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Revue NeuRologique 165 (2009) 53 - 64 61
d’inhibiteurs de protéases (Complete Mini Roche) a été ajouté
aux échantillons de plasma. La détection de l’Aβ40 et 42 a été
effectuée avec des kits ELISA commerciaux (BioSource).
Résultats : Nous avons observé une différence significative
entre les taux d’Aβ plasmatique chez des souris APPswe/
PS1dE9 de différents fonds génétiques. Par exemple, les taux
d’Aβ40 étaient respectivement de 988±75 et 591±37 pg/ml chez
les souris B6C3F1 et C57BL/6J. Cependant, les taux d’Aβ40 et
42 plasmatiques chez les souris n’étaient pas modifiés avec
l’âge ou l’évolution de la pathologie. Chez le microcèbe, aucune
différence significative des taux d’Aβ40 n’a pu être observée
entre les animaux jeunes et âgés (41.7±2.4 et 52.3±7.5 pg/ml).
Cependant, une plus grande hétérogénéité était présente chez
les microcèbes âgés, ceci pouvant être un indicateur d’un
vieillissement pathologique de type Alzheimer chez certains
animaux.
Conclusion : La détection des taux d’Aβ plasmatique est un outil
simple et très précis chez la souris transgénique et le primate.
Cet outil peut permettre de suivre les effets de traitements. Il
pourra également permettre de sélectionner des animaux pour
l’étude du vieillissement pathologique chez le microcèbe.
remerciements : Association France-Alzheimer, National
Institute on Aging (R01-AG020197).
P1-17 la baisse du turnover du lCr est associée à une diminution des taux intra-ventriculaires d’aβ42
J.-M. Serot, J. Peltier, R. Fournier, N. Ledeme, A. Fichten, F. Bellarbre, O. Godefroy et J.-C. Maziere
CHU Amiens, Place Victor Pauchet, 80054 Amiens Cedex1, France
introduction : L’hydrocéphalie à pression normale (HPN) et la
maladie d’Alzheimer présentent une diminution du turnover
du LCR. Dans ces 2 affections, celui-ci est d’environ une fois
par jour, chez le témoin jeune il est de 6 fois/jour et chez le
sujet âgé de 3-4 fois/jour. Chez l’animal, la création d’une
hydrocéphalie est suivie de l’apparition de dépôts amyloïdes.
Les lésions de maladie d’Alzheimer sont fréquentes chez les
patients souffrant d’HPN. L’utilisation du PETscan avec le
composé B de Pittsburgh comme ligand confirme la présence
de dépôts amyloïdes chez la moitié des patients souffrant
d’HPN. Chez les sujets atteints de maladie d’Alzheimer, les
taux d’Aβ42 sont inversement proportionnels à la charge
amyloïde évaluée par PETscan.
Patients et méthodes : Nous avons dosé la protéine Aβ42 dans
le LCR intra-ventriculaire de 27 patients consécutifs âgés de
3 à 86 ans. Tous présentaient une hydrocéphalie chronique
nécessitant une ventriculostomie ou une dérivation ventri-
culo-péritonéale. Les diagnostics étaient les suivants : 6 HPN
idiopathiques, 6 sténoses de l’aqueduc de Sylvius, 3 séquelles
de méningite, d’hémorragie méningée ou de rupture de kyste
dermoïde, 2 tumeurs malignes, 6 tumeurs bénignes, 2 séquelles
de chirurgie, 1 hydrocéphalie congénitale et 1 malformation
d’Arnold Chiari. Nous avons utilisé une technique ELISA (test
Innotest beta amyloid(1-42) ; Innogenetics) ; les taux physiolo-
giques pour le LCR lombaire sont supérieurs à 500 pg/ml.
résultats : Chez les 6 patients souffrant d’HPN, un seul avait
des taux d’Aβ42 supérieurs à 500 pg/ml, 3 des taux situés
entre 200 et 300 pg/ml, et 2 des taux inférieurs à 200 pg/ml.
Pour les 21 autres patients, 3 avaient des taux supérieurs à
500 pg/ml, 2 situés entre 400 et 500 pg/ml, 4 entre 200 et 300,
et 12 inférieurs à 200 pg/ml. Les taux d’Aβ42 étaient inférieurs
à 300 pg/ml chez 10 des 11 patients de plus de 70 ans et chez
10 des 16 sujets de moins de 70 ans (p>0.05).
