RECUEIL DES RÉSUMÉS

LES JOURNÉES SCIENTIFIQUES NATIONALES SUR LES ENZYMES À APPLICATIONS

BIOTECHNOLOGIQUES EN ALGÉRIE

21 – 22 Décembre 2020

ENSB – CONSTANTINE

RECUEIL DES RÉSUMÉS

Ministère de l'Enseignement Supérieure de la Recherche ScientifiqueÉcole Nationale Supérieure de Biotechnologie

COMITÉS

Prés ident s

Président d’honneur : Pr. KHELIFI Douadi Directeur de l’ENSB

Présidente des JSNEABA’20 : Dr. BENLOUNISSI Aïcha (MCA/ ENSB) Président du comité Scientifique: Pr. KHELIFI Douadi (Pr/ ENSB)

Président du Comité d’organisation : Dr. MARIR Rafik (MCA/ ENSB)

Comi té d’organi sat ion

AMOURACHE Mounia

BENDAHMANE Ines

BENKARA Houssem

BENLOUNISSI Aïcha

BOUTEBBA Souheila

GUEMMOUR Billel

MARIR Rafik

MEROUANE Fateh

(MAB/ ENSB Constantine)

(ENSB Constantine)

(ENSB Constantine)

(MCA/ ENSB Constantine)

(MCB/ ENSB Constantine)

(Doctorant/ ENSB Constantine)

(MCA/ ENSB Constantine

(MCB/ ENSB Constantine)

Comi té sc ient i f ique

ALYANE Mohamed

BECHKRI Sakina

BELLIL Ines

BENLOUNISSI Aïcha

CHEKROUD Zohra

FEZOUANE Fatiha

KHELIFI Douadi

MARIR Rafik

RHOUATI Amina

SLIMANI Souheila


(MCA/ ATRBSA)

(MCA/ UFM Constantine)


(MCA/ Université 20/08/1955 Skikda)

(Pr/ Université de Boumerdes)

(Pr/ ENSB Constantine)



(MCA/ Université 20/08/1955 Skikda)

PROGRAMME

Lundi 21 décembre

8.30 Ouverture des journées et mot de bienvenue.

9.00 Plénière P1 GAGAOUA MohammedEnzymes recovery by Three Phase Partitioning: a focus on proteases as milk-clotting and meat tenderizing agents.

9.30 Session Orale 1 Les protéases en agroalimentaire Session Poster 1

•CO1.1 DERARDJA A. Inhibition of apricot polyphenol oxidase by combinations of plant proteases andascorbic acid.

•CO1.2 BENSMAIL S. Production d’une protéase coagulant le lait par Rhizopus stolonifer DIV16/2095-2048-1via SSF : Optimisation par les plans d’expériences.

•CO1.3 BOUMEDIENE F. Purification et caractérisation d’une protéase d’origine microbienne (Mucorcircinelloides SF15) et évaluation des propriétés rhéologiques d’un fromage fondu.

•CP1.1 RAHMANI A.

•CP1.2 KAHLOUCHE A.

•CP1.3 BOUKEROUI Y.

•CP1.4 GHEDJEMIS A.

•CP1.5 MEZIANE N.

•CP1.6 ZATER Z. Y.

•CP1.7 CHENNI F-Z.

10.00

10.30

11.00

11.30 Session Orale 2 De la biotechnologie des enzymes à l’agroalimentaire Session Poster 2

•CO2.1 BOURAS B. Optimisation des conditions de coagulation enzymatique du lait de chèvre avec laprésure caprine par la méthode des surfaces de réponse.

•CO2.2 AIT KAKI A. Production et caractérisation d’α-amylase fongique : Essai d’application en panification.

•CO2.3 DAKHMOUCHE-DJEKRIF S. Etude de la production et la caractérisation d’α-amylase de

Clavispora lustaniae et Pichia guilliermondii isolés de blé des zones arides. •CO2.4 DENDOUGA W. Degradation of Fusarium cell walls by lytic enzymes of potential biocontrol

Trichoderma isolates.

•CP2.1 TAIBI H.

•CP2.2 BACHTARZI N.

•CP2.3 CHEMLAL R.

•CP2.4 HERIZI A.

•CP2.5 KERMANI I.

•CP2.6 ALLOUCHE L.

•CP2.7 KHELALEF H.

12.00

12.30

13.00

13.30

14.00 Session Orale 3 Les enzymes et leur impact environnemental Session Poster 3 •CO3.1 BOUCHERBA N. Rétrospectives des travaux du laboratoire de Microbiologie Appliquée sur les

endoxylanases bactériennes (2005-2020). •CO3.2 BELLEBCIR A. Extraction et purification partielle d’une cellulase d’origine microbienne sur un déchet

de type papier. •CO3.3 JAOUADI B. Les enzymes microbiennes, outils clés de la biotechnologie industrielle et

environnementale : Cas des hydrolases et oxidoréductases. •CO3.4 AZZOUZ Z. Bioconversion of the lignocellulosic biomass residues and biotechnological production of

fungal xylanase in solid-state fermentation. •CO3.5 SAOUDI B. Isolement, purification et caractérisation d’une pectate Lyase thermostable et

alkalophile chez une espèce d’actinomycète thermophile, Actinomadura keratinilytica CPt20…

•CP3.1 BOUFERCHA O.

•CP3.2 BOUTANA W.

•CP3.3 BENAOUAD S.

•CP3.4 LASSOUANE F.

•CP3.5 KERNANI R.

•CP3.6 CHEMLAL R.

14.30

15.00

15.30

PROGRAMME

Mardi 22 décembre

9.00 Plénière P2 DJEGHADER Ahmed Structural biology as a tool to understand and improve enzymes activity.

9.30 Session Orale 4 Vers l’analyse et l’étude des enzymes Session Poster 4

•CO4.1 ALALLA A. Dédoublement cinétique enzymatique des beta-aminoalcools : Acylation et hydrolyse

en milieu organique.

•CO4.2 ALLALA F. Etude de l’α-amylase TfAmy48 pour une application en détergence.

•CO4.3 DJOULLAH A. Transglutaminase et ses applications en microencapsulation.

•CP4.1 BENHOULA M.

•CP4.2 CHAIB I.

•CP4.3 CHERGUI A.

•CP4.4 MANSOURI N.

•CP4.5 MAIBECHE R.

•CP4.6 BENAMEUR Q.

•CP4.7 BENNAMOUN L.

•CP4.8 BOUCHERIT H.

10.00

10.30

11.00

11.30 Session Orale 5 Des microorganismes particuliers pour des enzymes d’exception Session Poster 5

•CO5.1 BENMEBAREK H. Essai de production et dosage de l’activité enzymatique de souches

bactériennes et archéennes halophiles protéolytiques isolées d’environnements hypersalins algériens. •CO5.2 KHEMILI-TALBI S. Caractérisation de lipase, d’α-amylase et de dioxygénases halothermophiles à

partir de deux archées halophiles extrêmes pour des applications industrielles prometteuses. •CO5.3 BOUCHERIT Z. Production of laccase by a halotolerant Penicillium on Olive Pomace under SSF.

•CO5.4 HAMMA S. Caractérisation des potentialités kératinolytiques d’une souche actinomycète isolée

dans la région de Bejaïa.

•CP5.1 HARIR M.

•CP5.2 BENAISSA A.

•CP5.3 SAOUDI B.

•CP5.4 AGUIS H.

•CP5.5 BENHAMICHE H.

•CP5.6 LENCHI N.

•CP5.7 RACHEDI K.

•CP5.8 LEFAIDA C.

12.00

12.30

13.00

13.30

14.00 Session Orale 6 Les enzymes en biotechnologie et santé Session Poster 6

•CO6.1 MEBIROUK R. Probable antitumor activity of serine protease from Helix aspersa Algerian snail.

•CO6.2 ZERIZER H. Étude comparative d’enzymes à activité coagulante de deux souchesd’actinobactéries autochtones.

•CO6.3 MOSBAH A. La xanthine oxydoréductase comme outil promoteur pour le diagnostic despathologies hépatiques.

•CO6.4 BOUICHE C. Activité antioxydante de glucuronoxylanes (UXOS) et arabinoxylanes (AXOS) produitsd’hydrolyse d’endoxylanases de Bacillus safensis CBLMA18.

•CO6.5 HAMOUDI M. Activité anticholinesterase In vitro d’Ephedra nebrodensis contre AchE et BchE.

•CP6.1 LABBANI F-Z. K.

•CP6.2 MERIBAI A.

•CP6.3 MEDJAHED Z.

•CP6.4 KIHELI H.

•CP6.5 ZEGHIR R.

•CP6.6 SAOUD S.

•CP6.7 BENSLAMA O.

•CP6.8 KADI-SACI A.

14.30

15.00

15.30

16.00 Clôture des journées et désignation de la meilleure présentation.

MODÉRATION DES SESSIONS

Lundi 21 décembre

8.30 Ouverture des journées et mot de bienvenue. KHELIFI D. Président d’honneur des JSNEABA’20

BENLOUNISSI A. Présidente des JSNEABA’20 9.00

Plénière P1 BENLOUNISSI A. Membre du comité d’organisation MEROUANE F. Membre du comité d’organisation RHOUATI A. Membre du comité scientifique

9.30 Session Orale 1 Les protéases en agroalimentaire Session Poster 1

BENLOUNISSI A. Membre du comité d’organisation

MEROUANE F. Membre du comité d’organisation

BECHKRI S. Membre du comité scientifique

MARIR R. Membre du comité d’organisation

BELLIL I. Membre du comité scientifique

10.00

10.30

11.00

11.30 Session Orale 2 De la biotechnologie des enzymes à l’agroalimentaire Session Poster 2

BOUTEBA S. Membre du comité d’organisation


BELLIL I. Membre du comité scientifique


BECHKRI S. Membre du comité scientifique

12.00

12.30

13.00

13.30

14.00 Session Orale 3 Les enzymes et leur impact environnemental Session Poster 3

AMOURACHE M. Membre du comité d’organisation

GUEMMOUR B. Membre du comité d’organisation

BENLOUNISSI A. Membre du comité scientifique


RHOUATI A. Membre du comité scientifique

14.30

15.00

15.30

MODÉRATION DES SESSIONS

Mardi 22 décembre

9.00

Plénière P2 BOUTEBA S. Membre du comité d’organisation MARIR R. Membre du comité d’organisation ALYANE M. Membre du comité scientifique

9.30 Session Orale 4 Vers l’analyse et l’étude des enzymes Session Poster 4



ALYANE M. Membre du comité scientifique


BENLOUNISSI A. Membre du comité scientifique

10.00

10.30

11.00

11.30 Session Orale 5 Des microorganismes particuliers pour des enzymes d’exception Session Poster 5



MARIR R. Membre du comité scientifique


ALYANE M. Membre du comité scientifique

12.00

12.30

13.00

13.30

14.00 Session Orale 6 Les enzymes en biotechnologie et santé Session Poster 6



RHOUATI A. Membre du comité scientifique


MARIR R. Membre du comité scientifique

14.30

15.00

15.30

16.00 Clôture des journées + Désignation de la meilleure présentation

KHELIFI D. Président du comité scientifique des JSNEABA’20 BENLOUNISSI A. Présidente des JSNEABA’20 MARIR R. Président du comité d’organisation des JSNEABA’20

SOMMAIRE

Conférences plénières

P1. Enzymes recovery by Three Phase Partitioning: a focus on proteases as milk-

clotting and meat tenderizing agents

GAGAOUA Mohammed .........................................................................................................1

P2. Structural biology as a tool to understand and improve enzymes activity

DJEGHADER Ahmed ..............................................................................................................2

Communications orales

CO1.1 Inhibition of apricot polyphenol oxidase by combinations of plant proteases

and ascorbic acid

DERARDJA Ala eddine#, BARKAT Malika, ROMPEL Annette ............................................3

CO1.2 Production d’une protéase coagulant le lait par Rhizopus stolonifer DIV16/2095-

2048-1 via SSF: Optimisation par les plans d’expériences

BENSMAIL Souhila#, FAZOUANE-NAIMI Fethia .....................................................................4

CO1.3 Purification et caractérisation d’une protéase d’origine microbienne (Mucor

circinelloides SF15) et évaluation des propriétés rhéologiques d’un fromage

fondu.

BOUMEDIENE Farida#, KAHLOUCHE Amel ...........................................................................5

CO2.1 Optimisation des conditions de coagulation enzymatique du lait de chèvre

avec la présure caprine par la méthode des surfaces de réponse

BOURAS Biya#, Ouarda AISSAOUI ZITOUN , BOUBRIK Fairouz, BENYAHIA Ferial Aziza .....6

CO2.2 Production et caractérisation d’α-amylase fongique : Essai d’application en

panification

AIT KAKI Amel#, BENNAMOUN L., DJEKRIF DAKHMOUCHE S., LABANI FZ K., EL- HADEF

EL-OKKI M., & MERAIHI Z. ........................................................................................................7

CO2.3 Étude de la production et la caractérisation d’α-amylase de Clavispora

lustaniae et Pichia guilliermondii isolés de blé des zones arides.

DAKHMOUCHE-DJEKRIF Scheherazed #, AIT KAKI- EL HADEF ELOKKI Amel ,

BENNAMOUN Leila , LABBANI Fatima Zohra Kenza, CHAIB Ibtissem et NOUADRI Tahar.

..................................................................................................................................................8

CO2.4 Degradation of Fusarium cell walls by lytic enzymes of potential biocontrol

Trichoderma isolates

DENDOUGA Wassila#, GHEDJEMIS Amina , BOUREGHDA Houda ...................................9

CO3.1 Rétrospectives des travaux du laboratoire de Microbiologie Appliquée sur les

endoxylanases bactériennes (2005-2020)

BOUCHERBA Nawel#, BOUICHE Celia, HEBAL Hakim, BETTACHE Azzeddine, AZZOUZ

Zahra, BOUANANE-DARENFED Amel, BOUACEM Khelifa, JAOUADI Bassem. SUSANA V.

Valenzuella, COPINET Estelle , DUCHIRON Francis ...........................................................10

CO3.2 Extraction et purification partielle d’une cellulase d’origine microbienne sur un

déchet de type papier

BELLEBCIR Anfal#, BENAYED Rofida, BENLOUNISSI Aicha .................................................11

CO3.3 Les enzymes microbiennes, outils clés de la biotechnologie industrielle et

environnementale: Cas des hydrolases et oxidoréductases

JAOUADI Bassem#, MECHRI Sondes, ZARAI JAOUADI Nadia, BOUACEM Khelifa ,

ALLALA Fawzi , HACENE Hocine , BOUANANE-DARENFED Amel & ABDELMALEK Badis

................................................................................................................................................12

CO3.4 Bioconversion of the lignocellulosic biomass residues and biotechnological

production of fungal xylanase in solid-state fermentation

AZZOUZ Zahra#, BETTACHE Azzeddine , BOUICHE Celia, MAIBECHE Rima, HAMMA

Samir, AMGHAR Zahir, BEN HOULA Mohammed, ALIANE Wahiba, BOUCHERBA Nawel

, BENALLAOUA Said .............................................................................................................13

CO3.5 Isolement, purification et caractérisation d’une pectate Lyase thermostable et

alkalophile chez une espèce d’actinomycète thermophile, Actinomadura

keratinilytica CPt20, isolée du compost de poulet (région Annaba).

SAOUDI Boudjema#, HABERRA Soumaya, KEROUAZ Bilal , HABBECHE Amina, AYARI

Adel, BEN ROMDHANE ZAMEN, BELGHITH Hafedh, GARGOURI Ali, LADJAMA Ali ........14

CO4.1 Dédoublement cinétique enzymatique des 𝜷-aminoalcools : Acylation et

hydrolyse en milieu organique

ALALLA Affef#, MERABET-KHELASSI M., ARIBI-ZOUIOUECHE L., RIANT O. .........................15

CO4.2 Étude de l’α-amylase TfAmy48 pour une application en détergence

ALLALA Fawzi#, BOUACEM Khelifa#, JAOUADI Bassem et BOUANANE-DARENFED

Amel. ......................................................................................................................................16

CO4.3 Transglutaminase and its applications in microencapsulation

DJOULLAH Attaf# .................................................................................................................17

CO5.1 Essai de production et dosage de l’activité enzymatique de souches

bactériennes et archéennes halophiles protéolytiques isolées

d’environnements hypersalins algériens

BENMEBAREK Hania#,KHARROUB Karima ..........................................................................18

CO5.2 Caractérisation de lipase, d’α-amylase et de dioxygénases halothermophiles

à partir de deux archées halophiles extrêmes pour des applications

industrielles prometteuses

KHEMILI-TALBI Souad#, AKMOUSSI-TOUMI Siham, KEBBOUCHE-GANA Salima, LENCHI-

IZOUINE nesrine, FERRIOUNE Imen, SAYAH Amna, ALOUACHE Lamia, SADAOUI-

SMADHI Nesrine, NAJJARI Affef ..........................................................................................19

CO5.3 Production of laccase by a halotolerant Penicillium on Olive Pomace under

Solid State Fermentation

BOUCHERIT Zeyneb#, MECHAKRA Aicha , AMEDAH Souad ...........................................20

CO5.4 Caractérisation des potentialités kératinolytiques d’une souche actinomycète

isolée dans la région de Bejaïa

HAMMA Samir#, BENHOULA Mohammed, BETTACHE Azzeddine, JAOUADI Bassem, BOUCHERBA Nawel ..............................................................................................................21

CO6.1 Probable antitumor activity of serine protease from Helix aspersa Algerian snail

MEBIROUK Romeila#, NAIMI Dalila, AZARKAN Mohamed ...............................................22

CO6.2 Étude comparative d’enzymes à activité coagulante de deux souches

d’actinobactéries autochtones

ZERIZER Habiba#, BOUGHACHICHE Faiza., RACHEDI Kounouz. ......................................23

CO6.3 La xanthine oxydoréductase comme outil prometteur pour le diagnostic des

pathologies hépatiques

MOSBAH Asma#, KHITHER Hanane, MOSBAH Camélia, BENBOUT Amel .......................24

CO6.4 Activité antioxydante de glucuronoxylanes (UXOS) et arabinoxylanes (AXOS)

produits d’hydrolyse d’endoxylanases de Bacillus safensis CBLMA18

BOUICHE Cilia#, SUSANA V.Valenzuela, JAVIER PASTOR F.I, BETTACHE Azzeddine,

MAIBECHE Rima, AZZOUZ Zahra , HAMA Samir, BENHOULA Mohammed,

BENALLAOUA Said, BOUCHERBA Nawel ............................................................................25

CO6.5 Activité anticholinesterase in vitro d’Ephedra nebrodensis contre AchE et BchE.

HAMOUDI Meriem#, AMROUN Djouher, BENSOUICI Chawki , KHENNOUF Seddik,

DAHAMNA Saliha .................................................................................................................26

Communications par affiche

CP1.1 Recherche des enzymes « bêta-lactamases à spectre élargi » et d’autres

molécules bioactives d’origine microbienne.

RAHMANI Amina#, MERADI Larem, ARHAB Rabah ..........................................................27

CP1.2 Extraction et caractérisation biochimique d’une enzyme coagulant le lait issu

de la caillette de Chevreau. Essai de fabrication d’un fromage frais à base de

lait de chèvre.

KAHLOUCHE amal#, BOUMEDIENE Farida, NOUANI Abdelouahab ...............................28

CP1.3 Application d’enzymes d’intérêt biotechnologique produites par des

microorganismes

BOUKEROUI Yasmina#, AISSAOUI Nadia, KLOUCHE KHELIL Nihel ...................................29

CP1.4 Production d’enzyme fongique coagulante le lait sur un milieu à base de sous-

produit agroalimentaire (peau de tomate)

GHEDJEMIS Amina#, DENDOUGA Wassila .........................................................................30

CP1.5 Criblage de microorganismes producteurs de lipases

MEZIANE Nassim#, MEDJMEDJ Ayoub, OUSAADI Mouna Imene ....................................31

CP1.6 Pouvoir des Protéases Bactériennes à libérer des Peptides Antioxydants par

Caséinolyse

ZATER Zohra Yasmine# , ROUDJ Salima ..............................................................................32

CP1.7 The Effect of Viscozyme-Cellulast Mixture on Oil Extraction Yield

CHENNI Fatima Zohra#, HAMENNI Kahina, KUHNLE Gunter G C ....................................33

CP2.1 A comparison between acid and enzymatic hydrolysis of corn starch for

glucose syrups production

TAIBI Hoiria#, BOUDRIES Nadia , ABDELHAI Moufida and LOUNICI Hakim ...................34

CP2.2 Mise en évidence d’activités enzymatiques à intérêt technologique chez

quelques souches de bactéries lactiques.

BACHTARZI Nadia#, MERADJI Meriem, LEKSIR Dalal, KHARROUB Karima. .....................35

CP2.3 Production et purification des coagulases de Bacillus subtilis S3 et Bacillus

coagulans LC28.2.

CHEMLAL Radia#, DJERDJOURI Bahia , BELLAL Mohand Mouloud ...............................36

CP2.4 Optimization and Immobilization of alpha-amylase from Bacillus Subtilis in

calcium alginate and calcium Alginate –cellulosic residue beads.

