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B. Lindberger, Stockholm. Quelques considerations theoriques et pratiques sur l’bpreuve de l’albumine de Heller

Quelques considérations théoriques et pratiques sur l'épreuve de l'albumine de Heller

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B. Lindberger, Stockholm.

Quelques considerations theoriques et pratiques sur l’bpreuve de l’albumine de Heller

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~ ~ ; i l i c ) ~ i h rt cl’iilliolls ayiiiil d’Cnergiques pi*opi,ic;lds df’ p donnrk fes efrrls 1r.s plus putssants: /e t$u!/ute d ‘ m t j u j o

b u l f c r t f ’ de mugn6sium sont, par exemplc, &ins ce cas. Les sels ii’ayanl yur l’unr ou l’autre espPce d‘ions du type prticipitanl occupent uiie place moyeiine. SI I’itnion, de i~i61iir que le cation appartiennent d a m les series au grwupe le i~ictiiis capable de pr6ci- piter l’albumine, un iel ainsi conqtitiit; ne prut coagulrr l’alhuniinr ; tels sont, par Pxemple, IPS iorlirr~s alcwlins. l’nzotatr~ rr’c potussium.

Cet te loil de HOFMEI~TER, coIiccrn:int la prkcipi talion Blectro- lytique de l’abumine au niveau OLI nulour du point nfwtre, a 6tP coriipl6tk d’une manihre import ante par PosTErmaK. Aiiisi qur C P L auteurs a pu le nioritrer, iii t B l quo l o milieu, tlani Icqucl la suhs- tame albumineuse est d i w , possk i c UIIP r6action ticide notable, i l qe produit un renversrmrrit coniplet tlrs rapacit6s de prPcipitation en tous IPS ciis des anions, e n sort^ q i i ~ I P S plus artifs en reaction rieutre w i t maintenant les inoinq rfficarrs; i inrrsrrnrnt, ccux qui 6taient lea iiioins actifs dam les conditions PludiPrs par HOFMEISTER sont rnaiht Pnant capables. en la concrntration I n plus faiblr, de prkci- pitcr I’albuniine; mais en tout cwi I’orc1i.c dr \u ilr HOFMEISTEH prrsiste intPgralcnwiit. T I cst pourtant singulier qu’ori : t i t , B CP qu’isl srmhlr. con~pli~trmciil perdu dr ~ u c qur I P S acicles minhraux, en tnr i t qur r h r t i f \ rwpahlrs de prkcipitcr I’alhu- IIIIIIP. peuvent ahsoluinriit s’inte I P ~ daris la d r i e d’anioni Ctablir par POSTERNAH - ct qui est la I(* r l r a HOFMETSTER renvers6e.

Pour en relenir :I l’acidr azotiqriv, nous rcncontrons ic i , d’aprPs les dEducti’ons qui prkcPclrnt, l i b \ chimilition\ d’une bonne prkcipi- talion, B qavoir : In r hc t inn : i c i d r ct unr sorte d’anions particu- Iii.i8rnieiit nc t i f s clans re miliru w i d e , Ics ions uzotat~. Mais ill ne v:i p:ii de so1 qur I’aridr pur. dani lcqurl par cnnskquent l’ion Ib!ltlr*o!jc,r/c P t I’ion clzofnt? S P Irou\ cnl I W quaiit it& Bgalrs, possede justrmcnt Ips conditions Ici plus a ~ ~ r ~ i t a g ~ u s ~ s pour 1 ; ~ recherche rlc. I’:ilhuminc. En lis;iv:iillnnt avr OPS nillangw d’acide azotique e l tl’;izotatei neutrrs ~n di l l6r rn tc~ propiwlions, 11 rst possihle tl’Ptudier l’artion dfi In coiwcritration de rhaquc espkce d’ions irid6peiidaninicnt I ’ u n i ~ r l ~ I ’ i i t i l re. Jr 1 aiLs inrliclucr en quPlques niots les IAultats de c e t l r s6rie de rechei.ches.

LP degr6 d’aridili - fiypiLini6 par la roncentralion des ions I r y d / ’ o y i . ~ - qui cst n ~ ’ ~ ~ ( l \ s i i i r ~ pour qur I’ion nzofufc piiihsc ni:rnifehl cr son action par l a prPcipilnlion de l’alhuminr esf relati- \enlrnt has, iurtout cn ~ ~ c t ~ i i p ~ ~ i ~ : i i ~ ~ ~ n dc cplui que pr6sPnte 1e react i f

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~ U U I W ~ I ~ W I I I ri i ipl( iy6 (aciclc ;utttique d’une trnrur tlc 25 I I O U I ’ ( a r ~ ~ t 1 .