Conclusion : La baisse des taux intra-ventriculaires d’Aβ42
survient quelle que soit l’étiologie de l’hydrocéphalie chroni-
que. Ceci suggère que la diminution du turnover du LCR joue
un rôle dans la formation des dépôts amyloïdes.
P1-18 Protéine Tau, bien plus qu’une protéine associée aux microtubules
A. Sultana, F. Nesslanyb, D. Marzinb, S. Talaharib, A. Loyensc, Z. Mansuroglud, E. Bonnefoyd, L. Buéea et M.-C. Galasa
aInserm U837, Equipe Alzheimer and Tauopathies ; Univ Lille Nord de
France ; UDSL, IMPRT, Jean-Pierre Aubert Research Centre, Bâtiment
Biserte, place de Verdun, F-59045 Lille, France ; bLaboratoire de
Toxicologie Génétique-Institut Pasteur de Lille, F-59019 Lille, France,
1, rue du Pr. Calmette, 59019 Lille Cedex, France ; cInserm U837,
Equipe Développement et Plasticité du Cerveau Post-natal ; Univ Lille
Nord de France ; UDSL, IMPRT, Jean-Pierre Aubert Research Centre,
Bâtiment Biserte, place de Verdun, 59045 Lille, France ; dRégulation de la
Transcription et Maladies génétiques, CNRS UPR2228, UFR Biomédicale,
Université René Descartes, F-75270 Paris, France, Université René
Descartes, 45 rue des Saints-Pères, 75270 Paris Cedex, France
introduction : La famille des protéines Tau est principalement
connue pour moduler l’assemblage et la stabilisation des
microtubules. Cependant Tau pourrait aussi avoir d’autres
fonctions neuronales comme dans la transduction du signal
via ses interactions avec la membrane plasmique ou dans le
noyau où Tau est notamment présent. Des études in vitro ont
montré que Tau était capable de se lier à l’ADN. La liaison de
Tau protégerait l’ADN d’une altération par les radicaux libres
et préviendrait sa dégradation par les DNAses. L’objectif de ce
travail est d’étudier in situ l’influence de Tau sur l’intégrité de
l’ADN en conditions de stress.
matériels et méthodes : Les conditions de stress (oxydant ou
thermique) ont été mises au point sur des cultures primaires de
neurones. Ces conditions ont été comparées dans des cultures
primaires de neurones corticaux de souris obtenues à partir
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d’embryons sauvages ou déficients en Tau. La fragmentation
de l’ADN a été mise en évidence par Comet assay.
Résultats : Le stress entraîne une fragmentation de l’ADN spé-
cifiquement dans les neurones déficients en Tau. La présence
de Tau protègerait les neurones de la fragmentation de l’ADN
induite par un stress grâce à sa délocalisation nucléaire.
Conclusions : Ces résultats suggèrent que Tau est une protéine
multifonctionnelle qui pourrait jouer un rôle protecteur dans
le noyau des neurones. Dans la maladie d’Alzheimer, l’alté-
ration de Tau pourrait conduire à une perte de sa fonction
neuroprotectrice vis à vis de l’ADN et contribuer ainsi à la
physiopathologie de la maladie.
P1-19 Dérégulation de l’épissage de Tau par mBNl1 dans une Tauopathie
H. Trana, C.-M. Dhaenensa, C. Trolletb, H. Obriotc, D. Ghanema, C. Hammerd, E. Vanbrusselsa, N. Charletd, G. Gourdone, D. Furlingb, L. Buéea, M.-L. Caillet-Boudina, S. Schraen-Maschkea et N. Sergeantc
aInserm U837, Equipe Alzheimer and Tauopathies ; Univ Lille Nord
de France ; UDSL, IMPRT, Jean-Pierre Aubert Research Centre,
Bâtiment Biserte, place de Verdun, 59045 Lille, France ; bUniv Paris
6 Inserm U974/Institut de Myologie, bd de l’hôpital, 75013 Paris,
France ; cInserm U837, Equipe Alzheimer and Tauopathies ; Univ Lille
Nord de France ; UDSL, IMPRT, Jean-Pierre Aubert Research Centre,
Bâtiment Biserte, place de Verdun, F-59045 Lille, France ; dInserm
Avenir Groupe, IGBMC, 67404 Illkrich, France ; eInserm U781, Hôpital
Necker Enfants malades, 75015 Paris, France
introduction : La dégénérescence neurofibrillaire (DNF)
correspond à l’agrégation intraneuronale d’une ou plusieurs
isoformes de protéines Tau anormalement modifiées. Cette
lésion est commune à plus de vingt maladies neurodégéné-
ratives appelées Tauopathies. Il existe plusieurs hypothèses
étiologiques à la DNF dont celle d’une modification de l’épis-
sage de Tau. Nous avons montré dans le cerveau de patient
atteint de la dystrophie myotonique de type 1 (DM1) un défaut
d’épissage de Tau associé à une DNF. La DM1 est une maladie
neuromusculaire, autosomique dominante. La mutation, loca-
lisée en 3’UTR du gène dmpk, se caractérise par des répétitions
CTGn>50. Les ARNs mutants séquestrent des protéines dont
le facteur d’épissage MBNL1. La conséquence est une perte
de fonction de MBNL1 entraînant une dérégulation indirecte
de l’épissage alternatif de ses cibles, dont Tau. L’objectif de
notre travail vise à mieux comprendre les mécanismes liés
à la dérégulation de l’épissage de Tau et tenter de corriger
cette dérégulation.
