Le Diagnostique Les Bacilles Gram Positifs. Classification Bacilles Gram Positifs Sporulants Aérobie et aérobie facultatif Bacillus Anaérobie stricte.

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    03-Apr-2015

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  • Le Diagnostique Les Bacilles Gram Positifs
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  • Classification Bacilles Gram Positifs Sporulants Arobie et arobie facultatif Bacillus Anarobie stricte ClostridiumNon-sporulantsArobieListeria
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  • Caractristiques des Bacilles Sporulants Tous sont de gros bacilles Gram positifs Font des endospores Principalement retrouvs dans le sol, les eaux et la poussire Exigences nutrionelles trs diverses Utilisent des sources de carbones simples et complexes Leurs spores leurs permettent de rsister des conditions extrmes
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  • Les Bacilles dImportance Mdicale Bacillus Majoritairement inofensifs Quelques espces opportunistes Bacillus cereus & Bacillus subtilis Empoisonement alimentaire Une espce pathogne Bacillus anthracis Anthrax
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  • Les Bacilles dImportance Mdicale Clostridium Plusieurs espces pathognes Clostridium perfringens Gangrne gazeuse Clostridium tetani Ttanos Clostridium botulinum Botulisme Clostridium difficile Diarrhe
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  • Identification: Tests Mtaboliques Bouillon de phnol rouge Mtabolisme de sources de carbones simples Source de carbone: Peptone (protine acides amins) Sucre dsir ajout Indicateur de pH Phnol rouge Jaune pH acide Orange pH neutre Rouge pH alcalin
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  • Bouillons de Phnols Rouges Utilisation de Carbone: Sucre Raction acide (Jaune) ou neutre (Original) Protine Raction alcaline (Rouge)
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  • Fermentation du Glucose Accumulation dacide: Glucose pyruvate acide lactique et/ou actique + CO 2 Accumulation de produits neutres Glucose pyruvate actoine 2 butanediol + CO 2
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  • Test de Mthyl Rouge Test pour laccumulation dacide Sources de carbones: Glucose et protines Indicateur -mthyl rouge; Ajout aprs MR +: rouge (pH < 5.2) MR - : jaune (pH > 5.2)
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  • Test de Voges-Proskauer VP + = rouge VP - = jaune Rsultats habituelle de MR/VP: MR+/VP-; MR-/VP+ MR-/VP- Ractifs VP: butanediol + -naphthol + KOH + O 2 actoine
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  • Utilisation dUre Carbone: Ure Enzyme Urase Indicateur de pH Phnol rouge C O + 2 H 2 O CO 2 + H 2 O + 2 NH 3 (NH 4 ) 2 CO 3 H2NH2N H2NH2N ure ammonium carbonate (alcalin) Acides amins NgatifPositif
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  • Utilisation du Carbone Complexe Trop gros pour le transport lintrieur Ncessite enzymes exocellulaires pour la dgradation externe en petites units Polysaccharides Amidon (amylase) Lipides (lipase) Tributyrine Protines (protase) Casine (casinase)
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  • Amylase Avant lajout diodeAprs lajout diode
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  • Casinase
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  • Lipase
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  • La Respiration Arobie La Chane de Transport de- 3 H 2 O H+H+ 2 H + 3 H + + 3 OH - 2 H + H2OH2O 3 H + + 1/2 O 2 2 e- Fp Fe-S 2 e- Q Cyt b Cyt o NADH + H + FADH 2 intrieur extrieur
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  • Test dOxydase Cytochrome oxydase catalyse la rduction du capteur final de-, loxygne Un donneur artificiel de-, la phenylenediamine, est utilis pour rduire le cytochrome oxydase Si lenzyme est prsente, le ractif incolore (tat rduit) deviendra bleu (tat oxyd)
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  • Catalase Ajout de 3% H 2 O 2 la croissance bactrienne 2H 2 O 2 2H 2 O + O 2 catalase Produit de la respiration dommageable pour lADN Mtabolisme darobie require la catalase Bulles (O 2 )