II s’y ajoulc ccttc ~ ~ i r c o i i ~ t a i i c c ~ rernarquahlr qur. h i l’ioii rrzolatv e5t en ex&, doric sou5 i ‘ o r n ~ c l r nitrate neutre, Ic drgr8 d’aciclite tlu iirilicu n h t pas iiiodifiP. ~ndPpriid~iinn~ent dcs conditions vni*iahIes dr l a recherche, <I part i r du iiionient oil l’albuniine coiiimence B s p

pivkipiler jusqu’A crlui ou e l l ? csl (.orriplhteinent prricipit6e. En d’au- IiAcs trnne\, S I I nxi wlutinn d’alhumine de serum wt int;l& & un azota tc neulre, 1 1 ne 561 produil aucunc prBcipitulion. 81 I’on njtrutr iiiiiiiitciiant k r e ni6lange. pritdrniment, des quatitite3 croissant(- tl’acidc azotique forleincrit dilub, l a prbcipitatioii twtiiiiiriicp b se produiiv apr6h quelques addr tioris d’acido. Si jc rrclierche la r&iction tlu niiliru, alors qur la p r r i n i + i ~ prPcipitat ion conimcnce B 5r pro- duirc. j e ronstate uiip valeur dc pR d’environ 3,6. c’rst-8-dirc. cnti c 1/10(10 rt 1/10000 de normalit6 par rapport a i n io115 hydroy+nc,. SI jc cont inur maintenant k verspr discri4rniriit tlr l’ilcitlc. la prPcipi- tat inn augtiicntc, mats le depr4 d’acitliti. tlu iiiilien n’aiigiiictitr pa\. lant que de l’alhuminc d ~ m e n r e V I I solut inn. C’est m ~ l ~ i i i ~ n t t lunnd tou t r I’alhumine a 6t6 prkcipitkc. qu’il se produit unr rapidr avriision de 1 i i concentration des ions hyrl,wqi.~rr (Inns le Iiquirlr. t l u trmps qu’on continue B a joutw dr l’itcidt?. T,’c%nlution cqt cti

sotnine la n i b n i ~ . si j’ncidific avrc uii i1utI.e acide, par exmiplc> n \ ~ r tlr I’acide rlilorhydriqur nu de I’aridP sulfuriquc. h la roriililioii iiiiurtant que Ie+ ion< uzotalrs soient di‘s Ic t l P h n t r r i r x r k . Sou‘ rt+rvc clc‘ wt lc rnnditi’on. IPS variations dan.: I i i concrntralim tlc 1 ’ i i z o t ; I l ~ ~ ti’ont nucunr r6pewussion sur le f a c l t w r ici iiidiqiir: r i I’(irhnngc d r l’ion azofatr contrc un imtrc ion prccipitnnt nc dPtpi - iriiiir pas non plus dr ~nodific;iIioii dnns le rEsultat. Par contrc, l i t

\ ;ilcut* pfi cii quwt ion wmhlc Gtrt. unc cntistantc (.;iract~risticlnc (lr l i i ~uh>laric.c+ altruitiincusc ( k t *rinhIr viirirr sui\;int les diff6rcntc- 5uhs I a IN PS ii 1 hum i neuscs . P niir 1 r s h u hst ;I nc P\ a 1 h u r n i n rusr s t l II + i w i i i - ct ptir cons6qucnt ; i u 4 dans l’uriiic rt lrs cxsndnts contti- nant d~ l’alhuminc - ell^ w ticnt, c o n ~ t ~ i c il a 6t6 dit, nux cnvirnns tl’uiic valeui- dc p H Pgalc k 3,ti.

