Coprologie ParasitaireProtozoaires

Helmintes

NOTIONS GENERALES DE PARASITOLOGIE

Parasitisme: mode d’association permanente ou temporaire de 2 êtres vivants , l’hôte et le parasite, dont un seul, le parasite, tire bénéfice. L’association est plus ou moins néfaste à l’hôte.

Cycle évolutif: suite inéluctable de transformations, se déroulant dans un ordre précis, que doit subir un parasite pour passer d’une génération à la suivante, avec ou sans passage par le milieu extérieur.

Cycle direct-parasite monoxène: évolution parasitaire chez un seul hôte

Cycle indirect-parasite hétéroxène: évolution parasitaire chez plusieurs hôtes successifs

Ectoparasites: peau,cavités accessibles

Endoparasites: cavités profondes, tissus

Hôte définitif: héberge forme adulte et multiplication sexuée

Hôte intermédiaire: héberge forme larvaire et multiplication asexuée

Quelques maladies parasitaires humaines et leurs agents:

Helminthiases (vers)

Oxyurose: Oxyure Ascaridiase: Ascaris

Téniase: Taenia

Distomatoses: Douves Bilharzioses: Schistosomes

Onchocercose et Filarioses lymphatiques: Filaires

Protozooses (unicellulaires)

Paludisme: Plasmodiums

Amibiase: Amibe Entamoeba histolytica

Toxoplasmose: Toxoplasma gondii

Leishmanioses: Leishmania

Maladie du sommeil: Trypanosome

COPROLOGIE PARASITAIRE

•Interrogatoire du patient indispensable: origine géographique, voyage, immuno-dépression, signes cliniques,…

•Prélèvement des selles:

-2 à 3 fois sur quelques jours (rareté parasitaire, émission discontinue d’éléments parasitaires)

-éviter alimentation riches en résidus (légumes verts, secs, fruits)

-transport rapide au labo

-si examen différé, fixation du prélèvement (eau formolée, milieu de conservation MIF)

•Examen parasitologique:

-macroscopique des selles

-microscopique direct

-microscopique après techniques de concentration classique

-microscopique après techniques spéciales selon renseignements

COPROLOGIE PARASITAIRE

•Examen macro:

-aspect selles (dures, moulées, molles, pâteuses, liquides)

-couleur, présence de sang ou glaires

-présence d’éléments nutritionnels

-présence de parasites macroscopiques (vers ou fragments de vers: anneaux Ténia, ascaris, oxyures…)

•Examen micro (x10 et x40) :

-œufs ou larves de vers helminthes

-kystes ou forme végétative de protozoaires

-en NaCl 9g/L ou en Lugol

-coloration MIF (Merthiolate-Iode-Formol): fixation et conservation

- Les 2 méthodes utilisées permettent de concentrer les éléments parasitaires quand ils sont trop rares pour être décelés par examen direct.

- On utilise de nombreuses techniques pour concentrer les parasites en un petit volume, ce qui augmente les chances de les détecter s’ils sont peu nombreux.

La technique idéale qui concentrerait tous les éléments parasitaires n’existe pas.

methode BAILENGER: Cette méthode met en présence une solution fécale concentrer certains acqueuse et un solvant de lipides (éther). Après centrifugation, on obtient un culot débarassé de tous les débris lipophiles. Avec cette méthode, on utilise l’acide acétique pour ajuster la solution à Ph 7,5. Ce pH est reconnu comme étant le plus favorable à la concentration des éléments parasitaires.

methode MIF (Merthiolate - Iode – Formol): Cette technique est particulièrement efficace pour la recherche des œufs de schistosomes, d’ascaris et des kystes d’amibes et de flagellés. On peut également tropozoïtes d’Amibes, tels Dientamoeba fragilis qui restent parfaitement identifiables.

EF:eau physio,lugol,B.Méthyl,etc…Colorations:Z.NIELSEN,B.Méthylène,Encre,MIF,etc….

Scotch-test,Baerman,etc…

Techniques d’étude en parasitologie : EF-Concentrations-Colorations-Techniques spécifiques

LES RHIZOPODESEntamoebaEndolimaxPseudolimaxDientamoeba ���� (?)