HERIZI Abdallah#, SOUILAH Rachid , DJABALI Djaffar , NADJEMI Boubekeur ...............37

CP2.5 Suillus granulatus, un champignon comestible riche en enzymes capables de

dégrader les margines, sous-produits de l’industrie oléicole.

KERMANI Ismahan#, FORTAS Zohra, DIB Soulef .................................................................38

CP2.6 Effet de l’addition des enzymes exogènes dans un régime hypocalorique de

poulets de chair sur les performances et les caractéristiques de la viande

ALLOUCHE L.#, MADANI T., AIT HAMOUDA Z .....................................................................39

CP2.7 Valorisation biotechnologique des sous-produits de l’olivier « Margine» par

fermentation submergée

KHELALEF Hind# et BENLOUNISSI Aicha ..............................................................................40

CP3.1 Étude de quelques aptitudes enzymatiques des actinobactéries isolées à

partir des stations d’épuration des eaux usées

BOUFERCHA Oumeima#, BOUDEMAGH Allaoueddine ...................................................41

CP3.2 Mise en évidence des enzymes protéolytiques d’actinobactéries isolées de

compost

BOUTANA Wissem#, ZERIZER Habiba, KHARROUB Karima ................................................42

CP3.3 Isolation of cellulase producing bacteria using spent coffee grounds as sole

carbon source: potential application in lignocellulose saccharification for

bioethanol production

BENAOUAD Sara#, MERAINI Ibtissem, CHOUBANE Slimane .............................................43

CP3.4 Removal of BPA in aqueous solution by immobilized laccase

LASSOUANE Fatiha#, AIT AMAR Hamid , RODRIGUEZ-COUTO Susana ...........................44

CP3.5 Performance of Commercial Enzymatic Preparation in Lignocellulosic Biomass

Hydrolysis

KERNANI Ridha#, HADIOUCHE Dalila ..................................................................................45

CP3.6 Valorisation des déchets végétaux pour la production de cellulases à partir

d’Aspergillus sp. (PRn) isolé localement.

CHEMLAL Radia#, KHERAT Mohamed , BOUKAF Fatma, MOKHNACHE Meriem, STIHI

Loubna Zakia, MAMERI Nabil .............................................................................................46

CP4.1 Isolement et screening des bactéries lipolytiques

BENHOULA Mohammed#, HAMMA Samir, BENSAAD Mohamed Sabri ,AMGHAR

Zahir , BOUDJELAL Aya, AZZOUZ Zahra ,MAIBECHE Rima, BOUICHE Celia, BETTACHE

Azzeddine,BENALLAOUA Said, BOUCHERBA Nawel .......................................................47

CP4.2 Étude de la bioprospection de levures : criblage des activités enzymatiques

d'intérêt biotechnologique.

CHAIB Ibtissem#, DAKHMOUCHE-DJEKRIF Scheherazed , BENNAMOUN Leila , AIT KAKI-

EL HADEF ELOKKI Amel , LABBANI Fatima Zohra Kenza et NOUADRI Tahar. ................48

CP4.3 Optimization of Extracellular L-asparaginase production by Streptomyces

strain isolated in Algeria, using mathematical Modeling.

CHERGUI Achour#, TITOUCHE Yacine, HOUALI Karim ......................................................49

CP4.4 Optimisation de la production de l’enzyme protéase d’origine actinomycétale

MANSOURI Nedjwa#,BENSLAMA Ouide , ARHAB Rabah ................................................50

CP4.5 Optimisation de la production de peroxydase des souches d’actinomycètes

isolées au niveau de la wilaya de Béjaia

MAIBECHE Rima#, LE ROES-HILL Marilize, BENDJEDDOU Kamel, PRINS Alaric, BOUICHE

Cilia , AZZOUZ Zahra, HAMMA Samir, BEN HOULA Mohammed, AMGHAR Zahir,

BETTACHE Azzeddine, BENALLAOUA Said, BOUCHERBA Nawel .....................................51

CP4.6 Application of Pulsed field gel electrophoresis using XbaI restriction enzyme to

study clonal relatedness of Multidrug-resistant E. coli isolates

BENAMEUR Qada#, BEN-MAHDI Meriem-Hind , GERVASI Teresa ....................................52

CP4.7 Optimisation de la production de la polygalacturonase à intérêt industriel par

la levure Aureobasidium pullulans isolée de sol aride saharien (El-M’gheir).

BENNAMOUN L. #, DAKHMOUCHE S. , AIT-KAKI A. , LABBANI F-Z K. , NOUADRI T. ........53

CP4.8 Recherche in silico de nouveaux inhibiteurs de la 1-désoxy-D-xylulose 5-

phosphate réducto-isomérase (DXR) : des agents antimycobactériens

potentiels

BOUCHERIT Hanane# , MERZOUG Amina , CHIKHI Abdelouahab, BENSEGUENI

Abderrahmane, MOSBAH Asma ........................................................................................54

CP5.1 Isolation and characterization of a novel tyrosinase produced by Saharan soil actinobacteria

HARIR Mohammed#, BENHAMED Nadjia, DIB Soulef , POGNI Rebecca................................................................................................................................................55

CP5.2 Isolation and characterization of bacteria of the genera Pseudomonas and

Bacillus with enzymatic potential from a volcanic soil of Ahaggar.

BENAISSA Asmaa#, OUANKILLA Aicha, BEN BESSIS El-Hadja, HABIBI Zaineb ..................56

CP5.3 Isolement et étude biochimique des enzymes amylolytiques chez des souches

d'actinomycètes telluriques isolées à partir de la région de Souk Ahras

SAOUDI Boudjema#, HABERRA Soumaya, AYARI Adel, LADJAMA Ali ..........................57

CP5.4 Recherche de l’activité antibactérienne et enzymatique chez des isolats

d’Actinomycètes isolées à partir d’écosystème extrême d’El Bayadh

AGUIS Hayat#, BENREGUIEG Mokhtar ................................................................................58

CP5.5 Activité protéolytique des actinomycètes de l’extrême

BENHAMICHE Houria#, ZERIZER Habiba, .............................................................................59

CP5.6 Screening de lacoagulase chez des bactéries isolées d’un lac salé Algerien

LENCHI Nesrine#, KEBBOUCHE-GANA Salima , KHEMILI-TALBI Souad , AKMOUSSI-TOUMI

Sihem ....................................................................................................................................60

CP5.7 Production, activité et stabilité de protéases synthétisées par une souche

thermotolérante d’actinobactérie.

RACHEDI Kounouz #, MERADJI Meriem, MAHDJOUB Nour El Houda, ZERIZER Habiba,

BOUGHACHICHE Faiza, KHARROUB Karima ......................................................................61

CP5.8 Actinobactéries thermophiles isolées à partir d’une eau thermale Algérienne :

une source d’alpha amylase thermostable

LEFAIDA Cherifa#, MEDJMEDJ Maya, BOUDEMAGH Allaoueddine ..............................62

CP6.1 Isolement, Screening et caractérisation de levures productrices d’enzymes à intérêt biotechnologique

LABBANI Fatima-Zohra Kenza#, DAKHMOUCHE Schehrazed, BENNAMOUN Leila, AIT-KAKI Amel, NOUADRI Taher ...............................................................................................63

CP6.2 Highlighting of cellulolytic, saccharolytic, pectinolytic activity and scereening

of antibio-resistants prokaryotic species involved in soft rots of vegetables,

collected from different arid areas in the North-eastern of Algeria. Preliminary

study

MERIBAI Abdelmalek# , DIAFAT Abdelouaha, BACHENE Abderahmane ...................64

CP6.3 Inhibition de l’activité de la xanthine oxydase par les extraits de feuilles et de

l’écorce de Fraxinus angustifolia

MEDJAHED Zineb#, ATMANI –KILANI Dina, ATMANI djebbar ...........................................65

CP6.4 Cc-PDE,new purified phosphodiesterase enzyme from snake venom with

biotechnological impact

KIHELI Hamida#, CHERIFI Fatah , LARABA-DJEBARI Fatima ..............................................66

CP6.5 Rôle potentiel des inhibiteurs de protéases d’Echinococcus granulosus dans

l’action anticancéreuse: apport de l’analyse protéomique

ZEGHIR-BOUTELDJA Razika#, TOUIL-BOUKOFFA Chafia ...................................................67

CP6.6 Cc-5’NTase a promising alternative biomolecule in CD73 lack-related

immunodeficiency

SAOUD Samah#, CHERIFI Fatah, LARABA-DJEBARI Fatima ..............................................68

CP6.7 Étude de l’activité enzymatique bioinsecticide de souches

d’actinomycètes isolées à partir de différents sols contre le Tribolium

Rouge de la farine (Tribolium castaneum)

BENSLAMA Ouided#, MANSOURI Nadjwa, ARHAB Rabah .............................................69

CP6.8 Anti-platelet aggregation activity of a novel phospholipase A2 an

enzyme purified from Vipera lebetina snake venom: New tool with

biotechnological applications

KADI-SACI Amel# , Laraba-Djebari Fatima..........................................................................70

CONFÉRENCES PLÉNIÈRES

1

LES JOURNÉES SCIENTIFIQUES NATIONALES SUR LES ENZYMES À APPLICATIONS BIOTECHNOLOGIQUES EN ALGÉRIE

21-22 Décembre 2020, ENSB-CONSTANTINE

P1. Enzymes recovery by Three Phase Partitioning: a focus on

proteases as milk-clotting and meat tenderizing agents

GAGAOUA Mohammed

Food Quality and Sensory Science Department, Teagasc Ashtown Food Research

Centre, Ashtown, Dublin 15, Ireland

[email protected] & [email protected]

Abstract

Among the aqueous purification systems, three phase partitioning (TPP) is an

alternative and cost-effective non-chromatography bioseparation

technique used for the extraction, concentration and recovery/purification

of macromolecules, including enzymes, from different biological sources

(microorganisms, plants and animals).This presentation will serve as a one-

stop-reference to give a snapshotabout the studies that used over the last

two decades this very simple and effective method to purify enzymes with

high and acceptable purity from several sources with a specific focus on

plant proteases.In food industries, proteases are frequently used in myriad

production steps including milk-clotting and meat tenderization.Most of the

plant proteases are cysteine proteinases, namely ficin,papain, bromelain,

zingibain and actinidin. Unfortunately, the number of plant proteases which

have been isolated and characterized still very low. In addition, endemic

plant proteases are of great interest due to their activity over a wide range

of temperature and pHs. For centuries, numerous of the plant proteases

have been used as milk coagulants in Algeria. Some of them are widely

used as meat tenderizers like ficin from Mediterranean Ficuscarica latex

which is also used as a milk-clotting enzyme in cheese-making. In this

presentation, I will further give an overview of the potential of TPP system to

recover proteases from some Algerianendemic plants such as the latex from

Ficuscarica, leaves from Calotropisprocera, juice from Cucumismelo,

sarcocarpe from Cucumissativus, flowers from Capparisspinosa, etc.

Keywords: Three Phase Partitioning, Enzymes purification, Proteases,

Endemic plants, Milk-clotting;Artificial meat tenderization.

mailto:[email protected]


2



P2. Structural biology as a tool to understand and improve enzymes

activity

DJEGHADER Ahmed

Department of Chemical Sciences and Bernal Institute, University of Limerick,

Ireland

[email protected]

Abstract

Biotechnological application of enzymes relies mainly on their ability to

catalyse complex chemical reactions. While the size of these biocatalysts

can range from few hundreds to thousands of amino acids, their activities

reside in a central part composed only by a limited number of residues, the

active site. Enzyme’s activity can be tuned to improve the reaction yield by

increasing the turnover. Thus, understanding how enzymes work is a key step

in the development of more efficient biocatalysts. Structural biology plays a

central role in this process, whereby it allows for the understanding of the

role of amino acids involved in catalysis. Here, different structural biology

techniques will be discussed with a main focus on X-ray crystallography. An

overview of how a protein structure can be obtained and interpreted will

be given through the example of the sulfite oxidase from the thermophilic

bacteria Thermus thermophilus. This protein belongs to the family of

molybdoenzymes and is responsible for sulfite detoxification in human and

linked to energy conservation in bacteria. In addition to its sulfite oxidase

activity, this protein seems to be endowed with a nitrite reductase activity,

opening the way for potential biotechnological application. The high

resolution structure of this protein has been obtained in two different states,

a product analogue bound state and a free state. Structural comparison

between the two structures allowed for a better understanding of the

catalytic mechanism, which opens the door for protein variants with

improved turnover to be engineered.

Keywords: Structural biology, X-ray crystallography, sulfite oxidase.


COMMUNICATIONS ORALES

3



CO1.1 Inhibition of apricot polyphenol oxidase by combinations of

plant proteases and ascorbic acid

DERARDJA Ala eddine#1, BARKAT Malika#1, ROMPEL Annette *2

# Laboratoire de recherche, Biotechnologie et Qualité des Aliments (BIOQUAL), * Laboratoire de chimie biophysique,1 Institut de la Nutrition, de l'Alimentation et des Technologies Agro-Alimentaires

(INATAA), Université Frères Mentouri Constantine1,2 Institut de chimie biophysique, faculté de chimie, Université de Vienne

[email protected]

Abstract

Enzymatic browning is considered to be one of the biggest problems during

apricot handling, storage, preservation and transformation. The browning is

mainly initiated by polyphenol oxidase (PPO). In this context, the main goal

of this research is to evaluate the potential of some plant protease

preparations as inhibitors of enzymatic browning in apricot by studying their

ability to inactivate PPO. In addition, we were also studying the possibility of

a combination between protease preparations and ascorbic acid (AA),

where AA is mainly used to inhibit PPO during the time needed by the

proteases to completely inactivate PPO. Therefore, we selected four plant

cysteine proteases (papain, calotropain, ficin and bromelain), known for

their high proteolytic activity. The proteases were applied in vitro (on purified

PPO), and in situ (on apricot puree) to evaluate their efficiency as PPO

inhibitors. The selected proteases were able to inactivate PPO at pH 4.5,

with the degree of inactivation proportional to incubation time and

protease concentration. The papain was the most effective protease, with

50 μg completely inactivating PPO in less than one hour. AA prevented

browning reactions that occur before or during PPO inactivation by

protease. The combinations AA/proteases were highly effective in vitro,

where 2 mM AA/500 μg proteases inhibited PPO activity completely over 24

h. The combinations AA/proteases were also effective in vivo, as treated

purees preserved their color compared to untreated samples after 10 days

of storage. The results demonstrate that AA/proteases combinations

constitute a promising practical anti-browning method with feasible

application in the food industry.

Keywords: Enzymatic browning, Polyphenol oxidase, Apricot, Plant

proteases, Ascorbic acid.

mailto:%[email protected]

4



CO1.2 Production d’une protéase coagulant le lait par Rhizopus

stolonifer DIV16/2095-2048-1 via SSF: Optimisation par les plans

d’expériences

BENSMAIL Souhila #1, FAZOUANE-NAIMI Fethia*2

#1Département de Biologie, FSNV-ST, Université Akli Mohand Oulhadj, Bouira,

Algérie. *2Laboratoire de Recherche Technologie Alimentaire (LRTA), Université M’Hamed

Bougara, Boumerdès, Algérie.

[email protected] ; [email protected]

Résumé

Les micro-organismes représentent la principale source de protéases utilisées

actuellement dans les différents processus industriels, en raison de leur croissance

rapide, leurs caractéristiques physiologiques et les rendements élevés en produits

élaborés. La principale application des protéases fongiques à acide aspartique

produites naturellement est dans l'industrie laitière comme agents coagulant le lait

pour la fabrication du fromage.

La production d’une protéase coagulant le lait par la souche locale Rhizopus

stolonifer (Ehrenberg) Vuillemin DIV16/2095-2048-1 a été réalisée sous les conditions

SSF (fermentation sur substrat solide). Avant criblage et optimisation statistique, des

expériences préliminaires ont été conduites afin de sélectionner le substrat et sa

quantité, la solution minérale à ajouter au substrat, les effets de certaines sources

supplémentaires de carbone et d'azote. Par la suite, la conception du Plackett et

Burman à 2 niveaux (PBD) a été appliquée dans le but de fixer les facteurs

améliorant de manière significative la production d'enzyme sous les conditions

expérimentales préalablement déterminées.

Le milieu de production a été préparé en utilisant 5 g du son de blé introduits dans

des Erlenmeyers de 250 mL et humidifiés avec la solution minérale M-9 sous les

conditions statiques. L'analyse statistique de la réponse (activité coagulante) par le

logiciel JMP13 Pro® a révélé que les variations du niveau d'humidité (p=0,0030*) et

du temps d'incubation (p=0,0369*) ainsi que l’addition du (NH4)2SO4 (p=0,0318*) et

le CaCl2 (p=0,0382*) au substrat ont un effet significatif sur la production de la

protéase coagulante. La température d’incubation, le pH de la solution minérale,

la taille d’inoculum et l'ajout de xylose, comme autres facteurs du PBD, n'affectent

pas de manière significative l’activité enzymatique. L'analyse de la variance pour

la réponse indique que le modèle est significatif (R2=98,03%, R2adj=92,78%,

pvalue=0,0175*). La production de la protéase a été multipliée par un facteur de

1,53 en utilisant le plan composite centré (CCD) pour atteindre une valeur de

705,9±34,94 US/mL sur la base des résultats obtenus par le PBD.

Mots-clés: Rhizopus stolonifer, protéases, fermentation, plans d’expériences,

activité coagulante.



5



CO1.3 Purification et caractérisation d’une protéase d’origine

microbienne (Mucor circinelloides SF15) et évaluation des

propriétés rhéologiques d’un fromage fondu.

BOUMEDIENE Farida#1, KAHLOUCHE Amel*2

#1 Université Dr.YAHIA Fares de MEDEA2 Ecole supérieure de science de l’aliment et des industries agroalimentaires

[email protected]

Résumé

L'obtention de coagulants naturels du lait constitue un défi, car la

disponibilité de la présure est limitée par rapport à la demande croissante

de l'industrie laitière. Ces dernières années, de très nombreux travaux sont

portés sur les protéases d’origine fongique, qui au plan pilote ont donné très

tôt des résultats souvent comparables et parfois supérieurs à ceux obtenus

avec la présure commerciale. C’est dans ce cadre d’investigation que

nous avons entrepris l’étude de protéase coagulant le lait d’origine

fongique (Mucor circinelloides SF15).

Dans un premier temps, un isolement et une identification par biologie

moléculaire ont été réalisés sur une souche fongique dont la séquence

génomique a été enregistrée au niveau de la base NCBI avec un code de

MH368140. Il s’agit de Mucor circinelloides. Les propriétés biochimiques ont

été mises en évidence sur les fromages fabriqués.

La pâte à fromage préparée dans le but de l’intégrer dans la fabrication du

fromage fondu en remplacement partiel du Cheddar en utilisant différents

coupages entre la présure commerciale et l'extrait pré purifié de Mucor

SF15.

La détermination du comportement rhéologique des fromages confirme

leur texture fondue tartinable. En effet, l’échantillon issu du coupage 60/40

est considéré comme le plus visqueux, autrement dit c’est le fromage le plus

mou et facile à tartiner. Toute fois, l’analyse des courbes de contrainte de

cisaillement obtenues montre que le fromage fabriqué à l’échelle de

laboratoire ne manifeste pas réellement un comportement rhéofluidifiant

contrairement à la mesure de la viscosité.

Mots-clés : présure ; protéase ; Mucor circinelloides SF15 ; fromage fondu à

tartiner; Rhéologie.


6



CO2.1

Optimisation des conditions de coagulation enzymatique du lait

de chèvre avec la présure caprine par la méthode des surfaces

de réponse

BOURAS Biya*1,2, Ouarda AISSAOUI ZITOUN 2, BOUBRIK Fairouz3, BENYAHIA

Ferial Aziza2

1Université Echahid Hamma Lakhdar, El Oued

2Laboratoire du Génie Agro-Alimentaire (GENIAAL)1-INATAA, université

Frères Mentouri, Constantine1

[email protected]

Résumé

La coagulation du lait est considérée comme la clé de la réussite de toute

fabrication fromagère. Elle consiste à la formation d’un gel suite à des

modifications physico-chimiques intervenant sur les micelles de caséines. La

qualité du gel lactique obtenu dépend du type d’enzyme et des conditions

de coagulation, dont le pH et la température. L’objectif de ce travail est

l’étude de l’activité de la présure caprine extraite selon le protocole de

Wangoh et al. (1993) et l’optimisation de ses conditions de coagulation

dans le lait de chèvre. Les conditions de coagulation : pH et température

sont optimisées par l’application de la méthode des surfaces de réponses

(plan composite central à deux facteurs). Les résultats d’extraction

montrent que la présure caprine présente une activité coagulante

UP, une force coagulante 1/2531,64 US et une teneur en protéine 01ة1,49±0

8,8±0,2 mg/ml. Concernant l’optimisation, notre étude a montré que le pH

a un effet significatif unique et un effet quadratique positif sur le temps de

floculation du lait de chèvre par contre pour le temps de coagulation nous

avons noté un effet linéaire et quadratique (effet positif).

Mots-clés : Présure caprin, coagulation, chèvre, optimisation, surface de

réponse.


