Digital_20289783 S1241 Laras Andria Wardani.unlocked

7/24/2019 Digital_20289783 S1241 Laras Andria Wardani.unlocked

1/81

Validasi metode..., Laras Andria Wardani, FMIPA UI, 2012

UNIVERSITAS INDONESIA

VALIDASI METODE ANALISIS DAN PENENTUAN KADAR

VITAMIN C PADA MINUMAN BUAH KEMASAN DENGAN

SPEKTROFOTOMETRI UV-VISIBLE

SKRIPSI

Diajukan sebaai sa!a" sa#u s$a%a# un#uk &e&'e%(!e" e!a% Sa%jana

Sains

LARAS ANDRIA

)ARDANI*+*,-../00

FAKULTAS MATEMATIKA DAN ILMU PENGETAHUAN ALAM

PROGRAM STUDI KIMIA

DEPOK

1ANUARI

0*20


2/81

i


3/81

ii


4/81

3


KATA PENGANTAR

Puji Syukur Penulis panjatkan kehadirat Tuhan Yang Maha Esa karena atas

rahmat dan karunia-Nya Penulis dapat menyelesaikan penelitian dan penulisan skripsi

ini tepat pada waktunya. Salawat serta salam semoga senantiasa terlimpahkan kepada

Rasulullah Muhammad S! yang merupakan suri tauladan "agi kita semua.

#alam penulisan skripsi ini Penulis tidak lepas dari "antuan "er"agai pihak

yang telah mem"antu dan mendukung Penulis dalam melaksanakan penelitian dan

menyelesaikan skripsi ini. Terima kasih Penulis sampaikan kepada papah mamah

tersayang dan kakak yang selama ini selalu mendukung dan mem"eri semangat

Penulis hingga penelitian dan penulisan skripsi ini dapat "erjalan dengan "aik danlan$ar.

%$apan terima kasih yang se$ara khusus juga Penulis sampaikan kepada &

'. (epada #rs. Sunardi) M.si. selaku pem"im"ing * atas "antuannya selama

penelitian dan penyusunan skripsi yang sangat "erarti "agi Penulis.

+. (epada #ra. Siswati Setiasih) M.Si. selaku pem"im"ing akademis atas segala

"antuannya sehingga memperlan$ar proses penelitian dan penyusunan skripsi.

3. (epada #r. Ridla ,akri selaku ketua #epartemen (imia M*P %*.

. (epada #ra. Tresye %tari) M.Si. selaku koordinator penelitian yang telah

mem"erikan kesempatan dan "antuan dalam penelitian.

/. (epada seluruh dosen-dosen kimia %* yang selama ini telah mengajarkan

ilmu-ilmu yang sangat "erman0aat "agi penulis.

1. (epada Pak 2edi S) Pak Marji) Pak 2adi) Pak Sutrisno ,a"eh4) M"ak Ema)

M"a Sri) M"ak *na) M"ak 5u$u) Pak Min) Pak (iri serta seluruh sta0

departemen (imia yang telah "anyak mem"antu terlaksananya penelitian.

6. (epada kedua orang tua yang telah mem"erikan kasih sayangnya serta

dukungan moril dan materi kepada saya.

7. (a Puji) (a Rasyid) (a l0in) (a rispa) (a 8ora) (a #yo) (a #aniel se"agai

penanggung jawa" la" a0iliasi yang telah mem"antu saya dalam penelitian.


5/81

9. (epada saha"at-saha"atku& Mi$u) airu:) *ndri) Puti) 5ipa) Risa) ,o$il) ;ilid)

isha) #inda) Sesin) ames) ;ia) Mimit) urusan (imia M*P %* khususnya angkatan +@@7"aik paralel maupun reguler serta "er"agai pihak yang telah mem"antu namun

"elum ter$antumkan dalam laporan ini.

Penulis menyadari "ahwa skripsi ini masih "anyak kekurangan dan masih

jauh dari kata sempurna) sehingga skripsi ini pun kiranya masih perlu e=aluasi

untuk penyempurnaan. ?leh karena itu) penulis sangat ter"uka terhadap kritik dan

saran yang mem"angun dari semua pihak. Penulis juga "erharap penelitian dan

skripsi ini dapat "erman0aat "agi seluruh pihak yang mem"a$a terle"ih "agi

pem"a$a yang akan melaksanakan dan mem"uat penelitian terkait judul dan tema

"erikut.

>akarta) #esem"er +@''

Penulis


6/81


7/81

ABSTRAKSI

Nama & ;aras ndria !ardani

Program Studi & (imia>udul &


8/81

ABSTRACT

=ii


Name & ;aras ndria !ardani

Study Program & (imiaTitle & nalysis Method


9/81

DAFTAR ISI

=iii


HALAMAN PERN3ATAAN ORISINALITAS444444444444444444444444444444444444444444444444i

HALAMAN PENGESAHAN444444444444444444444444444444444444444444444444444444444444444444444444444ii

KATA PENGHANTAR444444444444444444444444444444444444444444444444444444444444444444444444444444444444iii

HALAMAN PERN3ATAAN PERSETU1UAN PUBLIKASI444444444444444444444445

ABSTRAK4444444444444444444444444444444444444444444444444444444444444444444444444444444444444444444444444444444444445i

DAFTAR ISI4444444444444444444444444444444444444444444444444444444444444444444444444444444444444444444444444444 5iii

DAFTAR GAMBAR6 44444444444444444444444444444444444444444444444444444444444444444444444444444444444447i

DAFTAR TABEL6 44444444444444444444444444444444444444444444444444444444444444444444444444444444444444444 7ii

DAFTAR LAMPIRAN64444444444444444444444444444444444444444444444444444444444444444444444444444444447ii

BAB I PENDAHULUAN

*.' ;atar ,elakang Masalah......................................................................... '

*.+ Perumusan Masalah ................................................................................ +

*.3 Tujuan Penelitian .................................................................................... 3

*. 2ipotesis.................................................................................................... 3*./ Man0aat Penelitian. ..................................................................................3

BAB II TIN1AUAN PUSTAKA

**.'


10/81

DAFTAR ISI

=iii


**.3.3 Selekti0itas....................................................................................'

**.3. ;iniearitas dan Rentang................................................................ '

**.3./ ,atas #eteksi dan ,atas (uantisasi............................................. '/**. Spektroskopi.......................................................................................... '1

