Etude comparée de la glycémie en tube sec et en tube

REPUBLIQUE DU BENIN

*-*-*-*-*-*-*

MINISTERE DE L’ENSEIGNEMENT SUPERIEUR ET DE LA RECH ERCHE SCIENTIFIQUE

*-*-*-*-*-*-*

DIRECTION GENERALE DE L’ENSEIGNEMENT SUPERIEUR

*-*-*-*-*-*-*

ECOLE SUPERIEURE ‘’LE FAUCON’’

DOMAINE : Sciences et Technologies

MENTION : Génie Biologique

FILIERE : Analyses Biologiques et Biochimiques

GRADE : Licence Professionnelle

RAPPORT DE STAGE DE FIN DE FORMATION POUR L’OBTENTI ON DE LA LICENCE PROFESSSIONNELLE

THEME :

Réalisé et soutenu par :

OKE Fifamè Marie Claire

Membres du jury :

Président du jury : Examinateur :

Professeur LOKO Frédéric

Professeur titulaire en Biochimie

Superviseur

Année académique : 2019-2020

Dr Gilles KINSICLOUNON

Docteur en Toxicologie de l’environnement

Dr Espérance KOUGNIMON

Docteur en Biochimie-Microbiologie

9ème

Promotion

Etude comparée de la glycémie en tube sec et en tube fluoré en fonction du temps

Tuteur :

AGOSSADOU Angélique


2

REPUBLIQUE DU BENIN

*-*-*-*-*-*-

MINISTERE DE L’ENSEIGNEMENT SUPERIEUR ET DE LA RECHERCHE SCIENTIFIQUE (MECESRS)

*-*-*-*-*-*-*

DIRECTION GENERALE DE L’ENSEIGNEMENT

SUPERIEUR

*-*-*-*-*-*-*

ECOLE SUPERIEURE ‘’LE FAUCON’’

*-*-*-*-*-*-*

DEPARTEMENT D’ANALYSES BIOLOGIQUES ET

BIOCHIMIQUES (ABB)

*-*-*-*-*-*-*

9èmePROMOTION DE LICENCE PROFESSIONNELLE

DIRECTEUR

Monsieur Michel SOARES

DIRECTEUR ACADEMIQUE

Pr. Hyacinthe AHISSOU

CHEF DU DEPARTEMENT ABB

Dr Paulin YOVO


3

Liste des Enseignants du Département de Génie Biologique

SPECIALITE: ANALYSES BIOLOGIQUES ET BIOCHIMIQUES

N° Noms Et Prénoms Matières Enseignées

1. ADJISSE Simplice Analyse et Algèbre

2. AGUESSI Pamphile Hématologie Hémostase

3. AHISSOU Hyacinthe Biochimie métabolique

4. AISSI Vahid Biochimie structurale

5. AKPOVI Casimir Biochimie clinique

6. ANAGO Eugénie Enzymologie

7. ATCHADE S. Pascal Parasitologie Générale et Médicale, Mycologie

8. ATREVI Nicolas Anatomie

9. BANKOLE Honoré Sourou Virologie, Bactériologie Appliquée

10. DEGBEY Cyriaque Comlan Santé Publique, Microbiologie Médicale

11. DESSOUASSI Noel Biophysiques

12. DJEDATIN Gustave Génétique

13. DOUGNON Victorien Microbiologie Générale, Méthodologie de la

Recherche

14. GLELE Moise Transfusion Sanguine

15. ISSAKA Bintou Soins Infirmiers

16. KANFON Aurélien Immuno-Hématologie, Sérologie, Hygiène

Sécurité Qualité Et Environnement

17. KLOTOE Jean-Robert Techniques Instrumentales, Equipements Biomédicaux

18. LAFIA Edgard Immunologie Générale, Management des services de santé

19. Mme Mariette HOUNSSOU Technique d’Expression Ecrite et Oral

20. Père MASLOKONON Vincent Histologie générale, Histopathologie

21. QUENUM Chantal Education Physique et Sportive

22. QUIRINO Clet Informatique Générale et Médicale

23. SEGBO Julien Biologie Moléculaire


4

24. SOARES R. Armel Gestion des Ressources Humaines

25. TCHOBO P. Fidèle Chimie Organique

26. TOBOSSI Boniface Biostatistiques

27. TOPANOU Nikita Chimie Générale

28. YADOULETON Anges Entomologie Médicale

29. YEHOUENOU PAZOU Elisabeth Biologie Cellulaire

30. YOKOSSI Daniel Anglais Générale et Scientifique

31. YOVO Kokou Paulin Pharmacologie, Toxicologie, Physiologie des

grandes fonctions

32. YOVOGAN Julien Sciences Physiques


5

A ma famille Pour votre amour, toutes les peines que vous avez endurées pour moi, prenez ce travail comme le fruit de ma reconnaissance. Que Dieu vous bénisse !!!

DEDICACE


6

A DIEU le père tout puissant de m’avoir gardé et protégé durant toute ma formation académique. Merci Seigneur

A notre Superviseur, Docteur KOUGNIMON,

Vos qualités d’enseignante, votre attention à nos difficultés, votre patience, votre disponibilité et votre dévouement font de vous un modèle qui suscite notre admiration.

Au Docteur Paulin K. YOVO,

Chef de Département d’Analyses Biologiques et Biochimiques à l’Ecole Supérieure le Faucon. Merci pour les exhortations et le soutien de tous les jours.

A Monsieur Michel SOARES,

Fondateur de l’Ecole Supérieure le Faucon. Merci pour tout ce que vous avez fait pour améliorer nos conditions d’études et la qualité de notre formation.

Au Docteur Gilles KINSICLOUNON,

Docteur merci pour m’avoir accepté comme stagiaire dans votre structure.

A Madame Angélique AGOSSADOU,

Responsable du laboratoire du Polyclinique Lab Campus. Vous avez su nous faire bénéficier de votre expérience et savoir-faire indispensables à ce travail. Puisse l’Eternel vous accorder longévité et prospérité afin que les générations futures bénéficient de vos connaissances !

A Madame Nicole DJENONTIN Technicienne au laboratoire du Polyclinique Lab Campus, merci pour vos multiples conseils et encouragement.

A tout le personnel du Polyclinique Lab Campus

Vos multiples conseils ont contribué à l’élaboration de ce travail. Que Dieu vous bénisse !

REMERCIEMENTS


7

A tous mes amis qui m’ont aidé, encouragé et a tous mes camarades de salle de la 9ème promotion principalement Bijou, Siane, Zoul,

Mes sincères remerciements. Profondes gratitudes. Tous ceux qui de près ou de loin, ont contribué à la réalisation de ce travail, soyez-en remerciés.


8

A son excellence, Monsieur le Président du Jury,

Nous avons été très honorés que vous ayez accepté de présider notre Jury. Veuillez recevoir nos hommages respectueux !

