Pathologie Biologie xxx (2013) xxx–xxx

G Model

PATBIO-3067; No. of Pages 5

Article original

Evaluation des activites antioxydante et anti-inflammatoire de Erica arboreaL. du Maroc

Antioxidant and anti-inflammatory activities of Moroccan Erica arborea L.

F. Amezouar a,*, W. Badri a, M. Hsaine a, N. Bourhim b, H. Fougrach a

a Laboratoire d’ecologie et d’environnement, faculte des sciences Ben M’sik, universite Hassan II-Mohammedia, avenue Cdt. Driss-El-Harti, BP 7955, 20800 Casablanca, Marocb Laboratoire de biochimie et biologie moleculaire, faculte des sciences, universite Hassan II-Aın Chock, km 8 route d’El-Jadida, BP 5366 Maarif, Casablanca, Maroc

I N F O A R T I C L E

Historique de l’article :

Recu le 2 mars 2012

Accepte le 21 mars 2013

Mots cles :

Erica arborea

Extrait ethanolique

Activite antioxydante

Activite anti-inflammatoire

Toxicite aigue

Keywords:

Erica arborea

Ethanol extract

Antioxidant activity

Anti-inflammatory activity

Acute toxicity

R E S U M E

Differentes especes de la famille des Ericaceae sont utilisees en medecine traditionnelle dans divers pays.

Cette famille est representee au Maroc par trois genres : Arbutus, Calluna et Erica.

But. – La presente etude porte sur l’evaluation des proprietes antioxydante et anti-inflammatoire des

feuilles de Erica arborea ainsi que sur la toxicite aigue de l’extrait ethanolique.

Methodes. – Le pouvoir antioxydant a ete evalue par les tests diphenyle-picryl-hydrazyl (DPPH),

phosphomolybdate (PPM) et pouvoir reducteur du fer (FRAP) et l’activite anti-inflammatoire a ete

evaluee a l’aide du modele de l’œdeme plantaire induit chez le rat par la carragenine. La toxicite a ete

evaluee par voie orale chez des souris.

Resultats. – L’etude de la toxicite aigue de l’extrait ethanolique n’a pas montre de signes de toxicite a la

dose de 5 g/kg PC. Nos extraits montrent des proprietes antioxydantes importantes. La concentration

efficace de l’extrait ethanolique (10,22 mg/mL) qui reduit de 50 % le DPPH en solution a ete comparable a

celle du standard, butyl-hydroxy-toluene (BHT) (8,87 mg/mL). L’administration de l’extrait ethanolique

aux doses de 200 et de 400 mg/kg PC a prevenu l’œdeme plantaire de facon significative (0,05) en

comparaison avec le groupe ayant recu du serum physiologique, mais a montre un pourcentage

d’inhibition de l’inflammation important, comparable a celui du diclofenac, anti-inflammatoire de

reference.

Conclusions. – Nos resultats montrent que les feuilles de E. arborea contiennent des composes bioactifs

doues d’une forte activite antioxydante ainsi que des proprietes anti-inflammatoires interessantes,

suggerant leur utilisation sous forme d’extraits afin de prevenir les processus oxydants et inflammatoires.

� 2013 Elsevier Masson SAS. Tous droits reserves.

A B S T R A C T

Aim. – The present study was carried out to evaluate the antioxidant and anti-inflammatory capacity,

and acute toxicity of Moroccan Erica arborea leaves.

Methods. – Antioxidant capacity was assessed by diphenyle-picryl-hydrazyl (DPPH), phosphomolyb-

date (PPM) and ferric reducing antioxidant power (FRAP) tests and anti-inflammatory capacity was

evaluated by hind paw oedema model using carrageenan-induced inflammation in rat. The acute toxicity

was evaluated using mice.

Results. – Acute toxicity of ethanolic extract of E. arborea showed no sign of toxicity at dose of 5 g/kg B.W.