Si, d’autre part, on chnihit un mi l iw de rhc t ion ayant uiic t~irnccnt~~rtion d’ions hydrwgfine h pru p r k cnn5tante offrnnt tin

r x c h crrtain de c m ions, par. rxrniple, uiic vnlpur de p H anx rnviron.: de 2,0 et si, dans r e ens, on rssaic I’wlion rl’uiic concentratinn croissanle d’ions azotate. on pourrn mettrr en hidprice une piwmil&re act ion sous forme d’une opalescence apparaissnn t auy environs de n - de teneur en nitrate e t unc pr6cipitation compli.te de I’alhumine 10

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LJ ;lux eIivirons de - . Si nous (:oiiipai’o11S ces v:il(JUl% :lVeC la COIlCell- 4

tral.ioii iiiinima d’ions hydroyB7ie nbcessaire pour ohtenir le menie c b f f r t t (entrn 1/1000 et 1/10000 n ) , on trouve celle-ci notablenient t:k\-t;e. Si, d’autre part, nous coinparons ilvec les concentrations 11rs tilcct rolyt.cs qui solit nbcessaires pour la coagulation saline en 1111 milieu ~espectiveineiit. neut.rc ou faibleriient alcalin, nous I rouvo~is 13. des valeurs iii(.onipal.ablenicnt plus elev6rs. Avec lc , S ? / / / ‘ U [ C d’&monium - UII clcs sels neutres qui pritcipitent I’albuminti I f 1 niieux - la globuline, comme on le sait, nt! se prdcipite complS- lenient qu’avec u ~ i e deiiii-saluraliori, cc qui e s l bgal b 4,4 inol. par lilrc. I’onr l a prdcipitation de I’alburnine, il en h u t r r i h e 11. clouble. En ni&nic temps que se pr*oduit la precipitatilon par des i:lwt.ri)lyt.es en inilien :wide, avec une concentration tolale notablo- iiient basso do I’itgent prkcipitant, l’iridgalilk si caractdristique, diklts

In prBci’pitation par un sel neutre, entre les di8Bsentt7s protcines tlu s6rum est loute proche da disparaire di4s que la rCaclion du iiiiliwi dcvienne acide.

Sortant de ces donnkefs comme pi.6misses i l i i e p u t pas 6 l . r ~ irii~itPressant de rechercher si I’acide ilzoliquc B 25 70, le rdaciir qut’ tious eniployons t rhs gdndraleineiil pour I’dpreuve de HEI.LEI~, o l f i t les conditioiis les plu.5 avant ageuses pour ccttc dpreuvc~. Jc.

iiiaiiienient ou du port Bventuel sur stri d’un acitlc aussi caust i c p ! ; ,jc J W place uiiiquement au point dr vue de la fraiichise de I:I rtiacl,ion e l dc la confitiilce qu’elle merite. A elles seulcs, 111s iiombi*eust~s publicat,ions y u i vi:sent I’cxBcut ion rle 1’6preuve n t I:i

sigiiitication pratique des ~Bsuttats prouveiit que I’aeidc azotiquc. il’est pas en l’espece nhsolunient parfili t,. C’est pour l a ddii~onslriilii~ii de l’albumine dam l’urine que I’epreuve trouve son princi~p:il rmiploi et, dans ce yui suit, j e m’en tipndrai A cell(: uniyue quest ioii. I:n dehors de I’issue s’isl se peut dirc iiorniale de 1;) rthction - siii8t avec une couche blanclie typique situBe entre I’ucide :izoliquc ( 3 1

I’urine placBe au-dessuP, en cas de presence pat.hologique d’albu- niinc, soit avec des milieux ahsolument limpidrs. quancl l’albuminc: fait, dbfaut - il se produit quclquefois une skri’e de coinplicat,ions, A cct hgard on s’est beaucoup occup6 de l’apparition de ce qu’lJi\ irppelle I’anneau supdricur, c’est-a-dire, d’un trouble plus ou iiioiii~ dense plact. au-tlessus d c la couche intermhdiaire A l’ac~i.11~ et i~ I’ui*iiic. A p i f s I P S rccherclies Btondues qui ont 6tB consucrkes :I cPI lii

f ‘ < l i b ‘ , ioi ab- straction des inconvhients qui p ~ u v e n t rBsullcr 1111

i~lit*S~ i O I i . I I O ~ i l l l l l l l l h l l ~ I J i l l ’ fPI1 II! pYl>fPSs[~lll’ h t i ~ l l N l m . ii:i :I Sloc:k-