Aux Honorables membres du Jury,

Pour l’honneur que vous nous faites en acceptant d’apprécier ce travail et d’apporter vos critiques. Vos remarques et suggestions contribueront à l’amélioration de sa qualité.

HOMMAGES


9

- ESF = Ecole Supérieure le Faucon

- ABB = Analyses Biologiques et Biochimiques

- Lab = Laboratoire

- UAC = Université d’Abomey Calavi

- LMD = Licence Master Doctorat

- ESM = Erreur Standard sur la Moyenne

- LDL = Low Density Lipoproteins

- HDL = High Density Lipoproteins

- ECB = Examen CytoBactériologique

- SIDA = Symdrome de l’Immuno-Déficience Aquise

- EDTA = Ethylène Diamine Trétra Acétique

- g/l = Gramme par litre

- EMB= Eosin Methylene Blue

- MH= Mueller Hinton

LISTES DES ABREVIATIONS, CIGLES ET SYMBOLES


10

Tableau : I Valeurs diagnostiques de la glycémie en fonction du tube de prélèvement.

Photo 1 : Résultat d’une sédimentation après 1h

LISTE DES TABLEAUX

LISTE DES PHOTOS


11

Figure : 1 Valeur moyenne de la glycémie à l’instant initial

Figure : 2 Variation de la glycémie sur tube fluoré en fonction de la durée du prélèvement.

Figure : 3 Variation de la glycémie sur tube sec en fonction de la durée du prélèvement

LISTE DES FIGURES


12

Le fluorure de sodium (NaF) est un anti-glycolytique utilisé pour le dosage du glucose

sanguin notamment lorsqu’il existe un délai pré-analytique.

L’objectif de cette étude est de déterminer le délai pré-analytique maximal au-delà duquel la

glycémie déterminée dans le sérum ne peut être analytiquement acceptable.

Nous avons dosé la glycémie dans le sérum et dans le plasma de 45 patients. Il est à noté que

ces patients ne sont pas des diabétiques connus ou non. La variation de la glycémie et de la

glycolyse dans le sérum a été déterminée en fonction du temps.

Deux heures après le prélèvement, la glycémie a baissé significativement dans le sérum par

rapport au plasma. Cependant, il existe une bonne corrélation entre la glycémie sérique et la

glycémie plasmatique 2heures après le prélèvement.

Nos résultats suggèrent que la glycémie sérique réalisée au-delà de 2h après le prélèvement

n’est pas analytiquement fiable en ce sens où la glycolyse débute 2heures après le

prélèvement.

RESUME


13

The sodium fluoride (NaF) is an anti - glycolytic used for the dosage of the blood glucose

notably when a pre - analytic delay exists.

The objective of this survey is to determine the maximum pre - analytic delay beyond of

which the blood sugar determined in the serum cannot be analytically acceptable.

We measured out the blood sugar in the serum and in the plasma of 45 patients. He/it is noted

that these patients are not known diabetics or no. The variation of the blood sugar and the

glycolysis in the serum has been determined according to the time.

Two hours after the sampling, the blood sugar lowered meaningfully in the serum in relation

to plasma. However, a good interrelationship exists between the blood sugar serum and the

blood sugar plasma 2hours after the sampling.

Our results suggest that the blood sugar serum achieved beyond 2h after the sampling is not

analytically reliable in this sense where the glycolysis starts 2hours after the sampling.

ABSTRAT


14

INTRODUCTION ……………………………………………………………………..15

1ère Partie : PRESENTATION DU CADRE DE STAGE………………………………16

2ème Partie : DEROULEMENT DU STAGE…………………………………………....19

3ème Partie : ETUDE DU THEME………………………………………………………32

CONCLUSION………………………………………………………………………….39

SUGGESTIONS…………………………………………………………………………40

REFERENCES BIBLIOGRAPHIQUES………………………………………………...41

TABLES DES MATIERES……………………………………………………………...44

SOMMAIRES


15

INTRODUCTION

Dans le but d’acquérir des connaissances pratiques, l’Ecole Supérieure le

Faucon (ESF) envoie ces étudiants ceux en Analyses Biologiques Biochimiques

(ABB) en stage académique dans les différentes structures hospitalières du

Bénin de leur choix. C’est dans cette optique que nous avons été envoyés en

stage à la Polyclinique Lab campus située en face du grand portail de

l’Université d’Abomey-Calavi (UAC). Ce stage s’est déroulé du 02 mars au 12

juin 2020. Au cours du stage nous avons été attirés par une étude du dosage de

la glycémie en tube sec et en tube fluoré en fonction du temps.

Le diagnostic de la glycémie au laboratoire est un examen essentiel pour le

dépistage du diabète utilisant pour certains laboratoires le sérum et pour d’autre

le plasma obtenu dans un tube avec un anti glycolytique. Selon l’organisation

mondiale de la santé (Puavilai et al., 1999) et l’association américaine du

diabète (American Diabetes, 2007), la glycémie ne devrait pas être déterminée

dans le sérum afin d’éviter la glycolyse in vitro. Les lignes directives

préconisent l’utilisation du fluorure de sodium (NaF) comme anti-glycolytique

s’il devrait avoir un délai pré-analytique supérieur à 60 min (Stahl et al., 2001).

L’utilisation répandue du sérum pour la détermination de la glycémie montre

qu’il existe des contraintes de prélèvement qui limitent le respect strict des

recommandations internationales. Du fait de la glycolyse érythrocytaire, les

valeurs de la glycémie varient en fonction du temps en in vivo; d’où l’intérêt

porté à notre étude sur la valeur diagnostique de la glycémie en tube sec.


16

Première partie


17

I. Présentation du cadre de stage

1.1- Cadre Institutionnel

L’Ecole Supérieure le « Faucon » (ESF) est une université privée située dans la commune

d’Abomey-Calavi au Bénin. Elle a été créée pour former des cadres compétents et motivés.

Elle offre des formations technologiques et managériales. Elle répond aux exigences du

système Licence Master Docteur(LMD) et s’est entourée d’enseignants et de praticiens

émérites qui ne ménagent aucun effort pour apporter aux étudiants des connaissances de

pointe et toujours actualisées. Les programmes de formations des licences professionnelles

sont homologués par l’état béninois et les diplômes de fin de formation sont signés par ce

dernier. Les arrêtés ministériels suivants permettent à l’ESF d’offrir ses formations en toute

légalité :

1. Arrêté N°497/MESRS/CAD/DC/DGM/DPP/DGES/SP Du 16 Novembre 2007 Portant

Autorisation D’ouverture ;

2. Arrêté N°050/MESRS/CAB/DC/SGM/DPP/DGES/DEPES/SA Du 05 Février 2014

Portant Homologation du Programme de Formation de La Licence Professionnelle

ABB.

