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Abstracts / Nutrition clinique et métabolisme 25 (2011) S21–S52 / Cahiers de nutrition et de diététique 46 (2011) S21–S52 S25 Concernant la prise en charge nutritionnelle, un enrichissement de l’alimentation et/ou des CON étaient prescrits chez un enfant sur deux. Une nutrition entérale par gastrostomie était indiquée dans 22 % des cas. Conclusion. Les troubles nutritionnels et digestifs sont fré- quents chez les enfants ayant un SSR. Leur recherche doit donc être systématique afin d’optimiser la prise en charge et notamment l’état nutritionnel des enfants avant mise en route d’un traitement par GH. O09 Analyse du protéome duodénal après apport entéral de leucine chez l’homme : diminution de l’expression d’enzymes impliquées dans la bêta-oxydation des acides gras Goichon A* 1 , Chan P 2 , Lecleire S 1 , Vaudry D 2 , Coquard A 3 , Cailleux A-F 4 , Déchelotte P 1 , Coëffier M 1 1 ADEN EA 4311, IFRMP23, Faculté de Médecine-Pharmacie, Rouen, 2 Plateforme de Protéomique et Inserm U982, Faculté des Sciences, Mont-Saint-Aignan, 3 Département de Pharmacie, CHU de Rouen, 4 CIC 0204, Inserm, CHU, IFRMP 23, Rouen, France Introduction et but de l’étude. Selon des données récentes, une supplémentation en leucine d’une solution de maltodextrines dimi- nue l’activité du protéasome et modifie la prolifération cellulaire au niveau duodénal chez le volontaire sain. Néanmoins, ses effets plus spécifiques sur le protéome intestinal humain ne sont pas connus. Le but de cette étude a donc été d’évaluer les effets d’une supplémen- tation en leucine sur l’expression des protéines duodénales par une approche protéomique. Matériel et Méthodes. Ce protocole a reçu un avis favorable du CPP local. Cinq volontaires sains ont reçu pendant 5 heures lors de 2 épreuves séparées d’au moins 2 semaines et réalisées dans un ordre aléatoire soit une perfusion entérale d’une solution de malto- dextrines (0,25 g.kg -1 .h -1 , groupe contrôle) soit de maltodextrines supplémentées en leucine (0,035 g.kg -1 .h -1 , groupe leucine). Des biopsies duodénales ont été prélevées par endoscopie en fin de per- fusion et immédiatement congelées dans l’azote liquide. Les pro- téines solubles extraites des biopsies ont été séparées par électrophorèse bidimensionnelle, puis révélées par coloration au nitrate d’argent. Les cartes protéomiques ont été comparées à l’aide du logiciel ImageMaster TM 2D Platinum v5. En prenant en compte un ratio d’expression R minimum de 1,5 et le test t de Student (p 0,05), l’analyse d’images a permis de déterminer les polypeptides dont l’expression était significativement modulée. Après excision et digestion automatisée des spots d’intérêt, les protéines ont été iden- tifiées à l’aide d’une chaîne nanoLC-ESI-Trap. Les résultats ont été confirmés par Western blot. Résultats. Après analyse protéomique comparative, 11 spots protéiques étaient significativement modulés par l’apport entéral de leucine versus groupe contrôle, dont 7 spots sous-exprimés et 4 sur- exprimés. 36 % des protéines identifiées étaient d’origine mito- chondriale. Parmi celles impliquées dans le métabolisme des lipides, les expressions des protéines HADHA (Trifunctional enzyme subunit alpha, R = 1,63), VLCAD (Very long chain acyl- CoA dehydrogenase, R = 1,76), CPT2 (carnitine O-palmitoyltrans- férase 2, R = 1,75) étaient significativement diminuées en réponse à la leucine (p 0,05). À l’inverse, l’expression de la protéine cytoso- lique FABP1 (Fatty acid-binding protein 1, R = 1,88) était signifi- cativement augmentée (p 0,05). Par ailleurs, les expressions des protéines DAK (dihydroxyacétone kinase, R = 1,51) et OTC (orni- thine carbamoyltranférase, R = 1,52), respectivement impliquées dans le métabolisme du glycérol et la biosynthèse de la citrulline, étaient significativement diminuées en réponse à la leucine (p 0,05). Conclusion. Une supplémentation en leucine d’une solution de maltodextrines module le protéome duodénal humain en agissant notamment sur l’expression d’enzymes impliquées dans le métabo- lisme des lipides. Ces résultats laissent suggérer un ralentissement du processus de – oxydation des acides gras compatible avec un effet cétogène de la leucine. Ce projet a été soutenu par l’ANR (ANR-07-PNRA-020), la Nutricia Research Foundation et l’Institut Benjamin-Delessert. O10 Effets de la prise orale d’acides biliaires sur le métabolisme lipidique chez des sujets ayant un grêle court sous nutrition parentérale au long cours Chambrier C* 1 , Drai J 1 , Sassolas A 1 , Mandy B 1 , Touré A 1 , Lauverjat M 1 , Gelas P 1 , Beylot M 2 1 Hospices civils de Lyon, 2 ERI22-UCLB-EA4173, Lyon, France Introduction et but de l’étude. Les patients ayant un grêle court ont une synthèse de cholestérol et une lipogenèse hépatique aug- mentées. Ces anomalies pourraient être dues à la diminution du pool d’acides biliaires, celle-ci stimule la transcription de CYP7A1, la synthèse d’acides biliaires et en amont celle de cholestérol. Elle lève l’inhibition de FXR sur LXR et augmente l’expression de SREBP1c, stimulant la lipogenèse. La restauration du pool d’acides biliaires par l’administration d’acides biliaires pourrait réduire les synthèses lipidiques chez ces patients. Matériel et Méthodes. Chez 5 patients ayant un grêle court (40 cm, 10-100) sous nutrition parentérale avec un bilan hépatique et une triglycéridémie normaux, ont été mesurés dans le plasma avant et après 4 mois d’apport oral de 20 mg/kg/jour d’acide ursode- soxycholique (AUDC) en 2 prises (accord CPP et patients) : méta- bolites (glycémie, cholestérol total, libre et estérifié, triglycérides), acides biliaires et 7OHCholestérol, enzymes hépatiques, hormones (insuline, glucagon), synthèse fractionnaire (FSR) des triglycérides et du cholestérol mesurées par méthode isotopique : ingestion orale de 2 fois 3 mL/kg d’eau corporelle d’eau deutérée à 2 heures d’intervalle). Résultats = med (min-max), test Wilcoxon pour comparaison entre les 2 périodes. Résultats. Âge : 56 ans (23-70), poids : 59 kg (32-93), IMC : 19,4 (17,6-22,2), poches de NP/semaine : 3 (2-6), durée NP : 48 mois (60-224). Anthropométrie, NP, métabolites et hormones comparables entre les deux périodes. Conclusion. Chez les patients ayant un grêle court, l’apport oral en AUDC diminue la synthèse hépatique des triglycérides et Cholestérol mM FSR cholestérol % Triglycérides mM FSR lipogénèse % Ac bilaires totaux mM Contrôle 2,5 (1,4-4,8) 31,5 (25,0-37,9) 1,3 (1,1-2,2) 11,1 (7,8-22,3) 1,6 (0,2-11,5) AUDC 2,8 (1,6-4,7) 25,7 (19,9-32,0)* 1,4 (1,2-1,8) 5,9 (4,5-17,1)* 2,3 (0,2-11,4) * p < 0,05