**./ Teori Spektroskopi Serapan Sinar %ltra


11/81

DAFTAR ISI

=iii


*


12/81

'


DAFTAR GAMBAR

am"ar +.' Struktur-struktur isiologis


13/81

Bii


DAFTAR TABEL

Ta"el +.' (andungan


14/81


DAFTAR LAMPIRAN

;ampiran ' Persamaan ;iniear untuk


15/81

Universitas Indonesia'


BAB I

PENDAHULUAN

*.' La#a% Be!akan Masa!a"


16/81

+

Universitas Indonesia


'9994. Pada kenyataannya) masyarakat le"ih memilih minuman "uah kemasan

di"andingkan dengan mengkonsumsi =itamin 5 pada "uah alami) hal ini

dikarenakan minuman "uah kemasan yang mudah ditemukan dimanapun dan

penggunaanya yang relati=e le"ih praktis. Tetapi kandungan =itamin 5 dalam

la"el kemasan minuman "uah terse"ut diduga tidak sesuai dengan apa yang

tertera pada kemasan. ?leh karena itu) diperlukannya pengawasan yang

merupakan salah satu "entuk upaya untuk melindungi konsumen dari

in0ormasi la"el yang tidak "enar.

Pada penelitian kali ini akan dilakukan =alidasi metode analisis dan

memeriksa apakah kadar =itamin 5 pada minuman "uah kemasan sesuai

dengan kadar yang ter$antum pada la"el minuman "uah kemasan terse"ut dan

diharapkan penelitian ini juga dapat mem"antu dalam pengawasan kadar

=itamin 5 pada minuman "uah kemasan yang "eredar di pasaran.

*.+ Pe%u&usan Masa!a"

(e"utuhan manusia akan =itamin 5 semakin meningkat diiringi

semakin "erkem"angnya produk-produk "aik makanan) minuman) o"at

o"atan dan lain se"againya. ?leh karena itu ke"utuhan terse"ut harus

ditunjang dengan dengan kesertediaan =itamin 5 yang tinggi. Namun dilain

pihak produsen harus memperhatikan kandungan dan kadar =itamin 5 dari

proses pem"uatannya. danya produsen yang tidak memperhatikan

kandungan dan kadar =itamin 5 akan menye"a"kan dampak negati=e "agi

tu"uh. (arena manusia mutlak memerlukan =itamin 5 dari luar tu"uh untuk

memenuhi ke"utuhannya 5arr dan rei) '9994. ?leh karena itu penelitian ini

dimaksudkan untuk menguji kadar dan kandungan dari =itamin 5 pada sampel

minuman "uah kemasan yang terdapat dipasaran.


17/81

kandungan =itamin 5 yang terdapat dipasaran dengan "aik. 5ara kerja dari

penelitian ini yaitu dengan mem"uat larutan standard =itamin 5 dengan

"er"agai ma$am konsentrasi dan diukur dengan menggunakan

spektro0otometri %


18/81



BAB II

TIN1AUAN PUSTAKA

II42 VITAMIN C


19/81

mbar 2.1 Struktur-struktur fsiologis vitamin C

min C termasuk golongan vitamin yang sangat mudah larut dalam air, sedikit larut dalam aena mudah dioksidasi, maka vitamin C merupakan suatu reduktor yangt $%hurnham dkk, 2&&&'.

/



+)3 diketogulonik) lalu dapat menjadi asam oksalat dan '-asam treonik.

Reaksi =itamin 5 menjadi asam ;-dehidroaskor"at "ersi0at re=ersi"le)

sedangkan reaksi reaksi yang lainnya tidak. Thurnham dkk) +@@@4.


20/81

tereduksi yang mempunyai e0ek se"agai pen$egat inter$eptor4 radikal "e"as

mem"rane) sehingga 0ungsinya kem"ali mem"aik. Re-reduksi radikal

askor"at terjadi se$ara spontan dengan jalan "ereaksi sesamanya4 atau oleh

"antuan glutation atau N#2 se"agai ko0aktor pereduksi 5arr dan rei)

'9994.

,e"erapa 0ungsi =itamin 5 yang sangat penting adalah sintesis

kolagen) "iosintesis karnitin) meta"olisme histamine) sintesis neurotransmitter

norepine0rin4dan 0ungsi imun) serta meningkatkan kemampuan a"sor"si :at

"esi nonheme) hidroksilasi kolestrol di mikroso hepati$ agar dapat

diekskresikan dalam asam empedu) mereduksi metal yang toksik dan

meningkatkan imunitas ;e=ine dkk)'99/I $om"s '99+4.Se"agai antioksidan =itamin 5 yang e0ekti0 dalam mereduksi

superoksida $&2(', radikal hidroksil $&)' dan hydrogen peroksida )2&2.

Se"agai donor ele$tron )=itamin 5 sangat ideal karena intermediate radikal

"e"asnya paling tidak toksik di"anding radikal "e"as lainnya Ma$hlin dan

,endi$h) '9764. Salah satu peran yang tidak menguntungkan dari =itamin 5

ialah "ila terdapat ion logam seperti transisi seperti "esi dan tem"aga) =itamin

5 dapat "erperan se"agai oksidan "ila "ereaksi dengan logam transisi

senhingga dapt memi$u terjadinya peroksidasi lipid 5om"s) '99+4. kan

tetapi karena jumlah yang sedikit dari ion ion logam itu) maka se$ara in =i=o

si0at antioksidan dari =itamin 5 le"ih dominan 5hom"s) '99+I 5arr dan rei)

'9994.

ungsi lain dari =itamin 5 yang menguntungkan adalah mampu

dengan $epat mereduksi kem"ali radikal K tokoperoksil dan "ekerja se$ara

sinergis menghadapi stress oksidati0 pada mem"rane atau lipoprotein dan

$airan. Reaksi reduksi-oksidasi asam askor"at-asam dehidroaskor"at yang

"erkaitan dengan akti=itas S2 glutation tereduksi4 dapat le"ih

menge0ekti0kan meta"olisme glukosa melalui jalur 2MP heBosa mono

phospat4) Niki dkk) '99/4. S2 juga menye"a"kan =itamin 5 dan K


21/81

toko0erol dalam status tereduksi. Penurunan S2 jaringan akan menim"ulkan

kerusakan sel) gangguan imunitas dan proses penuaan.