L’ESF est une université en progrès constant. Chaque année, elle a de nouveau partenaires qui

lui permettent de donner à ses étudiants les atouts nécessaires pour réussir dans la vie active.

Une inscription à l’ESF est toujours une recommandation d’étudiants satisfaits par les bonnes

pratiques, les compétences, les ressources humaines et matérielles de leur université.

1.2- Cadre technique

La polyclinique LAB Campus est un centre médical, créée en juillet 1997 et située en face du

grand portail de l’Université d’Abomey-Calavi (UAC), plus précisément dans la commune

d’Abomey-Calavi, département de l’Atlantique.

Elle est constituée de nombreux services médicaux et paramédicaux dont les missions

principales sont :

• L’accueil et les soins des patients ;

• L’hospitalisation des malades dans les services ;

• Le laboratoire d’analyses biomédicales.


18

PRESENTATION DU LABORATOIRE LAB Campus (lieu de not re stage) :

Le laboratoire est situé au premier étage.

Ce laboratoire d’analyses médicales offre les services allant dans le sens du diagnostic des

maladies, des bilans d’évolution, des traitements généralement de la connaissance de l’état de

santé afin de préserver en collaboration avec les autres services de soins, le bien-être de tous.

C’est un laboratoire pluridisciplinaire disposant d’une salle de prélèvements de plusieurs

liquides biologiques et d’une salle unique pour la manipulation des échantillons (le

laboratoire). Le prélèvement le plus fréquent est le prélèvement sanguin.


19

Deuxième partie


20

II. DEROULEMENT DU STAGE

2.1- Objectifs de stage :

Objectif général :

Se familiariser avec les différents techniques et appareils de diagnostic biologiques.

Objectifs spécifiques :

• Identifier les difficultés liées au processus de diagnostic et à l’environnement du

travail,

• Analyser les difficultés identifiées,

• Proposer des solutions techniques, administratives et ou de gestion appropriées.

Matériels, équipements, réactifs, outils et consommables :

Automate d’hématologie, microscope optique, lames, lamelles, gants, cônes, micropipettes,

échantillon de sang, réfrigérateur, plaque d’opaline, tube à hémolyse, centrifugeuse, eau

distillée, eau physiologique, éthanol, huile à immersion, cellule de Malassez, Marcano,

Lazarus, marqueur, crayon, stylo, balance de précision, étuve, spectrophotomètre, sparadrap,

aiguille, portoirs, bec bunsen, ordinateur, imprimante, solution a hémolyse, eosine, Giemsa,

May-Grunwald, bac d’électrophorèse, savon liquide, allumette, les milieux de culture, anse de

platine, tube de Westerngreen, papiers hygiéniques, les différents réactifs des paramètres

biochimiques, écouvillons, compresse, poubelle, climatiseur.

2.2- Travaux effectués par section de laboratoire

Le laboratoire ouvre ses portes du lundi au vendredi de 8h à 22h et le samedi de 8h à 16h. Il

existe l’équipe de permanence qui travaille de 8h à 16h et l’équipe de garde travaille de 16h à

22h. Tous les travaux du laboratoire, débutent par les prélèvements à partir de 8h. Le

prélèvement n’est pas limité. Les paramètres biochimiques ne sont pas dosés dans la soirée.

Au fur et mesure que le prélèvement se fait, les échantillons sont acheminés dans le

laboratoire pour être manipulé.


21

Pour faire le prélèvement, on utilise : des aiguilles, boîte de sécurité, alcool, coton, portoirs,

garrot, corps vacuténair.

Pour faire le prélèvement on procède comme suit :

• Accueillir le patient ;

• l’installer et lui prendre ses bulletins d’examens ;

Les numéros sont attribués à l’accueil.

• Placer le garrot au patient et demander à ce qu’il fasse le poing ;

• A l’aide de l’index, repérer la veine à piquer

• Désinfecter la zone à ponctionner à l’aide d’un tampon alcoolisé ;

• Changer de tampon si possible ;

• Fixer la veine et la pénétrer avec l’aiguille ;

• Recueillir la quantité de sang suffisante dans les tubes

S’il y a plusieurs tubes à prélever, on commence par le tube sec et finir par ceux qui ont d’anti

coagulant.

• Faire ouvrir le poing au patient et détacher le garrot

• Retirer l’aiguille et la jeter dans la boite de sécurité ;

• Homogénéiser les échantillons des tubes à anticoagulant

• Faire le pansement.

Dire au patient l’heure à laquelle il passera pour prendre son résultat.

1- Section Hématologie

L'hématologie est la science qui étudie les cellules sanguines sous tous ces aspects,

morphologiques. Les examens qui s’y font couramment dans notre laboratoire sont entre

autres :

- La Numération Formule Sanguine (NFS)

- La Vitesse de Sédimentation (VS)


22

• La vitesse de sédimentation (VS)

La vitesse de sédimentation est le temps nécessaire aux éléments cellulaires sanguins

(globules blancs, globules rouges et plaquettes) pour sédimenter c'est à dire tomber librement

au bas d'une colonne de sang exprimée en hauteur, incapable de se coaguler grâce à

l'anticoagulant utilisé pour le prélèvement. Ces cellules sédimentées sont mesurées au bout d'1

heure et de 2 heures. La VS est un élément d'orientation diagnostic, non spécifique mais

simple à réaliser, concernant le nombre de globules rouges et leur volume, le taux de certaines

protéines, la viscosité du sang. Résultats normaux de la VS : Chez l'homme à la première

heure : inférieure à 20 mm ; Chez la femme en période menstruelle à la première heure :

inférieure à 40 mm ; Chez l'enfant et chez les personnes de plus de soixante-dix ans à la

première heure : inférieure à 30mm.

Méthode

On prend du sang en adaptant la poire aspirante au tube qui existe dans l’appareil de

sédimentation.

On fait deux lectures à 1 heure d'intervalle entre les deux manipulations avant et après

sédimentation des éléments du sang (voir photo 1).

Photo 1 : Résultat d’une sédimentation après 1h

• Numération formule sanguine (NFS)

La numération formule sanguine(NFS) ou hémogramme permet de mesurer le nombre

d'éléments de chacune des trois catégories de cellules sanguines que sont les globules rouges

(hématies), les globules blancs (leucocytes) et les plaquettes.


23

- Le taux hémoglobine

Notons que le taux d’hémoglobine est dosé de façon manuelle. A l’aide de la micropipette

prélever 2500μL du Drabkin (le réactif de dosage) dans un tube à essai stéril. Après avoir

homogénéisé l’échantillon de sang, prélever 10μl de sang avec la micropipette bien essuyer

l’extérieur de la pipette (ou du cône de la micropipette) puis rejeter le sang prélevé au fond du

tube contenant les 2500 μl de Drabkin. Homogénéiser et laisser au repos pendant 5 minutes

puis lire au spectrophotomètre.