O10 Effets de la prise orale d’acides biliaires sur le métabolisme lipidique chez des sujets ayant un grêle court sous nutrition parentérale au long cours

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Abstracts / Nutrition clinique et métabolisme 25 (2011) S21–S52 / Cahiers de nutrition et de diététique 46 (2011) S21–S52 S25

Concernant la prise en charge nutritionnelle, un enrichissement de

l’alimentation et/ou des CON étaient prescrits chez un enfant sur

deux. Une nutrition entérale par gastrostomie était indiquée dans

22 % des cas.

Conclusion. – Les troubles nutritionnels et digestifs sont fré-

quents chez les enfants ayant un SSR. Leur recherche doit donc être

systématique afin d’optimiser la prise en charge et notamment l’état

nutritionnel des enfants avant mise en route d’un traitement par GH.

O09Analyse du protéome duodénal après apport entéral de leucine chez l’homme : diminution de l’expressiond’enzymes impliquées dans la bêta-oxydation des acides grasGoichon A*1, Chan P 2, Lecleire S 1, Vaudry D 2, Coquard A 3,

Cailleux A-F4, Déchelotte P 1, Coëffier M1

1ADEN EA 4311, IFRMP23, Faculté de Médecine-Pharmacie,Rouen,

2Plateforme de Protéomique et Inserm U982, Faculté des Sciences,Mont-Saint-Aignan,

3Département de Pharmacie, CHU de Rouen,4CIC 0204, Inserm, CHU, IFRMP 23, Rouen, France

Introduction et but de l’étude. – Selon des données récentes, une

supplémentation en leucine d’une solution de maltodextrines dimi-

nue l’activité du protéasome et modifie la prolifération cellulaire au

niveau duodénal chez le volontaire sain. Néanmoins, ses effets plus

spécifiques sur le protéome intestinal humain ne sont pas connus. Le

but de cette étude a donc été d’évaluer les effets d’une supplémen-

tation en leucine sur l’expression des protéines duodénales par une

approche protéomique.