Selain itu) man0aat lain dari =itamin 5 ialah turut "erperan dalam

pen$egahan tim"ulnya katarak) =itamin 5 merupakan antioksidan poten untuk

mengatasi radikal "e"as yang dapat merusak sel atau jaringan) termasuk

melindungi lensa dari kerusakan oksidati0 yang ditim"ulkan oleh radiasi %eruk /@

nggur @

Melon '3-33

pel '@-3@

Ras"eri '7-+/

Pea$h 6-'

Pisang '@

5eri '@

>am"u ''1

#uwet 7/.3

Sukun /7.

P%(:uk "e=ani

2ati) ginjal '@-@

Susu sapi '-+

#aging @-+

Sa$u% &a$u%

;ada '+/-+@@

terseli '6@

,rokoli 9@-'/@

,ayam /@-9@

(em"ang kol 1@-7@

(ol 3@-1@

#aun "awang '/-3@


24/81

VALIDASI METODE ANALISIS

dasi metode analitis adalah suatu tindakan penilaian terhadap parameter tertentu, berdasaerapa parameter analisis yang harus dipertimbangkan dalam validasi metode diba/ah ini*

(a$ang '@-3@

,awang '@-3@

(entang '@-3@

(apri '@-3@

>agung '+

!ortel /-'@

#aun katuk '1

#aun singkong '+/-'

Paria putih /7

Selada air /1

Toge 1

Tomat 3

ASI /-1


25/81

**.3.' Ke>e%&a#an

(e$ermatan adalah kedekatan hasil uji antara hasil yang diperoleh

dengan nilai se"enarnya true =alue4 atau dengan nilai re0erensinya 5hown

5hung 5han et all) +@@4. (e$ermatan menggam"arkan kesalahan sistematik

dari suatu hasil pengukuran. (esalahan sistematik "erasal dari pengaruh-

pengaruh yang dapat diketahui dengan pasti dan "ersi0at konstan. Sum"er

kesalahan "isa dari kelem"a"an) "ahan re0erensi) ketidakpastian yang

di"erikan oleh serti0ikat) metode analisis dan lain-lain Sumardi) +@@/4.

(esalahan sistematik mem"erikan penyimpanagn positi0 dan penyimpangan

negati=e dalam per$o"aan.

(e$ermatan dinyatakan se"agai persen kem"ali analit yang

ditam"ahkan dan nilai ke$ermatan dapat dinyatakan dengan persen perolehan

kem"ali persen re$o=ery4. (etika penentuan "atasan uji perolehan kem"ali

"elum ditentukan oleh la"oratorium yang melakukan pengujian maka se"agai

"atasan awal dapat ditentukan "erdasarkan ta"le di"awah ini&

Tabe! 040Nilai persen re$o=ery

Sum"er& !ood) '997


26/81

Terdapat dua $ara dalam menentukan ke$ermatan suatu metode&

a. Metode simulasi standar se"agai sampel4

#alam metode simulasi sejumlah analit "ahan murni diukur kadarnya

terle"ih dahulu dengan konsentrasi yang sudah diketahui4) kemudian

ditam"ahkan kedalam "ahan $ampuran pem"awa sediaan pla$e"o

adalah $ampuran pereaksi yang digunakan4 lalu $ampuran diukur dan

dianalisis) dan hasilnya di"andingkan dengan kadar analit yang

ditam"ahkan kadar se"enarnya4.

". Metode penam"ahan "ahan "aku standar adisi4

Pada metode penam"ahan "aku) sejumlah analit "ahan murni yang

diketahui kadarnya ditam"ahkan pada sampel yang telah mengandung

analit) namun tidak diketahui kuantitasnya. Matriks sampel yang telah

mengandung analit juga dianalisis. Selisih kedua hasil di"andingkan

dengan kadar yang se"enarnya.

**.3.+ Keseksa&aan

(eseksamaan adalah kedekatan hasil uji dengan $ara memperolehpengukuran dari "er"agai $ontoh yang homogen dalam kondisi yang normal

5hown 5hung 5han et all) +@@4. (eseksamaan adalah ukuran yang

menunjukkan derajat kesesuaian antara hasil uji indi=idual) diukur melalui

penye"aran hasil indi=idual rata-rata jika prosedur ditetapkan se$ara "erulang

pada sampel yang diam"il dari $ampuran yang homogen.

Pengujian keseksamaan umumnya men$akup pemeriksaan

repita"ilitas) keseksamaan antara) dan reprodusi"ilitas keterulangan4. #alam

per$o"aan ini dilakukan dengan melakukan uji repita"ilitas yakni dilakukan

oleh seorang analisis) menggunakan la"oratorium yang sama. %ji repita"ilitas

dilakukan untuk mengetahui =aria"ilitas data yang dihasilkan dalam "e"erapa


27/81

pengujian "erurutan pada kondisi yang sama. Repita"ilitas ini untuk melihat

konsistensi analisis) tingkat kesulitan metode dan $ontoh uji.

Pada umumnya nilai keseksamaan dihitung menggunakan standar

de=iasi S#4 untuk menghasilkanRelative Standard Deviasion RS#4 atau

Coeficient Variation 5


28/81

+J RSD/J ketelitian sedang

RSDO /J ketelitian rendah

**.3.3 Se!ek#i5i#as

Selekti0itas atau spesi0itas suatu metode adalah kemampuannya yang

hanya mengukur :at tertentu saja se$ara $ermat dan seksama dengan adanya

komponen lain yang mungkin ada dalm matriks sampel. Selekti0itas sering

kali dapat dinyatakan dengan derajat penyimpangan metode yang dilakukan

terhadap sampel yang mengandung "ahan yang ditam"ahkan "erupa

$ampuran senyawa yang dianalisis dan mem"andingkannya.

**.3. Liniea%i#as :an Ren#an

;iniearitas adalah kemampuan dalam rentang4 metode analisis

mem"erikan respon se$ara langsung atau "antuan trans0ormasi matematik

yang "aik) untuk mendapatkan hasil dari =aria"le data a"sor"ansi dan rentang

kur=a4 dimana se$ara langsung proposional dengan konsentrasi sesuai analit4

dalam $ontoh kisaran yang ada) serta untuk mengetahui kemampuan standar

dalam mendeteksi analit dalam $ontoh 5hown 5hung 5han et all) +@@4.

rtinya liniearitas suatu metode digunakan untuk mengetahui kemampuan

standar) sehingga dapat mem"uktikan adanya hu"ungan linier antara

konsentrasi analit dengan respon detektor.

