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La recherche des anticorps anti-tissus et spcifiques dorganes

8 Dcembre 2016 Les jeudis de Fleurus Dierge Laurine, Ph biologiste

SOMMAIRE

1. Introduction 2. Les principaux autoanticorps anti-tissus

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Introduction : autoimmunit

Dveloppement dune rponse de limmunit adaptative contre des antignes du soi. Prsence de lymphocytes autoractifs avec production dauto-anticorps

Lorsquil y a rupture de tolrance, la raction immunitaire est amplifie pouvant donner lieu une MALADIE auto-immunitaire chronicit ou rcidive

Maladies autoimmunes = plus dune centaine affections, souvent chroniques ncessitant une surveillance longue et un traitement complexe

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Introduction : autoimmunit

5% 7% de la population atteinte des pays industrialiss (la frquence est probablement sous-estime). Augmentation de lincidence au cours du temps

3ime cause de morbidit dans les pays dvelopps

Plus frquent chez les femmes que les hommes (75>

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Introduction : autoimmunit

Les autoanticorps peuvent tre des marqueurs prcoces dune pathologie venir

Le suivi du taux danticorps peut dans certains cas tre corrls lvolution de la maladie et la gravit de ltat clinique du patient (ex DsDNA dans le lupus)

Sil ny a pas de spcificit antignique identifie pour lauto-ractivit, on parle de maladies auto-inflammatoires

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Initiation de la production danticorps contre des auto-antignes auto-anticorps souvent dtects avant la maladie

Introduction : autoimmunit

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Introduction : maladies autoimmunes

Systmiques (atteintes simultane de plusieurs organes = connectivites)

Spcifiques dun organe

Syndrome de chevauchement

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Systmiques (non spcifiques dorganes)

Polyarthrite rhumatode (articulations)

Lupus rythmateux dissmin (certaines articulation, peau, reins)

Maladie de Sjgren (glandes exocrines)

Sclrodermie, Sclrose progressive systmique (peau)

Polymyosite/dermatomyosite (muscles)

Vascularites (vaisseaux)

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Spcifiques dorganes (1)

Estomac : Anmie de Biermer, Gastrite autoimmune

Foie : Hpatite Autoimmune, CPB

Intestin : Maladie cliaque, Crohn, RCHU

Jonction neuromusculaire: Myasthnie

Nerf : neuropathie priphrique

Pancras : Diabte insulinodpendant (type 1)

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Spcifiques dorganes (2)

Peau: Pemphigus, psoriasis, vitiligo

Rein: Syndrome de Goodpasture

Surrnales : Maladie dAddison, maladie de Cushing

Systme nerveux: Sclrose en plaque

Thyrode: Maladie de Basedow, thyrodite dHashimoto

SOMMAIRE

1. Introduction 2. Les principaux autoanticorps anti-tissus

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Les autoanticorps anti-tissus

Choix de lorgane

Coupe de lorgane

Choix de lantiglobuline ou du conjugu

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Les autoanticorps anti-tissus

Choix de lespce

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Les autoanticorps anti-tissus

La localisation prcise de la fluorescence au niveau des diffrentes structures tissulaires permet davoir des renseignements sur la nature des antignes reconnus, ce qui ncessite une connaissance de lhistologie des diffrents tissus

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FOIE

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FOIE

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http://www.cancerci.com/content/5/1/16/figure/F2?highres=y

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FOIE

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ESTOMAC

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Muscularis mucosa

Lumire de lestomac

Muqueuse

Muscle lisse

Sous-muqueuse

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ESTOMAC

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ESTOMAC (Cellules paritales de RAT et de SINGE)

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REIN

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REIN

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Kidney Cortex Kidney Medulla

Liver Stomach

Coupe de ESTOMAC-FOIE-REIN

Triple substrat

www.hopitauxschuman.lu www.hopitauxschuman.lu Triple substrat

Coupe de ESTOMAC-FOIE-REIN

Que recherche-t-on par IIF sur ces coupes de tissus de rongeurs?