- Numération des globules blancs

- Prendre 190μl de Lazarrus dilué au 1/20 et le mélanger avec 10μl de sang total.

- Poser ensuite une quantité nécessaire sur la cellule de Malassez sans réaliser de bulle ;

- Attendre trois minutes puis passer au microscope pour la numération des globules blancs ;

- La lecture se fera à partir de la première bande à la dixième bande, le résultat trouvé est

multiplié par deux afin de couvrir les dix bandes, puis ensuite multiplier par l’inverse de la

dilution effectuée soit 20.

- Le taux d’hématocrite

Nous avons effectué ce travail manuellement suivant la procédure ci-après

Bien mélanger le sang prélevé sur anticoagulant (EDTA) ;

Plonger l’une des extrémités du micro-tube à hématocrite dans l’échantillon

et incliner suffisamment le tube pour permettre au sang de monter par capillarité ;

Laisser remplir le micro-tube presque entièrement et le sortir puis nettoyer son extrémité

avec du papier absorbant ;

Boucher l’autre extrémité du micro-tube avec la pâte à modelée en évitant que la pâte

soit incliner à l’intérieur du micro-tube et les bulles d’air ;

Disposer le micro-tube dans des tubes à hématocrite numéroté puis apparier ;

Centrifuger pendant 15mn à trois mille tour par minute ;

Enfin lire la valeur de l’hématocrite à l’aide d’une règle tout en faisant le quotient du

culot sur le surnagent.


24

2- Section biochimie Cette unité s'occupe essentiellement des examens biochimiques. Le laboratoire effectue parmi

tant d’autres les examens suivants : Glycémie, Calcémie, Créatinémie, Magnésémie,

Transaminases, Urémie, Bilirubine, Triglycérides, Albumine, Acide urique, Cholestérol Total,

LDL, HDL.

GLYCEMIE

La glycémie est le taux de glucose dans le sang. L’échantillon sera prélevé dans un tube

fluoré. Selon le réactif Human utilisé dans notre laboratoire, la valeur normale est comprise

entre 0,70 à 1,10 g/L. Un taux nettement excessif est une hyperglycémie, un taux insuffisant,

est une hypoglycémie. Le spectrophotomètre est de marque ErbaChem-7.

Mode opératoire Tubes à essai Blanc Etalon Dosage

Réactif 1000µl 1000µl 1000µl

Etalon 10µl

Echantillon 10µl

Temps d’incubation 10 à 15 minutes à la température ambiante du laboratoire

10 à 15 minutes à la température ambiante du laboratoire


Mélanger et lire les concentrations de l’étalon et de l’échantillon. La lecture se fait à 505nm.

Résultats La valeur normale est comprise entre 0,70 et 1,10g /l

Interprétation

- Une valeur < 0,70g/l traduit une hypoglycémie

- Une valeur > 1,10g/l traduit par contre une hyperglycémie.

Créatinine Le dosage de créatinine, associé à l’urée permet de diagnostiquer des pathologies rénales. Le

dosage est fait par méthode cinétique. . L’échantillon sera prélevé dans un tube sec et

centrifugé à 3000tours/minute pendant 5 minutes. Le réactif utilisé est de marque Human et le

spectrophotomètre est de marque ErbaChem-7.


25

Mode opératoire

Tubes à essai Blanc Etalon Dosage

Réactif 1 250µl 250µl 250µl

Réactif 2 250µl 250µl 250µl

Etalon 50 µl

Echantillon 50µl

Résultat

Mélanger et faire ensuite la lecture directement au spectrophotomètre. La valeur normale est comprise entre 6mg/l et 14mg/l.

3- Section parasitologie On distingue plusieurs examens tels que :

Goutte Epaisse (GE) et Densité Parasitaire (DP)

C’est un examen qui a pour but de détecter dans le sang les parasites en l’occurrence les

trophozoites de Plasmodium falciparum (parasites responsables du paludisme) et ceci sous

leur forme de trophozoites.

La GE est une méthode de concentration par contre le frottis sanguin est une méthode

d’identification de l’espèce plasmodiale. La technique se présente comme suit :

Goutte épaisse (GE)

La GE est une méthode de concentration des parasites.

• Etaler le sang sur une lame identifiée à l’aide d’une lame ou d’une lamelle en faisant

un mouvement circulaire de manière à obtenir un cercle d’un centimètre de diamètre

• Laisser sécher,

• Ensuite recouvrir la goutte du Giemsa dilué à 10%

• Laisser agir pendant 15 minutes et rincer à l’eau de robinet

• Laisser sécher et observer au microscope à l’objectif 100X avec l’huile à immersion.

L’interprétation des résultats se fait de la manière suivante


26

Densité parasitaire (DP)

Elle se fait sur le frottis sanguin. C’est une méthode qui permet de voir l’espèce du parasite.

Elle permet d’apprécier la parasitémie par la connaissance du nombre de parasite par

microlitre. Soit X le nombre de leucocytes comptés et Y le nombre de plasmodies comptés.

La formule de la DP sera :

6000. Y

DP= = nombre parasites/ul

X

NB : On s’arrête à 200 leucocyte si le nombre de parasite compté est supérieur ou égale à 10 ;

si moins de 10, on continue jusqu’à 500 leucocytes.

AKOP (Amibes Kystes Œufs Parasites) :

- Principe

C’est un examen qui se fait entre lame et lamelle permettant de déterminer les amibes,

les kystes, les œufs et les parasites présents dans l’échantillon. Il est important que le patient

respecte les conditions de ce prélèvement et l’amène le plus tôt possible vers le laboratoire.

- Matériel

Lame, Lamelle, eau physiologique, lugol, Giemsa, pipette pasteur, formol à 10%

Elle se déroule en trois étapes. 1. Etat frais qui consiste en la recherche des œufs, des kystes, des amibes, des parasites et

des formes végétatives dans les selles. Elle se déroule comme suit :

Déposer une goutte d’eau physiologique et une goutte de lugol séparée sur la lame ;

Ajouter une petite quantité de selles sur l’eau physiologique et le lugol et mélanger ;

Recouvrir la préparation d’une lamelle puis observer au microscope.

- Interprétation

Si négatif recherche parasitaire négative

Si positif présence d’amibe, de kystes, d’œufs ou de parasites


27

2. Méthode de Willis : c’est une méthode de concentration des œufs dans les selles. Elle

utilise une solution saturée de chlorure de sodium (NaCL).

Mode Opératoire :

- Diluer dans un verre à pied conique 10g de selles dans 200ml d’une solution

saturée de NaCL

- Homogénéiser et tamiser

- Verser dans un tube à centrifuger jusqu’à affleurement du liquide aux bords du

tube.

