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www.sciencedirect.com
Annales d’Endocrinologie 74 (2013) 278–280
SFE Paris 2013
Surrénales�
CO-61
Contrôle post-transcriptionnel del’expression rénale du récepteurminéralocorticoïde par l’hypertonicité :conséquences physiopathologiques sur labalance hydro-éléctrolytiqueI. Lema a,∗, S. Viengchareun a, V. Kéo a, L. Amazit b,J. Nevoux a, L. Martinerie a, A. Blanchard c, N. Cherradi d,M. Lombès a
a Inserm U693, Le Kremlin Bicêtre, Franceb Institut biomédical de Bicêtre (IB2), Le Kremlin Bicêtre, Francec Inserm, Centre d’Investigations Cliniques 9201, Paris, Franced Inserm U878, Grenoble, France∗Auteur correspondant.
La balance hydrosodée et la pression artérielle sont régulées par l’aldostéroneet le récepteur minéralocorticoïde (MR), un facteur de transcription dontl’expression rénale varie au cours du développement et est altérée dans certainesnéphropathies.Nous montrons que l’hypertonicité stimule (× 4) l’expression de Tis11b, uneprotéine de liaison à l’ARN et réduit l’expression du MR (messager et protéine)dans les cellules rénales KC3AC1. À l’inverse, la contre-régulation de Tis11bpar ARN interférents restaure l’expression du MR, confirmant la corrélationnégative entre Tis11b et MR.Nous démontrons que Tis11b module la stabilité/dégradation du transcrit MRen se fixant aux motifs riches en adénosine/uridine (ARE), identifiés dans larégion 3′-non traduite (3′-UTR) du transcrit MR.L’analyse de mutants de délétion du 3′-UTR du transcrit MR dans des vec-teurs rapporteurs pMIR-Luc révèle le rôle fonctionnel clé des éléments AREproximaux dans la déstabilisation des transcrits par Tis11b. Les expériences deRNA-ChiP confirment l’interaction physique de Tis11b avec ces motifs AREdu 3′-UTR du MR. Nous montrons également que la baisse d’expression duMR induite par l’hypertonicité via Tis11b a des conséquences fonctionnellesmajeures, en réduisant l’induction aldostérone-dépendante de gènes cibles dansles cellules rénales.Ces mécanismes de régulation post-transcriptionnelle sont également mis en jeuin vivo puisque les conditions mimant l’hypertonicité chez la souris (restrictionhydrique, régime hypersalé, diurétiques) stimulent l’expression rénale de Tis11bet diminuent celle du MR.L’altération de ces mécanismes inédits, régulant spécifiquement l’action rénaledu MR pourrait participer à la pathogenèse de maladies rénales, de l’hypertensionou des résistances minéralocorticoïdeS.
http://dx.doi.org/10.1016/j.ando.2013.07.123
� Résumés présentés lors du 30e Congrès de la Société francaised’endocrinologie Paris 2013.
CO-62
L’autocrine de la cellulecortico-surrénalienne est régulée par lerécepteur glucocorticoïdeL. Asser a,∗, S. Hescot a, J. Bouligand b, B. Delemer c,S. Trabado b, M. Lombès a
a Faculté de médecine Paris Sud, INSERM unité 693, Le Kremlin Bicêtre,Franceb Faculté de médecine Paris Sud, INSERM unité 693, service de génétiquemoléculaire, pharmacogénétique, hormonologie, CHU de Bicêtre, Le KremlinBicêtre, Francec Service d’endocrinologie et métabolisme, CHU de Reims, hôpitalRobert-Debré, Reims, France∗Auteur correspondant.
Si la régulation endocrine de la stéroïdogenèse surrénalienne par l’ACTH estbien connue, l’hyperplasie surrénalienne retrouvée chez les patients porteursde mutations du récepteur glucocorticoïde (GR) ou chez les souris hétérozy-gotes invalidées pour GR nous interroge sur le rôle de la signalisation autocrineglucocorticoïde et sur l’implication du GR dans la fonctionnalité de la cellulecortico-surrénalienne.Les cellules humaines cortico-surrénaliennes H295R sécrétantes sont incu-bées avec un agoniste (déxamethasone) ou un antagoniste (RU486) duGR. L’expression du GR est contre-régulée par interférence ARN (SiRNA).L’expression génique est analysée par PCR quantitative et Western Blot, lasécrétion stéroïdienne mesurée par RIA.Nous montrons que la contre-expression du GR par SiRNA (baisse de 70 % en48 heures) ou l’inactivation pharmacologique du GR par RU486, inhibent dras-tiquement (> 70 %) l’expression des gènes stéroïdogéniques (StAR, CYP11A1,CYP11B1), associée à une diminution de la sécrétion de 17-OH-progestérone etde cortisol. À l’opposé, 100 nM de dexaméthasone augmente d’un facteur 2 lestranscrits de StAR, CYP11A1 et CYP11B1 et stimule de 1,5 fois la sécrétionstéroïdienne. Nous démontrons aussi que l’expression du récepteur de l’ACTH(MC2R) est corrélée à l’activité du GR : diminuée de 50 % par le SiRNA GR oule RU486 et augmentée de 2,7 fois sous dexaméthasone.Nos résultats démontrent l’existence d’une relation fonctionnelle directe entresignalisation glucocorticoïde et stéroïdogenèse surrénalienne. L’implicationdirecte de GR sur le potentiel sécrétoire surrénalien via l’expression modu-lée de MC2R suggère l’existence d’une boucle de rétrocontrôle autocrine de lasignalisation glucocorticoïde sur la cellule cortico-surrénalienne.
http://dx.doi.org/10.1016/j.ando.2013.07.124
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Comparaison fonctionnelle de mutantsPRKAR1A responsables de complexe deCarney et d’acrodysostoseY. Rhayem a,∗, C. Le-Stunff b, A. Linglart c, J. Bertherat a,C. Silve b, E. Clauser a
a Inserm, université Paris Descartes, AP–HP, Paris, France
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