DEUXIEME WORKSHOP DE BIOTECHNOLOGIE ET SANTE

DEUXIEME WORKSHOP DE BIOTECHNOLOGIE EN SANTE HUMAINE

LBCM FSB-USTHB

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MINISTERE DE L’ENSEIGNEMENT SUPERIEUR ET DE LA RECHERCHE SCIENTIFIQUE

UNIVERSITE DES SCIENCES ET DE LA TECHNOLOGIE HOUARI BOUMEDIENE

FACULTE DES SCIENCES BIOLOGIQUES

LABORATOIRE DE BIOLOGIE CELLULAIRE ET MOLECULAIRE

EN PARTENARIAT AVEC L’ANDRS

DEUXIEME WORKSHOP

BIOTECHNOLOGIE EN SANTE HUMAINE

08 - 10 novembre 2009

SALLE POLYVALENTE DE L’USTHB


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Les Biotechnologies : Innovations technologiques utilisant les Sciences du Vivant, sont devenues actuellement un carrefour incontournable à l’échelle internationale reliant les disciplines de la biologie cellulaire et moléculaire aux nouvelles technologies.

Technologies en plein essor, elles regroupent de nombreux

domaines d’activités dont celui de la santé humaine qui nous réunit aujourd’hui.

Utilisant les concepts fondamentaux de la biologie (biochimie,

microbiologie, génétique, pharmacologie, biophysique, biologie

moléculaire, ingénierie et bioinformatique) et les innovations

technologiques émanant de ces disciplines, les biotechnologies

permettent de:

1 - Préparer, tester et produire des bio-médicaments : vaccins, protéines

recombinantes, anticorps monoclonaux, thérapie cellulaire et génique,

cytokines, anti-cytokines, facteurs de croissance.

2 – Pronostiquer (bio-marqueurs), diagnostiquer et comprendre les

mécanismes des pathogénèses.

Science en plein essor, les Biotechnologies

constituent un enjeu stratégique majeur

dans l’économie.

http://fr.wikipedia.org/wiki/Biochimie

http://fr.wikipedia.org/wiki/Microbiologie

http://fr.wikipedia.org/wiki/G%C3%A9n%C3%A9tique

http://fr.wikipedia.org/wiki/Biophysique

http://fr.wikipedia.org/wiki/Biologie_mol%C3%A9culaire

http://fr.wikipedia.org/wiki/Biologie_mol%C3%A9culaire

http://fr.wikipedia.org/wiki/Vaccin

http://fr.wikipedia.org/w/index.php?title=Prot%C3%A9ines_recombinantes&action=edit&redlink=1

http://fr.wikipedia.org/w/index.php?title=Prot%C3%A9ines_recombinantes&action=edit&redlink=1

http://fr.wikipedia.org/wiki/Anticorps_monoclonaux

http://fr.wikipedia.org/wiki/Th%C3%A9rapie_cellulaire

http://fr.wikipedia.org/wiki/Th%C3%A9rapie_g%C3%A9nique

http://fr.wikipedia.org/wiki/Diagnostic


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COMITES

COMITE SCIENTIFIQUE

Professeur Laraba-Djebari Fatima Présidente-USTHB

Professeur Bakour Rabah USTHB

Professeur Djerdjouri Bahia USTHB

Professeur Touil-Boukoffa Chafia USTHB

Professeur Hacéne Hocine USTHB

Professeur Benazzoug Yasmina USTHB

Professeur Benlatrèche Chérifa Univ Mentouri

Professeur Satta Dalila Univ Mentouri

Professeur Mechakra Aïcha Univ Mentouri

Professeur Meraihi Zahia Univ Mentouri

Professeur Karam Nouredine USTO

Professeur Benboubétra Mohamed Univ Ferhat Abbas Sétif

Professeur Mati Abderahmane Univ M M Tizi ouzou

DR Hammoudi-Triki Djelila USTHB

DR Mohammedi-ladjali Kefia USTHB

DR Ouartsi Zohra UNIV-Annaba

DR Fazouane Fethia UMBB Boumerdes

DR Belkhodja Razika UMBB Boumerdes

DR Halouane Fatma UMBB Boumerdes

DR Oussedik-Oumehdi Habiba USTHB

DR Messai Yamina USTHB

DR Hamadouche-Benhassine Traki USTHB

DR Otmani-Marabout Kheira USTHB

DR Nateche-Métiaz Farida USTHB

COMITE ORGANISATION DR Adi-Bessalem Sonia

DR Benmalek Yamina

DR Mezioug Dalila

DR Izem Malika

DR Belguendouz Houda

DR Amri Manel

DR Mendil Amina

DR Bounaama Abdelkader

DR Boussag-Abib Lila

DR Abderahmani Ahmed

DR Sami-Merah Sassia

DR Messaoudène Djamel

DR Hadj-Rabia Yamina

DR Saci Amel

SECRETARIAT

DR Belkhelfa Mourad

Mr. Bouanane Ouramdane

DR Rafa Hayet

DR Chelghoum Hayet

www.usthb.dz

Contact: [email protected]

http://www.usthb.dz/

mailto:[email protected]


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SPONSORS

Remerciements

Tous nos remerciements vont à ceux qui ont accepté d’apporter

leur soutien financier à l’organisation de ce Workshop


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PROGRAMME

Dimanche 08 Novembre 2009

9 H 00 Allocutions d’ouverture : Monsieur le Recteur et Mme la Doyenne de la FSB

9 H 45 Présentation du Laboratoire de Biologie Cellulaire et Moléculaire

PREMIERE SEANCE

Conférences thématiques

Modérateurs : Chentouf-Mentouri Z., Bakour R., Laraba-Djebari F.

10 H 00 Application de la Nanotechnologie dans les traitements de l’arthrite rhumatoïde.

Dr Mohamed Benderdour : Département de Pharmacologie, Université de Médecine, Montréal,

Canada.

10 H 30 Anticorps recombinant: Du gène au médicament anti-thrombotique.

Pr Philippe Billiald: Faculté de Pharmacie, Université Paris-Sud et Muséum National d’Histoire

Naturelle, Paris

11 H 00 Pause Café

11 H 30 Transcriptional effects of delivery systems: The effect of dendrimer architecture on EGFR mRNA

expression and on siRNA-mediated gene silencing activity.

Pr Mustapha Benboubetra. University of Sétif, Algeria.

DEUXIEME SEANCE

Session : Diagnostic- Pronostic- Biotechnologie.

Modérateurs : Benboubetra M., Hacene H., Touil-Boukoffa C.

12 H 00 Optimisation d’un Test d’Immuno-Diagnostic dans la Prise en Charge des patients envenimés.

Hammoudi-Triki, D., Mendil, A., Adi-Bessalem, S., Sami-Merah, S.et Laraba-Djebari, F, LBCM, FSB-

USTHB.

12 H 10 Génétique des affections neuromusculaires fréquentes en Algérie. Analyse moléculaire de plus d’un

millier de familles. Benhassine T., Hamadouche, T., Tazir,M, Chaouch M., Makri S., Grid D, Lévy N.,

De Sandre-Giovannoli A., Delague V., LeGuern E., Brice A., Koenig M., Moreira M., Vallat J.M.

LBCM, FSB-USTHB.

12 H 20 Diagnostic moléculaire de l’hémoglobine H en Algérie. H. Mesbah-Amroun , F. Rouabhi , R.

Ducrocq , J. Elion. LBCM, FSB-USTHB.

12 H 40 BRCA1 and BRCA2 mutation screening in Algerian patients with Hereditary Breast Cancer.

Cherbal., F. et collaborateurs, LBCM, FSB, USTHB.

12 H 50 Identification des gènes de prédisposition aux cancers colorectaux héréditaires non polyposiques,

HNPCC (Syndrome de Lynch) et mise en évidence du statut MSI (MicroSatellite Instability). Berkane

K.et Bouzid, K.FSB-USTHB.

13 H 00 Etude de quelques biomarqueurs du syndrome néphrotique. Benhamdi A., Mechakra A., Cheriti

N.. Constantine.


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13 H 10 Association entre-le polymorphisme du gène de l’Apolipoprteine E, le profil lipidique sérique et la

maladie d’Alzheimer. Amari H., Ouldjaoui A., Sifi K., Sifi Y. Kohil K., Hamri A et Abadi.

Laboratoire de génétique et biologie moléculaire, CHU et Université Mentouri Constantine

13H 20 Rôle des cytokines et la NO-synthase dans les désordres immunitaires associés à de la maladie

d’Alzheimer: Impact sur l’immunosurveillance des patients. Belkhelfa. M, Medjeber O.,Rafa H.,

Bouaziz S., Djeraba Z., Lammali A, Abdelouahab K, Abada-Bendib M., Touil-Boukoffa C. LBCM,

FSB-USTHB.

13 H 30 Mise en évidence des biomarqueurs du diabète dans la salive par les techniques d’électrophorèse.

Bellil Ines & Khelifi Douadi. Laboratoire de Génétique Biochimie et Biotechnologie Végétale,

Faculté des Sciences de la Nature et de la Vie, Université Mentouri Constantine

13 H 40 Débat et Pause Déjeuner

TROISIEME SEANCE

Session : Biothérapie

Modérateurs : Billiad P., Benlatrèche C., Benderdour M.

14 H 40 Les Biomolécules de Venins : Outils de Diagnostic et de Thérapie dans l’Hémostase

Oussedik-Oumehdi H., Cherifi F., Saci A et Laraba-Djebari F., LBCM, FSB-USTHB.

14 H 50 Perspectives Immunothérapeutiques et Vaccinales dans les envenimations scorpioniques. Adi-

Bessalem S., Boussag-Abib L., Mendil A, Hammoudi-Triki D, Sami-Merah S., Billiald, P., et Laraba-

Djebari F, LBCM, FSB-USTHB.

15 H 00 Implication de la membrane lamellaire dans les stratégies d’échappement parasitaire et la pathogenèse

au cours de l’échinococcose humaine : Rôle anti-hydatique des Voies : IFN-gamma/NOSynthase2.

Amri M., Mezioug D., Bouaziz S., Abdi Zaki-S. e Touil-Boukoffa C, LBCM, FSB-USTHB.

15 H 10 Implication de l’IL-17, de l’IL-6, du TNF-α et de l’IL-10 dans les mécanismes de l’immuno-

modulation au cours des maladies inflammatoires chroniques de l’intestin : Action potentielle

thérapeutique de l’IL-10. H. Rafa, H. Saoula, A. Boutaleb F, Aftiss S., Nakmouche M.et Touil-

Boukoffa C., LBCM, FSB-USTHB.

15 H 20 Les activités anti-radicalaires d’une plante médicinale locale fraxinus angustifolia (le frêne). Laib Y. et

Atmani Djebbar, Bejaïa.

15 H 30 Les éléments mobiles de type mariner issus des organismes des sources hydrothermales océaniques :

étude et perspectives d’utilisation en thérapie génique.

Toumi N., Renault S., Casse N., Pradier E., Bigot Y. et Laulier M., Tebessa.

15 H 40 Apport des thérapies moléculaires ciblées dans la prise en charge des cancers colorectaux métastiques.

Expérience Algérienne. Berkane K, Oukkal, Mahfouf M.H., Terki N., Baba Ahmed R et Bouzid K,

FSB- USTHB et CPMC, Alger.

15 H 50-16 H00 Débat et Pause café

QUATRIEME SEANCE

Session : Posters (P1-P15) Modérateurs : Amroun-Mesbah H., Ait Lounis A., Hammoudi-Triki D.

16 H 10 -17 H 30 POSTERS (Diagnostic- Pronostic-Biotechnologie/Biothérapie)


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Lundi 09 Novembre 2009

CINQUIEME SEANCE

Session : Biochimie - Biotechnologie.

Modérateurs : Ammar-Khodja, Benhassine T., Benazoug Y., Hammoudi-Triki D.

9 H 00 L’hémoglobine source intarissable de connaissances.

Boudrahem-Addour N. LBCM, FSB-USTHB.

9 H 10 Effet de l’acide niflumique sur la physiologie mitochondriale et la prolifération des cellules ht-29.

Amrouche-Mekkioui I. et Djerdjouri B., LBCM, FSB-USTHB.

9 H 20 Colite ulcereuse au dextran sulfate - modulation du stress oxydatif par un anti-inflammatoire non

steroïdien, l’indometacine. Bounaama A. et Djerdjouri B.,

LBCM, FSB-USTHB.

9 H 30 Antidiabetic and antioxidant effect of aloin in streptozotocin-induced diabetic rats.

Kandouli C., Khelifi-Touhami F., Benlatreche C., Leulmi Z, Constantine.

9 H 40 Variation de l’Homocystéine et du Génotype C677T de la Méthylénetétrahydrofolate Réductase chez

l’Hypertendu. Otmane A., Makhelouf M., Bouamrane F., Zenati A, CHU de Bab El Oued.

9 H 50 Genetic Polymorphisms of N-Acetyltransférase 2 and Cardiovascular Disease

Khelil M, Djerdjouri B. et Tayebi B., LBCM, FSB-USTHB.

10 H 10 Description des Chromosomes de l’Outarde houbara Chlamydotis undulata undulata et Cartographie

Chromosomique Comparée: Première Etape de l’Analyse du Génome. Mahiddine L., Belhamra M.,

Boucekkine W., Ladjali-Mohammedi K. LBCM, FSB-USTHB, Centre Cynégétique de Zéralda,

Centre de Recherche Scientifique et Technique sur les Régions Arides, Université de Biskra, Direction

Générale des Forêts

10 H 20 Débat et Pause Café

SIXIEME SEANCE

Session Microbiologie-Biotechnologie

Modérateurs : Hacene H., Messai Y., Oussedik-Oumehdi H.

10 H 25 Etude moléculaire de la résistance d’Enterobacter sp aux céphalosporines à large spectre et aux

quinolones dans les hôpitaux d’Alger. Iabadene H., Messai Y., Allouache S., Verdet C., Arlet G et

Bakour R., LBCM, FSB-USTHB.

10 H 35 Gravité des mycobactérioses chez les patients immunodéprimés.

Nateche F, Lafoz C, Baraka S, Samper S et Khaled S, LBCM, FSB-USTHB.

10 H 35 Mise en évidence et essai de Caractérisation de molécules antifongique chez Bacillus thuringiensis.

Abderrahmani A., Nateche-Metiaz F., Hacene H. et Jacques P., LBCM, FSB-USTHB.

10 H 45 Etude phénotypique et génotypique de la virulence de souches hospitalières de Klebsiella pneumoniae.

Aissani R., Messai Y., Iabadene H., Alouache S., Arlet G.et Bakour R., LBCM, FSB-USTHB.

11 H 55 Débat


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SEPTIEME SEANCE

Session : Posters (P16 – P44)

Modérateurs : Benmalek Y., Natèche F., Oussedik-Oumehdi H.

12 H 15 POSTERS (Biochimie-Biotechnologie /Microbiologie-Biotechnologie)

13 H 00 Pause Déjeuner

HUITIEME SEANCE

Session : Microbiologie-Biotechnologie (suite)

Modérateurs : Ladjali-Mohammedi K., Nateche F., Othmani K.

14 H 00 Production d’esters d’alkyle d’acides gras par bioconversion microbienne d’une huile végétale. Z.

Hachaichi-Sadouk, A. Tazerouti, H. Hacene, LBCM-FSB, USTHB.

14 H 10 Profil de résistance aux métaux lourds chez Chryseobacterium solincola sp, nov.

Benmalek Y, Nateche-Metiaz F, Hachani B, Hambli A, Fardeau M-L et Hacene H.

LBCM, FSB-USTHB.

14 H 20 Influence des apports anthropiques sur l’évolution génétique des bactéries en milieu marin : cas de la

résistance aux antibiotiques dans les eaux portuaires d’Alger.

Alouache S., Anssour L., Messai Y., Iabadene H. et Bakour R., LBCM, FSB-USTHB.

14 H 30 Extraction et essai de caractérisation des substances antimicrobiennes produites par une souche

d’actinomycète halophile modérée. Djinni I., Souagui S., Kecha M. et Benallaoua S, Béjaia.

14 H 40 Débat

NEUVIEME SEANCE

Session: ATELIER

Modérateurs : Boudrahem N., Adi-Bessalem S., Aouf A. 15 H 00 Welcome to high definition genomics: Aouatef Ait- Lounis, Faculty of Biological sciences, USTHB,

Algeria

Introduction à la bio-informatique : Mesbab-Amroun Hemida, LBCM, FSB-USTHB

TABLES RONDES

16 H 00- 16 H 30 Table ronde 1

Débat autour des questions de l’heure, les progrès et les perspectives des grands thèmes de la

Biologie Cellulaire et Moléculaire et leurs implications dans les Biotechnologies en rapport

avec la santé Humaine.

16 H 30 - 17 H 00 Table Ronde 2

Réflexion autour de la création d’une Société Algérienne de Biochimie-Immunologie


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RESUMES DES COMMUNICATIONS


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CONFERENCES PLENIERES


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Application de la Nanotechnologie dans les traitements de l’arthrite rhumatoïde

Dr Mohamed BENDERDOUR Département de Pharmacologie, Université de Médecine, Montréal, Canada.

ABSTRACT

The musculoskeletal disorders such as rheumatoid arthritis (RA) and osteoarthritis (OA) are leading worldwide causes

of long-term function and work disability in both developed and developing countries. It exits conventional RA

treatment strategies. However, new forms of therapy such as biological therapy and gene therapy have been shown

initial promise. Biological therapy of RA is specially engineered medication which blocks the effects of pro-

inflammatory factors such as tumour necrosis factor-alpha (TNF) and interleukin 1 beta (IL-1). One example of RA

biological therapy is by using recombinant interleukin-1 receptor antagonist (IL-1Ra). But biological treatments are

costly, inconvenient, and only partially effective in many patients. Gene therapy offers a solution to controlled,

targeted and specific delivery of genetic material (DNA and RNA) to targeted cells, leading to treatments that are less

invasive, more effective and less expensive than existing modalities. Gene therapy with IL-1Ra which was effective in

reducing joint destruction in experimental RA models and clinical trials is an alternative strategy in arthritis.

Additional approaches include the use of siRNA to knock down pro inflammatory factor-TNFα. The gene transfer can

occur through two delivery systems: viral mediated or non-viral vectors. Viruses are obvious first choices as gene

delivery vehicles because they transfer their own genetic material and therapeutic genes very efficiently to the cells

they infect. Unfortunately, certain viral vectors (for example, adenoviruses) can elicit a robust cellular immune

response against viral and some transgenic proteins. Non-viral gene transfer systems offer several potential advantages

over virus vectors. They are non-infectious, relatively non immunogenic, have low acute toxicity, can accommodate

large DNA plasmids or RNA, and may be produced on a large scale. The main drawback with non-viral vector as a

gene carrier is its typically low transfection efficiency (e.g. chitosan) and high toxicity (e.g. polyethylenimine [PEI]).

One of our strategies to improve transfection rate is to take advantage of the passive diffusion of small size

nanoparticles through the nuclear pore. Another strategy for improving transfection efficiency is to take advantage of

the mechanism of folate uptake by cells to promote targeting and internalization.


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Anticorps recombinant: Du gène au médicament anti-thrombotique

Philippe BILLIALD1, Julien MUZARD

1,2, Muhammad ZAHID

1, Maxime BOUABDELLI

2, Martine

JANDROT-PERRUS2

1Université Paris-Sud 11, Faculté de Pharmacie et Muséum national d'Histoire naturelle, Paris (F)

2INSERM U698, Hôpital Bichat, Paris (F)

RESUME

Le contact des plaquettes avec la surface d'une lésion vasculaire et leur agrégation est un processus essentiel

pour la formation d'un thrombus stable dans des conditions de flux artériel, en particulier dans les artères

sténosées alors que dans les conditions de flux veineux, la coagulation est plus importante. Ce processus est

complexe et, mal contrôlé, il peut conduire à la formation d'un thrombus occlusif à l'origine d'accidents

ischémiques aigus, infarctus et accidents vasculaires cérébraux. L'association thrombose-remodelage

vasculaire est également responsable de lésions ischémiques chroniques: angor, ischémie des membres

inférieurs.

Les drogues antiplaquettaires classiquement utilisées agissent sur des étapes tardives de la formation du

thrombus en induisant parfois des effets secondaires graves de type saignement et déplétion plaquettaire.

Dans ce contexte, il serait intéressant de disposer de molécules antithrombotiques agissant sur une étape

précoce du processus. Ainsi, la glycoprotéine plaquettaire VI (GPVI), impliquée dans l'adhésion des

plaquettes sanguines à la matrice extracellulaire lésée et leur activation pourrait être une cible de choix.

Récemment, nous avons développé un fragment d'anticorps recombinant de haute affinité pour GPVI. Ce

fragment d'anticorps murin (mscFv) inhibe la liaison de GPVI au collagène ainsi que l'agrégation des

plaquettes sanguines induite par le collagène à la fois dans des conditions statiques et de flux artériel. Ce

scFv a ensuite été humanisé pour en réduire l'immunogénicité et plusieurs constructions ont été évaluées.

L'une d'entre elles conserve intactes les propriétés fonctionnelles de l'anticorps parentale. In vitro, elle inhibe

l'activation des plaquettes et leur agrégation induite par le collagène. La méthode employée est simple,

efficace et transférable à d'autres anticorps à potentiel thérapeutique.


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TRANSCRIPTIONAL EFFECTS OF DELIVERY SYSTEMS: THE EFFECT OF DENDRIMER

ARCHITECTURE ON EGFR mRNA EXPRESSION AND ON siRNA-MEDIATED GENE

SILENCING ACTIVITY

Mustapha BENBOUBETRA1,2

Andrew J. HOLLINS2, Yadi OMIDI

2,3 and Saghir AKHTAR

2,4

1Laboratory of Applied Biochemistry, Faculty of Sciences, University of Sétif, Algeria.

2Centre for Genome-based Therapeutics, Welsh School of Pharmacy, Cardiff University, Cardiff, UK;

3Department of Pharmaceutics, Tabriz University of Medical Sciences, Tabriz, Iran

4Department of Pharmacology and Toxicology, Faculty of Medicine, Kuwait University, Safat, Kuwait

ABSTRACT

RNA interference (RNAi) is an evolutionary conserved process for the regulation of gene expression. In

mammalian cells, RNAi-induced via short (21-23nt) duplexes of RNA, termed small interfering RNA

(siRNA), can elicit highly specific RNAi-mediated gene silencing providing the antisense strand of the

duplex is incorporated into a multi-protein RNA-induced silencing complex complex (RISC). Subsequent

hybridization with the targeted mRNA followed by its cleavage by argonaute-2, the endonuclease present in

RISC, leads to inhibition of target gene expression in vitro and in vivo. RNAi technology is being widely

used in studies of gene function, drug target validation as well as being explored for potential therapeutic use

in the clinic. Synthetic siRNA duplexes are polyanionic macromolecules that do not readily enter cells and

typically require the use of a delivery vector for effective gene silencing in cells. Choice of delivery systems

is usually made on its ability to enhance cellular uptake of siRNA. Here, we show that separate from their

effects on cell uptake, delivery systems can also exert changes in target gene expression that can be

exploited to significantly enhance siRNA potency. Here, we show that separate from their effects on cell uptake,

delivery systems can also exert changes in target gene.

Corresponding author:

E-mail: [email protected]



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COMMUNICATIONS ORALES


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SESSION: DIAGNOSTIC-PRONOSTIC-BIOTECHNOLOGE


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Optimisation d’un Test d’Immuno-Diagnostic dans la Prise en Charge des patients

envenimés

Djelila HAMMOUDI-TRIKI, Amina MENDIL, Sonia ADI-BESSALEM, Sassia SAMI-MERAH,

Fatima LARABA-DJEBARI

Laboratoire de Biologie Cellulaire et Moléculaire, Faculté des Sciences Biologiques, Université des Sciences et de la Technologie

« Houari Boumédienne » USTHB, Bab Ezzouar, Alger, Algérie et Laboratoire de Recherche et de Développement sur les Venins,

Institut Pasteur d’Algérie, Alger, Algérie.

E-mail : [email protected] - Fax: 00213 21 91 72 21

RESUME

L’envenimation scorpionique est une pathologie multifactorielle qui nécessite une prise en charge

rapide des personnes envenimées. La mise au point d’un test d’immunodiagnostic spécifique de type ELISA

sandwich permet 1) de doser le venin dans les sérums de patients envenimés, 2) d’évaluer une corrélation

avec la gravité de l’envenimation et 3) d’observer l’évolution de la concentration du venin.

Dans ce contexte, des anticorps sous forme de fragments F(ab’)2 spécifiques à la fraction toxique du

venin de scorpion sont purifiés par immunoaffinité et utilisés comme un marqueur de diagnostic dans les

liquides biologiques des patients. Un test ELISA de type sandwich, fiable, reproductible et sensible a été mis

au point au laboratoire pour le dosage des composants toxiques du venin dans les fluides biologiques. Une

étude rétrospective portant sur l’analyse clinique et informative de 182 dossiers de patients avec collecte de

leurs échantillons sériques a permis de classer les patients en deux grades cliniques: un grade mineur (grade

I) et un grade modéré (grade II). La détermination des concentrations sériques du venin à l’aide de ce test a

permis d’établir une corrélation étroite entre ces concentrations et les grades cliniques définis selon les

symptômes observés. Les patients présentant un taux élevé de venin sérique, sont les plus sévèrement

affectés.

La mise en place de ce test au chevet du patient devrait être exécutée dans les plus brefs délais car

cette pathologie accidentelle est une urgence médicale. La validation d’un test ELISA rapide pourrait être

une alternative innovante pour une prise en charge rapide. Des mises au point de ce test sont entreprises par

notre équipe afin de le rendre le plus rapide possible afin de permettre une utilisation plus rationnelle des

thérapeutiques et moins empirique.

Mots clés : Immuno-Diagnostic, Envenimation, Venin, Anticorps, ELISA, Gradation, thérapie.



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Génétique des affections neuromusculaires fréquentes en Algérie.

Analyse moléculaire de plus d’un millier de familles.