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Hpatites auto-immunes : HAI

Origine des hpatites chroniques actives:

HAI: Manifestations cliniques variables, souvent insidieuses et non spcifiques chez les adultes

25% dcouvertes par hasard de tests hpatiques perturbs, patients asymptomatiques souvent volution subclinique depuis des annes

30-40% : dbut mimant une hpatite aige

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HAI

Maladie rare (50-200 cas/million), affecte principalelement les femmes (80%)

2 types : HAI-1 et HAI-2

Clinique : htrogne allant de la maladie asymptomatique lhpatite ictrique jusqu lhpatite fulminante + symptmes non spcifiques tels que prurit, asthnie, malaise, anorexie, nause, douleurs abdominlaes, arthralgies,...

Pathognse inconnue : perte de tolrance contre les tissus hpatiques et prdisposition gntique (HLA A1, Cw7, B8, DR3, DR4)

Terrain dysimmunitaire avec thyrodite, RCUH, diabte, connectivite, CBP, PSC

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HAI

Anticorps: Nature auto-immune de laffection et classification

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HAI-1 HAI-2

AC anti-nuclaire : Anti-dsDNA Anti-RNP Anti-centromres Anti-Histones Souvent spcificit non identifies Parfois pANCA atypique

15% Anti-LKM

70%

AC anti-muscle lisse type F-actine 50-80% Anti-LC1

10%

ANA + anti-ASMA 50% Anti-LKM + LC1

20%

Anti-SLA/LP : (trs spcifiques et de mauvais pronostic)

10-30%

Tout ge Svrit variable

Surtout enfants et jeunes adultes Souvent svre

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HAI

Critres internationaux de diagnotic des HAI

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HAI

Critres simplifis pour le diagnostic des AIH (Hennes, 2008)

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1 point 2points

IgG > 16 g/L > 18 g/L

ANA ou anti-actine ou anti-LKM 1/40 1/80 ou anti-SLA/LP +

Histologie Compatibles avec HAI Typiques de lHAI

Marqueurs viraux Ngatifs

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HAI

Biologie:

Traitement :

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Les autoanticorps anti-muscles lisses

ASMA (anti-smooth muscle antibodies)

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ASMA: Dtection sur tissu de rat

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ASMA :Dtection sur cellules Hep2

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Vimentine

Desmine

Tropomyosine

Actine

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ASMA : Ac anti-muscle lisse de type F-Actine

Clinique : Si titre lev > 1/40: HAI-1 (50-80%), CBP (20%), HCV, HBV, cirrhose alcoolique.

Sensibilit : 85%, spcificit: 85%

Dtection : IIF

Confirmation:

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ASMA : Ac anti-muscle lisse de type-F-actine

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VSM47 Rein : spicules

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Les autoanticorps anti-LKM-1

LKM : Liver Kidney Microsomes. Les AC ragissent avec les microsomes du foie et du rein = composants du reticulum endoplasmique des cellules.

Antigne : LKM1 = cytochrome P450 2D6

Clinique :

Dtection (sensibilit de 95-100%)

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Les autoanticorps Anti-LKM1

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Les autoanticorps anti-LKM-2

Antigne :

Clinique :

Dtection

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Les autoanticorps anti-LKM-3

Antigne :

Clinique :

Dtection

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Les autoanticorps anti-LM

LM: Liver Microsomal antibodies

antigne :

Clinique:

Dtection :

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Anti-Liver Cytosol de type 1

Antigne :

Clinique :

Dtection :

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Les autoanticorps anti-LC1

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Les autoanticorps anti-LC1

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Rein : ngatif

Foie : fluorescence homogne des

hpatocytes, pargnant les

hpatocytes jouxtant les veines

centrolobulaires

Estomac: ngatif

Prsence et titre