local minimal pourun fractionnement automatique de pics nonséparés
• Nombre élevé de fractions (capacité totale de5,6 l avec des portoirs standard)
>> Logiciel• Le système est équipé d'un ordinateur et
d'un logiciel convivial pour accéder à tous lesparamètres lors de la purification
• Autres fonctions: méthode de contrôle entemps réel, notamment les fonction decliquer-déplacer pour le temps depurification, le gradient et le débit
• Chargement automatique des conditions dechromatographie liées à la colonnesélectionnée à l'aide d'une base de donnéesde colonnes.
SPOT FLASH
Pour plus d'informations sur ces produits,
Chromatographie Flash
>
Solution totalement
automatisée – pour
une purification
rapide, fiable et
pratique
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Purification Flash
pratique et efficace
de vos composants
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VWR C h r o m J o u r n a l Numéro 3 S e p t e m b r e 2 0 0 74
Séparation rapide des anthocyanines de baies à l'aide dela colonne Chromolith
Johanna Witzell & Marie Lundström
Les pigments de l'anthocyanine phénolique sont très répandus dans la flore. Les baies
rouges, pourpres et noires, telles que les myrtilles (Vaccinium sp.) sont particulièrement
riches en anthocyanines et constituent une source importante d'anthocyanines dans le
régime alimentaire de l'homme. Des recherches récentes ont mis en avant les fonctions
antioxydantes potentielles des anthocyanines, ce qui augmentent l'importance des baies
dans la nutrition. Du point de vue industriel, les anthocyanines des baies sont
intéressantes à cause de leur importance en tant que colorants alimentaires naturels. Pour
une analyse fiable et rapide de la teneur en anthocyanines des matières premières, les
méthodes d'analyse doivent être soumises à une évaluation et une optimisation
constantes. Au cours de cette étude, nous avons vérifié si une méthode HPLC en phase
inverse, décrite précédemment pour l'analyse des anthocyanines dans les baies et le vin
(Nyman et Kumpulainen 2001), pouvait être réalisée plus rapidement à l'aide d'une
colonne monolithique.
Matériaux et méthodesLes glycosides ont été extraits des myrtilles préalablement congelées, lyophilisées et réduites enune fine poudre, à l'aide de 2M HCl dans du méthanol (agitation à +4 C pendant 20 minutes).Les aglycones proviennent des mêmes extraits et obtenus par hydrolyse (90 C dans un bain-mariependant 25 min). ous les échantillons ont été filtrés sur des filtre-seringues 0,22 μm avant d'êtreinjectés dans la colonne HPLC.
Un système HPLC Merck Hitachi LaChrom, constitué d'une pompe L-7100, d'un passeurd'échantillon L-7200, d'un four à colonnes L-7360 et d'un détecteur à barrettes de diodes L-7455,a été utilisé. La température du four a été réglée sur 30 °C. Les constituants des extraits ont étéséparés dans une colonne monolithique (ChromolithTM, Merck KGaA, Darmstadt, Allemagne) àl'aide d'une méthode Nyman et Kumpulainen (2001) modifiée. Lors de nos analyses, un gradientd'élution a été réalisée à l'aide de 100 % de méthanol (solution A) et de 10 % d'acide formique(solution B) comme suit : 5 % de A en B (0-14 min), 40 % de A en B (15-19 min), suivi d'un courtrinçage au méthanol et d'un équilibrage pour revenir aux conditions initiales. Le débit était de 2ml/min. Le volume d'injection était de 25 µl pour tous les échantillons et les solutions étalons. Lessurfaces des pics des composants analysés ont été détectées à 525 nm et identifiées en comparantleurs temps de rétention et leurs caractères spectraux à ceux des composés de référence. Lacyanidine, la delphinidine, la malvidine, la péonidine et la pétunidine (sels de chlorure) et des
>
HPLC Analytique
Les anthocyanines sont des
composants phénoliques glycosylés
qui libèrent leur aglycone
(anthocyanidine) après hydrolyse.
En raison de leur utilisation comme
colorants naturels et agents
favorables à la santé, les
anthocyanidines et les
anthocyanines présentent un
intérêt considérable pour l'industrie
pharmaceutique et agro-
alimentaire. Nous avons étudié les
profils de l'anthocyanidine et de
l'anthocyanine de la myrtille
suédoise (Vaccinium myrtillus). A
l'aide d'une colonne monolithique
Chromolith, nous avons obtenu une
excellente séparation de 17 pics
d'anthocyanine ou
d'anthocyanidine. Les cinq
anthocyanidines caractéristiques de
la myrtille sont éluées en 13
minutes, avec des temps de
rétention pour la delphinidine et la
malvidine de 7,0 et 12,6 minutes,
respectivement. Par conséquent, la
colonne monolithique a permis une
analyse rapide et précise des
anthocyanines et des
anthocyanidines de la myrtille.
Figure 1.HPLC chromatogram of hydrolyzedsamples of Vaccinium myrtillusberries. 1 = delphinidin; 2 = cyanidin; 3 = petunidin; 4 = peonidin; 5 = malvidin.
VWR C h r o m J o u r n a l Numéro 3 S e p t e m b r e 2 0 0 7 5
solutions étalons cyanidine-3-glucoside, cyanidine-3-galactoside, cyanidine-3-rutinoside etdelphinidine-3-glucoside ont été achetées auprès de la société Extrasynthese (Genay, France) etutilisées comme solutions étalons externes.
RésultatsDans les baies V. myrtillus hydrolysées, cinq aglycones caractéristiques ont été mis en évidence :delphinidine, cyanidine, péonidine, pétunidine et malvidine (figure 1). Le chromatogramme HPLCdes échantillons non hydrolysés ont produit 17 pics (figure 2). Parmi ceux-ci, la delphinidine-3-glucoside, la cyanidine-3-galactoside, la cyanidine-3-glucoside et les aglycones (pétunidine,péonidine et malvidine) ont été mise en évidence.
ConclusionL'utilisation de la colonne monolithique a permis une bonne séparation de 17 anthocyanines ouanthocyanidines. Les cinq anthocyanidines de la myrtille sont éluées en 13 minutes avec des tempsde rétention pour la delphinidine et la malvidine de 7,0 et 12,6 minutes, respectivement, au lieu de
10 et 20 min comme rapporté dans lapublication (Nyman et Kumpulainen 2001). Parconséquent, les conditions HPLC utilisées ici ontpermis une analyse rapide des composantschimiques de la myrtille, accroissant ainsi laquantité des échantillons dosés. De plus, il estprobable qu'en adaptant le gradient et le débit,le temps d'analyse sur la colonne monolithiquepuisse être encore améliorée sans effet négatifsur la séparation des constituants des extraits.
Applications
Johanna WitzellSouthern Swedish Forest ResearchCentre, Swedish University of Agricultural Sciences, SE-230 53 Alnarp, Sweden
Figure 2.HPLC chromatogram of non-hydrolysed samples of berries. 2 = delphinidin-3-glucoside; 3 = cyanidin-3-galactoside; 5 = cyanidin-3-glucoside; 15 = petunidin; 16 = peonidin; 17 = malvidin. Other peaks areunidentified compounds.
Référence :Nyman N.A. et Kumpulainen J.T., 2001 : Determination ofAnthocyanidins in Berries and Red Wine by High-Performance Liquid Chromatography. J. Agric. FoodChem. 49: 4183-4187.
Pour plus d'informations sur ces produits, contactez directement votre agence locale VWR,envoyez un email à [email protected] visitez notre site web sur www.vwr.com
VWR C h r o m J o u r n a l Numéro 3 S e p t e m b r e 2 0 0 76
HPLC Analytiquesection line 2section line 1
L'efficacité des méthodes analytiques est deplus en plus importante en période deréduction des coûts. Le développement de
méthodes a souvent pour objectif principald'obtenir des séparations chromatographiquesrapides ainsi qu'un nombre élevé d'échantillonsanalysés.
Une approche permettant d'obtenir desséparations plus rapides consiste à réduire lataille de particules de la silice utilisée. Cependant,des particules minuscules présentes dans lescolonnes HPLC génèrent une perte de chargeélevée des colonnes. Aussi, dans de nombreux cas(par ex. avec des particules de 1,7 μm), il estnécessaire de recourir à des systèmes HPLCspéciaux permettant d'obtenir des pressions allantjusqu'à 1 000 bars (15 000 psi).
