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Coordination Rgionale dHmovigilance Docteur Mahdi TAZEROUT Madame Yolande GALINIER

Direction Rgionale des Affaires Sanitaires et Sociales Midi-Pyrnes 10 Chemin du Raisin 31050 TOULOUSE Cedex 9

Tl. 05.34.30.24.38 Fax : 05.34.30.24.39

MANUEL DAIDE A LA FORMATION EN TRANSFUSION SANGUINE

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CHAPITRE 1 : LE DON DU SANG

La transfusion sanguine est une discipline aux confins de lhmatologie et de limmunologie : elle implique la mdecine, la biologie, la bio-industrie et la sociologie ; elle repose sur lthique. La transfusion sanguine consiste administrer le sang ou lun de ses composants (globules rouges, plaquettes, granulocytes, plasma, protines) provenant dun ou plusieurs sujets appels donneurs , un ou plusieurs sujets malades appels receveurs . Llaboration de produits cellulaires dits labiles, ncessaires au traitement des malades, nest possible que par la mise en uvre dune chane de solidarit dont le premier maillon est constitu par les donneurs de sang bnvoles. La mise disposition des produits doit obligatoirement rpondre des rgles de bonnes pratiques transfusionnelles : prlvement, prparation, qualification biologique, distribution et indications cliniques. Le respect de ces rgles est une ncessit absolue. LEtablissement Franais du Sang prpare des produits sanguins labiles de qualit rpondant des normes prcises et participe lapprovisionnement en plasma au Laboratoire Franais du Fractionnement et des Biotechnologies (LFB) pour la production de produits stables. Le plasma permet la prparation dalbumine, de facteurs de coagulation et dimmunoglobulines.

I. LE PRELEVEMENT ET LA QUALIFICATION DU DON Selon la lgislation franaise, toute personne en bonne sant, ge de 18 65 ans, peut donner son sang. Le volume maximal prlev lors du don est de 8ml/kg. Cependant, quel que soit le poids de la personne, un volume total de 500 ml ne doit pas tre dpass, le nombre total par anne ne doit pas excder 5 pour les hommes et 3 pour les femmes pour les dons cellulaires et lintervalle doit tre au moins gal 8 semaines. Toutefois, entre 60 et 65 ans, le nombre total par anne chez les hommes et les femmes ne peut tre suprieur 3 dons. La compensation des pertes subies lors dun don de sang total seffectue normalement en quelques semaines.

II. LES CONTROLES A loccasion de chaque don, le donneur fait lobjet : dun contrle clinique :

Entretien mdical (un document de prparation lentretien mdicale pralable au don du sang) est

remis au donneur de sang, lors de lenregistrement Examen gnral.

Il permet dliminer certaines contre-indications au don. Cette tape est dfinie comme lensemble des mesures visant rduire ou liminer les risques immunologiques ou infectieux lis la transfusion de produits sanguins (circulaire DH/DGS/3B/4 du 15 janvier 1992).

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de contrles biologiques obligatoires : NFS dpistage syphilis dtection de lAg HBs, anticorps anti-HBc dpistage des anticorps anti VIH1/VIH2 dpistage des anticorps anti VHC diagnostic gnomique viral : VIH/VHC dpistage des anticorps anti-HTLV1/HTLV2 groupe sanguin et phnotype rhsus Kell dpistage des hmolysines Anti-A et Anti-B recherche des anticorps anti-rythrocytaires (RAE) dpistage du CMV (cytomgalovirus) non obligatoire.

Et en cas de voyage en zone dendmie du Paludisme : srologie anti-paludenne.

III. LES PRODUITS SANGUINS LABILES

Les produits sanguins labiles (PSL), issus du sang de donneurs, ne subissent aucune transformation. Toutes les tapes de prparation des PSL visent accrotre leur puret et leur scurit. Les prlvements et la prparation des PSL sont rgis par des textes lgislatifs contraignants. Seul lEtablissement Franais du Sang est autoris les raliser.

IV. LA COMPOSITION DU SANG

Le sang se compose de cellules et de plasma. Le plasma contient des protines diverses, dont :

les immunoglobulines, lalbumine, les facteurs de coagulation.

Les cellules du sang se divisent en trois catgories :

les globules rouges qui transportent loxygne des poumons

aux tissus et captent le gaz carbonique qui est limin ensuite par les voies respiratoires ;

les globules blancs qui dfendent lorganisme contre les agressions des microbes, bactries et virus ;

les plaquettes qui empchent le saignement en colmatant les lsions des vaisseaux.

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V. LE DON DE SANG TOTAL Cest la forme de prlvement la plus connue. Elle consiste prlever 450 ml 500 ml de sang directement de la veine du donneur jusqu une poche de recueil qui contient lanticoagulant. La poche de recueil rassemble donc tous les lments du sang : globules rouges, plaquettes et plasma. Pour le donneur, les pertes reprsentent : 250 280 ml de plasma, 15 20 g de protines 200 mg de fer 1 2 g/l dhmoglobine. La compensation rythrocytaire se fait en 3 semaines (avec un pic rticulocytaire au 9me jour). La rcupration volmique est de 40 80 ml/heure.

