EXAMENS BIOLOGIQUES ET BACTERIOLOGIQUES DE DETECTION DUN AGENT INFECTIEUX. Compétence 4 – UE 2.5 S3 Processus inflammatoire et infectieux

EXAMENS BIOLOGIQUES EXAMENS BIOLOGIQUES ET BACTERIOLOGIQUES ET BACTERIOLOGIQUES

DE DETECTION D’UN DE DETECTION D’UN AGENT INFECTIEUX.AGENT INFECTIEUX.

Compétence 4 – UE 2.5 S3

Processus inflammatoire et infectieux.

IFSI de Bayonne - NL - Promotion 2010 - 2013

PLANPLAN

• EXAMENS BIOLOGIQUES

• EXAMENS BACTERIOLOGIQUES

• IDR, QUANTIFERON BK.


EXAMENS BIOLOGIQUESEXAMENS BIOLOGIQUES


EXAMENS BIOLOGIQUESEXAMENS BIOLOGIQUES

• Hémogramme ou marqueur biologique non spécifique

• Marqueurs biologiques spécifiques de l’inflammation

• Autres marqueurs


HEMOGRAMMEHEMOGRAMME


EXAMENS BIOLOGIQUES : EXAMENS BIOLOGIQUES : HEMOGRAMMEHEMOGRAMME

• Obtenu par ponction veineuse (prescription médicale de NFSPlaq)

• Marqueurs non spécifiques : permettent de suspecter une réaction inflammatoire mais ne la caractérisent pas


EXAMENS BIOLOGIQUES : HEMOGRAMME

Cellules mesurées Normales Modification si inflammation

Hématies (érythrocytes) 5 à 6 millions/mm³ Diminution (anémie)

= Destruction des hématies (hémolyse) par des agents infectieux

Leucocytes 6000 à 7000 / mm³ Augmentation (hyper leucocytose)

Plaquettes 150 000 à 400 000 / mm³ - Augmentation (thrombocytose) = états inflammatoires chroniques

- Diminution ( thrombopénie) = infections bactériennes (méningocoques ou pneumocoques), infection virale (varicelle, rougeole, rubéole..), paludisme


MARQUEURS SPECIFIQUESMARQUEURS SPECIFIQUES


VITESSE DE VITESSE DE SEDIMENTATIONSEDIMENTATION


EXAMENS BIOLOGIQUES : EXAMENS BIOLOGIQUES : MARQUEURS SPECIFIQUESMARQUEURS SPECIFIQUES• Confirment une réaction inflammatoire sans

en préciser l’origine• Vitesse de sédimentationVitesse de sédimentation:

– Étudie la vitesse de la chute des globules rouges.Mesure la hauteur de la couche de plasma au-dessus des hématies qui sédimentent au bout de 1 heure.

– Varie selon l’âge , le sexe, la viscosité sanguine– Prélèvement veineux.


EXAMENS BIOLOGIQUES : EXAMENS BIOLOGIQUES : MARQUEURS SPECIFIQUESMARQUEURS SPECIFIQUES

– La grossesse et les périodes menstruelles augmentent les chiffres

– Normes : < 5mm (1° heure) et < 10 mm (2° heure) en moyenne pour un adulte

– Mais peut atteindre 30mm chez la personne de plus de 70 ans


CRPCRP


EXAMENS BIOLOGIQUES : EXAMENS BIOLOGIQUES : MARQUEURS SPECIFIQUESMARQUEURS SPECIFIQUES• CRP (Protéine C réactive):CRP (Protéine C réactive):

– Protéine synthétisée par le foieProtéine synthétisée par le foie– S’élève en quelques heures lors d’un S’élève en quelques heures lors d’un

processus inflammatoireprocessus inflammatoire– Prélèvement veineux sur tube secPrélèvement veineux sur tube sec– Norme : entre 5 et 10 mg/l (augmentation Norme : entre 5 et 10 mg/l (augmentation

normale lors de grossesse, traitement normale lors de grossesse, traitement oestroprogestatif et 48 h. après intervention oestroprogestatif et 48 h. après intervention chirurgicale)chirurgicale)


PCRPCR


EXAMENS BIOLOGIQUES : EXAMENS BIOLOGIQUES : MARQUEURS SPECIFIQUESMARQUEURS SPECIFIQUES• PCR (Polymérase Chain Reaction) :PCR (Polymérase Chain Reaction) :

– Méthode de duplication de fragments d’ADN Méthode de duplication de fragments d’ADN in vitro : permet de reconnaître le germe à in vitro : permet de reconnaître le germe à partir de ses gênes spécifiquespartir de ses gênes spécifiques

– Intérêt majeur dans la mesure de la charge Intérêt majeur dans la mesure de la charge virale dans le sang (bilan initial de l’infection virale dans le sang (bilan initial de l’infection par VIH, hépatites) ou dans le LCR (herpès, par VIH, hépatites) ou dans le LCR (herpès, zona..)zona..)