%ji linearitas ini dilakukan dengan suatu larutan "aku yang terdiri atasminimal / konsentrasi yang naik dengan rentang /@-'@@J dari rentang

komponen uji. (emudian data diproses dengan menggunakan regresi linear)

sehingga dapat diperoleh respon linier terhadap konsentrasi larutan "aku

dengan nilai koe0isien korelasi diharapkan mendekati ' atau diatas @)99/


29/81

untuk suatu metode analisis yang "aik. Rentang metode adalah pernyataan

konsentrasi terendah dan tertinggi analit yang mana metode analisis

mem"erikan ke$ermatan) keseksamaan dan linearitas yang dapat diterima.

Se"agai parameter adanya hu"ungan linear ) digunakan koe0isien korelasi r4

pada analisis regresi linear y"Ba. hu"ungan linier yang ideal di$apai jika

nilai " @ dan r Q' atau -' tergantung pada arah garis. Nilai a pada regresi

linier menunjukkan kepekaan analisis terutama instrumen yang digunakan

2armita) +@@4.

(xix yiy )r =

6+ +

'A +

7 89:;< (xix)(yi y

) =>

?

@ A

**.3./ Ba#as De#eksi :an Ba#as Kuan#isasi

,atas deteksi merupakan jumlah terke$il analit dalam sampel yang

dapat dideteksi yang masih mem"erikan respon yang signi0i$ant di"andingkan

dengan "lanko. ,atas deteksi merupakan parameter uji "atas. ,atas deteksi

dinyatakan dalam konsentrasi analit persen "agian permiliyar4 dalam sampel.

,atas kuantisasi merupakan jumlah terke$il analit dalam sampel yang

masih memenuhi $riteria $ermat dan seksama dan dapat dikuanti0ikasi dengan

akurasi dan presisi yang "aik. ,atas kuantisasi adalah nilai parameter

penentuan kuantitati0 senyawa yang terdapat dalam konsentrasi rendah dalammatriks.


30/81

Gambar 2.2 "atas deteksi dalam me

o $imit o! etection'D 0SSlope

oE $imit o! Euantition'

DE 1& Slope

Sy

n 2dimana, S 4 Standar eviasi $simpangan "aku' dari blanko contoh membe

**. S'ek#%(sk('i

Spektroskopi adalah ilmu yang mempelajari materi dan atri"utnya

"erdasarkan $ahaya) suara atau partikel yang dipan$arkan) diserap atau

dipantulkan oleh materi terse"ut. Spektroskopi juga dapat dide0inisikan


31/81

se"agai ilmu yang mempelajari interaksi antara $ahaya dan materi. #alam

$atatan sejarah) spektroskopi menga$u kepada $a"ang ilmu dimana $ahaya

tampak digunakan dalam teori-teori struktur materi serta analisa kualitati0

dan kuantitati0.

Metoda spekroskopi merupakan alat ukur utama pada kimia modern

untuk mengidenti0ikasi struktur molekul. #alam masa modern) de0inisi

spektroskopi "erkem"ang seiring teknik-teknik "aru yang dikem"angkan

untuk meman0aatkan tidak hanya $ahaya tampak) tetapi juga "entuk lain dari

radiasi elektromagnetik dan non-elektromagnetik seperti gelom"ang mikro)

gelom"ang radio) elektron) 0onon) gelom"ang suara) sinar B dan lain

se"againya.

Spektroskopi umumnya digunakan dalam kimia 0isik dan kimia

analisis untuk mengidenti0ikasi suatu su"stansi melalui spektrum yang

dipan$arkan atau yang diserap. Pada kimia organik metoda spektroskopi

digunakan untuk menentukan dan mengkon0irmasi struktur molekul) untuk

memantau reaksi) dan untuk mengetahui kemurnian suatu senyawa. lat

untuk merekam spektrum dise"ut spektrometer.

Spektroskopi juga digunakan se$ara intensi0 dalam astronomi dan

penginderaan jarak jauh. (e"anyakan teleskop-teleskop "esar mempunyai

spektrogra0 yang digunakan untuk mengukur komposisi kimia dan atri"ut

0isik lainnya dari suatu o"jek astronomi atau untuk mengukur ke$epatan o"jek

astronomi "erdasarkan pergeseran #oppler garis-garis spektral. Salah satu

jenis spektroskopi adalah spektroskopi serapan sinar ultra =iolet Mulya)

'994.


32/81

**./ Te(%i S'ek#%(sk('i Se%a'an Sina% U!#%a Vi(!e#

%mumnya se"agian "esar senyawa organik dapat dianalisis se$ara

kualitati0 maupun kuantitati0 dengan menggunakan spektro0otometer

ultra=iolet pada panjang gelom"ang +@@-@@ nm. (emudian hasil pengukuran

dapat diperoleh dari alat pen$atat pada spektro0otometer.

Molekul-molekul dengan elektron terikat lemah dapat menyerap

energi dalam daerah %


33/81

,e"erapa istilah penting pada spektra elektronik&

(romo0or gugus tak jenuh ko=alen yang menye"a"kan serapan

elektronik seperti 55) 5? dan N?+4

uksokrom gugus jenuh yang "ila terikat pada suatu kromo0or akan

mempengaruhi panjang gelom"ang dan intensitas serapan

maksimumnya seperti N2+) ?2) dan 5l4

Pergeseran "atokromik pergeseran merah4. Pergeseran serapan ke arah

panjang gelom"ang le"ih panjang aki"at pengaruh su"stitusi atau

pelarut.

Pergeseran hipsokromik pergeseran "iru4. Pergeseran serapan ke arah

panjang gelom"ang le"ih pendek aki"at pengaruh su"stitusi atau pelarut.

E0ek hiperkromik. Suatu kenaikkan intensitas serapan.