Une méthode plus efficace consiste à utiliser descolonnes HPLC Chromolith®, qui permettent unechromatographie ultra rapide avec des systèmesHPLC standard. La récente publication de Bolivaret de ses collaborateurs 1) fait état d'un gain detemps de 85 % dans une application utilisant descolonnes Chromolith® , ce qui se traduit, selon lemode de calcul, par une économie de coûts de 80000 euros par an.
Contrairement aux colonnes HPLC traditionnelles,remplies de particules de silice, les colonnes HPLCmonolithiques sont constituées d'un seul bloc desilice totalement poreux présentant une stabilitémécanique élevée. Grâce à sa perméabilité élevéecombinée à sa surface spécifique, la silicemonolithique est idéale pour les séparations HPLCrapides.2)
La figure 1 montre la structure de la silicemonolithique vue au microscope électronique.Celle-ci semble très similaire à la structure typiquedu corail. La silice forme un squelette continuentouré d'un espace totalement ouvert etperméable. Les liquides peuvent circuler dans ces"macropores" ouverts sans rencontrer de granderésistance. Les colonnes HPLC en silice monolithique, tellesque les colonnes HPLC Chromolith®, présentent lacaractéristique exceptionnelle de fournir desperformances chromatographiques optimales avecune perte de charge considérablement inférieure àcelle des colonnes HPLC à silice particulairetraditionnelles.
Exigences réduites enmatière de préparationd'échantillons !
Une autre caractéristique importante descolonnes HPLC Chromolith® est qu'ellespeuvent être utilisées avec des techniques depréparation d'échantillons plus simples. Ungrand nombre d'échantillons contiennent deminuscules particules en suspension quientraînent une colmatage des colonnes HPLC àsilice particulaire traditionnelles. Grâce à sesmacropores de 2 μm, la structure de silicemonolithique a tendance à éviter cescolmatages. De ce fait, la durée de vie de lacolonne est améliorée. Cet avantage ouvre lavoie à des techniques de préparationd'échantillons "Diluez et Injectez" trèssimples 1,3,4). L'échantillon est simplement filtréà travers un filtre-seringues de 0,45 μm, dans
Grâce aux colonnes HPLC Chromolith®, les systèmesHPLC standard deviennent de vrais pur-sangs
Figure 1.
Figure 2.
Les colonnes de silice
monolithique
(Chromolith®)
permettent de réaliser
des analyses HPLC avec
une grande sensibilité
de détection. Ces
colonnes s'utilisent à
merveille avec des
systèmes HPLC standard.
Les exigences en
matière de préparation
d'échantillons sont
réduites, ce qui permet
de restreindre la durée
et les coûts de l'analyse.
VWR C h r o m J o u r n a l Numéro 3 S e p t e m b r e 2 0 0 7 7
Colonnes
certains cas après dilution et centrifugation, etensuite directement injecté dans la colonne,sans la moindre préparation d'échantilloncomplémentaire. Même dans l'analyse dedenrées alimentaires ou de produitsphytopharmaceutiques, les étapes d'extractionsur phase solide peuvent souvent êtreéliminées.Avec les colonnes HPLC Chromolith®, les gainsde temps ne résultent pas uniquement deséparations plus rapides. Grâce à la réductiondes exigences en matière de préparationd'échantillons, la durée et les coûts totaux del'analyse sont extraordinairement restreints,comme en attestent les exemples suivants : -
1) Pour la détermination de la caféine dans lecafé 3) , la durée de l'analyse est passée de 18minutes, en utilisant des colonnes HPLC à siliceparticulaire, à 0,68 minute en employant unecolonne Chromolith® SpeedRod. Le débitd'échantillons est passé à 60 échantillons parheure en utilisant un système HPLC tout à faitstandard. Aucune étape d'extraction sur phasesolide n'a été nécessaire. Les échantillons ontuniquement été filtrés avant d'être injectés.
2) Pour la détermination iso-alpha d'acidesdans la bière1) une économie de coûts et detemps, respectivement de 60 % et 80 %, a étéréalisée en utilisant la colonne Chromolith®
Performance. L'écart-type relatif (RSD) s'estamélioré en passant de 1,6 à 0,9 %. Leséchantillons de bière allégée ont été injectésdirectement dans la colonne après avoir étéfiltrés. Une étape d'extraction sur phase solidea été éliminée (celle-ci était nécessaire en cas
d'utilisation de colonnes HPLC à siliceparticulaire).
Séparations ultra-rapides avec la colonneChromolith® de 3 mm
Les colonnes HPLC Chromolith® de 3 mm dediamètre interne, au lieu de 4,6, permettentd'obtenir des séparations très rapides à desdébits relativement faibles en mode isocratique(fig. 2) ou gradient (fig. 3).
(Figure 2) Séparation isocratique de quatrehydroxybiphényles
La figure 3 montre la séparation de 8sulfamides en seulement 1,4 minute à unevitesse de 2 ml/min -1.6). La même séparationen utilisant des colonnes HPLC à siliceparticulaire de 3 μm, demande généralementenviron 6 minutes.
References:1. A. Bolivar, M. Gasparri, C. Zufall, J. Am. Soc. Brew.
Chem. 2006, 64 (1) , 39-46 2. K. Cabrera, J. Sep. Sci, 2004, 27, 843-8523. Paraskevas D. Tzanavaras, Demetrius G. Themelis -
Analytica Chimica Acta (2006), doi : 10, 1016/j.aca. 2006.07.081
4. V. Borges et al, J. Chromatography B, 2004, 804,277-287
5. Hydroxybiphenyle – eine Substanzklasse, die alsFungizid eingesetzt wird und damit relevant für dieLebensmittel- und Umweltanalytik ist6. LaChrom Elite Application Note 2006 -
Sulphonamides
Figure 3.
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VWR C h r o m J o u r n a l Numéro 3 S e p t e m b r e 2 0 0 78
Toujours le meilleur choix ! Colonnes HPLC Purospher® STAR – le meilleur choix pour des séparations HPLC réussiesLes colonnes HPLC Purospher® STAR RP-18E
sont le meilleur choix de phase pour la
plupart des applications, selon de nombreux
utilisateurs qui apprécient les excellentes
propriétés des colonnes HPLC Purospher®
STAR RP-18E.
Grâce à l'absence de métaux lourds dans la
matrice de la silice ultra-pure Purospher®
STAR et en association avec une
exceptionnelle densité de greffage, ces
phases stationnaires assurent une
chromatographie sans traînée de pics de
composés acides, basiques et chélatants.
Purospher® STAR offre les meilleures
caractéristiques de rétention. Excellente
stabilité jusqu'au pH 10,5, ce qui permet de
séparer des composés basiques avec des
éluats alcalins simples. En outre, les colonnes
Purospher® STAR RP-18E conviennent à une
utilisation avec des phases mobiles 100 %
aqueuses.
L'association de ces caractéristiques fait de
Purospher® STAR RP-18E une phase
stationnaire aux performances
exceptionnelles, adaptée à la quasi-totalité
des applications. Découvrez les
performances des colonnes HPLC Purospher®
STAR RP-18E : une colonne pour différentes
exigences. Les colonnes Purospher® STAR RP-
18E sont idéales par exemple, pour la
séparation des aflatoxines dans les denrées
alimentaires avec une sensibilité très élevée.
Aflatoxines dans les denrées alimentairesLes aflatoxines B1, B2, G1 et G2 sont les principales toxines produites par Aspergillus flavus, A.parasiticus et A. nomius. Ces toxines ont un poids moléculaire relativement élevé et contiennent aumoins un cycle aliphatique oxygéné. Elles peuvent contaminer des produits alimentaires lorsque lesconditions de stockage sont favorables à la croissance fongique. Les principaux contaminantsaflatoxines ont été signalés dans le maïs, les cacahuètes, les noix du Brésil ou les pistaches, lesnoix de coco et les graines de coton. Les aflatoxines sont cancérigènes, mutagènes, tératogènes etimmunosuppressives chez la plupart des animaux. Le Centre International de Recherche sur leCancer (CIRC) a classé les quatre aflatoxines dans le groupe un des cancérigènes.