Our extracts have important antioxidant properties. The efficient concentration of the ethanolic extract

(10.22 mg/ml) required for decreasing initial DPPH concentration by 50% was comparable to that of

standard solution butyl-hydroxy-toluene (BHT) (8.87 mg/ml). The administration of ethanolic extract at

doses of 200 and 400 mg/kg B.W. was able to prevent plantar oedema and exhibited a significant

inhibition against carrageenan-induced inflammation when compared to the control group (NaCl 0.9%)

but comparable to those of diclofenac (reference drug).

Disponible en ligne sur

www.sciencedirect.com

* Auteur correspondant.

Adresse e-mail : amezouarfatimazahra@ymail.com (F. Amezouar).

Pour citer cet article : Amezouar F, et al. Evaluation des activites antioxydante et anti-inflammatoire de Erica arborea L. du Maroc. PatholBiol (Paris) (2013), http://dx.doi.org/10.1016/j.patbio.2013.03.005

0369-8114/$ – see front matter � 2013 Elsevier Masson SAS. Tous droits reserves.

http://dx.doi.org/10.1016/j.patbio.2013.03.005

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Conclusions. – Our results show that the leaves of E. arborea may contain some bioactive compounds

which are responsible for the antioxidant and anti-inflammatory activities observed here. Our finding

may indicate the possibility of using the extracts of this plant to prevent the antioxidant and

inflammatory processes.

� 2013 Elsevier Masson SAS. All rights reserved.

1. Introduction

Ericaceae est une famille cosmopolite, representee par124 genres dont Arbutus (arbousier), Calluna (calune), Erica

(bruyere), Rhododendron et environ 4100 especes [1]. La plusgrande densite ainsi que la plus grande diversite des Ericaceae seretrouvent sous les climats mediterraneens, notamment enAustralie et en Afrique du Sud [2]. Elle compte au Maroc troisgenres (Arbutus, Calluna et Erica) et dix especes. Le genre Erica a luiseule compte huit especes, dont les plus connus sont : Erica cinerea,

Erica multiflora, Erica scoparia et Erica arborea. De nombreusesutilisations des Ericaceae sont mentionnees dans les pharmaco-pees traditionnelles a travers le monde. Arbutus unedo L., a ete citecomme anti-diarrheique et anti-inflammatoire [3]. Il a ete rapporteque les feuilles de Rhododendron chrysanthum en Siberie [4] et deRhododendron ferrugineum en Allemagne [5] ont ete utilisees pourle traitement du rhumatisme. En Turquie, des thes de fines herbesprepares a partir de la partie aerienne de E. arborea et deErica manipuliflora, ont ete populairement employes en tant quediuretique, d’astringent et dans le traitement des infectionsurinaires [6,7]. De meme, des travaux anterieurs sur des especesdes Ericaceae avaient permis d’evaluer l’activite antioxydante [8,9]et antinociceptive [10,11] de E. arborea et de Arbutus andrachne, etcelle anti-inflammatoire de E. manipuliflora, de Erica bocquetii et deRhododendron ponticum [10,12]. Au Maroc, E. multiflora est utiliseeautant qu’antiseptique urinaire que diuretique [13]. Sur les fleursde la meme espece, Sadki et al. [14] ont confirme experimentale-ment que les fleurs de la meme espece (E. multiflora) presententdes proprietes diuretiques comme cela a ete cite dans lapharmacopee marocaine [15].

Le but de ce travail est d’evaluer l’activite pharmacologiquede l’espece E. arborea du Maroc. Ainsi, l’analyse de cette especea porte sur la recherche des principaux groupes chimiqueset sur l’evaluation de l’activite antioxydant, anti-inflammatoireet la toxicite aigue de l’extrait ethanolique des feuilles deE. arborea.

2. Materiels et methodes

2.1. Materiel vegetal

La partie aerienne de la plante a ete recoltee (avril 2010) dans la suberaie de Bab

Azhar a une altitude de 1072 m (region de Taza, Maroc). Elle a ete identifiee par les

professeurs Fougrach et Hsaine du laboratoire d’ecologie et d’environnement,

departement de biologie, Universite Hassan II Mohammedia, Maroc.