7



CO2.2 Production et caractérisation d’α-amylase fongique : Essai

d’application en panification

AIT KAKI Amel1,2, BENNAMOUN L.2, DJEKRIF DAKHMOUCHE S.2, LABANI FZ K.2,

EL- HADEF EL-OKKI M.1,3, & MERAIHI Z.2

1 Institut de la Nutrition, de l’Alimentation et des Technologies Agro-Alimentaires,

Université Frères Mentouri-Constantine 1. 2 Laboratoire de Génie Microbiologique et Applications, Université Frères Mentouri-

Constantine 1. 3 Laboratoire de Biologie et Environnement, Université Frères Mentouri-Constantine1

[email protected]

Résumé

Le champ d'application des enzymes ne cesse de s'élargir. Le marché

mondial des enzymes est estimé à 7,4 milliards de dollars, avec une

augmentation de 4 % par an. Les amylases constituent une classe

d'enzymes industrielles occupant environ 25 % du marché des enzymes. En

effet, le marché mondial de l’α amylase utilisée en boulangerie à lui seul

devrait atteindre 320,1 millions de dollars d'ici 2024.

La production d’α-amylase fongique sur un milieu optimisé à base de farine

de dattes déclassées a révélé une production maximale de 11034 UI, au

bout de 28 h d’incubation. La caractérisation de l’enzyme partiellement

purifiée a révélé un pH optimum de 5 et une température optimale de 60°C.

L'enzyme est stable à 80 °C et à 90 °C.

La performance de l’α-amylase produite est testée dans le processus de

fabrication du pain à base de farine et comparé à la même enzyme

importée et utilisée localement dans la fabrication du pain. L’essai

d’incorporation de cette enzyme a induit une augmentation du volume

spécifique et du rapport hauteur / largeur du pain, de 0,72 cm3/g et 0,2

respectivement, par rapport au témoin. Cette augmentation est supérieure

à celle induite par l'α-amylase commerciale importée, qui atteint 0,49

cm3/g et 0,1 respectivement. Ces résultats suggèrent l’intérêt de

l’application de cette enzyme en panification pour remplacer les amylases

importées et les additifs constitués de produits chimiques et d’émulsifiants

classiquement utilisés en panification afin d’améliorer les propriétés

texturales, rhéologiques et la saveur du pain d’une part et d’autre part,

limiter la vitesse de rassissement du pain.

Mots-clés : α-amylase fongique, panification, texture, rhéologie,

rassissement.


8



CO2.3 Étude de la production et la caractérisation d’α-amylase de

Clavispora lustaniae et Pichia guilliermondii isolés de blé des

zones arides.

DAKHMOUCHE-DJEKRIF Scheherazed 1*, AIT KAKI- EL HADEF ELOKKI Amel 2,

BENNAMOUN Leila 2, LABBANI Fatima Zohra Kenza2, CHAIB Ibtissem2 et

NOUADRI Tahar2.

1 ENS Assia DJEBAR, Constantine. 2 Laboratoire de Génie Microbiologique et Applications (GMA). Université Frères Mentouri

(UFM), Constantine 1.

[email protected]

Résumé

La production de l'α-amylase extracellulaire thermostable chez les souches locales

de Clavispora lusitaniae et Pichia guilliermondii a été réalisée. Les résultats ont

montré que les deux souches produisent l’α-amylase : 13630 UI pour Clavispora

lusitaniae et 13344,5 UI pour Pichia guilliermondii. La purification de l’enzyme

consiste à l’utilisation de l’acétone qui a permis l’augmentation de l’activité

spécifique de l’α-amylase de 215.60 à 691.28 UI/mg pour Clavispora lusitaniae et

de 271.90 à 677.39 UI/mg pour Pichia guilliermondii. Chez les deux souches, le profil

chromatographique de gel filtration sur sephadex G 75 montre l’existence de deux

fractions protéiques contenant des activités α-amylasiques dont le 2éme pic

renferme les fractions protéiques et les activités enzymatiques les plus élevées.

L’étude des caractéristiques physico-chimiques des α-amylases purifiées a montré

que le pH optimum, la température optimale de l’enzyme de Clavispora lusitaniae

sont de 8 et 70 °C, ceux de l’α-amylase de Pichia guilliermondii sont de 6 et 60°C et

ceux de l’enzyme commerciale sont de 9 ,40°C. L’étude de la thermostabilité des

trois enzymes a révélé une excellente stabilité car après incubation de 120 min à

80°C, l’enzyme de Clavispora lusitaniae garde 99,43% de son activité initiale. Pour

Pichia guilliermondii, l’enzyme maintient 99,21% de son activité. Quant à l’enzyme

commerciale, elle conserve 99,18 de son activité. L’effet des ions métalliques sur

l’activité α-amylasique de Clavispora lusitaniae, Pichia guilliermondii, et l’enzyme

commerciale montre que le MgCl2 est un inhibiteur pour les trois enzymes (99.74%,

99.27% et 99.92% respectivement). Pour le ZnSO4, il augmente l’activité de 120,45%,

120.05 % et 118,86% respectivement). Quant à CaCl2, il augmente l’activité

enzymatique de l’amylase de Pichia guilliermondii (115%) et commerciale (113,86%)

et il diminue légèrement celle de Clavispora lustaniae (99,4%). Les performances

des enzymes amylolytiques de ces deux souches de levure (isolées d'un

environnement saharien aride) les qualifient de souches d'utilité industrielle en

particulier celle de l’amidon, du textile et des détergents pour l’amylase de

Clavispora lusitaniae puisque c’est une enzyme alcalothermostable et dans les

industries agroalimentaires et pharmaceutiques pour l’enzyme de Pichia

guilliermondii car c’est une enzyme acidothermostable.

Mots-clés : α-amylase, Clavispora lusitaniae, Pichia guilliermondii, thermostabilité,

purification.


9



CO2.4 Degradation of Fusarium cell walls by lytic enzymes of potential

biocontrol Trichoderma isolates

DENDOUGA Wassila 1, GHEDJEMIS Amina 2, BOUREGHDA Houda 2

1 Laboratory of Biodiversity of Ecosystem and Dynamic Production of Agriculture

System in Arid Regions, University of Biskra, Algeria. 2Laboratory of Phytopathology and Molecular Biology, National High School of

Agronomy (ENSA), El-Harrach, Algiers, Algeria.

[email protected]

Abstract

Trichoderma is one of the most exploited fungal biocontrol agents in

agriculture to manage plant diseases caused by a wide number of fungal

pathogens. Fourteen strains of Trichoderma spp. were isolated from Algerian

desert soils and assessed for their biocontrol potential against Fusarium

crown and root rot of wheat. Identity of Trichoderma spp. was confirmed by

genetic analysis performed by sequencing the ITS1- 5.8S-ITS2 rRNA region. In

vitro tests have been carried to evaluate the sporulation of Trichoderma

spp. and their possible production of diffusible substances. Results obtained

with all Trichoderma spp. isolates showed significant decrease in colony

diameter and sporulation of Fusarium species compared to the control. In

direct confrontation, Trichoderma harzianum and T. viride isolates were able

to overgrow and sporulate above F. culmorum colonies which reflect their

high mycoparasitic potential. The efficiency of all Trichoderma spp. isolates

under greenhouse conditions was evaluated during the first week of

germination and 30 days after sowing. Disease incidence and severity of the

seedlings treated with Trichoderma spp. were significantly less than the

control inoculated only with pathogen. The highest disease index decrease

(>70 %) was obtained with the two isolates of T. harzianum (Thr.4 and Thr.10)

and T. viride Tv.6. Lytic enzymes (CWDE) production by Trichoderma spp.

isolates was tested in liquid cultures containing fungal cell walls of each

pathogen as sole carbon source. Higher levels of chitinase, β-1, 3-glucanase

and protease activities were induced by hyphal cell walls of F. graminearum

than cell walls of F. verticillioides and F. culmorum. T. harzianum Thr.4 was

exhibited the highest enzyme activities with hyphal cell walls of F.

graminearum and F. culmorum. However, in the medium amended with cell

wall of F. verticillioides, maximal lytic activities were recorded for T. viride

Tv.6. Lytic enzymes activities (CWDE) of Trichoderma isolates were positively

correlated with disease reduction potential.

Key words: Lytic enzymes, Trichoderma, biocontrol, Fusarium, wheat.


10



CO3.1 Rétrospectives des travaux du laboratoire de Microbiologie

Appliquée sur les endoxylanases bactériennes (2005-2020)

BOUCHERBA Nawel1, BOUICHE Celia1,2, HEBAL Hakim1,3 BETTACHE

Azzeddine1, AZZOUZ Zahra1,4, BOUANANE-DARENFED Amel5, BOUACEM

Khelifa5, JAOUADI Bassem6. SUSANA V. Valenzuella2, COPINET Estelle 7,

DUCHIRON Francis7

1 Laboratoire de Microbiologie appliquée, Faculté des sciences de la nature et de la vie, Université de

Bejaia, Targa Ouzemmour, 06000 Bejaia, Algérie 2 Department of Genetics, Microbiology and Statistics, Faculty of Biology, University of Barcelona, Av.

Diagonal 643, 08028 Barcelona, Spain 3 Department of Chemistry, FI-00014, University of Helsinki, Finland 4 Biotechnology for Lignocellulosic Biomass Group, Centro de Investigaciones Biológicas (CIB-CSIC),

c/Ramiro de Maeztu 9, 28040 Madrid, Spain. 5 Laboratory of Cellular and Molecular Biology (LCMB), Microbiology Team, Faculty of Biological

Sciences, University of Sciences and Technology Houari Boumediene (USTHB), P.O. Box 32, El Alia, Bab

Ezzouar, 16111, Algiers

6 Laboratory of Microbial Biotechnology and Engineering Enzymes (LMBEE), Centre of Biotechnology of

Sfax (CBS), University of Sfax, Road of Sidi Mansour Km 6, P.O. Box 1177, Sfax 3018, Tunisia 7 UMR FARE 614 INRA/URCA, Laboratory of Industrial Microbiology, UFR Sciences, University of Reims

Champagne-Ardenne, Moulin de la Housse, BP 1039, 51687 Reims, France

[email protected]

Résumé

L’Algérie qui est un pays producteur de pétrole vise à relever aussi les défis de promouvoir

de nouvelles sources d’énergie pour contribuer progressivement à la satisfaction de la

demande nationale attendue dans les décennies à venir, tout en préservant les ressources

en hydrocarbures en place, c’est pour cette raison qu’il est primordial d’accompagner les

acteurs de la promotion et du développement des énergies renouvelables. Nous travaillons

depuis 2005 sur les enzymes de la bioconversion de la biomasse végétale en l’occurrence

les endoxylanases qui catalysent la réaction d’hydrolyse du xylane en xylooligosaccharides

et enfin le xylose est transformé en bioéthanol, l’Algérie peut devenir un grand producteur

de pâte à papier à partir de déchets de palmier-dattier (20 000 000 palmiers dattiers), le

papier kraft pourra être blanchis avec des préparations de xylanases produites localement.

Dans ce résume nous donnerons un aperçu général sur les endoxylanases produites par des

souches locales, la première souche est une actinomycète nommé Jonesia denitrificans

BN13 (Boucherba et al., 2011), sa xylanase 4 possède un PM de 42 Kda. Cette dernière est

active à pH 7,0 et à 50°C, son temps de demi-vie est de 9,34 h à 50°C (Boucherba et al.,

2014). Une deuxième souche nommée Bacillus safensis CBLMA18 produit deux xylanases, la

Xyn11A ayant un PM de 22,5 kDa tandis que la seconde xylanase Xyn10B correspond à une

enzyme de 48 kDa. Xyn11A affiche une activité plus élevée sur les glucuronoxylanes, avec

un optimum à pH 8 et 50 ºC, et un Vmax de 5281 U/mg avec le xylane de hêtre, tandis que

la Xyn10B a une spécificité élevée vis-à-vis des arabinoxylanes, avec un optimum de pH à 7

et à une température de 60 ºC, et un Vmax de 50,29 U/mg avec l'arabinoxylane de seigle

(Bouiche et al., 2019), une étude collaborative a été menée sur la purification et la

caractérisation de l’endoxylanase produite par Caldicoprobacter algeriensis (Bouacem et

al., 2014 ; Bouanane-Darnefed et al., 2016).

Mots-clés : endoxylanases, purification, caractérisation, Jonesia denitrificans BN13, Bacillus

safensis CBLMA18.

11



CO3.2 Extraction et purification partielle d’une cellulase d’origine

microbienne sur un déchet de type papier

BELLEBCIR Anfal#1, BENAYED Rofida1, BENLOUNISSI Aicha1

1 Laboratoire de recherche en Bioengineering, Ecole Nationale Supérieure de

Biotechnologie (ENSB)

[email protected]

Résumé

Les déchets de papiers sont considérés comme une source

lignocellulosique majeure en raison de leur teneur élevée en cellulose, cette

caractéristique les rend exploitables dans le domaine de la biotechnologie

comme des substrats pour la production des enzymes par les

microorganismes, l’une des moisissures qui possède un pouvoir de

production de cellulases très important est la souche A. niger, pour cette

raison une culture d’A. niger est réalisée par fermentation submergée en

utilisant le carton comme seul substrat pendant 7 jours. Le suivi de la

croissance de la moisissure montre une production maximale de l’enzyme

extracellulaire « la cellulase » après 96 heures d’incubation avec une activité

enzymatique de 8.13U. Une purification de cette dernière par précipitation

au sulfate d’ammonium à 80%, dialyse, chromatographie d’exclusion

moléculaire (gel Sephadex-G50) et chromatographie échangeuse d’ions

(DEAE-Sepharose) est réalisée, ces étapes ont permis d’éliminer 95% de

protéines non actives. Les sous-unités de l’enzyme partiellement purifiée

montrent une bande visible sur gel de polyacrylamide obtenue par SDS-

PAGE dont le poids moléculaire avoisine les 14KDa. L’activité cellulolytique

est mise en évidence par zymographie en présence de la cellulose pure.

Mots-clés : Aspergillus niger, fermentation submergée, carton, cellulase.



12



CO3.3 Les enzymes microbiennes, outils clés de la biotechnologie

industrielle et environnementale: Cas des hydrolases et

oxidoréductases

JAOUADI Bassem 1,*, MECHRI Sondes 1, ZARAI JAOUADI Nadia 1, BOUACEM

Khelifa 2, ALLALA Fawzi 2, HACENE Hocine 2, BOUANANE-DARENFED Amel 2 &

ABDELMALEK Badis 2,4

1 Laboratoire de Biotechnologie Microbienne, Enzymatique et de Biomolécules (LBMEB), Centre de

Biotechnologie de Sfax (CBS), Université de Sfax, Route Sidi Mansour Km 6, BP 1177, Sfax 3018, Tunisie. 2 Laboratoire de Biologie Cellulaire et Moléculaire, Equipe de Microbiologie, Université des Sciences et

Technologie Houari Boumediene (USTHB), BP 32 El Alia, Bab Ezzouar Alger, Algérie. 3Laboratoire de Chimie des Substances Naturelles et de Biomolécules (LCSN-BioM), Faculté des Sciences,

Université de Blida 1, Route de Soumaâ, BP 270, Blida (09000), Algérie. 4 Centre National de Recherche et de Développement de la Pèche et de l’Aquaculture (CNRDPA), 11

Boulevard Colonel Amirouche, Bou Ismail, Tipasa.

[email protected]

Résumé

Le marché mondial des enzymes est en nette progression essentiellement du fait de l’intérêt

que portent ces dernières à l’environnement et aux industries dites propres. Selon Freedonia

Group (www.FreedoniaGroup.com) aux États Unis, la demande en enzymes sera estimée à

7 milliards de dollars en 2017. En effet, l’utilisation des enzymes devient une solution pour

remplacer les produits chimiques polluants et toxiques, traditionnellement utilisés dans

l’industrie. Ces enzymes permettent de développer des bioprocédés plus spécifiques, très

sélectifs et moins polluants et d’effectuer les réactions dans des conditions plus douces. En

plus, leurs actions ne génèrent pratiquement pas de produits secondaires indésirables. Les

enzymes utilisables industriellement doivent catalyser les réactions à des pH et des

températures particuliers, résister aux conditions de formulation et présenter une très grande

spécificité. Actuellement, les protéases représentent le groupe d’enzymes le plus

commercialisé et utilisé en biotechnologie industrielle grâce aux avantages qu’elles

présentent surtout dans la substitution des agents chimiques toxiques. En effet, ce groupe

d’hydrolases couvre 65% du marché total des enzymes. Ainsi, dans le cadre d’une

collaboration scientifique, entre le LBMIE-CBS (Sfax, Tunisie) et le CNRDPA (Bou Ismaïl, Tipaza,

Algérie) et la FS-Université de Blida 1 (Blida, Algérie), soutenue par le projet de recherche

conjoint tuniso-algérien « TNDZ-MicrooZymes 2012-2018_Code TA/04/2012 », nous avons

réalisé des études biochimiques et des essais à l’échelle pilote et industrielle en détergence

et traitement de cuir de plusieurs protéases et kératinases bactériennes issues de souches

isolées de différents biotopes de la Tunisie et de l’Algérie. Les peroxydases sont des enzymes

universelles. Elles sont des hémoprotéines dont le groupement prosthétique est l’hème. Elles

utilisent le peroxyde d’hydrogène comme accepteur d’électrons ou d’autres peroxydes, tels

que les lipides hydroperoxydes, pour catalyser les réactions d’oxydation. Elles catalysent des

réactions d’oxydoréduction impliquant la réduction d’un peroxyde et l’oxydation d’un

substrat, variable d’une classe de peroxydase à une autre. Ainsi, dans le même cadre de

collaboration tuniso-algérienne, nous avons d’écrire pour la première fois quatre

peroxydases à acides humiques (nommées HaP) formant une nouvelle classe de

peroxydases à partir de souches de Streptomycètes non mentionnées dans la littérature

«Actino de classe II type HaP 1/2/3/4».

Mots-clés: Protéases; Kératinases; Peroxydases; Détergence; Traitement de cuir;

Biotechnologie.

13



CO3.4 Bioconversion of the lignocellulosic biomass residues and

biotechnological production of fungal xylanase in solid-state

fermentation

AZZOUZ Zahra *1, BETTACHE Azzeddine 1, BOUICHE Celia, MAIBECHE Rima1,

HAMMA Samir1, AMGHAR Zahir1, BEN HOULA Mohammed1, ALIANE Wahiba2,

BOUCHERBA Nawel 1, BENALLAOUA Said 1

1 Laboratoire de Microbiologie Appliquée (LMA), Département de Microbiologie,

Faculté des Sciences de la Nature et de la Vie, Université de Bejaia, 06000, Bejaia,

Algérie 2 Laboratoire de caractérisation, valorisation des ressources naturelles, Université

Mohamed El Bachir El Ibrahimi, Bordj Bou-Arreridj, Algérie

[email protected]

Abstract

Most of the lignocellulosic biomass residues are decomposed and

transformed by a variety of microbes in the natural environment. Along with

the augmentation of green chemistry, the offer of retraining economy and

sustainable development designs, conversion, and research in the

application of lignocellulosic biomass feedstock is highly appreciated and

widely used. Xylan is the central hemicellulosic component in several

lignocellulosic biomass which can be hydrolyzed by xylanolytic enzymes.

The xylanase production from Aspergillus niger strain BG has been produced

approach using wheat bran under solid state fermentation (SSF). Effect of

the incubation period, initial pH, medium moisture content, and cultivation

temperature on the xylanase production has been optimizing using one

factor at a time approach (OFAT). Further, experiments were designed with

a Box–Behnken design (BBD) on the same variables using response surface

methodology (RSM). Analysis of variance was carried out and the xylanase

production was expressed with a mathematical equation depending on the

factors. Maximum xylanase yield after RSM optimization was important

(986.82±0.44U/ml) than optimized with OFAT conditions (695,95 ± 0.03U/ml).

The effects of individual, interaction and square terms on xylanase

production were represented by means of the non-linear regression

equations with significant R2 and P-values. An optimized value was obtained

with a media pH of 2.5 in 66 hours (h) at 37 °C using wheat bran as a

substrate humidified to 84%. Xylanase production from Aspergillus niger

strain BG using RSM is considered advantageous because the rate of

enzyme production is higher than other fungi.

Mots-clés : Conversion, optimization, xylanase, lignocellulosic biomass

residues, solid state fermentation.


14



CO3.5 Isolement, purification et caractérisation d’une pectate Lyase

thermostable et alkalophile chez une espèce d’actinomycète

thermophile, Actinomadura keratinilytica CPt20, isolée du

compost de poulet (région Annaba).

SAOUDI Boudjema*1-#2, HABERRA Soumaya#2, KEROUAZ Bilal #2, HABBECHE

Amina#2, AYARI Adel*1, BEN ROMDHANE ZAMEN&3, BELGHITH Hafedh&3,

GARGOURI Ali&3, LADJAMA Ali#2

(*1) Laboratoire des Ecosystèmes Aquatiques et Terrestres (LEAT), Faculté des

Sciences de la Nature et de la Vie, Université Mohamed Cherif Messaadia, Route

de Annaba, BP 1553- Souk Ahras- 41000 Algérie.