RECHERCHE D’ANTIGENESRECHERCHE D’ANTIGENES


EXAMENS BIOLOGIQUES : EXAMENS BIOLOGIQUES : MARQUEURS SPECIFIQUESMARQUEURS SPECIFIQUES• Détection des antigènes Détection des antigènes : recherche

spécifique pour confirmation

• Prélèvement veineux

• Exemples :– AgHBS : hépatite– AgP24 : VIH– AgCMV


SEROLOGIE / SEROLOGIE / SERODIAGNOSTICSSERODIAGNOSTICS


EXAMENS BIOLOGIQUES : EXAMENS BIOLOGIQUES : MARQUEURS SPECIFIQUESMARQUEURS SPECIFIQUES• Sérologie : Sérologie :

– étude des sérums, de leurs propriétés, de leurs particularités immunitaires

– Révèle la réaction immunitaire développée par l’hôte, en recherchant et en titrant des anticorps apparus dans le sérum

– Permet de diagnostiquer une maladie infectieuse : sérodiagnostic


EXAMENS BIOLOGIQUES : EXAMENS BIOLOGIQUES : MARQUEURS SPECIFIQUESMARQUEURS SPECIFIQUES• Les sérologies peuvent rechercher :

– Des bactéries : mycoplasmes, syphilis (TPHA-VDRL)..

– Des virus : VIH (Ac anti VIH1 et antiVIH 2), hépatites B (Ac anti VHB)…

– Des parasites : toxoplasmose (Ac spécifiques du Toxoplasma gondii)..


EXAMENS BIOLOGIQUES : EXAMENS BIOLOGIQUES : MARQUEURS SPECIFIQUESMARQUEURS SPECIFIQUES• 2 moyens pour étudier la sérologie:

– Diagnostic direct : • recherche de l’agent pathogène responsable par mise

en culture

• Différentes techniques : au microscope sans puis avec colorants, par immunofluorescence, mise en culture


EXAMENS BIOLOGIQUES : EXAMENS BIOLOGIQUES : MARQUEURS SPECIFIQUESMARQUEURS SPECIFIQUES

– Diagnostic indirect :• recherche de la réponse immunitaire spécifique de

l’organisme à l’agent pathogène . Met en évidence la réponse de l’organisme à l’infection par la présence d’anticorps spécifiques

• Différentes techniques : recherche d’antigènes, biologie moléculaire (PCR = polymerase Chain Reaction)


EXAMENS BIOLOGIQUES : EXAMENS BIOLOGIQUES : MARQUEURS SPECIFIQUESMARQUEURS SPECIFIQUES• Quelques exemples :

– Sérologie de Widal = thyphoïde– Sérologie de Bordet -Wasermann = syphillis– Sérologie de Wright = brucellose– Sérologie Paul Bunnel = mononucléose

infectieuse


FROTTIS SANGUIN / FROTTIS SANGUIN / GOUTTE EPAISSEGOUTTE EPAISSE


EXAMENS BIOLOGIQUES : EXAMENS BIOLOGIQUES : MARQUEURS SPECIFIQUESMARQUEURS SPECIFIQUES• Frottis sanguin : Frottis sanguin :

– Prélèvement veineux, spécifique au Prélèvement veineux, spécifique au paludismepaludisme

– Une goutte de sang est déposée sur une lame Une goutte de sang est déposée sur une lame et lue au microscope : permet de mettre et lue au microscope : permet de mettre rapidement en évidence la présence du rapidement en évidence la présence du parasite spécifique (plasmodium)parasite spécifique (plasmodium)


EXAMENS BIOLOGIQUES : EXAMENS BIOLOGIQUES : MARQUEURS SPECIFIQUESMARQUEURS SPECIFIQUES• Goutte épaisse :Goutte épaisse :