Benhassine, T.1, Hamadouche, T.

2, Tazir, M.

3, Chaouch, M.

4, Makri, S.

5, Grid, D.

6, Lévy, N.

7, De Sandre-

Giovannoli, A.7, Delague, V.

7, LeGuern, E.

8, Brice, A.

8, Koenig, M.

9, Moreira, M.

9, Vallat, J.M.

10

1 Laboratoire de Biologie Cellulaire et Moléculaire, F.S.B., U.S.T.H.B., Alger,

2 Laboratoire de Biologie Moléculaire, F.S.,

U.M.B.B., Boumerdes, 3 Service de Neurologie, C.H.U. Alger Centre, Alger,

4 Service de Neurologie, C.H.U. Ben Aknoun,

Alger, 5 Service de Neurologie, E.H.S. Ali Aït-Idir, Alger,

6 Généthon, Paris,

7 Inserm u_910, Marseille,

8 Inserm u_679, Paris,

9

I.G.B.M.C., Strasbourg, 10

C.H.U.R. Limoges, Limoges

RESUME

Dans le cadre de notre étude, près d’un millier de familles atteintes d’affections neuromusculaires (atrophies

musculaires spinales, neuropathies héréditaires sensitivo-motrices, dystrophies musculaires progressives, ataxies à

transmission récessive, ...) ont été explorées au plan moléculaire, avec pour finalité l’instauration et la mise en place

d’un diagnostic génétique précis in situ en vue de répondre aux attentes des cliniciens et des familles demandeuses.

Le choix de ces maladies héréditaires était motivé par leur forte prévalence dans notre pays, posant ainsi un grave

problème de santé publique, mais également en vue de collaborer à l’effort international visant à clarifier la nosologie

de ces affections.

La collaboration multidisciplinaire engageant un réseau de généticiens, cliniciens et anatomopathologistes a ainsi

permis d’engranger un nombre impressionnant de données, notamment l’identification de nouveaux loci/gènes

responsables de nouvelles formes de ces affections neuromusculaires, mais également la caractérisation de nouvelles

altérations mutationnelles, parfois spécifiques à notre pays, avec tout ce que cela entraîne en terme d’épidémiologie

génétique et de corrélation phénotype-génotype.

Les données obtenues ont ainsi permis de prendre une sorte de cliché photographique des ces maladies héréditaires

dans notre pays, seul garant de la mise en place d’une approche de criblage moléculaire rationnelle et adaptée au

contexte de consanguinité y prévalant, et ainsi de poser les jalons d’une meilleure prise en charge de ces pathologies

sur un plan génétique.

Mots-clés : Maladies neuromusculaires, Criblage moléculaire, Diagnostic génétique


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DIAGNOSTIC MOLECULAIRE DE L’HEMOGLOBINOSE H EN ALGERIE

Hamida Mesbah-Amroun ab

; Fatiha Rouabhi c; Rolande Ducrocq

d; Jacques Elion

be

aUniversité des Sciences et de la Technologie Houari Boumedi ne (USTHB), Faculté des Sciences Biologiques Alger, Algérie.

bInserm U763, Hôpital Robert Debr , Paris, France.

cCentre de Transfusions Sanguine, Hôpital Mustapha-Bacha, Algiers, Algeria.

dAP-HP, Département de Génétique, Hôpital Robert Debré, Paris, France

eUniversité Paris Diderot - Paris 7, Faculté de Médecine, Paris, France

RESUME

L’hémoglobinose H (Hbose H) est un syndrome thalassémique, présentant une anémie hémolytique

caractérisée par la présence d’une hémoglobine anormale, l’hémoglobine H (β4). Le déterminisme génétique

de l’ Hbose H est connu : c’est une α-thalassémie correspondant à la délétion/inactivation de trois gènes α

par locus diploïde (αα/αα).

La caractérisation génotypique a été réalisée chez 19 individus répartis sur 6 familles différentes, comportant

chacune au moins un propositus (Hbose H).

Dix mutations méditerranéennes (délétionnelles et non délétionnelles) ont été recherchées. Cette recherche

ciblée basée sur l’utilisation des techniques de Southern, PCR (GAP-PCR, PCR-RFLP) et séquençage direct,

nous a permit d’identifier 5 génotypes Hbose H différents, preuve d’une hétérogénéité génétique.

Nos résultats montrent que l’utilisation de la technique de PCR (GAP-PCR) couplée à l’utilisation des

enzymes de restriction (PCR-RFLP) comme stratégie de dépistage suffit pour identifier les mutations α-

thalassémiques retrouvées dans notre échantillon.

L’intégration de ces techniques dans les stratégies de dépistage en milieu clinique contribuera sans aucun

doute à l’amélioration du diagnostic des α-thalassémies et des autres hémoglobinopathies associées (β-

thalassémies, drépanocytose).


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BRCA1 and BRCA2 mutations screening in Algerian patients with Hereditary Breast

Cancer

Farid Cherbal1

, Dounia Amet Errahmane Houamel1, Nadjet Salhi

1, Anita Chikh

1, Karima Ait Hami

1,

Lamia Talaoubrid, Karima Akli1, Ibtissem Derouiche

1, Rabah Bakour

1, Traki Benhassine

1, Yamina Messai

1,

Ouardia Kareb1, Lydia Igoudjilene

1, Saida Adane

2, Kada Boualga

3, Ahmed Cherifi

4, Abdelaziz Melboucy

5,

Salim Bahayou6, Veronica Sciretta

7, Chantal Souverain

7, Bruno Pardo

7, Gaelle Benais-Pont

7 and Philippe

Maillet7.

1Unit of Genetics, LMCB, FBS, University of Sciences and Technology Houari Boumediene, Algiers, Algeria,

2Central Hospital

of Algiers, Algeria, 3Anti Cancer Center, Blida, Algeria,

4Senology Clinic, Ouargla, Algeria,

5Senology Clinic "Les Amandiers"

Mekla, Tizi Ouzou, Algeria, 6Clinic of Radiology, Ghardaia, Algeria,

7Laboratory of Molecular Oncology, Department of

Genetics and Laboratory Medicine, Geneva University Hospitals, Geneva, Switzerland.

Corresponding author: Farid Cherbal, E-mail:[email protected], work phone: 21321247950/64 extension 911, Fax: 21321247217

Abstract:

Background: Breast cancer is the leading cause of cancer death in women in Algeria. The

contribution of BRCA1 and BRCA2 mutations to hereditary breast cancer in Algerian population is largely

unknown. Here, we describe analysis of BRCA1 and BRCA2 genes in 45 individuals from 37 families from

an Algerian cohort with a personal and family history suggestive of genetic predisposition to breast cancer.

Methods: The approach used is based on BRCA1 and BRCA2 mutations screening by High-Resolution

Melting (HRM) curve analysis followed by direct sequencing.

Results: Three distinct pathogenic mutations, c.83_84delTG/ p.Leu28ArgfsX12 c.181T>G/Cys61Gly,

c.798_799delTT/p.Ser267LysfsX19 were detected in BRCA1 gene. Moreover 16 unclassified variants and

polymorphisms were detected in BRCA1 gene (6 described for the first time).

Two pathogenic mutations, c.1310_1313delAAGA/p.Lys437IlefsX22 and

c.5722_5723delCT/p.Leu1908ArgfsX2 and 37 unclassified variants and polymorphisms (15 never described

before) were identified in BRCA2 gene.

Conclusions: For the first time, we used HRM analysis to identify BRCA1 and BRCA2 mutations in

Algerian patients with a personal and family history suggestive of genetic predisposition to breast cancer.

The implications of these new findings in regard to genetic testing and counseling are substantial for

the

Algerian population.

Keywords Algeria. BRCA1. BRCA2. Hereditary breast cancer. Mutation analysis. Unknown Variants



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Identification des gènes de prédisposition aux cancers colorectaux héréditaires non

polyposiques, HNPCC( (Syndrome de Lynch) et mise en evidence du statut MSI

(MicroSatellite Instability).

K. Berkane 1-2

et K.Bouzid2

1 Faculté des Sciences Biologiques, USTHB, Alger. 2- Laboratoire d’Oncologie Moléculaire Fondamentale et Appliqué, Service

d’Oncologie Médicale (LOMFA), CPMC, Alger.

RESUME

La plupart des cancers (90 à95 %) surviennent dans un contexte sporadique, sans cause apparente alors que

d’autres apparaissent dans un contexte familial (5 à 10%). Dans ce contexte familial, une prédisposition

héréditaire est retrouvée. Avec de fortes traditions d’endogamie et de consanguinité, la fréquence des

cancers familiaux serait plus élevée dans les familles Algériennes que dans les familles occidentales. Les

avancées récentes de la Biologie Moléculaire permettent l’identification des personnes porteuses d’une

prédisposition héréditaire à certains cancers. L’identification des gènes de prédisposition aux cancers

colorectaux, permet de réaliser un diagnostic précoce (diagnostic moléculaire) et dépistage ciblé d’une

population à très haut risque de développer un cancer et leur assure une prise en charge optimale selon les

recommandations internationales de surveillance préconisées par l’Organisation Mondiale de la Sante

(OMS) et l’Union Internationale contre le Cancer (UICC). De Octobre 2001 a Janvier 2005, 76 patients

atteints de cancer colorectal et répondant aux critères d’Amsterdam II (critères de sélection des cancers

familiaux) ou cas index ont été admis au service d’Oncologie Médicale pour prise en charge thérapeutique ;

ces cas index subissent un prélèvement sanguin pour les recherches mutationnelles au niveau des gènes h

MLH1 et h MSH2 le plus souvent impliqués dans le syndrome. Une mutation au niveau du gène h MLH1 a

été retrouvée (exon 13, codon 516) dans 80% des cas étudiés. Le statut MSI a été déterminé chez tous les

patients.


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ETUDE DE QUELQUES BIOMARQUEURS DU SYNDROME NEPHROTIQUE

1,2BENHAMDI Asma,

1 MECHAKRA Aicha,

2CHERITI Nadjia.

1Laboratoire de Biologie et Environnement, Université Mentouri, Constantine ;

2Laboratoire de Biochimie, Clinique rénale, Daksi, Constantine. Email : [email protected]

Résumé

Le syndrome néphrotique est la néphropathie glomérulaire la plus fréquente dans le monde, surtout chez les

enfants. Il est lié à une augmentation de la perméabilité glomérulaire qui est à l’origine de plusieurs

complications et se caractérise par une protéinurie, une hypoprotidémie et une hyperlipidémie.

Dans ce travail, nous avons étudié les principaux biomarqueurs de ce syndrome (protides totaux, albumine,

transferrine, IgG, cholestérol, triglycérides, HDL et LDL).

La protéinurie dosée par méthode colorimétrique est observée chez l’ensemble des malades échantillons.

La séparation des protéines sériques des patients de différents âges par électrophorèse sur acétate de

cellulose montre des modifications de la répartition des fractions. Les protéines sériques spécifiques

dosées par des méthodes colorimétriques et immunoturbidimétriques révèlent une diminution de leurs

concentrations. Les lipides et lipoprotéines dosés par des méthodes enzymatiques et d’immunoinhibition

traduisent une augmentation significative de leurs concentrations.

L’étude de ces biomarqueurs prouve leur intérêt dans le diagnostic du syndrome néphrotique et montre leurs

rôles dans la survenue des complications de la maladie.

Mots clés : Biomarqueurs, syndrome néphrotique, électrophorèse, albumine, transferrine, IgG, lipides.


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Association entre le polymorphisme du gène de l’Apolipoprteine E, le profile lipidique

sérique et la maladie d’Alzheimer.

AMARI HANANE, OULDJAOUI A, SIFI K, SIFI Y, KOHIL K, HAMRI A, ABADI N.

Les objectifs principaux du travail :

1- déterminer les fréquences allélique et génotypique du gène de l’apoE dans la population nord constantinoise.

2- Etudier l’association entre ce polymorphisme et la maladie d’Alzheimer sur notre population

3- Etudier l’association entre le profile lipidique sérique (taux de cholestérol total, HDL, LDL, et triglycérides) et

la maladie d’Alzheimer.

RESUME

La maladie d’Alzheimer est la première cause des démences du sujet âgé, c’est une maladie neurodégénérative

irréversible, son expression est le résultat de multiples facteurs génétiques et environnementaux. L’apolipoprotéine E

constituée de 299 AA joue un rôle physiologique majeur dans la régulation du métabolisme lipidique et l’homéostasie

des lipoprotéines, et joue aussi un rôle important dans la réparation neuronale.

De nombreuses équipes ont étudié l’association entre le polymorphisme de l’apoE et risque de la maladie

d’Alzheimer, et l’allèle e4 a était identifié comme un facteur de susceptibilité génétique pour la MA dans divers

groupes ethniques. L’allèle ε 4 augmente le risque de la MA et baisse considérablement l’âge de début de la maladie,

et il existe une relation entre le nombre d’allèles 4 et l’incidence de la MA ; le risque est plus élevé pour les sujets

porteurs de deux allèles ε 4 que pour les porteurs d'un seul allèle indiquant un effet-dose associé à cet allèle. Mais la

contribution de l’allèle ε 4 dans le développement de la MA, n’est pas le même dans tous les groupes ethniques à

travers le monde.

Dans Cette étude on a examiné l’association entre le polymorphisme du gène de l’apoE, le profil lipidique

sérique et la MA chez des malades, et des sujets contrôles habitants la région nord-constantinoise.

Population et méthodes :

Notre étude cas témoins a porté sur 114 sujets dont 60 témoins (30 Femmes et 30 Hommes avec une moyenne

d’âge de 67,17 ± 10,84 ans ) et 54 patients (25 Femmes et 29 Hommes avec une moyenne d’âge de 73,47 ± 7,61)

remplissant les critères du diagnostic de M.A probable selon les critères du DSM IV (Diagnostic and statistical

Manual of Mental Disorders Fourth Edition), et ceux de la NINCDS-ADRDA (National Institute of Neurological and

Communicative Disorders and Stroke-Alzheimer Disease and Related Disorders Association)

Les malades ont été recrutés au niveau du service de neurologie CHU de Constantine et en consultation

privée (Skikda, Constantine). Les malades sont exclus s’ils présentent une autre forme de démence voir une démence

vasculaire ou tumorale et les témoins sont choisis parmi des sujets sains volontaires des deux sexes présentant un âge

supérieur à 60 ans, ayant été recruté au niveau des maisons de retraite de Constantine (Hamma Bouziane) et de

Skikda. Tous les sujets (malades et témoins) ont été choisis sur la base de leurs histoires médicales et après examens

physique. Leurs fonctions cognitives sont évaluées par le Mini Mental State Examination (MMSE).

Méthodes :


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Le sang veineux est prélevé après un jeûne d'au moins 10 heures. Nous avons recueilli 10 mL sur EDTA pour

l'étude moléculaire et 5 mL sur héparinate de lithium pour le bilan biochimique. Le cholestérol total le cholestérol-

LDL et HDL et les triglycérides sont dosés en utilisant les procédures enzymatiques standards sur l'automate

(technicon RA et Opera systems N° de ref.T01-2801-56). Pour le génotypage de l'apo E, l'ADN est extrait à partir des

leucocytes selon la technique de Miller et al. , et l'exon 4 du gène de l'apo E est amplifié par PCR (Taq DNA

polymérase). Nous avons utilisé les mêmes conditions opératoires et les mêmes amorces (OD 5’-ATG GCG CTG

AGG CCG CGC TC-3’ ; (20pb) OG 5’-AAC AAC TGA CCC CGG TGG CG-3’ (20pb).) que celles décrites par

Tsai et al. . Les produits de PCR sont digérés par cinq unités de HhaI, puis les produits de RFLP sont séparés par

électrophorèse sur gel de polyacrylamide en présence de marqueurs de poids moléculaire. La détermination du

génotype de l'apo E est réalisée en comparant le profil de restriction des patients aux combinaisons de fragments

décrites par Hixson et Vernier.

Analyses statistiques :

Le traitement des données et l'analyse statistique sont réalisées par le logiciel Epi info version 6.0. Les

statistiques descriptives sont utilisées pour déterminer les caractéristiques de la population, et l'analyse de corrélation

pour établir la relation entre les différents paramètres. Par ailleurs, la comparaison des fréquences allèliques et

génotypiques entre malades et témoins est réalisée en utilisant le teste de χ2 et Fisher’s. Les odd ratios (OR)

représentants une mesure d'association épidémiologique entre les différents génotypes et la maladie sont calculées, le

Seuil de significativité statistique est retenue p <0.05.

Résultats

Nos résultats montrent que la fréquence allèlique de l’allèle ε 4 est significativement supérieurs chez les

malades que chez le groupe témoins (27,80% versus 12,3% ; p< 0.05), de plus les OR des sujets homozygotes et

hétérozygotes pour l’allèle e4 étaient de 2,24( [0,97-5,21] p<0.05) et 6,71([0,65-116] p<0.05) respectivement. Ces

données indiquent que l’allèle ε4 augmente le risque de la maladie d’Alzheimer, dans notre population d’une manière

dépendante de sa dose.

Les sujet MA présentaient des taux significativement supérieurs de cholestérol (1,75 ± 0,37 versus 1,22 ±

0,29*, p<0.05) et de C-LDL (1,10 ± 0,32 versus 1,91 ± 0,37*, p<0.05) mais seulement chez les hommes, et des taux

significativement inférieurs de C-HDL dans les deux sexes, hommes (0,44 ± 0,07 versus 0,42 ± 0,08*, p<0.05),

femmes (0,47 ± 0,08 versus 0,37 ± 0,08*, p<0.05). Ces résultats indiquent que les sujets porteurs de l’allèle ε4 avec

des taux élevés de cholestérol et de C-LDL, et des taux bas de C-HDL sont plus susceptibles de développer une

maladie d’Alzheimer.

Le lien entre marqueurs biologiques du métabolisme lipidique et risque de maladie d’Alzheimer est incertain

et demeure un sujet de controverse. Pendant les 15 dernières années, plusieurs études épidémiologiques suggère que

des taux élevé de cholestérol plasmatique peut contribuer dans la pathogenèse de la MA

Dans la présente étude, on a trouvé que le groupe MA avait des taux significativement inférieur de C-HDL, et

des taux supérieur de cholestérol totale et C-LDL, par rapport au groupe contrôle. Nos résultats concordent avec des

études récentes, comme celle de Hall et al, qui ont trouvé que des taux élevés de cholestérol et C-LDL étaient associés

a l’augmentation du risque de la MA dans la population africaine âgée de plus de 70ans indépendamment du

polymorphisme de l’apoE.

Conclusion :

En conclusion, l’allèle ε4 est associé à l’augmentation du risque de la maladie d’Alzheimer dans notre population

d’une manière dépendante de sa dose. En revanche le rôle protecteur de l’allèle ε2 dans la maladie d’Alzheimer n’est

pas évident et reste à démontrer. Les taux élevés de cholestérol et de C-LDL et des niveaux bas de C-HDL, semblent

également favoriser le développement de la MA dans la population nord constantinoise.

Mais L’Algérie avec sa diversité historique, géographique, culturelle et linguistique, présente une large diversité

génétique, ainsi, des études additionnelles avec de plus grands échantillons sont nécessaires pour clarifier la


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contribution réelle de l’APOE et du profil lipidique dans le développement de la maladie d’Alzheimer dans

différentes populations algériennes.

Nos résultats nous permettent de confirmer la suggestion selon laquelle l’allèle ε4 et le profil lipidique peuvent

être utilisés comme biomarqueurs de la maladie d’Alzheimer et considérés comme un complément au diagnostic

clinique de la MA chez les sujets déments, chez lesquels la découverte d'un allèle epsilon4 à une valeur prédictive

positive de 94 à 98 %.


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Rôle des cytokines et la NO-synthase dans les désordres immunitaires associés à de la

maladie d’Alzheimer : Impact sur l’immunosurveillance des patients

M Belkhelfa1., O Medjeber

1., H Rafa

1., S Bouaziz

1., Z Djeraba

1., A Lammali

1., K Abdelouahab

1., M

Abada-Bendib2., C Touil-Boukoffa

1.

1: Équipe Cytokine et NO Synthase; Immunité et Pathogénie, LBCM (FSB/USTHB). 2: Service de Neurologie/Hôpital de Bab El

Oued.

La maladie d’Alzheimer est une des pathologies neurodégénératives les plus fréquentes chez le sujet âgé.

Cependant, l’étiologie de cette maladie n’est que partiellement connue. Les principales caractéristiques

histopathologiques ciblent l’installation des plaques séniles extracellulaires et la dégénérescence

neurofibrillaire associées à une importante perte neuronale. Elle se caractérise par trois phases selon

l’évolution et la sévérité des symptômes.

Les objectifs de notre travail portent sur le rôle des cytokines (IFNγ, TNFα, IL-13, IL-6 et IL-17) et du

monoxyde d’azote dans les désordres immunitaire associés à l’évolution de la pathologie en vue de cibler un

bio marqueur de phase de cette pathologie. Cette étude est réalisée sur des patients suivis au service de

Neurologie/Hôpital de Bab El Oued.

Nos résultats suggèrent que l’inflammation périphérique est une composante active au niveau cérébral se

caractérisant notamment par une expression accrue d’une cytokine marqueur de la voie Th1, l’IFNγ, dont

l’action est potentialisée par le TNFα, en particulier dans la phase précoce de la maladie. Cette augmentation

est en étroite relation avec la production substantielle du NO, mettant en jeu l’induction de la NOS2. A

l’inverse, la phase intermédiaire caractérisée par un état pseudo-stationnaire des malades indique une action

significative de l’IL13 dans la régulation négative de la NOS2. La phase avancée est caractérisée par une

corrélation positive entre la production importante du NO, l’action de l’IL6 et une cytokine de la voie Th17

(IL17).

Ces résultats pourraient ainsi contribuer dans le diagnostic précoce et l’immunosurveillance des

patients atteints de la maladie d’Alzheimer.

Mots clés : cytokine, Alzheimer, NO-Synthase, démence, neuroinflammation


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Mise en évidence des biomarqueurs du diabète dans la salive par les techniques

d’électrophorèse

Bellil Ines, Khelifi Douadi

Laboratoire de Génétique Biochimie et Biotechnologie Végétale, Département de Biochimie Microbiologie, Faculté des Sciences

de la Nature et de la Vie, Université Mentouri Constantine

Résumé

Parmi les marqueurs moléculaires, les marqueurs protéiques sont les premiers à avoir été utilisés. Ils sont le

produit direct des gènes. Plus d’un 1/3 de protéines de la salive se trouvent dans le sang et sont similaires aux

protéines sanguines et dont le rôle a déjà été établi. Une majorité de ces protéines salivaires font partie du système

central d’alerte du corps face aux maladies et représentent de ce fait un bon outil diagnostic. Pour cela, une population

de patients diabétiques de type I (n = 4) âgés de 16 à 38 et de type II (n = 8) âgés de 51 à 81 dont la pathologie datait

plus de 5 ans avec une glycémie à jeun supérieure à 1.26g/l et présentant une bonne hygiène buccale a été retenue pour

le prélèvement de la salive. Cette population a été comparée à un sujet sain sans pathologies connues. Les protéines

salivaires ont été extraites et séparées par la technique d’électrophorèse mono et bidimensionnelle sur gel de

polyacrylamide. L’électrophorèse monodimensionnelle pour les protéines réduites et non réduites dans des conditions

naturantes et dénaturantes a fourni des diagrammes protéiques clairs et reproductibles mais elle ne nous pas permis de

diagnostiquer le diabète par la détection qualitative ou quantitative d’un biomarqueur. L’utilisation de la

bidimensionnelle PAGE 8.8 / SDS- PAGE a permis de mettre en évidence la présence de 6 spots chez le diabétique

type II et qui sont absents chez le témoin. Aussi une nette différence a été observée dans les spots communs qui sont

surexprimés chez le patient diabétique. Ces différences d’expression sont autant de facteurs d’intérêt (biomarqueur)

pour l’analyse de l’influence du diabète sur la composition en protéines salivaires, celles-ci étant susceptibles d’être

spécifiquement exprimées ou inhibées au cours de cette pathologie. Ces protéines salivaires variantes pouvant être

secondairement caractérisées par spectroscopie de masse et étudiées, afin de déterminer si elles sont vraiment

susceptibles d’être considérées comme marqueurs du diabète. Cette mise en évidence de spots spécifiques et /ou

variants au cours d’une pathologie telle que le diabète, ouvre des champs d’investigation nouveaux tant dans le

domaine du diagnostic (mise en évidence éventuelle de marqueurs) que dans le suivi de ces pathologies.

Mots clés : Biomarqueur, diabète, salive, électrophorèse, diagnostic


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SESSION: BIOTHERAPIE


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Les Biomolécules de Venins : Outils de Diagnostic et de Thérapie dans l’Hémostase

Habiba OUSSEDIK-OUMEHDI., Fatah CHERIFI. Amel SACI, et Fatima LARABA-DJEBARI.

Laboratoire de Biologie Cellulaire et Moléculaire, Faculté des Sciences Biologiques, USTHB Bab Ezzouar, Alger, Algérie.

Laboratoire de Recherche et Développement sur les Venins, Institut Pasteur d’Algérie.

E-mail : [email protected] - Fax: 00213 21 91 72 21

RESUME

Les constituants des venins de Viperidae renferment deux catégories de composants d’action

antagoniste, agissant par activation ou inhibition des facteurs de coagulation et de l’agrégation plaquettaire.