(#2) Laboratoire de Biochimie et de Microbiologie Appliquée (LBMA).

Département de Biochimie, Faculté des Sciences, Université Badji Mokhtar BP12-

Annaba-23000 Algérie.

(&3) Laboratoire de Biotechnologie Moléculaire des Eucaryotes (LBME).

Centre de Biotechnologie de Sfax,BP 1177.3018 Sfax- Tunisie.

[email protected]

Résumé

Dans ce travail de recherche, 29 espèces d’actinomycètes thermophiles

secrètent des pectinases extracellulaires ont été isolées. La souche Cpt20

semble être la plus active par sécrétion de pectate lyase (Pel-20), celle-ci a

été choisie pour une étude plus approfondie. L’identification moléculaire

de l’ARNr16S a permis de classer cette espèce comme étant Actinomadura

keratinilytica Cpt20. L’optimisation du milieu de production de la Pel-20 a

permis d’avoir un niveau d’activité de l’ordre de 21101,32 UI/ml. Par la suite

cette enzyme a été purifiée et caractérisée. La Pel-20 s’est révélé un

monomère de masse molaire 34 kDa par SDS-PAGE et 33,12511 kDa par

MALDI-TOF/MS. La séquence de l’extrémité NH2-terminale de la Pel-20

(GFATNQGGTTGGAGGTLS), montre une forte homologie avec la

superfamille des pectate lyases. La Pel-20 a un pH optimum de 10,5 et une

température optimale de 70°C. L’enzyme est inhibée par l'EDTA et activée

par le calcium à 1mM ce qui confirme son appartenance à la superfamille

des pectate lyases. Le substrat préférentiel de cette enzyme est la pectine

faiblement estérifiée (32%). La thermoactivité et la thermostabilité de la Pel-

20 ont été améliorées en présence de 1 mM de Ca2+. En conclusion, les

propriétés d'alcaliphilicité et de thermostabilité de Pel-20 ont permis de dire

que cette enzyme est un candidat potentiel pour des applications futures

dans les bioprocédés industriels.

Mots-clés: Actinomycètes thermophiles; Pectate lyase; Alcalophile;

Purification.


15



CO4.1 Dédoublement cinétique enzymatique des 𝜷-aminoalcools :

Acylation et hydrolyse en milieu organique

ALALLA A.1#, MERABET-KHELASSI M.1, ARIBI-ZOUIOUECHE L.1, RIANT O.2

1Laboratoire de Catalyse Asymétrique EcoCompatible. Université Badji Mokhtar

Annaba. B.P 12, 23000 Annaba, Algerie, 2Université Catholique de Louvain, 1348

Louvain La Neuve, Belgique #Ecole Nationale Supérieure de Biotechnologie – Taoufik Khaznadar - Constantine

[email protected]

Résumé

Les aminoalcools, sous leurs formes optiquement actives, jouent un rôle

important en chimie moderne. Leur domaine d’utilisation prédomine en

chimie pharmaceutique. Le développement et la mise au point des modes

d’accès aisés aux dérivés β-aminoalcools énantiomériquement pures est

d’une grande importance dans la synthèse des molécules présentant un

intérêt potentiel en chimie thérapeutique.

Dans ce travail, nous présentons l’étude du dédoublement cinétique par

acylation et hydrolyse enzymatique des β-aminoalcools, nous examinons la

N- et/ou O-acylation ainsi que l’hydrolyse de ces molécules

polyfonctionnelles par catalyse avec des lipases. L'efficacité de ces

biocatalyseurs (activité, chimiosélectivité et stéréosélectivité) en font une

bonne alternative aux processus chimiques pour la synthèse d’amino-

alcools optiquement enrichis.

Nous décrivons ainsi une méthode hautement énantiosélective pour

accéder à quelques β-aminoalcools d’intérêt pharmacologique, et ce, en

combinant deux voix de synthèse obéissants aux critères de chimie verte :

La première, permet d'accéder aux β-aminoalcools racémiques via la

réaction d’Henry modifiée et la seconde, consiste en l’utilisation d'une

réaction d’hydrolyse enzymatique en milieu organique alcalin hautement

énantiosélective avec la CAL-B. Les résultats obtenus montrent une haute

affinité de la CAL-B avec des sélectivités atteignaient E> 200.

Mots-clés : β-aminoalcools, catalyse enzymatique


16



CO4.2 Étude de l’α-amylase TfAmy48 pour une application en

détergence

ALLALA Fawzi#1, BOUACEM Khelifa#1, JAOUADI Bassem#2 et BOUANANE-

DARENFED Amel#1.

#1 Laboratoire de Biologie Cellulaire et Moléculaire (LBCM), Equipe de

Microbiologie, Faculté des Sciences Biologiques, Université des Sciences et

Technologies de Houari Boumediene (USTHB), BP 32, El Alia, Bab Ezzouar, 16111

Alger, Algérie. #2 Laboratoire de Biotechnologie Microbienne, Enzymatique et de

Biomolécules (LBMEB), Centre de Biotechnologie de Sfax (CBS), Université de Sfax,

Route de Sidi Mansour Km 6, BP 1177, Sfax 3018, Tunisie.

[email protected]

Résumé

Les enzymes sont utilisées dans les formulations détergentes depuis les années 1960

afin de surmonter l'eutrophisation de l'eau causée par les détergents au phosphore.

Les protéases, les amylases, les lipases et les cellulases ont été utilisées pour

dégrader les taches de protéines, de glucides et de lipides sur les vêtements.

Aujourd’hui, les amylases sont largement utilisées dans les produits de nettoyage,

principalement les lessives et les détergents à vaisselle. La capacité d'hydrolyser

l'amidon dans les taches alimentaires augmente considérablement la capacité du

détergent à éliminer ces taches. Elles sont aussi utilisées pour éliminer les résidus

d'amidon insolubles pendant le lavage de la vaisselle.

Au cours cette étude, une α-amylase bactérienne thermostable (TfAmy48) issue de

Tepidimonas fonticaldi HB23 a été purifiée et caractérisée afin de servir de bio-

composant dans la formulation des détergents liquides et solides à usage

domestique. Pour cela, des tests de compatibilité et de stabilité avec plusieurs

détergents commerciaux (locaux et étrangers) ont été réalisés. Les caractéristiques

de l’enzyme ont montré que l’activité optimale est située à pH8 et à une

température de 70 °C en l'absence de calcium et à 80 °C en présence de CaCl2

à 5 mM. Les résultats ont aussi révélé que TfAmy48 n’était pratiquement pas inhibée

par l’EDTA et l’EGTA. L’analyse des performances de l’α-amylase TfAmy48 (en

comparaison avec l’enzyme commerciale Termamyl® 300L) en présence de divers

détergents ainsi que leurs constituants a montré des résultats d’activité relative et

résiduelle très concluants, souvent meilleurs que celles de l’enzyme commerciale.

Assurant un impact réduit sur l’environnement (biodégradabilité et aucun impact

nocif sur les processus de traitement des eaux usées), moins d'utilisation de polluants

tels que le phosphate, et une efficacité de lavage équivalente ou parfois meilleure,

l’α-amylase TfAmy48 se présente comme un bio-additif détergent très prometteur

et avantageux.

Mots-clés : α-amylase, détergents, thermophile


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CO4.3 Transglutaminase and its applications in microencapsulation

DJOULLAH Attaf#

#Division de Recherche-Développement/CFT, Ministère de la Défense Nationale

[email protected]

Abstract

Microbial transglutaminase (MTGase) is an enzyme widely used in foodstuffs

to improve textural and functional properties of proteins (restructuration of

meat, fish, and seafood products). MTGase catalyses acyl-transfer reactions

between carboxyamide groups (acyl donors) of glutamine residues and ε

amino group of lysines (acyl aceptors) in proteins, leading to the formation

of ε-(γ-glutamyl)-lysine (G-L) crosslinks. The resulting isopeptide bonds

contribute to the formation of a stable protein network via intermolecular

and intramolecular cross-links. Furthermore, it is anticipated that processing

of protein isolates with MTGase, modifying their technofunctional properties,

will open up new areas of applications such as microencapsulation of

bioactive molecules. In this work riboflavin was encapsulated in pea proteins

microparticles prepared by subsequent emulsion-enzymatic gelation

process. Total pea proteins fraction containing 20% albumins and 80%

globulins was prepared from pea flour by alkaline extraction (pH8) and

ultrafiltration process. Treatment of 15% (w/w) pea proteins by

transglutaminase (20 Units/g of protein) at pH 7 and 45°C led to the

formation of strong gel (G’= 2000 Pa) with a good water holding capacity

(95%). These gel properties were exploited to form microparticles (150 µm)

from a water-in-oil emulsion followed by enzymatic gelation. Because of low

emulsifying property of pea proteins, addition of surfactant was required to

form individual spherical microparticles. The produced microparticles were

practically insoluble in gastrointestinal media in the absence of enzymes

and slowly degradable in the presence of enzymes. The encapsulation

yields were satisfactory and depending on the microparticles size and the

amount of charged riboflavin. The release mechanisms of riboflavin in

digestive environments are governed by a diffusion phenomenon in the

absence of enzymes and by support degradation phenomenon in the

presence of enzymes. This study indicates that pea proteins microparticles

prepared by subsequent emulsion-enzymatic gelation process can be used

as nutraceutical delivery systems.

Keywords : transglutaminase, enzymatic gelation, emulsion, pea proteins,

encapsulation.


18



CO5.1 Essai de production et dosage de l’activité enzymatique de

souches bactériennes et archéennes halophiles protéolytiques

isolées d’environnements hypersalins algériens

BENMEBAREK Hania1,2,KHARROUB Karima1,2

1Laboratoire de Biotechnologie et Qualité Alimentaire (BIOQUAL) ; 2Institut de la Nutrition de l’Alimentation et des Technologies Agro- Alimentaire

(INATAA) ;

7ème kilomètre, Route de Ain Smara, Constantine 25000, Algérie.

[email protected]

Résumé

Le présent travail a été effectué sur 133 souches halophiles, isolées sur milieu

MGM à 12 et 23% (p/v) de sel. Un criblage des activités protéolytiques

extracellulaires, réalisé sur le même milieu additionné à chaque fois de

caséine ou de gélatine à 1% (p/v), a permis de sélectionner 24 souches

bactériennes et 21 souches archéennes présentant un précipité autour des

colonies pour la caséine et/ou un halo translucide (après addition du réactif

de Frazier) pour la gélatine. L’essai enzymatique a été réalisé sur milieu

liquide en micro- culture sur tube Eppendorf de 2 mL. Le dosage de l’activité

protéolytique en utilisant l’Azocaséine comme substrat, en présence à

chaque fois de témoins positifs et négatifs a démontré des résultats

intéressants pour 10 souches parmi les 45 testées dont 5 bactéries et 5

archées. Ces dernières ont fait l’objet d’une caractérisation

morphologique, physiologique et moléculaire sur la base de l’amplification

et du séquençage du gène de l’ARN ribosomique 16S.

Mots-clés : bactéries halophiles, archées halophiles, protéases,

dosage, environnements salins.


19



CO5.2 Caractérisation de lipase, d’α-amylase et de dioxygénases

halothermophiles à partir de deux archées halophiles extrêmes

pour des applications industrielles prometteuses

KHEMILI-TALBI Souad#1, AKMOUSSI-TOUMI Siham1, KEBBOUCHE-GANA

Salima1, LENCHI-IZOUINE nesrine1, FERRIOUNE Imen2, SAYAH Amna2,

ALOUACHE Lamia2, SADAOUI-SMADHI Nesrine1, NAJJARI Affef3

1Laboratoire de Bioinformatique, Microbiologie Appliquée et Biomolécules (BMAB),

Université M'Hamed Bougara, Boumerdès, 35000, Algérie. 2Laboratoire Conservation et Valorisation des Ressources Biologiques (VALCORE),

Université M'Hamed Bougara, Boumerdès, 35000, Algérie. 3Université de Tunis El Manar, Faculté des Sciences de Tunis, LR03ES03 Microorganismes et

Biomolécules Actives, 2092, Tunis, Tunisie.

[email protected]

Résumé

Grâce à leurs propriétés structurales et fonctionnelles, les enzymes des microorganismes

extrêmophiles ont été largement étudiées en vue de leur exploitation industrielle. C’est dans

ce contexte que s’inscrit l’objectif de nos travaux de recherche. Des approches culturales

en combinaison avec des méthodes moléculaires ont été utilisées pour l’isolement et

caractérisation des archaebactéries halophiles à partir d’écosystèmes aquatiques salins et

de leurs enzymes(lipases, α-amylases et dioxygénases) halothermophiles. Les enzymes des

souches Haloferaxmediterranei ATS1 et Haloarculasp.D21 ont montré les meilleurs potentiels

biotechnologiques.

Haloferaxmediterraneiproduit une lipase à sérine monomérique de masse moléculaire

45011,09 Da déterminée par MALDI-TOF/MS. Les valeurs optimales de pH, de salinité et de

température pour l'activité de la lipaseétaient respectivement de 7, 15% NaCl et 60°C.Le

calcium à 2mM améliore considérablement la thermoactivité et la thermostabilité de

l’enzyme. Cette dernièreétait stable dans divers solvants organiques, détergents et

tensioactifs. L’ajout de cette lipase halothermophile à la solution détergente améliore

nettement les performances du détergent iSiS avec une meilleure élimination des taches

d’huile.

L’α-amylase halothermophile isolée à partir de Haloarulasp.D21 a, quant à elle, exhibé un

caractère très halophile tout engardant son activité même en absence du sel. L’enzyme a

montré un optimum d’activité (57,85 U/ml) à pH 8, 4-5M du NaCl et 60°C. L’activité de cette

α-amylase halothermophile est inhibée par l’addition de 5mM de Fe2+et Co2+ mais fortement

stimulée en présence 7mM de Ca2+. Une étude in silico a également été réalisée afin de

comprendre le phénomène d’adaptation des α-amylases à des fortes concentrations en sel.

Dans un autre axe d’application, ces halophiles extrêmes isolées ont montré une très bonne

dégradation du phénol par une voie de clivage ortho par l'intermédiaire de leurs enzymes

catéchol-1,2-dioxygénases révélées par la forte accumulation del’acidecis,cis-muconique.

En plus du potentiel de l’utilisation de ces souches pour la dépollution des environnements

salins et hypersalins pollués par le phénol et ses dérivés, l’acide cis,cis muconique produit

joue un rôle important comme matière première potentiellement utile pour la synthèse et la

production des polyamides, des produits pharmaceutiques, agrochimiques, cosmétiques et

les additifs alimentaires.

Mots-clé : Enzymes halothermophiles, haloadaptation, détergence, biodégradation.


20



CO5.3 Production of laccase by a halotolerant Penicillium on Olive

Pomace under Solid State Fermentation

BOUCHERIT Zeyneb #1, MECHAKRA Aicha #2, AMEDAH Souad #3

# Laboratoire de Biologie et Environnement, Faculty of Nature and Life Sciences.

UFMC1

[email protected]

A total of 23 halotolerant fungi isolated from saline soil of Ain Ezzemoul’s

Sebkha (Oum-el-Bouagui Province. Algeria) were screened for laccase

production on agar plate method. The three fungal strains (VS1, GS7 and

GS15) which exhibited an extracellular laccase activity were subjected to

the test of growth and decolourization on olive mill wastewater (OMW). For

that reason, wastes recuperated from a modern olive mill were used for

preparation of 2% agar solid medium with several concentrations (from 10

to 100%). The strains VS1, GS7 and GS15 were capable of growing at OMW

up to 100 %, 50 % and 40 % correspondingly but only the strain GS15 showed

a complete decolourization at 10 and 20 %. This latter was identified

macroscopically and microscopically as Penicillium strain. The production of

laccase, by the efficient strain, under solid culture on 50% humidified olive

pomace showed activities of 2124.52 U/g and 1670.61 U/g on grinded and

un-grinded waste respectively.

Mots-clés: Halotolerant fungi ; Laccase ; Olive pomace ; Olive mill

wastewater


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CO5.4 Caractérisation des potentialités kératinolytiques d’une souche

actinomycète isolée dans la région de Bejaïa

HAMMA Samir#1, BENHOULA Mohammed1, BETTACHE Azzeddine1, JAOUADI Bassem2, BOUCHERBA Nawel1

1 Laboratoire de Microbiologie Appliquée, Université Abderrahmane Mira - Bejaia

2 Laboratoire de Biotechnologie Microbienne, Enzymatique et de Biomolécules (LBMEB),Centre de Biotechnologie de Sfax (CBS), Université de Sfax

[email protected]

Résumé

L'application de moyens biotechnologiques dans le traitement et la valorisation des

plumes de volailles générées par l'industrie avicole en Algérie est une alternative

très intéressante en raison des grandes quantités de ces déchets produites chaque

année.

L’objectif de ce travail est la recherche de bactéries capables de produire des

kératinases thermostables répondants aux exigences des applications industrielles.

Des échantillonnages à base de coproduits de plumes sont effectués sur différents

sites dans la wilaya de Bejaïa. Des isolements, des purifications et un screening des

isolats sont réalisés. La souche la plus performante est confrontée à certains travaux

notamment la cinétique de croissance et de production des enzymes.

Les travaux réalisés ont permis d’obtenir vingt- six isolats bactériens doués de

capacités kératinolytiques et présentant des caractéristiques culturales

d’Actinomycètes ;

- Les souches DZ06, CC06 et YG06 sont de nouvelles souches Actinomycetales douées de capacités kératinolytiques isolées et sélectionnées en utilisant la farine

de plumes de volailles récupérées localement comme coproduits bon marché.

- La souche DZ06 présente un maximum de croissance et de production après 5 jours d’incubation à pH 10, une température de 40 °C et une concentration de 20

% de farine de plumes de volailles.

Les résultats obtenus montrent que les souches sélectionnées, isolées dans la région

de Bejaia sont des Actinomycètes thermophiles et protéolytiques capables de

croître sur un substrat kératinique localement récupéré par production de

kératinases extracellulaires actives.

La souche DZ06 offre des perspectives pour la poursuite des travaux notamment

l’optimisation des paramètres physico- chimiques et nutritionnels par utilisation de

méthodes statistiques, la Purification à homogénéité et caractérisation physico-

chimique de(s) kératinase(s) la/les plus intéressante(s) ;

Des essais d’application de(s) kératinase(s) la/les plus intéressante(s), à petite

échelle sont envisagés, notamment dans le traitement et la valorisation des plumes

de volailles et dans le traitement du cuir.

Mots-clés :

Actinomycètes, Activité kératinolytique, farine de plumes, kératinases,

thermostabilité.

22



CO6.1 Probable antitumor activity of serine protease from Helix aspersa

Algerian snail

MEBIROUK Romeila#1, NAIMI Dalila#2, AZARKAN Mohamed*3

# Laboratoire de bioengineering, ENSB Constantine

* Unité de Chimie des protéines, service de chimie générale. ULB-BELGIUM,1 Faculté de Médecine, Université Salah Boubnider, Constantine 32 Ecole Nationale Supérieure de Biotechnologie de Constantine3 Université Libre de Bruxelles, Belgique.

[email protected]

Abstract

The principal aim of our study is to test and discover new activities of Helix

aspersa proteins extract and to identify the responsible of those activities.

For this, soluble protein precipitation is performed with ammonium sulfate

from homogenate of foot gastropods. After that, protein extract is

fractioned using Akta Start system equipped with a pre-cast Hi-Trap Q-

Sepharose anion exchange column, followed by dialysis against distilled

water. The resulting fractions were tested for their enzymatic and anti-

proliferative activities. For enzymatic activity, we used synthetic substrates;

with which each fraction was incubated for 120 min at 37°C. Enzymatic

activity was determined by measuring the emission at 440 nm. The type of

protease found in chromatographic fractions was determined using

protease inhibitors. Finally, anti-proliferative effect was carried out in vitro

using the MTT assay and the inhibition concentration at 50% (IC50) was

estimated against tumor cell lines (A549, Huh7and K562) and against normal

cell line (Mk2). Our results showed serine and cysteine protease activity in

Helix aspersa foot homogenate; with cytotoxic effect against tumor cells.

Keywords: Helix aspersa, enzymatic activity, serine protease, cysteine

protease, anti-proliferative activity, tumor cells.


23



CO6.2 Étude comparative d’enzymes à activité coagulante de deux

souches d’actinobactéries autochtones

ZERIZER Habiba#, BOUGHACHICHE Faiza#., RACHEDI Kounouz#.

#Laboratoire de Biotechnologie et Qualité des Aliments (BIOQUAL) ; Institut de la

Nutrition, de l’Alimentation et des Technologies Agro-Alimentaires ;Université Frères

Mentouri, Constantine-1

[email protected]

Résumé

La pénurie mondiale en présure animale, pour des raisons zootechniques et

économiques, suscite les travaux de recherche sur les enzymes

coagulantes d’origine microbienne, ce privilège est dû à la culture facile,

la productivité élevée et la simplicité de manipulation génétique.