La confirmation de la présence d'aflatoxines dans un échantillon analysé par HPLC nécessite ladérivatisation des aflatoxines B1 et G1 pour favoriser leur fluorescence naturelle et les rendre plusfacilement détectables. Auparavant, les seules options disponibles pour dérivatiser les aflatoxinesimpliquaient l'utilisation d'acide trifluroacétique (TFA) ou d'iode. Ces deux méthodes sont fiablesmais assez limitées, ce qui peut être surmonté à l'aide d'une troisième méthode avec la celluleCoring.
La norme européenne EN 12955 en méthode HPLC pour la détermination de l'aflatoxine B1 et lasomme des aflatoxines B1, B2, G1 et G2 dans les céréales, les fruits à coque et les produits dérivés,comprend une détection par fluorescence après dérivatisation post colonne avec de l'iode et unnettoyage de la colonne de l'immunoaffinité. La dérivatisation avec de l'iode comme techniquepost-colonne ne présente pas d'autres désavantages qu'un temps de réaction plus long à destempératures plus élevées (élargissement du pic), la nécessité d'une pompe HPLC supplémentaireet la préparation quotidienne de solutions corrosives d'iode. Cette norme européenne spécifie uneméthode pour la détermination d'un taux d'aflatoxine supérieur à
La méthode officielle allemande de mesure des composés dans les produits alimentaires (méthodesLMBG §35) comprend la purification des aflatoxines B1, B2, G1 et G2 au moyen d'une colonned'immunoaffinité et la détection HPLC qui en découle à l'aide d'une cellule électrochimique (celluleCoring). La cellule Coring est une cellule électrochimique qui génère l'agent de dérivatisation, lebrome, à partir de bromure de potassium présent dans la phase mobile. La dérivatisation desaflatoxines se réalise rapidement (le temps de réaction est d'approximativement 4 secondes) àtempérature ambiante. Une préparation quotidienne du réactif de dérivatisation (iode) et unepompe supplémentaire pour l'ajout du réactif de dérivatisation ne sont plus nécessaires.Pour les deux méthodes, Purospher® STAR RP-18E présente une excellente séparation des 4aflatoxines avec une étonnante symétrie de pics comme le prouve la comparaison des différentescolonnes HPLC (Figure 1- Figure 3).
HPLC Analytique
0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15
0
20
60
40
80
100
Retention Time (min)
G2
G1
B2
B1
Conditions chromatographiques :Colonne : EcoCART® 125-3 LiChrospher RP-18, 5 μmPhase mobile : Eau/méthanol/acétonitrile(65:15:20)+ 100 μl HNO3 65 %/l + 119 mg KBr/l
Débit : 0,6 ml min-1Volume d'injection : 100 μlDérivatisation : cellule Coring
Figure 1Separation of Aflatoxins on LiChrospher® RP-18
59
0 2 4 6 8 10 12 14 16
58,5
58
57,5
57
56,5
56
55,5
55
54,5
B1
B2
G1
G2
Conditions chromatographiques :Colonne : colonne 250-4,6 RP-18, 5 μmPhase mobile : Eau/méthanol/acétonitrile (06:03:2)+ 350 μl HNO3=4 mol/l + 120 mg KBr/lDébit : 1 ml min-1Volume d'injection : 200 μl
Dérivatisation : cellule Coring
Figure 2Separation of Aflatoxins on RP-18 column ;Chromatogram from the § 35 LMBG method
0 2 4 6 8 10 12 1614 18 20-5
0
5
10
15
20
25
30
35
-5
0
5
10
15
20
25
30
35
Minutes
FLU
Time: 19,9796 Minutes - Amplitude: -0,40675 FLU
G2
G1
B2
B1
Conditions chromatographiques :Colonne : Purospher® STAR RP-18E, 150 x 4,6 mm,5 μm Précolonne : Purospher ® STAR RP-18E, 4x 4 mm, 5 μm Phase mobile : Eau + 183,1 mg KBr/l + 154 μlHNO3 65 %/l / méthanol / acétonitrile65 % A / 17,5 % B / 17,5 % C(V/V/V), isocratiqueDébit :1 ml min-1Température : 40 ºCVolume d'injection : 100 μl
Dérivatisation : cellule Coring
Figure 3Separation of Aflatoxins on Purospher® STARRP-18 endcapped
VWR C h r o m J o u r n a l Numéro 3 S e p t e m b r e 2 0 0 7 9
Applications
0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15
-0,25
0,00
0,25
0,50
0,75
1,00
1,25
1,50
-0,25
0,00
0,25
0,50
0,75
1,00
1,25
1,50
Minutes
FLU
Time: 14,9852 Minutes - Amplitude: -0,135 FLU
G2
G1
B2B1
Méthode 1 : Aflatoxines avec dérivatisation à l'iode (EN 12955)
G2 - 30 pg/mL, G1 - 100 pg/mL, B2 - 30 pg/mL, B1 - 100 pg/mL
Conditions chromatographiques :Colonne : Purospher® STAR RP-18E, 150 x 4,6 mm, 5 μm Précolonne : Purospher ® STAR RP-18E, 4 x 4 mm, 5 μm Phase mobile A : Eau/acétonitrile/méthanol 65/17,5/17,5 (V/V/V)Phase mobile B : Rincez le système après la séparation pendant 30minutes avec 90/10 d'eau/méthanol (V/V)Débit : 1 ml/minDétection : Fluorescence EX 365 / EM 435Température four : 60 ºCVolume d'injection : 50 μL
Dérivatisation post colonne :DRéactif de dérivatisation : solution d'iode saturéeRéacteur post-colonne : La pompe est arrêtée par la minuteriede la pompe L-2130 lorsque le programme de rinçage commence.Ne laissez jamais cette pompe fonctionner lorsque la pompeL-2130 est arrêtée. L'iode endommagerait votre colonne. Boucle de dérivatisation : boucle PTFE prête à l'emploi,5 m x 0,5 mm D.I ou faites soi-même 3 m x 0,5 mm D.I Débit réacteur post-colonne : 0,2 ml/min
0 2 4 6 8 10 12 1614 18 20
-0,5
0,0
0,5
1,0
1,5
2,0
2,5
-0,5
0,0
0,5
1,0
1,5
2,0
2,5
Minutes
FLU
Time: 19,9796 Minutes - Amplitude: -0,14275 FLU
G2
G1
B2
B1
Méthode 2 :Aflatoxines avec cellule Coring (§ 35 LMBG)
B1 et G1 : 10 pg/mL ; B2 et G2 : 2,5 pg/mL
Conditions chromatographiques :Colonne Purospher® STAR RP-18E, 150 x 4,6 mm, 5 μm Précolonne Purospher ® STAR RP-18E, 4 x 4 mm, 5 μm Phase mobile : Eau + 183,1 mg KBr/L + 154 μl HNO3 65 %/L /méthanol / acétonitrile65 % A / 17,5 % B / 17,5 % C(V/V/V), isocratiqueDébit : 1 ml min-1Détection : Fluorescence EX 365 / EM 435Température : 40 ºCVolume d'injection : 100 μl
Dérivatisation post-colonne :Boucle de dérivatisation : boucle PEEK, 1,38 m x 0,25 mm D.I
Nombreusesapplications disponiblessur simple demandeauprès de votre agencelocale VWR
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>Caractéristiques techniques :Matériau: Polymère réticulé depoly(styrène-divinylbenzène)
Taille de particules: 5 μm
Taille de pores: 100 Å
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2.0x10 6
4.0x10 6
6.0x10 6
8.0x10 6
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Column Bleed Characteristics PRP-h1 vs. Traditional Polymeric Column
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Column Bleed Characteristics PRP-h1 vs. Traditional Polymeric Column
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50 mm 100 mm 150 mm 250 mm
2,1 mm D.I 554-1378 554-13814,6 mm D.I 554-1377 554-1379 554-1382 554-138410 mm D.I 554-1380 554-1383100 mm D.I 554-1385
Colonnes de garde PRP-h1Kit de colonnes de garde analytiques (1 support, 2 cartouches) 554-1386Précolonnes de remplacement (5/paquet) 554-1387Kit de colonnes de garde Semiprep/Prep (1 support, 2 cartouches) 554-1388Précolonnes de remplacement Semiprep/Prep (2/paquet) 554-1389
Résine PRP-h1Résine Bulk 12-20 μm (1 gramme) 554-1390
VWR C h r o m J o u r n a l Numéro 3 S e p t e m b r e 2 0 0 710
Nouvelles colonnes HPLC PRP-h1 de HAMILTON :sensibilité accrue, perte de charge réduite de moitié et absence de ressuage !