- Appliquer une lamelle sur le tube en évitant de laisser des bulles d’air entre la

lamelle et le liquide.

- Retirer la lamelle au bout de 15 à 45minutes, la déposer sur une lame et

examiner immédiatement.

Cette méthode est indiquée pour la recherche des œufs d’ankylostomes et d’ascaris fertiles.

3. Méthode de Bailenger : c’est une méthode de concentration des œufs et des kystes.

Mode opératoire :

- Triturer dans un verre à pied conique 2 à 5g de selles dans 10fois leur volume

dans du tampon acéto-acétique à pH 5.5.

- Laisser sédimenter 40 à 50 secondes.

- Verser le liquide surnageant dans un tube à centrifuger.

- Ajouter de l’éther sulfurique (1/3 du volume total de liquide) en prenant la

précaution de laisser au moins un centimètre de hauteur vide dans le tube

- Agiter vigoureusement jusqu’à émulsion complète après avoir bouché le tube

avec le pouce.

- Centrifuger immédiatement après l’émulsion 1 minute entre 1500 et 2000 tours

- Jeter le surnageant et prélever le culot par capillarité avec une pipette Pasteur

Cette technique concentre bien les kystes (giardia, amibes) et les œufs (trichocéphale et

ankylostome) ainsi que les oocystes de cryptosporidies.


28

4- Section sérologie

La sérologie est la mise en évidence et éventuellement le dosage d'anticorps spécifiques. Elle

est donc liée à l'étude des immunoglobulines du sérum sanguin ou d'autres liquides

organiques. Elle est utilisée comme outil diagnostic ou comme outil de dépistage (SIDA,

Hépatite...). Notons aussi que le prélèvement de tout examen sérologique se fait sur un tube

sec. Les différents examens sérologiques effectués dans notre laboratoire sont entre autres :

Le test HIV

Le TBG (Test Biologique de Grossesse)

L’AgHbs (Antigène de surface du virus de l’hépatite B)

La CRP (Protéine C réactive)

L’ASLO (Anti Strepto Lysine O)

La SDW (Séro Diagnostic de Widal et de Félix)

TPHA (Treponema Pallidum Hemagglitinations Assay)

• Test AgHbs

L'hépatite B est une maladie grave du foie causée par le virus de l'hépatite B (VHB). Elle est

extrêmement infectieuse et se transmet par rapports sexuels ou par contact direct avec du sang

ou des liquides organiques infectés. L’hépatite B attaque directement le foie, provoquant une

maladie grave, des lésions hépatiques et dans certains cas la mort. Il existe un vaccin sûr et

efficace pour prévenir la maladie. Ce test permet la détection de l'antigène B dans le sérum ou

le plasma.

Mode opératoire

-Déposer 50μl de sérum du patient sur la bandelette d’AgHbs

-Laisser migrer quelques minutes et observer

-L’AgHbs est positive s’il y a 2 barres y compris la barre de contrôle

-L’AgHbs est négative s’il y a 1 barre, celle du contrôle

• Test CRP (Protéine C Réactive)

C’est un bio marqueur de l’inflammation synthétisé par le foie en réponse à une infection .Le

test de la CRP permet le diagnostic précoce et le suivi d’une infection et d’évaluer le taux

d’inflammation chez un patient lorsqu’il s’avère positif.


29

Principe Les particules de latex sont revêtues d’anticorps anti CRP humain. Lorsque la suspension de

latex est mélangée avec un sérum contenant un taux élevé de CRP (plus de 6mg/l), une

agglutination franche apparait dans les minutes qui suivent.

Matériel Micropipettes, cônes jaune et bleus, centrifugeuse, réactif de travail, plaque de la CRP.

Mode opératoire Elle se fait en deux temps :

1- Détecter la présence ou non des protéines C-Réactives dans le sérum du patient (test

qualitatif)

-Prélever le sang dans le tube sec

-Centrifuger l’échantillon et recueillir le sérum

-Sortir le réactif du réfrigérateur et attendre 30min pour les ramener à la température de

laboratoire

-Prendre 50ul du sérum du patient sur la plaque et ajouter 50ul de réactif latex CRP ;

-Mélanger les gouttes à l’aide d’un agitateur jetable, de manière à couvrir toute la surface du

cercle se trouvant sur la plaque ;

-Chalouper rigoureusement pendant 02 minutes

Résultat -Test négatif : absence d’agglutination

-Test positif : présence d’agglutination

Interprétation -La présence d’agglutination témoigne qu’il y a inflammation et que le sérum du patient

contient des anticorps anti protéine C Réactive à une concentration supérieure à 6mg/l.

En cas de positivité on passe à la deuxième partie du test qui consiste à faire les

dilutions dans le but d’évaluer le taux d’inflammation à partir des facteurs de dilutions :

1/2pour le 1er cercle, 1/4 pour le 2ème cercle, 1/8 pour le 3ème cercle, 1/16 pour le 4ème cercle,

1/32 pour le 5ème cercle et 1/64 pour 6ème cercle.


30

-Absence d’agglutination : suspension uniforme

2-Test quantitatif (Titrage)

Lorsque la CRP donne un résultat positif, on réalise la dilution successive du sérum au ½, ¼,

1/8, 1/16, 1/32, 1/64 de la manière suivante.

-Déposer 25ul de l’eau physiologique dans les cercles 1 à 6 de la microplaque

-Avec une pipette automatique, déposer 25ul du sérum dans le cercle 1

-A l’aide de la même pipette, aspirer et expulser à plusieurs reprises le mélange obtenu dans le

cercle, jusqu’à l’obtention d’un mélange homogène

-Prélever ensuite 25ul du mélange obtenu dans le cercle 2 et le transférer dans le cercle3

-Procéder aux mêmes opérations que celles précédemment décrite en vue d’obtenir le

mélange correct des réactifs jusqu’au 6ème cercle, puis jeter 25ul

-Déposer le réactif latex sur chaque dilution tel que décrit dans la section

-Mélanger dans chaque cas et chalouper pendant 02minutes.

Le titre est l’inverse de la dernière dilution ayant un résultat positif multiplié par le seuil de

positivité qui est 6mg/l.

5- Section bactériologie

Dans la section de la bactériologie il est réalisé comme examens : l’examen

cytobactériologique des urines (ECB des urines), ou des pus (ECB des pus), ainsi que d'autres

analyses tels que le spermogramme et le prélèvement vaginal.

• PV (Prélèvement Vaginal)

Le prélèvement vaginal consiste à prélever quelques cellules ou des sécrétions génitales, le

plus souvent dans le but de déterminer si une personne souffre d’une infection génitale.