– Prélèvement veineux, spécifique au paludisme– Recherche du parasite par une technique de

concentration puis de coloration des hématies– Résultat au bout de 24 heures– Moins spécifique que le frottis


AUTRES MARQUEURSAUTRES MARQUEURS


EXAMENS BIOLOGIQUES : EXAMENS BIOLOGIQUES : AUTRES MARQUEURSAUTRES MARQUEURS

• Protéines non spécifiques qui peuvent se modifier si inflammation

• Leur dosage peut avoir valeur d’orientation diagnostique

• Haptoglobine, fibrinogène,complément, protéines totales


PROTEINES NON PROTEINES NON SPECIFIQUESSPECIFIQUES

NORMESNORMES MODIFICATION SI MODIFICATION SI INFLAMMATIONINFLAMMATION

Haptoglobine 2g/L Augmentation

Fibrinogène 2 à 5 g/L Augmentation (peut aller jusqu’à 10 – 12 g/L)

Complément total (CH50) ou fractions C3 et C4 : protéines sériques intervenant dans l’immunité

CH 50 : 25 à 100 U/mL

C3 (fraction) : 0,8 à 1,6 g/L

C4 (fraction) : 0,2 à 0,5 g/L

Augmentation

Protéines totales 60 à 80 g/L Augmentation

Albumine: protéine qui représente 55% des protéines plasmatiques totales

40g/L Augmentation


EXAMENS EXAMENS BACTERIOLOGIQUESBACTERIOLOGIQUES



• La recherche bactériologique permet de confirmer une étiologie infectieuse d’origine bactérienne

• Des examens spécifiques sont préconisés pour identifier les bactéries en fonction de la localisation du foyer infectieux

• Tout prélèvement qui nécessite une mise en culture doit être réalisé de manière aseptique afin d’éviter tout risque de contamination (résultats faussés)



• Les examens spécifiques sont les suivants :– Hémocultures– Examen cytobactériologique des urines– Ponction liquidienne : pleurale, lombaire– Écouvillonnages– Examen cytobactériologique des secrétions

endobronchiques– Coproculture


HEMOCULTURESHEMOCULTURES


EXAMENS EXAMENS BACTERIOLOGIQUES : BACTERIOLOGIQUES :

HEMOCULTURESHEMOCULTURES• Prélèvement sanguin stérile, pour mise en

culture immédiate, sur prescription médicale



HEMOCULTURESHEMOCULTURES• Les indications :

– Hyperthermie > 38°5– Hypothermie < 36°5– Frissons– Sepsis ou choc septique– Fièvre prolongée inexpliquée



HEMOCULTURESHEMOCULTURES• Déroulement :

– Se fait pendant un pic fébrile– Lavage antiseptique des mains (bétadine scrub)– Asepsie des bouchons (bétadine alcoolique)– Port de gants– Asepsie en 5 temps du point de ponction



HEMOCULTURESHEMOCULTURES– Toujours prélever d’abord le flacon aérobie,

puis le flacon anaérobie– Homogénéisation par 2 ou 3 retournements– Retirer les gants– Étiqueter les flacons en dehors des codes barres– Noter heure du prélèvement


ECBUECBU


EXAMENS EXAMENS BACTERIOLOGIQUES : ECBUBACTERIOLOGIQUES : ECBU

• Recherche une infection située sur l’ensemble de l’arbre urinaire

• Recueil aseptique des urines en vue de déterminer la présence ou non de germes

• Présence de germes si :– Femmes : > 10⁵ germes /mL– Hommes : > 10³ germes/mL



• Une bactériurie > 10³ germes/mL signe en général une infection urinaire si un seul germe est retrouvé (sinon, contamination)

• Une bactériurie < 10³ germes/mL exclut généralement la possibilité d’une infection.



• Déroulé :– Se fait de préférence avant tout traitement anti

infectieux– Prévoir l’examen pour la première miction du

matin (urines plus concentrées, germes plus développés)



– Assurer une hygiène des organes génitaux externes pour éviter toute souillure

– Acheminer l’examen rapidement au laboratoire– L’aspect macroscopique des urines recueillies

peut déjà renseigner sur la présence de germes ou pas.