VI. LE DON DE PLASMA DAPHERESE Ce don ncessite lutilisation dun sparateur. Au cours du prlvement, le sang est spar en ses diffrents lments. Le plasma est recueilli dans une poche, les autres lments sont restitus au donneur. Le prlvement dure environ dheure. Il est possible de faire 20 dons par an avec un intervalle dau moins 2 semaines. Pour le donneur, les pertes reprsentent : 600 ml de plasma, 25 40 ml de globules rouges 45 g de protines. La rcupration volmique est de 40 80 ml/heure.

VII. LE DON DE PLAQUETTES DAPHERESE Ce don ncessite lutilisation dun sparateur. Au cours du prlvement, le sang est spar en ses diffrents lments. Les plaquettes sont recueillies dans une poche, les autres lments sont restitus au donneur. Le prlvement dure environ 1 heure. Il est possible de faire jusqu 5 dons par an avec un intervalle dau moins 8 semaines. Contient de 2 8 x10 11 plaquettes dans 200 650 cc de plasma Pour le donneur, les pertes reprsentent : 40 50 ml de globules rouges 20 40 % des plaquettes moins de 45 g de protines 10 12 % du taux initial de calcium.

VIII. LE DON DE GLOBULES BLANCS DAPHERESE Ce don ncessite un sparateur. Les globules blancs sont recueillis dans une poche, les autres lments sont restitus au donneur. Ce don est trs limit car extrmement contraignant. Il dure environ 2h30.

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IX. LE DON AUTOLOGUE Il sagit de prlever du sang un donneur afin de transfuser ce mme donneur son propre sang. Ce don ne peut se pratiquer, gnralement, que pour une intervention chirurgicale prvue une date prcise. Il faut alors dterminer la quantit de sang ncessaire. Ce prlvemen t doit tre dbut dans un dlai qui tient compte de la dure de conservation des globules rouges.

X. LESPRODUITS SANGUINS LABILES :

A- LES CGR 1 - Issu d'un seul donneur : soit sang total ou par rythrocytaphrse 2 - Volume : . 140 cc de GR (Unit Adulte) . < 140 cc de GR (Unit Enfant) . + 80 100 cc SAGM 3 - Caractristiques : 40 g Hb (UA) et Ht 50 - 70 % Leucocytes rsiduels < 1,0 x 106 B- CONCENTRE DE PLAQUETTES ISSUES D'APHERESE (CPA) Prlev sur 1 seul donneur par cytaphrse Contient de 2 8 x10 plaquettes dans 200 650 cc de plasma Intrt : mono donneur Diminution du risque viral Diminution des immunisations HLA Diminution des allo-immunisations ? C- MELANGE DE CONCENTRES DE PLAQUETTE STANDARD (M-CPS) Obtenus par centrifugation dune unit de sang totale = CPS Contenu en plaquettes dun CPS : = 0,5.10 dans 40 60 ml de plasma Conservation entre 20 et 24C en agitation continue La dure de conservation est au maximum 5 jours Posologie = 0.5 1 unit par 10 Kg de poids. D- LE PLASMA FRAIS CONGEL

1- PFC scuris issu d'aphrse

. Scurisation 120 jours . Mono donneur . 200, 400 ou 600 ml

2- Prparation et prsentation du plasma frais congel viro-attnu par solvant dtergent dleucocyt (PVA-SD)

Le PVA-SD est prpar en France partir dun pool de plasma de 100 donneurs maximum. Il sagit de pools de plasma daphrse de mme groupe sanguin congel dans les 6 heures suivant le prlvement. Linactivation des agents pathognes est ralise aprs conglation-dconglation (qui dtruit les cellules) en utilisant un solvant (tri n-butyl phosphate : TnBP) et un dtergent (Triton X100). Llimination des inactivateurs sopre par lhuile de ricin et chromatographie. Aprs filtration strilisante, le plasma, produit acellulaire et strile, est rparti aseptiquement en units de 200cc Virus

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3- Prsentation du plasma frais congel viro-attnu par bleu de mthylne (PVA-BM) Le plasma frais congel dleucocyt viro-attnu par bleu de mthylne (PVA-BM) est prpar partir dun plasma unitaire issu daphrse puis trait laide dune mthode autorise par lAFSSaPS. Le plasma, pralablement dleucocyt pour liminer les cellules rsiduelles, est mis en contact avec le bleu de mthylne puis soumis une illumination en lumire visible. Le BM rsiduel est ensuite limin par une filtration spcifique. Le PVA-BM est congel dans les 12 heures qui suivent la fin du prlvement.

Principe du traitement pour viro-attnuation par le bleu demthylne (BM) Le BM prsente une affinit pour les acides nucliques. Aprs absorption de lnergie lumineuse, il existe une production de formes actives doxygne qui dnaturent les acides nucliques bloquant la rplication des virus. Le traitement dattnuation virale par BM permet dinactiver les virus envelopps et certains virus non envelopps selon les rsultats prsents ci-dessous.

4- PLASMA FRAIS CONGELE DELEUCOCYTE VIRO -ATTENUE PAR AMOTOSALEN Caractristiques: Volume: 200 300 ml Prparation: unitaire, sur un don daphrse Conglation 30C ou < le plus rapidement possible et dans les 18 heures. Aprs dconglation: Amotosalen rsiduel < ou = 2M Validit: 1 an E- LES PSL D'AUTOTRANSFUSION

- CGR . Non dleucocyt en gnral . Volume variabl