E0ek hipokromik. Suatu penurunan intensitas serapan. Sunardi) +@@/4

**. , Ins#%u&en#asi s'ek#%(9(#(&e#e% UV-Vis

Pada umumnya kon0igurasi dasar setiap spektro0otometer %


34/81

Gambar 2.F Sistem optik spektro!otometer V-Vis radiasi berkas tunggal$single beam'

2. Sistem optik radiasi berkas ganda $double beam'

Gambar 2. Sistem optik spektro!otometer V-Vis radiasi berkas ganda$double beam'

0. Sistem optik radiasi berkas terpisah $splittter beam'

#ilihat dari sistem optik spektro0otometer dapat digolongkan menjadi

tiga ma$am&

'. Sistem optik radiasi "erkas tunggal single "eam4

am"ar +.1 Sistem optik radiasi "erkas terpisah splittter "eam4

Spektro0otometer %


35/81

mulai dipopulerkan spektro0otometer %


36/81

disekitar panjang gelom"ang 31/nm 31/.@&31/./&dan 311.3 nm4 dan

sekaligus menge$ek resolusi dari monokromator.

+. Monokromator

Monokromator "er0ungsi untuk mendapatkan radiasi monokromatis

dari sum"er radiasi yang meman$arkan radiasi polikromatis.

Monokromator pada spektro0otometer %


37/81

pengukuran '9@-''@@ nm) dan ku=et dari "ahn gelas dipakai pada daerah

pengukuran 37@-''@@nm4 karena "ahan dari gelas mengadsor"si radiasi

sinar %


38/81

tode Hbase-lineI seperti terlihat pada gambar di ba/ahn ini $gambar 2.J'. Ketode ini hanya

II4 / Ana!isis Kua!i#a#i9 :enan Me#(:e ?Base-!ine@

nalisis komponen yang diketahui dan "erada "ersama-sama

komponen lain yang tak diketahui) tetapi menyerap radiasi pada daerah

spe$tral yang sama) merupakan masalah yang sering dihadapi dalam

pengukuran. Masalah-masalah terse"ut seringkali dapat diselesaikan dengan

am"ar +.7 nalisis kuantitati0 dengan teknik G,ase-lineH

$atatan& data harus diplot terhadap satuan a"sor"ansi) "ukan JT4


39/81

a4 Menggam"arkan "agian spe$trum dari senyawa yang mempunyai pu$ak

serapan. (arena konsentrasi diketahui maka harga B dapat dihitung.

"4 #engan menggam"arkan ,ase-line harga B dapat pula dihitung dari

tinggi pun$ak itu sendiri. 2arga ini B4 se"anding dengan konsentrasi

dan dapat digunakan untuk analisis kuantitati0.

$4 >ika senyawa "er$anpur dengan senyawa Y yang juga menyerap dan

mempunyai spe$trum yang sederhana seperti yang ditunjukkan oleh garis

putus putus pada gam"ar $4) harga pun$ak B tidak "eru"ah. kan tetapi

pun$ak se$ara keseluruhan akan "ergeser ke harga a"sor"ansi yang le"ih

tinggi.

d4 >ika senyawa ditentukan dengan adanya senyawa 8 yang spe$trum nyaterlihat se"agai garis putus-putus) akan mengaki"atkan peru"ahan dalam

"entuk pun$ak akan tetapi pun$ak terse"ut tidak "eru"ah.

#engan menggunakan metode G,ase-lineH ini maka adanya senyawa matriks

$ontoh dapat dihilangkan sehingga nilai a"sor"an yang didapat "enar-"enar

hanya dari analit yang dianalisis #onald T sawyer) '9/@I Sunardi. +@@/4.


40/81

Universitas indonesia+1


BAB III

METODE PENELITIAN

***.' Me#(:e 'ene!i#ian

#alam penelitian ini) =itamin 5 diukur dengan menggunakan

spektro0otometri %


41/81

+6

Universitas indonesia


***.3.+ Ba"an

,ahan penilitian ini meliputi&

'. sam askor"at =itamin 54 s4

+. sam sitrat s4

3. Ethanol aC4

. Cua"idest aC4

/. ,e"erapa sampel minuman "uah kemasan dari "er"agai merk yang

dipilih karena "entuknya larutan dan pada etiketnya tertera kadar

=itamin 5 dalam tiap "otolnya.

III4 Ca%a Ke%ja

III442 P%e'a%asi S#an:a%

;arutan induk =itamin 5 disiapkan dengan menim"ang =itamin 5

se"anyak +/ mg dan dilarutkan dengan aCua"idest dalam la"u ukur +/@ml

sehingga konsentrasinya menjadi '@@ppm. (ur=a kali"rasi =itamin 5

diperoleh dengan mengen$erkan larutan standar induk yang di"uat dengan

"er"agai ma$am konsentrasi yaitu @.'ppm) @./ppm) 'ppm) +ppm) 3ppm)

ppm) /ppm) 1ppm) 6ppm) 7ppm) 9ppm) '@ppm) +@ppm) 3@ppm) /@ppm)

6@ppm) 7@ppm =A=4.

***..' Uji s#abi!i#as

%ji sta"ilitas ini dilakukan dengan mengam"il konsentrasi terke$il

larutan pada =itamin 5 yang masih mampu dan masih dapat ter"a$a dengan

"aik. ;alu setiap jamnya diukur tinggi a"sor"ansinya) dan dilihat

penurunannya.

***..+ Uji '%esisi4

%ji presisi yang dilakukan ada dua&

'. %ji presisi untuk mengetahui ketelitian alat maupun ketelitian praktikan

itu sendiri


42/81

uji ini dilakukan dengan mem"uat larutan standar =itamin 5 yaitu

'@@ppm) '@ppm) 'ppm) masing-masing larutan terse"ut di"uat

se"anyak '@ la"u ukur. #ari kesepuluh la"u ukur terse"ut) salah

satunya diukur se"anyak '@ kali dan yang lainnya hanya diukur

se"anyak satu kali.

+. %ji presisi dilakukan pada deret standar =itamin 5 dengan "er"agai

konsentrasi

=itamin 5 dilakukan pengukuran ulang dengan sedikitnya '@

kali untuk tiap konsentrasi yang di"uat dari pengen$eran larutan induk

'@@ppm.

(onsentrasi yang diukur ialah @.'ppm) @./ppm) 'ppm) +pppm)3ppm) ppm) /ppm) 1ppm) 6ppm) 7ppm) 9ppm) '@ppm) +@ppm)

3@ppm) /@ppm) 6@ppm) 7@ppm =A=4 dan larutan induk '@@ppm.