– L’IDE peut être amené(e) à faire un ECBU par sondage vésical (prescription médicale)



Urines claires Urines troubles Hématurie


PONCTION LOMBAIREPONCTION LOMBAIRE


EXAMENS BACTERIOLOGIQUES : EXAMENS BACTERIOLOGIQUES : PONCTION LOMBAIREPONCTION LOMBAIRE

• Acte médical qui consiste à prélever du liquide céphalo-rachidien, en introduisant un trocart entre les vertèbres L3 et L4 ou L4 et L5

• Examen fondamental pour toutes les infections du système nerveux (méningite par exemple)



Trocarts pour PL





• Le liquide céphalo-rachidien est un liquide circulant à l'intérieur même du système nerveux central dans les ventricules cérébraux et le canal médullaire qui est un fin canal traversant la moelle épinière dans toute sa longueur.


• Le LCR est examiné en bactériologie pour identifier des germes par mise en culture

• Peut aussi faire l’objet d’un examen:– Direct (microscope)– Biochimique : recherche de glucose, protides

chlore dont la quantité varie en fonction de l’infection

– Cytologiques :recherche la présence de différentes variétés de cellules sanguines




• Geste invasif et parfois douloureux qui génère beaucoup d’anxiété (prescription de patch analgésique avant le geste)

• Déroulement :– Geste médical– IDE = aide opératoire + ressource pour la

personne (bien-être, communication)



• Déroulement :– Geste médical– IDE = aide opératoire + ressource pour la

personne (bien-être, communication)– Aide à l’installation de la personne :position

assise, jambes pendantes, un oreiller sur l’abdomen,dos rond



• Complications :– Céphalées intenses survenant 12 à 24 heures

après la ponction– Malaise vagal– Risque infectieux au niveau du point de

ponction– Vertiges– Rachialgies



• Contre indications:– Hypertension intracrânienne– Infection au niveau du point de ponction– Affection neurologique– Trouble de l’hémostase



• Rôle infirmier post ponction:– Installer le patient en décubitus latéral– Lui faire respecter un repos strict au lit pendant

24 heures– Veiller à une hydratation suffisante– Évaluer la douleur et faire respecter les

prescriptions d’antalgiques



• LCR : liquide clair, « eau de roche »

• Différents aspects du LCR :– Trouble : infection– Purulent : méningite purulente– Jaune : saignement ancien

(hyperprotéinorachie, hépatite)– Hémorragique : saignement traumatique,

hémorragie méningée



• Composition du LCR :– Protéinorachie :< 0,40 g/L– Glycorachie : ½ de la glycémie, 2,8 à 4?2

mmôles/L– Leucocytes : < 5/mm³– Hématies : 0/mm³



LCR : liquide clair « eau de roche »


ECOUVILLONNAGESECOUVILLONNAGES


EXAMENS BACTERIOLOGIQUES : EXAMENS BACTERIOLOGIQUES : ECOUVILLONNAGESECOUVILLONNAGES

• Écouvillon : matériel stérile permettant de pratiquer des prélèvements au niveau :– Des conjonctives– Du nez– De la gorge– De la peau– De la verge– Du vagin


EXAMENS BACTERIOLOGIQUES : EXAMENS BACTERIOLOGIQUES : ECOUVILLONNAGESECOUVILLONNAGES

• But : recherche d’une infection locale pour identifier le germe et adapter le traitement (sur prescription)


ECBCECBC


EXAMENS BACTERIOLOGIQUES : EXAMENS BACTERIOLOGIQUES : SECRETIONS SECRETIONS

ENDOBRONCHIQUESENDOBRONCHIQUES• Recueil aseptique de crachats : ECBC

• Important d’obtenir une expectoration en provenance du foyer infectieux : le patient doit fournir un effort de toux pour recueillir le crachat


EXAMENS BACTERIOLOGIQUES : EXAMENS BACTERIOLOGIQUES : SECRETIONS SECRETIONS

ENDOBRONCHIQUESENDOBRONCHIQUES

• Si difficultés : recueil par tubage gastrique (secrétions bronchiques dégluties pendant la nuit) ou par fibroscopie bronchique (aspiration bronchique, brossage bronchique, lavage broncho-alvéolaire)


COPROCULTURESCOPROCULTURES


EXAMENS BACTERIOLOGIQUES : EXAMENS BACTERIOLOGIQUES : COPROCULTURECOPROCULTURE

• Recueil de selles fraîches dans pot stérile pour mise en culture et identification des germes

• Indication:– Diarrhées– Syndrome dysentérique


EXAMENS BACTERIOLOGIQUES : EXAMENS BACTERIOLOGIQUES : COPROCULTURECOPROCULTURE


IDR ou IDR ou INTRADERMOREACTIONINTRADERMOREACTION


IDRIDR

• Test cutané qui explore l’hypersensibilité de type retardée induite par l’injection de composants antigéniques de Mycobactérium tuberculosis. La source antigénique utilisée est la tuberculine.