Matériel et Méthodes. – Ce protocole a reçu un avis favorable du

CPP local. Cinq volontaires sains ont reçu pendant 5 heures lors de

2 épreuves séparées d’au moins 2 semaines et réalisées dans un

ordre aléatoire soit une perfusion entérale d’une solution de malto-

dextrines (0,25 g.kg-1.h-1, groupe contrôle) soit de maltodextrines

supplémentées en leucine (0,035 g.kg-1.h-1, groupe leucine). Des

biopsies duodénales ont été prélevées par endoscopie en fin de per-

fusion et immédiatement congelées dans l’azote liquide. Les pro-

téines solubles extraites des biopsies ont été séparées par

électrophorèse bidimensionnelle, puis révélées par coloration au

nitrate d’argent. Les cartes protéomiques ont été comparées à l’aide

du logiciel ImageMasterTM 2D Platinum v5. En prenant en compte

un ratio d’expression R minimum de 1,5 et le test t de Student

(p 0,05), l’analyse d’images a permis de déterminer les polypeptides

dont l’expression était significativement modulée. Après excision et

digestion automatisée des spots d’intérêt, les protéines ont été iden-

tifiées à l’aide d’une chaîne nanoLC-ESI-Trap. Les résultats ont été

confirmés par Western blot.

Résultats. – Après analyse protéomique comparative, 11 spots

protéiques étaient significativement modulés par l’apport entéral de

leucine versus groupe contrôle, dont 7 spots sous-exprimés et 4 sur-

exprimés. 36 % des protéines identifiées étaient d’origine mito-

chondriale. Parmi celles impliquées dans le métabolisme des

lipides, les expressions des protéines HADHA (Trifunctional

enzyme subunit alpha, R = 1,63), VLCAD (Very long chain acyl-

CoA dehydrogenase, R = 1,76), CPT2 (carnitine O-palmitoyltrans-

férase 2, R = 1,75) étaient significativement diminuées en réponse à

la leucine (p 0,05). À l’inverse, l’expression de la protéine cytoso-

lique FABP1 (Fatty acid-binding protein 1, R = 1,88) était signifi-

cativement augmentée (p 0,05). Par ailleurs, les expressions des

protéines DAK (dihydroxyacétone kinase, R = 1,51) et OTC (orni-

thine carbamoyltranférase, R = 1,52), respectivement impliquées

dans le métabolisme du glycérol et la biosynthèse de la citrulline,

étaient significativement diminuées en réponse à la leucine (p 0,05).

Conclusion. – Une supplémentation en leucine d’une solution de

maltodextrines module le protéome duodénal humain en agissant

notamment sur l’expression d’enzymes impliquées dans le métabo-

lisme des lipides. Ces résultats laissent suggérer un ralentissement

du processus de – oxydation des acides gras compatible avec un

effet cétogène de la leucine.

Ce projet a été soutenu par l’ANR (ANR-07-PNRA-020), la

Nutricia Research Foundation et l’Institut Benjamin-Delessert.

O10Effets de la prise orale d’acides biliaires sur le métabolismelipidique chez des sujets ayant un grêle court sous nutritionparentérale au long coursChambrier C*1, Drai J1, Sassolas A1, Mandy B1, Touré A1,

Lauverjat M1, Gelas P 1, Beylot M2

1Hospices civils de Lyon,2ERI22-UCLB-EA4173, Lyon, France

Introduction et but de l’étude. – Les patients ayant un grêle court

ont une synthèse de cholestérol et une lipogenèse hépatique aug-

mentées. Ces anomalies pourraient être dues à la diminution du pool

d’acides biliaires, celle-ci stimule la transcription de CYP7A1, la

synthèse d’acides biliaires et en amont celle de cholestérol. Elle lève

l’inhibition de FXR sur LXR et augmente l’expression de

SREBP1c, stimulant la lipogenèse. La restauration du pool d’acides

biliaires par l’administration d’acides biliaires pourrait réduire les

synthèses lipidiques chez ces patients.