Ces protéinases, capables de cliver les facteurs de coagulation avec une haute spécificité, sont réparties en

sérine protéinases et en métalloprotéinases. Les biomolécules des venins de serpents présentent un grand

intérêt aussi bien fondamental, diagnostique que thérapeutique. Ils constituent de précieux outils pour la

compréhension des différents mécanismes de l’hémostase et sont également utilisés dans le diagnostic des

dysfonctionnements liés aux facteurs de coagulation à l’instar des enzymes de venins à activité « thrombin-

like » (SVTLE) qui sont utilisées pour le dépistage des fibrinogénopathies. Les venins sont également

utilisés en diagnostic pour l’analyse des différents facteurs de coagulation (facteurs V, VII, X, le facteur 3

plaquettaire, la protéine C et le facteur de Will brand). Sur le plan thérapeutique, les SVLTE sont largement

utilisés comme traitements anticoagulants. Dans cette optique, la purification de plusieurs molécules des

venins de Cerastes cerastes et de Vipera lebetina a été effectuée. Certaines des molécules purifiées agissent

sur l’hémostase, tel que la RP34, une sérine-protéinase de type thrombine, constituée de deux sous-unités de

48.5 kDa. Une autre sérine-protéinase de type thrombine a été purifiée. L’afaâcytine, d’un poids moléculaire

de 40 kDa, présente des propriétés fibrinase et fibrinogènase. Elle active le facteur X et libère la

sérotonine en agissant sur l’agrégation plaquettaire. Une autre molécule de 70 kDa a été purifiée, et présente

une activité pro-coagulante, fibrinogénase.

Mots clefs : Venins ; Viperidae ; Biomolécules ; Hémostase ; Diagnostic ; Thérapie ; Thrombin-like.



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Perspectives Immunothérapeutiques et Vaccinales

dans les envenimations scorpioniques

Adi-Bessalem S., Boussag-Abib L., Mendil A, Hammoudi-Triki, D, Sami-Merah S., Billiald, P., et

Laraba-Djebari F.


« Houari Boumediene » EL Alia BP 32, 16111, Alger, Algérie

Laboratoire de - Recherche et de Développement sur les Venins, Institut Pasteur d’Algérie.

Muséum National d’Histoire Naturelle EA4105. 75005

E-mail: [email protected] Fax: 00213 21 33 60 77

RESUME

Classiquement l’immunothérapie consiste à administrer aux patients envenimés des anticorps

polyclonaux obtenus après hyper-immunisation des animaux. La toxicité élevée des toxines des venins de

scorpions constitue une difficulté majeure dans la préparation des immun-sérums et s’accompagne souvent

de détérioration de la santé des animaux producteurs.

Deux approches technologiques ont été envisagées dans notre équipe pour augmenter l'activité

spécifique des immun-sérums produits, réduire la toxicité de l'immunogène utilisé et réaliser des essais

d’immunoprotection chez un modèle expérimental.

La détoxification du venin ou de sa fraction toxique par irradiation gamma jusqu’à 20 DL50

constitue une des approches abordées pour aboutir à une meilleure prévention. Ces antigènes atténués

anavenin préservent leur pouvoir antigénique et immunogénique. Des essais de vaccination réalisée chez

l’animal préalablement immunisé avec ces antigènes détoxifiés montrent une protection de 100 % de

protection contre des doses létales de venin natif d’Aah.

La deuxième approche consiste à identifier des peptides synthétiques analogues à la toxine AaH II

après criblage d’une banque aléatoire de dodécapeptides. Utilisés comme antigènes dans un protocole

d’immunisation, ces peptides dépourvus de toxicité sont capables d’induire la production d’anticorps

spécifiques. L’immunoréactivité des anticorps vis à vis du venin d’Aah est confirmé par des tests

immunologiques et par résonance plasmonique de surface.

Ces approches d’immunoprotection pourraient être d’un apport certain dans l’immunothérapie mais surtout

dans la vaccinothérapie.

Mots clés : Venin, détoxification, peptide synthétique, Immunothérapie, Vaccinothérapie.



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Implication de la membrane lamellaire dans les stratégies d’échappement parasitaire et

la pathogenèse au cours de l’échinococcose humaine : Rôle anti-hydatique des Voies :

IFN-gamma/NOSynthase2

Amri Manel, Mezioug Dalila, Bouaziz Samia, Abdi Zaki-Sofiane & Touil-Boukoffa Chafia.

Equipe « Cytokines et NOSynthases », LBCM, FSB-USTHB, Alger.

RESUME

L’hydatidose causée par la forme larvaire du taenia Echinococcus granulosus est endémique en Algérie et

contraint à un traitement lourd essentiellement chirurgical. La survie du parasite est essentiellement due à la

présence de la couche externe du kyste hydatique : la membrane lamellaire. Cette dernière constitue une

barrière physique efficace vis à vis de la réponse immunitaire de l’hôte.

Dans notre étude, nous nous sommes intéressés à situer le rôle joué par la membrane lamellaire dans la

relation mise en place entre ce macroparasite et le système immunitaire de l’hôte. Nous avons évalué

l’implication de la membrane lamellaire dans la régulation de deux voies antagonistes Th1/iNOS et

Treg/Arginase au niveau des cultures de PBMC de sujets hydatiques. Parallèlement à cette étude, nous

avons également évalué l’effet de l’IFN-γ (marqueur Th1) et de l’IL-10 (marqueur Treg) sur la viabilité des

protoscolex (forme larvaire du parasite) en coculture avec les PBMC de sujets hydatiques (Amri et al.,

2007* & 2009**).

Nos résultats montrent que l’extrait de membrane lamellaire diminue la production d’IFN-γ/ NO. A

l’inverse, il augmente la production d’IL-10 et l’activité de l’arginase. Nos résultats montrent également que

l’IFN-γ possède une activité scolicide en coculture. A l’opposé, l’IL-10 semble réguler négativement

l’activité parasiticide des macrophages via l’inhibition de la production du NO.

L’ensemble de ces données suggère que la couche lamellaire joue un rôle essentiel dans les mécanismes

d’échappement mis en jeu par le parasite à travers l’inhibition des voies IFN-γ/iNOS et l’activation accrue

des voies Treg/Arginase. Nos résultats ouvrent des perspectives quant au choix d’une biomolécule

efficace dans la thérapie anti-hydatique.

* Amri M., Aït Aïssa S., Belguendouz H., Mezioug D. & Touil-Boukoffa C. In Vitro Antihydatic Action of Gamma Interferon

(IFN-γ) is Dependent on Nitric Oxide (NO) pathway. Journal of Interferon & Cytokine Research, 2007; 27(9): 781-787.

**Amri M., Mezioug D. & Touil-Boukoffa C. Involvement of IL-10 and IL-4 in evasion strategies of Echinococcus granulosus to

host immune response. Journal of European Cytokines network, 2009; 20(2): 83-86.


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Implication de l’IL-17, de l’IL-6, du TNF-α et de l’IL-10 dans les mécanismes de

l’immuno-modulation au cours des maladies inflammatoires chroniques de l’intestin :

Action potentielle thérapeutique de l’IL-10

Hayet Rafa 1, Houria Saoula

2, Amira F Boutaleb

2, Saida. Aftiss

2, M’hamed Nakmouche

2, Chafia

Touil-Boukoffa 1.

1: Equipe: Cytokines et NOSynthases, Laboratoire de Biologie Cellulaire et Moléculaire, Faculté des Sciences Biologiques,

USTHB, Alger. 2: Service de gastrœntérologie, CHU Maillot, Alger.

RESUME

Les maladies inflammatoires chroniques intestinales (MICI) sont des affections résultant de l’inflammation

chronique d’une partie de la paroi intestinale. Les déviations auto-immunes associées à ces pathologies sont la

résultante d’un déséquilibre des voies de régulation immunitaires. Le monoxyde d’azote (NO) joue un rôle

essentiel dans les réponses immunitaires et les réactions inflammatoires. Il est essentiellement synthétisé par la

NOS inductible (l’iNOS), enzyme induite sous l’effet de plusieurs cytokines. Dans le présent travail, nous nous

sommes intéressés à l’étude de la production du NO in vivo et ex vivo chez des patients atteints des MICI en

phase active. L’activité de l’iNOS a été déterminée au niveau des biopsies coliques provenant des patients

atteints les pathologies considérées. Cette étude a été complétée par l’étude de la modulation de l’iNOS au

niveau des cultures de PBMC par le TNF-α, l’IL-17, l’IL-6 et l’IL-10. Nous avons observé une corrélation

positive entre la production sérique de NO et l’activité de l’iNOS au niveau des biopsies coliques. Les résultats

obtenus montrent également une augmentation des taux de NO pour les deux catégories de patients après

stimulation des PBMC par l’IL-17, l’IL-6 et le TNF- α. A l’inverse, l’IL-10 a induit une diminution de la

production du NO. L’IL-17, l’IL-6 et le TNF-α semblent exercer des effets similaires dans l’induction de

l’iNOS au cours de ces deux pathologies. Notre étude souligne le rôle direct de NO dans l’immuno-

inflammation associée aux ulcérations coliques. L’IL-10 serait en faveur de l’utilisation thérapeutique de cette

molécule dans le traitement des patients atteints des MICI.

Mots clés : Maladies inflammatoires chroniques de l’intestin, IL-17, TNF-α, IL-6, IL-10, Monoxyde d’azote.


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LES ACTIVITES ANTI-RADICALAIRES D’UNE PLANTE MEDICINALE LOCALE

FRAXINUS ANGUSTIFOLIA (LE FRENE)

Laib yasmina et Atmani djebbar

Université de Bejaïa, Targa Ouzemour.

Les activités anti-radicalaires des extraits ; éthanolique, éthyle acétate, aqueux de l’éthyle acétate,

hexane, chloroforme et aqueux de chloroforme du Fraxinus angustifolia (feuilles et écorce) ont été étudiés

a l’aide de méthodes spectro photométriques in vitro. Leur teneur en phénols totaux et en flavonoïdes a été

également déterminée .Les résultats obtenus apportent que tous les extraits ont une forte activité

scavenger sur le radicale 1,1-diphényl-2-picryhydrazyl (DPPH) Avec un taux d’inhibition de 96.01% et

de91.74 pour les extraits aqueux de chloroforme écorce et feuilles respectivement et un taux de95.33% et

de 92.03 pour les 2 extraits éthanoliques, écorce et feuilles respectivement ( a 100ug /ml) de même pour le

peroxyde d’hydrogène(H2O2) l’inhibition été de 79.89% et 79.35% pour les 2 extraits éthyle acétate,82%

pour l’extrait aqueux de l’éthyle acétate des feuilles et 78% pour l’extrait hexane de l’écorce. Le radicale

hydroxyl (OH°) été généré avec le système EDTA-FeCL3. H2O2, et en présence du TBA comme révélateur

des produits de dégradation du désoxyribose(MDA), une faible capacité anti-hydroxyl été enregistrée pour

les extraits aqueux contrairement a leurs activités anti –DPPH et anti- H2O2 , les extraits éthanolique et

hexane des feuilles avaient des taux d’inhibitions respectifs de: 77.56%, 70% et 59.56%, 55.21 % pour les

extraits éthanolique et hexane de l’écorce. Une comparaison été faite entre les IC50 des extraits et celles des

standards (catéchine, acide gallique, acide ascorbique), une corrélation été effectuée entre la teneur en

phénols totaux et en flavonoïdes et entre les différentes activités anti radicalaires.

Mots clés : Fraxinus, DPPH, hydroxyl OH°, désoxyribose...


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Les éléments mobiles de type mariner issus des organismes des sources hydrothermales

océaniques : étude et perspectives d’utilisation en thérapie génique

Nassima Toumi1.2.3

, Sylvaine Renault3, Nathalie Casse

2, Elisabeth Pradier

2, Yves Bigot

3 et Marc

Laulier2.

[1] Université Cheikh Larbi Tébéssi , Route de constantine 12200 Tébéssa

[2] Laboratoire de Biologie et de Génétique Évolutive, E.A. 3565, Université du Maine, Avenue Olivier Messiaen, 72085 Le

Mans, France.

[3] Laboratoire d’étude des parasites génétiques (EA3868), Université François Rabelais, UFR de Sciences et Techniques, Parc de

Grandmont, Avenue monge 37200 Tours

Les éléments mobiles (transposons) sont des séquences d’ADN capables de se déplacer dans le génome. Ce

déplacement est généralement assuré par une protéine (transposase) codée par le transposon lui-même. Les

transposons sont actuellement étudiés comme outils de transgènèse et de mutagenèse en thérapie génique. Ils offrent

plusieurs avantages par rapports aux autres techniques de transfert de gène (taille de transgène, contrôle de

l’intégration du transgène, etc …).

Les transposons de type mariner sont ubiquiste chez les eucaryotes et ils ont une structure simple ce qui fait

d’eux des bons candidats en biotechnologie.

Au Laboratoire de Biologie et Génétique Evolutive (LBGE), nous travaillons sur des transposons de type

mariner issus des organismes des sources hydrothermales océaniques.

A l’heure actuelle le LBGE possèdent plus de 50 séquences de type mariner chez plusieurs espèces. Parmi ces

séquences, 5 ont un cadre de lecture ouvert (ORF) pour le gène de la transposase. Nous avons réalisé une étude de la

fonctionnalité de l’élément Alvcmar1 issu de l’annélide hydrothermal Alvinella caudata.

L’analyse in silico de cet élément révèle qu’il est capable de coder deux isoformes de la transposase. Une première

isoforme qui est constituée d’un ORF qui correspond à une transposase de 350 acides aminés ». La seconde isoforme

possède dans sa région N-teminale une extension de 30aa. Afin d’étudier l’activité de ces isoformes, les protéines

correspondantes ont été produites en bactérie. On a pu montrer, par la technique de gel retard, qu’elles reconnaissent et

se fixent spécifiquement aux ITR d’Alvcmar1. Cette technique a pu montrer également des événements de coupure

produits par ces transposases à différentes températures (4°C, 15°C, 30°C et 50°C). Parallèlement, des tests de

transposition en bactérie ont révélé une activité faible de ces deux isoformes.

Nos perspectives consistent à optimiser cet élément par mutagenèse dirigée afin d’obtenir un élément plus

performant qui peut être utilisé comme vecteur de transfert de gène.


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Apport des thérapies moléculaires ciblées dans la prise en charge des cancers

colorectaux métastiques . Expérience Algérienne

K. Berkane 1-2

M.Oukkal2, H.Mahfouf

2, N.Terki

3, R.Baba Ahmed

4 et K. Bouzid

2

1- Faculté des Sciences Biologiques, USTHB, 2- Service d’Oncologie Medicale, 3- Service d’Anatomie Pathologique, CPMC et

4- Service d’Anatomie Pathologique EHS Lamine Debaghine, BEO, Alger.

RESUME

Le cancer colorectal est une pathologie grave et pose un véritable problème de santé publique. L’incidence

est régulièrement croissante dans le monde. L’émergence des thérapies moléculaires ciblées (TMC) apporte

un réel espoir en terme de survie pour des patients où un plafond thérapeutique semblait être atteint et où le

pronostic a brève échéance était réservé. Ces TMC se révèlent ciblées à double titre : elles ciblent un

mécanisme impliqué dans le processus de l’oncogenèse et elles ne visent qu’une catégorie de patients. Les

mutations du gène Kras se révèlent prédictives d’une réponse à ces anticorps monoclonaux dirigés contre le

récepteur du facteur de croissance de l’Epidermal Growth Factor (EGFR). De Septembre 2005 à Juin 2006,

46 patients atteints de cancer colorectal métastatique sont admis au service pour prise en charge. Les

mutations au niveau du gène KRAS sont recherchées pour les patients en échec thérapeutique. La forme

Wild type a été retouvée chez 75,6% de nos patients et où un traitement anti-EGFR a été préconisé ; une

survie sans progression de la maladie de 12,5 mois a été retrouvée par rapport aux patients sous

cytotoxiques classiques. Les mécanismes impliqués dans les processus de l’Oncogenèse sont loin d’être

complètement élucidés chez l’Homme puisqu’une résistance à ce traitement est de nouveau observée. La

recherche d’autres facteurs prédictifs de réponse est en cours de réalisation.

L’intégration de ces techniques dans les stratégies de dépistage en milieu clinique contribuera sans aucun

doute à l’amélioration du diagnostic des α-thalassémies et des autres hémoglobinopathies associées (β-

thalassémies, drépanocytose).


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Page 35

SESSION: BIOCHIMIE-BIOTECHNOLOGIE


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L’hémoglobine source intarissable de connaissances

Boudrahem-Addour N Laboratoire de biologie moléculaire et cellulaire, Faculté des sciences biologiques,

USTHB, Bab Ezzouar Alger.

RESUME

L’hémoglobine réunit à son actif un tableau de performances exceptionnelles. C’est une maladie de

l’hémoglobine, la drépanocytose qui a été la première maladie moléculaire identifiée en 1949. Première

séquence protéique, première structure tridimensionnelle. C’est aussi la protéine qui présente le plus grands

nombre de variants. L’ensemble de ces travaux a permis les premières interprétations structure/fonction.

A l’ère de la biologie moléculaire, l’hémoglobine a gardé sa position de leader. Les gènes de globine ont

été les premiers gènes humains analysés dans leur structure et leur environnement chromosomique. Ils sont

considérés comme un système modèle d’étude des mécanismes de la spécificité tissulaire d’expression des

gènes chez les vertébrés. Parallèlement, de très nombreuses mutations ont été identifiées responsables des

syndromes thalassémiques. L’utilisation de méthodologies de plus en plus sophistiquées a contribué à la

précocité et à la standardisation du diagnostic moléculaire et à une réflexion profonde sur les aspects

éthiques de ce geste.

L’hémoglobine a aussi été un outil précieux dans les études de génétique de populations. La comparaison

des études réalisées en Algérie avec d’autres dans le monde permet de retracer les mouvements de

population. Le caractère endogame constaté favorise les affections génétiques à transmission autosomique

récessive. Il y a sans doute à ce niveau une politique de santé publique à mettre en place. Le phénomène de

sélection par le Plasmodium falciparum sur les hémoglobinopathies s’avère s’exercer sur d’autres gènes tels

que les gènes HLA du CMH, les cytokines et les gènes des molécules d’Adhérence.

En thérapeutique, des étapes de la physiopathologie ont été ciblées par l’utilisation d’agents

pharmacologiques inducteurs de l’Hémoglobine fœtale.

Les paradigmes actuels concernent le rôle de l’hémoglobine dans le transport du monoxyde d’azote, la

régulation complexe des familles de gènes de globine au cours du développement et l’implication des gènes

modificateurs dans l’hétérogénéité clinique. Quand à la thérapie génique, elle est encore à l’échelle de la

recherche fondamentale.

A l’aube de la médecine moléculaire, l’hémoglobine continue de nous entraîner sous son sillage. Fidèle à

elle-même cette molécule ne cessera de nous apporter la lumière…..

Mots clés : Hémoglobine, molécule modèle


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EFFET DE L’ACIDE NIFLUMIQUE SUR LA PHYSIOLOGIE

MITOCHONDRIALE ET LA PROLIFERATION DES CELLULES HT-29

I. Amrouche-Mekkioui 1 et B. Djerdjouri

1

1Laboratoire de Biologie Cellulaire et Moléculaire, Faculté des Sciences Biologiques (FSB). Université des Sciences et de la

Technologie Houari Boumediene (USTHB), BP 32 EL-ALIA 16111, Bab-Ezzouar (Alger).

RESUME

La cyclooxygénase 2 (COX-2), une enzyme qui produit hydrolyse l’acide arachidonique en prostanoïdes, a

été impliquée dans la cancérogenèse colique. Elle intervient en inhibant l’apoptose, dont la phase

effectrice consiste en l'ouverture des pores de transition de perméabilité mitochondriale (PTPC) et la

libération de protéines apoptogènes.

L’acide niflumique (Nif) est un anti-inflammatoire non stéroïdien (AINS), qui inhibe les deux isoforme de

cyclooxygénases avec un effet préférentiel sur la COX-2.

Nous avons étudié l’effet de l’acide niflumique (Nif) sur la physiologie des mitochondries de foie de rat

(gonflement et respiration), sur la prolifération des cellules HT-29 (lignée épithéliale intestinale dérivées de

cancer colique humain) et la libération d’IL-8 induites par le TNFα et le PMA.

Nos résultats montrent que le Nif provoque l’ouverture des pores de transition de perméabilité (PTPC, 100-

150µM) et découple la phosphorylation oxydative des mitochondries (10-150µM). Le LPS multiplie leur

taux de prolifération par un facteur de 3.5 à J4. Le Nif 250 µM a un pouvoir anti prolifératif sur ces cellules.

Le Nif (50-100µM) augmente la production d’IL-8 par les cellules HT-29 en absence et en présence de

TNFα, alors qu’à des doses plus élevées il semble avoir l’effet inverse (250 à 750µM). Le Nif n’a aucun

effet sur la production d’IL-8 stimulée par le PMA. Le Nif possède un effet anti prolifératif potentiel.

Mots clés : HT-29, AINS, mitochondrie, IL-8, TNFα, PMA.


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COLITE ULCEREUSE AU DEXTRAN SULFATE - MODULATION DU STRESS

OXYDATIF PAR UN ANTI-INFLAMMATOIRE NON STEROÏDIEN,

L’INDOMETACINE

A. Bounaama1 et B. Djerdjouri

1



RESUME

La colite ulcéreuse est une inflammation chronique du colon qui augmente le risque de développement du

cancer colorectal. Cet effet est fortement lié à l’induction d’un stress oxydatif dans la muqueuse colique.

Dans ce travail, l’effet de l’indométacine un anti-inflammatoire non stéroïdien présentant un effet inhibiteur

sur le développement du cancer colorectal, a été recherché sur la modulation du stress oxydatif associé à une

colite ulcéreuse expérimentale induite par le dextran sulfate sodium (DSS).

Deux cycles de DSS successifs ont été réalisés. L’administration du DSS (3%) par voie orale pendant 7 jours

suivie d’une administration de l’eau du robinet pendant 14 jours définit un cycle de DSS.

Les taux de malondialdehyde (MDA), de glutathion réduit (GSH), de monoxyde d’azote (NO) et de

l’activité catalase ont été mesurés dans les homogénats de colons prélevés des souris soumises aux

différents traitements.

Les résultats obtenus montrent que le DSS a induit une augmentation du taux de GSH, du MDA et du NO

respectivement avec des facteurs de 1.40, 1.65 et de 4.43 des taux témoins. L’indométacine a rétabli le taux

de GSH et de MDA aux valeurs témoins, sans réduire le taux de NO. Par ailleurs, l’activité catalase diffère

peu de la valeur témoin après traitement au DSS seul ou en présence d’indométacine. L’indométacine a

partiellement neutralisé l’inflammation chronique de la muqueuse intestinale induite par le DSS, en

réduisant notamment l’infiltrat cellulaire.

Mots clés : stress oxydatif, colite, dextran sodium sulfate, indométacine, malondialdehyde, monoxyde d’azote, GSH,

catalase.


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ANTIDIABETIC AND ANTIOXIDANT EFFECT OF ALOIN IN

STREPTOZOTOCIN-INDUCED DIABETIC RATS.

C. Kandouli (1)

, F. Khelifi-Touhami (1)

, C. Benlatreche (2)

, Z. Leulmi (3)

.

(1)Laboratoire de biologie animale. Département de biologie animale .Faculté des Sciences de la Nature et de la Vie .Université

Mentouri, Constantine 25000, Algérie. (2)Laboratoire de biochimie CHU IBN BADIS, Constantine 25000.Algérie. (3)

Laboratoire de génie microbiologique et applications.

[email protected]

ABSTRACT

Hyperglycemia not only generates reactive oxygen species but also attenuates antioxidant mechanisms

creating a state of oxidative stress. Oxidative stress is thought to play crucial role in development of

complications associates a diabetes. Many plants were evaluated to overcome this problem. Aloe (Liliaceae)

is widely used in North Africa folk medicine to treat various diseases including diabetes. Aloe contains

many active ingredients, but the best known is aloin.The purpose of this study was to investigate the

possible antidiabetic, hypolipidemic and antioxidant effect of aloin, with the daily amount of 30 mg/kg,

during three weeks, in streptozotocin (STZ)-induced diabetic rats (30 mg/kg body weight) for three weeks.

Serum glucose level was measured weekly. At the end, total cholesterol, triglycerides and HDL-cholesterol

were examined in serum and reduced glutathione (GSH), thiobarbituric acid reactive substances (TBARS),

superoxide dismutase (SOD), catalase (CAT) were evaluated in homogenates of liver and kidney. Oral

administration of aloin for three weeks resulted in a significant reduction in blood glucose and a decrease in

serum total cholesterol and triglycerides but no change in the level of HDL was observed. The aloin also

resulted in decreased free radical formation in studied tissues (liver and Kidney). The decrease in

thiobarbituric acid reactive substances (TBARS) and the increase in the activities of superoxide dismutase

(SOD), catalase (CAT) and reduced glutathione (GSH) suggest that aloin has antioxidant properties in

addition to its antidiabetic effect. The result of this experimental study indicates that aloin at 30 mg/kg body

weight possesses antidiabetic and antioxidant activity. However other experimental research is necessary to

determine the mechanisms involved in these effects.

Keywords: Aloin; Streptozotocin; Diabetes; glycemia; Oxidative stress; Antioxidants.


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Variation de l’Homocystéine et du Génotype C677T de

la Méthylénetétrahydrofolate Réductase chez l’Hypertendu

A.Otmane1, M.Makrelouf

1, F.Bouamrane

3, A.Zenati

1

Laboratoire Central de Biologie CHU de Bab El Oued1 . Service de Médecine Interne Hôpital de Bainem

3 Alger 16000 Algérie

Correspondance:[email protected]

RESUME

L’hyperhomocystéinémie représente un facteur de risque indépendant de pathologie cardiovasculaires et

athérothrombotiques. La régulation du taux de cet acide aminé est sous la dépendance de facteurs

physiologiques (âge, sexe), nutritionnels (statut vitaminique) et génétiques (déficit ou mutation des enzymes

impliqués dans son métabolisme).

Dans ce travail nous étudions la mutation ponctuelle C677T de la MTHFR (Méthylènetétrahydrofolate

réductase) une des enzymes clé du métabolisme de l’homocystéine, dans le but d’étudier sa répartition chez

une cohorte Algérienne de patients hypertendus. Ils s’agit d’une étude rétrospective conduite au CHU de

Bab El Oued d’Alger, 67 patients hypertendus sont inclus, d’âge moyen 55.31 13.35 ans, ils sont comparés

à 30 sujets témoins d’âge moyen 53.9 14.34 ans.L’homocystéine totale plasmatique a été dosée par

technique FPIA : Fluorescence Polarization Immunoassay. Le génotype C677T de la MTHFR a été réalisé

par la méthode PCR sur Light Cycler.

