Exploration du métabolisme lipidique · 2017. 6. 12. · Appréciation du risque athérogène • Rapports: C-LDL / C-HDL < 3,5 ApoB / ApoAI < 3,5 2- Exploration du métabolisme

Exploration du métabolisme lipidiquelipidique

Pr. Layachi Chabraoui

Faculté de Médecine et de Pharmacie de Rabat

Cours de 2ème année de Médecine 2010-2011

1- Lipides et lipoprotéines

• Lipides plasmatiques: – Cholestérol,– Triglycérides– Phospholipides

Insolubles dans l’eau

– Phospholipides

• Apoprotéines: AI, AII, B48, B100, CI, CII, CIII….

S’associent aux lipides et avec les Phospholipides permettent la solubilisation de TG et du CT

LIPOPROTEINES

1-1- Structure des lipoprotéines

CE

PPhospholipides

Cholestérollibre ( CL)

TG

CE

P

1-2-Classification des lipoprotéines

• Ultracentrifugation:

ChylomicronsVLDLLDLHDL

Densité< 0,990,99 -1,0061,019-1,0631,063- 1,21

Lipides98% (TG 90%)90% (TG 60%)75% (CT 50%)55% (CT 45%)

ProtéinesApo B48,A,CApo B, D, EApo B100Apo AI, (AII)

• Electrophorèse:

HDL 1,063- 1,21 55% (CT 45%) Apo AI, (AII)

- +Dépôt

ChylomicronsPré β

lipoprotéinesα

lipoprotéines

βlipoprotéines

Composition des lipoprotéines

Chylomicrons

TGPhosphoApoCLCE

VLDL

TGPhosphoApo

1er trim.2e trim.3e trim.LDL

TGPhosphoApoCLCE

HDL

ApoCLCE

Composition des LDL

TGPL35% PLApoCLCE

35%10%

10% 20%

25%

1-3- Métabolisme des lipoprotéines

Les Chylomicrons

– formés dans l’entérocyte à partir des produits de

la digestion des lipides (AG, monoglycéries, la digestion des lipides (AG, monoglycéries,

lysophospholipides).

– → circulation lymphatique puis sang: Action de

la LPL (muscle et tissu adipeux) → AG +

remnants


Les VLDL

TG endogènes (foie) → circulation sanguine: action de la LPL et de la LCAT → AG + IDL (densité entre 1,006 et 1,019) IDL (densité entre 1,006 et 1,019)

Les IDL (remnants) →→→→ captation (récepteurs) et dégradation par le foie

→→→→ transformation en LDL (lipase hépatique)


Les LDL

Proviennent des VLDL (IDL)

Riches en cholestérol (transport)

Récepteurs LDL (ApoB/E): foie et autres tissus

LDL oxydés: Récepteurs éboueurs (scavenger)

des macrophages

1-3- Métabolisme des lipoprotéinesLes HDL

Chylomicrons

Remnants

LPL

AG+

VLDL

HDL

Cholestérol

Récepteurs

AG + IDLLPL

Transport "reverse" du cholestérol

Remnants HDL discoïdes

Cholestérol Ester Phospholipides

Cholestérol

HDL3

HDL2

AI

LCAT

LCAT

Foie

Récepteurs foie

2- Exploration du métabolisme lipidique

Prélèvementsujet à jeun depuis 12 heures+++

Sérum ou plasma héparinéSérum ou plasma hépariné

Aspect du sérumJaune citrin (clair)

Lactescent ou opalescent Réexamen après une nuit à 4°C


Dosage des TriglycéridesTG AG + Glycérol

Lipase ATPGlycérolKinase

1

2Kinase

ADP

Glycérol P DH

P di OH Acétone Glycérol P

NAD+ NADH+

3

Mesure DO à 340 nm


Dosage du Cholestérol

CE CL Cholesténone+

Chol. Estérase Chol. Oxydase+

H2O2

Formazan réduitincolore Peroxydase

Formazan oxydécoloré H2O

Mesure DO


Dosage du Cholestérol HDL

Méthode indirecte (TP)

• Précipitation des LDL et VLDL (lipoprotéines contenant l’ApoB) par le sulfate de dextan de haut PM ou par le phosphotungstate de sodium + MgCl2

• Centrifugation

• Dosage du C-HDL dans le surnageant

Méthodes directes

(Ex: Complexer les lipo non HDL par Ac anti β-lipo)

Le Cholestérol LDL� Calcul par la formule de Friedewald:

C-LDL = CT – (C-HDL + TG/5) en g/l


C-LDL = CT – (C-HDL + TG/5) en g/l

Condition de validité: TG < 3,5 g/l

� Dosage direct: 4 nouvelles méthodes ont été

validées en 2005 (Article: Anales de Biologie

Clinique)

Valeurs usuelles

• CT: 1,40 à 2 g/l


• TG: 0,50 à 1,50 g/l

• C-HDL: 0,40 à 0,65 g/l

• C-LDL: 0,70 à 1,60 g/l

Electrophorèse des lipoprotéinesLipidogramme

• De moins en moins étudié• Electrophorèse en milieu alcalin qui sépare les


• Electrophorèse en milieu alcalin qui sépare les différentes lipoprotéines:

- +Dépôt

ChylomicronsPré β

lipoprotéines 10 à 15%

α lipoprotéines 30 à 35%

β lipoprotéines 50 à 60%

Dosage des Apoprotéines

• Méthodes immunologiques: (Anticorps) Immunoprécipitation en milieu liquide ou


Immunoprécipitation en milieu liquide ou sur gel:

ApoAI (HDL): 0,70 à 2 g/l

ApoB (LDL): 0,50 à 1,30 g/l

Lp (a) (LDL): < 0,30 g/l

Appréciation du risque athérogène• Rapports:

C-LDL / C-HDL < 3,5

ApoB / ApoAI < 3,5


ApoB / ApoAI < 3,5

C-LDL et seuils d’intervention

1,9 g/l si aucun facteur de risque

1,6 g/l si un facteur de risque

1,3 g/l si deux facteurs de risque

1 g/l si pathologie coronarienne

3- Classification des hyperlipoprotéinémies

• ↑ des TG et ou du CT

• ↑ du Cholestérol surtout le C-LDL car athérogène +++

• Hyperlipoprotéinémies secondaires

• Hyperlipoprotéinémies familiales (primaires)

Hyperlipoprotéinémies primaires

Classification Internationale (Fredrickson)

FréquenceAspect du

sérumCT TG Lipoprot

IIa fréquent Clair +++ N LDL

IIb fréquent opalescent ++ + LDL,VLDLIIb

III

fréquent

rare

opalescent

opalescent

++

++

+

++

LDL,VLDL

Broad β

I

IV

V

très rare

fréquent

rare

lactescent

opalescent

lactescent

N ou +

N ou +

N ou +

+++

++

+++

Chylo

VLDL

VLDL Chylo

Classification selon De Gennes Fredrickson

Hypercholestérolémies essentielles1 ) Forme mineure : expression biologique permanente, manifestations cardiovasculaires occasionnelles2) Forme majeure : xanthomatose tendineuse hypercholestérolémique familiale (XTHF)3) Forme monstrueuse de XTHF

IIa

Hyperlipidémies mixtes

CT/TG > 2,5

CT/TG ≤≤≤≤ 2,5 TG/CT ≤≤≤≤ 2,5Hyperlipidémies mixtes1) Forme mineure: expression biologique permanente, quelques manifestations cardiovasculaires2) Forme majeure avec ou sans xanthomatose

IIb

III

Hypertriglycéridémies majeures• Formes exogènes dépendantes des graisses (LPL↓)• Formes endogènes indépendantes des graisses ( glucido-dépendantes ou éthanolodépendantes, (LPL normale)• Formes exogènes et endogènes

I

IV

V

TG/CT > 2,5

CT/TG ≤≤≤≤ 2,5 TG/CT ≤≤≤≤ 2,5

Hyperlipoprotéinémies secondaires

Types selon Fredrickson

CT TG

Pathologies métaboliquesDiabète Insuffisance rénaleHyperuricémies

Syndrome néphrotique

IV ou IIb

IIb ou IV

N ou +

+

+

+Syndrome néphrotique IIb ou IV + +

Pathologie HormonaleHypothyroïdies

IIa ou IIb ++ N ou ++

HyperLipoProtéinemies latrogènesContraceptifs stéroïdiensBeta-BloquantsDiurétiques thiazidiquesCorticoïdes

IIb ou IVIVIIb

IV ou IIb

N ou +N+

N ou +

++++

Hypolipoprotéinémies

Secondaires• Hyperthyroïdies• Malnutrition• Malnutrition

• Insuffisance hépatocellulaires

Primaires

• Maladie de Tangier: absence des α lipo• Maladie de Bassen Kornzweig: Abétalipo

Sphingolipidoses

• Anomalies héréditaires du métabolisme des sphingolipides qui sont des lipides complexes tissulaires: système nerveux

• Structure de base = sphingosine : alcool • Structure de base = sphingosine : alcool aminé à 18 atomes de carbone

• La substitution de la fonction amine en 2 par un AG en C18 à 26 → Céramide

• La substitution de la fonction alcool en 1 donne 4 types de composés:

1. Sphingomyélines = Céramide lié au phosphorylcholine

2. Cérébrosides =Céramide + Oligosaccharide

3. Sulfatides =Cérébrosides sulfatés

4. Gangliosides =4. Gangliosides =Cérébrosides + molécules d’acide sialique

Ces sphingolipides sont catabolisés par des enzymes spécifiques.

Le déficit d’une enzyme entraîne l’accumulation du sphingolipide non dégradé et détermine une sphingolipidose

Sphingolipidose Enzyme déficient Sphingolipide accumulé

GM1 Gangliosidose

GM2 Gangliosidose

Tay-Sachs

Sandhof

Maladie de Fabry

β Galactosidase

Hexosaminidase A

Hases A et B

α Galactosidase A

GM1 ganglioside

GM2 ganglioside

Globotriaosylcéramide

Maladie de Gaucher

Maladie de Farber

Leucodystrophie

métachromatique

Maladie de Krabe

Maladie de

Niemann-Pick

Glucocérébrosidase

Céramidase acide

Arylsulfatase A

Galactosylcéramidase

Sphingomyélinase

Glucosylcéramide

Céramide

Sulfatide

Galactosylcéramide

Sphingomyéline

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Exploration du métabolisme lipidique · 2017. 6. 12. · Appréciation du risque athérogène • Rapports: C-LDL / C-HDL < 3,5 ApoB / ApoAI < 3,5 2- Exploration du métabolisme