Matériel et Méthodes. – Chez 5 patients ayant un grêle court

(40 cm, 10-100) sous nutrition parentérale avec un bilan hépatique

et une triglycéridémie normaux, ont été mesurés dans le plasma

avant et après 4 mois d’apport oral de 20 mg/kg/jour d’acide ursode-

soxycholique (AUDC) en 2 prises (accord CPP et patients) : méta-

bolites (glycémie, cholestérol total, libre et estérifié, triglycérides),

acides biliaires et 7OHCholestérol, enzymes hépatiques, hormones

(insuline, glucagon), synthèse fractionnaire (FSR) des triglycérides

et du cholestérol mesurées par méthode isotopique : ingestion orale

de 2 fois 3 mL/kg d’eau corporelle d’eau deutérée à 2 heures

d’intervalle). Résultats = med (min-max), test Wilcoxon pour

comparaison entre les 2 périodes.

Résultats. – Âge : 56 ans (23-70), poids : 59 kg (32-93), IMC :

19,4 (17,6-22,2), poches de NP/semaine : 3 (2-6), durée NP :

48 mois (60-224). Anthropométrie, NP, métabolites et hormones

comparables entre les deux périodes.

Conclusion. – Chez les patients ayant un grêle court, l’apport

oral en AUDC diminue la synthèse hépatique des triglycérides et

Cholestérol mM

FSR cholestérol %

TriglycéridesmM

FSRlipogénèse %

Ac bilaires totaux mM

Contrôle 2,5 (1,4-4,8)

31,5 (25,0-37,9)

1,3 (1,1-2,2)

11,1(7,8-22,3)

1,6 (0,2-11,5)

AUDC 2,8 (1,6-4,7)

25,7(19,9-32,0)*

1,4 (1,2-1,8) 5,9 (4,5-17,1)*

2,3 (0,2-11,4)

* p < 0,05

S26 Nutrition clinique et métabolisme 25 (2011) S20–S52 / Cahiers de nutrition et de diététique 46 2011(2011) S20–S52

celle du cholestérol suggérant que les anomalies initialement obser-

vées étaient bien secondaires à la réduction du pool d’acides

biliaires.

O11Augmentation de la sécrétion à jeun et postprandiale des enté-ropeptides GLP-2, GLP-1 et PYY chez des patients avec syn-drome de grêle court avec colon en continuité comparés à dessujets contrôles.Gillard L1, 2, 3, Benkouhi A2, Gandhour F 1, Larroque B4, Rousset M2,

Lacorte J-M2, 3, Le Beyec J 2, 3, Joly F*1

1Gastroentérologie, MICI et Assistance nutritive, hôpital Beaujon,PMAD, université Paris-VII, Clichy,

2UMRS872, centre de recherche des Cordeliers,3Service de Biochimie endocrinienne et oncologique, CHU Pitié-

Salpêtrière, Paris,4Unité d’Épidémiologie et de Recherche clinique, hôpital Beaujon,

université Paris-VII, Clichy, France

Introduction et but de l’étude. – Le syndrome du grêle court

(SGC) résulte d’une résection étendue de l’intestin grêle et se carac-

térise par une insuffisance intestinale chronique dont le traitement

est la nutrition parentérale (NP). L’expérience clinique montre le

rôle déterminant de l’iléon terminal et du colon restant dans l’adap-

tation intestinale du SGC avec, jusqu’au 24e mois post-opératoire,

une amélioration de l’absorption intestinale et une hyperphagie

compensatrice, de degré variable selon les patients. Peu de données

sont disponibles sur le profil de sécrétion hormonal intestinal chez

les patients avec SGC, et ceci même pour le GLP-2, dont l’usage

thérapeutique fait l’objet d’essais cliniques. L’objectif de cette

étude a été de déterminer si la sécrétion de peptides gastro-intesti-

naux, impliqués dans l’absorption, dans l’adaptation intestinale, et

dans la prise alimentaire est modifiée à jeun ou en réponse à un repas

test chez les sujets SGC par rapport à des sujets sains.

Matériel et Méthodes. – Le GLP-2, le GLP-1, le PYY et la grhé-

line ont été dosés à jeun et au cours d’une cinétique post-prandiale

(à 30, 60, 90,120, 180 minutes après un repas standardisé de

725 kcal) chez 9 patients SGC avec colon en continuité et 5 sujets

contrôles. La réponse postprandiale de sécrétion de ces peptides a

été évaluée par le calcul des aires sous la courbe (ASC). La compa-

raison des moyennes des concentrations à jeun et des moyennes des

ASC entre patients SGC et contrôles a été réalisée par des tests de

Mann et Whitney. Une corrélation entre les concentrations à jeun de

GLP-1, de PYY, de ghréline et les ingesta a été recherchée (Test de

Spearman).