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holni, les conditions &apparition dc w p1ienoiiiOne peuvent Btre coiisiddrkes coInnie 6lucidkes. L’urine, d’aprhs M O R & E I ~ , contieiit souvent des substaiices capahles de pr6cipilw I’albuniiaie, g h k a l e - ~ n e n t el, vr;iise~nblableme~it d e l’ucitle s u l f u r i p e de clio~~dr.oi’lirie. Si l’urinc contieiit en n i h e tenips des tiaces cl’albumiiie, il se produit, aussitfit quo la reaction du iiiiilieu deviciit faihleinent acide, uiie pr6cipi;tation de I’alhumiiie par cette substance capable de la prkoi- piter. Dans I’exkcution de la r6actiun de HEILEH, sous forriie ti’dpreuve par couches, les ions hydroghne, I r k s itiobiles, di ffuscnl. avec une e x t r h c : facillith e’t du rdactif - l’ncide azutiyrie cor~ceutr*tie - ila vont sil vite en haut clans la couclie do l’urine yue la reaction, nil@me h, une certaine distance au-dessus de la couc~lie inteririddiailx~ ;rpparente, devient notahlement wide. Ici donc se constiltue un pro- duit insoluhlp, formi. B la fois par l’albuinine P I la substance prkci- pitant I’alhuniine. Si la tcneur tlc I’urine cii nlhumirie est notable, ill sit produit, aussi darts la ligiw tlc cl6niarcaLioii WE pi-6cipitit.ion dBkrinin6r par. Ics i’ons azottrtc f’t , dn11s cc c w , I I o u s avoits deux c,ouctirs tic. pr6cipitaLion I’unc au-dcssus cle I’aut.rc. LJar contre, ; I V W dc giwidits quantitks tl’elhuininc, l’aiineau supkrieur est ii1;Lsqrid par I;A prt;cipitat.ion I I I ive occupant la couche intermd- cliaire 6.1 r’est alors cetle pri.!cipil:itioit iii;issivr qui tlevicnt seule ;I ppar en t e .

I’ne nutre anoiiialie dc I;] rkacl ion s’ohscxve quand I’urine esl, I I+S pauvre en sets. Au lieu de la couche caract6rist.ique ct coiiipactc. d’nihuiui~nc, on n’obti;ent alors qu’unc oputcsc~ricr diffuse au-dessiis de l’acide.

POUJ- linir, notons cette particulsr.it.6 bieii co~inue, que certaines suhst.:inccs no11 alhuniirieuscs so111 p r k i p i tuhlcs par I’acide nzot iquc ct. peuvcnt &re uue cause dc confusions ou, tout au inoins, enlr;\vc!r la ccmstatati~on d’une rbnction event,uelleliienl positive dr, I’albu- mine. La pr6cipit.ation dr l’acitk uriquc, duns les urines riches PII

urates est Ic phi.noirii.nc qui i i la plus gimdc iinportance pratiqur. Toutefois, I’anneau dit dcs uriites on’rc une diiT6renc,e si; caracthris- tique par rapport h I’anneau do l’alhuiiiinc qu’unc confusion n’est, @re possible; iiiais il pcut goner I’ohscirvatcur cii c,as de rBaction positive faible de l’albumine.

Apres l’ahsorpti‘on de balsaniiques, tlw :Icicles rksineux peuvent s’ac:cuniuIc:r quelque’foiis dans l’urine i i v p c tuic tclle ahondance yu’ils sc prhcipitent 6galeiiient a la 1imil.e de la couche d’acide.

Conintc c,ons6quence des 6tudes quc je v i e w dc relater sur le

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l~~,t:canisnie de If1 rdactilon avec prtiripitation par I’ion azolate en solut,ioii acide, j’ai essay6 de modifier le r6actif en vue d’une kpreuye pr:itique cnniparative. C’est surtout, le tlegr6 d’acidit6 qui I I ~ R seliihlait iiiulilernenb e t pratiquerirent trop &lev6 dans le r6actif G O L ~ ~ ~ I I ~ ~ I I I ~ I ~ ~ cmploy6. Le reactif que j’ai rnis h l’6tude est form6 d’une solution 3 niol. par litre cl’azotate de sodiun-r avec additi’on tl’acidc azotique jusqu’h concurr(’Iice d’environ 1 /15 11. Des pesdes tJieii rigoureuses ne sont pas en soninie extr&inenienl iidcessaires;

r&iclilf peut done se prkparer ais6inent en dissolvant 250 gm. d’azotate de sodi,uni dam I’eau, tmi ajoutant 15 cc,. d’x ide an t ique ordiiiaire a 25 % et versnnt , pour fink, tle I’eau jusqu’g concurreIicc tl’uri litne.

11 n’est. pas sans int&r&t,, a u point t ie vuc pratique, de signaler 1r.s difl6reiices qurl des dpreuves coinparat ives fonl, ressortir entre cc rbectif et, l’acilde azotique.