;arutan standar =itamin 5 terse"ut dimasukkan kedalam la"u ukur

'@@ml dan ditam"ahkan aCua"idest hingga tanda "atas) lalu

dihomogenkan. Masing-masing larutan dimasukkan kedalam ku=et

dan di"a$a dengan menggunakan spektro0otometri %


43/81

***.. Uji LOD :an LO

#i"uat larutan standard =itamin 5 yang menga$u pada kur=a kali"rasi

dari standard =itamin 5) didapatkan kur=a kali"rasi kemudian pengukuran

standar dilakukan dari konsentrasi tertinggi sampai dengan konsentrasi yang

terendah sampai didapatkan "atas dimana alat spektro0otometri %


44/81

dan dihomogenkan. Setelah semua larutan sampel siap "arulah dilakukan

pengukuran a"sor"ansi terhadap sampel.

Sampel ini diuji dengan menggunakan alat spektro0otometri %


45/81

Universitas Indonesia3'


BAB IV

HASIL DAN PEMBAHASAN

Pada penelitian ini telah dilakukan analisis untuk mengetahui kadar

=itamin 5 didalam minuman "uah kemasan yang "eredar dipasaran. nalisis

dilakukan dengan mengunakan pendekatan metode =alidasi dengan

menggunakan instrumen spektro0otometri %< -


46/81

3+



yang mempunyai energi eksitasi yang $ukup rendah yang menim"ulkan

penyerapan dalam daerah %< dekat.

Penetapan kadar =itamin 5 dengan $ara spektro0otometri %


47/81

yang le"ih ke$il akan menyerap panjang gelom"ang yang le"ih panjang.

(ekuatan suatu asam merupakan kemampuannya menyum"angkan atau

melepaskan proton pada molekul air. sam lemah adalah asam yang tidak

terionisasi se$ara signi0ikan dalam larutan.


48/81

konsentrasi =itamin 5 dari konsentrasi tinggi kekonsentrasi rendah) terjadi

pergeseran panjang gelom"ang maksimum dari +3nm konsentrasi tinggi 3@

ppm sAd '@@ ppm4 ke +1/ nm konsentrasi rendah dari @.1@6 ppm sAd 3@ ppm4

pergeseran ini dise"ut pergeseran "atokromik.

*


49/81

am"ar .3 (ur=a degradasi =itamin 5 konsentrasi 'ppm

*


50/81

5ontoh metode "ase-line&

am"ar . Metode "ase line pada konsentrasi =itamin 5 3ppm

%ji presisi yang praktikan lakukan ada dua yaitu&

'. %ji presisi untuk mengetahui ketelitian instrumen maupun ketelitian

indi=idu itu sendiri.

%ntuk mengetahui ketelitian dari instrument) maka dilakukan

pengukuran se"anyak '@ kali untuk setiap satu la"u ukur =itamin 5

dengan konsentrasi '@ppm) '@ppm) dan 'ppm. Sedangkan untuk

mengetahui ketelitian indi=idu) maka dilakukan dengan mem"uat larutan

=itamin 5 se"anyak '@ la"u ukur pada masing masing konsentrasi

yaitu'@@ppm) '@ppm) dan 'ppm dan diukur se"anyak satu kali. ;alu

di$ari rata ratanya dan didapatkan nilai simpangan de=iasinya maupun

nilai dari persentase simpangngan de=iasi relati=enya

#ari data yang didapat menunjukkan "ahwa ketelitian dari instrumenterse"ut masih $ukup "aik untuk digunakan. Sedangkan ketelitian

praktikan jauh le"ih rendah di"andingkan dengan instrumen. 2al ini dapat

dilihat dari nilai dari persentase simpangan de=iasi relati=enya yang

$enderung menurun seiring dengan semakin ke$ilnya konsentrasi.

%inggi

absorb

an


51/81

Ta"el .' %ji presisi untuk analisis instrumen

Ta"el .+ %ji presisi untuk analisis indi=idu

+. %ji presisi dilakukan pada deret standar =itamin 5 dengan "er"agai

konsentrasi

Masing-masing deret standar


52/81

i data diatas pada tabel F.0 bah/a nilai persentase deviasi standartive pada konsentrasi-konsentrasi ini lebih rendah dari syarat yang ditetapkan, Badi dapat d

IV.3 Liniearitas

Ta"el .3 %ji presisi untuk kur=a standar liniearitas

;iniearitas senyawa =itamin 5 ditetapkan dengan mem"uat deret

standar se"anyak ' konsentrasi pada rentang @.'ppm =A=4 sampai dengan

3@ppm =A=4 pada panjang gelom"ang +1/ nm) sedangkan se"anyak /


53/81

%abel F.F #onsentrasi standar vitamin C $ 2Lnm'

konsentrasi pada rentang 3@ ppm =A=4 sampai dengan '@@ppm pada panjang

gelom"ang +3nm.

,erikut adalah ta"el dan gra0ik persamaan linier dari standar =itamin 5

dengan pelarut aCua"idespada panjang gelom"ang +1/nm untuk konsentrasi

rendah @.'ppm sAd 3@ppm4&

am"ar ./ Persamaan linier konsentrasi @.'ppm sAd 3@ppm +1/nm4


54/81

,erikut adalah ta"el dan gra0ik persamaan linier dari standar =itamin 5

dengan pelarut aCua"idespada panjang gelom"ang +3nm untuk konsentrasi

tinggi 3@ppm sAd '@@ppm4&

Ta"el ./ (onsentrasi standar =itamin 5 +3nm4

am"ar .1 Persamaan linier =itamin 5 konsentrasi 3@ppm sAd '@@ppm

+3nm4

Pada panjang gelom"ang +1/ nm di"uat rentang linier dari konsentrasi

@)'ppm =A=4 sampai dengan 3@ppm =A=4 mem"erikan persamaan linier

y@.@/Q@.@@1 dengan regresi linier N2 @)9764. Sedangkan pada panjang

gelom"ang +3nm di"uat rentang liniear dari 3@ppm =A=4 sampai dengan

'@@ppm mem"erikan persamaan liniear y@)@+9BQ@)13 dengan regresi linier


55/81

analisis suatu analit. Bi keliniearan ini digunakan suatu larutan baku standar asa vitamin Ca rentang linier ini dibuat suatu garis linier dari konsentrasi versus absorbansi. "erikut persael F.L #onsentrasi linier standar vitamin C $2Lnm'

N2 @)7964. Pada rentang daerah ini adalah kurang linier sehingga

perlu di$ari daerah linier untuk melakukan kerja.