• Evalue si une personne est atteinte de tuberculose latente.


IDRIDR• Technique pour réaliser une IDR:

• L‘IDR nécessite une technique parfaite pour être valide:– injection strictement intradermique et

exsangue à la face antérieure de l’avant-bras– de 0,1 ml de la solution tuberculinique– lecture à la 72ème heure par la mesure du

diamètre de l’induration.


IDRIDR• La réaction est jugée négative lorsque le

diamètre d’induration est inférieur à 5 mm après injection intradermique de 0,1 ml de tuberculine Tubertest R 50 TU/ml au niveau de la face antérieure de l’avant-bras.

• La lecture s’effectue idéalement à la 72ème heure mais peut être différée jusqu’au 5ème jour chez les personnes âgées chez qui la réaction peut se développer plus lentement.


IDRIDR• Indications (telles qu’elles sont définies par le

Conseil supérieur d’hygiène publique de France.)– Vérification de l’absence de tuberculose avant une

primo-vaccination, sauf chez les nourrissons de moins de 3 mois;

– enquête autour d’un cas de tuberculose;– aide ponctuelle au diagnostic de tuberculose;– test de référence dans le cadre de la surveillance des

membres des professions à caractère sanitaire ou social exposés à la tuberculose ( énumérés dans les articles R. 3112-1 et R. 3112-2 du code de la santé publique.)


IDRIDR

• L’IDR peut être faussement négative au cours d’authentiques tuberculoses– Injection trop profonde, d’une quantité trop

faible de tuberculine, d’une tuberculine qui a perdu son activité antigénique…

– Erreur de lecture: trop retardée…– Tuberculose en phase d’incubation:

phase préallergique de 6 à 8 semaines après un contact infectant.


IDRIDR

– Certains cas de tuberculose pulmonaire.– Tuberculose miliaire: l’IDR est souvent

négative car l’hypersensibilité est non acquise.– Dépression de l’immunité cellulaire.– Certaines infections virales: rougeole, etc


IDRIDR

• Réaction croisée avec le BCG– La vaccination par le BCG positive l’IDR.– 2 à 3 mois après vaccination le diamètre

d’induration est supérieur ou égal à 5 mm.– La positivité est parfois forte avec un diamètre

d’induration supérieur ou égal à 10 mm durant les premières années qui suivent la vaccination par le BCG.

– .


IDRIDR

• Ainsi l’IDR est considérée comme non contributive pour faire le diagnostic de tuberculose-infection latente dans les 10 ans qui suivent la vaccination


IDRIDR


QUANTIFERONQUANTIFERON


QUANTIFERON BKQUANTIFERON BK

• Remplace de plus en plus l’IDR car plus fiable

• Destiné à diagnostiquer les tuberculoses latentes (en aucun cas les tuberculoses actives)


QUANTIFERON

• Le système QuantiFERON BK fait appel à des tubes spéciaux pour le prélèvement

• du sang entier. • Líncubation du sang séffectue dans les

tubes pendant 16 à 24 heures.• Ensuite, le plasma est prélevé et analysé

pour détecter la présence dÍFN-produits en réponse


REFERENCES REFERENCES BIBLIOGRAPHIQUESBIBLIOGRAPHIQUES

• Modulopratique « Maladies infectieuses » - Modulopratique « Maladies infectieuses » - Editions Estem.Editions Estem.

• Les essentiels en IFSI « Processus Les essentiels en IFSI « Processus inflammatoires et infectieux » - Editions inflammatoires et infectieux » - Editions Masson.Masson.

• Nouveaux dossiers de l’IDE « Processus Nouveaux dossiers de l’IDE « Processus infectieux et hygiène » - Editions Maloine.infectieux et hygiène » - Editions Maloine.

Documents

EXAMENS BIOLOGIQUES ET BACTERIOLOGIQUES DE DETECTION DUN AGENT INFECTIEUX. Compétence 4 – UE 2.5 S3 Processus inflammatoire et infectieux