Les résultats obtenus ont montré que l’hyperhomocystéinémie est plus marquée chez les hypertendus 12.89

6.71 µmol/l, versus 10.35 2.38 µmol/l dans le groupe témoin (p<0.05). Chez les hypertendus les

fréquences génotypiques sont respectivement : 37% CC ,60% CT et 3%TT, cependant dans le groupe

témoin le génotype TT n’a pas été retrouvé, les génotypes CC et CT représentent respectivement 40% et

60%. La distribution mondiale du génotype C677T est très hétérogène; bien que notre travail soit

préliminaire, les premiers résultats retrouvent une fréquence génotypique de 2.5%, celle de l’allèleT est de

32.5%.

Nos connaissances actuelles concernant l’influence de facteurs environnementaux sur le déterminant

génétique s’avèrent incomplètes.

Cette étude devra être poursuivie par d’autres investigations essentiellement le dosage des vitamines du

groupe B (B6, B9, B12).


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GENETIC POLYMORPHISMS OF N-ACETYLTRANSFERASE 2 AND

CARDIOVASCULAR DISEASES

M. Khelil1*

, Bahia Djerdjouri1, Bouchentouf Tayebi

2,


« Houari Boumédienne » USTHB, Bab Ezzouar, BP: 32 El- Alia. 16111, Alger, Algérie

RESUME

La N-acétyltransférase 2 (NAT2) est un enzyme du métabolisme des xénobiotiques. NAT2 est polymorphe

et ce polymorphisme a été associé à une différence interindividuelle dans la réponse aux médicaments. En

outre, ce polymorphisme a aussi été associé à la modification du risque des maladies multifactorielles. Notre

but a été d’une part de déterminer la capacité d’acétylation chez une population Algérienne afin de

déterminer une dose thérapeutique efficace et moins toxique par rapport à la dose standard. D’autre part,

nous avons testé la relation entre le polymorphisme génétique de l’enzyme NAT2 et les maladies

cardiovasculaires. 200 sujets (50 patients avec une hypertension artérielle, 50 patients ayant présenté un

accident vasculaire cérébral et 100 témoins) ont été enrôlés dans cette étude. Le génotype NAT2 a été

déterminé par la méthode PCR-RFLP. Nos résultats ont montré une différence significative entre patients et

témoins pour l’haplotype NAT2*5F (P =0.032; OR = 0.44). Aucune différence significative n’a été observée

pour les autres haplotypes, ni pour les génotypes et phénotypes. La proportion d’acétyleurs lents et rapides a

été d’environ 50% aussi bien chez les malades que chez les témoins. En conclusion, nous pouvons suggérer

qu’il y aurait autant de métaboliseurs rapides que de métaboliseurs lents chez la population de patients

étudiés. En outre, l’haplotype NAT2*5F semblerait être un facteur protecteur contre les maladies

cardiovasculaires étudiées.

Mots clés : Maladies cardiovasculaires N- acétyltransférase, polymorphisme.


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Description des Chromosomes de l’Outarde houbara Chlamydotis undulata undulata et

Cartographie Chromosomique Comparée:

Première Etape de l’Analyse du Génome

Mahiddine L.,* Belhamra M.,** Boucekkine W.,*** Ladjali-Mohammedi K.* * Laboratoire de Génétique du Développement, FSB, USTHB

([email protected]; [email protected])

** Centre Cynégétique de Zéralda, Centre de Recherche Scientifique et Technique sur les Régions Arides, Université de Biskra

([email protected])

*** Direction Générale des Forêts ([email protected])

Résumé

Certains réarrangements chromosomiques se sont produits durant l’évolution entre les génomes aviaires et

humains mais plusieurs groupes de synténies restent conservés. Ceci a été observé dans plusieurs familles de

gènes impliqués dans des fonctions biologiques extrêmement importantes. C’est pour ces raisons que les

génomes aviaires constituent un excellent modèle d’évolution et leur connaissance commence par leurs

descriptions et l’accumulation d’informations. En effet, une de ces étapes est l’analyse des différents

caryotypes aviaires et l’établissement de la cartographie chromosomique comparée.

Parmi les nombreuses espèces aviaires qui figurent comme étant vulnérables dans la liste rouge établie en

2004 par L’Union Internationale pour la Conservation de la Nature (UICN), on retrouve l’Outarde houbara

Chlamydotis undulata undulata qui est un oiseau rare, appartenant à l’ordre des Gruiformes, emblématique

des grands espaces steppiques et désertiques de l’Afrique du Nord et du Moyen Orient.

La situation très préoccupante de cette espèce en Algérie nous incite à entamer, rapidement, une étude de

son génome ainsi que la mise en place d’une base de données afin de contribuer à sa préservation. Ainsi,

nous proposons pour la première fois le caryotype de l’Outarde houbara en bandes morphologiques GTG et

dynamiques RBG obtenu après la réalisation d’une culture des précurseurs érythrocytaires à partir d’un

jeune mâle. Des doubles synchronisations du cycle cellulaire avec l’incorporation du BrdU, analogue

structural de la thymidine, lors de la réplication de l’ADN ont été réalisées et nous ont permis d’obtenir des

chromosomes allongés en prométaphase.

La comparaison individuelle des huit premières paires chromosomiques et les chromosomes sexuels ZZ

avec les chromosomes du poulet, a révélé la présence de similitudes entre la morphologie et le motif des

bandes pour les 6 premiers macrochromosomes et le chromosome sexuel Z. A l’inverse, les chromosomes 7

et 8 sont nettement différents chez ces deux espèces qui semblent avoir divergés après des réarrangements

chromosomiques qui se sont produit durant l’évolution des oiseaux.

Mots clés : Outarde houbara, Chlamydotis undulata undulata, espèce menace d’extinction, précurseurs

érythrocytaires, double synchronisation, génome aviaire, caryotype, chromosomes, bandes GTG et RBG,

cartographie comparée.


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Page 43

SESSION: MICROBIOLOGIE-BIOTECHNOLOGIE


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Etude moléculaire de la résistance d’Enterobacter sp aux céphalosporines à large

spectre et aux quinolones dans les hôpitaux d’Alger

Hassen IABADENEa, Yamina MESSAI

a, Souhila ALOUACHE

a, Charlotte VERDET

b, Guillaume

ARLETb et Rabah BAKOUR

a

a- Laboratoire de Biologie Cellulaire et Moléculaire, Equipe de Génétique, Faculté des Sciences Biologiques, Université des

Sciences et de la Technologie Houari Boumediene, Alger

b- Université Paris VI, Faculté de Médecine Pierre et Marie Curie, Laboratoire de Bactériologie, UPRES EA 2392, Paris, France

Résumé :

L’étude a porté sur Enterobacter sp (n=149) isolés dans les hôpitaux d’Alger. L’antibiogramme, les tests

d’antagonisme et de synergie ont permis de distinguer 2 groupes de souches :

- Sensibles aux céphalosporines de 3ème

et 4ème

génération (C3G/C4G) : 114 souches se répartissant en phénotypes «

pénicillinase haut niveau » (n=21) et « céphalosporinase naturelle » (n=93).

- Résistantes aux C3G/C4G : 35 souches assignées aux phénotypes « béta-lactamases à spectre élargi » (n=25) et

céphalosporinase acquise (n=10).

La caractérisation moléculaire de la résistance a confirmé :

- Le phénotype BLSE avec la présence des allèles blaCTX-M (CTX-M-15 : n=11, CTX-M-3 : n=9), blaSHV-12 (n=4) et

blaVEB-1 (n=1) portés respectivement par des plasmides auto-transférables Inc/rep L/M de 80kb et Inc/rep HI2 de

150kb, et non conjugatif Inc/rep FII de 60kb. Les souches SHV-12+ coproduisent des céphalosporinases plasmidiques

(pAmpC) de type DHA-1 localisées sur un plasmide Inc/rep A/C de 100kb .

- La dérépression chez le reste des souches de la céphalosporinase chromosomique suite à des mutations dans les

gènes régulateurs ampR et ampD.

La recherche des déterminants qnr a montré la présence des allèles qnrS1, qnrB1 et qnrB4 chez 5 souches BLSE+

produisant CTX-M-15 ou SHV-12.

Cette étude a montré la prédominance des BLSE CTX-M et l’association des déterminants qnr à ceux des BLSE, ainsi

qu’elle a mis en évidence pour la première fois les pAmpC en Algérie et le type DHA-1 chez Enterobacter cloacae.

Mots clés : Enterobacter, BLSE, QNR, Algérie.


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Gravité des mycobactérioses chez les patients immunodéprimés.

Nateche F1.2*

, Lafoz C3, Baraka S

2, Samper S

3 et Khaled S

2.

1 Laboratoire de biologie moléculaire et cellulaire, FSB, USTHB. ALGER.. ALGER.

2 Laboratoire central, EHS EL HADI FLICI Ex EL KETTAR. ALGER

3 Laboratoire de mycobactériologie, faculté de médecine, université de ZARAGOSSE. ESPAGNE. * [email protected]

Résumé

Objectif : cette étude démontre la vulnérabilité des patients HIV positifs aux mycobactéries atypiques ou

non tuberculeuse (MNT). Ainsi, 312 produits pathologiques ont été investigués.

Méthodes :

L’identification classique des souches atypiques ou MNT a été faite sur la base des tests classiques : Etude

macroscopique des colonies ; présence de pigments ; temps de croissance ; tests physiologiques et

biochimiques ; ainsi que la résistance à l’isoniazide, le TCH et le PNB.L’identification moléculaire a été

réalisée par une PCR avec l’ ARNr 16S de Mycobacterium tuberculosis, et la technique de PRA (PCR

restriction analysis). L’analyse des fragments de restriction sont comparés avec la base des données du site :

http://app.chuv.ch/prasit.

Résultats :

Touts les isolats ont été identifiés comme appartenant au complexe M. tuberculosis à part 10 souches

provenant de 9 patients ont donné des réactions atypiques.

Il est important de souligner que 6 patients sont positifs pour le VIH. En effet, le p value de 0.0001 met en

évidence l’étroite relation entre les souches atypiques et le statut VIH.

5 espèces différentes ont été mises en évidence :

- M. intracellulare type 2 avec 5 souches.

- M. nonchromogenicum type 2 avec une souche.

- M. lentiflavum type 4 avec une souche.

- M. fortuitum type 1 avec 2 souches.

- M. chaloneae type 1 avec une souche.

Dans ce cas, la thérapie est problématique vu le haut niveau de résistance de ces souches aux molécules

antituberculeuses particulièrement à l’isoniazide et la rifampicine. En effet, 7/10 souches sont

multirésistantes dans le cas de notre étude.

La technique PRA est non fastidieuse et non onéreuse, elle est à recommander dans les laboratoires de

mycobactériologie afin de dresser un diagnostic juste et surtout précoce.

Conclusion :

Les mycobactéries affectent plus les malades positifs pour le VIH que les patients séronégatifs, Le p value

de 0.0001 met en évidence l’étroite relation entre les souches atypiques et le statut VIH.

Mots clés : Mycobacterium, VIH, PCR restriction analysis, multirésistance.


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Mise en évidence et essai de Caractérisation de molécules antifongique chez Bacillus

thuringiensis

Abderrahmani Ahmed1, Nateche-Metiaz Farida

1, Hacene Hocine

1et Jacques Philippe

2.

1) Laboratoire BCM Equipe Microbiologie Faculté des Sciences Biologiques -USTHB.BP 32 .El alia. 16111 .Alger Algérie.

2) Laboratoire Probiogem Polytech’lille. Avenue Langevin.USTL1 .Lille. 59655. France

Résumé

Une collection de soixante rhizobactéries appartenant au laboratoire de microbiologie et identifiées

comme étant des souches de Bacillus thuringiensis a été testée vis-à-vis de cinq champignons mycéliens :

Mucor roxii, Rhizopus nigricans, Penicillium roquefortii, Aspergillus niger et Fusarium oxysporum.

L’investigation avec ces mycètes révèle une bonne activité antagoniste. En effet, l’analyse par

spectrométrie de masse de type Matrix-assisted laser desorption-ionisation time of fligt ( MALDI TOF) de la

souche B. thuringiensis (FvBj6) qui a présenté le spectre le plus large a permis de retrouver deux pics

importants avec des masses de 906 et 1065 correspondant respectivement à la kurstakine et à l’iturine A ou

à la mycosubtiline.

Outre, le pic 906 aurait un intérêt systématique puisqu’il est retrouvé chez les souches de Bacillus

thuringiensis uniquement et peut être considéré comme un bio marqueur et serait responsable de l’activité

antifongique. En plus de son activité entomocide, Bacillus thuringiensis peut être un prometteur candidat

pour une utilisation contre les pathologies antifongiques.

Mots clés : Bacillus thuringiensis, activité antifongique, Maldi tof, kurstakine, biomarqueur antifongique.


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Page 47

Etude phénotypique et génotypique de la virulence de souches hospitalières de

Klebsiella pneumoniae

Radia AISSANIa,

Yamina MESSAIa, Hassen IABADENE

a, Souhila ALOUACHE

a, Guillaume

ARLETb et Rabah BAKOUR

a

a- Laboratoire de Biologie Cellulaire et Moléculaire, Equipe de Génétique, Faculté des Sciences Biologiques, Université des


b- Université Paris VI, Faculté de Médecine Pierre et Marie Curie, Laboratoire de Bactériologie, UPRES EA 2392, Paris,

France

Résumé

Klebsiella pneumoniae est une bactérie pathogène opportuniste causant des infections nosocomiales et

communautaires. Sa pathogénicité est liée à l’expression de plusieurs facteurs de virulence: capsule, adhésines,

sidérophores et protectines/invasines. Les principales manifestations cliniques sont la pneumonie, la septicémie,

l’infection des plaies et du tractus urinaire. L’émergence de souches productrices de β-lactamases à spectre élargi

plasmidiques (BLSE) a compliqué la situation.

La recherche de facteurs de virulence sur 39 souches cliniques productrices de BLSE a montré l’ubiquité des gènes

fimH(100%), mrkD(95%) et ycfM(95%) codant les fimbriae1, les fimbriae3 et une protéine putative de liaison à la

fibronectine. Le gène kpn codant une adhésine FimH-like est présent chez 69% des souches. Les capsules produites ne

sont pas de types antigéniques K1, K2 et K5. 90% des souches sont phénotypiquement résistantes au sérum et les

gènes traT, rmpA et magA, parmi ceux susceptibles de conférer cette résistance, sont absents excepté chez 3 souches.

Toutes les souches sont positives pour le gène entB de l’entérobactine, ceux de biosynthèse et de capture de la

yersiniabactine (irp1, irp2, ybtS, fyuA) sont présents chez 56% des souches et seules 8% des souches sont positives

pour le gène iutA de l’opéron de l’aérobactine. La production de sidérophores a été confirmée par la méthode de co-

culture en milieu appauvri en fer. La combinaison des facteurs de virulence a permis de distinguer 9 pathotypes dont 3

sont prédominants.

Cette étude a révélé la virulence des souches de K. pneumoniae sévissant dans les hôpitaux d’Alger.

Mots clés: Klebsiella pneumoniae, virulence, béta-lactamases


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Page 48

SESSION: MICROBIOLOGIE-BIOTECHNOLOGIE

(Suite)


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PRODUCTION D’ESTERS D’ALKYLE D’ACIDES GRAS PAR BIOCONVERSION

MICROBIENNE D’UNE HUILE VEGETALE

Z. HACHAICHI-SADOUK1, 2

, A. TAZEROUTI2, H. HACENE

1

1Laboratoire de Biologie Cellulaire et Moléculaire, Faculté des Sciences Biologiques,

2Laboratoire de Chimie Organique Appliquée, Faculté de Chimie,

Université des Sciences et de la Technologie Houari Boumediène,

BP 32 El Alia, 16111 Bab Ezzouar, Alger, Algérie.

Résumé-

Les esters d’alkyle d’acides gras issus de la transestérification d’huiles végétales constituent des matières

premières intermédiaires très recherchées par les industries pharmaceutiques. En 2007, le « Committee for

medicinal products for human use » de l’ « European medicines agency » par exemple, désigne les esters

d’acides gras comme excipients aptes à solubiliser et/ou à faciliter la pénétration des formulations

transdermiques.

Cette transestérification peut être réalisée soit, par voie chimique conventionnelle, soit par voie

enzymatique, ou par biotransformation au cours de la fermentation microbienne (whole cells).

La bioconversion d’une huile de tourteau d’olives avec une souche du genre Rhodococcus a été

effectuée dans notre laboratoire: l’analyse du produit brut par CG et CG/MS/IE a révélé la présence d’esters

méthyliques et éthyliques d’acides gras. Les bandes caractéristiques des esters ont été confirmées par IR.

Mots clés: Bioconversion, Rhodococcus rhodochrous. Huile végétale, Esters d’alkyle d’acides gras.


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Page 50

Profil de résistance aux métaux lourds chez Chryseobacterium solincola sp, nov.,

Benmalek1 Y, Nateche-Metiaz

1 F, Hachani

1 B, Hambli

1 A, Fardeau

2 M-L & AHacene

1 H

1 Laboratoire de Microbiologie, Département de BCM, Faculté des sciences biologiques, Université des Sciences et de

Technologie Houari Boumediene, Bab Ezzouar, Alger, Algérie.

2

Laboratoire de Microbiologie IRD, UMR D180, Microbiologie et Biotechnologie des Environnements Chauds, Universités de

Provence et de la Méditerranée, ESIL, Case 925, 163 Avenue de Luminy, 13288 Marseille Cedex 09, France

Corresponding author: [email protected]

RESUME

Les métaux lourds sont des éléments métalliques de masse volumique ≥ 5g/cm3. Certains sont essentiels pour le bon

fonctionnement des différentes activités cellulaires (Fe,Cu, Ni, Zn,Co..), par contre d’autres sont très toxiques même à

de très faibles concentrations (Hg, Cd, Pb...). Ils sont naturellement présents dans l’environnement sous forme de

traces, mais le développement de la technologie a significativement augmenté leur taux et leur disponibilité. Ils

peuvent se concentrer le long de la chaîne alimentaire et s’accumuler dans quelques organes de l’homme et de

l’animal. Ils sont tous neurotoxiques, avec certains cancérigènes. Pour cette raison, plusieurs procédés de

biotechnologie de l’environnement ont été développés dans le but d’éliminer ou de diminuer la concentration de

ces éléments minéraux très toxiques dans notre environnement.

Dans cette optique, on a étudié la résistance vis à vis 7 sels métalliques (plomb, chrome, zinc, nickel, cadmium,

cuivre, cobalt) chez Chryseobacterium solincola sp, nov., par la suite on a procédé à la détermination du support

génétique par les techniques du transfert génétique (conjugaison), et le curage.

Les résultats obtenus montrent que cette bactérie est poly résistante et les CMIs déterminées sont considérables

avec des chiffres de l’ordre de 500 ug/ml (Pb), 350ug/ml (Cr), 300ug/ml (Zn et Ni), 150ug/ml (Cd), 75ug/ml (Cu et

Co). Aucun transfert génétique n’a eu lieu entre notre souche et la souche réceptrice E coli K 12. Pour le curage 3

clones sont obtenus avec des fréquences différentes. Deux clones avec l’agent curant SDS dont un a perdu le

caractère de résistance aux Zn et Na Cl, et l’autre le caractère de résistance au ZN seulement avec une fréquence de

1.33x10-2

. Pour le 2ème

agent curant (acide nalidixique), un seul clone est obtenu qui a montré une perte de 3

caractères de résistance à la fois (Pb, Zn, Na Cl), avec une fréquence de 0.66x 10

-2 .

Sur la base des résultats obtenus, cette bactérie est très intéressante, et peut être appliquée dans les différents procédés

de biotechnologie de l’environnement.

Mots clés : Chryseobacterium solincola, résistance, métaux lourds, gènes de résistance.



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Page 51

Influence des apports anthropiques sur l’évolution génétique des bactéries en milieu

marin : cas de la résistance aux antibiotiques dans les eaux portuaires d’Alger

Souhila ALOUACHE, Lynda ANSSOUR, Yamina MESSAI, Hassen IABADENE

et Rabah BAKOUR Laboratoire de Biologie Cellulaire et Moléculaire, Equipe de Génétique, Faculté des Sciences Biologiques, Université des


RESUME

L’étude a porté sur la détection de la résistance aux béta-lactamines chez les bactéries à Gram- dans les eaux

portuaires polluées d’Alger. Trente cinq souches ont été sélectionnées sur la base de leur résistance aux

céphalosporines à large spectre médiée par des béta-lactamases à spectre étendu (BLSE). Ces souches se répartissent

en 20 Citrobacter freundii, 6 Aeromonas hydrophila, 6 Vibrio fluvialis (17%), 1 Citrobacter braaki (2,86%), 1

Bordetella sp. (2,86%) et 1 E. coli (2,86%). Le typage moléculaire par ERIC-PCR des souches d’Aeromonas et de

Vibrio a révélé des génotypes différents, tandis qu’on a noté le caractère clonal de 17 souches sur les 20 de

Citrobacter freundii. Les BLSE identifiées sont principalement de type CTXM-3 et CTXM-15, avec la présence des

types PER-1 et VEB-1 ; leurs gènes sont localisés, respectivement, sur des plasmides de 85kb autotransférable, 10kb

mobilisable et >128kb non transférable.

Ces souches identifiées sont allochtones et autochtones du milieu marin, elles ont été décrites comme agents

étiologiques d’infections opportunistes et les BLSE détectées sont de même type que celles retrouvées en clinique. Ces

données peuvent être indicatives de l’influence des apports anthropiques biotiques et abiotiques sur l’évolution

génétique des bactéries marines, par les transferts génétiques in situ et la pression de sélection. Ainsi, outre le maintien

confirmé de la résistance aux antibiotiques dans le milieu marin, ce dernier peut même jouer un rôle dans son

exacerbation.

Mots clés: Bactéries à Gram-, milieu marin, résistance, antibiotiques


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Extraction et essai de caractérisation des substances antimicrobiennes

produites par une souche d’actinomycète halophile modérée.

DJINNI Ibtissem1, SOUAGUI Samiha

1, KECHA Mouloud

1 et BENALLAOUA Said

1.

1Laboratoire de Biochimie Microbienne / LMA, FSNV, Université A.MIRA, 06000 Bejaia- Algérie

e-mail : [email protected]

RESUME

Face à la résurgence des maladies infectieuses déjà connues (paludisme, tuberculose, etc.) et à

l’apparition de nouvelles autres encore plus mortelles (telles que le SIDA, la grippe aviaire, etc.) mais

également le phénomène de multirésistance bactérienne qui connaît une augmentation ces dernières années,

sont devenues la préoccupation majeure des industries pharmaceutiques et de la communauté médicale tant

du point de vue de la mise en évidence de nouvelles molécules, sûres mais également efficaces que de celui

du mécanisme d’action et activité biologique.

L’une des stratégies adoptées est l’isolement et l’identification de souches d’actinomycètes

productrices d’antimicrobiens issus des environnements peu communs voir extrêmes.

Sur un total de 35 souches modérément halophiles isolées de la région de Béjaia, l’isolat S17 a été

sélectionné pour son importante activité à la fois antibactérienne et antifongique vis-à-vis de 6 bactéries, de

3 champignons filamenteux et d’une levure.

Les activités antibactériennes et antifongiques de cet isolat sont extraites, aussi bien à partir du

mycélium qu’à partir des filtrats de cultures, par cinq solvants de polarité croissante. Des résultats positifs

ont été obtenus uniquement avec les filtrats de culture.

Les extraits organiques bruts de la souche S17 ont fait objet d’une semi purification sur plaque de gel

de silice (CCM) afin de déterminer le meilleur système d’élution, de ce fait, le système éthanol-

ammoniaque-eau (60/20/20) s’est révélé être le meilleur.

Des révélations chimiques et une étude spectroscopique ont été réalisées sur les extraits bruts de ces

filtrats de culture et les résultats indiquent l’absence de composés polyèniques mais aussi, que nos

substances semblent avoir des propriétés analogues aux molécules de type polyéthers dont les

caractéristiques biologiques et physicochimiques semblent coïncider avec nos résultats : action exclusive sur

les bactéries à Gram +, champignons filamenteux et levures, et réaction intense avec la vanilline-H2SO4.

Mots clés : Actinomycètes halophiles, isolement, activité antibiotique, Streptomyces.



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ATELIER

BIOTECHNOLOGIE ET BIOINFORMATIQUE


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Welcome to High Definition Genomics

Aouatef Ait-Lounis Faculté des Sciences Biologiques, USTHB

Abstract. Chromatin immunoprecipitation (ChIP) is a technique for assaying protein–DNA binding in vivo.

In a ChIP experiment for DNA-binding proteins, DNA fragments associated with a specific protein are

enriched. The DNA-binding protein is crosslinked to DNA in vivo by treating cells with formaldehyde and

the chromatin is sheared by sonication into small fragments, which are generally in the 200–600 bp range.

An antibody specific to the protein of interest is used to immunoprecipitate the DNA–protein complex.

Finally, the crosslinks are reversed and the released DNA is assayed to determine the sequences bound by

the protein. The introduction of microarrays allowed the fragments obtained from ChIP to be identified by

hybridization to a microarray (ChIP–chip), therefore enabling a genome-scale view of DNA–protein

interactions. In ChIP–seq, the DNA fragments of interest are sequenced directly instead of being hybridized

on an array. ChIP-chip and ChIP–seq experiments generate large quantities of data, and effective

computational analysis will be crucial for uncovering biological mechanisms. Genome-wide mapping of

protein–DNA interactions is essential for a full understanding of transcriptional regulation. A precise map of

binding sites for transcription factors, core transcriptional machinery and other DNA-binding proteins is

vital for deciphering the gene regulatory networks that underlie various biological processes.

Key words: Chromatin immunoprecipitation – ChIPchip and microarray – ChIPSeq - transcription factor -

protein−DNA interaction.