Pem"uatan daerah liniear ini "ertujuan untuk mengetahui daerah

rentang kerja yang "aik dari kelinieran standar =itamin 5. 2al ini sangat perlu

dilakukan karena pada daerah ini akan didapatkan metode =alidasi yang tepat

am"ar .6 Persamaan liniear untuk


56/81

mbar F.J Oersamaan liniear untuk vitamin C $2F0nm'

nurut uBi kelinearan, pada panBang gelombang 2Lnm, maka dilakukan pembuangan data pa

Ta"el .6 (onsentrasi linier standar =itamin 5 +3nm4

rentang kerja, maka data terse"ut harus di"uang.

#ari data di atas didapatkan nilai a"sor"ansi yang "erada pada rentang

linier yang diperkenankan yaitu y @.@/BQ @.@@1 dengan nilai regresi linier

mengalami peningkatan yaitu N2 @)9964 untuk panjang gelom"ang +1/nm

dan y@)@B-@)+/ dengan nilai regresi linier mengalami peningkatan yaitu


57/81

N2 @)9974 untuk panjang gelom"ang +3nm. #aerah ini memiliki regresi

linier yang le"ih tinggi dari regresi linier yang ditetapkan yaitu [email protected]/ pada

kelayakan suatu metode analisis. Pada rentang linier ini menunjukkan "ahwa

daerah ini adalah daerah respon linier suatu =alidasi metode penetapan kadar

senyawa dalam suatu analit.

Ta"el .7 Standar de=iasi untuk persamaan liniear =itamin 5 +1/nm4

Ta"el .9 Standar de=iasi untuk persamaan liniear =itamin 5 +3nm4

,erdasarkan rentang liniear +1/nm4 y@.@/BQ @.@@1 didapatkan

sesuai perhitungan pada ta"le .3 standar de=iasi adalah @)@'' dan standar

de=iasi untuk nilai " @)@/@)@@' dan nilai standar de=iasi untuk nilai

a@.@@1@)@@1. Sedangkan "erdasarkan rentang liniear +3nm4 y@)@B-

@)+/ didapatkan sesuai perhitungan pada ta"le . standar de=iasi adalah

@.@99 dan standar de=iasi untuk nilai "@)@@.@@ dan nilai standar de=iasi

untuk nilai a-@.+/@.'7/.


58/81

nko dengan tingkat kepercayaan ++Q. "atas kuantisasi merupakan konsentrasi analit yang mel F.10 D dan DE untuk persamaan liniear vitamin C

IV4 Ba#as :e#eksi :an Ba#as kuan#isasi

#ari hasil persamaan linier =itamin 5 yaitu y @.@/BQ@.@@1) dapat

di$ari "atas deteksi maupun "atas kuantisasinya. #iman "atas deteksi

merupakan konsentrasi analit terendah yang mampu menghasilkan signal

$ukup "esar sehingga mampu terdeteksi dan dapat di"edakan dengan signal

dan

am"ar .9 ra0ik uji ;?# dan ;?D


59/81

5 Uji Selektiftas

selektiftas dari vitamin C bertuBuan untuk mengetahui perubahan bentuk kurva maupun pekut adalah kurva dari asam sitrat dan vitamin C , yang dibuat konsentrasinya masing-masin

#ari hasil perhitungan se$ara statisti$ menggunakan persamaan kur=a

kali"rasi yang diperoleh dari ta"le ./ dengan rentang konsentrasi larutan

standar =itamin 5 dari @.'ppm sAd '@ ppm =A=4 ) maka diperoleh nilai ;?#

@.1@6 ppm dan nilai ;?D adalah +.@+ ppm.

am"ar .'@ ra0ik a4 asam sitrat '@ppm "4 =itamin 5 '@ppm $4

per$ampuran antara =itamin 5 dengan asam sitrat.


60/81

#ari analisis kur=a =itamin 5 terse"ut) jika ditam"ahkan asam sitrat

kedalamnya tidak terjadi peru"ahan kur=a maupun panjang gelom"ang dari

=itamin 5 itu sendiri. 2al terse"ut menandakan "ahwa asam sitrat tidak

mem"erikan pengaruh "entuk apapun terhadap kur=a =itamin 5) dapat dilihat

pada gam"ar .'@.

*


61/81

5ontoh gra0ik sampel&

am"ar .'' ra0ik sampel dan , yang dien$erkan sepuluh kali

#apat dilihat dari spe$trum serapan pada sampel yang diperoleh

tidak terlalu terlihat kemun$ulan peak pada panjang gelom"ang +1/ nm. 2al

ini "isa dikarenakan si0at =itamin 5 yang sangat mudah dioksidasi. Selain

terurai menjadi asam dehidroaskor"at) dan tidak menutup kemungkinan ada

=itamin 5 yang telah terurai menjadi asam treonik dan asam oksalat yang

reaksinya "ersi0at irre=ersi"le Thurnham dkk) +@@@4.

#ari gam"ar .'' pada sampel menghasilkan tinggi a"sor"ansi pada

panjang gelom"ang +1/ nm yaitu @)@/3. %ntuk mendapatkan kadar sampel)

maka tinggi a"sor"an terse"ut dimasukkan kem"ali kedalam persamaan

liniear y@.@/BQ@)@@1. (adar yang didapat dikalikan dengan 0a$tor

pengen$eran '@B4 yaitu 7)1/ ppm sedangkan kadar =itamin 5 yang tertera

pada kemasan adalah 9@mg dalam kemasan +@@ml. #an Pada sampel ,

menghasilkan tinggi a"sor"ansi pada panjang gelom"ang +1/ nm yaitu @)@'3.

%ntuk mendapatkan kadar sampel) maka tinggi a"sor"an terse"ut dimasukkan

kem"ali kedalam persamaan liniear y@.@/BQ@)@@1. (adar yang didapatdikalikan dengan 0a$tor pengen$eran '@B4 yaitu ')3+1 mg. sedangkan kadar

=itamin 5 yang tertera pada kemasan adalah '@.39mg dalam kemasam +@@ml.