2.2. Criblage phytochimique

La revelation de certaines familles chimiques des differents extraits de E. arborea

a ete realisee grace aux tests de detection chimique ; les alcaloıdes (reactif de

Dragendorff), les composes phenoliques et les tanins (reaction au chlorure ferrique),

les flavonoıdes (reaction a la cyanidine), les saponosides (indice de mousse), les

sterols (reaction de Liebermann Buchard), coumarines (visualisation du chromato-

gramme CCM a 365 nm), quinones (NaOH 1/10) et mucilage (ethanol absolu) [16–

18].

2.3. Preparation des extraits

La matiere vegetale (feuilles) prealablement sechee a l’ombre jusqu’au poids

constant, a ete reduite en poudre fine (100 g), puis maceree pendant 48 heures dans

300 mL d’ethanol (absolu) sous agitation a temperature ambiante. Le residu sec a

Pour citer cet article : Amezouar F, et al. Evaluation des activites antioxBiol (Paris) (2013), http://dx.doi.org/10.1016/j.patbio.2013.03.005

ete extrait trois fois par 200 mL d’ethanol (absolu) jusqu’a epuisement. Apres

filtration sur papier Whatman de 0,45 mm de porosite, la phase alcoolique a ete

evaporee sous pression reduite par le rotavapeur a 45 8C.

L’extraction des flavonoıdes, des tanins et des saponines ont ete realisees

respectivement selon les methodes de Lee et al. [19], Zhang et al. [20] et Applebaum

et al. [21]. Les phases organiques evaporees a sec a 45 8C par le rotavapeur ont ete

stockees a –20 8C jusqu’a l’utilisation pour les tests.

L’extrait utilise pour la determination de la teneur en polyphenols totaux ainsi

qu’en flavonoıdes totaux, a ete prepare comme suit : 2 g de la matiere vegetale ont

ete dissous et maceres dans 20 mL d’une solution de methanol 50 %. Apres filtration,

l’extrait a ete centrifuge (4500 tpm) pendant 20 minutes, le filtrat obtenu a ete

garde au frais (4 8C) jusqu’a utilisation.

2.4. Determination de la teneur en polyphenols

Les polyphenols totaux ont ete estimes par la methode decrite par Wolfe et al.

[22]. La reduction du reactif de folin-ciocalteu (RFC) entraıne une diminution de

ses proprietes colorimetriques, ainsi, la teneur en polyphenols totaux est

determinee par extrapolation sur une courbe d’etalonnage obtenue a partir

d’une serie de dilutions a l’eau distillee de l’acide gallique (125 mg/L). Dans chaque

tube a essai ont ete ajoutes une aliquote (0,25 mL) de l’echantillon a doser

(echantillon ou acide gallique), 1,25 mL de reactif de RFC (dilue a 1/10) et 1 mL

(75 g/L) de carbonate de sodium. Apres agitation, les differentes solutions ont ete

laissees a l’abri de la lumiere pendant 30 min a 40 8C. L’absorbance a ete ensuite

mesuree a 765 nm (spectrophotometre Jenway 6405 UV/Visible). Le contenu

phenolique total a ete exprime en mg Equivalent d’Acide Gallique par g de matiere

seche (mg EAG/gMS) en utilisant l’equation suivante : y = 0,877 x + 0,194

(R2 = 0,976) ou « y » est l’absorbance et « x » est l’equivalent d’acide gallique

(mg/gMS).

2.5. Dosage des flavonoıdes totaux

Les flavonoıdes totaux ont ete evalues a l’aide d’un test colorimetrique

legerement modifies [23]. Dans un tube ont ete introduits successivement

250 mL de l’extrait et 1 mL d’eau distillee. Au temps initial (0 minute), 75 mL

d’une solution de NaNO2 (5 %) ont ete ajoutes, apres cinq minutes 75 mL de AlCl3

(10 %) ont ete ajoutes. Et a six minutes, 500 mL de NaOH (1 N) et 2,5 ml d’eau

distillee ont ete ajoutes successivement au melange. L’absorbance du melange

obtenue a ete directement mesuree au spectrophotometre UV-visible a 510 nm

contre le blanc. Les resultats ont ete exprimes en milligramme Equivalant

Quercetine par gramme de matiere seche (mg EQ/gMS).