Les actinobactéries constituent d’excellentes sources de substances à

propriétés intéressantes. Dans ce travail nous comparons les propriétés

biochimiques et l’activité coagulante d’enzymes protéolytiques produites

par des souches appartenant à deux genres différents d’actinobactéries :

Streptomyces sp. et Nocardiopsis sp. isolées localement. Une purification

partielle est réalisée par fractionnement triphasique, puis l’effet du pH, de

la température, des ions métalliques, des inhibiteurs des solvants organiques

ainsi que la stabilité sont étudiés. L’activité coagulante des extraits des deux

souches est évaluée selon la méthode de Berridge (1952).

Les protéases des deux souches ont des caractères biochimiques

rapprochés, l’extrait de la souche Streptomyces sp. à une température

optimale de 40°C, alors que celui de la souche Nocardiopsis sp. est à 50°C.

Cependant les deux extraits enzymatiques présentent un pH optimum à 9

et une stabilité satisfaisante à différents pH, température, ions métalliques

(Cu2+, Ca2+, Na2+, Fe2+, Mn2+, Mg2+, Zn2+, K+ et Hg2+) inhibiteurs (Triton x100,

H2O2), solvants organiques (l’éthanol, le méthanol, l’acétone-éthanol, le

butanol, le xylène, l’acétone, l’acétate d’éthyle et l’éther de pétrole) mais

ils sont partiellement inhibés en présence du Tween 80, SDS et EDTA. Les

extraits enzymatiques des deux souches ont une activité coagulante

intéressante estimée à 15094,33 U/ml et 11478 U/ml pour Streptomyces sp.

et Nocardiopsis sp. respectivement.

Ces enzymes peuvent trouver des applications en industrie alimentaire

notamment fromagère.

Mots clés : enzymes, actinobactéries, caractères biochimiques, activité

coagulante, industrie alimentaire


24



CO6.3 La xanthine oxydoréductase comme outil prometteur pour le

diagnostic des pathologies hépatiques

MOSBAH Asma1, KHITHER Hanane2, MOSBAH Camélia3, BENBOUT Amel3

1Laboratoire de Biochimie Appliquée, Faculté des Sciences de la Nature et de la

Vie, Université les Frères Mentouri- Constantine 1, Algérie. 2Laboratoire de Biochimie Appliquée, Faculté des Sciences de la Nature et de la

Vie, Université Ferhat Abbas Sétif 1, Sétif 19000, Algérie. 3Laboratoire de substances naturelles,molécules bioactives et applications

biotechnologiques, Institut des sciences et des techniques appliquées , Université

Larbi Ben M’hidi, Oum El Bouaghi, Algérie

[email protected]

Résumé

La xanthine oxydoréductase (XOR) est un complexe molybdoflavo enzyme

catalysant l’oxydation de l’hypoxanthine en xanthine et la xanthine en acide

urique tout en produisant des espèces réactives de l’oxygène (ROS) et de l’azote

(RNS). Il ya actuellement un intérêt croissant à l’étude de la XOR sérique circulant

dont le taux augmente dans plusieurs pathologies humaines, en particulier dans

celles mettant en jeu les lésions hépatiques de type ischémie-reperfusion.

Bien que l’ALAT soit parmi les transaminases les plus spécifiques comme indicateur

de lésions hépatiques, les résultats préliminaires réalisés par différentes équipes de

recherche ont montré que la XOR sérique est un meilleur paramètre pour suivre la

fonction hépatique.

Vu l’importance du taux de cette enzyme sérique dans le diagnostic et le pronostic

de pathologies hépatiques, nous nous sommes intéressés au dosage sérique de

cette enzyme chez différentes pathologies hépatiques à travers un test ELISA

sandwich.

Nous avons procédé à la purification et caractérisation de la XOR à partir du lait

humain, la pureté de l’enzyme a été vérifiée à travers le spectre d’activité et

l’électrophorèse sur gel polyacrylamide SDS-PAGE. Par la suite, l’enzyme extraite a

été utilisée pour l’immunisation des lapins afin de produire des anticorps anti-XOR.

L’étape finale consiste à optimiser un test ELISA sandwich pour le dosage de la XOR

dans les sérums des patients atteints de différentes pathologies hépatiques.

Les résultats montrent que le taux de cette l'enzyme est augmenté significativement

chez les sujets atteints des différentes lésions hépatiques (les sujets cirrhotiques 4595

± 4376 ng/ml, les sujets cancéreux 3771 ± 4262 ng/ml, les sujets atteints d’hépatites

virales (HVB et HVC) 6128 ± 6913 ng/ml et les sujets atteints d’intoxications

hépatiques 1529 ± 1713 ng/ml) par rapport aux sujets normaux 91.89 ± 93.06 ng/ml.

Sur la base des résultats obtenus, la XOR peut être utilisée comme un paramètre

clinique aussi efficace que le dosage des transaminases pour un diagnostic

précoce des lésions hépatiques et pour un suivi thérapeutique approprié.

Mots-clés : XOR, Hépatites, Test ELISA sandwich, Transaminases, diagnostic.


25



CO6.4 Activité antioxydante de glucuronoxylanes (UXOS) et

arabinoxylanes (AXOS) produits d’hydrolyse d’endoxylanases

de Bacillus safensis CBLMA18

BOUICHE Cilia*1, SUSANA V.Valenzuela2, JAVIER PASTOR F.I 2, BETTACHE

Azzeddine 1, MAIBECHE Rima1, AZZOUZ Zahra 1, HAMA Samir1, BENHOULA

Mohammed1, BENALLAOUA Said1, BOUCHERBA Nawel1

1 Laboratoire de Microbiologie Appliquée, Faculté des Sciences de la Nature et de

la Vie, Université de Bejaia, 06000 Bejaia, Algérie, 2 Laboratoire d’enzymes Microbiennes pour Applications Industrielles, Département

de Génétique, Microbiologie et statistiques, Faculté de Biologie, Université de

Barcelone, Av. Diagonal 643,08028, Espagne,

[email protected]

Résumé

L'utilisation de matériaux renouvelables constitue l’une des alternatives sur

laquelle repose le principe du développement durable, L'hémicellulose est

l'un des polysaccharides les plus courants de la biomasse lignocellulosique

après la cellulose, et n'a pas encore trouvé sa place dans de larges

applications industrielles comme la cellulose. Les Xylooligosaccharides

(XOS) issus de l’hydrolyse d’un hémicellulose nommé xylane sont des

molécules bioactives particulièrement intéressantes vu leur activité

antioxydante. L’espèce Bacillus safensis CBLMA18 est une bactérie

xylanolytique isolée à Béjaia (Bouiche et al., 2020), L'activité antioxydante

du glucuronoxylane et de l’arabinoxylane généré d’une part par l’hydrolyse

de la xylanase11A et celle de la Xylanase 10B des arabinoxylanes est testée

avec la méthode ABTS (acide 2, 2'-azino-bis (3-éthylbenzothiazoline-6-

sulfonique). Le glucuronoxylane a montré une activité antioxydante plus

élevée que l’arabinoxylane (plus de 80% de la capacité antioxydante). La

chromatographie sur couche mince et l'analyse MALDI-TOF MS ont montré

que les glucuronoxylanes comprennent des XOS neutres et acides avec

des ramifications d'acide méthylglucuronique (MeGlcA), tandis que les

arabinoxylanes ne contiennent que des molécules neutres avec des

ramifications d'arabinose. Les ramifications de MeGlcA semblent avoir un

rôle important dans la capacité antioxydante des oligosaccharides. En

outre, l'augmentation de la taille des glucuronoxylanes est proportionnelle

à l’augmentation de leur activité

Mots-clés : xylanase, antioxydant, xylooligosacharide, arabinoxylane,

glucuronoxylane


26



CO6.5 Activité anticholinesterase in vitro d’Ephedra nebrodensis contre

AchE et BchE.

HAMOUDI Meriem#1, AMROUN Djouher1, BENSOUICI Chawki 2, KHENNOUF

Seddik1, DAHAMNA Saliha1

1 Laboratory of Phytotherapy Applied to Chronic Diseases, Faculty of Natural and

Life Sciences, University Ferhat Abbas Setif 1, Setif 19000, Algeria. 2 Centre de Recherche en Biotechnologie, Ali Mendjli Nouvelle Ville UV03,

Constantine, Algérie.

[email protected]

Résumé

Les principaux enzymes impliqués dans les pathologies de la maladie

d'Alzheimer sont l'AchE et le BchE, l'inhibition de chaque enzyme augmente

la communication dans les voies cholinergiques et réduire les signes de la

maladie d'Alzheimer. Cependant La consommation de drogues de

synthèse pour le traitement de la maladie d'Alzheimer, comme (la

galantamine et la rivastigmine), a des effets secondaires indésirables,

notamment gastro-intestinaux (les douleurs d'estomac, la diarrhée, les

nausées, les vomissements, la perte de l'appétit…. etc). Ces dernières

années, la recherche sur les produits naturels anti-Alzheimer dans

l'alimentation et les sources végétales s'est intensifiée. Les composés naturels

possèdent de nombreuses propriétés, notamment l'activité anti-

enzymatique vis-à-vis AchE et BchE. L'objectif de cette étude était d'évaluer

les propriétés inhibitrices in vitro des extraits d'Ephedra nebrodensis. Les

extraits EAC et MeOH ont montré la plus forte inhibition de l'AchE avec une

valeur de CI50 (21,56 et 22,50 μg/ml) et des CI50 intéressantes de (8,64 et

10,98 μg/ml) contre la BchE. On peut conclure que la plupart des extraits

d'E. nebrodensis sont actifs et présentent une meilleure inhibition qui aller

jusqu’à 99% contre la BChE que l'AchE. Cette étude montre que cette

plante possède des propriétés anti-Alzheimer in vitro intéressantes.

Mots-clés: Ephedra nebrrodensis, anti-cholinesterase, extraits, maladie

d’Alzheimer.


COMMUNICATIONS PAR AFFICHE

27



CP1.1 Recherche des enzymes « bêta-lactamases à spectre élargi » et

d’autres molécules bioactives d’origine microbienne.

RAHMANI Amina#1, MERADI Larem#2, ARHAB Rabah#3

# Université LARBI BEM MHIDI, département des sciences de la nature et de la vie,

Laboratoire de biotechnologie des substances naturelles et applications,

[email protected]

Résumé

L'évolution constante de la résistance bactérienne aux antibiotiques et

l'émergence de nouvelles maladies infectieuses justifient l'urgence de

l’Organisation Mondiale de la Santé (OMS) d’évoquer un plan mondial pour

combattre la résistance aux antimicrobiens pour lutter contre

l’antibiorésistance en soutenant le développement des projets de la

biotechnologie pharmaceutique. Dans cette dernière, la détection de la

résistance bactérienne est un outil ou moyen de diagnostic, ce qui donne

aux biotechnologues les informations nécessaires pour créer un procédé

éliminant cette résistance. Alors, ce travail consiste à isoler à partir de

plusieurs biotopes des souches bactériennes exclusivement Escherichia coli

et quelques souches d’actinomycètes et de caractériser leurs profils de

résistance vis-à-vis de plusieurs familles d’antibiotiques. L’identification des

souches a été réalisée par les méthodes de microbiologie classique, et la

confirmation des E. coli par la galerie d’identification API20Plus. La méthode

de diffusion des disques a été utilisée pour la réalisation de l’antibiogramme

sur gélose Mueller-Hinton selon les normes NCCLS (National Committee of

Clinical Laboratory Standards, 2019). Les résultats révèlent la présence de

souches E. coli productrice de bêta-lactamases à spectre étendu (BLSE)

présentant des phénotypes de résistance assez inquiétants, ainsi que des

souches actinomycétale productrices de molécules bioactives dont les

enzymes de dégradation (amylase, caséinase..etc), l’identification des

molécules bioactives permettra de synthétiser à l’échelle biotechnologique

une quantité assez importante de ces molécules qui peuvent agir comme

des enzymes de coupure des gènes de résistance ,présents au niveau des

souches bactériennes GRAM négatif ou positif, ou bien faciliter à l’échelle

biotechnologique la dégradation des molécules complexes.

Mots-clés : Escherichia coli, Actinomycètes, BLSE, biotechnologie, enzymes.


28



CP1.2 Extraction et caractérisation biochimique d’une enzyme

coagulant le lait issu de la caillette de Chevreau. Essai de

fabrication d’un fromage frais à base de lait de chèvre.

KAHLOUCHE amal1, BOUMEDIENE Farida2, NOUANI Abdelouahab3

1Ecole supérieure des sciences de l’aliment et des industries agroalimentaires-ESSAIA-Alger 2Laboratoire de technologie alimentaire –Ecole nationale supérieure agronomique-ENSA-

Alger 3Laboratoiree de technologie Alimentaire -Université de Boumerdès,

[email protected]

Résumé

Dans l’industrie fromagère, la présure est le principal agent coagulant de lait,.

Actuellement, la présure de veau est la plus largement utilisée en fromagerie,

toutefois, elle couvre seulement 20 à 30 % de la demande mondiale en coagulants.

Nous savons que l’indisponibilité des présures de veau associée à des problèmes

d’éthiques ainsi que l’abattage accéléré des jeunes bovins constituaient une

nécessité impérieuse de rechercher d’autres alternatives à la chymosine bovine.

Cependant, malgré plusieurs tentatives de productions d’enzymes microbiennes et

végétales, certains auteurs considèrent que la qualité des fromages et produits

laitiers à base de ces enzymes affectait la qualité des laitages notamment

l’apparition du goût amer produit par certains peptides. Par ailleurs, les travaux

menés sur des mammifères tels que le buffle, le caprin, l’ovin, l’agneau et le lapin

pourraient constituer de bonnes sources de présure. Cependant, très peu

d’informations ont été rapportées sur la purification et la caractérisation sur la

chymosine du chevreau bien que les laitages, particulièrement les fromages à

base de lait de chèvre a forte valeur ajoutée, possèdent une très bonne valeur

nutritionnelle et des propriétés sensorielles très appréciées par le consommateur, il

est digne d’intérêt de s’intéresser aux enzymes gastriques du caprin notamment la

chymosine potentiellement utilisée comme substitut de la présure traditionnelle. Tel

est l’objectif du présent travail.

Une meilleure connaissance des propriétés des protéases extraites à partir de la

caillette de chevreau a été établie pour une meilleure future application en

fromagerie locale. Ainsi, notre étude nous a permis d’évaluer L’étude de la

propriété coagulante et protéolytique de l’enzyme après son extraction et sa

purification par précipitation au sulfate d’ammonium suivie d’une

chromatographie d’exclusion moléculaire. Par ailleurs, une caractérisation

biochimique de l’extrait enzymatique a été réalisée en déterminant les conditions

optimales de son activité coagulante (Température, pH, CaCl2)

En fin, un essai de fabrication de fromage frais de chèvre a été réalisé à partir

d’extrait enzymatique brut de chevreau, et la présure commerciale prise comme

référence. L’analyse comparée a porté sur le rendement fromager.

Mots clés: Enzyme coagulant le lait, extraction, caractérisation, chevreau,

fromage.


29



CP1.3

Application d’enzymes d’intérêt biotechnologique produites par

des microorganismes

BOUKEROUI Yasmina 1, AISSAOUI Nadia 1, KLOUCHE KHELIL Nihel 1,2,3

1Laboratoire de Microbiologie appliquée à l’agroalimentaire, au biomédical et à

l’environnement, Université de Tlemcen-Tlemcen-Algérie 2Département de chirurgie dentaire, Faculté de médecine, Université de Tlemcen,

Tlemcen-Algérie 3Laboratoire de chirurgie expérimentale, Faculté de médecine, Université de

Tlemcen, Tlemcen- Algérie

[email protected]

Résumé

Les enzymes sont des protéines aux propriétés catalytiques très utiles dans

de nombreux procédés industriels vu leur spécificité dans la fabrication d'un

produit et leurs avantages comparés aux produits chimiques de synthèse,

ce qui permet de consommer moins d’énergie et de faire de réels progrès

dans la réduction des déchets.

L’utilisation des enzymes en biotechnologie est en augmentation

considérable, parmi ses applications commerciales, on peut citer la

production de détergents, le recyclage du papier, production d'éthanol,

transformation des aliments et des boissons, textiles, cosmétique, produits

pharmaceutiques, synthèse peptidique et production d'énergie.

Dans cette étude, nous mettrons en relief les différentes techniques de

purification utilisées pour les enzymes d’origine microbienne, nous discutons

ensuite les stratégies adoptées pour la découverte de nouvelles enzymes

et enfin nous citerons leurs applications biotechnologiques.

Mots-clés : Microorganismes, bioprospection, ingénierie protéique,

application enzymatique


30



CP1.4 Production d’enzyme fongique coagulante le lait sur un milieu à

base de sous-produit agroalimentaire (peau de tomate)

GHEDJEMIS Amina#, DENDOUGA Wassila*

# Laboratoire de caractérisation, valorisation des ressources naturelles, Université

Mohamed El Bachir El Ibrahim, Bordj Bou Arreridj, Algérie *Laboratoire de Biodiversité des Ecosystèmes et de Production Dynamique de

Système Agricole en Régions Arides, Université de Biskra, Algérie.

[email protected]

Résumé

Dans le cadre de produire une enzyme fongique coagulante le lait sur un

milieu bon marché, la farine de la peau de tomate a été préparée

classiquement pour d’une part remplaçant la présure animale et d’une

autre part minimiser le coût de production de biocatalyseurs sur des milieux

synthétiques. Les analyses chimiques de la farine ont montré sa richesse en

particulier en hydrate de carbone, avec les taux dépassant et également

en sels minéraux.

L’activité protéolytique de nos isolats a été testée sur CLM caséine. Le

résultat de cette étape a permis de sélectionner la souche Aspergillus sp.02

comme la plus productrice d’exoprotéase. La production de cette dernière

par la souche Aspergillus sp.02 sélectionnée sur de milieu complexe à base

de farine des tomates aux quatre concentrations (20%, 60%, 80%, 100%) a

révélé que l’isolat donne son optimum de croissance (6.78%) et activité

(129.09 UI) au milieu farine de poudre de tomate à 60%.

Le test de coagulation de lait effectué par l’extrait enzymatique de la

souche Aspergillus sp.02 en présence de Cacl2 (0.01M), est considéré positif

par la formation des premiers flocons après 20 min d’incubation

Mots-clés: le lait, coagulation, moisissures, protéase, Farine de peau de

tomate

31



CP1.5

Criblage de microorganismes producteurs de lipases

MEZIANE Nassim#1, MEDJMEDJ Ayoub*2, OUSAADI Mouna Imene#3

# Laboratoire de PFE Microbiologie, Ecole Nationale Supérieure de Biotechnologie,

[email protected]

Résumé

Les sous-produits oléicoles (grignons d’olives), sont pour la plupart peu ou

pas valorisés, ils constituent une source importante de microorganismes

producteurs d'enzymes, tels que les lipases qui peuvent être produites par

des microorganismes à partir de ces milieux grâce à leurs richesses en

substrats lipidiques. Parmi ces microorganismes on trouve, les

actinobactéries qui sont d'excellentes productrices de métabolites à intérêt

biotechnologique.

Dans cette étude, les activités enzymatiques principalement l’activité

lipolytique et les activités antimicrobiennes des actinobactéries isolées ont

été étudiées. Un total de 13 isolats est obtenu à partir de différents

échantillons de sol (12 isolats) de la région de Ain Smara, Constantine et de

grignons d’olives (S11), obtenus d’une huilerie locale située dans la région

d’El Khemis à Jijel.

En effet, six actinobactéries (S1, S2, S7, S8, S10 et S11) sur 13 isolées (soit

46,15%), sont sélectionnés pour leur capacité à développer une activité

lipolytique sur milieu gélosé à base de jaune d'oeuf 10% et sur milieu Tween

80. La majorité des isolats (12 isolats) se sont avérés capables de synthétiser

la lipoproteinase, sur milieu gélosé à base de jaune d'oeuf 10%. Une activité

lécithinase, est mise en évidence pour une seule souche d’actinobactérie

(S8).

L’activité antimicrobienne a été étudiée par la technique des cylindres

d’agar vis-à-vis de cinq souches bactérienne tests Bacillus cereus,

Staphylococcus aureus (ATCC 25923), Escherichia coli (ATCC 25922),

Pseudomonas aeruginosa (ATCC 27853), et Klebsiella Pneumoniae (ATCC

700603), et deux champignons filamenteux Aspergillus niger, Fusarium

oxysporum. Le test de l’activité antibactérienne révèle qu’une seule souche

(S8) parmi les 13 actinobactéries isolées, possède une activité vis-à-vis d’une

bactérie-test Gram positif Bacillus cereus, après 15 et 21 jours d’incubation.

Tandis que pour l’activité antifongique, huit souches se sont révélées actives

contre le champignon Fusarium oxysporum.

Mots-clés: Actinobactéries, valorisation de déchet, grignons d’olives,

lipases, activité antimicrobienne


32



CP1.6

Pouvoir des Protéases Bactériennes à libérer des Peptides

Antioxydants par Caséinolyse

ZATER Zohra Yasmine1# , ROUDJ Salima

# Université Oran1, Ahmed Ben Bella/ Laboratoire de biologie des microorganismes

et biotechnologie.

[email protected] / [email protected]

Résumé

Les peptides dérivés des protéines du lait peuvent exercer différentes

activités biologiques bénéfiques, en plus de leurs rôles nutritionnels de base.