Résumé . L’immunoprécipitation de la chromatine, appelée également « ChIP » (pour « Chromatin

ImmunoPrecipitation ») est une technique qui permet d’identifier les sites de liaison d’un facteur de

transcription sur l’ADN in situ. Le ChIP consiste à purifier des complexes ADN-protéines liés après un

traitement par du formaldéhyde. Après fixation de la chromatine (de l’ADN et des protéines qui lui sont

associées) par un traitement au formaldéhyde, l’ADN est clivé en fragments de 200 à 600 paires de bases par

sonication. La protéine d’intérêt, un facteur de transcription par exemple, est ensuite immunoprécipitée et

l’ADN auquel elle était liée est récupéré, purifié et amplifié par PCR avec des amorces choisies,

complémentaires des régions promotrices d’intérêt. L’apparition des puces à haute densité ou des nouvelles

techniques de séquençage ont permis de cartographier à l’échelle du génome les sites d’interaction entre

l’ADN et des protéines régulant l’expression des gènes. La technologie de ChIP sur puces à ADN (ChIP-on-

chip) ou par séquençage massif (ChIP-seq) récemment proposée offre des perspectives intéressantes dans le

domaine de la régulation génique. Ces méthodologies reposent sur des analyses 'Genome-wide' qui demande

des traitements bioinformatiques multiples, pas toujours bien définis (e.g. pour ChIP-seq).

Mots clés : Immunoprécipitation de la chromatine – ChIPchip –Puce ADN- ChIPSeq – Facteurs de

transcriptions – Interaction ADN protéine.


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COMMUNICATIONS AFFICHEES


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P1

Action du peroxynitrite dans les altérations cellulaires et tissulaires induites par

l’antigène S, lors des uveites.

Lahmar-Belguendouz K1, 2

, Belguendouz H 1., et Touil- Boukoffa C

1.

1 : Equipe Cytokines et NO Synthases-LBCM- F.S.B-U.S.T.H.B.

2 : Département des sciences de la nature, Université de Tebessa.

RESUME

L’uvéite est un terme englobant une multitude de maladies inflammatoires de la tunique uvéale de l’œil

pouvant conduire à la cécité. Elle peut être d’étiologie auto-immune. La protéine majeure impliquée dans l’initiation

des uvéites auto-immunes est l’antigène S (Ag-S), localisé essentiellement dans les photorécepteurs. Des travaux

précédents réalisés par notre équipe, ont montré que les explants rétiniens sains mis en culture en présence de l’Ag-S

subissaient des altérations cellulaires et structurales et produisaient du monoxyde d’azote (NO) quantifié à travers ses

dérivés à savoir les nitrites et les nitrates. Le peroxynitrite, une autre molécule dérivée du NO résultant de la réaction

de ce dernier avec l’O2- au niveau des sites inflammatoires, est connue pour sa toxicité cellulaire et tissulaire au cours

de différentes pathologies.

Afin de situer l’effet du peroxynitrite et de l’antigène S au niveau des différentes tuniques oculaires, des

explants oculaires bovins sains ont été mis en culture en présence d’un donneur de peroxynitrite (SIN-1) à des

concentrations croissantes de 100-500 µM pendant 24h et 48h et d’autres explants en présence de l’Ag-S à une

concentration de 10 µg et 20 µg /ml pendant la même durée. Les résultats obtenus ont montré de hautes similitudes

entre les altérations induites par l’Ag-S et celles induites par le peroxynitrite en particulier, au niveau de la cornée, la

rétine et la choroïde.

A travers nos résultats, Il apparaît que le peroxynitrite joue un rôle déterminant dans la genèse des lésions

symptomatiques de l’uvéite et pourrait être utilisé comme bio-marqueur de l’évolution de la maladie.

Mots clés : uvéite, monoxyde d’azote, peroxynitrite.


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P2

In vitro “Nitric Oxide and Steroid Hormones” relationship during Behçet Disease: Role

in patients physiopathological status

M.L. Ahmedi1, H. Belguendouz

1, D. Messaoudene

1, K. Lahmar- Belguendouz

1, D. Hartani

2, C. Touil-

Boukoffa1

1'cytokines and NO Synthases' team, LBCM- FSB,-USTHB, Algiers, Algeria,

2Clinique d'ophtalmologie,

CHU Mustapha Bacha, Algiers, Algeria

RESUME

Behçet disease (BD) is a systemic chronic inflammatory disorder that is considered as vasculitis. It is

characterized by significant elevation in nitric oxide (NO) levels both in vivo and in vitro. The sex ratio

(male to female) is 3/1. However, despite of this fact, literature didn't report any differences in sexual

hormones levels between patients with BD and control subjects. In order to investigate in vivo steroid

hormones levels and their effect on NO production during BD, 85 patients with BD (66 men, 19 women)

and 35 control subjects (20 men, 15 women) were included in this study. Plasma steroid hormones

(progesterone, testosterone and cortisol) were evaluated by immunoassay (Biomérieux, France). PBMC

were cultured in RPMI 1640 with 5% FBS, 2 mM of glutamine in presence of either testosterone (1ng/ml),

oestradiol (40pg/ml) or cortisol (100ng/ml). NO levels in cultures supernatants were estimated by modified

Griess method. We found that Testosterone and progesterone levels had no significant differences between

patients and controls (p=0.23, p=0.52). In contrast, cortisol showed significant diminution during BD when

compared to controls (p< 0.01). The cellular response to oestradiol and cortisol showed a significant

reduction in NO rates (p< 0.05) while testosterone significantly increased its production (p< 0.05). In

conclusion, our results showed normal sex hormones levels. However, their effect on NO production

suggests that BD physiopathology is more reliable to cellular response. Reduced corticosteroid production

during BD may contribute to the exacerbated inflammatory status as cortisol inhibited NO formation.

Mots clés: Steroid Hormons, Nitric Oxide, Behcet Disease


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P3

Mise en place d’un modèle d’uvéite auto-immune expérimentale induite par l’IRBP :

Implication du monoxyde d’azote

Arroul-Lammali Amina, Djeraba Zineb, Belguendouz Houda, Messaoudène Djamel

& Touil-Boukoffa Chafia. Equipe « Cytokines et NOSynthases » FSB-USTHB

RESUME

L’uvéite est une inflammation intraoculaire formant l’une des manifestations cliniques les plus sévères de la maladie

de Behçet. L’IRBP, auto-antigène rétinien, a été impliqué dans la physiopathologie de cette affection. Plusieurs

travaux ont démontré une production élevée de monoxyde d'azote (NO) au cours de la pathologie. Nous avons donc

été amenés à la mise au point d’un modèle expérimental, afin de vérifier l'implication de cette bio-molécule.

A cet effet, nous avons induit l’uvéite auto-immune expérimentale (UAE) chez le rat Wistar par l’IRBP. La production

du NO in vivo dans les plasmas, in vitro au niveau des surnageants de culture des splénocytes et localement, au niveau

des yeux de rats Wistar immunisés par l’IRBP a également fait l’objet de notre étude.

Nos résultats montrent que la souche Wistar utilisée dans les expérimentations est sensible à l’induction de l’UAE par

l’IRBP. En effet, une inflammation intraoculaire ainsi qu’une désorganisation de l’architecture de la rétine ont été

observées. La production du NO in vivo, in vitro et localement a montré une augmentation significative en

comparaison avec les rats témoins et contrôle (CFA+PBS). De plus, le pic de production du NO précède celui de

l’apparition de l’uvéite et des désordres histopathologiques au niveau des rétines.

Nos résultats suggèrent l’implication du NO durant les phases précoce et aigue de l’UAE et le situent en tant que

marqueur clé de mauvais pronostic dans le suivi des manifestations inflammatoires observées lors de l’atteinte

oculaire associée à la maladie de Behçet.

Mots clés : Uvéite auto-immune expérimentale/ rat Wistar/ IRBP/ monoxyde d’azote.


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P4

Mise en place d’un modèle d’uvéite auto-immune expérimentale induite par l’antigène-

S : Implication du Monoxyde d’azote.

Djeraba, Z., Arroul-Lammali, A., Belguendouz, H., Messaoudene, D., Touil-Boukoffa, C

Equipe ‘’ Cytokines et NO Synthase’’. LBCM-FSB-USTHB.

RESUME

L’uvéite, constitue l’une des manifestations les plus sévères du syndrome de Behçet. L’Ag S, protéine

rétinienne, a été fortement incriminée dans la physiopathologie de cette affection. Elle est utilisée chez différents

modèles expérimentaux, afin d’induire l’uvéite auto-immune expérimentale (UAE), modèle de l’uvéite humaine.

La production du monoxyde d’azote (NO) au cours de l’UAE a été fortement discutée par plusieurs travaux chez

l’homme et sur un modèle animal utilisant le rat Lewis.

Nos objectifs ont porté sur la mise au point d’un modèle expérimental d’uvéite Behçet induite chez le rat Wistar en

utilisant comme effecteur l’Ag S. L’évolution de la production in vivo et in situ du NO a été poursuivie sur ce modèle

établi au préalable. Une étude histologique du tissu neuro-rétinien a été réalisée en parallèle afin d’y localiser les effets

délétères de l’Ag S et sa relation avec la production du NO. Nos résultats ont montré une augmentation significative

des taux du NO dans les plasmas et les homogénats des yeux des rats Wistar traités avec l’Ag S ; avec une différence

de production selon les phases cliniques de l’UAE. L’Ag S a induit des effets délétères notables sur le tissu neuro-

rétinien des rats Wistar traités et la couche des photorécepteurs semble en être la plus sensible.

Une production maximale de NO a été observée durant la phase précédant les altérations touchant le tissu neuro-

rétinien. Le NO pourrait constituer un bio-marqueur de mauvais pronostic au cours de cette affection. Ainsi, le stress

oxydatif, pourrait être considéré comme l’étape pathologique initiale menant à la destruction des photorécepteurs.

Mots clés : l’uvéite auto-immune expérimentale, Ag S, le monoxyde d’azote, destruction des photorécepteurs.


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P5

Analyse de l’expression des protéines symplekine et -catenine impliquées dans les

jonctions urothéliales tumorales.

Aslane M* ., Baz H. Laboratoire de biologie physiologie cellulaire et moléculaire. Ecole Normale Supérieure (ENS de Kouba, Alger- Algérie).

* Département de biologie moléculaire et cellulaire-Université de Mouloud Mammeri (Tizi-Ouzou- Algérie). [email protected]

RESUME

La symplekine et la -catenine sont des protéines localisées au niveau des jonctions cellulaire, font

partie d’un complexe protéique cytoplasmique lié à la surface interne des jonctions, ces deux protéines

participent à l’échafaudage par leur liaison au cytosquelette.

Pendant la prolifération cellulaire la symplekine et la -catenine ont été localisées dans le noyau liées à

des complexes de protéines nucléaires intervenant dans la régulation de la transcription génétique.

La progression tumorale est marquée par une évolution du degré de l’indifférenciation cellulaire, qui

est le témoin d’une désorganisation remarquable des jonctions intercellulaires et une perte de l’ancrage à la

matrice cellulaire.

Nous nous somme posé la question, si l’altération au niveau des jonctions cellulaires pendant la

progression des carcinomes urothéliaux s’exprime par une variation d’expression de la symplekine et de

la -catenine.

Notre étude a consisté à analyser l’expression de la symplekine et de la -catenine par électrophorèse

sur gèle de polyacrilamide SDS-page, réalisée sur des biopsies humaines de tumeurs de la vessie de

différents grades de malignité déterminés par une coloration à l’Hématoxyline éosine.

Nos résultats ont montré que les taux d’expression de la symplekine et de la -catenine dans le

cytoplasme diminuent progressivement en fonction de l’évolution du grade tumorale.

Ceci nous a permis de suggérer que ces deux protéines se détachent des jonctions et migrent vers le

noyau afin d’activer la prolifération cellulaire. La symplekine et la -catenine peuvent servir de facteurs

pronostiques d’évolution tumorale et cibles pour une thérapie génique.

Mots clés : symplekine, -catenine, cancers urothéliaux, jonction cellulaire, indifférenciation cellulaire.



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P6

APPORT DE LA RADIOBIOLOGIE DANS LA THERAPIE ANTIVENIMEUSE OPHIDIENNE

Bennacef-Heffar N., Boukhalfa-Abib H., Oussedik-Oumehdi H et Laraba-Djebari F Laboratoire de Biologie Cellulaire et Moléculaire, Faculté des Sciences Biologiques, Université des Sciences et de la Technologie

« Houari Boumédienne » Bab Ezzouar, Alger, Algérie.

Laboratoire de Recherche et de Développement sur les Venins, Institut Pasteur d’Algérie.

E-mail: [email protected] - Fax: 00213 21 91 72 21

Résumé

La toxicité des venins de serpents constitue une difficulté majeure dans la préparation des sérums

anti-vipérins efficaces pour le traitement des envenimations ophidiennes. L’irradiation gamma a été

appliquée pour améliorer la qualité des immun-sérums.

Les venins de Cerastes cerastes et de Vipera lebetina ont été irradiés en utilisant deux doses de

rayons gamma (1 et 2 kGy) émises par le Cobalt (60

Co). Après irradiation, la toxicité de ces venins est

atténuée jusqu’à 10 DL50.

La filtration moléculaire des différents venins irradiés a permis d’obtenir des profils

chromatographiques totalement modifiés par rapport à ceux des venins natifs. De même, l'analyse

électrophorétique des venins natifs et irradiés par SDS-PAGE, révèle une hétérogénéité dans

l'électrophorégramme des échantillons irradiés.

L’étude biochimique de l’activité protéolytique des venins de Cerastes cerastes et de Vipera

lebetina, a révélé une diminution de cette activité enzymatique. Cette réduction est dose-dépendante. En

outre, l’activité phospholipasique du venin de Vipera lebetina s’est révélée radiosensible car totalement

abolie après l’application de la dose de 2 kGy, alors que cette activité est radiorésistante pour le venin de

Cerastes cerastes aux doses appliquées.

D’autre part, l’irradiation gamma semble préserver les propriétés immunologiques des molécules des

venins de serpents. En effet, l’immunisation de lapins avec les différents venins détoxifiés (1 et 2 kGy) a

permis d’obtenir des immun-sérums ayant des titres en anticorps élevés et une meilleure neutralisation de la

toxicité des venins de Cerastes cerastes et de Vipera lebetina. De plus, les résultats du Western blot ont

révélé que les anticorps anti-venins détoxifiés ont une meilleure immunoréactivité avec les différents

constituants des venins natifs comparés à ceux des anti-venins natifs.

Mots clés : Venin, Viperidae, Irradiation gamma, Détoxification, Immunogénicité.

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Détoxification des contituants du venin d’Androctonus australis hector par irradiation

gamma : Approche Immunoprotective

Boussag-Abib Lila et Laraba-Djebari Fatima Laboratoire de Biologie Cellulaire et Moléculaire, Faculté des Sciences Biologiques, USTHB.

Laboratoire de Recherche et Développement sur les Venins Institut Pasteur d’Algérie.

Courriel: [email protected]

RESUME

Le développement d’une protection efficace et sélective contre la toxicité des venins de scorpion est d’une très

grande importance clinique. Il est donc nécessaire de développer des techniques qui pourraient réduire la toxicité des

venins tout en gardant leur pouvoir immunogénique.

L’application des rayonnements ionisants gamma a été employé avec succès pour détoxifier le venin

d’Androctonus australis hector toute en préservant ses propriétés immunogéniques et antigéniques (Abib et Laraba-

Djebari, 2003).

Ces caractéristiques nouvelles des composants du venin d’Aah après irradiation, permet d’ouvrir des

perspectives dans les essais d’immunoprotection. Des expérimentations ont été réalisées sur des animaux

préalablement immunisés avec le venin ou sa fraction toxique Ftox-G50 irradiés, après 1, 3 et 6 mois ces animaux sont

envenimées avec le venin natif. Un mois après l’immunisation avec les deux immunogènes non toxiques, il a été

observé une protection quasi-totale des animaux contre des doses de 3 DL50. Ce pouvoir protecteur des animaux

persiste à 3 mois et à 6 mois après immunisation avec le venin irradié et ce jusqu’à une dose de 5 DL50 et 4 DL50 du

venin natif respectivement.

Une meilleure protection est observée lorsque les animaux sont immunisés avec la fraction Ftox-G50 ou le

pouvoir protecteur atteint des doses de 4 DL50, 10 DL50 et 8 DL50 respectivement à 1, 3 et à 6 mois après

immunisation.

L’immunoprotection observée est probablement due à la présence et à la persistance des anticorps

neutralisants circulants dans l’organisme des animaux immunisés.

Mots clés : Venin, Fraction Ftox-G50, Irradiation gamma, Immunoprotection.



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DETOXIFICATION DE LA TOXINE BOTULIQUE PAR RAYONNEMENT GAMMA : PRODUCTION

D’ANTICORPS

AMROUCHE Lynda, MERAD Asma-Saida et LARABA –DJEBARI Fatima

Laboratoire de biologie cellulaire et moléculaire, faculté des sciences biologiques, USTHB.Bab Ezzouar, Alger,

Laboratoire de Recherche et développement sur les venins Institut Pasteur d’Algérie.

Centre National de Référence des anaérobies et du botulisme de l’Institut Pasteur d’Algérie.

RESUME

Les toxines botuliques se divisent en sept (07) toxinotypes (A, B, C, D E, F et G). La toxine A est la forme la plus

grave. Une confirmation rapide en cas de suspicion clinique est indispensable. Notre étude a pour but principal de

développer des techniques de production d’anticorps neutralisants. Ces anticorps seront utilisés pour le typage des

toxines et l’identification rapide des clostridies toxinogènes.

Une souche de Clostridium botulinum de Type A 453+ particulièrement virulente a été isolée et identifiée à partir du

fromage fondu.

La toxine BoNT A est produite sur bouillon TGY. Après purification partielle, cet antigène a servi à la préparation

d’immuns sérums.

Par un procédé d’irradiation gamma en utilisant la source 60

Co, la toxicité de la BoNT A est atténuée avec différentes

doses d’irradiation.

La caractérisation immunologique des immuns sérums obtenus après hyperimmunisation de lapins avec la BoNT A

irradiée à 20 KGy révèle que les propriétés immunologiques de la toxine sont résistants aux rayonnements ionisants

gamma. Ces immun-sérums présentent un titre et une capacité neutralisante plus élevés que ceux obtenus avec la

toxine native.

Mots clés : Toxine botulique A, irradiation gamma, propriétés immunologiques, immuns sérums, titre neutralisant


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Les anticorps polyvalents : Leur utilisation en Immunothérapie antiscorpionique

Mendil A., Adi-Bessalem S., Saidi H., Sami-Merah S., Hammoudi-Triki D. et Laraba-Djebari F. Laboratoire de Biologie Cellulaire et Moléculaire, Faculté des Sciences Biologiques, USTHB Bab Ezzouar, Alger, Algérie.

Laboratoire de Recherche et Développement sur les Venins, Institut Pasteur d’Algérie.

RESUME

En Algérie, l’immun sérum produit par l’Institut Pasteur d’Algérie est un sérum monovalent dirigé contre les

molécules d’un seul venin qui est celui d’Androctonus australis hector. La difficulté d’identification du scorpion

incriminé lors d’une piqure, tant par les victimes que par le personnel de santé nous a conduit à préparer un sérum

polyvalent qui pourrait être d’indication plus large et plus performante.

Après préparation et purification d’un immun-sérum dirigé contre trois espèces endémiques (Androctonus australis

hector, Buthus occitanus tunetanus et Androctonus ameurexi), les anticorps obtenus sous forme de fragments F(ab’)2

ont été caractérisés. Leur capacité neutralisante des désordres histopathologiques et biochimiques a été évaluée.

Cet immun-sérum polyvalent semble être doué d’une importante capacité neutralisante. En effet, son

administration 30 minutes après envenimation, permet une restauration quasi-totale des structures tissulaires

altérées (myocarde, parenchyme pulmonaire et hépatique) avec normalisation des activités enzymatiques

sériques (GOT/GPT, LDH et CPK), et réduction des perturbations des paramètres métaboliques (glycémie,

urée, créatinine, cholestérol) induites par les venins.

Les résultats expérimentaux ont montré que l’immun sérum constitué de fragments F(ab')2 polyvalents

administrés dans un délai rapide (30 min) est capable de neutraliser la quasi-totalité des altérations observées

suite à l’envenimation. Il en ressort de cette étude, que cet immun-sérum pourrait être d’un grand apport

pour couvrir tous les polymorphismes existant dans notre pays.

Mots clés : Venin, Anticorps polyvalents, Immunothérapie, physiopathologie, Métabolisme.


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Formats d’anticorps : Utilisation dans un schéma thérapeutique après envenimation

expérimentale

Sami-Merah S, Adi-Bessalem S., Mendil A, Hammoudi-Triki, D et Laraba-Djebari F.


« Houari Boumediene » EL Alia BP 32, 16111, Alger, Algérie

Laboratoire de - Recherche et de Développement sur les Venins, Institut Pasteur d’Algérie.

RESUME

La taille des anticorps utilisés actuellement en immunothérapie est souvent un sujet de controverses. Leur

efficacité à neutraliser les toxines souvent de petite taille est une des difficultés majeures à surmonter dans les cas

cliniques les plus sévères.

Dans l’immunothérapie actuelle, le choix du type de fragments dánticorps à utiliser (F(ab’)2 ou Fab) est un

grand débat autour duquel les chercheurs essayent de justifier leur utilisation en se basant sur leurs propriétés

pharmacocinétiques. les fragments F(ab’)2 diffuse légèrement dans le compartiment tissulaire et sont lentement

éliminés. Alors que les fragments Fab présentent une meilleure diffusibilité et sont rapidement éliminés. Ces

avantages et inconvénients respectifs des deux fragments laissent les producteurs et les cliniciens départagés pour le

choix de la molécule neutralisante.

L’efficacité de différentes préparations d’anticorps (fragments Fab, fragments F(ab’)2 anti-FtoxG-50 ou leur

association F(ab’)2/Fab) dans la neutralisation des effets physiopathologiques induits par le venin dÁndroctonus

australis hector a été testée. L’administration de ces molécules 30 min après envenimation des animaux permet, une

neutralisation des toxines, une réparation des désordres tissulaire et métabolique avec rétablissement du processus

inflammatoire.

L’utilisation de chaque molécule d’anticorps seule permet une neutralisation des toxines circulantes au niveau

du sérum, du cœur et du pancréas. Elle permet également la neutralisation des œdèmes, des hémorragies et de la

leucocytose péritonéale ainsi quúne normalisation des taux de l’IL-6 et des activités enzymatiques (CK, LDH et

EPO). Il semble cependant que la combinaison des deux types de fragments F(ab’)2/Fab présente une meilleure

efficacité dans la neutralisation de toutes les perturbations causées par les constituants toxiques du venin.

Ládministration de límmunothérapie sous forme dún mélange des deux fragments Fab, F(ab´)2 pourrait être

une alternative dans le traitement des cas sévèrement envenimés par le venin d’Aah.

Mots clés : Venin, Toxine Aah II, Inflammation, Immunotherapie


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Action des cytokines Th1 (IFN-/ IL-12/) sur les scolex d’Echinococcus granulosus :

Immunosurveillance et nouvelle approche thérapeutique

Mezioug Dalila ; Amri Manel ; Bouaziz Samia & Touil-Boukoffa Chafia

Laboratoire de Biologie Cellulaire et Moléculaire- Faculté des Sciences Biologiques- Université des

Sciences et de la Technologie Houari Boumediene. Alger. Equipe « Cytokines et NOSynthases »

RESUME

L’ hydatidose est une affection parasitaire provoquée par le développement chez l‘homme et divers

mammifères de la forme larvaire d’Echinococcus granulosus vivant à l’état adulte dans le tube digestif de

certains mammifères carnivores essentiellement le chien. En Algérie, l’hydatidose est endémique et

représente par sa fréquence un véritable fléau. Malgré l’apparition, au cours des dernières années, de

médicaments de plus en plus actifs sur les larves de Cestodes, l’hydatidose relève encore largement de la

chirurgie. Le système immunitaire stimulé au cours des parasitoses peut être responsable de réactions

adverses ou inappropriées parfois sévères. En vue de situer l’implication du rapport Th1/Th2 dans

l’évolution de la pathologie, une analyse du profil cytokinique chez les patients atteints d’hydatidose a été

réalisée in vivo et in vitro. Les résultats obtenus montrent que les teneurs sériques en IFN-, IL-12 et IL-18

mesurées chez les patients atteints d’hydatidose à localisations fréquentes et répondant à une évolution

classique, sont nettement supérieures à celles observées chez les porteurs de localisations rares ou des

formes « à complications », chez lesquels une production substantielle en Il-4, IL-10 et IL-13 a été

détectée. Ces résultats indiquent que la production des cytokines Th1 est prédictive d’un bon pronostic, celle

des cytokines Th2 laisse envisager des formes d’évolution chronique ou des formes « à complications ». Ces

résultats ont été confortés par une étude in vitro portant sur l’étude de l’effet des cytokines Th1 : IFN-γ,

TNF-α, IL-12 et des cytokines Th2 : IL-4, IL-10 sur la viabilité des protoscolex en coculture avec les PBMC

et les monocytes/macrophages de patients hydatique. Un état de souffrance et de dégénérescence très

prononcée des protoscolex a été observé avec les cytokines Th1 associées à une production substantielle en

monoxyde d’azote. Cependant, un état de résistance des protoscolex a été observé avec les cytokines Th2.

Nos résultats suggèrent le rôle immuno protecteur des cytokines Th1 en particulier pour l’IFN-γ et l’IL-12.

Ces données suggèrent que le parasite Echinococcus granulosus induit une immunosuppression par le biais

des cytokines Th2 avec probablement l’implication d’un système de régulation via les Treg ; il est possible

que par ce mécanisme, que le parasite se protège des réponses immunitaires de l’organisme qui l’héberge. Il

échapperait ainsi aux réponses immunitaires. Ces résultats soulignent le rôle clé de l’utilisation du ratio

Th1/Th2 dans l’établissement d’un diagnostic précoce, dans l’immuno surveillance des patients et

permettent d’envisager de nouvelles stratégies thérapeutiques.