LES PROTOZOAIRESLES PROTOZOAIRES

LES FLAGELLESChilomastix Giardia Trichomonas Dientamoeba Enteromonas

LES CILIES Balantidium

LES APICOMPLEXACryptosporidiumIsospora Cyclospora Sarcocystis

LES MICROSPORIDIESEnterocytozoon, Encephalitozoon

SANSCLASSIFICATION Blastocystis

Les AmibiasesOn définit sous le nom d’amibiase les différentes

manifestations cliniques dues à Entamoeba histolytica (E.h) qui est la seule amibe responsable

de pathologies graves.

Les Protozoaires communsAmibes : ENTAMOEBA SP.

6-8Entamoeba hartmanni

11-15Entamoeba polecki

15-25Entamoeba coli

12-15Entamoeba dispar

12-15Entamoeba histolytica

KysteTAILLE MICRON

E. histolytica

Forme végétative histolytica

Forme végétative minuta

Kystes

E. coli

Forme végétative

Kystes

Entamoeba histolytica

Formekystique

Formevégétative

Entamoebahistolytica

minuta

Non pathogène

Entamoebahistolyticahistolytica

Pathogène

Entamoeba histolytica ...

Entamoeba histolytica kyste 14µm

(cliché JF Pays)

Entamoeba histolytica histolytica 15 µm(cliché JF Pays)

Entamoeba histolytica histolytica 20-40 µm (cliché JF Pays)

Forme végétative Entamoeba histolytica minuta coloration hématoxyline ferrique

Entamoeba coli

Kyste d’Entamoeba coli

LES RHIZOPODESEntamoebaEndolimaxPseudolimaxDientamoeba ���� (?)

LES PROTOZOAIRESLES PROTOZOAIRES

LES FLAGELLESChilomastix Giardia Trichomonas Dientamoeba Enteromonas

LES CILIES Balantidium

LES APICOMPLEXACryptosporidiumIsospora Cyclospora Sarcocystis

LES MICROSPORIDIESEnterocytozoon, Encephalitozoon

SANSCLASSIFICATION Blastocystis

Les Protozoaires Flagellés

/Dientamoeba fragilis

6-8Enteromonas hominis

/Trichomonas intestinalis

7-9Chilomastix mesnilli

10-12Giardia intestinalis

KysteTAILLE MICRON

Giardia intestinalis

Formes végétatives (face et profil) Kyste

FLAGELLES INTESTINAUX

* NOMBREUSES ESPECES SAPROPHYTES DU COLON

* SEUL GIARDIA INTESTINALIS PARASITE DU DUODENUM ET DE L’INTESTIN GRELE EST PATHOGENE

* GIARDIA INTESTINALIS EXISTE SOUS 2 FORMES :- TROPHOZOITES (INTESTIN)- KYSTES (SELLES)

Kystes de Giardia intestinalis 8x12µm (cliché Th. Duong)

Formes végétatives de Giardia intestinalis 6x15 µm (cliché M. Gari-Toussaint)

Les Protozoaires Flagellés

Trichomonas intestinalis

TRICHOMONAS VAGINALIS (Trichomonase)

Règne des protistes, Embranchement des Sarcomastigophora, sous embranchement des Mastigophora, Classe des Zoomastigophorasida, Ordre des Trichomonadida

Morphologie

trophozoïte: forme ovoïde à sphérique de 7 à 30 µm de long x 5 à 12 µm de large, 1 axostyle, 3 à 5 flagelles antérieurs libres et 1 flagelle postérieur court formant une courte membrane ondulante, 1 noyau visible après coloration, mobile à état frais

division par scissiparité, pas de reproduction sexuée, pas de forme kystique

Les Protozoaires émergents: Sporozoaires (Apicomplexa) :

Coccidies

Cryptosporidium parvumIsospora belli Cyclospora cayetanensis Sarcocystis hominis

Bactrim(trimethoprime-sulfamethoxazol)

Traitement :Humatin(paromomycine)

EPS standardDiagnostic bio :Frottis selles, Ziehl-Neelsen, Ac fluo

Diarrhée ++Malabsorption

Clinique :Diarrhée ++, Malabsorption, Cholécystite

Tout, EnfantImmunodépressionSIDA +++

Terrain :Tout, EnfantImmunodépression, SIDA +++

Ingestion d’oocystesalimentation

Contamination :Ingestion d’oocystes, Risque prof.Alimentation, Risque nosocomial, Homosexualité

SchizogonieGamagonieOocystes immatures(maturation milieuextérieur)

