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S42 Nutrition clinique et métabolisme 21 (2007) S31–S46 contenant 1þ% de pyrogallol (antioxydant) et saponifié par 200þμl d’une solution de KOH (3,6þM) dans un sonicateur (Branson 2210), 30þmin à 65°C et sous atmosphère d’azote. Les échantillons sont alors tamponnés par 500þμl de NaH2PO4 (0,2þM, pH 7,8) et une double extraction à l’hexane est réalisée. La séparation et la quanti- fication des vitamines sont réalisées par chromatographie liquide haute performance en phase inverse (colonne DiscoveryTM C8, 25þcm x 4,6þmm, 5þμm) (avec une phase mobile méthanol-acétoni- trile-eau 75/15/10, v/v) et une détection spectrophotométrique à deux longueurs d’onde (292 et 325þnm). La linéarité, la répétabilité (n =þ10) et la reproductibilité (n =þ20 en 4 séries) ont été déterminées et leurs coefficients de variation (CV) ont été calculés. Résultats. – Les temps de rétention des vitamines A et E sont res- pectivement de 5,7 et 14,1 min. Les paramètres de validation sont les suivantsþ: Conclusions. – Cette procédure validée est bien adaptée en ter- mes de sensibilité. Elle est simple à réaliser, peu coûteuse et appli- cable en routine. O022 Influence des micronutriments sur les phénomènes de peroxy- dation lipidique dans les solutés ternaires de nutrition paren- térale utilisés en néonatologie A.þGrand a , A.þJalabert a , J.þSteghens b , G.þMercier c , M.þFlorent d , S.þHansel-Esteller a , J.þPicaud e a Pharmacie, CHU Montpellier, Montpellier, France b Biochimie, CHU Lyon, Lyon, France c DIM, CHU, Montpellier, France d Fasonut, Fasonut Montpellier, France e Néo-natalogie, CHU Montpellier, Montpellier, France Introduction et but de l’étude. – Certains micronutriments utiles chez le nouveau-né prématuré, tels que les vitamines, les oligo-élé- ments (OE) et le fer peuvent influencer la survenue des phénomènes de peroxydation lipidique. Les phénomènes de peroxydation lipidi- que peuvent être quantifiés par le dosage du malonedialdéhyde (MDA). L’objectif de l’étude est d’évaluer l’influence des micronu- triments et de la lumière sur les phénomènes de peroxydation lipidi- que dans les solutés ternaires de nutrition parentérale utilisés chez le nouveau-né. Matériel et méthodes. – Nous avons mesuré le MDA dans des mélanges ternaires, correspondant aux besoins d’un nouveau-né prématuré de 1,5þkg, contenant ou non des vitamines, des OE et du fer, à Ho et après 24þheures d’exposition ou de protection de la lumière. Le dosage du MDA a été réalisé par une méthode couplant la chromatographie liquide haute performance à la détection Ultra- Violet. Résultats. – En situation d’exposition à la lumière, les mélanges supplémentés en micronutriments contiennent significativement plus de MDA à H24 (2þ020þnmol/l pour les poches avec vitamines, 1þ987þnmol/l pour celles avec OE, 4þ300þnmol/l pour celles avec fer), que les mélanges non supplémentés, (1þ238þnmol/l pour les poches sans vitamines, 1þ190þnmol/l pour celles sans OE, 1þ128þnmol/l pour celles sans fer) (p<0,001). Il existe une augmen- tation significative des concentrations de MDA entre H0 et H24 dans tous les groupes (supplémentés ou non) (p<0,05). Cependant, cette augmentation des concentrations de MDA est significative- ment plus importante pour les mélanges supplémentés (p<0,05) quel que soit le type de supplémentation (vitamines, OE). En situation de protection de la lumière, seuls les mélanges comprenant des vitamines et ceux comprenant du fer contiennent significativement plus de MDA à H24 (1þ754þnmol/l pour les poches avec vitamines, 2þ414þnmol/l pour celles avec fer), que ceux n’en contenant pas (1þ114þnmol/l pour les poches sans vitamines, 1þ209þnmol/l pour celles sans fer) (p<0,05). Il existe une augmenta- tion significative des concentrations de MDA entre H0 et H24 dans tous les groupes (supplémentés ou non) (p<0,05). Cependant, cette augmentation des concentrations de MDA est significativement plus importante pour les mélanges supplémentés en fer par rapport à ceux n’en contenant pas (p<0,05), alors que l’évolution des concentrations de MDA ne diffère pas entre les mélanges supplé- mentés ou non en vitamines ou OE. Conclusions. – Les données de notre étude suggèrent que la pro- tection contre la lumière des mélanges supplémentés en vitamines et OE permet d’obtenir des concentrations de MDA similaires à celles des mélanges non supplémentés. Par contre, la supplémentation en fer génère des phénomènes de peroxydation importants malgré la protection des mélanges vis-à-vis de la lumière. Il est donc possible d’utiliser des solutés ternaires avec vitamines et oligo-éléments chez le nouveau-né, à condition qu’ils soient protégés de la lumière. O023 Étude des émulsions lipidiques des mélanges ternaires de nutrition parentérale par résonance magnétique nucléaire G.þHenneré a , J.þPaul b , F.þBrion c , P.þProgron a , L.þLe Moyec d a Laboratoire de Chimie Analytique EA 4041, Chatenay-Malabry, France b Service de Biochimie Cardiovasculaire Hôpital Européen Geor- ges Pompidou (AP-HP),Paris, France c Service de Pharmacie, Hôpital Robert Debré (AP-HP), Paris, France d Laboratoire BioMoCeTi UMR 7033, Faculté de Médecine Paris 13, Bobigny, France Introduction et but de l’étude. – Les mélanges ternaires pour nutrition parentérale sont composés de glucose, acides aminés et lipides supplémentés par des électrolytes, vitamines et oligoélé- ments. De nombreuses interactions physico-chimiques s’établissent entre les constituants du mélange, affectant la stabilité de l’émulsion lipidique. Les méthodes d’étude classiques de la stabilité ne permet- tent pas de comprendre les mécanismes des interactions à l’échelle moléculaire. La Résonance Magnétique Nucléaire (RMN) est une technique utilisée pour l’étude des interactions membranes biologi- ques-électrolytes. Elle permet d’accéder à la composition et à l’organisation des lipides présents dans les échantillons. L’objectif Tableau 1 þ Vit A Vit A Vit E Vit E Linéarité minþ: 0,2þμM maxþ: 10,0þμM minþ: 3,0þμM maxþ: 84,4þμM Répétabilité 4,7 ±þ0,2þμM CVþ: 4,0þ% 30,6 ±þ1,5þμM CVþ: 4,9þ% Reproductibilité 5,2 ±þ0,3þμM CVþ: 4,7þ% 27,2 ±þ1,4þμM CVþ: 5,0þ% 05_Communications_orales.fm Page 42 Mardi, 13. novembre 2007 1:15 13