La dernière phase HPLC mise au point par
HAMILTON sur la base du PS-DVB conserve
des avantages sur la silice, elle est
généralement associée aux colonnes
polymériques tout en minimisant le taux
d'extractibles.
En effet, les colonnes PRP-h1 ne
présentent aucun "relargage", même avec
de l'acétonitrile à 100 % et une perte de
charge réduite de moitié par rapport à
celle des colonnes polymériques
traditionnelles.
La stabilité exceptionnelle au pH (pH 0-14)
complète les caractéristiques
extraordinaires de ces nouvelles colonnes.
HPLC Analytique Colonnes
Détermination de Naproxène etd'IbuprofèneColonne : PRP-h1,5 μm, 100 Å, 4,1 x 50 mm
Phase mobile :A: 10 mmol/l Sodium dihydrogéno-phosphate, pH=2B: Acétonitrile
Isocratique 50 % A / 50 % B
Débit : 0,6 ml/min
Température : 60 °C
Détection : UV à 230 nm
Echantillon : (1) Naproxen (110 μg/ml)(2) Ibuprofène (830 μg/ml)
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Conformément aux systèmes qualité(directives BPF, BPL ou ISO), lavalidation des procédures utilisées estde la plus grande importance.Toutefois, ce processus comprenant laréalisation du rapport de validationest souvent long et fastidieux. Lelogiciel Validation Manager est unoutil précieux et rapide qui vérifie sivos méthodes sont appropriées àl'utilisation que vous souhaitez enfaire et produit automatiquement lerapport de validation dont vous avezbesoin.
• Internationalement reconnuValidation Manager se base sur les directivesinternationales de validation des méthodesanalytiques établies par EP, USP, FDA, ICH etISO.
• Configuration polyvalente pourtoutes les techniques analytiquesLa procédure de validation peut être configuréeen fonction des formats, des termes utilisés etde la langue, ainsi qu'en fonction desméthodes de calcul et des tests de statistiquesà appliquer. Plusieurs modèles préconfiguréspeuvent être sélectionnés. De nouveauxmodèles peuvent être créés et stockés. Le hautdegré de polyvalence du Validation Managerpermet de l'utiliser pour la validation depratiquement toutes les procéduresanalytiques.
• Utilisation aiséeValidation Manager est très simpled'utilisation. Après avoir répondu à quelquesquestions par le biais d'un assistant, le projetde validation et le document sont créés à l'aided'un simple bouton.
• Création aisée de fiches detravail pour la préparationd'échantillons et de tablesd'injectionUn autre assistant de programmation permetde créer des fiches de travail pour lapréparation d'échantillons pour les différentescaractéristiques de la méthode à évaluer. Deplus, les tables d'injection pour le logiciel depilotage EZChrom Elite™ peuvent être crééesautomatiquement.
• Saisie aisée des donnéesAprès l'acquisition des données, des donnéeschromatographique peuvent être importées àpartir des logiciels EZChrom Elite™ , ou HPLCD-7000 HSM et d'Agilent ChemStation™. Deplus, les données peuvent être copiées depuisdes tables EXCEL™ ou entrées manuellement.
• Calcul automatiqueAprès la saisie des données, les caractéristiquesrequises de la méthode sont calculéesautomatiquement et vérifiées d'un point devue statistique en fonction des procéduresconfigurées.
• Compilation automatique derapportAprès avoir saisi vos commentaires etdécisions, vous pouvez créer le rapport devalidation de méthode d'un simple clic.
• Validé et conforme à la normeFDA 21CFR part 11Le logiciel Validation Manager est validé et lecertificat de validation est fourni avec lelogiciel. Il comprend toutes les fonctions pourune conformité totale avec la norme FDA.
• Pour un gain de tempsimportantEn tant qu'outil complet pour la validation deméthode assistée par ordinateur, ValidationManager aide l'utilisateur dans les différentesétapes de la procédure de validation. Lacompilation automatique du rapport devalidation peut permettre un gain de tempssubstantiel.
Validation Manager - l'outil permettant ungain de temps et d'argent pour la validationde méthodes analytiques peut vous fairegagné des jours ou des semaines de travail.
Si vous devez valider desméthodes analytiques, contacteznos spécialistes et recevez plusd'informations sur le logicielValidation Manager.
Validation ManagerPour une validation rapide et fiable desméthodes analytiques
LogicielsPour plus d'informations sur ces produits, contactez directement votre agence locale VWR,
envoyez un email à [email protected] visitez notre site web sur www.vwr.com
VWR C h r o m J o u r n a l Numéro 3 S e p t e m b r e 2 0 0 712
• Convivialité
• Contrôle des instruments
• Traitement des données
• Respect desréglementations
• Evolutivité réseau
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HPLC Analytique
Logiciel EZChrom EliteTM
Solution logicielle standard et évolutive
Exempled'assistant
pour un accèsrapide aux
fonctions lesplus courantes
Commande du système LaChrom Elite® : écran deconfiguration de la pompe
Affichage de l'état des instruments
VWR C h r o m J o u r n a l Numéro 3 S e p t e m b r e 2 0 0 7 13
EZChrom Elite™ est l'un des systèmes de données chromatographiques les plus utilisés au monde. Ilrépond aux exigences actuelles dans le secteur analytique, d'une station de travail unique à unsystème client/serveur à l'échelle de l'entreprise. EZChrom Elite® est un logiciel intuitif et convivialdéveloppé en fonction des besoins actuels de l'industrie pharmaceutique et chimique. Il comprenddes outils spéciaux pour la conformité aux exigences réglementaires, par exemple FDA 21 CFR11 etvalidation des instruments et du système.
EZChrom Elite™ offre une plate-forme logicielle unique pour le contrôle, letraitement des données et la gestion de nombreux systèmes de chromatographie(HPLC et GC), notamment VWR-Hitachi LaChrom® et LaChrom Elite®, ainsi que lessystèmes des principaux fournisseurs du secteur HPLC et GC (pour une listecomplète des instruments pris en charge, voir www.vwr.com). Lefonctionnement identique du logiciel avec différents systèmes dechromatographie accroît l'efficacité et réduit les frais deformation. EZChrom Elite™ proposes de nombreusesfonctions pour le pilotage des systèmes dechromatographie, la configuration des méthodesdes séquences, le traitement des données,ainsi que la visualisation et lacompilation de rapportspersonnalisés.
Logiciels
Affichage del'état desinstrumentsProchaines sessions de formationconcernant ce système exceptionnel
Site : Darmstadt/AllemagneEn anglais
Formation de l'opérateur debase (FOB) 5/6 fév. 2008Contenu de la formation :Cette formation présente le logicielEZChrom Elite™ aux néophytes etaborde les thèmes suivants :•Développement de méthodes pour
l'acquisition et le traitement des données
•Configuration et exécution de séquences pour l'acquisition et le (re-)traitement des données
•Utilisation de chromatogrammes•Calibrage et quantification•Génération de rapports avec
méthodes et séquences•Options de méthode avancées et
particularités
Formation complémentaire(DBD)7 fév. 2008Contenu de la formation :Cette formation complète la FOB ets'adresse aux clients qui utilisent unDBD (détecteur à barrettes de diodes). La formation FOB doit avoir étéaccomplie et assimilée préalablement.La journée de formation DBD couvre lesthèmes suivants :• Particularités de la configuration
de méthode pour l'acquisition etle traitement des données DBD
• Utilisation de données 3D et 2D. Similitudes et différences avec les détecteurs 2D
• Création et utilisation de bibliothèques de spectres
• Configuration et utilisation de fonctions de pureté des pics
• Particularités de la génération de rapports sur la base des données de DBD
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Optimisation de laséparation rapide àl'aide du systèmede navigation
VWR C h r o m J o u r n a l Numéro 3 S e p t e m b r e 2 0 0 714
Votre navigateur pour desméthodes HPLC optimalesRésolution des pics plus rapide et plus nette réaliséerapidement, intelligemment et de manière fiable!