Déroulement d’un PV

Lors d’un prélèvement vaginal, la patiente déjà deviergée est allongée nue sur un lit puis la

technicienne introduit un spéculum stérile préalablement recouvert de gèle afin de faciliter

l’introduction de ce dernier dans le vagin pour maintenir les parois écartées. L’étape suivante

est l’introduction d’un écouvillon qui permet de recueillir des sécrétions dans l’endocol et a


31

l’exocol. Celles- ci seront ensuite analysées par microscope et s’en suivra une recherche

d’agents pathogènes pouvant être à l’origine d’une infection.

Réalisation du PV

L’étude bactériologique du PV se déroule en cinq étapes :

Examiner le prélèvement de l’exocol dans le but d’apprécier : la couleur, l’abondance, la

quantité des leucocytes et des cellules épithéliales, la présence ou non des parasites tel que

le Trichomonas vaginalis, les levures.

La coloration de Gram : elle permet de rechercher les bacilles Gram(-) et les cocci Gram

(+) responsables de l’infection urogénitale pouvant conduire au choix des milieux de

culture.

Ensemencer les milieux de cultures. Ainsi sont ensemencés :

- EMB pour l’isolement des Entérobactéries

- Gélose au sang frais pour l’isolement des Entérocoques ou Streptocoques

- Gélose au sang cuit pour l’isolement des Gonocoques

- Chapman pour l’isolement des Staphylocoques

- Sabouraux pour l’isolement des Candida.

Identifier les germes par la Galerie minimale ou API20. Si le Sabouraux est positif,

réaliser le test de filamentation afin d’identifier l’espèce du Candida albicans.

Faire l’antibiogramme sur :

- MH si le germe est un Entérobactérie ou Staphylocoque.

- Gélose au sang frais si c’est un Entérocoque ou un Staphylocoque.

• ECBU (Examen Cytobactériologique des urines)

Principe Le recueil d’urines doit s’effectuer dans de bonnes conditions d’hygiène, dans un flacon

prévu à cet effet pour avoir des résultats fiables. L’urine doit être prélevée au matin et

ramenée au laboratoire dans un bref délai.

Matériels Lames, lamelles, anse de platine, bec bunsen, microscope, bouteille à gaz, centrifugeuse Cet examen se réalise en cinq étapes :


32

1. Examen macroscopique qui consiste à apprécier à l’œil nu la couleur (jaune claire,

foncé, jaune paille..), l’aspect des urines (limpide, trouble…), présence ou non

d’éléments figurés (sang).

2. Examen à l’état frais qui consiste à examiner le culot urinaire obtenu après

centrifugation à 3000tours par minutes pendant cinq minutes dans le but d’apprécier :

- La quantité des leucocytes et des cellules épithéliales (rares, abondant,

quelques)

- La présence ou non des cristaux, des parasites (Giardia…)

- La présence ou non des hématies, des lavures, des cylindres.

3. Examen après coloration de Gram qui permet de faire le choix des milieux de culture à

ensemencer

4. Ensemencer les milieux de cultures pour faire l’isolement des bactéries :

- Cled pour la numération

- Gélose au sang pour les cocci (+) et les bacilles (-) parfois les levures

- Chapman pour les Staphylocoques

- EMB pour les Entérobactéries.

5. Identification par la galerie minimale, API20E, ou la galerie de Leminor.


33

Troisième partie


34

III- ETUDE DU THEME

III-1 Généralités :

Le pancréas est la deuxième plus grosse glande de l’organisme. Il est situé dans la partie

supérieure de l’abdomen, entre l’intestin grêle et la rate, juste derrière l’estomac. Il est

constitué des cellules β (beta) et des cellules α (alpha).

C’est un organe qui produit du suc pancréatique qui est déversé dans le duodénum pour

permettre la digestion des graisses et des sucres. Il produit et déverse également différentes

hormones en particulier l’insuline et le glucagon. L’insuline et le glucagon permettent de

réguler la quantité de sucre dans le sang. L’insuline est hypoglycémiante c’est-à-dire sert à

abaisser la glycémie alors que le glucagon est hyperglycémiant c’est-à-dire sert à augmenter

la glycémie. L’insuline est fabriquée par les cellules β alors que le glucagon est fabriqué par

les cellules α.

Le métabolisme du glucose se fait en deux étapes : l’anabolisme et le catabolisme.

L’anabolisme est la fabrication du glucose dans notre organisme tandis que le catabolisme est

la destruction du glucose. Un taux élevé du glucose dans l’organisme entraine le diabète.

Le diabète est un problème majeur de santé public par sa prévalence importante et croissante

d’une part, et son impact socio-économique d’autre part. C’est une maladie qui empêche le

corps d’utiliser correctement l’énergie fournie par les aliments ingérés. Cependant, pour que

le sucre présent dans le sang puisse ensuite être transmis aux cellules, le corps a besoin

d’insuline, une hormone secrétée par le pancréas. Cette maladie se manifeste généralement

par : une polyurie, une polydipsie, amaigrissement, asthénie, une polyphagie, un trouble de

l’attention, et une fatigue intense, etc…

Un diagnostic précoce et une prise en charge appropriée de cette affection chronique sont

indispensables dans la mesure où celle-ci est susceptible d’entrainer de graves complications.

Le diagnostic de cette maladie repose sur le dosage de la glycémie c’est-à-dire le taux de

glucose dans le sang. Le glucose est le principal sucre de l’organisme qui provient de

l’alimentation et est la principale source d’énergie pour les cellules de l’organisme. Une partie

du glucose sanguin est utilisée pour produire de l’énergie tandis que le reste est stocké sous

forme de glycogène, prêt à être mobilisé en cas de besoin.


35

Au laboratoire, la glycémie est dosée dans le plasma à partir de sang veineux prélevé chez un

sujet à jeun, dans un tube contenant du fluorure de sodium pour empêcher la glycolyse. La

valeur normale de la glycémie est comprise entre 0.7g/l et 1.10g/l. Un taux nettement inférieur

à 0.7g/l associé aux signes cliniques est caractérisé d’hypoglycémie et un taux nettement

supérieure à 1.10g/l associé aux manifestations cliniques est caractérisé d’hyperglycémie.

III-2 Contexte du choix du sujet et justification :

Le technicien de laboratoire rencontre certaines difficultés dans l’exercice de sa fonction

parmi ces difficultés on peut citer le prélèvement sanguin.

Plusieurs situations amènent les techniciens à doser la glycémie sur tube sec. Parmi

lesquelles nous avons :

- Rupture de tube fluoré,

- Difficultés à prélever les nouveau-nées,

- Refus catégorique de certains patients à les prélever dans plusieurs tubes.

Il est donc nécessaire de déterminer l’intervalle de temps pendant lequel le dosage de la

glycémie doit se faire sur tube sec afin d’être fiable.

III-3 OBJECTIFS ET HYPOTHESES

3-3-1 Objectif général :

L’objectif général de cette étude est de déterminer le délai pré-analytique maximal au-delà

duquel la glycémie dosée dans le sérum n’est pas fiable.