Résultats. – Les patients SGC avaient des concentrations

moyennes de GLP-2 (4,0 +/ – 2,0 ng/ml) et de GLP-1 (3,55 +/–

1,74 pM) à jeûn (et aux différents temps de la cinétique postpran-

diale) supérieures à celles des contrôles (GLP-2 = 1,4 +/– 0,5 ng/ml

et GLP-1 = 1,55 +/– 0,1 pM à jeun) (p < 0,05), sans différence de la

réponse postprandiale. Les concentrations moyennes de PYY à jeun

et à tous les temps de la cinétique étaient significativement augmen-

tées chez les patients SCG (261,8 +/– 113,30 pg/ml à jeun) compa-

rés aux contrôles (61,4 +/– 12,7 pg/ml à jeun) (p < 0,01). Les

patients SGC avaient une réponse postprandiale de la sécrétion de

PYY (18 593 +/– 10 701 [pg/ml × min]) supérieure aux contrôles

(4 475 +/– 2 714 [pg/ml × min]) (p < 0,01). La ghréline n’était pas

modifiée chez les patients et aucune corrélation n’a été mise en évi-

dence entre les ingesta des patients et les concentrations des diffé-

rents peptides.

Conclusion. – La sécrétion à jeun et postprandiale des enté-

ropeptides GLP-2, GLP-1 et PYY est augmentée chez des patients

avec syndrome de grêle court avec colon en continuité comparés à

des sujets contrôles, suggérant une augmentation du nombre et/ou

de la fonction des cellules entéroendocrines coliques dans le syn-

drome du grêle court.

O12Un apport azoté stimule la synthèse protéique duodénale chez l’homme sain par un mécanisme indépendant de la voie mTORCoeffier M*1, Claeyssens S1, Bôle-Feysot C 1, Guérin C 1, Maurer B2,

Lecleire S3, Coquard A4, Lavoinne A2, Cailleux AF 5, Déchelotte P1

1Aden EA4311, IFRMP23, Faculté de Médecine Pharmacie,2Laboratoire de Biochimie médicale, CHU,3Unité d’Endoscopie digestive, CHU,4Département de Pharmacie, CHU,5CIC 0204, Inserm, CHU, Rouen, France

Introduction et but de l’étude. – Les données de la littérature

suggèrent qu’un apport azoté modifie le métabolisme protéique

intestinal mais la voie intracellulaire impliquée n’a pas été étudiée

chez l’homme. Le but de cette étude a donc été d’évaluer les effets

d’une supplémentation en protéines sur le métabolisme protéique

duodénal et les voies de signalisation impliquées.

Matériel et Méthodes. – Ce protocole a reçu un avis favorable du

CPP local. Douze volontaires sains ont reçu pendant cinq heures

lors de deux épreuves séparées d’au moins deux semaineset réali-

sées dans un ordre aléatoire soit une perfusion entérale d’une solu-

tion de maltodextrines (0,25 g.kg-1.h-1) soit de maltodextrines

supplémentées avec une poudre de protéines (PP, 22,4 mg

d’azote.kg-1.h-1). Une perfusion intraveineuse de 2H5-phenylalanine

et de 13C-leucine (9 μmol.kg-1.h-1 chacune) a été également réalisée.

Après cinq heures, des biopsies endoscopiques duodénales ont été

prélevées et immédiatement congelées. L’enrichissement en 2H5-

phenylalanine et 13C-leucine a été mesuré dans les protéines et le

pool intracellulaire d’acides aminés libres par GC-MS permettant le

calcul du taux de synthèse fractionnaire (FSR). Les activités du pro-

téasome, l’état de phosphorylation des protéines impliquées dans les

voies de signalisation ont été également mesurés par l’utilisation de

substrats fluorogéniques spécifiques, de macro-arrays ou par wes-

ternblot.

Résultats. – Le FSR était augmenté après PP (1,7 fois avec la2H5-phenylalanine, 1,6 fois avec la 13C-leucine, p < 0,01) alors que

l’activité totale du protéasome n’était pas modifiée. Une augmenta-

tion de l’activité peptidase du protéasome était cependant observée

(141 ± 15 vs 100 ± 5, p < 0,05). L’état de phosphorylation de mTOR

(S2448), de la p70S6 kinase (T389/T229/T421/S424) et du facteur

4EBP-1 (S65) n’était pas différent entre les deux épreuves. Au

contraire, la phosphorylation de la PI3-kinase (p85, Y458) était aug-

mentée (1,95, p < 0,05). L’insulinémie était augmentée après les

deux épreuves mais de façon plus marquée après PP (p < 0,05).

Conclusion. – La supplémentation d’une solution de maltodex-

trines avec une poudre de protéines stimule la synthèse protéique

duodénale chez l’homme par un mécanisme indépendant de la voie