Le système de navigation de VWR Internationalest le premier système HPLC intelligent quivous guide en toute sécurité à travers lesdifficultés du développement d'une méthodeHPLC. Ce système est extrêmement simple : ilsuffit de placer votre échantillon dansl'injecteur automatique, sélectionner unecolonne, un éluant et appuyer sur le boutonstart!
Que peut faire le système denavigation?Tout d'abord, le système réalise un gradientpour obtenir des informations sur les pics et lestemps de rétention du produit correspondants.Sur la base de ces données et de ses fonctionsd'optimisation uniques, le système navigateurcalcule les gradients linéaires et discontinusoptimaux. A l'aide d'un ordinateur, le systèmeprend en compte davantage de possibilités dedéveloppement de méthode que par unsystème manuel. Il peut mettre au point uneméthode de séparation optimisée en moins de3 heures. Dans des applications standard, uneméthode optimisée peut ensuite devenir uneméthode d'analyse de routine. Même en cas deséparation extrêmement complexes, le systèmede navigation peut réaliser une méthode debase ne nécessitant qu'un paramétrage simple.
Avec quelles applications HPLC lesystème de navigateur peut-ilêtre utilisé?Le système navigateur a été conçu pour une
utilisation universelle. Il peut être utilisé pourl'optimisation des analyses chimiques etbiologiques dans les universités, pour ledéveloppement de méthodes dans les secteurschimiques et pharmaceutiques et pour lecontrôle des denrées alimentaires.
De quoi est constitué le systèmenavigateur?TLe système navigateur comprend une chaineHPLC hautes performances LaChrom Elite®
équipé d'une version spéciale du célèbrelogiciel de développement automatique deméthode ChromSword® Auto. Le système estproposé à un prix très intéressant.
Quels sont les autres avantagesdu système navigateur?Grâce à ses Up grade faciles, le système denavigation offre d'autres possibilités pour ledéveloppement de méthodes HPLCprofessionnelles: le système peut être adaptépour un criblage de colonnes et de solvants, enmode automatique ,lors duquel une méthodede séparation HPLC optimisée développé,même pour les applications complexes.
Outre sa fonction spéciale de développementrapide de méthodes HPLC, le système estéquipé pour les travaux d'analyse de routine,comme pour le contrôle qualité des produitschimiques, pharmaceutiques et alimentairesainsi que pour l'analyse environnementale.Avec ses spécifications hautes performances, sa
HPLC Analytique
Gradient discontinu optimiséautomatiquement dans la séparation de 7sulfonamides.Colonne: LiChrospher® 60 RP-select B, 125-4mmEluant: Eau/acétonitrileDébit: 1,5 ml/min
Optimisation de la séparation rapide d'unéchantillon pharmaceutiqueDessus : Gradient linéaire optimiséBas: Gradient discontinu optimiséColonne: Chromolith® SpeedROD RP18e 50-4,6mmEluant: Eau/acétonitrile Débit: 1,5 ml/min
Le système comprend les modules suivants:• Pompe L-2130 avec accessoire de gradient basse pression et dégazeur
• Auto-échantillonneur L-2200
• Four à colonnes L-2300
• Détecteur à barrettes de diodes L-2455 avec connexion USB
• Organiser
• Système de données de chromatographie EZChrom Elite®
• Logiciel de développement de méthode navigateur
VWR C h r o m J o u r n a l Numéro 3 S e p t e m b r e 2 0 0 7 15
Logiciels
Analyse de la séparation rapide d'unéchantillon pharmaceutique: Gradientdiscontinu optimiséColonne: XTerra® RP18 3,5 μm 4,6-100 mmEluant: Eau/acétonitrileDébit: 1 ml/min
Eluent: Water / acetonitrileFlow rate: 1 ml/min
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Optimisation de la séparation rapide desingrédients d'un jus de pommesDessus: Gradient linéaire optimiséBas: Gradient discontinu optimiséColonne: Chromolith® Performance RP18e
100-4,6 mmEluant : Eau/acétonitrileDébit: 1,5 ml/min
capacité importante d'échantillons, sonsystème de détecteur à barrettes de diodestrès sensible, ses fonctions d'automatisation etde qualification de modules, ainsi que safiabilité absolue, le système LaChrom Elite®
convient également parfaitement aux analysesde routine.
Découvrez les avantages du systèmenavigateur; il optimisera vraiment laproductivité de votre laboratoire HPLC:
Il trouvera automatiquement la méthode deséparation la plus appropriée et présentantune durée d'analyse réduite!
Pourquoi ne pas laisser lesoin à l'un de nosspécialistes de vousprésenter les avantages dusystème de navigation dansvotre propre laboratoire? Contactez nous aux :Tel:01.45.14.87.85
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VWR C h r o m J o u r n a l Numéro 3 S e p t e m b r e 2 0 0 716
La nouvelle pompe inerte L-2130i pourbiochromatographie et chromatographie ionique
La nouvelle pompe biocompatible, multi-usages et chimiquement inerte L-2130i pour lachromatographie biologique et ionique satisfait aux exigences les plus élevées en matière de
sensibilité de détection, de stabilité de ligne de base et de fiabilité.
Pour la réalisation de la pompe L-2130i, il à été décidé de ne pas utiliser de matériau métallique.Le titane a également été évité car il contient des impuretés métaliques qui peuvent se dissoudredans de nombreux éluents Ex: acides ou bases. En fait, des matériaux synthétiques inertes -(notamment le PEEK (polyéthyléthercétone) qui sont stable à la pression) - et la céramique ont étéutilisés pour satisfaire aux exigences de biocompatibilité, d'inertie , et aux traces métaliques
La pompe L-2130i est une pompe en série à double piston offrant l'avantage d'une très bonnestabilité de débit , de faibles pulsations, d'une très grande fiabilité et d'une excellente sécurité defonctionnement. Le système de gestion électronique de la pompe corrige la compressibilité dessolvants et élimine les pulsations. Cette compensation, associée à la stabilité du débit permettentdes temps de rétention parfaitement reproductibles.
La fonction PASS (Synchronisation de l'échantillonneur et de lapompe) novatrice permet uneinjection précise lors de l'utilisation de gradients et accroît considérablement la reproductibilité destemps de rétention. Un mécanisme intégré de rinçage des pistons qui peut être utiliséautomatiquement avec un injecteur automatique, réduit de manière considérable l'usure despistons et la corrosion de la pompe avec l'utilisation de tampon.
La pompe L-2130i peut évoluer vers une pompe à gradient quaternaire avec l'accessoire gradient.Dans ce cas, elle peut être utilisée sur une plage de débits pouvant atteindre 10 ml/min.
La plage de pression pouvant atteindre 275 bars permet une utilisation de la pompe pour toutesles applications, notamment les séparations de phase polymérique biochromatographiques etionchromatographiques ainsi que pour les phases HPLC RP par exemple pour l'analyse despeptides .
La pompe L-2130i inerte possède des fonctions de contrôleparticulièrement intéressantes pour les applications debiochromatographie nécessitant une élution de gradient oul'activation de valves, un contrôle de pompe supplémentaire ou laconnexion d'un autre équipement. Elle est équipée de quatrecommutateurs de contact temporisés ainsi que d'autres contacts desortie pour le démarrage, l'arrêt et le fonctionnement d'autresmodules. La pompe peut,ainsi, être utilisée comme un contrôleurprincipal pour le système de chromatographie lorsqu'il fonctionnesans logiciel de pilotage.
Toutefois, dans la majorité des applications, la pompe L-2130i estintégrée au système LaChrom Elite® à l'aide de la communication E-line® et
contrôlée totalement par le logiciel EZChrom Elite™. Grâce au logiciel d'acquisition de données et de contrôle EZChrom Elite™, une vaste gamme defonctions GXP sont disponibles, comme l'enregistrement de caractéristiques de pression lors del'analyse, l'affichage des numéros de série, un carnet de bord et de la consommation de solvantdepuis le dernier remplacement des joints de pistons.
La pompe L-2130i inerte satisfait aux normes de qualité élevées de Hitachi et est livrée avec unrapport de test et un certificat de qualification.