3-3-2 Objectifs spécifiques :

Il s’agira de :

• Doser la glycémie sur tube fluoré à des intervalles de temps régulier,

• Doser la glycémie sur tube sec au même intervalle de temps régulier,

• Comparer les résultats de ces deux dosages.


36

Pour atteindre ces objectifs nous allons poser des hypothèses.

3-3-3 Hypothèses :

- Le dosage de la glycémie sur tube fluoré après une certaine heure n’est pas fiable,

- Le dosage de la glycémie sur tube sec après une certaine heure n’est pas fiable,

- Le dosage de la glycémie en tube fluoré est plus fiable que le dosage de la glycémie en

tube sec.

III-4 Cadres, Matériel et Méthodes

3-4-1 Cadres :

La présente étude s’est déroulée au service de laboratoire de la polyclinique Lab Campus.

3-4-2 Matériel :

Comme matériel technique nous avons eu à utiliser un spectrophotomètre Erbachm-7, une

centrifugeuse, des tubes secs, des tubes à hémolyses, tubes fluorés, des micropipettes et cônes,

coffrets de réactifs de glucose Human, des portoirs, marqueurs, stylo.

Comme matériel biologique nous avons utilisé du plasma et du sérum recueillis sur sang

prélevé respectivement sur tube fluoré et sur tube sec.

3-4-3 Méthodes d’étude :

Cette étude prospective de type comparative s’est tenue au cours de la période allant du 02

mars au 12 juin 2020. Elle a porté sur 45 patients (tout âge et sexe confondu) ayant des

examens biochimiques incluant le dosage de la glycémie.

Les tâches ayant été réalisées se répartissent dans les trois (03) phases de tout processus

analytique de la manière suivante :

La phase pré-analytique a pris en compte la réalisation du prélèvement, la

centrifugation des échantillons et la mise en place du reste du matériel à utiliser.


37

Au cours de la phase analytique, nous avons réalisé le dosage proprement dit : c’est-à-

dire la mise en place du milieu réactionnel suivie de la lecture au spectrophotomètre

après avoir réalisé le calibrage de ce dernier avec une solution étalon. Nous avons

utilisé la méthode en point final puis les lectures au spectrophotomètre ont été

effectuées à une longueur d’onde de 505nm.

Principe

Le glucose en présence du Glucose oxydase donne de l’acide gluconique et du peroxyde

d’hydrogène. Le peroxyde d’hydrogène réagit avec le phénol et l’amino-4-antypirine en

présence de la peroxydase pour donner un chromogène de couleur rose, quinonéimine.

L’intensité de la coloration est proportionnelle à la concentration en glucose.

Mode opératoire Tubes à essai Blanc Etalon Dosage

Réactif 1000µl 1000µl 1000µl

Etalon 10µl

Echantillon 10µl

Temps d’incubation 10 à 15 minutes à la température ambiante du laboratoire



Mélanger et lire les concentrations de l’étalon et de l’échantillon. La lecture se fait à 505nm.

Résultats La valeur normale est comprise entre 0,70 et 1,10g /l chez l’adulte.

Interprétation Une valeur < 0,70g/l traduit une hypoglycémie

Une valeur > 1,10g/l traduit par contre une hyperglycémie.

Enfin vient la phase post-analytique au cours de laquelle nous reportions les résultats

dans notre cahier de paillasse, dans l’ordinateur puis rangions le matériel et désinfecté

la paillasse.


38

III- 5 Résultats:

Valeur diagnostique de la glycémie en fonction du tube de prélèvement :

Le tableau 1 présente les valeurs de la glycémie en fonction du tube de prélèvement.

Tableau I : Valeurs de la glycémie en fonction du tube de prélèvement.

Glycémie Instant initial (t = 30 min)

p-value Tube fluoré Tube sec

Effectif

(fréquence)

< 0,7 g/L 03 (6,67%) 16 (35,56%) 0,002

[0,7 ; 1,1] 31 (68,89%) 18 (40%) 0,011

> 1,1 g/L 11 (24,44%) 11 (24,44%) 0,805

Total 45 (100%) 45 (100%) -

A l’instant initial, la fréquence des cas d’hypoglycémie sur tube sec est significativement plus

élevée que celle obtenue sur tube fluoré (p = 0,002) tandis que la fréquence des cas de

glycémie normale sur tube sec a significativement baissé comparativement à celle obtenue sur

tube fluoré (p = 0,011). Toutefois, la fréquence des cas d’hyperglycémie est la même pour les

deux tubes de prélèvement, soit 24,44%.

Variation de la glycémie sur tube fluoré en fonction de la durée du

prélèvement :


39

La figure 2 présente la variation de la glycémie sur tube fluoré en fonction de la durée du

prélèvement.

Figure : 2 Variation de la glycémie sur tube fluoré en fonction de la durée du prélèvement.

Comparativement à l’instant initial, la glycémie sur tube fluoré baisse significativement deux

heures (t = 2h) et quatre heures (t = 4h) après la réalisation du prélèvement (p < 0,01).

Variation de la glycémie sur tube sec en fonction de la durée du

prélèvement :

La figure 3, montre la variation de la glycémie sur tube sec en fonction de la durée du

prélèvement.


40

Figure : 3 Variation de la glycémie sur tube sec en fonction de la durée du prélèvement.

La glycémie sur tube sec baisse significativement à partir de la deuxième heure (t = 2h) après

la réalisation du prélèvement (p < 0,01) et beaucoup plus (p < 0,001) trois heures (t = 3h) et

quatre heures (t = 4h) après le prélèvement comparativement à l’instant initial (t = 30min).

III- 6 DISCUSSION

Dans cette étude, nous avons comparé la glycémie sérique avec la glycémie déterminée dans

du plasma contenant le fluorure de sodium. L’objectif est de déterminer le temps pendant

lequel le dosage de la glycémie sur le sérum est fiable.

Notre étude n’a pas été faite sur des diabétiques connus.

D’après notre étude nous constatons que 30 minutes après le prélèvement la valeur moyenne

de la glycémie en tube sec est légèrement basse par rapport à celle du tube fluoré.

Cette tendance est obtenue deux (02) heures de temps, temps au bout duquel la glycémie du

tube fluoré a chuté significativement. Cela signifie que deux (02) heures après prélèvement la

glycolyse est déclenchée dans les tubes secs. Elle est par contre bloqué par le fluorure de

sodium jusqu’à deux (02) heures de temps dans les tubes fluorés. Donc c’est après deux (02)

de temps que le travail de l’anti-glycolytique a considérablement diminué.