Mots clés : Hydatidose ; Cytokines ; stratégies thérapeutiques


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EFFET PREVENTIF DES ANTICORPS ANTI NEUTROPHILES

ET DE L’ACIDE CAFEIQUE

DANS UNE TOXICITE HEPATIQUE DE PIROXICAM

Z. Khiari 1 et B. Djerdjouri

1

1Laboratoire de Biologie Cellulaire et Moléculaire, Faculté des Sciences Biologiques (FSB).

Université des Sciences et de la Technologie Houari Boumediene (USTHB), BP 32 EL-ALIA 16111,

Bab-Ezzouar (Alger).

RESUME

Le but de cette étude est de rechercher l’effet des anticorps anti-neutrophiles de rats (IgG anti-PN) et de l’acide

caféique (CA), un inhibiteur non sélectif de la 5-lipooxygénase, sur l’infiltration des polynucléaires neutrophiles

(PN), lors d’une hépatotoxicité de piroxicam.

La toxicité a été induite par administration des doses toxiques D45 et D90 de piroxicam, un anti-inflammatoire non

stéroïdien non sélectif, à des rats blancs de souche wistar. Ce gavage est précédé ou non d'une injection

intrapéritonéale d’IgG anti-PN de rats ou d'une solution de CA 50mg/Kg. Les dosages des marqueurs du stress

oxydatif réalisés sur les homogénats hépatiques 6 heures après l’induction de la toxicité, ont montré une augmentation

de l’activité myéloperoxydase (enzyme marqueur de l’infiltration leucocytaire), et du taux de malondialdéhyde d’un

facteur de 2.5 après administration de la D45, et avec des facteurs de 7 et 5 respectivement après administration de la

D90 comparés à leurs témoins respectifs. L’activité catalase est réduite avec des facteurs de 0.62 et 0.36

respectivement avec les doses D45 et D90 de piroxicam. Le stress oxydatif s'est traduit par une stéatonécrose, une

nécrose et une importante infiltration des PN au niveau du tissu hépatique.

La neutralisation de l'infiltration des PN par les IgG anti-PN et le CA est associée à une prévention des atteintes

biochimiques et histologiques induites par les doses toxiques de piroxicam.

Mots clés : Piroxicam, hépatotoxicité, polynucléaires neutrophiles, anticorps anti-neutrophiles de rats, acide

caféique.


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Apport de la phytothérapie dans l’échinococcose murine

Samia Bouaziz, Manel Amri, Hadjira Zekri-Ariba, Dalila Mezioug & Chafia Touil-Boukoffa

Equipe : Cytokines & NO Synthases, LBCM-FSB-USTHB, Alger, Algérie

RESUME

La chirurgie reste le traitement de choix de l’hydatidose humaine malgré l’existence de quelques essais de

chimiothérapie. Nous nous sommes intéressés dans ce sens, à la recherche de nouvelles options

thérapeutiques en utilisant une stratégie phytothérapeutique . Ainsi, l’étude de l'effet de l’extrait aqueux

de graines de nigelle et de gingembre sur l’évolution d’une échinococcose expérimentale chez la souris

Mus musculus a été entreprise. Après infestation par injection intra-péritonéale de 2000 protscolexes /

souris, le traitement à été administré à une concentration de 1mg/ml. Après 7 mois d’infestation, une

diminution significative du taux d'enkystement a été notée chez les groupes traités. Nous avons observé

une régression importante après phytothérapie, la moyenne calculée du taux d’enkystement chez les

groupes traités est respectivement de 5 et 4. A l’inverse, la moyenne d’enkystement enregistrée chez les

témoins positifs est de 12,4. Notre étude montre le potentiel scolicidal du gingembre et des graines de

nigelle in vivo. Toutefois, l’identification des composés responsables de l’effet scolicidal apparait

nécessaire.


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Action Potentielle anti-Diabétique de Crataegus azarolus

Zidi Sourour1 & Henchiri Chérifa

1

Laboratoire de Biochimie, Département de Biochimie,

Université Badji Mokhtar, Annaba

RESUME

Crataegus azarolus est une plante appartenant à la famille des Rosacées, traditionnellement utilisée aussi

bien dans les pays arabes que dans la région d’El Tarf à l’est de l’Algérie, pour le traitement du diabète.

Des rats Wistar albinos rendus diabétiques par injection intra-péritonéale d’Alloxane et recevant un

régime standard ont été traités avec l’extrait aqueux obtenu par infusion des feuilles aux doses de 150(d1) et

300 mg/kg (d2) et par la metformine (28 mg/kg de poids corporel), deux fois par jour. Le traitement a

commencé 72 heures après injection de l’Alloxane et la confirmation de l’hyperglycémie.

Les résultats obtenus relatifs à la mesure de la glycémie à jeun, avant et après sacrifice ont révélé

qu’après un traitement de 12 jours, la dose d1 a engendré un effet correcteur du diabète supérieur à celui de

la dose d2 et de la metformine. Une réduction significative des glycémies mesurées ( p<0, 001) et de

certains paramètres :lipides totaux (p<0,01), triglycérides(p<0,05), cholestérol total(p<0,01), LDL(p<0,01),

urée(p<0,01) et créatinine(p<0,01) a été observée. Parallèlement une augmentation non significative du

taux des HDL chez les individus diabétiques traités a été relevée. L’étude histologique du pancréas des rats

diabétiques a montré que Crataegus azarolus aux deux doses de l'extrait d1 et d2 a exercé une restauration

des îlots de Langerhans lésés au préalable par l'effet de l’Alloxane. La présence résiduelle de l’insuline dans

le sang a confirmé cet effet. L’étude parallèle phytochimique de l’extrait a été entreprise et a révélé la

présence de principes actifs tels que les flavonoïdes, les triterpènes et les saponosides qui pourraient être à

l’origine de l’effet antidiabétique observé.

Les résultats obtenus suggèrent le rôle potentiel thérapeutique de Crataegus azarolus

.

Mots clés : Diabète, Plantes Médicinales, Phytothérapie, Alloxane, Antidiabétiques,

Pharmacognosie.


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P15

CYTOTOXICITE INDUITE PAR LE VENIN D’ANDROCTONUS AUSTRALIS HECTOR

SES TOXINES PURIFIEES

Bekkari Nadjia, Hammoudi-Triki Djelila, *Martin-Eauclaire Marie France et **Laraba-Djebari Fatima

- Laboratoire de Biologie Cellulaire et Moléculaire, Faculté des Sciences Biologiques, Université des Sciences et de la

Technologie « Houari Boumediene » EL Alia BP 32, 16111, Alger, Algérie

- Laboratoire de - Recherche et de Développement sur les Venins, Institut Pasteur d’Algérie. 3 CNRS UMR3132 CRN2M, IFR Jean-Roche, Université de la Méditerranée, Faculté de Médecine Nord, Bd Pierre Dramard,

13916, Marseille, Cedex 20, France

**Corresponding author: E-mail: [email protected]

RESUME

La toxicité de venin de scorpion, est liée aux neurotoxines qui affectent le fonctionnement des canaux ioniques

des cellules excitables et induisent une libération massive de neurotransmetteurs. Les symptômes associés à ces

perturbations sont variables allant de l’hyper, hypothermie, défaillances cardiaques et évolution dans les cas sévères

avec un œdème pulmonaire. Les symptômes sont liés à un syndrome inflammatoire

Le venin d’Androctonus australis hector (AaH) induit des perturbations du métabolisme général avec des

augmentations sériques des médiateurs marqueurs de la cytotoxicité et de l’inflammation.

L’étude de l’implication du venin et de ses composants toxiques, fraction FtoxG50 et toxines purifiées, AaH I

et AaH II dans l’induction de l’activité lytique du complément et l’augmentation des taux sériques des cytokines a été

entreprise pour expliquer les mécanismes de cette pathogénèse afin de proposer une thérapie symptomatique qui serait

complémentaire à l’immunothérapie.

Le système du complément sérique est activé par le venin d’AaH, sa fraction FtoxG50 et ses toxines AahI et

AaHII en deux phases, la première phase d’activation est atteinte avec un taux maximum à 3 H, la deuxième phase

apparait à 24 H. Cette activité est moins importante au niveau pulmonaire, le premier pic est précoce et apparait à 1 H,

le second étant plus tardif (48 H). Au niveau hépatique, l’activité lytique apparait en une seule phase retardée.

Cependant, l’augmentation du taux des cytokines, pro-inflammatoires (IL1 et 6), anti-inflammatoire (IL10), de

la molécule d’adhésion (ICAM) au niveau hépatique est accentuée sous l’effet de la toxine AaHII.

L’activité lytique du complément est inhibée par un antagoniste des récepteurs muscarinique de l’acétyle

choline de (l’atropine), aucun effet n’est observé avec un antagoniste des récepteurs β1et β2 adrénergiques (le

propranolol). Ces résultats pourraient nous être utiles pour comprendre les mécanismes par lesquels la cytotoxicité est

induite par le venin ou ses composants moléculaires.

Mots Clés : Venin, Toxines, Système du Complément, Inflammation, traitements.



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P16

Biodisponibilité et rôle hépato-protecteur du lycopène chez le Rat Wistar.

Yefsah-Idres A.1, 2

, Benazzoug Y.2, Othmani K.

2, Djenane N.

3, Sifer R.

3

1. Institut National Agronomique, Alger (Algérie).

2. BRMEC, Laboratoire BCM (FCB/USTHB), Alger (Algérie)

3. Laboratoire de Biologie, CHU de Tizi-Ouzou (Algérie)

RESUME

Le rôle des espèces réactives de l’oxygène (ROS) et les dommages des biomolécules sont les axes

principaux de la recherche actuelle liée aux maladies chroniques. Plusieurs auteurs ont montré le rôle des

antioxydants, en particulier les caroténoïdes, dans la protection de l’organisme agissant comme agents

inactivant les ROS.

Dans ce travail, nous nous sommes intéressés à la biodisponibilité et au rôle du lycopène au niveau

hépatique. L’expérimentation a porté sur des rats Wistar répartis en 4 lots.

Le protocole expérimental comporte la détermination du poids corporel et de l’indice hépato-somatique

(IHS), le dosage du lycopène sérique et tissulaire (par HPLC), une étude histologique (fixation au Bouin

aqueux, coloration à l’hématoxyline-éosine) et un dosage sérique de certaines enzymes du bilan hépatique.

Nos résultats ne montrent pas de variations importantes du poids corporel mais la détermination de l’IHS a

mis en évidence une hypertrophie du foie. Le dosage du lycopène au niveau hépatique a été prouvé.

L’étude histologique a permis d’observes une désorganisation de la structure du parenchyme hépatique et

des lésions de type stéatose chez les rats intoxiqués au CCl4. Les observations effectuées montrent que

l’administration de lycopène réduit ces altérations. Le dosage de certaines enzymes hépatiques confirme les

altérations cellulaires et tissulaires observées avec le CCl4. Une réduction du taux de ces enzymes est notée

chez les rats intoxiqués et traités au lycopène.

En conclusion, cette étude met en exergue d’une part la biodisponibilité du lycopène et d’autre part son rôle

hépato-protecteur.

Mots clés : Lycopène -Biodisponibilité -Altérations hépatiques -Rats.


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Hyperhomocystéinémie et processus athéroscléreux chez Psammomys obesus

Zerrouk F.1 ; Hamdis N.

1 ; Othmani-Mecif K.

1 ; Khedis L.

1 ; Chaouad B.

1 ; Ghoul A.

1 ; Rezkallah N.

2 ;

Neggazi S. 2

; Boumaza S.2

; Berdja S2. ; Aouichat-Bouguerra S.

2 ; Cherifi M.

3 ; Benazzoug Y.

1

1BR. MEC ;

2PPCM. FSB/USTHB. BEZ. Alger ;

3Lab. Bioch. Parnet .HDey Alger

RESUME

Actuellement, il est bien établi que l’hyperhomocystéinémie modérée est un facteur de risque des maladies

cardiovasculaires dont l’athérosclérose.

L’objectif de ce travail, est de mettre en évidence les troubles biochimiques et histologiques liés à une surcharge en

méthionine chez le rat des sables, Psammomys obesus.

La méthionine est administrée par injection intra-péritonéale à raison de 70 mg/Kg de poids corporel / jour pendant 6

mois.

Cette administration semble affecter l’ensemble des paramètres biochimiques plasmatiques. Par ailleurs,

l’homocystéinémie augmente d’un facteur 7,6 au terme de l’expérimentation. L’étude biochimique est complétée par

une élecrophorèse horizontale des lipoprotéines plasmatiques de Psammomys obesus soumis à la méthionine pendant

3 mois. L’analyse des lipidogrammes met en évidence un déséquilibre des fractions lipoprotéiques marqué par une

importante diminution de 70% des HDL et une augmentation de 35% des VLDL-LDL associée à l’apparition de la

lipoprotéine (a).

Les changements structuraux révélés par les techniques histologiques et histochimiques appropriées montrent que

l’hyperhomocystéinémie altère l’organisation et la structure des différentes couches du cœur et de l’aorte. Ces

altérations sont représentées par des agrégations sanguines, une hypertrophie de l’endothélium, une modification de la

composition de la matrice extracellulaire marquée par une accumulation de collagènes et de protéoglycannes, et une

désorganisation de la trame élastique aortique. Un épaississement de l’épicarde et de l’adventice est observé.

Nos résultats montrent que les altérations engendrées par une hyperhomocystéinémie perturbent non seulement la

biochimie plasmatique mais également et fortement la structure cellulaire et tissulaire de la paroi cardiaque et

vasculaire.

Mots-clés : hyperhomocystéinémie, athérosclérose, Psammomys.


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Corrélation hyperhomocystéinémie - désordres lipidiques plasmatiques et tissulaires,

chez le rat Wistar Rattus norvegicus.

Ghoul A1. ; Fernane A

1. ; Taghlit A

1. ; Othmani K

1. ; Chaouad B

1. ; Zerrouk F

1. ; Cherifi M

3.; Griene L

4. ;

Yargui L 5. ;

Aouichat-Bouguerra S

2. ; Benazzoug Y

1.

1. Biochimie & remodelage de la matrice extracellulaire. LBCM. FSB/USTHB BP32 El Alia. Bab Ezzouar.16111. Alger. Algérie

2. Physiopathologie cellulaire & moléculaire. LBPO. FSB/USTHB BP32 El Alia. Bab Ezzouar.16111. Alger. Algérie

3. Laboratoire de biochimie Hôpital Parnet. Hussein Dey.Alger.

4. Laboratoire d’endocrinologie.CPMC .Hôpital Mustapha. Alger.

5. Laboratoire central de l’hôpital Mustapha Bacha. Alger

RESUME

Plusieurs mécanismes ont été avancés, dont la théorie lipidique, pour expliquer les propriétés athérogènes de

l’homocystéine (McCully 1969). Nous avons précédemment montré que l’hyperhomocystéinémie constituait un f

acteur de risque des maladies cardiovasculaires.

Nous nous sommes proposé d’établir la corrélation hyperhomocystéinémie - statut lipidique.

Les rats Wistar sont répartis en un lot témoin et un lot soumis à une administration de méthionine à raison de 200

mg/Kg de poids corporel / jour pendant 6 mois.

Le suivi des animaux a comporté une pesée hebdomadaire et des ponctions sanguines mensuelles pour le dosage de

l’homocystéine (méthode FPIA), du cholestérol total et des triglycérides (méthode enzymatique colorimétrique).

Les lipoprotéines plasmatiques ont fait l’objet d’une analyse grâce à une électrophorèse horizontale sur gel d’agarose.

En fin d’expérimentation, les rats sont sacrifiés, le testicule, objet de ce travail, est prélevé, rapidement pesé et

immergé dans le Folch pour évaluer les lipides totaux.

Nos résultats montrent, que l’administration chronique de méthionine pendant 6 mois engendre chez le rat Wistar, une

hyperhomocystéinémie modérée. Celle-ci ne semble pas affecter le poids corporel ainsi que le poids moyen du

testicule.

Nous avons enregistré des fluctuations similaires des lipides plasmatiques (cholestérol total et triglycérides) dans les 2

groupes de rats. Par contre l’analyse des lipoprotéines plasmatiques met en évidence chez les rats expérimentés, une

diminution des particules protectrices associée à une augmentation des particules athérogènes.

En conclusion, nos résultats montreraient que l’athérogénicité de l’homocystéine serait médiée en partie par la

détérioration du statut lipidique. Mots clés : Athérosclérose–Hyperhomocytéinémie-Lipides

Folch J.; Lees M and Stanly G.H.S. (1957). A simple method for the isolation on purification of total lipids from animal tissues. J. Biol. Chem., 226: 497-509.

McCully K.S. (1969). Vascular pathology of homocysteinemia: implications for the pathogenesis of arteriosclerosis. Am. J. Pathol., 56 : 111–128.

Richmond W.(1973). Preparation and proprieties of cholesterol oxidase from Nocardia sp.And its application to the enzymatic assay of total cholesterol in serum. Clin. Chem., 19 : 1350 – 1356.

Yong D. L.; Pestaner L.; Gillerman V. (1975). Effects of drugs on clinical laboratory tests.Clin. Chem., 21: 1D-432D


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P19

HYPERHOMOCYSTEINEMIE, SYSTEME CARDIOVASCULAIRE, GESTATION

K. Othmani-Mecif 1

, L. Khedis 1, F. Zerrouk

1, B. Chaouad

1, A. Ghoul

1, A. Fernane

1, A.Taghlit

1, A.

Yargui 2, S. Aouichat

3, Y. Benazzoug

1.

1. MEC, BCM, FSB ;

2 Lab. Biochimie, CHU M. Bacha ;

3PCM, LBPO, FSB /USTHB, Alger

RESUME

L’hyperhomocystéinémie induite par surcharge en méthionine constitue un facteur de risque de maladies

cardiovasculaires. Au cours de la gestation, les vaisseaux sanguins sont soumis aux stress physique et

biochimique. Peu de travaux portent sur la triade homocystéine-vaisseaux sanguins- gestation. Notre travail

évalue l’influence de l’état gestationnel sur le système cardiovasculaire éprouvé par

l’hyperhomocystéinémie induite.

L’expérimentation consiste à administrer de la Met (500 mg/jour) pendant 3 mois ; quatre lots de lapins

adultes (n=8 chacun) sont constitués : lot témoins non gestantes (TNG), lot témoins gestantes (TG), lot non

gestantes avec Met (NGM) et lot gestantes avec Met (GM). L’excès de Met élève la teneur en homocystéine

de 1000 % pour le lot NGM et de 12% pour les GM. Le rapport des lipoprotéines β/ α atteint la valeur 3,07

vs 2,17 sous l’effet de la Met (NGM) (p<0,01) alors qu’il est réduit chez les GM (2,44 vs 2,37).

La Met en surcharge réduit l’activité de la lactate DHase et de la phosphatase acide chez les NGM, la teneur

lipidique chez les GM vs TG (90 ± 31 µg/mg vs 190 ± 70 µg/mg) (p<0,05), les triglycérides accumulés au

cours de la gestation et la teneur en cholestérol aortique pour ce lot (GM) (p<0,05). Par contre, l’excès de

Met provoque chez les NGM, une légère augmentation des triglycérides, une modification de la structure

aortique au niveau de l’intima et de la média (néointima). Une importante désorganisation du tissu cardiaque

est observée, avec apparition d’espaces entre les cardiomyocytes et fibrose interstitielle.


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P20

Hyperhomocystéinémie induite par une hypothyroïdie et processus athéroscléreux

chez Psammomys obesus

Chaouad B1, Neggazi S

2, Sahraoui A

2, Zerrouk F

1, Ghoul A

1, Othmani-Mecif K

1, Cherifi M

3, Griene

L4, Aouichat-Bouguerra S

2, Benazzoug Y

1

1 BRMEC et 2 PPCM, FSB/USTHB Bab Ezzouar, Alger.

3 Lab. Bioch, Hôpital Parnet, Alger.

4 Hormonologie CPMC. CHU Mustapha Alger.

RESUME

L'hypothyroïdie est un facteur de risque des maladies cardiovasculaires associée à une hyperhomocystéinémie et

hypercholestérolémie.

Objectif : Nous avons étudié la relation hypothyroïdie-hyperhomocystéinémie-et processus athéroscléreux chez le Rat

des sables (Psammomys obesus).

Méthodes : Les Rats des sables sont répartis en un lot témoin nourri de plantes halophiles et un lot traité recevant le

même régime alimentaire associé à une administration orale de carbimazole (0,03%) pendant 6 mois. L’ensemble des

animaux a fait l’objet de prélèvements sanguins en vue du dosage de certains paramètres biochimiques plasmatiques

(cholestérol, homocystéine), d’hormones thyroïdiennes et de l’analyse des lipoprotéines par électrophorèse

horizontale. Les techniques histologiques réalisées en fin d’expérimentation ont permis une étude histo-

morphométrique de la paroi aortique de Psammomys obesus.

Résultats : Nos résultats montrent chez les animaux hyperhomocystéinémiques, une diminution de la T3 et T4, une

hyperhomocystéinémie et une hypercholestérolémie, une diminution des HDL associée à une augmentation des LDL-

VLDL.

L’analyse histologique de l’aorte a mis en évidence chez les rats des sables hyperhomocystéinémiques, une importante

agrégation sanguine et des altérations cellulaires (changement d’orientation des cellules musculaires lisses,

prolifération des fibroblastes adventiciels). La composition de la matrice extracellulaire est modifiée par une

accumulation de collagènes et de protéoglycannes, une désorganisation et dégradation de la trame élastique.

L’ensemble des altérations observées caractérise l’installation d’un processus athéroscléreux.

Conclusion : Les résultats obtenus montrent que l’hypothyroïdie constitue un facteur de risque des maladies

cardiovasculaires chez le rat des sables, Psammomys obesus, via une hyperhomocystéinémie et une

hypercholestérolémie.

Mots clés : Athérosclérose-Hyperhomocystéinémie-Hypothyroïdie


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MODULATION PARTIELLE PAR L’ASPIRINE DU STRESS OXYDATIF ET DE

LA TOXICITE MITOCHONDRIALE

DANS UN MODELE DE DEFAILLANCE CARDIAQUE A L’ISOPRENALINE

M. Izem-Meziane1 et B. Djerdjouri

1



RESUME

Le stress oxydatif et le dysfonctionnement mitochondrial sont impliqués dans la pathogenèse des maladies

cardiovasculaires. L'aspirine reste l’anti-agrégant plaquettaire le plus utilisé en clinique.

Nous avons étudié l’effet de l’aspirine sur un modèle expérimental de défaillance myocardique (Infarctus du

myocarde) induite par l’isoprenaline chez le rat Wistar.

Les rats reçoivent 30 mg/kg d’aspirine par voie orale une heure avant l’administration de 150 mg/kg d’isoprénaline

par voie sous cutanée. Les ventricules gauche (VG) sont prélevés, les dosages de l’activité de la myeloperoxydase

(MPO), du monoxyde d’azote (NO) et du malondialdéhyde (MDA), de l’activité catalase et du taux de GSH ont été

mesurés.

Les taux de MDA et de NO et l’activité MPO doublent chez les rats traités par l’isoprenaline comparés aux contrôles.

Ils sont respectivement de 2,17±0,15 vs 0,94±0,05 nmoles/ mg de protéines ; 11,32±0,82 vs 5,58±0,31 μM H2O2/min/

mg de protéines et 13,91±1,34 vs 6,77 ± 0,56 μM/mg de protéines.

Le taux de GSH et de catalase chez les rats traités par l’isoprenaline diminue comparés au témoins avec

respectivement 24,74±1,11 vs 15,44±0,33 nmoles/mg de protéines et 21,96±0,84 vs 10,25±0,71 U /mg de prot pour la

catalase).

Le stress oxydatif implique un dysfonctionnement mitochondrial, traduit par une augmentation de la perméabilité

mitochondriale comparativement aux témoins (0,10±0,01 vs 0,026±0,003 UDO / mg de protéines/5min).

L’asprine 30 mg/kg contrôle partiellement le stress oxydatif en réduisant l’activité MPO et le gonflement

mitochondrial de de près de 50%/ au traité isoprénaline et

Mots clés : Aspirine, isoprenaline, infarctus du myocarde, mitochondrie, stress oxydatif.


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LA PRODUCTION D’ANIONS SUPEROXYDE ET DE MONOXYDE D’AZOTE

PAR LES POLYNUCLEAIRES NEUTROPHILES DE SOURIS BALB/c EST

MODULEE DIFFEREMMENT PAR LEISHMANIA INFANTUM LEM 75

N. Tounsi1 et B. Djerdjouri

1

1Laboratoire de Biologie Cellulaire et Moléculaire, Faculté des Sciences Biologiques (FSB). Université des Sciences

et de la Technologie Houari Boumediene (USTHB), BP 32 EL-ALIA 16111, Bab-Ezzouar (Alger).

RESUME

Le contrôle efficace de l’infestation leishmanienne repose sur une production adaptée des espèces réactives

de l’oxygène (ROS) et de l’azote par les Leucocytes neutrophiles et macrophages.

Les polynucléaires neutrophiles (PN) inflammatoires de souris BALB/c sont obtenus par après une

peritonite au thioglycollate de sodium 3%. Leur activité bactéricide a été mesurée en présence de

Leishmania infantum, LEM75 (Laboratoire National de Référence des Leishmanies, Institut Pasteur, Alger),

par la methode de réduction du cytochrome C exogène par les anions O2- à 550nm et le dosage des nitrites

(NO) dans les surnageants de culture (Méthode de Griess).

Les résultats montrent que le taux d’O2- basal (28,87±0,03 nM de Cytc réduit /10

6 PN), est augmenté de 186%, après

incubation de 106 PN pendant 1 h avec 4x10

6 promastigotes de L. infantum, LEM75. La production d’O2

- par les PN

préalablement incubés avec L. infantum, LEM75 est potentialisée de 347% par une stimulation de 30 min avec 160

nM de phorbol 12 myristate, 13 acetate (PMA).