Cycle :SchizogonieGamagonieOocystes mûrs- paroi mince (autoinfection)- paroi épaisse (dissémination)

IntracellulaireIntestin (grêle)

Localisation :IntracellulaireIntestin (grêle), Bronches, Vésicule

CosmopoliteTropical +++

Répartition :Cosmopolite

HommeMonoxène

Réservoir :Homme, bétail, Monoxène

CoccidieCoccidie

Isospora belliCryptosporidiumparvum

Oocystes de Cryptosporidium (x40) (4 à 6 µm de diamètre)Selles colorées par le Ziehl-Neelsen

L’HyperEosinophilieet

Helminthes

NématodesCestodes

Trématodes

VERS HELMINTHES

LES NEMATODES

•ENTEROBIUS VERMICULARIS –Oxyure-(Oxyurose)

•TRICHURIS TRICHURA –Trichocéphale –(Trichocéphalose)

•ASCARIS LUMBRICOIDES-(Ascaridiase)

•STRONGYLOIDES STERCORALIS-Anguillule-(Anguillulose)

•ANKYLOSTOMA DUODENALE et NECATOR AMERICANUS- Ankylostomes-(Ankylostomose)

•TRICHINELLA SPIRALIS –Trichine- (Trichinellose)

•TOXOCARA CANIS/CATI (Toxocarose) SYNDROME DE LARVA MIGRANS VISCERALE

•LES FILAIRES EXOTIQUES (Filarioses)

LES CESTODES•TAENIA SAGINATA-(Taeniase)

•TAENIA SOLIUM (Taeniase) et CYSTICERCUS CELLULOSAE (Cysticercose)

•DIPHYLLOBOTHRIUM LATUM – Bothriocéphale-(Bothriocéphalose)

•ECHINOCOCCUS GRANULOSUS-(Hydatidose ou Echinococcose)

•ECHINOCOCCUS MULTILOCULARIS –(Echinococcose alvéolaire)

VERS HELMINTHES

LES TREMATODES

•FASCIOLA HEPATICA –Grande Douve du Foie-(Fascoliose, Distomatose)

•SCHISTOSOMA-Schistosomes ou Bilharzies (Bilharzioses ou Schistosomoses)

VERS HELMINTHES

ParasitesUnicellulaires

=Protozoaires

Pluricellulaires=

Vers

N’entraînent pasou quasiment pas

d’Hyperéosinophilie

ENTRAINENT UNEHYPER

EOSINOPHILIE

l’HyperEosinophilie et Helminthes

Nématodes- OVIPARES

ANGUILLULEANKYLOSTOMESASCARISTRICHOCEPHALEOXYURE

- VIVIPARESTRICHINEFILAIRES

Cristaux de Charcot-Leyden

Signe digestif de l’hyperEosinophilie

STRONGYLOIDES STERCORALIS ou ANGUILLULE-(Anguillulose)

Embranchement des Némathelminthes, Classe des Nématodes, Ordre des Rhabditidés

Morphologie:

oeuf: coque mince, claire, transparente, 50 x 30 µm, contiennent la larve L1 lors de l'émission des selles

Stades larvaires: L1: rhabditoïde: (250 µm, double renflement oesophagien); L2: strongyloïde (500 µm, un renflement oesophagien)

L3: strongyloïde infectieuse (600 µm, un renflement oesophagien, oesophage égal à 1/2 du corps, extrémité postérieure discrètement bifide)

Oeuf Œuf+L1

L1

L3

Oeuf Œuf+L1

L1

L3

Technique de Baermann

3

2-3 heures

1

Eau tiède

42Pascal DELAUNAY – PARASITOLOGIE – CHU de NICE

NECATOR AMERICANUSANCYLOSTOMA DUODENALE

ASCARIS LUMBRICOIDES-(Ascaridiase)

Embranchement des Némathelminthes, Classe des Nématodes, Ordre des Ascaridés.