2.6. Evaluation de l’activite antioxydant par les tests diphenyle-picryl-hydrazyl,

phosphomolybdate et pouvoir reducteur du fer

L’activite antioxydante a ete mesuree par la methode DPPH (1,1-diphenyle-2-

picrylhydrazyl) selon le protocole decrit par Wang et al. [24]. 0,5 mL de l’extrait a

tester ont ete ajoutes a 125 ml de solution methanolique DPPH (4 %) et 0,5 mL de

methanol. Apres agitation par un vortex, le melange a ete laisse a l’obscurite

pendant 30 min et la densite optique a ete mesuree a 517 nm. Le controle negatif

contient uniquement la solution de DPPH et le controle positif est represente par

des solutions d’antioxydant standard ; le butyl-hydroxy toluene (BHT) et la

vitamine C dont l’absorbance a ete mesuree dans les memes conditions que

l’echantillon test. L’activite antioxydante est estimee en pourcentage d’inhibition

ou pourcentage d’activite antioxydante, selon la formule suivante : % d’activite

antioxydante = (Abs control – Abs test)/(Abs control *100) ou Abs est l’absorbance a la

longueur d’onde de 517 nm. Pour obtenir la concentration efficace (CE) ; differentes

concentrations de l’extrait a tester (0–1000 mg/mL) et des antioxydants de

reference (0–100 mg/mL) ont ete preparees.

Le test phosphomolybdate (PPM) a ete realise selon la methode decrite par

Prieto et al. [25] qui consiste a introduire dans un tube Epindorff 100 mL de

l’extrait de la plante melanges a 900 ml d’un reactif compose de H2SO4 (0,6 M), de

NaH2PO4 (28 mM) et du molybdate d’ammonium (4 mM). Le tube a ete ensuite

bien ferme puis incube a 95 8C pendant 90 minutes. Apres refroidissement,

l’absorbance a ete mesuree a 695 nm. Le temoin a ete constitue de 100 mL de

methanol melange avec 900 mL du reactif mentionne ci-dessus. Les etalons, les

echantillons et le temoin ont ete incubes dans les memes conditions. La capacite

antioxydante est exprimee en mg equivalent vitamine E par gramme de matiere

seche (mg VEE/gMS).

ydante et anti-inflammatoire de Erica arborea L. du Maroc. Pathol

Tableau 1Resultats de la caracterisation des groupes chimiques dans les extraits des feuilles

de Erica arborea.

Groupes chimiques Resultats des tests

Polyphenols +

Flavonoıdes +

Tanins catechiques +

Tanins galliques +

Saponines (indice de mousse) + (250)

Sterols +

Alcaloıdes –

Anthocyanines –

Coumarines –

Quinones libres –

Mucilages +

Precipite ou coloration : present : + ; absent : –.

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Ferric reducing antioxidant power (FRAP) ou le pouvoir reducteur du fer, a ete

determine selon la methode d’Oyaizu [26]. Dans des tubes a essai contenant 0,5 mL

de solution d’echantillon a differentes concentrations (de 0 a 1000 mg/mL), ont ete

ajoutes 2,5 mL de tampon phosphate (0,2 M ; pH 6,6) puis 2,5 mL de potassium

hexacyanoferrate [K3Fe(CN)6] a 1 % dans l’eau distillee. L’ensemble a ete chauffe a

50 8C au bain marie pendant 20 min. Un volume de 2,5 mL d’acide trichloracetique

(10 %) a ete ensuite ajoute et le melange a ete centrifuge a 3000 tpm pendant

10 min. Le surnagent (2,5 mL) a ete melange avec 2,5 mL d’eau distillee et 0,5 mL de

FeCl3 1 % fraıchement prepare dans de l’eau distillee. Un blanc sans echantillon a ete

prepare dans les memes conditions. La lecture a ete faite a 700 nm. La vitamine E a

ete utilisee comme controle positif. Dans cette methode, plus l’absorbance est

haute, plus la puissance de reduction est haute.