La production de NO dans le surnageant de culture des PN incubés avec 4x106

parasites est inhibée de 34.67% par

rapport à celle de PN prétraités 24 h avec 160 nM de PMA seul (Activité résiduelle de 65.33% ±0. 027 µM NO2-/ 10

6

PN).

L’ensemble de ces résultats montrent que les leishmanies internalisées interfèrent sélectivement avec l’activité

iNOsynthase des PN, sans modifier la production d‘anion superoxyde par la NADPH oxydase, impliquant les

protéines kinases c conventionnelles.

Mots clés : LEISHMANIA INFANTUM LEM 75, Leucocytes neutrophiles, anion superoxyde, monoxyde d’azote.


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EFFET PREVENTIF DE L’ASPIRINE SUR LE STRESS OXYDATIF

INDUIT PAR ESCHERICHIA COLI, CHEZ LE RAT BLANC

I. Rahim1, M. Izem

1 et B. Djerdjouri

1



RESUME

Notre travail avait pour objectif d’étudier le rôle de l’aspirine dans la prévention du stress oxydatif induit par un choc

septique par Escherichia coli inactivée au niveau du ventricule gauche.

Le choc septique a été induit chez les rats blancs par deux injections, en intrapéritonéale, d’une dose subléthale de 1,5

109 UFC/kg d’Escherichia coli inactivée.

Les résultats obtenus montrent une augmentation de près de 194% du taux du monoxyde d’azote (NO) et de 98% le

taux de malondialdehyde (MDA) comparés taux mesurés dans les homogénats de ventricules gauches témoins, 48

heures après induction du choc septique.

Le prétraitement par l’aspirine 30 mg/kg, 1 heure avant l’induction du choc septique prévient le stress oxydatif.

L’aspirine diminue de près de 86,3% et de 43,5% respectivement, les taux de NO et de MDA, comparés aux taux

mesurés dans les ventricules gauches des rats septiques.

Ces résultats suggèrent que la défaillance cardiaque au cours du choc septique à E. coli inactivée, implique un stress

oxydatif caractérisé par une augmentation du taux de NO et du MDA.

L’aspirine un AINS, inhibiteur sélectif de la cyclo-oxygénase-1, permet de prévenir le stress oxydatif induit par E.coli

inactivée au niveau du ventricule gauche.

Mots clés : Choc septique, Escherichia coli, stress oxydatif, malondialdehyde, monoxyde d’azote, aspirine.


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MODULATION PHARMACOLOGIQUE DU STRESS OXYDATIF INDUIT

CHEZ DES SOURIS BALB/C PAR LEISHMANIA MAJOR (LIPA 1126)

- ETUDE A L’AIDE DU DICLOFENAC-NA ET DE LA QUERCETINE

R. Belkhelfa-Slimani 1 et B. Djerdjouri

1

1Laboratoire de Biologie Cellulaire et Moléculaire, Faculté des Sciences Biologiques (FSB). Université des

Sciences et de la Technologie Houari Boumediene (USTHB), BP 32 EL-ALIA 16111, Bab-Ezzouar (Alger).

RESUME

Une leishmaniose cutanée expérimentale induite par le parasite Leishmania major chez des souris BALB/c a

été modulée par le diclofénac-Na (Diclo-Na) et la quercétine (Qr).

Les souris sont infectées au niveau de la patte postérieure gauche par 3 x 106 promastigotes Leishmania

major (MHOM/DZ/2000/LIPA1126, Leishmania, Institut Pasteur, Alger). A la 4ème

semaine post infection,

les souris ont reçu 4mg/kg/j de Diclo-Na (lot1), 25 mg/kg /jour de Qr (lot 2) ou du NaCl 0.9% (lot 4).

Le volume des pattes des souris infectées augmente parallèlement à l’activité arginase qui augmente de

351% (p≤0,01) après 9 semaines d’infection. Au contraire, le taux des nitrites est réduit de 36% (p≤0,02).

Le diclo-Na et la Qr réduisent respectivement, la taille de l’œdème plantaire à 94,26% et 76,87% et la

charge parasitaire à 28 % et 36 %. L’activité arginase à 54% et 42%. Le taux des nitrites (activité iNO

synthase) est restauré à 75% et 83%, après 8 semaines ((p≤0,001).

Le diclo-Na ne réduit pas l’infiltration des PN (activité myeloperoxydase, MPO) et des macrophages

(activité α-naphtyl acétate estérase, NAE), alors que la Qr réduit le taux de cellules inflammatoires dans les

tissus infectés. Ces effets sont confirmés par l’étude histologique des pattes et ganglions lymphatiques. Les activités anti oxydantes du diclo-Na et de la Qr ont réduit le stress oxydatif dépendant des phagocytes, les lésions

et le taux de parasitisme des tissus infectés.

Mots clés : Leishmania major; DiclofénacNa; Quercétine; Arginase; Myeloperoxydase, NO synthase, α-naphtyl

acétate estérase.


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EFFET DE L’ACIDE NIFLUMIQUE SUR LA PHYSIOLOGIE

MITOCHONDRIALE ET LA PROLIFERATION DES CELLULES HT-29

I. Amrouche-Mekkioui 1 et B. Djerdjouri

1



RESUME

La cyclooxygénase 2 (COX-2), une enzyme qui produit hydrolyse l’acide arachidonique en prostanoïdes, a

été impliquée dans la cancérogenèse colique. Elle intervient en inhibant l’apoptose, dont la phase

effectrice consiste en l'ouverture des pores de transition de perméabilité mitochondriale (PTPC) et la

libération de protéines apoptogènes.

L’acide niflumique (Nif) est un anti-inflammatoire non stéroïdien (AINS), qui inhibe les deux isoforme de

cyclooxygénases avec un effet préférentiel sur la COX-2.

Nous avons étudié l’effet de l’acide niflumique (Nif) sur la physiologie des mitochondries de foie de rat

(gonflement et respiration), sur la prolifération des cellules HT-29 (lignée épithéliale intestinale dérivées de

cancer colique humain) et la libération d’IL-8 induites par le TNFα et le PMA.

Nos résultats montrent que le Nif provoque l’ouverture des pores de transition de perméabilité (PTPC, 100-

150µM) et découple la phosphorylation oxydative des mitochondries (10-150µM). Le LPS multiplie leur

taux de prolifération par un facteur de 3.5 à J4. Le Nif 250 µM a un pouvoir anti prolifératif sur ces cellules.

Le Nif (50-100µM) augmente la production d’IL-8 par les cellules HT-29 en absence et en présence de

TNFα, alors qu’à des doses plus élevées il semble avoir l’effet inverse (250 à 750µM). Le Nif n’a aucun

effet sur la production d’IL-8 stimulée par le PMA. Le Nif possède un effet anti prolifératif potentiel.

Mots clés : HT-29, AINS, mitochondrie, IL-8, TNFα, PMA.


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P26

EFFET PROTECTEUR DE LA N-ACETYL CYSTEINE

DANS UNE COLITE INDUITE PAR L’ACIDE ACETIQUE

A. Tchakal 1, Z. Khiari

1 et B. Djerdjouri

1

1Laboratoire de Biologie Cellulaire et Moléculaire, Faculté des Sciences Biologiques(FSB). Université des Sciences et de la

Technologie Houari Boumediene (USTHB).

BP 32 EL-ALIA 16111, Bab-Ezzouar (Alger).

TEL/FAX: 021. 24. 79. 50 à 64 postes 942; 021. 24. 72. 17

RESUME

La perturbation de l’homéostasie redox (ou stress oxydatif) a été impliqué dans la pathogenèse de la colite ulcérative

humaine.

Le but de cette étude est de rechercher l’effet protecteur de la N-Acétyl Cystéine (NAC), un antioxydant et précurseur

du glutathion sur l’inflammation colique.

Des souris blanches (Mus musculatus, souche Swiss) d’un poids de 22 ±2g reparties en 3 lots de 4 souris, ont reçu

une injection intra-rectale d’une solution d’acide acétique (5%) préparée dans de l’eau physiologique (NaCl 9‰),

précédée ou non d’une injection intra-péritonéale de NAC 150mg/kg, 30 minutes avant l’induction de la colite.

Les activités enzymatiques myeloperoxydase, MPO (enzyme marqueur de l’infiltration leucocytaire), le taux de

malondialdehyde, MDA (marqueur de la peroxydation lipidique), le taux du monoxyde d’azote, NO ont été mesurés

dans les homogénats coliques parallèlement à une étude histologique, 18 heures après l’induction de la colite.

Les taux de NO et de MDA et l’activité MPO ont significativement augmenté de 1,56, 2,57 et 2,7 fois, par rapport

aux témoins respectifs.

Le traitement avec 150mg/kg de NAC 30 minutes avant l’injection de l’acide acétique, révèle une

diminution significative des taux de NO, MDA et de l’activité MPO coliques de 30%, 50% et 44,57%,

respectivement. L’effet protecteur de la NAC a été confirmé par l’étude histologique.

Mots clés : Stress oxydatif, colite, acide acétique, N acétyl cystéine, malondialdehyde, myeloperoxydase, monoxyde

d’azote.


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L’APOCYNINE, UN INHIBITEUR DE LA NADPH OXYDASE DES PHAGOCYTES,

RESTAURE LA BALANCE REDOX

DANS UNE COLITE AU TNBS CHEZ LA SOURIS BALB/C

N. Rebbah1, S. Mouzaoui

1 et B. Djerdjouri

1



RESUME

Le disfonctionnement du système immunitaire de la muqueuse ainsi que le stress oxydatif induit par le déséquilibre

du rapport oxydant/anti-oxydant, conduisent à l’altération de l’intégrité et de la fonction du tissu intestinal.

Dans ce travail, l’apocynine, un flavonoïde antioxydant a été utilisée pour moduler le stress oxydatif dans un

modèle expérimental de colite ulcéreuse induit in vivo par l’acide trinitrobenzène sulfonique 30mg/kg.

L’effet protecteur de l’apocynine sur les atteintes de la paroi intestinale engendrées par le TNBS, a été évalué par

une étude biochimique (dosage du taux de malondialdehyde MDA, de l’activité myeloperoxydase MPO, de

l’activité catalase CAT et du taux de glutathion GSH), parallèlement à une étude histopathologique. L’évolution de

la CU est étudiée selon un protocole de 3, 7 et 10J.

Le TNBS 30mg/kg a induit une inflammation du colon, caractérisée par une infiltration de leucocytes neutrophiles

(PN). Le relargage des enzymes granulaires comme la MPO, dont le taux est augmenté de 37% par rapport aux

témoins induit une peroxydation sévère du tissu colique (≈100%). Parallèlement, la colite est associée à une

inhibition l’activité CAT (33%) et une déplétion du taux de GSH (31%), marqueurs du système antioxydant.

Le traitement avec l’apocynine 25 mg/kg réduit le taux de MDA et l’activité MPO et restaure l’activité CAT et le

taux de GSH. Ceci suggère que l’inhibition sélective de la NADPH oxydase 2 (NOX2), une enzyme

caractéristique des phagocytes par l’apocynine réduit l’inflammation et les dommages tissulaires engendrés par le

TNBS.

Mots clés : Colite ulcéreuse, stress oxydatif, TNBS, apocynine.


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P28

COLITE A L’ACIDE TRINITROBENZENE SULFONIQUE.

CARACTERISATION A L’AIDE D’UN ANTIOXYDANT, LA CURCUMINE

S. Mouzaoui1 et B. Djerdjouri

1



RESUME

Dans cette étude l’effet de la curcumine (CUR), une molécule antioxydante a été recherchée dans la modulation d’une

colite chronique induite expérimentalement par l’acide trinitrobezène sulfonique (TNBS) chez des souris de souche

Swiss.

L’instillation rectale d’une dose de TNBS 30 mg/kg, entraîne une mortalité de 27% au 14ème

jour. Ce taux de mortalité

est nul après une administration quotidienne de 25mg/kg de curcumine administrée par voie intra péritonéale.

Le taux des nitrites, marqueur de l’activité NO synthase (NOS), malonyldialdehyde (MDA, marqueur de la

peroxydation des lipides) et de l’activité Myeloperoxydase (MPO, marqueur de l’infiltration des polynucléaires

neutrophiles, PN) mesurés dans les homogénats du colon sont respectivement 5, 4 et 8 fois supérieurs aux taux basals

(4.351±1.696 µM de nitrites/mg de protéines, 0.016±0.002 DO 532nm éq MDA/mg de protéines et 0.064±0.010 DO 460

nm éq MPO/min/mg de protéines) 14 jours après instillation du TNBS.

A partir de 7ème

jour, le stress oxydatif induit par le TNBS est efficacement contrôlé après le traitement des souris

avec la curcumine.

La curcumine restaure partiellement l’activité catalase réduite à 80% par le TNBS (activité contrôle : 1.015±0.056

U/mg de protéine) à partir de 3ème

jour du traitement, par contre le taux physiologique de GSH (soit 0.523±0.075 DO

12nm/mg de protéine) n’est rétabli qu’après 14 jours. Ces résultats ont été confirmés par l’étude histologique.

Ces résultats suggèrent que la curcumine, a rétabli l’équilibre des systèmes prooxydants/antioxydants en faveur de ces

derniers, dans une colite au TNBS, un modèle expérimental de la maladie de Crohn.

Mots clés : Acide trinitrobenzène sulfonique, curcumine, stress oxydant.


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P29

UTILITE DES CELLULES VERO DANS LA CARACTERISATION

DE LA TOXICITE DE L’INDOMETACINE.

MODULATION PAR LA N ACETYL CYSTEINE ET LA QUERCETINE

O. Limane2,3

, M. Driss2,3

, N. Touabti3, L. Ait Said

3, M. Segouani

3 et B. Djerdjouri

1

1Laboratoire de Biologie Cellulaire et Moléculaire, Faculté des Sciences Biologiques (FSB). Université des Sciences

et de la Technologie Houari Boumediene (USTHB), BP 32 EL-ALIA 16111, Bab-Ezzouar (Alger). 2Faculté des génies des procédés pharmaceutique

3Institut Pasteur, Dely Ibrahim, Alger

RESUME

L'indométacine ou acide chlorobenzoyl métoxy méthyl indol acétique est un anti-inflammatoire non stéroïdien, qui

agit par inhibition non sélective des cyclooxygénase 1 et 2 (COX-1/-2). Ces effets pro apototiques et anti prolifératifs

sont attribués à une activité indépendante des cyclooxygénases.

Le but de cette étude est de caractériser la toxicité de l'indométacine sur une lignée de cellules dérivées de rein de

singe (VERO). L'implication du stress oxydatif a été recherché à l'aide d’un antioxydant naturel la quercétine (Qr) et

d’un scavenger des espèces réactives de l’oxygène (ROS) et précurseur du glutathion, la N-Acétyl-Cystéine (NAC).

L’incubation des cellules VERO 24h avec des concentrations croissantes d’indométacine (100-500 µM), a induit une

augmentation dose dépendante de la production de nitrites et de malondialdehyde (MDA), marqueurs du stress

oxydatif et la réduction parallèle du taux de GSH et de l’activité catalase. La toxicité est confirmée par le relargage

dose dépendant de la lactate déshydrogénase (LDH).

La quercétine 15 µM et la NAC 50 µM ont totalement neutralisé les taux des nitrites et de MDA et restauré les

systèmes de défense antioxydants (GSH, catalase). Cet effet protecteur est inversement proportionnel aux

concentrations excessives d’indométacine.

Par ailleurs, les deux antioxydants testés exercent par elles mêmes un effet pro oxydant dose dépendant, qui vient se

surajouter à la toxicité de l’indométacine. Cette observation suggère une utilisation modérée et contrôlée des

molécules anti oxydantes naturelles, en particulier dans les chimiothérapies caractérisées par une production

excessives de ROS.

Mots clés : Indométacine, cellules VERO, stress oxydatif, quercétine, N-Acétyl-Cystéine


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P30

EFFET MODULATEUR DE L’ACIDE CAFEIQUE SUR UNE

COLITE ULCEREUSE CHRONIQUE AU DEXTRAN SULFATE SODIUM

A. Cherallah1, I. Amrouche-Mekkioui

1 et B. Djerdjouri

1



RESUME

La colite ulcéreuse est une maladie inflammatoire chronique du côlon. Bien que son étiologie reste inconnue, la

perturbation des systèmes pro-oxydants et antioxydants semble jouer un rôle clé dans sa physiopathologie.

Le but de notre travail a été d’étudier l’effet de l’acide caféique 50 mg/kg sur une colite ulcéreuse chronique induite

chez les souris mus musculus avec du dextran sulfate sodium (DSS) 5%.

L’intensité des lésions de la muqueuse colique a été estimé après l’application de deux cycles successifs de DSS 5%

par une étude histopathologique et le dosage des marqueurs du stress oxydatif (myeloperoxydase MPO,

malondialdéhyde MDA et activité catalase CAT).

Après l’administration de deux cycles de DSS 5%, nos résultats ont révélé une augmentation de l’activité MPO (1,71

fois), signe d’une forte infiltration leucocytaire et visible sur les coupes histologiques. Une augmentation du taux de

MDA (2 fois) ainsi qu’une diminution de l’activité CAT (1,27 fois) ont également été noté.

L’acide caféique 50mg/kg a protégé de façon significative les souris au cours de l’administration de deux cycles de

DSS 5% par ces propriétés d’inhibition de la 5-LOX, par son effet scavenger sur les espèces réactives de l’oxygène

(ROS) et par sa capacité à interrompre les réactions en chaîne de la peroxydation lipidique.

Mots clés : Colite ulcéreuse, dextran sulfate sodium, acide caféique.


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des chromosomes de la caille des blés Coturnix coturnix dans le cadre d’une

Contribution à sa Préservation *

KARTOUT Y.,* BELHAMRA M.** et LADJALI-MOHAMMEDI. K.*

*Laboratoire de biologie cellulaire et moléculaire, Faculté des sciences biologiques (FSB), Université des Sciences et

de la Technologie Houari Boumediene (USTHB)

**Centre Cynégétique de Zéralda, Centre de la Recherche Scientifique et Technique sur les Régions Arides

(CRSTRA), Université de Biskra

[email protected]

[email protected]

Résumé

La caille des blés Coturnix coturnix coturnix, appelée caille Européenne, est un petit oiseau nicheur et

migrateur. Elle fréquente en Algérie le Tell, les Hautes Altitudes et le Sahara Septentrional. Un déclin important du

nombre de cailles a été signalé au cours de ces 30 dernières années partout en Europe ainsi qu’en Algérie. Cette

situation est due à l’apparition de plusieurs facteurs défavorables à son maintien tels que la chasse excessive et la

pollution génétique. Cette espèce cynégétique est menacée de disparition. Une prise de conscience générale a motivé

sa double inscription juridique en 1979 (convention de Bonn et de Berne) pour sa protection.

L’objet de ce travail est de contribuer à la préservation de cette espèce en entamant la description de son

génome et d’établir, pour la première fois en Algérie, des chromosomes à haute résolution. Nous avons ainsi réalisé

des cultures de fibroblastes issus d’organes d’embryons et d’animaux adultes. Ainsi, nous avons établi le caryotype de

la caille des blés. Nous avons ensuite effectué des comparaisons avec des espèces aviaires connues telles que la poule

domestique Gallus domesticus et la caille japonaise Coturnix japonica.

Le nombre diploïde est approximativement égal à 78 chromosomes tout comme la caille japonaise et la poule

domestique. Des caryotypes en bandes GTG et RBG sont proposés. Ils correspondent seulement aux huit premières

paires d’autosomes ainsi que la paire de chromosomes sexuels (ZZ ou ZW). Les microchromosomes, comme pour

tous les oiseaux, sont extrêmement difficiles à identifier. Les résultats obtenus sont très semblables au caryotype de la

caille japonaise.

MOTS CLES : Caille des blés, Coturnix coturnix, espèce menacée, embryon, animal adulte, culture cellulaire,

chromosomes, haute résolution, caryotype, étude génomique comparée.




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P32

Etude du Caryotype et Cartographie Chromosomique Comparée d’Une Espèce

Menacée : la Perdrix gambra Alectoris barbara*

OUCHIA S.,* BELHAMRA M.** et LADJALI –MOHAMMEDI K.*

*Laboratoire de biologie cellulaire et moléculaire

Faculté des sciences biologiques (FSB)

Université des Sciences et de la Technologie Houari Boumediene (USTHB)

**Centre Cynégétique de Zéralda, Centre de la Recherche Scientifique et Technique sur les Régions Arides (CRSTRA),

Université de Biskra

[email protected]; [email protected]; [email protected]

RESUME

Les progrès et les connaissances accumulés grâce à l’étude des génomes aviaires ont permis de

détecter des homologies de séquences avec les mammifères et l’homme concernant plusieurs familles de

gènes. C’est pour toutes ces raisons que l’étude des différents caryotypes aviaires constitue une étape

importante dans l’établissement des cartographies chromosomiques comparées.

En effet, parmi les espèces aviaires endémiques de l’Afrique du Nord la perdrix gambra Alectoris

barbara est l’homologue des perdrix rouges et bartavelles Européennes. Elle est très prisée pour sa chaire et

soumise à des textes de lois permettant son exploitation par l’exercice de la chasse. Cependant, la pratique

anarchique de la chasse, cumulée à la dégradation des biotopes et l’épandage excessif des pesticides, ont

conduit au déclin alarmant des populations de perdrix locales. Le projet « Perdrix gambra », lancé par le

Centre Cynégétique de Zéralda, vise à obtenir une souche capable de se reproduire en captivité, puis de

réaliser un suivi démographique des populations naturelles après les lâchers de repeuplement.

Dans ce présent travail, nous contribuons à la préservation de la Perdrix gambra par une étude

cytogénétique, menée pour la première fois en Algérie sur cette espèce locale. Nous avons ainsi établi le

caryotype à haute résolution et décrit les huit premières paires chromosomiques ainsi que les chromosomes

sexuels Z et W à partir de cultures cellulaires issues d’embryons et d’animaux adultes. Le nombre diploïde a

été établi à 2n= 78 comme pour la plupart des espèces appartenant à cette famille.

Cette étude permettra par la suite de déceler d’éventuelles anomalies chromosomiques successibles de

conduire à long terme au déclin de l’espèce. Des études comparatives, aussi bien cytogénétiques que

phylogénétiques, seront également possibles avec d’autres espèces connues telles que la Poule domestique

Gallus domesticus, et d’autres espèces locales étudiées pour la première fois au Laboratoire de Génétique du

Développement (perdrix choukar, caille des blés, tourterelle des bois et outarde houbara).

Mots clés : Perdrix gambra, espèce endémique, cultures cellulaires, embryons, animaux adultes, caryotype,

chromosomes à haute résolution, génome aviaire, cartographie comparée.





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P33

Glucotoxicité et remodelage de la matrice extracellulaire des fibroblastes

adventitiels en culture de Psammomys obesus

Berdja S1Neggazi S

1., Hamlat N., Boumaza S

1., Smail L

1., Sahraoui H

1., Benazzoug Y

2., Kacimi

G3., Haffaf E

4 ., Boudrissa A

5., Aouichat-Bouguerra

S1.(1)PPCM, (2) BRME, FSB, USTHB ; (3) Laboratoire de Biochimie, HCA, Alger, (4) Service de Médecine nucléaire,

HCA, Alger. (5). Unité de parasitologie, Institut Pasteur, Sidi [email protected]

RESUME

Introduction : L’hyperglycémie chronique induit des désordres métaboliques et des altérations intra et

extracellulaires. Ces dernières sont marquées par l’activation des voies des polyols, de la protéine kinase

C, des produits terminaux de glycation accentuant le stress oxydatif, marqueur de l’évolution des

complications cardiovasculaires.

Méthodes : les fibroblastes sont mis en culture par la méthode des explants. La glucotoxicité est induite

par incubation des fibroblastes en présence de D-glucose à 0.4% et 0.6% pendant 7 jours. L’évaluation

des nitrites totaux et du malonaldehyde est réalisée dans le compartiment intracellulaire. La prolifération

des cellules est évaluée par comptage. Les collagènes totaux du compartiment extracellulaire sont

caractérisés par SDS-PAGE.

Résultats : La prolifération montre une augmentation très hautement significative comparativement aux

témoins correspondants. Le malonaldéhyde et les nitrites totaux sont, dose dépendante, très

significativement augmentés. De même, la quantification des chaînes α2 (I) et α1 (I+III) des collagènes I

et III contenus dans le compartiment extracellulaire montre une augmentation sensible, dose dépendante.

Conclusion : L’induction d’une glucotoxicité in vitro, par addition de D glucose à des doses

supraphysiologiques, instaure un stress oxydatif, une augmentation de la prolifération liée à l’activation

cellulaire et une augmentation des collagènes en relation avec un remodelage important de la matrice

extracellulaire aortique. Toutes ces altérations sont des facteurs qui induisent et accélèrent les

complications cardiovasculaires. Une perspective thérapeutique comporterait deux volets : un volet

diététique et un volet pharmacologique.

Mots clés : Psammomys obesus, fibroblaste advetitiel, subculture, glucotoxicité, stress oxydant



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P34

Cytotoxicité in vitro du peroxyde d’hydrogène sur des fibroblastes aortiques

de Psammomys obesus

Boumaza S1 ([email protected])., Neggazi S

1., Hamlat N., Sahraoui H

1., Berdja S

1., Smail L

1.,

Benazzoug Y2., Kacimi G

3., Aouichat Bouguerra S

1.

(1) PPCM, (2) BRME, FSB, USTHB ; (3) Lab de Bioch. HCA, Alger.

Introduction : il est établi que les espèces réactives à l’oxygène induisent des dommages oxydatifs

cellulaires. Ces derniers sont impliqués dans les pathologies cardiovasculaires qui constituent un réel

problème de santé publique. Dans notre étude nous nous sommes proposés d’induire un stress oxydatif par

le peroxyde d’hydrogène sur les fibroblastes aortiques en culture secondaire, de Psammomys obesus.