HPLC Analytique Pompes
• Non métallique,chimiquementinerte(PEEK,céramique)
• Stabilité de débitimportante
• Précision dugradient
• Stabilité de la hautepression
• Accès frontal detoutes les pièces derechange
• Encombrementréduit
VWR C h r o m J o u r n a l Numéro 3 S e p t e m b r e 2 0 0 7 17
Le nouveau détecteur de conductibilité CD 5pour chromatographie ionique répond auxexigences les plus élevées en terme desensibilité de détection, de stabilité de ligne debase et de fiabilité.
Son système de mesure à plusieurs électrodesgarantit une ligne de base stable. La cellule demesure, thermostatable à plusieurs niveaux,peut être placée hors du détecteur ou dans unfour à colonnes. La stabilité nettementsupérieure du système d'analyse grâce à lathermostatisation de la cellule et de lacolonne, permet des mesures très sensiblessur une plage de 0 à 1 000 S/cm. Le systèmede mesure n'étant pas affecté par latempérature ambiante, la stabilisation de laligne de base est relativement rapide. Unefonction d'autozéro permet la suppression dela valeur de conductibilité éluants. Unefonction de décalage du zéro, différentsparamètres de sensibilité et l'inversion depolarité du signal offrent une souplesse accruepour l'analyse d'anions et de cations,notamment dans les limites de sensibililté. Toutes les données sont saisies à l'aide d'unclavier . Le grand écran LCD assure unaffichage clair de la conductibilité. Une foisl'appareil mis sous tension, la ligne de basedevient stable en une demi-heure environ et ledétecteur est alors prêt à effectuer desmesures.
Une série de contacts d'entrée et de sortiepermet de connecter d'autres appareils HPLC,une entrée d'autozéro ,de marqueurd'evénements et des sorties pour lesenregistreurs et intégrateurs.
Le détecteur de conductibilité CD 5 peut êtreintégré de manière simple dans le systèmeLaChrom Elite® grâce à sa constructioncompacte et constitue, en association avec lesmodules HPLC VWR Hitachi, un système dechromatographie ionique hautes performancespour les travaux de recherche et de routine.
Nouveau détecteur de conductibilitéaux propriétés excellentes
Détectionconductimétrique
• Sensibilitéexceptionnelle
• Grande stabilité deligne de base
• Faible bruit de fond
• Cellule de mesurethermostable
• Très faibleencombrement
Chromatogramme A:détermination des anionsavec une sensibilité de 50
ppb par anion
Chromatogramme B:détermination des anions
dans de l'eau LiChrosolv
Chromatogramme C:détermination des anions
dans de l'eau Milli-Q
Conditions analytiques• Echantillons:
50 ppb standard,LiChrosolv
®et eau Milli-Q
• Colonnes de séparation:Shodex IC NI-424
• Phase mobile:1,7 mM d'acide phtalique 300 mM d'acide borique
• Détecteur:CD 5, plage 10 μS/cm
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VWR C h r o m J o u r n a l Numéro 3 S e p t e m b r e 2 0 0 718
Le système HPLC LaChrom Elite® est désormais également contrôlépar le système de données de chromatographie Chromeleon® System
Le système HPLC LaChrom
Elite® de VWR/Hitachi est
désormais encore plus
polyvalent : il est
contrôlable à l'aide du
logiciel Chromeleon® de
Dionex.
HPLC Analytique Logiciels
Des laboratoires du monde entier utilisent les systèmes LaChrom Elite® de VWR/Hitachi. Denombreux utilisateurs préfèrent les instruments LC VWR/Hitachi LaChrom Elite® pour leurfonctionnement fiable et polyvalent. Cette gamme d'instruments HPLC offre une précision, et unesensibilité exceptionnelles, ainsi qu'une contamination croisée très faible.
Le nouveau logiciel pilotage pour le système LaChrom Elite® est un module additionnel du systèmede données de chromatographie Dionex Chromeleon® 6.8. Ce module permet un contrôle total dusystème LaChrom Elite® par le logiciel de données Chromeleon®. Le système Hitachi LaChromElite® fonctionne avec des instruments d'autres fabricants sur une plate-forme logicielle commune.Les utilisateurs disposent ainsi d'une interface logicielle unique pour la gestion des données, desparamètres des instruments, des séquences, des méthodes et des rapports.
Vous bénéficiez d'une solution économique et unique pour vos analyses, ce qui minimise lesbesoins de formation et simplifie la gestion des utilisateurs .
Le pilotage Hitachi pour Chromeleon® a été développé par des ingénieurs d'Hitachi encollaboration avec des développeurs de Dionex .
Programmation simple : Que votre mise en œuvre Chromeleon® soit constituée d'une station detravail unique ou d'une solution complète à l'échelle de l'entreprise(réseau client/serveur), le pilotage LaChrom Elite® peut être utilisée pources deux types de configuration. Le logiciel de pilotage pour HitachiLaChrom Elite permet de commander la pompe, l'injecteur automatique,le four et les détecteurs. Programmation de la pompe : Toutes les informations de la pompe: le débit, les événementssecondaires , la composition du gardient sont programmables enfonction du temps..Programmation du four: Réglage de la température et de la précision.Programmation des détecteurs : Les détecteurs UV, UV/VIS et fluorescence sont programmable dans lelogiciel: la longueur d'onde, les commandes d'autozéro , l'état de lalampe, les longueurs d'ondes et autres paramètres sont programmableen fontion du temps.
Les utilisateurs peuvent consulter l'écran des instruments, qui affichetoutes les informations, en personnalisant la présentation.
Conformité réglementaire:
Tous les modules LaChrom Elite® comprennent un journal de maintenance, qui enregistrel'utilisation et le remplacement des pièces détachées. Ils présentent également une fonction dediagnostic intégrée, qui permet de contrôler le® bon fonctionnement du système.
Dans le cadre d'une association avec le logiciel Chromeleon®, la gamme complète des fonctionsGXP et le respect de la norme 21 CFR partie 11 sont assurés, par exemple usage et remplacementde la lampe du détecteur, suivi des modifications, documentation automatique des paramètres desinstruments, paramètres de maintenance, etc.
Figure 1: Logiciel de controleLaChrom Elite pour le logicielDionex Chromeleon®. L'écranpermet de suivre aisément lesajustements et chromatogrammes
Aperçu des fonctions et de l'étatdes modules avec tous lesparamètres
VWR C h r o m J o u r n a l Numéro 3 S e p t e m b r e 2 0 0 7 19
Pour conserver la haute qualité
des solvants jusqu'à ce que vous
les utilisiez, Merck a mis au point
un concept de conditionnement
pratique pour les produits
chimiques
Pour le Lichrosolv®, le Prepsolv® (HPLC),l'Uvasol® (UV/VIS), le SeccoSolv®, leSupraSolv® et l'Unisolv® (GC), nousproposons une gamme unique de tailleset de types de matériaux différents:• Flacons en verre• Flacons en aluminium• Bidons en acier inoxydable• Autres bidons et conteneurs• Systèmes de prélèvement
Systèmes de prélèvement et de conditionnement,parfaitement adaptés aux solvants HPLC
Solvants
Produits chimiques Prolabo BDH La nouvelle marque de produits chimiques deVWR International
Nouvelle gammeHiPerSolvChromanorm
• Solvants de hautepureté pourapplications HPLC
• Les spécificationsgaranties sontconformes à celles dessolvants HiPerSolv
• Haute performance etfiabilité
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Association d'une qualitéoptimale et de prixcompétitifs
Pour obtenir un exemplairegratuit de la nouvelle
brochure de produitschimiques Prolabo BDH
ou pour toutcomplémentd'information,contactez votreinterlocuteur VWR
local ou consultez vwr.com
Nos avantages:
• Manipulation aisée, sécurisée et évitant la contamination des solvants
• Stockage et distribution centralisée possibles
• Installation par l'utilisateur ou autressolutions personnalisées possibles
• Possibilité de connexion directe àl'équipement de laboratoire comme unepompe HPLC
L'expertise de Merck est reconnue et l'autoriseà agir comme un organisme d'inspectionofficiel par le Federal Institute for MaterialResearch and Testing d'Allemagne (RAM).