62/81

*


63/81

am"ar .'3 ra0ik a4 sampel , yang dien$erkan sepuluh kali "4 sampel ,yang ditam"ahkan standar =itamin 5 '@ppm

#engan adanya penam"ahan standar =itamin 5 se"esar @.@@' g) maka

pada panjang gelom"ang +1/ nm) akan terjadi peningkatan a"sor"ansi yang

$ukup signi0i$ant yaitu diperoleh tinggi a"sor"ansi untuk sampel , adalah

@)@11. Tinggi a"sor"an terse"ut dimasukkan kem"ali kedalam persamaan

linier y @.@/BQ@.@@1. (adar diperoleh dengan mengalikan 0a$tor

pengen$eran '@B4 yaitu se"esar '')@6+mgA;. (enaikan a"sor"ansi ini dapatdihitung dengan uji perolehan kem"ali yaitu 96)J.


64/81

Universitas Indonesia/@


BAB V

KESIMPULAN

'. Metode analisis dengan menggunakan spektro0otometri %


65/81

ebaiknya dilakukan pengukuran kadar vitamin C tidak hanya sebatas pada minuman saBa, y



SARAN

,erdasarkan hasil penelitian ini disarankan hal hal se"agai "erikut&

'. #ilakukannya pengaplikasian pelarut pada semua uji untuk =itamin 5

dengan menggunakan pelarut etanol murni agar diperoleh pergeseran

panjang gelom"ang di daerah %< tidak terlalu le"ar.


66/81

DAFTAR PUSTAKA

?5 uidelines 0or single la"oratory & r V .; %nderwood) '997)#nalisis Kimia Kuantitatif ed e ', ali&

ba&asa ole& Dr,r is Sopyan " *n+" enerbit *rlan++a-

#epartemen (esehatan Repu"lik *ndonesia '99/4Daftar omposisi .at

+i.i pan+an ndonesia) hal 9-/+.

#onald T sawyer) >awni$e M"ee"e) !illiam R 2eineman. e"ruary '9/@.

5hemistry eBperiments 0or instrumental methods. %ni=ersity o0 Pitts"urgh

#wi (oko Pratoko. +@@6.


67/81

2armita) +@@. Gpetunjuk pelaksanaan =alidasi metode dan $ara perhitungannya.H

Majalah ilmu ke0armasian) ulia. +@@1. .,. '99/4

#etermination o0 optimal .) dan ,endi$h .) '9764 0ree radi$al tissue damage & prote$ti=e role

o0 antioBidant nutrient. SE, >. l) '-/.
http://id.wikipedia.org/wiki/Asam_askorbathttp://id.wikipedia.org/wiki/Asam_askorbat


68/81

Matilainen T.) usat *.) #jalal .) dan Tarjowo '9974 ngka ke$ukupan gi:i yang

dianjurkan) dalam risala& /idyaarya pan+an dan +i.i akarta.

Mulya) '99. Muhammad. Suharman.#nalisis nstrumental. Perpustakaan

departemen (imia M*P %*) #epok.

Narins #. M. 5 '9914 =itamin dalamKrause0s 1ood) Nutrition and #iet Therapy

Mahlan ;.(.) and Stumps S.E.) eda4 +th ed) hal ''@-.

Niki E.) Nogu$hi N.) Tsus$hihashi 2.) otoh N. '99/4 *ntera$tion among

=itamin 5) =itamin E and , $arotene.#m" $" Clin" !utr" 1+ suppl4) '3++S-

'3+1S.

2Safety (SDS) data for ascorbic acid. ?B0ord %ni=ersity.

S$hetman .) ,yrd >. 5.) dan ru$how 2.!. '9794 The in0luen$e o0 smoking on


69/81

mins, dalam )uman Rutritions and ietatics $Garro/ . S., ames T. O. %., and Nalph U., eds' versitas ndonesia, 2&&J. Hpedoman teknis penulisan tugas akhir mahasis/a universitas ndod, N.U Rillsondan dan ). Tallin. 1++J. Euality in %he Wood Unalysis aboratory %he Noyal So

Taylor (. >ohn. '976. ;uality assurance of c&emical measurement. lorida& lewis

pu"lisher *n$.

Tetrasari) 2ermini. +@@3.


70/81

Universitas Indonesia/1


;ampiran '

. %ji Presisi

'. (ur=a %ji Presisi pada panjang gelom"ang +1/ nm Pelarut aCua"idest4

L


71/81




72/81

+. (ur=a %ji Presisi pada panjang gelom"ang +3 nm Pelarut aCua"ides4


73/81

Ulat spektro!otometri V-Visibel dioperasikan pada tempat dan /aktu yang sama.Bi presisi asam askorbat konsentrasi &. ppm $vPv'

Ulat spektro!otometri V-Visibel dioperasikan pada tempat dan /aktu yang sama.Bi presisi asam askorbat konsentrasi 1 ppm $vPv'

3. %ji presisi asam askor"at pada panjang gelom"ang +1/nm Pelarut aCua"idest4

*. %ji presisi asam askor"at konsentrasi @.' ppm =A=4

lat spektro0otometri %


74/81

Ulat spektro!otometri V-Visibel dioperasikan pada tempat dan /aktu yang sama

V.Bi presisi asam askorbat konsentrasi M ppm $vPv'

Ulat spektro!otometri V-Visibel dioperasikan pada tempat dan /aktu yang sama

V.Bi presisi asam askorbat konsentrasi 1& ppm $vPv'

L

*


75/81

L

. %ji presisi asam askor"at pada panjang gelom"ang +3 nm Pelarut aCua"idest4

*. %ji presisi asam askor"at konsentrasi 3@ ppm =A=4

lat spektro0otometri %


76/81

Sd 4 &,&11, Sb 4 &,&&1,dan Sa 4 &,&&L, o 4 &.L&M, oE 4 2.&2F2. #urva standar asam askorbat pada panBang gelombang 2F0 nm

;ampiran +

,. %ji ;inieritas asam askor"at

'. (ur=a standar asam askor"at pada panjang gelom"ang +1/ nm

Sd @.@99) S" @)@@.@@ dan Sa @.'7/


77/81

Bi liniearitas Bi D dan DE

Oembuatan larutanstandar asam askorbat

Validasi metode analisis $instrumen spektro!otometri VXVis'

Bi respon instrumen

Bi presisi

Bi selektiftas

Bi Sampel

Bi perolehan kembali

La&'i%an

C4 Baan Ke%ja


78/81

;ampran

#. %ji sampel


79/81


80/81


81/81

Documents

Digital_20289783 S1241 Laras Andria Wardani.unlocked