2.7. La toxicite aigue

La toxicite aigue des feuilles de E. arborea a ete evaluee chez des souris Swiss

albinos de 25 a 32 g de poids corporel (PC) prealablement mises a jeun pendant

16 h. Les animaux ont ete randomises par groupe de quatre souris males et femelles

pour chaque dose. Des doses de l’extrait ethanolique allant de 0,5 a 10 g/kg PC ont

ete preparees dans l’eau distillee et administrees aux souris par voie orale (10 mL/kg

PC). Ceux temoins, ont recu un meme volume et de la meme maniere de l’eau

distillee. Apres administration, l’observation du comportement general des

animaux en comparaison avec celui du groupe non traite (mort, agitation,

respiration, asthenie) a ete faite pendant deux heures avant de leurs donner a

manger et a boire et ensuite pendant 48 h.

2.8. Activite anti-inflammatoire

La recherche de proprietes anti-inflammatoires a ete realisee sur le modele de

l’œdeme plantaire induit chez le rat (Wistar males et femelles, 150–200 g) par

l’injection d’une suspension a 1 % (0,2 mL) de carragenine dans la patte droite ;

technique inspiree de celles decrites par Winter et al. [27] et Adeyemi et al. [28]. Les

produits testes ont ete administres par injection intramusculaire 30 min avant

l’injection de la carragenine. Les rats ont ete mis a jeun 16 heures avant le

traitement et divises en cinq groupes de trois rats chacun. Le groupe A temoin non

traite, le groupe B a recu du NaCl 0,9 % (10 mL/kg PC) seulement, les groupes C et D

ont ete traites respectivement avec 200 et 400 mg/kg PC d’extrait ethanolique de

E. arborea, et les rats du groupe E ont ete traites avec le diclofenac (Dic), anti-

inflammatoire non steroıdien de reference, a la dose de 100 mg/kg PC. L’evaluation

de l’œdeme a ete suivie par l’enregistrement du diametre de la patte inflammee 0, 1,

2, 3, 4, 5, 24, et 48 heures apres l’injection de l’agent phlogogene. Pour chaque

groupe traite, les diametres moyens obtenus a ces differents releves (Dt) ont ete

compares a celui obtenu avant tout traitement (D0), permettant ainsi de calculer les

pourcentages d’œdeme (pourcentage d’inflammation), a partir de la formule : (Dt –

D0)/D0 � 100. Tandis que le pourcentage d’inhibition de l’œdeme a ete calcule a

partir de la formule : [(Dt – D0)temoin – (Dt – D0)traite]/(Dt – D0)temoin � 100 [29].

2.9. Analyses statistiques

Toutes les experiences ont ete realisees en triple et les resultats ont ete

exprimes en moyenne � l’ecart-type. L’etude statistique a ete realisee par le logiciel

statistique XLSTAT V.7.1. en utilisant Anova suivie du test LSD de Fisher et du test de

Dunnett pour les comparaisons multiples. Les differences ont ete considerees

significatives au seuil de probabilite de 5 % (p < 0,05). La determination de la

concentration efficace (CE50) a ete effectuee par le logiciel (Graph Pad. Prism V. 5.00)

en tracant la courbe du pourcentage de l’inhibition en fonction du logarithme des

concentrations.

3. Resultats et discussion

3.1. Composes bioactifs et teneur en polyphenols et flavonoıdes totaux

Les resultats de la composition phytochimique de differentsextraits de E. arborea par screening chimique sont reportes dans leTableau 1. Ces etudes ont permis de deceler que les extraits testescontiennent aussi bien des polyphenols, des tanins, des flavo-noıdes, des saponines, des sterols et des mucilages. Les rendementsen composes bioactifs sont indiques dans le Tableau 2. Les taninssont plus abondants avec une teneur egale a 7,2 � 1,8 % suivis dessaponines et des flavonoıdes qui representent respectivement enmoyenne 4 � 0,3 % et 2,7 � 0,9 % du poids sec des feuilles. Cesresultats sont en accord avec les travaux realises sur la compositionchimique de la famille des Ericaceae. Les representants de cettefamille produisent des tanins galliques, des tanins ellagiques et destanins condenses, essentiellement au niveau des feuilles. L’acide

Pour citer cet article : Amezouar F, et al. Evaluation des activites antioxBiol (Paris) (2013), http://dx.doi.org/10.1016/j.patbio.2013.03.005

gallique, la catechine et l’epicatechine sont les plus repandus [30,31].Aussi, les especes du genre Erica contiennent beaucoup de composesbioactifs tels que des flavonoıdes [32], des anthocyanidines [33] et descoumarines [34].