Pour plus d'informations sur ces produits, contactez directement votre agence locale VWR,envoyez un email à [email protected] visitez notre site web sur www.vwr.com
Exemples d'utilisation :
• Alimentation des pompes HPLC en solvants (éluants)
• Elimination des déchets
• Utilisation dans tous les systèmes clos pour le transfert stérile de milieuxde culture sous pression (par exemple, fermenteurs)
VWR C h r o m J o u r n a l Numéro 3 S e p t e m b r e 2 0 0 720
FLACON DE LABORATOIRE POURHPLC DURAN® DE SCHOTT
Ces flacons permettent un transfert sûr de liquide vers un
système fermé ou stérile.
Idéal pour les laboratoires de chimie et de biotechnologies.
FONCTIONNEMENT
Le flacon HPLC DURAN® de SCHOTT est un système complet. Il est constitué du flacon delaboratoire spécial DURAN® de SCHOTT et d'un bouchon à vis avec quatre ports. Ceux-cipermettent une utilisation avec trois voies simultanément. Le quatrième port peut être utilisé pourinstaller un dispositif stérile avec compensation de pression . Le système convient aux tuyaux d'undiamètre externe de 1,58 mm (1/16 de pouces) et de 3,17 mm (1/8 de pouces). Les ports qui ne sont pas utilisés peuvent être obstrués à l'aide d'un joint en silicone.Le flacon "pression plus" SCHOTT DURAN® résiste à la pression grâce à sa géométrie spéciale. Sarésistance à la pression est certifiée TÜV-GS (ID TÜV : 0000020716 ) et testée selon la norme EN1596. Le flacon est équipé d'un code de traçabilité pour le téléchargement d'un certificat deconformité sur Internet.
Celui-comprend le numéro de lot et date de fabrication, mais également des informationssupplémentaires sur les normes et la conformité USP/FDA.
VOS AVANTAGES
• Connection parfaite des capillaires évitant les risques de fuite et de désamorce des pompes• Le flacon possède une forme spéciale conformément à la norme ISO 4796 et résiste à la
pression/au vide entre –1 et +1,5 bars • Le bouchon en PTFE et en PP est autoclavable avec le flacon sans que vous ne deviez le retirer.• Permet une utilisation répétée• Des joints en silicone (disponibles indivuellement) peuvent également servir de septum pour
l'ajout d'additifs• L'utilisation dans un système clos retient les gaz toxiques dans le flacon• Le système est conçu pour une utilisation universelle car le bouchon à vis est basé sur le filetage
ISO GL 45 standard • Système complet pratique : le flacon de laboratoire HPLC SCHOTT DURAN® avec bouchon à vis à
quatre ports peut être utilisé immédiatement (des pièces de rechange sont disponiblesséparément).
Solvants Systèmes de raccord
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Il y a peu, l'exposition d'une colonne GC à desextraits bruts de plantes aurait assurémentdiminué la durée de vie de la colonne car lesextraits de plantes sont connus pour endommagerla phase stationnaire. Toutefois, pour tester lastabilité chimique des phases stationnaires de lanouvelle gamme de colonnes GC Forte, nous lesavons soumises au "Green Tea Test" (test du thévert).
Au cours de l'expérience, un mélange test standarda été analysé pour réaliser un chromatogramme deréférence. Ensuite, la colonne a été soumise à 100injections de thé vert suivies par l'analyse répétéedu mélange test. Les chromatogrammes avant etaprès le test montrent des performances similaireset la nature inerte de la phase stationnaire qui estextrêmement stable (figure 1).
En approfondissant le concept, le test du thé vert aété réalisé sur des phases plus polaires telle que laBPX50. Généralement, les phases polaires sontmoins robustes que les phases non polaires.Malgré cela, la colonne BPX50 a passé le test duthé vert et, même après 200 injections de thé vert,il n'y avait que peu de différences entre leschromatogrammes avant et après le test. L'analysedes pesticides organochlorés montre que la phasestationnaire extrêmement stable est restée inerteen raison de l'absence de décomposition despesticides dans la colonne (figure 2).
Une robustesse similaire a été constatée pour laBPX35, qui offre une séparation excellente desH.P.A après 100 injections de thé vert (figure 3).
Une utilisation excessive de la colonne comme lorsdu test du thé vert peut sembler drastique mais, enlaboratoire, les contraintes de temps et lesproblèmes de coûts peuvent souvent entraîner des
compromis lors de lapréparation deséchantillons. Il estraisonnable de penserqu'une préparationd'échantillons inappropriéeest liée à la durée de vieréduite des colonnes,nécessitant ainsi unremplacement des colonneset des temps d'arrêt del'instrument plus fréquents.Toutefois, même si vos
échantillons ne contiennent pas autantd'impuretés que le thé vert, la nouvelle gamme decolonnes Forte propose une durée de vie et desperformances exceptionnelles.
Dans le cadre de recherches plus poussées, nousavons évalué le taux de ressuage des colonnesForte. En utilisant des échantillons propres, la duréede vie des colonnes est déterminée par une perteprogressive de la phase (entraînant unedéterioration de la résolution) qui est provoquéepar le ressuage de la colonne. Le ressuage est uneperte de phase, en quantifiant celle-ci par rapport àun étalon, le taux de perte de phase peut êtremesuré en ng/s. Si la quantité initiale de la phasedans la colonne est connue, la durée nécessairepour la perte de 1% de la phase peut être calculée.Les résultats du ressuage sont illustrés à la (figure4).
Ne nous contentons pas de soumettre noscolonnes au test du thé vert, nous avons décidé detester l'hypothèse suivante. l'exposition d'unecolonne à l'oxygène ou la suppression de gazvecteur, tout particulièrement en cas detempératures élevées (notamment avec les phasespolaires), endommagent-elles rapidement lacolonne. Contrairement à ce que nous croyions,même les phases les plus polaires de la gammeForte peuvent faire face à ce type d'utilisationagressive. La figure 5 montre qu'après un brefreconditionnement, les performances de la colonneBPX50 ont été restaurées après une suppressiondu gaz vecteur pendant 90 minutes à 250 ºC.Même l'utilisation de 1% de mélange d'air commegaz vecteur n'a pas fait beaucoup de dégâts,comme le montre l'analyse du mélangeorganochloré 8081 (figure 6). 250 °
Bien que nous ne souhaitions pas encourager lamauvaise préparation d'échantillons et l'utilisationabusive des colonnes, nos expériences ontdémontré l'excellente durée de vie de la gammeForte. Davantage d'exemples d'utilisation agressivedes colonne à suivre!
La nouvelle colonne Forte deSGE relève le défi du thé vert
Chromatographie enphase gazeuse
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Nouvelles colonnes de chromatographied'échange d'ions AcroSep™ de Pall Life Sciences
Biochromatographie
Pall a récemment agrandi sa gamme deproduits de chromatographie à l'aide desnouvelles colonnes de chromatographied'échange d'ions AcroSep™ . Les colonnessont idéales pour les études d'optimisation desprogrammes de purification des protéinesutilisant de petits volumes d'échantillon avanttransposition et proposent une méthodeefficace et fiable de préparation d'échantillonsde protéines pour des analyses structurelles,fonctionnelles et de rendement.
Les colonnes d'échange d'ions contiennent lesphases de chromatographie HyperD de Pallcréés à l'aide de la technologie "gel-in-a-shell"brevetée.
La conception
"Gel-in-a-Shell"
La bille est ainsi composée d'un hydrogelhaute capacité polymérisé dans les gigaporesd'une bille de céramique rigide. L'agent demodification est lié à l'hydrogel dans les poresde la bille. Cette structure offre de nombreuxavantages, notamment une capacité supérieureà la moyenne, une tolérance aux cycles dechromatographie rapides sans augmentationconcomitante de la perte de charge et unetolérance accrue aux sels pour les échangeursd'ions.
Que vos applications
concernent la recherche, la
transposition ou le "polishing",
Pall propose une gamme
complète de gels pour la
chromatographie d'affinité,
d'échange d'ions, d'exclusion
de taille, d'intéraction
hydrophobe et sur
hydroxyapatite.
Pour recevoir une listecomplète de produits dela gamme de purificationprotéinique de Pall et lemanuel d'applicationanalytique, contactez s'ilvous plaît votre serviceclient VWR.
Les gels de chromatographie Bulk (en flaconsde 1 à 1 000 ml) sont également disponibleschez Pall. Les gels de chromatographie sontutilisables dans des colonnes dechromatographie traditionnelles ou, pour desséparations rapides, dans des colonnes decentrifugation (p. ex., Pall Nanosep®). Pour lesséparations à haut rendement ou les tests dedépistage, les sorbants peuvent être associésaux plaques de filtration AcroPrep™ avec unmaximum de 96 mini-colonnes pour untraitement simultané.