O022 Influence des micronutriments sur les phénomènes de peroxydation lipidique dans les solutés ternaires de nutrition parentérale utilisés en néonatologie

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Page 1: O022 Influence des micronutriments sur les phénomènes de peroxydation lipidique dans les solutés ternaires de nutrition parentérale utilisés en néonatologie

S42 Nutrition clinique et métabolisme 21 (2007) S31–S46

contenant 1þ% de pyrogallol (antioxydant) et saponifié par 200þμld’une solution de KOH (3,6þM) dans un sonicateur (Branson 2210),30þmin à 65°C et sous atmosphère d’azote. Les échantillons sontalors tamponnés par 500þμl de NaH2PO4 (0,2þM, pH 7,8) et unedouble extraction à l’hexane est réalisée. La séparation et la quanti-fication des vitamines sont réalisées par chromatographie liquidehaute performance en phase inverse (colonne DiscoveryTM C8,25þcm x 4,6þmm, 5þμm) (avec une phase mobile méthanol-acétoni-trile-eau 75/15/10, v/v) et une détection spectrophotométrique àdeux longueurs d’onde (292 et 325þnm). La linéarité, la répétabilité(n =þ10) et la reproductibilité (n =þ20 en 4 séries) ont été déterminéeset leurs coefficients de variation (CV) ont été calculés.

Résultats. – Les temps de rétention des vitamines A et E sont res-pectivement de 5,7 et 14,1 min.

Les paramètres de validation sont les suivantsþ:

Conclusions. – Cette procédure validée est bien adaptée en ter-mes de sensibilité. Elle est simple à réaliser, peu coûteuse et appli-cable en routine.

O022Influence des micronutriments sur les phénomènes de peroxy-dation lipidique dans les solutés ternaires de nutrition paren-térale utilisés en néonatologieA.þGranda, A.þJalaberta, J.þSteghensb, G.þMercierc, M.þFlorentd,S.þHansel-Estellera, J.þPicaude

aPharmacie, CHU Montpellier, Montpellier, FrancebBiochimie, CHU Lyon, Lyon, FrancecDIM, CHU, Montpellier, FrancedFasonut, Fasonut Montpellier, FranceeNéo-natalogie, CHU Montpellier, Montpellier, France

Introduction et but de l’étude. – Certains micronutriments utileschez le nouveau-né prématuré, tels que les vitamines, les oligo-élé-ments (OE) et le fer peuvent influencer la survenue des phénomènesde peroxydation lipidique. Les phénomènes de peroxydation lipidi-que peuvent être quantifiés par le dosage du malonedialdéhyde(MDA). L’objectif de l’étude est d’évaluer l’influence des micronu-triments et de la lumière sur les phénomènes de peroxydation lipidi-que dans les solutés ternaires de nutrition parentérale utilisés chez lenouveau-né.