Le resultat des analyses quantitatives en composes phenoliqueset flavonoıdes totaux de l’extrait des feuilles de E. arborea parspectroscopie UV-visible montre qu’il contient 78,49 � 0,047 mgEAG/gMS et 54,08 � 0,031 mg EQ/gMS respectivement. Les composesphenoliques sont abondants dans les especes appartenant a la familledes Ericaceae [35]. Les teneurs en polyphenols et en flavonoıdesdeterminees par la presente etude sont en accord avec cellesrapportees par des etudes anterieures realisees sur la meme espece[8,36].

3.2. Activite antioxydante

L’ensemble des extraits etudies revelent des proprietes anti-oxydantes interessantes, ce qui se manifeste par des valeursimportantes de l’activite antioxydante qui varient entre 49,6 % pourles tanins et 86,4 % pour les flavonoıdes (Fig. 1). En outre, l’activiteantioxydante de l’extrait ethanolique a ete mesuree par troismethodes ; le radical DPPH, le test PPM et le test FRAP. Les resultatssont representes dans le Tableau 3. La CE50 de l’extrait ethanoliqueest de 10,22 mg/mL, une valeur comparable a celle du BHT (8,87 mg/mL) pris comme standard. Les methodes PPM et FRAP ont donnerespectivement les valeurs 16,07 � 0,01 mg et 9,48 � 0,05 mg VEE/gMS. Aussi, comme le montre la Fig. 2, plus la concentration de l’extraitaugmente, plus le pouvoir reducteur augmente. Nos resultats sontanalogues a ceux rapportes par des travaux anterieurs sur l’activiteantioxydante de E. arborea poussant en Turquie. Ces travaux ontenregistre des valeurs de CE50 de 5,98 � 0,09 mg/mL pour l’extraitde l’acetate d’ethyle ; 6,44 � 0,08 mg/mL pour la fraction desflavonoıdes ; 23,06 � 0,36 mg/mL pour l’extrait methanolique et41,10 � 0,36 mg/mL pour l’extrait aqueux [8]. De meme Marquez-Garcıa et al. [36] ont montre que E. arborea presente une correlationelevee entre la teneur en phenols et son activite antioxydante. Celapourrait etre en relation avec les observations decrites par Krauset al. [37] suggerant que la croissance de cette espece dans des solsacides et pauvres en nutriments la mene a contenir des quantiteselevees en polyphenols.

3.3. Toxicite aigue

L’administration par voie orale de l’extrait ethanolique deE. arborea a la dose de 10 g/kg PC a provoque la mort d’une sourisapres cinq minutes. Ce resultat n’est pas significatif statistique-ment (Anova) au seuil de 5 % et reste a verifier sur un plus grandnombre d’animaux. En outre l’observation, pendant 48 h apresl’administration de l’extrait ethanolique de 0,5 a 5 g/kg PC, n’a pas

ydante et anti-inflammatoire de Erica arborea L. du Maroc. Pathol

Tableau 2Rendements de quelques composes bioactifs extraits des feuilles de Erica arborea

par rapport au poids sec de la matiere vegetale.

Extraits Couleurs/Aspects Rendements (%)

Ethanolique Vert/poudre 17,9 � 0,1

Saponines Marron/pateux 4,0 � 0,5

Flavonıdes Orange/pateux 2,7 � 0,9

Tanins Marron/pateux 7,2 � 1,8

Valeurs exprimees en moyenne � l’ecart-type des extractions repetees deux fois.

Tableau 3Activites antioxydantes (%) et concentration efficace (CE50) de l’extrait ethanolique

des feuilles de Erica arborea.