matériel et méthodes : Afin de reproduire le défaut d’épissage
de Tau, nous disposons d’un minigène de Tau comprenant les
exons 2 et 3 flanquées de leurs séquences introniques, d’un
plasmide exprimant 960 répétitions CTG, mimant ainsi in
vitro la production des ARNs mutés de la DM1 et de plusieurs
isoformes de MBNL1 ainsi que des formes délétées des domai-
nes N- ou C-terminaux de cette protéine. Nous avons préciser
l’implication de MBNL1 à l’aide de ces outils moléculaires.
résultats : Nous montrons in vitro que les répétitions CTG
et l’invalidation de MBNL1 par siRNA reproduisent le défaut
d’épissage de Tau. De plus, la surexpression de MBNL1 en
présence des répétitions CTG restaure le défaut d’épissage
de Tau. MBNL1 semble donc jouer un rôle majeur dans
la régulation de l’épissage des exons 2 et 3 de Tau. Afin de
préciser l’implication de MBNL1 pour l’altération d’épissage
de Tau, nous avons réalisé une étude structure / fonction et
montrons que la région N-terminale de MBNL1 est essentielle
et suffisante à la restauration de l’épissage de Tau.
Conclusion/Perspectives : La perte de fonction endogène de
MBNL1 dans la DM1 peut être restaurée par la surexpression
du domaine N-terminale de MBNL1. Elle est actuellement
évaluée comme outil thérapeutique dans un modèle de souris
transgénique DM1
P1-20 effets de l’exercice volontaire à long terme dans un modèle de souris transgénique ThY-Tau22 développant une pathologie Tau similaire à celle observée dans la maladie d’alzheimer
L. Troquiera, S. Burnoufa, K. Belarbia, F. Fernandez-Gomeza, A. Sultana, M.-E. Grosjeana, D. Demeyera, H. Obriota, R. Cailliereza, M.-C. Galasa, I. Brionb, B. Barbotb, S. Humeza, N. Sergeanta, M. Hamdanea, D. Bluma et L. Buéea
aInserm U837, Equipe Alzheimer and Tauopathies ; Univ Lille Nord de
France ; UDSL, IMPRT, Jean-Pierre Aubert Research Centre, Bâtiment
Biserte, place de Verdun, F-59045 Lille, France ; bUniv Lille Nord de
France, IMPRT, Univ Lille 2, Place de Verdun, F-59045 Lille, France
introduction : La maladie d’Alzheimer est une maladie
neurodégénérative caractérisée par des dépôts amyloïdes et
une dégénérescence neurofibrillaire (DNF). Cette dernière est
constituée d’agrégats de protéines Tau hyper- et anormale-
ment phosphorylées et sa progression est corrélée avec celle
des déficits cognitifs. Afin de modéliser la pathologie Tau, nous
avons généré un nouveau modèle de souris transgénique Tau
(THY-Tau22) dans lequel nous testons certains paradigmes.
Ainsi, l’activité physique prévient le déclin cognitif et retarde
le début des démences.
matériels et méthodes : La lignée Thy-Tau22 a été caractérisée
dans une cinétique d’un point de vue comportemental (Y
maze). Des études immunohistochimiques sur la pathologie
Tau et le système cholinergique ont été réalisées. Des souris
THY-Tau22 et ”littermates” âgées de 3 mois ont été soumises
à l’exercice volontaire ad libitum durant 9 mois. Les mêmes
études ont ensuite été réalisées.