Ils peuvent posséder des propriétés antioxydantes, anti-inflammatoires,

antihypertensives, et antimicrobiennes qui pourraient jouer un rôle dans le

maintien ou la préservation de la santé humaine. L’objectif de notre étude

est l’hydrolyse de caséines du lait de deux sources différentes, lait de vache

et lait de chèvre, par des protéases issues de Lactobacilles et la recherche

d’activité antioxydante des hydrolysats générés. On a sélectionné, par

criblage, des lactobacilles à potentiel protéolytique parmi des souches

lactiques autochtones isolées de différentes sources alimentaires. Ces

souches ont montré leurs aptitudes à libérer des protéases dans le milieu de

culture. L’activité des protéases a été examinée sur la caséine totale en

solution et les hydrolysats obtenus ont été quantifiés par méthode

biochimique. L’évaluation de l’activité antioxydante par piégeage de

radical libre diphenylpicrylhydrazyl (DPPH) des hydrolysats obtenus a révélé

un pouvoir antioxydant. Les antioxydants contribuent à la prévention des

maladies chroniques telles que les maladies cardiovasculaires dues au stress

oxydatif. Ainsi, l'ingestion de peptides naturels dérivés des protéines

alimentaires peut retarder l'apparition de ces maladies, tout en réduisant

les dommages oxydatifs.

Mots-clés: Protéases, Lactobacilles, caséines, peptide, activité

antioxydante.



33



CP1.7

The Effect of Viscozyme-Cellulast Mixture on Oil Extraction Yield

CHENNI Fatima Zohra #1, HAMENNI Kahina *2, KUHNLE Gunter G C *3

# Laboratoire de Biotoxicologie, Department of Biology, Faculty of Natural

Sciences and Life, BP 89, 22000 Sidi Bel Abbes (Algeria)

* Department of Food & Nutritional Sciences, University of Reading, Reading RG6

6AP, United Kingdom

[email protected]

Abstract

Enzyme incorporation in the process of oil extraction is a good alternative to

the traditional and high temperature solvent extractions as it could get up

their inconvenient such as fewer yields, as described by many researchers

on different species. Through the enzyme-assisted extraction, many

improvements have been reported in the quantity and the quality of oil. The

aim of this research is to provide a new understanding of the effect of

enzymatic mixture on argan kernels oil extraction through the use of two

commercial enzymes : viscozyme and cellulast. To increase the oil extraction

yield, different parameters of the enzymatic processing were studied and

optimized. The two enzymes (1:1) were used within a ratio of 0.25 % E/S

during 3h at 50°C and compared with one enzyme (cellulase) or non –

enzymatic oil extraction process. Enzyme mixtures as a pretreatment in the

process of oil extraction are useful to improve oil extraction and may

enhance bioactive compounds yields.

Keywords: Enzyme ;Cellulast ;Viscozyme ;Extraction ; Argan oil


34



CP2.1

A comparison between acid and enzymatic hydrolysis of corn

starch for glucose syrups production

TAIBI Hoiria 1, BOUDRIES Nadia 1, ABDELHAI Moufida 1 and LOUNICI Hakim 2

1 Laboratoire de recherche sur les produits bioactifs et la valorisation de la biomasse,

Ecole Normale Supérieure Cheikh Mohamed El Bachir El Ibrahimi, ENS Kouba, Alger,

Algérie 2 Laboratoire Matériaux et Développement Durable, Université Akli Mohand Oulhadj

, Bouira

[email protected]

Starch is widely used in various bioprocesses in the pharmaceutical and

textile industries, as well as in food applications. Acid and enzymatic

modifications are used to produce many starch-based sweeteners include

corn syrups, high fructose corn syrups (HFCS), dextrose, fructose and

maltodextrin.

In this study, two combinations technics (acid-enzyme and enzyme-

enzyme) of starch hydrolysis were tested to produce glucose syrups.

Commercial corn starch was used for the bioconversion. The optimal

conditions of the two steps of hydrolysis (liquefaction and saccharification)

were determinate. Corn starch at 30, 35 and 40% (w/v) were used as

substrate. After 2h of liquefaction, for starch concentration of 35%,

maximum dextrose equivalent (DE) of 15.43% was obtained using 0.1% (w/v)

of ɑ-amylase from Bacillus subtilis at 90 °C and pH = 6.5. However, the highest

value of DE of 42.08 % was achieved using 1.0 M HCl at 100°C. Optimal

saccharification process occurs at 60°C, pH of 4.5 for 72 h, using 1% (w/v) of

amyloglucosidase. Final values of DE of 97.03% and 94.68% for corn starch

were obtained after enzymatic liquefaction and acid liquefaction,

respectively.

The results indicated that the processing of corn starch to glucose syrups

can be carried out either by acid or enzymatic hydrolysis. However, the use

of enzyme is preferred to acid, because it produces high yields of desired

products and less formation of undesired products such as toxic

compounds.

Keywords: corn starch, glucose syrups, dextrose equivalent, liquefaction,

saccharification.


35



CP2.2

Mise en évidence d’activités enzymatiques à intérêt

technologique chez quelques souches de bactéries lactiques.

BACHTARZI Nadia1, MERADJI Meriem1, LEKSIR Dalal1, KHARROUB Karima1.

1Laboratoire de Recherche Biotechnologie et Qualité des Aliments (BIOQUAL).

Institut de la Nutrition, de l’Alimentation et des Technologies Agro Alimentaires

(INATAA), Université Frères Mentouri Constantine 1 (UFMC1), Constantine, Algérie,

[email protected]

Le potentiel enzymatique de 44 souches de bactéries lactiques pré-

identifiées isolées à partir de laits de deux espèces bovine et caprine, a été

testé sur trois milieux gélosés supplémentés de caséines, de tween 80 et sur

milieu amidonné pour l’étude de la protéolyse, la lipolyse et l’amylolyse

respectivement. En effet, la capacité des souches lactiques à hydrolyser les

trois substrats testés contribue efficacement au développement des

attributs sensoriels des matrices alimentaires générées telles que les

fromages, le beurre ou encore les produits de panification. Ainsi, les résultats

du criblage ont montré que 6 isolats présentent une forte activité

protéolytique avec des plages de lyse atteignant 25 mm de diamètre, par

contre les activités lipolytique et amylolytique se sont avérées absentes chez

l’ensemble des isolats testés. Ces résultats peuvent être rattachés à

l’adaptation des souches à leur habitat d’origine, le lait riche en caséines,

en dépit des autres substrats carbonés. De ce fait, l’exploitation

technologique des isolats présentant une activité protéolytique peut être

envisagée dans l’élaboration de nouveaux ferments intéressants pour

l’affinage des fromages.

Mots-clés: Protéolyse, lipolyse, amylolyse, bactéries lactiques.


36



CP2.3

Production et purification des coagulases de Bacillus subtilis S3

et Bacillus coagulans LC28.2.

CHEMLAL Radia 1,2,3, DJERDJOURI Bahia 1, BELLAL Mohand Mouloud 3

1 Laboratoire de biologie cellulaire et moléculaire, Département BCM, FSB-USTHB,

BAB EZZOUAR, ALGER. 2 Laboratoire de bioengineering et génie des procédés, Département du Génie de

l’environnement, ENP, ALGER.

3 Département de Technologie alimentaire, ENSA, ALGER.

[email protected]

Résumé

Actuellement l’industrie fromagère, des pays en voie de développement en

particulier, subit une crise de l’approvisionnement en présure traditionnelle.

Cette situation à conduit de nombreux chercheurs à s’intéresser aux

nouvelles sources potentielles d’enzymes de remplacement notamment, les

enzymes d’origine végétale et microbienne.

En dépit de nombreux travaux relatifs aux enzymes de remplacement de la

présure animale, les applications industrielles restent limitées. Les principaux

obstacles à l’utilisation des enzymes d’origine bactérienne ou fongique

restent leur toxicité et leur prix de revient élevé. En revanche, les

inconvénients des enzymes d’origine végétale résident dans leurs

inaptitudes technologiques.

L’objectif de ce travail est de contribuer à une meilleure connaissance des

protéases coagulant le lait, issues de culture des souches locales de Bacillus

sélectionnées. La caractérisation des extraits coagulants bruts issus de deux

souches fait apparaître que l’influence des principaux paramètres sur les

activités coagulantes est similaire pour les deux extraits bruts. Les résultats

montrent des activités coagulantes relativement élevées et stables à 40°C.

En outre, les résultats de l’électrophorèse des différentes fractions

coagulantes, traitées au sulfate d’ammonium et soumises à une filtration

moléculaire, révèlent une seule bande protéique de poids moléculaire

estimée à 40.44KDa. Ceci semble indiquer que les protéases obtenues

correspondent à des protéases neutres caractérisées généralement par

des poids moléculaires compris entre 32.9 et 47.5 KDa. A ce stade de

l’étude, les résultats mettent en évidence la possibilité d’obtention des

coagulases à partir de souches locales de Bacillus.

Mots-clés: Activité coagulante, Bacillus, protéases.


37



CP2.4 Optimization and Immobilization of alpha-amylase from Bacillus

Subtilis in calcium alginate and calcium Alginate –cellulosic

residue beads.

HERIZI Abdallah 1,2, SOUILAH Rachid 1,3, DJABALI Djaffar 1, NADJEMI

Boubekeur 1

1Laboratoire d’Etudes et Développement des Techniques d’Epuration et de

Traitement des Eaux et Gestion Environnementale, Département de Chimie, Ecole

Normale Supérieure de Kouba, Alger. 2Faculté de technologie, Université Mohamed Boudiaf M’sila, Algeria 3Département de physique, Ecole Normale Supérieure de Laghouat, Algeria.

[email protected]

Abstract

In this study, Alpha amylase from Bacillus Subtilis was immobilized by

entrapment in Calcium alginate beads. To improve the properties of these

beads, alginate was blended with cellulosic residue (CR) obtained from

sorghum-starch extraction. The conditions of entrapment were optimized for

a maximum immobilization yield (Y %) by mathematical statistics, where the

23 full factorial design of experiments was used. The properties of calcium

alginate beads were improved by comparing the activity of immobilized

enzymes in the hydrolysis of starch. The activity of the immobilized enzyme

by Calcium alginate /cellulosic residue (CA/CR) was found to be higher

than the Calcium alginate method. Zn2+ and Cu2+ have inhibitory effects

on both immobilized enzymes. The Bacillus Subtilis immobilized in alginate

can be reused for 7 cycles with 12.7 μmol of reduced sugars and 6 cycles

for the entrapped enzyme in (CA/CR) with 30 μmol of reduced sugars.

Keywords: Alginate, cellulosic residue, α-amylase, immobilization,

optimization.

38



CP2.5 Suillus granulatus, un champignon comestible riche en enzymes

capables de dégrader les margines, sous-produits de l’industrie

oléicole.

KERMANI Ismahan#, FORTAS Zohra#, DIB Soulef#

#Laboratoire de Biologie des Microorganismes et Biotechnologie, Département de

Biotechnologie, Faculté des Sciences de la Nature et de la Vie, Université Oran 1

Ahmed Ben Bella(Algérie)

[email protected]

Résumé

Actuellement, le secteur oléicole est considéré comme un élément majeur

de l'économie agricole en Algérie. En effet, avec la promotion des vertus

bénéfiques de l’huile d’olive pour la santé, la demande mondiale ne cesse

d’augmenter et la production doit constamment répondre aux besoins des

consommateurs. L’industrie oléicole engendre, en plus de l’huile comme

produit principal, de grandes quantités de sous- produits liquides appelés

margines qui sont difficilement biodégradables et donc très polluants pour

l’environnement. Les procédés de dépollution classiques sont complexes et

coûteux. La nécessité de trouver des moyens de dépollution bio-

écologiques et économiques s’impose. C’est dans cette perspective que

nous orientons notre étude en essayant d’utiliser un champignon

filamenteux, un Basidiomycète comestible appelé Suillus granulatus, riche

en enzymes, pour dégrader les margines.

En matériel et méthodes, nous avons ensemencé in vitro les implants de la

souche mycélienne de S. granulatus par différentes techniques de culture

en absence et en présence de margine d’olive stérile sur des milieux liquides

et gélosés à base de malt ou PDA et sur cellophane ainsi que sur milieu à

base de céréales.

Les résultats obtenus montrent que la présence de margine favorise

considérablement la croissance mycélienne de Suillus granulatus sur tous les

milieux de culture testés. Ceci prouve que le champignon a bien dégradé

la margine pour croître. Selon la bibliographie, la dégradation est due à

l’activité enzymatique de ces champignons.

En conclusion, l’utilisation du champignon comestible Suillus granulatus

pourrait être un moyen très efficace pour dégrader les margines et éviter la

pollution qu’elles engendrent.

Mots clés : Suillus granulatus, activité enzymatique, margines, souche

mycélienne.


39



CP2.6 Effet de l’addition des enzymes exogènes dans un régime

hypocalorique de poulets de chair sur les performances et les

caractéristiques de la viande

ALLOUCHE L.#1, MADANI T.*2, AIT HAMOUDA Z.#3

1Département de Biologie et physiologie Animale. Faculté des Sciences de la

Nature et de la Vie. Université Ferhat Abbas Sétif 1. Algérie. Laboratoire de

valorisation des ressources biologiques et naturelles. 2Département d’agronomie. Faculté des Sciences de la Nature et de la Vie.

Université Ferhat Abbas Sétif 1. Algérie. Laboratoire de valorisation des ressources

biologiques et naturelles 3Entreprise d’Hygiène et de Nutrition Animale (NH2M), Bordj Bou Arreridj. Algérie.

[email protected]

Résumé

Dans les pays en voie de développement, les éleveurs de poulets de chair

utilisent souvent des régimes énergétiques déséquilibrés, c'est pourquoi

notre étude vise à évaluer l'effet de l'ajout des enzymes exogènes

commerciales (EEC) dans un régime à base de farine de maïs/soja à faible

niveau énergétique sur les performances, les caractéristiques de la viande

et le coût de l’alimentation. Un total de 120 poulets de chair de souche

ISA15 âgés d'un jour ont été répartis en deux groupes (60 animaux par

groupe) avec cinq répétitions par groupe.

Le groupe témoin a reçu un régime standard, tandis que le groupe EEC a

reçu le même régime alimentaire complété par des EEC (250 g/tonne). La

période de l’élevage est de 60 jours ; durant cette période, les poulets ont

reçu un régime de démarrage de 1 à 9 jours, de croissance de 10 à 41 jours

et un régime de finition de 42 à 60 jours.

Nos résultats ont montré que l'ajout d'enzymes a réduit significativement la

consommation en aliment (p<0,001) et en eau (p<0,05) comparativement

au groupe témoin ; le taux de conversion alimentaire avait tendance à être

plus faible (p = 0,08) chez les poulets ayant consommés des EEC.

Concernant la qualité de la viande, aucun changement n'a été observé

dans le pH, la teneur en protéines ou en humidité de la viande chez les

poulets de chair des deux sexes entre les groupes EEC et témoins.

Cependant, l'addition des EEC a permis une diminution de 950 g/poulet de

la ration alimentaire pendant toute la période d’élevage, économisant

ainsi 34418 DA/ 1000 poulets. En conclusion, l'utilisation des EEC dans un

régime hypocalorique améliore l'efficacité alimentaire des poulets de chair

et procure un avantage économique aux éleveurs.

Mots-clés : poulet de chair, enzymes exogènes, performances, qualité de

viande, économie.


40



CP2.7

Valorisation biotechnologique des sous-produits de l’olivier

« Margine» par fermentation submergée

KHELALEF Hind1 et BENLOUNISSI Aicha2

1 Université 20Août 1955, Skikda 2 Ecole Nationale Supérieure de Biotechnologie, Constantine

[email protected]

Résumé

Les Margines, effluents d’extraction de l’huile d’olive, posent de sérieux

problèmes de pollution pour l’environnement, d’où la nécessité de leur

traitement ou de leur valorisation. Le but de ce travail est de valoriser les

Margines par leur utilisation comme substrat de fermentation, avec une

souche mycélienne, afin de produire des lipases qui permettent de résoudre

plusieurs problèmes. Pour cette raison une culture fongique est réalisée par

fermentation submergée en utilisant les margine comme seul substrat

pendant 8jour. Le suivie de croissance de la moisissure montrent une Activité

maximale de l’enzyme « lipase » après 120 heures d’incubation, avec une

Activité enzymatique de 0.724g/ml/min. En conclusion, la valorisation des

Margines permettant de remédier les effets néfastes engendrés par les rejets

de ces déchets dans l’environnement.

Mots-clés : Valorisation, Fermentation submergée, Margine, Lipase.


41



CP3.1 Etude de quelques aptitudes enzymatiques des actinobactéries

isolées à partir des stations d’épuration des eaux usées

BOUFERCHA Oumeima(1,2), BOUDEMAGH Allaoueddine(2)

(1) Laboratoire de génie microbiologique et application, Département de

microbiologie. Faculté des sciences de la nature et de la vie. Université Frères

Mentouri 1, Constantine- Algérie(2) Département de Microbiologie. Faculté des Sciences de la Nature et de la Vie.

Université Frères Mentouri-Constantine 1. Algérie

[email protected]

Résumé

Les actinobactéries sont largement distribuées dans les écosystèmes

terrestres mais aussi aquatiques. Ces bactéries sont connues par leurs

aptitudes à produire plusieurs biomolécules notamment les enzymes. Les

enzymes hydrolytiques des actinobactéries jouent un rôle important dans la

dégradation des différents polymères complexes, permettant ainsi le

recyclage de la matière vivante et des multiples substances. Ces enzymes

ont été depuis longtemps utilisés dans l’environnement, dans l’agriculture,

en médecine et dans la chimie. Les stations d’épuration des eaux usées

constituent un écosystème très pollué, offrant une panoplie de substrats

extraordinairement variés. Par cette composition chimique exceptionnelle,

ces endroits peuvent êtres les précurseurs d’une importante variété

d’enzymes, agissants sur ces substrats. L’objectif de cette étude est la

recherche dans les stations d’épuration des eaux usées, d’actinobactéries

capables de produire certains enzymes hydrolytiques. Au total 45 souches

d’actinobactéries ont été isolées et purifiées à partir des trois stations

d’épuration des eaux usées situées à l’est de l’Algérie. La mise en évidence

de l’aptitude de ces isolats à synthétiser plusieurs enzymes a été testée sur

des milieux gélosés. Les résultats révèlent que la majorité des isolats sont

capables de produire plusieurs enzymes d’importance biotechnologique.

La plus grande majorité des isolats produisent l’amylase et la caseinase

avec respectivement 95,55%, et 82,22%. L’estérase, la lipase, la tyrosinase et

la gélatinase sont quant à elles produites respectivement par environ 60%,

53%, 51% et 51% des isolats d’actinobactéries. Ces résultats intéressants

montrent que ces écosystèmes très pollués sont riches en actinobactéries

présentant des aptitudes à produire des enzymes d’intérêt

biotechnologiques.

Mots-clés: Enzyme, actinobactéries, eaux usées.


42



CP3.2

Mise en évidence des enzymes protéolytiques

d’actinobactéries isolées de compost

BOUTANA Wissem#1, ZERIZER Habiba1, KHARROUB Karima1

1 Laboratoire de recherche biotechnologie et qualité des aliments (BIOQUAL),

Institut de Nutrition de l’Alimentation et des Technologie Agro-Alimentaires,

Université des Frères Mentouri, Constantine 1, Route d’Ain-El-Bey, Constantine,

Algérie

[email protected]

Résumé

Les microorganismes occupent une place importante dans notre vie et sont

actuellement à l’origine des exploitations biotechnologiques. Les

actinobactéries sont parmi les microorganismes les plus rencontrés sur les

substrats naturels. Elles sont connues pour leur aptitude à dégrader plusieurs

métabolites grâce à leurs enzymes notamment protéolytiques. Les

protéases occupent une grande part du marché des enzymes industrielles,

notamment dans celle des détergents, des applications analytiques et dans

le domaine biomédical. En industries alimentaires, la protéolyse constitue un

puissant outil pour la modification des propriétés des protéines et des

systèmes protéiques.

Ce travail consiste à réaliser un screening de six échantillons de compost,

l’isolement des souches d’actinobactéries a été effectué par

ensemencement sur quatre différents milieux de culture (ISP2, ISP9, AF et

Olson). L’incubation a été réalisée à différentes températures de 7 jours

jusqu’à 14 jours. La présence d’activité protéolytique extracellulaire a été

prospectée sur le même milieu de culture de base (ISP2, ISP9, et Olson)

additionné de 1% de caséines déshydratées, les souches présentant un halo

clair autour des colonies ont été conservées.

Un total de 173 souches isolées ont fait l’objet d’une sélection après mise en

évidence de leurs capacités de production de protéases, 53 isolats

d’actinobactéries ayant été sélectionnées présentant une zone d’hydrolyse

qui varie de 4 mm jusqu’à 2,5 mm de diamètre. Cette étape a permet de

constituer une collection de souches productrices de protéases

extracellulaires pour la mise en culture liquide.

D’après les résultats obtenus, nous incitons à poursuivre nos efforts de

recherche pour une éventuelle exploitation en bio-industries.