41

Le thème avait déjà été traité par quelques moniteurs dont le Professeur AKPOVI et ces

collaborateurs, leurs études a portés sur : VALEUR DIAGNOSTIQUE DE LA GLYCEMIE

EN TUBE SEC, publiés en Janvier 2014 (Journal de la Société de Biologie Clinique du

Bénin, 2014 ; N° 020 ; 72-76). Leurs études ont montré que ce n’est six (06) heures de temps

après le prelèvement que le dosage de la glycémie sur tube sec n’est plus fiable et huit (08)

heures de temps après sur le tube fluoré.

De toute les manières selon les résultats issues des deux études le dosage de la glycémie

effectuées sur tube sec et sur tube fluoré est significativement différents au bout de quelques

heures après le prelèvement.


42

Conclusion

Ce stage à la Polyclinique Lab Campus est très satisfaisant grâce aux efforts

consentis par les uns et les autres pour l’amélioration de la qualité du travail afin

de satisfaire la population. Il a aussi été très avantageux et nous a permis

d’approfondir plus nos connaissances dans le domaine professionnel, et

intellectuel. En résume, ce stage nous a permis de faire face aux réalités de la vie

professionnelle et aussi une opportunité pour nous familiariser avec notre cadre

de travail qui est le laboratoire. Aussi de voir les problèmes auxquels nous

serons confrontés ce qui nous a d’ailleurs poussés à faire une étude comparée de

la glycémie en tube sec et en tube fluoré en fonction du temps. Nous avons

déterminé que la glycémie mesurée dans le sérum est équivalente à la glycémie

dans le plasma fluoré entre l’heure du prélèvement et 2 heures après. Au-delà de

2 heures après le prélèvement, le degré glycolyse est suffisamment élevé pour

significativement agir sur la glycémie sérique.


43

Suggestions :

Au vu des résultats obtenus à l’issue de cette étude de cas, il nous parait opportun de faire

quelques suggestions qui méritent d’être formulées :

• Au ministère de la santé :

- Mobiliser des fonds d’appui au secteur de la santé notamment en matériels,

équipements et surtout en générateurs de secours pour assurer le relais de

l’alimentation électrique en cas de coupure ou de panne, cela permettra aux

biotechnologistes de réaliser les dosages dans les délais raisonnables afin

d’obtenir des résultats fiables.

• Aux bio-technologistes de laboratoire :

- De vite manipuler la glycémie lorsque le prélèvement est fait sur tube sec,

- Faire le maximum d’effort pour respecter les tubes de prélèvement afin de

réduire les risques d’erreur de manipulation,

• Aux autorités de L’ESF

- Nous augmenter la durée de stage en fin de formation afin de permettre des

études plus approfondies.

- Limiter le nombre d’Etudiant a l’inscription afin que tous les Etudiants inscrits

puissent avoir de laboratoires bien équipé pour éviter les navettes entre

plusieurs centres.

- Nous laisser choisi librement nos superviseurs.


44

Références bibliographiques :

1. Mémoire de fin d’étude en vue d’obtention du Diplôme de Docteur en médecine

présenté par FEHAIMA Sarra , Qualité de vie et Diabète, thèse 2017, page 15,

2. Mémoire de fin d’études présenté par Benbernou Hosni Yousra pour l’obtention du

diplôme de Master en biologie, présenté en 2019, page 4.

3. . Puavilai G, Chanprasertyotin S, Sriphrapradaeng A. Diagnostic criteria for

diabetes mellitus and other categories of glucose intolerance: 1997 criteria by the

Expert Committee on the Diagnosis and Classification of Diabetes Mellitus (ADA),

1998 WHO consultation criteria, and 1985 WHO criteria. World Health Organization.

Diabetes Res Clin Pract 1999; 44:21-26.

4. American Diabetes A. Standards of medical care in diabetes--2007. Diabetes Care

2007; 30 Suppl 1:S4-S41.

5. Stahl M, Jorgensen LG, Hyltoft Petersen P, Brandslund I, de Fine Olivarius N,

Borch-Johnsen K. Optimization of preanalytical conditions and analysis of plasma

glucose. 1. Impact of the new WHO and ADA recommendations on diagnosis of

diabetes mellitus. Scand J Clin Lab Invest 2001; 61:169-179.

6. Akpovi Casimir D ., Segbo A.G. Julien, Anago A.A. Eugénie, Medehouenou T.C.

Marc , Loko Frédéric, Journal de la Société de Biologie Clinique du Bénin, 2014; N°

020; 72-76, valeur diagnostique de la glycémie en tube sec.

7. These présentée et soutenue par Mlle. Hajar DAROUICH pour l’obtention du

Doctorat en Pharmacie, les lecteurs de glycemie capillaire, page 2, 4


45

TABLE DES MATIERES

LISTE DES ENSEIGNANTS ……………………………………………………………….3

DEDICACE ………………………………………………………………………………….5

REMERCIEMENTS …………………………………………………………………………6

HOMMAGES ………………………………………………………………………………..8

LISTE DES ABREVIATIONS, CIGLES ET SYMBOLES …………………………………9

LISTE DES TABLEAUX …………………………………………………………………..10

LISTE DES PHOTOS ……………………………………………………………………….10

LISTE DES FIGURES ………………………………………………………………………11

RESUME …………………………………………………………………………………….12

ABSTRAT …………………………………………………………………………………....13

SOMMAIRE …………………………………………………………………………………14

INTRODUCTION ……………………………………………………………………………15

PREMIERE PARTIE …………………………………………………………………………16

I. Présentation du cadre de stage ………………………………………………..17

1 -1 Cadre institutionnel …………………………………………………....17

1 -2 Cadre technique ……………………………………………………….17

DEUXIEME PARTIE …………………………………………………………………………19

II. Déroulement du stage ………………………………………………………....20

2 -1 Objectif du stage ……………………………………………………....20

2 -2 travaux effectués par section du laboratoire …………………………..20

TROISIEME PARTIE : ETUDE DU THEME ………………………………………………..33

III – 1 Généralités ………………………………………………………………………………34

III – 2 Contexte du choix du sujet et justification ……………………………………………..34

III – 3 Objectifs et hypothèses ………………………………………………………………...35


46

3 -3-1 Objectif général …………………………………………………….35

3 -3-2 Objectifs spécifiques ………………………………………………..35

3-3-3 Hypothèses …………………………………………………………..35

III – 4 Cadres, Matériels et Méthodes ………………………………………………………...35

3 – 4-1 Cadres ………………………………………………………………...35

3 –4-2 Matériel ……………………………………………………………......36

3 -4-3 Méthodes ……………………………………………………………....36

III – 5 Résultats …………………………………………………………………………………38

III – 6 Discussion ……………………………………………………………………………….41

CONCLUSION ………………………………………………………………………………….42

SUGGESTION ………………………………………………………………………………….43

REFERENCES BIBLIOGRAPHIQUES ……………………………………………………….44

TABLE DES MATIERES ………………………………………………………………………45

Documents

Etude comparée de la glycémie en tube sec et en tube