EII ce qui concei~ne tout d’itl~oril la sensibilit6 dc I n r6acti’on, on ne ronst,ate pas dr dil’t’tirence pour Ics solutions purcs d’albmninc cii solution clc chlorure de sodium ; riiais la solution sali’ne faiblernent. irc~icle ulilisd roinme react i f donne, avec IIIW cmncentrntion alhumi- nwse faible, une r o w h e alhnniiniwse plus c~on~pwct.e, plus ressttrrke, pi. qui est. tl’une t~ttser*vati80ii plus facilc que d a m 1’r:preuve corres- pondnnte avw I’aritie azotique. I A transition est, pour ainsi dire, plus ahrupte cle 1’6prruvcl negative a 1’6preuve faiblement positiwe.

Cet,t.e diff6rence apparait encore plus nettenient h I’essai d’urines firiblenlcnt alhuinincuscs. En raison du drgre d’acidit,b si essenti;elle- ment. bas du reactif, Irs ilons hyclrog8ne ne diffusent pas tellernent, loin en conrrntrati’on nckcssili re que la ZOIILL de prGc,ipit,ation s’en 8largit; au c,ontrxire, le prdcipitd se riiontre loujours hi;en rassernble dilns la couche intcrmPdiaire cllr~-ini.me; i l ii des liniiles trandi6es el, s’observc farileni~nt.. On dvitc ninsii IPS rdactions douteuses. En cons6quence, i l lie SR produil pas non plus d’nnneau supbrieur, mais l a prPcipit.alion occupe toujours la courlir: de s4paral ion elle-iii6me. Ceci peuf-(Ztw sera considbr’6 coiiiiiir! un tltSfaut, etant. donnit qup hcaucoup sent, hahitiids a i l type sp6cial que pr6sente la r6action usuelle dans la zone tle transibion c’t qu’i.15 eii f.irent. leurs conclusions. Mais, puisque lc hut. est. en soi~tiiiic dc. d6montrer la pr6senc.e d~ l’albuniiri~, j’estime quc If. nicillleur cles r h t i f s est alors celui qui montre c,rtle suhstancc d’unc mani+i*e uiiiforme et non Bquivoque, surtout quand elle existe en qunntit6 pathologique.

Avec moil rdilctif modifit! 1:i pauyret6 de l’urine en sels est sans

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iniportancc pour IF: rksultat dc la r&c,tioii; car, ayant luil-mhie line teneur elevke en sel neutre, moil reactif prkcipile clirectemeni. niArne les solutbons slbumineuses dPpourvues d’klect,r’olyt.es.

Dans la plupart des cas on 6vi;te conipl6tement I’anneau des uratw ; quelquefois pourtant il s’est produit une prkipi’tation, mais seule- iireiit aprbs un temps notable - 5 minutes ou dasantage - en sorte qu’on a tout le temps voulu pour constater d’tibord une reaction dventuelle de l’albumine.

A ce propos je tiens h signaler que l’apparition cle la reaction albumineuse positive senible prendre un peu plus de i,enips qu’avcc I’aciide azotique pur. L8a dijf6rrhnce cst cerlainement insignitiante, m a i s pour cette raison i l importe qu’on ne nkglige poinl. de verifier h nouveau, nu bout de quelques minutes, toute bpreuve ndgative t lc HELLER. Je n’ai pas eu l’occasion doberver la f:qr)n dont se conipor- t.mt les acidcs rbsineux avec nia niodification de la r6actimon.

En prmant pour base les observations qui concernent I’influenae tips difflwnts facteurs sur la prkcipitation dlectrolylique de I’alhu- inine en solutioii wide el. en considkrant mes r6sultals ti cet egarll, ,jc pensc i:tre, en droit de rwommander, pour l ’bprfuv? de HEI,LEH. iiiic Ittodificat.ioii qui consist.t! b I’cx6cuter i i v w u n p solution il’wi- I i i t c ’ dc sodium faible,nimt acidifiee par l’i\(*i(.ltl iinil icliw. IPS ilVilIIt2tigPS qui; en dkcoulpnt sont. ICS suiv:inl s :

1’ l ~ t r6act,if est d’un IlliJllil?l~l~llt coniinwtlc; 2” JA Is6:cc:t.ion p s i plus tiBuiic:li&, plus i l l l i f o i , l i i ~ ~ . iiiiiiii,< s f \ l i \ ~ ~ ~ i i I

i:qiiivoque ; 3 ” 011 I I ’ I ~ S ~ , ~ I ~ I S gC1li’L par f l fv r~’~iic*Iioiis sf*ciiiiiliiii’c~s.