Matériel et méthodes : En culture secondaire, les fibroblastes sont exposés à H2O2 1,2 et 30 mM pendant

24 h. La prolifération cellulaire est évaluée par comptage. Une étude morphologique est réalisée après

coloration à l’acridine orange. La quantification du malonaldéhyde et des nitrites totaux est effectuée dans

les compartiments extra- et intracellulaires.

Résultats : Nos résultats montrent une diminution dose dépendante de la prolifération des fibroblastes

incubés en présence de H2O2. Le malonaldéhyde et les nitrites totaux montrent une augmentation dose

dépendante très hautement significative dans les deux compartiments comparativement aux témoins

correspondants. La coloration à l’acridine orange a montré que les cellules soumises à H2O2 produisent une

fluorescence importante dans la région perinucléaire marquant une hypercondensation de la chromatine

associée à des bourgeonnements de la membrane plasmique caractérisant l’apoptose cellulaire.

Conclusion : le peroxyde d’hydrogène est un puissant oxydant induisant des altérations biochimiques et

morphologiques. De même, les acides gras polyinsaturés des membranes cellulaires seraient très affectés par

le stress oxydatif puisque le malonaldéhyde est retrouvé dans le compartiment extracellulaire. Les nitrites

sont à l’origine de la formation du peroxynitrite, radical cytotoxique majeur de l’apoptose.

Mots clés : stress oxydant, fibroblastes adventitiel, apoptose.


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P35

Production de xylanases de Jonesia sp. sur milieux à base de xylane commercial et de

déchets agricoles.

Boucherba Nawel

1, Duchiron Francis

2, Copinet Estelle

2 et Benallaoua Said

1

1-Laboratoire de Microbiologie Appliquée/ Biochimie Microbienne, Faculté des Sciences de la Nature et de la Vie ,Université de

Bejaia Route de Targa ouzemmour 06000 , Algérie. 2-Laboratoire de Microbiologie Industrielle, UFR Sciences, Université de Reims Champagne-Ardenne , Moulin de la Housse, BP

1039 , 51687 Reims, France.

Les crises successives du pétrole, l’épuisement progressif des sources d’énergies fossiles et leurs

inconvénients écologiques ont conduit les pays industrialisés à rechercher et à développer de nouvelles

sources de carburant qui seraient la ressource privilégiée pour remplacer le pétrole ou tout du moins

l’économiser : le bioéthanol de deuxième génération est probablement la solution .L’Algérie étant un pays

producteur de pétrole devrait suivre cette démarche pour des raisons stratégiques, en plus la valorisation de

la biomasse végétale a aussi un impact écologique très intéressant qui consiste à réduire les émissions de gaz

à effet de serre.

Le xylane étant un polysaccharide abondant dans les résidus agricoles, son hydrolyse nécessite l'intervention

de xylanases, ces dernières ont été isolé chez les actinomycètes notamment le genre Streptomyces.

Dans ce travail nous présentons une toute première description d'une xylanase produite par l'espèce Jonesia

sp. isolée à Béjaia, l’identification de la souche a été réalisé par le séquencage de l’ARN 16s, l’activité

enzymatique la plus élevée a été détectée à la fin de la phase exponentielle après 35h de fermentation dans

un milieu contenant le xylane de bouleau comme seule source de carbone.

Un suivi de la biomasse bactérienne et de l’activité xylanolytique de la souche Jonesia sp. a été réalisé

pendant 10 jours sur milieux contenant la paille, le son de blé et la pulpe de tomate comme substituant du

xylane de bouleau (xylane commercial), les concentrations testées sont à raison de 0,5, 1 et 2%.

L’expérience a montré que la meilleure activité xylanolytique est obtenue avec la paille de blé à 2% après 9

jours de fermentation, l’activité enzymatique a été estimée à 11,97 U/ml, ces résultats sont en corrélation

avec ceux obtenus avec la biomasse bactérienne.

L’effet de La variation du taux d’inoculation de 1 à 5% sur l’activité enzymatique a montré qu’un taux de

3% donne la meilleure activité xylanolytique sur milieu à base de paille de blé à raison de 2%.

Mots clés : production xylanases, résidus agricoles, Jonesia sp.


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P36

Résistance bactérienne aux antibiotiques : Approche par la biologie structurale

Ahmed Meksem1,2

et Fatima Laraba-Djebari2*

1. .Métaux & Micro-organismes : Chimie, Biologie & Applications, Département Récepteur et Protéines Membranaires, Institut de Recherches

de l’Ecole de Biotechnologie de Strasbourg

Ecole Supérieure de Biotechnologie de Strasbourg, Université de Strasbourg, France

2. Laboratoire de Biologie Cellulaire et Moléculaire

Biomolécules-Mode d’Action : Immunodiagnostic et Immunothérapie, Faculté des Sciences Biologiques, Université des Sciences et de la

Technologie Houari Boumediène, Alger, Algérie

*[email protected]

Résumé

Le transport actif de l’hème, des complexes fer-sidérophore, du saccharose… à travers la membrane externe

de bactéries à Gram-négatif fait intervenir des transporteurs TonB-dépendants (TBDTs). Les TBDTs sont formés de

deux domaines caractéristiques : un domaine bouchon et un tonneau β transmembranaire à 22 brins antiparallèles, le

domaine bouchon ferme le lumen du tonneau. L’énergie nécessaire au transport actif par les TBDTs est dérivée de la

force proton-motrice suite à une interaction entre la TonB-box du TBDT et la protéine TonB du complexe TonB-

ExbB-ExbD de la membrane cytoplasmique. Les TBDTs peuvent être utilisés pour véhiculer des antibiotiques sous

forme de complexes, fer-sidérophore-antibiotique. La membrane externe ne constitue plus une barrière sélective pour

l’entrée de ces antibiotiques, mais facilite et augmente leur taux d’entrée grâce à ce transport actif.

Nous nous sommes intéressés à un transporteur appartenant à cette famille de protéines membranaires, FetA :

TBDT de l’énantio-pyocheline de Pseudomonas fluorescens.

Nous avons mis en place et optimisé une stratégie de clonage, de surexpression, de purification et de

cristallisation. Cette stratégie nous a permis de cristalliser le récepteur, dans plusieurs conditions de cristallisation avec

différents détergents, et d’enregistrer des données de diffraction. Ainsi, nous avons résolue sa structure sous sa forme

apo à 3,2 Å.

FetA adopte le même repliement que les autres TBDTs en deux domaines caractéristiques

bouchon. L'analyse structurale révèle une grande flexibilité des boucles extracellulaires. Bien que le transporteur ne

soit pas lié à son ligand, la TonB-box n'est pas visible dans la carte de densité électronique, et donc dans la structure

3D, alors que sa flexibilité est supposée très importante pour échanger des interactions avec la protéine TonB de la

membrane interne pour le transfert d'énergie. Cette observation suppose que d'autres régions périplamiques de FetA

sont impliquées dans des interactions avec le complexe TonB-ExbB-ExbD de la membrane interne.

Les données structurales serviront pour développer des stratégies thérapeutiques innovantes de lutte contre la

résistance bactérienne aux antibiotiques « synthèse de conjugués antibiotique-EPch » ciblant l’approvisionnement en

fer de Pseudomonas fluorescens sans incidence sur l’hôte.

Mots clés : TBDTs, transport du fer, antibiorésistance, FetA, Structure 3D.

http://www.lbcm.usthb.dz/


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Page 92

P37

LES MICRO-ORGANISMES HALOPHILES ET LEURS POTENTIALITES BIOTECHNOLOGIQUES

MEKNACI R., HADJ RABIA Y. et HACENE H.

Laboratoire de Microbiologie, Faculté des Sciences Biologiques, Université des Sciences et de la technologie Houari-

Boumédiène, Alger-Algérie. [email protected]

RESUME

Au cours des 30 dernières années, nous avons assisté à la découverte d'une extraordinaire diversité de

microorganismes habitant des milieux que l'on croyait auparavant hostiles à la vie.

On a baptisé comme « extrêmophiles » ces micro-organismes limites du vivant, qui se développent optimalement dans

des environnements où les conditions physico-chimiques sont insoutenables pour le reste des êtres vivants. Ces

conditions mettent à l'épreuve les propriétés de stabilité et de fonctionnalité des macromolécules biologiques.

24 souches appartenant aux Archaebactéries Halophiles extrêmes qui font partie du groupe des micro-organismes

extrémophiles ont été isolées à partir de la Sebkha d’El Goléa située au Sahara Algérien.

Les interactions entre ces dernières ont mis en évidence 9 souches présentant une activité antagoniste contre au moins

un isolat du même domaine. Il s’agirait vraisemblablement d’activités dues à des substances du type Halocines déjà

connues chez les Archaebactéries Halophiles.

Deux souches productrices de substances antimicrobiennes potentiellement intéressantes ont été étudiées de

manière approfondie et leurs produits ont été caractérisés.

Leur purification et caractérisation par diverses techniques chromatographique, biologique et physicochimique ont

permis d’obtenir des composés de nature protéique, exerçant un effet bactéricide et présentant un spectre d’action

centré sur les germes phylogénétiquement proches des souches productrices.

Ce type de molécules est connu pour être efficace dans la conservation des produits alimentaires conservés par salage,

dans l’industrie du cuir et également pour avoir des potentialités d’être utilisé comme agent chimiothérapeutiques

actifs contre les agents pathogènes humains et animaux.

Mots clés : les Archaebactéries halophiles, les Halocines, Environnements extrêmes.



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Page 93

P38

Apport des outils moléculaires dans l’étude épidémiologique des souches de

Mycobacterium tuberculosis isolées de patients VIH positifs.

Nateche F1-2

*, Mechouet F2, Baraka S

2, Gavin Benavent P

3, Lopez-Calleja A

3, Samper S

3 et Khaled S

2.

1 laboratoire de biologie moléculaire et cellulaire, FSB, USTHB. ALGER.

2 Laboratoire central, EHS EL HADI FLICI. ALGER

3 Laboratoire de mycobactériologie, faculté de médecine, université de ZARAGOSSE. ESPAGNE.

* [email protected]

Objectif :

Cette étude se focalise sur la caractérisation moléculaire des souches de M.tuberculosis isolées de patients infectés par

le VIH dans un hôpital spécialisé en maladies infectieuses à Alger.

Matériel et Méthodes :

312 isolats cliniques sont colligés entre la période allant de 2000 jusqu’à 2006, 34 proviennent de patients VIH

positifs.

L’identification des souches a été réalisée par les tests biochimiques classiques.

Le genotypage a été abordé par les techniques de spoligotyping et RFLP-IS6110.

Résultats :

Parmi les 34 souches, 28 sont génotypées. La technique de spoligotypage offre un taux d’homologie fluctuant entre

100% à 40% avec une prédominance des familles H (haarlem) ; LAM (Latino-américain-méditerranéen) et enfin la

famille ubiquitaire T.

L’analyse des résultats par technique RFLP ne met pas en évidence de corrélation entre les types de profils de

restriction des souches et le statut sérologique des patients.

Parmi ces souches, nous attirons l’attention sur la mise en évidence d’une souche de profil ST1 ou famille Beijing

chez un patient algérien et de 4 souches de profil ST61 famille LAM-CAM chez 4 patients originaires de pays sub-

sahariens.

Conclusion :

Cette étude révèle des spoligotypes similaires aux génotypes de M.tuberculosis circulantes dans notre environnement.

Outre, l’installation de nouveaux génotypes à Alger est à souligner.

Mots clés : M.tuberculosis, VIH, spoligotyping, RFLP-IS6110.



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P39

Effet antibactérien de Lactococcus lactis à l’égard de Staphylococcus aureus résistant

aux antibiotiques isolé de lait de vaches mammiteuses dans un fromage au lait cru.

Keramane Badria, Titeli Fatiha, Sadoun Djamila

Laboratoire de Microbiologie Appliquée, Université A Mira de Bejaïa

E-mail : [email protected]

Résumé

Cette étude avait pour objectif de mettre en évidence le pouvoir antagoniste de Lactococcus lactis à

l’égard de Staphylococcus aureus isolé de lait de vaches atteintes de mammites, et de démontrer l’intérêt de

cet antagonisme dans la production de fromages au lait cru par une croissance simultanée des deux souches.

Un isolement et une identification de souches de S. aureus à partir de différents laits mammiteux

avant pendant et après le traitement aux antibiotiques sont menés.

Parallèlement, des souches de Lc. lactis sont isolées, purifiées et identifiées à partir de différents

échantillons de lait cru. Les souches de Lc. lactis sont alors criblées pour leur effet antibactérien, à l’égard

de S. aureus résistant aux antibiotiques par le test des spots.

Enfin, un suivi de l’activité antibactérienne potentielle de Lc. lactis à l’égard de S. aureus est réalisé

dans du lait écrémé.

11 souches de Staphylococcus aureus ont été isolées et identifiées à partir de lait mammiteux. Sur 59

souches de bactéries lactiques isolées 14 ont été identifiées comme appartenant à l’espèce Lactococcus

lactis, dont 10 présentaient une bonne activité antibactérienne à l’égard de S aureus isolé de lait de vaches

mammiteuses.

Les résultats du suivi de la croissance de S. aureus en culture mixte avec Lc. lactis dans le lait et le

fromage, ont montré que la croissance de S. aureus est très significativement inhibée dans le fromage en

présence de Lc. lactis.

Mots clés : Staphylococcus aureus, mammites, Antagonisme, Lactococcus lactis, fromage au lait cru.


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P40

EVALUATION DE LA TOXICITE DES BLOOMS A MYCROCYSTIS SP.

A.Ouartsi & D.Chekireb Université Badji Mokhtar, Faculté des Sciences, Département de Biochimie, Annaba 23000 Algérie,

Résumé :

L'apparition fréquente de blooms toxiques à cyanobactéries au niveau des plans d'eau se produit à différents

endroits dans le monde. Ce problème est d’autant plus sérieux que les espèces occasionnant les blooms peuvent

produire des cyanotoxines qui sont potentiellement hépatotoxiques et/ou neurotoxiques. La présence dans les

retenues servant à la production d'eau potable et/ou à l'irrigation de cyanobactéries productrices de toxines

constitue donc une menace sanitaire sérieuse.

Dans ce contexte, des études physico-chimiques et biologiques ont été réalisées, pour la 1ère fois, dans le

barrage Mexa situé au Nord-Est de l'Algérie, afin d'y rechercher des cyanobactéries potentiellement toxiques. Les

microcystines ont été spécialement recherchées. L'échantillonnage a été effectué durant 10 mois de mars à

décembre 2007.

L'examen microscopique du phytoplancton montre la présence de 8 genres de cyanobactéries dont 6 sont

productrices de toxines. Parmi ces dernières, le genre Microcystis sp. prolifère régulièrement et domine le

phytoplancton au mois de novembre et décembre, avec une densité cellulaire maximale de 2,1x106 cellules.ml

-1

Les teneurs de microcystines intracellulaires déterminées par le test immunologique ELISA montrent que les

valeurs les plus élevées atteignent 0,77 µg.L-1

au mois de novembre. De plus, ces valeurs sont en concordance

avec les densités cellulaires du genre Microcystis sp. et de la concentration maximale de chlorophylle (a) obtenue.

Parallèlement, des cultures du genre Microcystis sp. sur milieu BG11, ont été menées et révèlent l'existence de 2

morphoespèces se distinguant par la taille de leurs cellules. L’approche par des méthodes génomiques permettra,

par la suite, l’identification de ces souches.


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P41

ISOLEMENT ET IDENTIFICATION CLASSIQUE ET MOLECULAIRE

D’ESPECES D’ACTINOBACTERIESPRODUCTRICES DE MOLECULES

ANTAGONISTES.

HADJ-RABIA Y., MEKNACI R. et HACENE H

LBCM-FSB-USTHB

[email protected]

RESUME

L’évolution constante de la résistance bactérienne aux antibiotiques, l’émergence de nouvelles maladies

infectieuses ainsi que de plusieurs types de cancer demeurant sans traitement efficace justifient la recherche intensive

de nouvelles molécules bioactives.Ainsi, l’une des stratégies suivies dans ce domaine de recherche consiste à isoler

des souches d’actinobactéries extrêmophiles connues pour être la principale source naturelle de métabolites bioactifs à

partir d’écosystèmes ou environnements peu ou pas étudiés essentiellement les écosystèmes dont l’un des facteurs

environnementaux est extrême (salinité, pH, et température).Dans nos travaux de recherches, nous nous sommes

intéressés au facteur de la salinité et cela en analysant des échantillons aussi bien solides que liquides provenant de

différentes sebkhas du Sahara Algérien. Ainsi, l’analyse de ces échantillons nous a permis d’isoler 12 isolats

d’actinobactéries sur des milieux sélectifs fortement salés.Les isolats obtenus ont été soumis à un screening pour la

production de molécules bioactives en choisissant comme cibles des bactéries de référence ainsi que des

Archaebactéries halophiles.L’activité antagoniste des souches isolées a été mise en évidence par la technique de

diffusion sur gélose par les cylindres d’agar. Ceci, nous a permis de sélectionner deux souches les plus actives. Les

produits actifs ont été extraits, localisés par des méthodes chromatographiques et partiellement caractérisés.Une

identification approfondie des deux souches a été effectuée par les méthodes classique (morphologiques,

physiologiques et biochimiques) et moléculaire. En effet, le séquençage partiel de l’ARNr16S a révélé que les deux

souches sélectionnées appartenaient à deux genres différents à savoir Saccharomonospora et Nocardiopsis et que

l’une d’entre elles présente un taux de similarité de 97% avec Saccharomonospora halophila ce qui laisse suggérer

qu’il s’agirait, très probablement, d’une nouvelle espèce halophile.

Mots clés : Actinobactéries, Sebkha, halophiles, antibiotiques.



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Page 97

P42

Typage moléculaire des plasmides de souches d’entérobactéries multirésistantes aux

antibiotiques, isolées des eaux usées

Farida BOUFROUCHE et Rabah BAKOUR Laboratoire de Biologie Cellulaire et Moléculaire, Equipe de Génétique, Faculté des Sciences Biologiques,

Université des Sciences et de la Technologie Houari Boumediene, Alger

RESUME

L’évaluation de la sensibilité aux antibiotiques de 89 souches d’entérobactéries isolées des eaux usées a montré une

multirésistance avec une moyenne de 20 résistances pour 34 antibiotiques testés. Le rôle des plasmides dans ces

phénotypes est prépondérant. Le culot plasmidique des souches comporte 0 à 9 plasmides avec des tailles variant de 2

à 120 kb. Le replicon-typing des plasmides par hybridation moléculaire a permis de les assigner majoritairement aux

groupes d’incompatibilité ubiquitaires IncFI, Com9 et IncQ et moins fréquemment aux groupes HI2 et IncU. La

comparaison de plasmides de même taille de différentes espèces par leurs profils de restriction a montré une similarité

entre certains, ce qui peut-être indicatif de transferts génétiques in situ.

Mots-Clés : entérobactéries, plasmides, résistance, antibiotiques, eau


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P43

Culture d’Arthrospira platensis (Spirulina platensis) sur eaux carbonatées et production

de pigments phycocyanine et xanthophylles.

CHEKIREB Djamel & OUARTSI Akila

Université Badji Mokhtar Annaba - Faculté des Sciences

Département de Biochimie – BP 12 El-Hadjar Annaba Algérie

[email protected]

RESUME Arthrospira platensis (Spirulina platensis) est une cyanobactérie photosynthétique se développant

dans des eaux riches en carbonates. Elle est consommée par les populations du Tchad et du Mexique, et

possède une valeur nutritionnelle très élevée. Sa composition chimique montre une grande richesse en

nutriments tels que minéraux, protéines, provitamines, acides gras polyinsaturés. Elle renferme des pigments

de type chlorophylle « a », β - carotènes et surtout phycocyanine. La phycocyanine possède une activité

biologique importante, elle est utilisée dans le domaine médical comme antioxydant, anti-inflammatoire et

anti-tumorale et aussi comme hépatoprotecteur et détoxifiant.Notre travail consiste à cultiver in vitro

Arthrospira platensis sur des milieux à base d’eaux carbonatées provenant des sources thermales de

Constantine et de Guelma ; d’évaluer la croissance de cette algue et de comparer avec les milieux de culture

classiques pour cyanobactéries (Spir, Zarrouk et BG11). La nature et la composition en pigments de la

biomasse obtenue sont des paramètres biotechnologiques importants, il s’agit de déterminer les teneurs en

chlorophylle « a » et en phycocyanine (et estimer son taux de pureté). Une séparation chromatographique

des extraits bruts est effectuée pour identifier la nature des pigments produits . Les résultats obtenus sont

satisfaisants ; une croissance maximale de A. platensis est obtenue sur milieu à base d’eau thermale de

Constantine comparable au milieu de culture « Spir ». Pour ce qui est de l’eau de Guelma, la croissance est

légèrement plus faible, mais demeure intéressante. La production de phycocyanine dépend fortement de la

composition du milieu de culture utilisé. Les valeurs obtenues de la pureté de la phycocyanine (exprimée en

%) dans les différents milieux varient de 0.5 à 2.18. Le maximum est obtenu avec le milieu Spir (2.18 %) et

une valeur très intéressante est obtenue avec l’eau de Guelma (1.7 %). Les pigments révélés par CCM

montrent une production de xanthophylles, de chlorophylle et d’autres pigments sur les milieux de

Constantine et de Guelma. Les quantités sont comparables à celles obtenues avec les milieux classiques.

Mots clés : Arthrospira, pigments, phycocynine, xanthophylles



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P44

APPROCHES MOLECULAIRES DE LA DIVERSITE BACTERIENNE D’UNE

SOURCE CHAUDE TERRESTRE ALGERIENNE

A. Bouanane1 , B. Ollivier2, ML. Fardeau 2 et H.Hacene1.

1- Laboratoire de Biologie cellulaire et moléculaire (Microbiologie), USTHB .

2-IRD UMR 180 Extremophiles, Université de Provence et de la Méditerranée, Marseille.

Contact : [email protected]

Un intérêt considérable est porté aux microorganismes thermophiles et hyper thermophiles associés aux sources

chaudes de différentes aires géothermales. En effet longtemps considérées comme impropres au développement de la

vie, les sources hydrothermales terrestres se sont révélées être le réservoir de consortia bactériens originaux. De

nouvelles lignées phylogénétiques d’espèces inconnues ont été déterminées grâce aux techniques moléculaires et au

choix de l’ARN 16 S comme marquer évolutif.

L’Algérie compte un grand nombre de sources thermo minérales. La majeure partie de ses sources est localisée dans

l’est algérien. Elles sont classées en eaux sulfureuses, ferrugineuses, chlorurées, sodiques, sulfatées ou carbonatées.

Les eaux de hammam chellala sont réputées pour être des plus chaudes au monde avec une température de 98°C à leur

point d’émergence.

Notre étude consiste à caractériser la diversité de la flore indigène d’une eau prélevée d’une source chaude située à

l’Est Algérien par les techniques moléculaires (16S, DGGE, Clonage, ARDRA et hybridation) et non moléculaires

(cultures et isolement aérobie et anaérobie) d’écologie microbienne.

Mots clé : Source chaude- Ecologie moléculaire- Diversité bactérienne.



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AUTEURS :

- CONFERENCES*,

- COMMUNICATIONS ORALES**

- COMMUNICATIONS AFFICHEES***

1 Abderrahmani

Ahmed ** 2 Adi-Bessalem Sonia ** 3 Ahmedi

Mohamed Laïd ***

4 Aissani

Radia ** 5 Ait-Lounis Aouatef ** 6 Alouache Souhila ** 7 Amari Hanane ** 8 Amri Manel ** 9 Amrouche Lynda *** 11 Amrouche-Mekkioui Ilhem ** 10 Aslane M *** 12 Bekkari Nadjia *** 13 Belkhelfa

Mourad **

14 Belkhelfa-Slimani Radia *** 15 Bellil Ines ** 16 Benboubetra

Mustapha *

17 Benderdour Mohamed * 18 Benhamadi Asma ** 19 Benhassine Traki ** 20 Berdja S 21 Benmalek Yamina ** 22 Bennacef-Heffar Nouara *** 23 Berkane Kinza ** 24 Billiald

Philippe *

25 Bouanane Amel 26 Bouaziz Samia *** 27 Boucherba

Nawel **

28 Boudrahem- Addour Nassima ** 29 Boufrouche Farida *** 30 Bounaama. Abdelkader ** 31 Boussag-Abib Lila *** 32 Chaouad B *** 33 Cherallah Amira *** 34 Cherbal

Farid **

35 Djeraba, Zineb ***


LBCM FSB-USTHB

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36 Djinni

Ibtissem ** 37 Ghoul A *** 38 Hachaichi-Sadok Zohra ** 39 Hammoudi-Triki Djelila ** 40 Izem-Meziane

Malika ***

41 Kandouli. C ** 42 Kartout Y ** 43 Keramane Badria *** 44 Khelil

Malika **

45 Khiari Zineb *** 46 Lahmar-Belguendouz Karima *** 47 Laib Yasmina ** 48 Lammali Amina ** 49 Limane

O. ***

50 Mahiddine L ** 51 Meknaci Rima *** 52 Meksem

Ahmed ***

53 Mendil Amina *** 54 Mesbah-Amroun Hamida ** 55 Messai

Yamina **

56 Mezioug

Dalila *** 57 Mouzaoui.

Souad ***

58 Nateche Farida ** 59 Othmani-Mecif

Kheira ***

60 Otmane A. ** 61 Ouartsi

Akila ***

62 Ouchia S *** 63 Oussedik-Oumehdi Habiba ** 64 Rafa Hayet ** 65 Rahim

Ibtissem ***

66 Rebbah

Nesrine *** 67 Saïdi Hadjer *** 68 Sami-Merah Sassia *** 69 Tchakal. A *** 70 Toumi

Nassima

71 Tounsi Nabila *** 72 Yefsah-Idres A *** 73 Zerrouk F 74 Zidi

Sourour ***


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DEUXIEME WORKSHOP DE BIOTECHNOLOGIE ET SANTE