Mots-clés : enzyme, isolement, actinobactéries, protéases.

mailto:wissem.boutana@

43



CP3.3

Isolation of cellulase producing bacteria using spent coffee

grounds as sole carbon source: potential application in

lignocellulose saccharification for bioethanol production

BENAOUAD Sara 1, MERAINI Ibtissem 1, CHOUBANE Slimane#1

1 Ecole Supérieure en Science Biologiques d’Oran ESSBO # Laboratoire d’Aquaculture et de Bioremédiation – AQUABIOR

[email protected]

Abstract

Enzymes are specific proteins with high catalytic efficiency. Several microorganisms

such as bacteria from various natural habitats are suitable to develop production

pathways for extracellular hydrolytic enzyme systems having synergistic effects for

the conversion of biomass into simpler sugars, such as cellulase. The latter has been

reported as one of the most important industrial enzymes on the world market. It has

several applications in food production, in textiles, in biological detergents and in

biofuels production which are intended to respond to the growing demands for

bioenergy. In this sense, bioethanol is widely recognized as a unique transport

biofuel with powerful economic, environmental and strategic attributes. The

second generation bioethanol is produced from lignocellulosic biomass such as

spent coffee grounds SCG which is a waste produced by millions of tonnes around

the world. There are several modes of enzymatic hydrolysis and fermentation to use

to produce bioethanol including the process of simultaneous saccharification and

fermentation (SSF).

Indeed, going from the overall context of this introduction, our aim was to isolate

bacterial strains capable of degrading crude cellulose to ultimately use the

produced cellulase in the saccharification of lignocellulosic biomass for the

production of bioethanol.

Hence, bacterial isolation was carried out from different samples from various

biotopes and sources (soil, waste and water) from different places in Algeria, to

isolate the best cellulase-producing bacterial strains. In this sense, the coffee

grounds were added to the isolation medium to promote the growth of bacteria

capable of using this waste as the sole source of carbon. Then, the best cellulase-

producing isolate is the one from the wheat bran sample (SON2), followed by the

strain corresponding to the banana peel sample (EB) and finally that from

Mostaganem soil (SM). This result was confirmed by Congo red assay and by

colorimetric assay of cellulase activity by the DNSA method.

The obtained strains would be an excellent source for the production of cellulase

capable of degrading crude SCG, after medium composition and conditions

optimization. This will allow the use of this important and available lignocellulosic

biomass in the production of bioethanol.

Keywords : Lignocellulosic biomass, spent coffee grounds, cellulase, SSF,

bioethanol.


44



CP3.4 Removal of BPA in aqueous solution by immobilized laccase

LASSOUANE Fatiha #1,2, AIT AMAR Hamid *2, RODRIGUEZ-COUTO Susana #3,4

1#Centre de Développement des Energies Renouvelables, CDER, 16340 Algiers,

Algeria, 2#Université des Sciences et de la Technologie Houari Boumediene (USTHB), LSGPI,

Faculté GMGP, BP 32, El-Alia 16111, Algiers, Algeria 3#Ceit-IK4, Water and Health Division, Paseo Manuel de Lardizábal 15, 20018

Donostia-San Sebastian, Spain 4#IKERBASQUE, Basque Foundation for Science, María Díaz de Haro 3, 48013 Bilbao,

Spain

[email protected]

Abstract

Enzymatic treatments focused on oxidative enzymes, such as laccases,

have been proposed as an alternative to conventional methods to remove

a contaminant present in wastewater such as endocrine disrupters.

However, the use of enzymes in their soluble form limits their practical

application due to their non-reusability, sensitivity towards denaturing

agents and low stability. To overcome these drawbacks, immobilization of

enzymes is a suitable technique that can increase the stability, facilitate the

separation and reuse of enzymes, thus, enabling their cost-effective use in

continuous processes.

The aim of this work was to study the ability of immobilized crude laccase,

produced under semi-solid state fermentation (SSF) of Trametes pubescens,

to degrade BPA in aqueous solution. This biocatalyst was immobilized by

glutaraldehyde crosslinking prior to entrapment into Ca-alginate beads. At

optimal conditions (i.e. pH 5, 30 °C, 20 mg L−1 BPA and 1500 U L−1 laccase),

a BPA removal higher than 99% in 2 h was achieved. In addition, the

immobilized biocatalyst was able to remove the BPA at 20 mg L-1 in 10

successive catalytic cycles with a removal efficiency greater than 70% at

the end of the last cycle.

Keywords : Laccase, Bisphénol A, immobilisation, crosslinking, alginate

beads


45



CP3.5 Performance of Commercial Enzymatic Preparation in

Lignocellulosic Biomass Hydrolysis

KERNANI Ridha#1, HADIOUCHE Dalila*2

#1Département de Génie des Procédés, Facultés des Sciences et Sciences

Appliquées,

Bouira University 2Laboratory of Management and Development of Natural Resources and Quality

Assurance

Bouira University

[email protected]

Abstract:

Enzymatic hydrolysis by a brewing enzyme and subsequent glucose

fermentation by baker’s yeast were evaluated for olive stones from 5 % to

15 % dry matter. Enzymatic hydrolysis resulted in an increase in glucose

concentration, giving final glucose yields near 65%. Fermentation of olive

stones hydrolysate resulted in the maximum ethanol produced (9.8 g/L).

Results showed that enzyme could effectively hydrolyze olive stone

pretreated with sulfuric acid as well as with NaOH without nutriment

addition, and yeast could ferment hydrolysate without nutrient addition.

Finally, results showed that olive stones are a suitable material for producing

ethanol.

Keywords: Enzymatic hydrolysis; Agro-industrial waste; Ethanol

fermentation; Yeast


46



CP3.6 Valorisation des déchets végétaux pour la production de

cellulases à partir d’Aspergillus sp. (PRn) isolé localement.

CHEMLAL Radia 1,2, KHERAT Mohamed 2, BOUKAF Fatma1, MOKHNACHE

Meriem1, STIHI Loubna Zakia1, MAMERI Nabil 2

1 Département BCM, FSB-USTHB, BAB EZZOUAR, ALGER. 2 Laboratoire de bioengineering et génie des procédés, Département du Génie de

l’environnement, ENP, ALGER.

[email protected]

Résumé

De nos jours, il est devenu important de réduire notre dépendance aux

combustibles fossiles dont l’utilisation abusive a eu des conséquences

dramatiques sur l’environnement. Pour pallier ce problème, les biocarburants

semblent être une alternative très prometteuse comme une énergie renouvelable,

durable et économiquement rentable. Les déchets végétaux riches en cellulose

sont potentiellement la matière première idéale pour la production de

biocarburant. Ce dernier est produit par la transformation du glucose issu de

l’hydrolyse préalable de la cellulose. Cette hydrolyse peut être réalisée par voie

chimique ou enzymatique. L’hydrolyse chimique nécessite l’utilisation d’acides et

de températures élevées. Alors que l'hydrolyse enzymatique présente les

avantages de nécessiter une consommation énergétique plus faible et possède

un impact environnemental réduit.

C’est pour cette raison que de nombreux chercheurs s’intéressent à la recherche

de nouvelles souches capables de se développer rapidement sur des substrats

peu coûteux tout en produisant de grandes quantités de cellulases. L’objectif de

ce travail est de contribuer à la recherche de nouvelles souches cellulolytiques qui

pourraient être utilisées dans la production de cellulases. Neuf souches fongiques

ont été isolées et identifiées à partir de matériaux cellulosiques en décomposition.

Le criblage sur un milieu ne contenant que de la carboxyméthylcellulose comme

source de carbone a montré que toutes les souches isolées possédaient une

activité cellulolytique. Parmi les souches les plus productrices, Aspergillus sp. (PRn)

a été retenue pour la production de cellulases. Les fermentations sur milieux

solides ont montré que l’utilisation du son de blé comme substrat était préférable

à celui d’un déchet végétal. Nous avons constaté qu’Aspergillus sp. (PRn) produit

des quantités élevées de protéines avec un optimum de production de cellulases

à 40°C.

On conclut que l’utilisation efficace de déchets agricoles résout des problèmes

non seulement de l’environnement, mais aussi contribue à la promotion de la

valeur économique des produits agricoles.

Mots-clés: Cellulases, Aspergillus, valorisation des déchets végétaux.


47



CP4.1 Isolement et screening des bactéries lipolytiques

BENHOULA Mohammed1, HAMMA Samir1, BENSAAD Mohamed Sabri2 ,AMGHAR Zahir1 , BOUDJELAL Aya3 ,AZZOUZ Zahra 1,MAIBECHE Rima1,

BOUICHE Celia1, BETTACHE Azzeddine1, BENALLAOUA Said1,

BOUCHERBA Nawel1

1 Laboratoire de microbiologie appliquée, Faculté des sciences de la Nature et de

la Vie Université de Bejaia

2Laboratoire physio-Toxicologie, Pathologie Cellulaire et Moléculaire-Biomolécules

(LPTPCMB), Université de Batna. 3Laboratoire de Biotechnologie Végétales et [email protected]

Résumé

La production d’huile d’olive représente environ 97% de la

production mondiale, cette production s’accompagne de l’apparition

des coproduits peu ou pas valorisés à l’heure actuelle. Un de ces produits

« Les margines » qui sont des effluents d’extraction d’huile d’olive, pose de

sérieux problèmes de pollution par leur concentration élevée en

matière organique et en polyphénols. L’objectif principal de cette

étude est la contribution à la biodégradation des margines via

certaines bactéries susceptibles d’être tolérantes à la toxicité des

polyphénols et productrices des lipases, l'isolement et la purification

des bactéries lipolytiques sont réalisés sur un milieu minimum minérale

additionné de tween 80. Le prélèvement des échantillons s’est fait à

partir de sites différents, effluents de Cevital, la boue du contour d’oued

Soummam et à partir d’un sol contaminé par les margines issu de

différentes huileries. Environ 30 souches sont isolées et ont montré une

activité lipolytique importante qui s’est manifestée par une zone

d'hydrolyse autour des colonies.

Mots-clés : Biodégradation, Margines, Isolement, Lipase

bactérienne, activité lipolytique

mailto:%[email protected]

48



CP4.2 Etude de la bioprospection de levures : criblage des activités

enzymatiques d'intérêt biotechnologique.

CHAIB Ibtissem2, DAKHMOUCHE-DJEKRIF Scheherazed 1, BENNAMOUN Leila2, AIT KAKI- EL HADEF ELOKKI Amel 2 , LABBANI Fatima Zohra Kenza1 et

NOUADRI Tahar2.

1 ENS Assia DJEBAR, Constantine. 2 Laboratoire de Génie Microbiologique et Applications (GMA).Université Frères

Mentouri (UFM), Constantine 1.

[email protected]

Résumé

Dans cette étude, nous nous sommes intéressées à l’étude du patrimoine

enzymatique chez des souches levuriennes locales. L'isolement des levures

productrices d’enzymes à intérêt industriel a été réalisé à partir de trois

échantillons à savoir le yaourt, les pelures de la pomme de terre et lemzeiet.

Ces niches microbiennes ont permis l’isolement de 80 souches. Parmi ces

dernières, 38 souches ont été sélectionnées selon la croissance rapide sur

YPGA à 30°C. Le potentiel enzymatique des isolats étudiés a été évalué pour

produire 09 activités différentes par la croissance des microorganismes sur

différents substrats. Les enzymes étudiées sont α-amylase, pectinase, lipase,

maltase, estérase, cellulase, protéase, laccase et uréase. Les résultats ont

montré que les souches les plus performantes pour chaque enzyme sont :P4

: α-amylase, Y38: cellulase, P28 : maltase , M31 : protéase, M3 : lipase, P5 :

laccase, M34: pectinase, P37: estérase et P4: uréase. L'identification des

cinq souches sélectionnées a été réalisée par l’étude des caractères

morphologiques et physiologiques. Les résultats ont révélé la capacité des

trois souches P5, P10 et Y38 de former le mycélium et à l’exception de P37

et M35, les quatre souches P5 , P10 ,M35 et Y38 ont une reproduction sexuée.

Mots-clés : lipase, maltase, estérase, laccase et uréase


49



CP4.3

Optimization of Extracellular L-asparaginase production by

Streptomyces strain isolated in Algeria, using mathematical

Modeling.

CHERGUI Achour#1, TITOUCHE Yacine*2, HOUALI Karim#3

# Laboratoire de Biochimie Analytique et Biotechnologies LABAB. Université Akli

Mohand Oulhadj de Bouira-Université Mouloud MAMMERI de Tizi-Ouzou,

[email protected]

Abstract

L-asparaginase is an enzyme that hydrolyses the amino acid L-Asparagine

into aspartic acid and ammonia. As a medication, L-asparaginase is used

in chemotherapy to treat acute lymphoblastic leukaemia by depleting

circulating Asparagine and depriving tumor cells. Interest in Streptomyces

genus as potential producers of antibiotics and enzymes encouraged us to

investigate an isolated strain (CA01) from soft wheat bran. The Streptomyces

strain was characterized based on its morphological, biochemical and

molecular characteristics and selected due to a proved promising ability to

produce L-Asparaginase optimized in both solid and liquid media cultures.

The conditions of enzyme production were standardized according to a

one-factor-at-a-time (OFAT) experimental design. To obtain optimal

medium combination, a Box-Behnken Response Surface Methodology

(RSM) has been adopted by choosing the most influential factors. The

optimal conditions for the enzyme production were (g/l): L-Asparagine 10.7;

Glucose 2.7; starch 7, in based medium containing (g/l): K2HPO4 0.5; MgSO4,

7H2O 0.1, corresponding to an optimal enzymatic activity of 8.03 IU/ml at

27.83°C. The maximum production of enzyme was reached on the sixth day

of experiment. The ANOVA test (P value ˂ 0.05) and adjusted R2 values close

to the experimental R2 show that the obtained model of the active L-

Asparaginase of CA01 strain production is significant with the following linear

terms: temperature, substrate concentration, Glucose concentration and

their squared.

Mots-clés : L-asparaginase; Streptomyces ; Optimization; Box Behnken

Design; RSM.


50



CP4.4 Optimisation de la production de l’enzyme protéase d’origine

actinomycétale

MANSOURI Nedjwa*#,BENSLAMA Ouided# , ARHAB Rabah#

# Laboratoire de Biotechnologie des Substances naturelles et Applications.

Département des sciences de la nature et de la vie, Université Larbi Ben M’Hidi,

Oum El Bouaghi

[email protected]

Résumé

Les protéases constituent l'un des groupes les plus importants d'enzymes

industrielles, représentant au moins 25% de la totalité des ventes d'enzymes,

les deux tiers des protéases produites commercialement étant d'origine

microbienne. Dans cette étude 11 souches d’actinomycètes ont été testées

pour leur activité protéolytique en procédant à un criblage primaire par leur

ensemencement sur les deux milieux gélose au lait et gélose à la gélatine.

Après 24 heures d’incubation à 30°C, le rapport de la zone hydrolysée

(mm)/zone de croissance (mm), a été calculé, les cinq souches SA12S17,

SA12S13, SA1S5, SA12S14 et SA12S18 ont présenté les rapports les plus élevés.

Afin d’optimiser la production de l’enzyme protéase, les cinq souches les

plus performantes ont été utilisées dans une expérience de production de

l’enzyme protéase, dans laquelle des fermentations ont été réalisées dans

trois milieux de composition différente, réglées chacunes à pH différents (pH

4, 7 et 9) et incubés pendant 5 jours à 30°C sous agitation continue à 180

tr/min. La souche SA12S18 donne le meilleur résultat dans le milieu I réglé à

pH 4 avec une valeur de 29,31 U/ml ce qui prouve que son activité

protéolytique est favorisée dans des pH acides, contrairement aux souches

SA12S16, SA12S13 et SA1S5 où la production de l’enzyme est favorisée par

un pH basique. Quant à la souche SA12S17 la meilleure activité

protéolytique a été observée dans le pH 7 dans le milieu II. L’effet de la

température sur la production de l’enzyme protéase a aussi été évalué

après incubation à différentes températures (30-50°C), il s’est avéré de

cette expérience que la production est nettement plus importante dans des

températures élevées pour les cinq souches étudiées.

Mots-clés : Protéase, actinomycètes, effet du milieu, effet du pH, effet de la

température


51



CP4.5 Optimisation de la production de peroxydase des souches

d’actinomycètes isolées au niveau de la wilaya de Béjaia

MAIBECHE Rima1,2, LE ROES-HILL Marilize2, BENDJEDDOU Kamel1, PRINS

Alaric2, BOUICHE Cilia1 , AZZOUZ Zahra1, HAMMA Samir1, BEN HOULA

Mohammed1, AMGHAR Zahir1, BETTACHE Azzeddine1, BENALLAOUA Said1,

BOUCHERBA Nawel1*

1Laboratoire de Microbiologie Appliquée (LMA), Département de Microbiologie,

Faculté des Sciences de la Nature et de la Vie, Université de Bejaia, 06000, Bejaia,

Algérie. 2Institut de Biotechnologie et Microbiologie Appliquée, Université de la Péninsule du

Cape, Bellville, Afrique du Sud

[email protected]

Résumé

Les peroxydases sont des oxydoréductases qui catalysent l’oxydation d’une variété

de substrats organiques et inorganiques en utilisant le peroxyde d’hydrogène. Ces

enzymes sont produites par les plantes, les animaux et les microorganismes et

l’aptitude à oxyder plusieurs substrats leur a permis d’être utilisées dans plusieurs

applications biotechnologiques telles que: l’industrie du papier (pour remplacer

certains traitements chimiques, ou encore le blanchiment de papier), la

détoxification des eaux usées (par l’élimination du phénol et décontamination du

sol), la dégradation des colorants synthétique, la dégradation des phénols et des

polluants aromatiques. Dans le présent résumé, nous décrivons des souches

d’actinomycètes isolées à partir de plusieurs échantillons telluriques de la région de

Béjaia, et testées pour leur production de peroxydases. La production

peroxydasique des 5 meilleures souches sélectionnées est optimisée en variant la

période d’incubation (3, 5 et 7 jours), la température d’incubation (30 et 37°C), le

pH du milieu de culture (5.0, 6.0, 7.0 et 8.0) et la présence de différents inducteurs

dans le milieu de culture (bois, papier, alcool vératrique, acide férulique et déchet

de canola). La production maximale de peroxydase de toutes les souches est

enregistrée après 5 jours d'incubation à 37°C pour les souches S04 ; S19 ; S44 et S45

et à 30°C pour la souche S36 et à pH 7 pour les souches S04 ; S19 ; S36 et S44 et à

pH 6 pour la souche S45. La présence de l’acide férulique dans le milieu de culture

a induit la production de peroxydase par les souches S04 ; S44 et S45 tandis que le

papier et l’alcool vératrique ont induit la production peroxydasique des souches

S04 et S45, respectivement. La production peroxydasique des souches est

également induite par la présence du déchet lignocellulosique du canola à

différentes concentrations, les activités peroxydasiques maximales sont obtenues

avec une concentration de 0,5% de canola pour les souches S04 ; S36 et S45, 1% de

canola pour la S44 et 2% de canola pour la souche S19.

Mots-clés: Actinobactérie, peroxydase, optimisation, inducteurs, applications

biotechnologiques.

52



CP4.6

Application of Pulsed field gel electrophoresis using XbaI

restriction enzyme to study clonal relatedness of Multidrug-

resistant E. coli isolates

BENAMEUR Qada 1, BEN-MAHDI Meriem-Hind 2, GERVASI Teresa3

1Nursing Department, Faculty of Sciences of Nature and Life, University of

Mostaganem, Algeria. 2Laboratory of Health and Animal Production, Higher National Veterinary School,

Algiers, Algeria. 3Laboratory of Food Microbiology and chemistry, Department of Biomedical and

Dental Sciences and Morphofunctional Imaging, University of Messina, Messina,

Italy.

[email protected]

Abstract

Background: Restriction enzymes are used in biotechnology to cut DNA into smaller

strands in order to study fragments length differences. Pulsed field gel

electrophoresis (PFGE) of DNA fragments obtained using different enzymes is a

powerful technique for identification the clonal origin of the isolates in an infectious

outbreak and for tracking the source, the route of transmission and dissemination

way of infection. There are nine restriction enzymes commercially available with an

8-bp recognition sequence. However, the choice of restriction enzyme to use for

DNA digestion is a critical variable in the PFGE process. This study aimed to

characterize two multidrug-resistant (MDR) E. coli isolates by PFGE method, using

XbaI restriction enzyme.

Material and Methods: Two previously characterized MDR E. coli isolates of poultry origin were

included in this study. The first strain was isolated from a pooled sample of the ovaries of broiler

breeders collected from a broiler breeder farm situated in Chlef province and the second one

was recovered from a sample of internal contents of broiler hatching eggs collected from a

commercial broiler hatchery located in Mostaganem province, which received eggs from

various provinces of western Algeria. Clonal relatedness was determined by PFGE using XbaI

restriction enzyme, isolated from the bacterium Xanthomonas badrii, according to standard

protocols. Plugs containing digested DNA were then loaded on agarose gels and run using

contour-clamped homogenous electric fields.

Results: One DNA banding pattern was obtained, by digestion of DNA with XbaI restriction

enzyme, for the two E. coli isolates. Digestion with XbaI produced DNA fragments with a size

smaller than 50-242 kb.