Matériel et méthodes. – Nous avons mesuré le MDA dans desmélanges ternaires, correspondant aux besoins d’un nouveau-néprématuré de 1,5þkg, contenant ou non des vitamines, des OE et dufer, à Ho et après 24þheures d’exposition ou de protection de lalumière. Le dosage du MDA a été réalisé par une méthode couplantla chromatographie liquide haute performance à la détection Ultra-Violet.

Résultats. – En situation d’exposition à la lumière, les mélangessupplémentés en micronutriments contiennent significativementplus de MDA à H24 (2þ020þnmol/l pour les poches avec vitamines,1þ987þnmol/l pour celles avec OE, 4þ300þnmol/l pour celles avecfer), que les mélanges non supplémentés, (1þ238þnmol/l pour lespoches sans vitamines, 1þ190þnmol/l pour celles sans OE,1þ128þnmol/l pour celles sans fer) (p<0,001). Il existe une augmen-tation significative des concentrations de MDA entre H0 et H24dans tous les groupes (supplémentés ou non) (p<0,05). Cependant,cette augmentation des concentrations de MDA est significative-ment plus importante pour les mélanges supplémentés (p<0,05) quelque soit le type de supplémentation (vitamines, OE).

En situation de protection de la lumière, seuls les mélangescomprenant des vitamines et ceux comprenant du fer contiennentsignificativement plus de MDA à H24 (1þ754þnmol/l pour lespoches avec vitamines, 2þ414þnmol/l pour celles avec fer), que ceuxn’en contenant pas (1þ114þnmol/l pour les poches sans vitamines,1þ209þnmol/l pour celles sans fer) (p<0,05). Il existe une augmenta-tion significative des concentrations de MDA entre H0 et H24 danstous les groupes (supplémentés ou non) (p<0,05). Cependant, cetteaugmentation des concentrations de MDA est significativementplus importante pour les mélanges supplémentés en fer par rapportà ceux n’en contenant pas (p<0,05), alors que l’évolution desconcentrations de MDA ne diffère pas entre les mélanges supplé-mentés ou non en vitamines ou OE.

Conclusions. – Les données de notre étude suggèrent que la pro-tection contre la lumière des mélanges supplémentés en vitamines etOE permet d’obtenir des concentrations de MDA similaires à cellesdes mélanges non supplémentés. Par contre, la supplémentation enfer génère des phénomènes de peroxydation importants malgré laprotection des mélanges vis-à-vis de la lumière. Il est donc possibled’utiliser des solutés ternaires avec vitamines et oligo-élémentschez le nouveau-né, à condition qu’ils soient protégés de la lumière.

O023Étude des émulsions lipidiques des mélanges ternaires denutrition parentérale par résonance magnétique nucléaireG.þHenneréa, J.þPaulb, F.þBrionc, P.þProgrona, L.þLe Moyecd

aLaboratoire de Chimie Analytique EA 4041, Chatenay-Malabry,FrancebService de Biochimie Cardiovasculaire Hôpital Européen Geor-

ges Pompidou (AP-HP),Paris, FrancecService de Pharmacie, Hôpital Robert Debré (AP-HP), Paris,

FrancedLaboratoire BioMoCeTi UMR 7033, Faculté de Médecine Paris

13, Bobigny, France

Introduction et but de l’étude. – Les mélanges ternaires pournutrition parentérale sont composés de glucose, acides aminés etlipides supplémentés par des électrolytes, vitamines et oligoélé-ments. De nombreuses interactions physico-chimiques s’établissententre les constituants du mélange, affectant la stabilité de l’émulsionlipidique. Les méthodes d’étude classiques de la stabilité ne permet-tent pas de comprendre les mécanismes des interactions à l’échellemoléculaire. La Résonance Magnétique Nucléaire (RMN) est unetechnique utilisée pour l’étude des interactions membranes biologi-ques-électrolytes. Elle permet d’accéder à la composition et àl’organisation des lipides présents dans les échantillons. L’objectif

Tableau 1

þ Vit A Vit A Vit E Vit E

Linéarité minþ: 0,2þμM maxþ: 10,0þμM minþ: 3,0þμM maxþ: 84,4þμM

Répétabilité 4,7 ±þ0,2þμM CVþ: 4,0þ% 30,6 ±þ1,5þμM CVþ: 4,9þ%

Reproductibilité 5,2 ±þ0,3þμM CVþ: 4,7þ% 27,2 ±þ1,4þμM CVþ: 5,0þ%

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