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  • Respiration Anarobie 2 H + 3 H + + 3 OH - 3 H 2 O 2 H + NO 2 - + H 2 O (N = +3) nitrite NO 3 - + 2 H + (N = +5) nitrate 2 e- Fp Fe-S 2 e- Q Cyt b NADH + H + FADH 2 Nitrate rductase Intrieur Extrieur Capteur final de-
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  • Nitrate Rductase NO 3 - + 2 H + + 2 e- H 2 O + NO 2 - NO, N 2 O, NH 2 OH, NH 3, N 2 nitrate nitrite tape 1: Test pour nitrite NO 2 - + acide sulfanilique et alpha naphthylamine HNO 2 Nitrate nest pas rduit Absence de Nitrite Jaune Nitrate est rduit Production de Nitrite Rouge Nitrate est rduit au nitrite Nitrite est rduit Absence de Nitrite Jaune
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  • Nitrate Rductase (suite) NO 3 - + 2 H + + 2 e- H 2 O + NO 2 - NO, N 2 O, NH 2 OH, NH 3, N 2 nitrate nitrite tape 2: Test pour prsence du nitrate NO 3 - + Zn (s) NO 2 - Nitrate est prsent Rduction au Nitrite Rouge Nitrate est absent Nitrite a t rduit Jaune
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  • Le Diagnostique Les Cocci Gram Positifs
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  • Classification Cocci Gram Positifs Streptococcaceae Catalase - Arobie & anarobie facultatif Streptococcus Micrococcaceae Catalase + ArobieMicrococcusStaphylococcus
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  • Caractristiques des Cocci Gram Positifs Tous sont non sporulants Principalement retrouvs parmi la flore naturelle des hommes et des animaux Exigences nutrionelles fastidieuses Utilisent des sources de carbones simples
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  • Aggrgation Cellulaire des Cocci Gram Positifs Micrococcus & Streptococcus Streptococcus Micrococcus Staphylococcus
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  • Les Cocci Gram Positifs dImportance Mdicale Micrococcaceae Staphylococcus aureus Cause plusieurs types dinfections, maladies alimentaires et choc toxique Staphylococcus epidermidis Cause des infections opportunistes Staphylococcus saprophyticus Cause majeure de cystites chez les femmes
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  • Les Cocci Gram Positifs dImportance Mdicale Streptococcaceae Streptococcus pyogenes Pharyngite (strep throat) et infection bactrie mangeuse de chair Streptococcus agalactiae Infections gnitales Streptococcus mutans Endocardites Streptococcus pneumonia Otite, meningite et pneumonie Enterococcus spp. Infections opportunistes
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  • Identification: Tests Mtaboliques Microccocus Vs Staphylococcus Test doxydase Micrococci sont + Staphylococci sont Bacitracine Micrococci sont sensibles Staphylococci sont rsistants
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  • Identification: Tests Mtaboliques Diffrentitation des espces de Staphylococcus Test de coagulase Les staphylococci coagulase positifs S. aureus Staphylococci coagulase ngatifs Tous les autres Staphylococci Fermentation du mannitol S. aureus et quelques S. saprophyticus sont positifs S. epidermidis est negatif S. aureus S. epidermidis
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  • Identification: Tests Mtaboliques Diffrentiation des espces de Streptoccocus Regroupement srologique de Lancefield Fond sur le type dhydrate de carbone dans leur paroi 8 groupes (A-H et K-U) Groupe A: -hmolytique - Streptococcus pyogenes Groupe B: -hmolytique - S. agalactiae Groupe C: ou hmolytique- S. viridans Groupe D: hmolytique Enterococcus Pas classifi daprs le regroupement de Lancfield hmolytique- S. pneumoniae et S. mutans
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  • Hmolyse Sanguine Glose de sang: Discrimination daprs patrons dhmolyses Hmolyse alpha - Hmolyse incomplte Hmolyse beta - Hmolyse complte Hmolyse gamma - Aucune hmolyse
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  • Identification: Tests Mtaboliques Identification de Streptoccocus pneumoniae Solubilisation par la bile Strep. pneumoniae est positif Autres Strep. sont ngatifs Identification dEnterococcus Test de bile-esculin Enterococcus est positif Autres Strep. sont ngatifs

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