Tests

DPPH PPM FRAP

% AA CE50 (mg/mL) (mg VEE/gMS) (mg VEE/gMS)

Extrait 86,5 � 0,01a 10,22 (R2 = 0,98) 16,07 � 0,008 9,48 � 0,05

BHT 85,1 � 0,00a 8,87 (R2 = 0,97) – –

Vitamine C 85,8 � 0,00a 9,45 (R2 = 0,98) – –

Valeurs representees en moyenne � l’ecart-type de trois mesures differentes.

DPPH : diphenyle-picryl-hydrazyl, PPM : phosphomolybdate, FRAP : ferric reducing

antioxidant power.a 100 mg/mL.

Fig. 2. Le pouvoir reducteur du fer (FRAP) de l’extrait ethanolique de E. arborea.

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montre d’effets remarquables sur le comportement general et larespiration des souris. Pour les concentrations elevees (10 g/kg PC),nous avons observe une tachycardie et un sedentarisme cheztoutes les souris de ce groupe durant les deux premieres heuressuivant l’administration. Ces resultats sont en accord avec ce qui aete rapporte par Sadki et al. [14], Akkol et al. [10] et Ruiz et al. [38].

3.4. Activite anti-inflammatoire

Les resultats de l’activite anti-inflammatoire obtenus ont etecompares a ceux du Dic (groupe E) et a ceux du controle ayant recule serum physiologique (groupe B). L’evolution de l’inflammationpour les differents groupes est representee par la Fig. 3. Nousconstatons que l’inflammation causee par la carragenine augmenteen fonction du temps et atteint un maximum (81,7 � 0,1 %) a cinqheures (Fig. 3). L’administration du Dic (100 mg/kg PC) previent defacon significative l’evolution de l’inflammation au niveau plantairede la patte du rat a la quatrieme et a la cinquieme heure apresl’administration de la carragenine (respectivement de 33,3 � 0,7 % etde 36,9 � 0,7 %). L’administration de l’extrait ethanolique deE. arborea aux doses de 200 et de 400 mg/kg PC previent de faconsignificative (p < 0,05) l’œdeme plantaire chez le rat a partir de ladeuxieme heure du traitement. Le traitement avec ces dosesprovoque un effet inhibiteur de l’inflammation important etsignificativement different du controle ayant recu le serum physio-logique et qui persiste au bout de 48 h apres l’injection de lacarragenine. A la troisieme heure, l’extrait ethanolique aux dosesindiquees (200 et 400 mg/kg PC) montre respectivement unpourcentage d’inhibition de 42,7 � 1,7 % et 59 � 0,5 % significative-ment different du groupe traite par le serum physiologique(3,3 � 0,5 %) (p < 0,05) (Tableau 4). Ces resultats indiquent quel’effet de l’extrait ethanolique de E. arborea est dose dependant.L’evaluation du pourcentage d’inhibition montre que cet extraitpossede une activite anti-inflammatoire (Tableau 4). Celle-ci pourraitetre due a la richesse de l’extrait ethanolique de E. arborea encomposes bioactifs, principalement les polyphenols et les flavo-noıdes. Les resultats obtenus dans ce travail sont en accord avec ceux

4045505560657075808590

%A

ctiv

ité

Anti

oxydan

te

Fig. 1. Activite antioxydante (%) au test diphenyle-picryl-hydrazyl (DPPH) des

differents extraits de E. arborea et des controles positifs (vitamine C et BHT).

Pour citer cet article : Amezouar F, et al. Evaluation des activites antioxBiol (Paris) (2013), http://dx.doi.org/10.1016/j.patbio.2013.03.005

trouves par Akkol et al. [10]. Aussi, d’autres etudes ont montre queplusieurs especes de la famille des Ericaceae telles que Calluna

vulgaris L., Ledum groenlandicum Retzius et Vaccinium mirtillus L.developpent une activite anti-inflammatoire in vivo [39–41].