Pall offre également des kits dechromatographie pour une élimination efficacedes protéines. Ces kits prêts à l'emploicomprennent tous les composants nécessairespour la déplétion ou la sélection de l'albumine
et/ou de l'IgG de nombreuses espèces.
Pour vous aider dans vos recherchesprotéomiques, Pall a mis au point un manueldétaillé contenant une série de protocoles pourla préparation et l'analyse d'échantillons. Ilexplique des protocoles de manipulation desgels de chromatographie et leur utilisation.
Pour obtenir une liste complète de la
gamme de produits de purification
protéinique de Pall ou pour commander un
nouveau manuel de préparation et
d'analyse de préparation d'échantillons
protéiniques, contactez votre bureau de
ventes local VWR.
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Echange d'ions
Support d'échange ion
Particule Stabilité Régénération Echange ioniqueMilieu Fonction Taille (moyenne μm) Plage de pH pH Capacité (1)
Céramique CM Cation faible 50 2-12 1-14 > 60 mg/ml (2)HyperD® F Echangeur
DEAE Ceramic Anion faible 50 2-12 1-14 > 85 mg/ml (3)HyperD F Echangeur
Q Ceramic Anion fort 50 2-12 1-14 > 85 mg/ml (3)HyperD F Echangeur
S Ceramic Cation fort 50 2-12 1-14 > 75 mg/ml (4)HyperD F Echangeur
(1) Capacité de liaison dynamique déterminée à 10 % de progression, 200 cm/h avec 7 ml de gel dans unecolonne de 1,1 cm (diamètre int) et de 7 cm de long utilisant :(2) 5 mg/ml d'IgG humain dans 50 mM de tampon d'acétate de sodium, 100 mM de NaCl, pH 4,7(3) 5 mg/ml de BSA dans 50 mM de tampon Tris-HCl, pH 8,6(4) 5 mg/ml de lysozyme dans 50 mM de tampon d'acétate de sodium, pH 4,5
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Description Qté/coffret Code article
Colonne HyperD F CM 1ml 5 569-1000Colonne HyperD F S 1ml 5 569-1001Colonne HyperD F Q 1ml 5 569-1002Colonne HyperD F DEAE 1ml 5 569-1003
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Caractéristiques :
Technologie Gel-in-a-Shell– Le gel de chromatographied'échange d'ion HyperD brevetéeest un hydrogel polymérisé hautecapacité dans les grands poresd'une bille de céramique rigide
Rapide et efficace – Lastructure du gel permet desdébits plus rapides et despressions plus élevées tout enconservant les capacités deliaison dynamique élevées.Haute résolution –Séparation efficace des protéinespour une isolation et unepurification complète
Taux de recouvrement –Récupération maximale afind'obtenir des protéinesextrêmement pures
Polyvalence – Raccords mâleset femelles Luer lock pour uneutilisation pratique avec uneseringue, une pompe ou unsystème de chromatographieautomatisé
Pratique - la tête de colonnehexagonale empêche celle-ci derouler
Convivialité - Code couleur etmarquage selon le typed'échangeur
AustriaVWR International GmbHGraumanngasse 71150 WienTel.: 01 97 002 0Fax: 01 97 002 600E-mail: [email protected]
BelgiumVWR International bvba/sprlHaasrode Researchpark Zone 3Geldenaaksebaan 4643001 LeuvenTel.: 016 385 011Fax: 016 385 385E-mail: [email protected]
DenmarkVWR International ApSValhøjs Alle 174-1762610 RødovreTel.: 43 86 87 88Fax: 43 86 87 90E-mail: [email protected]
FinlandVWR International OyPihatörmä 1 C 102240 EspooTel.: 09 80 45 51Fax: 09 80 45 52 00E-mail: [email protected]
FranceVWR International S.A.S.Le Périgares – Bâtiment B201, rue Carnot94126 Fontenay-sous-Bois cedexTel.: 0 825 02 30 30 (0,15 EUR TTC/min)
Fax: 0 825 02 30 35 (0,15 EUR TTC/min)
E-mail: [email protected]
GermanyVWR International GmbHHilpertstrasse 20aD - 64295 DarmstadtTel.: 0180 570 20 00*Fax: 0180 570 22 22*E-mail: [email protected]*14 Cent/Minute aus d. dt. Festnetz
IrelandAGB Scientific LimitedA VWR International CompanyOrion Business CampusNorthwest Business ParkBallycoolin, Dublin 15.Tel.: 01 8822222Fax: 01 8822333E-mail: [email protected]
ItalyVWR International s.r.l.Via Stephenson 9420157 Milano (MI)Tel.: 02 332 03 11Fax: 800 152 999E-mail: [email protected]
The NetherlandsVWR International B.V.Postbus 81981005 AD AmsterdamTel.: 020 4808 400Fax: 020 4808 480E-mail: [email protected]
Northern IrelandAGB Scientific LimitedA VWR International CompanyA10 Harbour Court, 7 Heron Rd.Sydenham Business ParkBelfast, BT3 9HBTel.: 028 9058 5800Fax: 028 9080 7812E-mail: [email protected]
NorwayVWR International ASKakkelovnskroken 1P.B. 45, Kalbakken 0901 OsloTel.: 0 2290Fax: 22 90 00 40E-mail: [email protected]
PortugalVWR International - Material deLaboratório, LdaEdifício NeoparkRua Tomás Ribeiro, 43- 3 D2790-221 CarnaxideTel: 21 3600 770Fax: 21 3600 798/9E-mail: [email protected]
SpainVWR International Eurolab S.L.Apartado 4808100 Mollet del Vallés - BarcelonaTel.: 902 222 897Fax: 902 430 657E-mail: [email protected]
SwedenVWR International ABFagerstagatan 18a163 94 StockholmTel.: 08 621 34 00Fax: 08 621 34 66E-mail: [email protected]
SwitzerlandVWR International AGLerzenstrasse 16/18 8953 DietikonTel.: 044 745 13 13Fax: 044 745 13 10E-mail: [email protected]
UKVWR International LtdCustomer Service CentreHunter BoulevardMagna ParkLutterworthLeicestershireLE17 4XNTel.: 0800 22 33 44Fax: 01455 55 85 86E-mail: [email protected]
Votre partenaire de distribution Européen
Une nouvelle gamme complète de vials àvisser avec des volumes compris entre 2 et60 ml est maintenant disponible pourcompléter la gamme VWR Collection deflacons et d'accessoires pourchromatographie.
Toutes les vials sont en verre de classehydrolytique 1, transparent ou ambré.Etant donné que ces flacons à vissernécessitent des joints avec des types defiletage différents et qu'une vaste gammede septa est disponible, vous pouvezcommander les bouchons séparément. Lesvials sont conditionnées par paquet de 100
Pour permettre une meilleure identificationdes échantillons stockés, le marquagecodes-barres sur les vials est égalementpossible. Toutefois, une quantité minimaledoit être commandée
Volume (ml) Type Filetage Dimension (mm) verre Code article
4 A visser 13-425 45 x 14.7 transparent 548-00514 A visser 13-425 45 x 14.7 Ambré 548-00528 A visser 15-425 61 x 16.6 transparent 548-08218 A visser 15-425 61 x 16.6 Ambré 548-088912 A visser 15-425 66 x 18.5 transparent 548-082012 A visser 15-425 66 x 18.5 Ambré 548-090320 A visser 20-400 86 x 22.7 transparent 548-089020 A visser EPA 57 x 27.5 transparent 548-015420 A visser EPA 57 x 27.5 Ambré 548-063830 A visser EPA 72.5 x 27.5 transparent 548-015530 A visser EPA 72.5 x 27.5 Ambré 548-063740 A visser EPA 95 x 27.5 transparent 548-015640 A visser EPA 95 x 27.5 Ambré 548-063960 A visser EPA 140 x 27.5 transparent 548-064060 A visser EPA 140 x 27.5 Ambré 548-0641
Nouveaux vials à visser VWR Collection
Pour plus d'informations sur les bouchons, les septa ou toute autre vial VWR Collection pourchromatographie, contactez votre bureau de ventes local VWR.