Morphologie:

Vers Adulte: Ver blanc rosé, élastique, bouche avec 3 lèvres coupantes

mâle 15-20 cm, diamètre 0.3 cm, extrémité postérieure en crosse, 2 spicules brunâtres,

femelle 20-25 cm, diamètre 0.5 cm, extrémité postérieure rectiligne, vulve ventrale au 1/3 antérieur

Oeuf: ovoïde, double coque, l'externe est brune et mamelonnée, l'interne est lisse et jaunâtre non embryonné à la ponte,

dimensions: 50-70 µm x 45-50 µm,

Il existe aussi des oeufs non fécondés plus grands, plus ovoïdes, et des œufs atypiques ayant perdus leur coque mamelonnée

Œuf atypique fécondé

Œuf typique fécondé

Œuf non fécondé

Oeuf: forme de citron, un bouchon muqueux proéminent à chaque pôle, double coque: externe lisse et brune, interne jaune, non embryonné à la ponte

dimensions: 50-60 µm x 25-30 µm

Cycle évolutif monoxène:HD = homme

les vers adultes sont situés au niveau du colon et du caecum, leur extrémité antérieure est enfoncée dans les glandes, leur extrémité postérieure flotte dans la lumière ;

les vers sont hématophages (5 µl de sang /ver/jour)

élimination fécale des œufs.

Trichocéphale

ENTEROBIUS VERMICULARIS ou OXYURE-(Oxyurose)

Embranchement des Némathelminthes, Classe des Nématodes, Ordre des Oxyuroidea

Morphologie:

Vers adulte: petit ver blanc très mobile avec renflement céphalique,bouche munie de 3 lèvres coupantes

mâle: 3-5 mm, extrémité postérieure enroulée, 1 spicule, femelle: 9-12 mm, extrémité postérieure effilée translucide,

Scotch-test

• Ponte nocturne

l’HyperEosinophilie et Helminthes

- Cestodes :- AU STADE ADULTE :TAENIASIS du bœuf

TAENIASIS du porc HYMENOLEPIASE

- AU STADE LARVAIRE : CYSTICERCOSEHYDATIDOSEECHINOCOCCOSE ALVEOLAIRE

Taenia saginata (bovin)Taenia solium (porc)

Taeniasolium

Taeniasaginata

L'œuf: paroi très fine facilement déchirée et souvent absente, contient un embryophore sphérique de 35 µm de diamètre à coque épaisse, brune et radiée contenant un embryon "hexacanthe" (à 6 crochets résiduels)

Scolex piriforme de 1 à 2 mm, organes de fixation: 4 ventouses (ni rostre , ni crochets) d'où "Ténia inerne"

Œuf de taenia

l’HyperEosinophilieet Helminthes

-Trématodes :- Schistosomes- Distomatoses hépato-bilaires:

FasciolosesDicrocoeliose ClonorchiosesOpisthorchioses

- Distomatoses intestinales- Distomatoses pulmonaires: paragonimoses

BILHARZIOSES

EPERON caractéristique 70 à 200 µm de longavec EMBRYON CILIE (MIRACIDIUM ) =100 µm

dans les SELLES ou les URINES

LA PATHOLOGIEEST PRINCIPALEMENT LIEE AUX ŒUFS

S. haematobiumS. mansoni S. intercalatum

ŒUFS

Schistosoma mansoni 140-180x60µm, éperon latéral

Schistosoma haematobium 140-170x40µm, éperon terminal

Schistosoma intercalatum 140-200x70µm, éperon terminalSchistososma japonicum, 70-100x40µm, petit éperon latéral

Oeufs

Oeufs

DISTOMATOSESVERS PLATS , CLASSE DES TREMATODES

LES ADULTES: HERMAPHRODITES

PARASITES DES ÉPITHELIUMS:

BILIAIRE=DOUVES HEPATIQUES

INTESTINAL=DOUVES INTESTINALES

BRONCHIQUE=DOUVES PULMONAIRESTAILLE VARIABLE EN FONCTION DES ESPÉCES:

DE 1,5 MM À 3 CM

LES OEUFS:TAILLE TRÉS VARIABLE

(30 À 150 MICRONS)

DANS LES SELLES

CARACTERISTIQUE: OPERCULE

CE SONT DES ZOONOSES

DOUVESDOUVESPARASITES DE L’EPITHELIUM BILIAIRE

Fasciola hepatica: DISTOMATOSES HEPATIQUESClonorchis sinensis:Dicrocoelium dentriticum

PARASITES DE L’EPITHELIUM BRONCHIQUE

Paragonimus : DISTOMATOSES PULMONAIRES

PARASITES DE L’EPITHELIUM INTESTINAL

Heterophyes heterophyes: DISTOMATOSES INTESTINALES

Fasciola hepatica

Œuf de Dicrocelium dentriticum

Œuf de Clonorchis sinensis