4. Conclusion

La presente etude a permis de mettre en evidence la presence deprincipes bioactifs dans les feuilles de E. arborea marocaine :polyphenols, flavonoıdes, saponines, tanins, sterols et mucilagesdoues de proprietes antioxydante et anti-inflammatoire. Lesextraits de E. arborea semblent presenter un interet reel etpotentiel par leurs activites antioxydantes qui ont ete etablies parles differents tests (DPPH, PPM et FRAP). L’etude de la toxicite aiguede cette plante, a permis de conclure que l’extrait ethanolique desfeuilles n’est pas toxique a la dose de 5 g/kg PC et il a montre une

0102030405060708090

1h 2h 3h 4h 5h 24 h 48 h

Infl

amm

atio

n (

%) Groupe A

Groupe B

Groupe C

Groupe D

Groupe E

Fig. 3. Evolution de l’inflammation (œdeme plantaire) en fonction du temps pour les

differents groupes. Groupe A : temoin non traite ; groupe B : traite avec le serum

physiologique (10 mL/kg PC) ; groupes C et D : traites avec l’extrait ethanolique

(200 et 400 mg/kg PC respectivement) ; groupe E : traite avec le diclofenac (100 mg/

kg PC).

ydante et anti-inflammatoire de Erica arborea L. du Maroc. Pathol

Tableau 4Effet de l’extrait ethanolique de Erica arborea (200 et 400 mg/kg PC) et Dic (100 mg/kg PC) sur l’œdeme plantaire induit par la carragenine chez le rat.

Groupes Doses Temps (H) et diametre de la patte (mm)

0 1 2 3 4 5 24 48

Groupe A 0 7,6 � 0,5 11,6 � 0,5 13,6 � 0,6 13,3 � 0,5 13,6 � 0,6 13,9 � 0,1 12,1 � 0,2 12,0 � 0,0

Groupe B 10 mL/kg 7,8 � 0,3 11,7 � 0,6

(1,7 %)

13,6 � 0,5

(3,3 %)

13,3 � 0,5

(4,2 %)

13,6 � 0,6

(3,3 %)

13,9 � 0,0

(2,1 %)

12,0 � 0,1

(5,9 %)

11,9 � 0,0

(4,6 %)

Groupe C 200 mg/kg 7,7 � 0,4 11,3 � 1,1

(10,1 %)

10,9 � 1,7

(45,8 %)a

11,0 � 1,7

(42,7 %)a

10,6 � 1,4

(52,2 %)a

10,3 � 1,1

(58,5 %)a

9,6 � 1,1

(57,7 %)a

9,3 � 1,

(63,1 %)a

Groupe D 400 mg/kg 8,0 � 0,0 11,2 � 0,6

(17,6 %)

10,9 � 0,9

(50,3 %)a

10,3 � 0,5

(59,1 %)a

10,4 � 0,5

(60,0 %)a

10,4 � 0,5

(61,7 %)a

9,7 � 0,5

(62,2 %)a

9,3 � 0,5

(69,2 %)a

Groupe E 100 mg/kg 7,5 � 0,7 10,0 � 0,0

(36,9 %)

11,6 � 0,5

(31,3 %)

11,5 � 0,6

(28,9 %)

11,5 � 0,7

(33,3 %)a

11,4 � 0,7

(36,9 %)a

11,0 � 0,0

(22,2 %)

10,6 � 0,5

(28,4 %)

Valeurs representees en moyenne � l’ecart-type de trois mesures differentes. Le pourcentage d’inhibition de l’extrait ethanolique et du Dic par rapport a l’inflammation induite par

la carragenine est indique en (%).a Significativement different (p < 0,05) du controle traite avec le serum physiologique (groupe B).

F. Amezouar et al. / Pathologie Biologie xxx (2013) xxx–xxx 5

G Model

PATBIO-3067; No. of Pages 5

efficacite dose dependante sur l’œdeme de la patte du rat induit parla carragenine. Les proprietes pharmacologiques des feuilles deE. arborea revelees dans ce travail, justifient leur application dans laphytotherapie traditionnelle et pourraient indiquer la possibilitede leur usage therapeutique comme antioxydant et anti-inflam-matoire.

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