Conclusion: The implementation of this powerful molecular tool, by using XbaI

restriction enzyme, allowed us to reinforce the hypothesis of vertical transmission of

MDR E. coli from broiler breeders to their offspring.

Keywords: MDR E. coli, clonal relatedness, poultry, PFGE, XbaI restriction enzyme.


53



CP4.7

Optimisation de la production de la polygalacturonase à intérêt

industriel par la levure Aureobasidium pullulans isolée de sol

aride saharien (El-M’gheir).

BENNAMOUN L. 1, DAKHMOUCHE S. 1, AIT-KAKI A. 1, LABBANI F-Z K. 1, NOUADRI

T. 1

1 Frères Mentouri University, Research Lab in Enzymatic Engineering, Depart. Of

Biochemestry – BMC, Constantine, Algeria

[email protected]

Résumé

Parmi les nombreuses enzymes, les industries montrent un intérêt grandissant

pour les pectinases qui offrent de nombreuses possibilités d’utilisation dans

différents secteurs industriels (IAA, textile, papeterie, …) et dont les domaines

d’applications ne cessent de s’accroître. Les enzymes pectinolytiques

occupent une position centrale avec 25% du marché global des enzymes.

Novenzymes (Danemark), Novartis (Suisse), Roche (Allemagne) et Biocon

(Inde) sont les principaux producteurs commerciaux de pectinases. En

Algérie, l’industrie des enzymes est totalement absente. Par ailleurs, les

déchets agro-industriels, riches en matières organiques, peuvent être

recyclés et transformés par les procédés biotechnologiques. Parmi ces

derniers, les fermentations en cultures submergées connaissent un regain

d’intérêt à travers le monde, puisqu’elles permettent une production

importante de diverses substances. Ainsi, l’objectif de cette étude est la

valorisation des déchets de tomates pour la production de la

polygalacturonase par la levure Aureobasidium pullulans. Ce substrat est

ciblé par sa richesse en glucides solubles (20.25%), en matière minérale

(5.83%) et en protéines (18.31%). L’étude montre que la levure

Aureobasidium pullulans donne une meilleure production en enzyme avec

une concentration de 4% en déchets de tomates. Le substrat inducteur est

le lactose à 1% entraînant une augmentation de l’enzyme de 642%. La

validation du modèle a permis d’obtenir une activité de la

polygalacturonase de 22.05 UI/ml, soit 5 fois plus élevé que dans les

conditions non optimisées. Ainsi, le milieu optimal permet une production

importante de la polygalacturonase sur un milieu à moindre coût.

Mots clés : Polygalacturonase, Aureobasidium pullulans, Déchets de

tomates, Optimisation.


54



CP4.8

Recherche in silico de nouveaux inhibiteurs de la 1-désoxy-D-

xylulose 5-phosphate réducto-isomérase (DXR) : des agents

antimycobactériens potentiels

BOUCHERIT Hanane [a, b]* , MERZOUG Amina [a, b] , CHIKHI Abdelouahab

[a], BENSEGUENI Abderrahmane [a] , MOSBAH Asma[a]

[a] Laboratoire de biochimie appliquée, Département de biochimie et de biologie

moléculaire et cellulaire, Faculté des sciences naturelles et de la vie, Université des Frères

Mentouri, Constantine 1.

[b] Centre universitaire Abdelhafid Boussouf, Mila, Algérie.

[email protected]

Résumé

L’augmentation des cas de tuberculoses pharmaco-résistantes est un phénomène

réel, inquiétant et une préoccupation dans de nombreux pays. Le besoin

permanent de développement de nouveaux antibiotiques qui ciblent des

nouvelles voies est évident. En effet, cette situation encourage les recherches

contre la tuberculose, notamment avec le renforcement des liens entre la biologie

et l’informatique; dont une grande variété de logiciels sont à présent disponibles en

vue de regrouper, analyser et intégrer des données biologiques et médicales. Plus

spécifiquement, ces logiciels permettent de créer des modèles informatiques visant

à faire des prédictions et par là même favoriser les progrès en médecine. Le

docking moléculaire est une approche théorique qui permet la prédiction du mode

d’interaction d’un ligand avec son récepteur en donnant un éclairage

irremplaçable sur les interactions au niveau moléculaire. Dans ce contexte, la 1-

désoxy-D-xylulose 5-phosphate réducto-isomérase (DXR) est une enzyme essentielle

de la voie non-mévalonique de synthèse des isoprénoides, chez la plupart des

microorganismes pathogènes incluant Mycobacterium tuberculosis. Celle-ci est

plus particulièrement étudiée dans le cadre de la mise au point d’agents

antituberculeux.

Notre travail avait pour objectif d’acquérir des compétences en simulation

informatique, notamment le docking moléculaire par FlexX afin de contribuer au

développement in silico de nouveaux inhibiteurs plus puissants de la DXR: cible

thérapeutique potentielle lors de l'infection par Mycobacterium tuberculosis.

Dans cette étude nous avons réalisé un docking moléculaire par le logiciel FlexX sur

la cible 2Y1F, un DXR appartenant à M. tuberculosis, d’une collection des composés

issus de la PubChem, similaires des inhibiteurs référés FOM et FM6. Trois similaires:

CID-73440823, CID-87982598 et CID-14151807 avec des énergies d’interaction

égale à -50.506 Kj/mole, -53.877 Kj/mole et -47.824 Kj/mole respectivement, sont

considérer comme les meilleurs inhibiteurs théoriquement potentiels de la 2Y1F plus

affins et plus sélectifs que la FOM et FM6. Ces résultats aideront probablement au

développement d’un outil thérapeutique efficace pour lutter contre le

développement de la tuberculose.

Mots-clés: Tuberculose, Mycobacterium tuberculosis, Antituberculeux, DXR,

Docking moléculaire.


55



CP5.1 Isolation and characterization of a novel tyrosinase produced by

Saharan soil Actinobacteria

HARIR Mohammed 1, 2, BENHAMED Nadjia2, DIB Soulef1, POGNI Rebecca3

# 1 1.Biology of Microorganisms and Biotechnology Laboratory, University of Oran 1

Ahmed Ben Bella, BP1524, Oran El Mnaouer, 31000 Oran, Algeria.

2 Department of Biotechnology, Faculty of Natural and Life Sciences, University of

Sciences and Technology Mohamed Boudiaf, Oran, Algeria. 3Department of Biotechnology, Chemistry and Pharmacy, University of Siena, 53100

Siena, Italy

[email protected]

Abstract

In the present study different actinomycete strains were collected and

isolated from Algerian Sahara soil with the aim to select novel enzymes with

promising features for biotechnological applications. The Ms1 strain was

selected, amongst the others, for its capability to produce melanin in

different solid media. Ms1 chromosomal DNA was sequenced and the strain

assigned to Streptomyces cyaneofuscatus sp. A tyrosinase (MW ∼ 30 kD)

encoding sequence was identified and the corresponding enzyme was

isolated and biochemically characterized. The tyrosinase showed the

highest activity and stability at a neutral and alkaline pH and it was able to

oxidize LDOPA at T = 55 °C and pH 7. The enzyme showed variable stability

in presence of various water-miscible organic solvents, while it was

inactivated by reducing agents. The tyrosinase activity was unaffected by

NaCl and enhanced by different cations. Furthermore, the enzyme showed

a higher specificity for diphenols than monophenols showing a higher

diphenolase than monophenolase activity.. Taken all together, these results

show that the enzyme displays interesting properties for biotechnological

purposes.

Keywords: Bacterial tyrosinase,soils, Biochemical characterization,

organic solvents , Streptomyces cyaneofuscatus ;

56



CP5.2 Isolation and characterization of bacteria of the genera

Pseudomonas and Bacillus with enzymatic potential from a

volcanic soil of Ahaggar.

BENAISSA Asmaa#1,2, OUANKILLA Aicha*2, BEN BESSIS El-Hadja*2, HABIBI

Zaineb*2

1) #Laboratory of Plant Physiology, Department of Biology and Physiology of

Organisms, Faculty of Biological Sciences, University of Sciences and

Technologies of Houari Boumediene - El-Alia BP 16011 Bab Ezzouar Algiers,

Algeria2) Department of Biology, Institute of Science and Technology, Universitary Center

of Amine Elokkal ElHadj Moussa Eg. Akhamoukh, 11039 Sersouf, Tamanrasset,

Algeria

[email protected]

Abstract

The soil contains various types of bacteria, which play an important role in

biological functioning, but not only that, they can be a real source of

biomolecules. The work that we present is a bio-prospective study of a

volcanic soil in the region of Tahart (Ahaggar) in Tamanrasset, which aims

to research and characterize bacteria of the genus Bacillus and

Pseudomonas that produce exo-enzymes.

Therefore, different selective culture media were used (Cetrimide, Pseudo

Agar) for the isolation of Pseudomonas and a thermal pre-treatment was

carried out for the isolation of Bacillus on Plat Count Agar. The strains were

studied phenotypically through examination of Gram, catalase, oxidase,

sugar assimilation and identified by API gallery (BioMérieux, France).

Similarly, an enzymatic characterisation of these strains was carried out

according to standardised protocols by searching for amylase, lecithinase,

haemolysin, caseinase, pectinase and gelatinase.

Bacteria belonging to the genus Bacillus represent 30% of our results, while

those belonging to the genus Pseudomonas represent 70%. The results

showed a strong enzymatic activity up to 59% of the strains that could in vitro

produce extracellular enzymes, especially hydrolytic ones. In conclusion,

despite the acidity of our substrate, an interesting strain of enzyme-

producing bacteria has been selected and can be used for further studies

such as the purification of these enzymes and their physicochemical

analysis.

Keywords : Volcanic soil, Bacillus, Pseudomonas, enzymatic activity,

Ahaggar.


57



CP5.3

Isolement et étude biochimique des enzymes amylolytiques

chez des souches d'actinomycètes telluriques isolées à partir de

la région de Souk Ahras

SAOUDI Boudjema *1-#2, HABERRA Soumaya#2, AYARI Adel*1, LADJAMA Ali#2

(*1) Laboratoire des Ecosystèmes Aquatiques et Terrestres (LEAT), Faculté des

Sciences de la Nature et de la Vie, Université Mohamed Cherif Messaadia, Route

de Annaba, BP 1553- Souk Ahras- 41000 Algérie.

(#2) Laboratoire de Biochimie et de Microbiologie Appliquée (LBMA).

Département de Biochimie, Faculté des Sciences, Université Badji Mokhtar BP12-

Annaba-23000 Algérie.

[email protected]

Résumé

Les enzymes occupent une place primordiale dans l’industrie alimentaire

particulièrement les amylases qui sont utilisées depuis l’antiquité en

biotechnologie surtout dans la production du jus riche en fructose, glucose

et maltose, ainsi, la panification. Dans ce travail de recherche, plusieurs

souches mésophiles, appartenant au groupe des actinomycètes ont été

isolées, ainsi, le criblage de leurs activités amylolytiques a été effectué. Les

résultats de recherche ont montré que la plupart des souches sont actives

sur l’amidon brut et hydrosoluble en milieu YST solide et liquide,

respectivement, par sécrétion des amylases. Cela a été mis en évidence

par un test semi quantitatif (test de l’iodine). Trois souches semblent être plus

actives par rapport aux autres souches et particulièrement la souche de

référence Streptomyces coelicolor A(3)2, c’est le cas des souches F222, S212

et S215. Cela a été confirmé par un test quantitatif -celui de Miller-

spécifique au réactif de DNS, qui permet la détection et la détermination

des sucres réducteurs issues de la réaction enzymatique du substrat

d’amidon. La souche F222 s’est montrée la plus active, celle-ci a fait l’objet

d’une étude plus approfondie. L’optimisation de la production de l’enzyme

par la souche sélectionnée a été effectuée par la méthode de culture

submergée (SBF) sur un milieu liquide (YST) à base d’amidon de maïs. La

purification des enzymes sécrétées sur milieu liquide a été réalisée par la

méthode de fractionnement par le sulfate d’ammonium. La caractérisation

physico-chimique de l’extrait brut (Température optimale, pH optimum,

thermo-stabilité, effet des sels,…etc) a été également effectuée et la

détermination des produits finaux de la réaction a été également menée

par la méthode de chromatographie sur couche mince (CCM).

Mots-clés: actinomycètes, amylases, purification, fractionnement et

caractérisation.


58



CP5.4 Recherche de l’activité antibactérienne et enzymatique chez

des isolats d’Actinomycètes isolées à partir d’écosystème

extrême d’El Bayadh

AGUIS Hayat#1, BENREGUIEG Mokhtar1

#Laboratoire de Biotoxicologie, Pharmacognosie et Valorisation Biologique des

Plantes , Département de biologie, université de Saida Dr. Tahar Moulay, Algérie

[email protected]

Résumé

Les actinomycètes extrêmophiles sont également considérés comme les

meilleurs candidats dans le domaine de production des métabolites à

diverses applications biotechnologiques (la santé, l'alimentation, l’industrie

de détergents, la dépollution etc.). Dans ce travail l’objectif était la

détection de l’activité antibactérienne et enzymatique chez des isolats

d’Actinomycètes originaires des sols arides de la région d’Ain Loarak,

Sebkha de Bougtob et El Bayadh. Pour cela, le test d’activité

antibactérienne a été effectué sur 18 isolats d’actinomycètes envers deux

souches bactériennes (Staphylococcus aureus ATCC 25923, Listeria

monocytogenes ATCC15313). Sur cet ensemble, 14 isolats ont montré un

pouvoir inhibiteur contre Staphylococcus aureus alors que 8 seulement ont

présenté un pouvoir inhibiteur contre Listeria monocytogenes. En outre, le

screening de l’activité enzymatique des isolats a été réalisé par culture sur

des milieux améliorés à base de différents substrats (xylane, amidon,

kératine, caséine, cellulose). L’activité kératinolytique et protéolytique et

Amylolytique ont été remarquées chez tous les isolats, tandis que l’activité

cellulolytique a été remarquée chez 7 isolats. Une attention particulière a

été portée sur la souche A19 qui a montré la meilleure activité

xylanolytique pour produire son extrait. Une fermentation submergée de

l’isolat A19 a été lancée pendant 24h pour suivre la cinétique de la

production de la xylanase. L’activité a été détectée dans le milieu dès la

quatrième heure d’incubation avec un maximum à partir du 6h alors qu’une

diminution progressive de cette activité a été marquée au-delà de cette

période. Alors que l’analyse CCM de l’extrait a révélé l’existence de deux

substances très polaires.

Mots-clés : Actinomycètes extrêmophiles, activité antibactérienne, activité

enzymatique, xylanase, CCM.

59



CP5.5 Activité protéolytique des actinomycètes de l’extrême

BENHAMICHE Houria#1, ZERIZER Habiba#2,

#BIOQUAL INATAA-Université Frères Mentouri Constantine 1

[email protected]

Résumé

Les protéases représentent la plus grande partie des enzymes industrielles,

elles trouvent leur application en industries pharmaceutiques, alimentaires,

textiles et en bioremédiation. Deux tiers des protéases produites

industriellement sont d'origine microbienne.

Le choix des actinobactéries comme source de protéases est motivé par

leur abondance dans la nature et leur adaptation à des environnements

extrêmes ce qui leur confère la particularité de produire des métabolites à

des propriétés intéressantes.

Cinquante-quatre souches appartenant aux actinobactéries sont isolées à

partir de sols arides du sud algérien et six de deux de sources thermales aux

températures avoisinant les 60°C: Hammam Silal de Bejaia et Hammam

ksana de Bouira.

L’isolement des actinobactéries est réalisé sur deux milieux : Bennet et ISP2

par la technique de suspensions-dilutions, la purification est effectuée par

la méthode des stries sur les mêmes milieux d’isolement. La morphologie des

souches est examinée par un microscope optique à objectif X40. Après

screening de l'activité protéolytique sur un milieu de gélose au lait écrémé,

27 souches se sont révélées productrices de protéases, leur température

optimale de croissance est à 45°C.

Cette première partie du travail a permis d’isoler des actinobactéries

protéolytiques thermotolérants. L’exploration d’autres environnements sera

une suite pour l’obtention de nouvelles souches extrêmophiles.

Mots-clés : Actinobactéries, Protéases, extrême

60



CP5.6 Screening de lacoagulase chez des bactéries isolées d’un lac

salé Algerien

LENCHI Nesrine 1,2, KEBBOUCHE-GANA Salima 2, KHEMILI-TALBI Souad 2,

AKMOUSSI-TOUMI Sihem 2

1Department of Natural and Life Sciences, Faculty of Sciences, University Algiers 1

BenYoucefBenkhedda, Algiers, Algeria 2Bioinformatics, Applied Microbiology and Biomolecules Laboratory, Faculty of

Sciences, University of M'HamedBougara of Boumerdès. Algeria.

[email protected] / [email protected]

Résumé

Les bactéries vivantes dans des milieux extrêmes comme les fortes

concentrations en sel ont une grande importance biotechnologique en

tant que sources d'enzymes halophiles. Les enzymes qui dérivent des

microorganismes halophiles ou halotolérants sont dotées de

caractéristiques structurales et d'un pouvoir catalytique unique et cela dans

des conditions de forte teneur en sel. Certaines de ces enzymes ont été

décrites comme étant actives et stables dans plus d'une condition extrême.

L'est de l'Algérie présente de nombreux écosystèmes, y compris des

environnements aquatiques hypersalins. Parmi eux le Chott Tinsilt, un lac salé

peu profond avec une concentration en sel de plus de 200 g/L.

Le but de ces travaux est d’une part, d’explorer, par méthodes culturales,

la biodiversité bactérienne habitant ce milieu extrême, et d’autre part, de

rechercher l’intérêt biotechnologique et industriel de ces souches isolées

par le biais de l’enzyme coagulase qu’elles produisent.

L'analyse de la séquence d'ADNr 16S a montré que les souches isolées

appartiennent aux genres Halomonas, Staphylococcus, Salinivibrio,

PlanococcusetHalobacillus.

Parmi les sept isolats identifiés, quatre souches A1, A2, A4 et B5 présentaient

des activités enzymatiques de type coagulase. A notre connaissance,

l'activité coagulase n'a jamais été rapportée chez les bactéries halophiles

et cela en présence de 20 et 25% de NaCl tel est le cas dans ce présent

travail.

Ces souches sont, en effet, de bonnes candidates comme sources de

nouvelles enzymes à potentiel biotechnologique car elles peuvent être

utilisées dans différents procédés industriels qui requièrent une forte

concentration en sel.

Mots-clés : Chott, bactéries, enzymes halophiles, coagulase,

biotechnologie.

mailto:[email protected]%20%20/%[email protected]

61



CP5.7 Production, activité et stabilité de protéases synthétisées par

une souche thermotolérante d’actinobactérie.

RACHEDI Kounouz1,2, MERADJI Meriem1,2, MAHDJOUB Nour El Houda2,

ZERIZER Habiba1,2, BOUGHACHICHE Faiza1,2, KHARROUB Karima1,2

1. Laboratoire de Recherche de Biotechnologie et Qualité des Aliments (BIOQUAL)2. INATAA, Université Frères Mentouri Constantine 1, Constantine, Algérie

[email protected]

Résumé

Les actinobactéries ; un groupe bactérien ubiquitaire, regroupent des

genres rares, dont le développement de certains, nécessite des conditions

physico-chimiques extrêmes et se distinguent donc par la synthèse de

protéases présentant un profil industriellement pertinent, intéressant les

industriels de divers domaines, notamment celui de l’agro-alimentaire.

Dans ce cadre, une souche actinobactérie (SMNH) est testée pour son

aptitude à produire des protéases sur une gélose au lait écrémé. Les

paramètres de production (température et pH) sont déterminés et l’activité

protéolytique est mesurée sur milieu liquide au lait écrémé, selon la

technique de Tsuchida et al. (1986). La température et le pH d’activité de

l’extrait enzymatique obtenu, ainsi que sa stabilité sous différentes valeurs

de température et de pH, sont déterminés. Par ailleurs, la souche SMNH est

partiellement caractérisée.

La souche SMNH présente une activité protéolytique optimale quand elle

est cultivée à Ph 7 sous une température de 37°C. L’extrait enzymatique

présente un optimum d’activité à 70°C et à pH 12, avec une thermostabilité

dans un intervalle allant de 30 à 80°C pendant une heure, alors que, dans

un intervalle de pH de 7 à 12, l’enzyme garde plus de 50% de son activité,

ceci permet de la classer parmi les protéases alcalines thermostables.

L’observation microscopique de la souche SMNH, par la technique de la

lamelle, révèle des filaments portant des spores séparées disposées en

alternance de part et d’autre des filaments constituant le mycélium aérien.

Cet aspect particulier permet de la rapprocher à deux genres présentant

la même disposition sporale, à savoir Thermoactinomyces et

Micromonospora.

En perspectives, deux axes doivent compléter ce travail ; une

caractérisation chimiotaxonomique et moléculaire de la souche SMNH ;

ainsi qu’une étude approfondie des protéases synthétisées.

Mots-clés : Activité protéolytique, actinobactéries, production et activité

optimales, stabilité.


62



CP5.8

Actinobactéries thermophiles isolées à partir d’une eau

thermale Algérienne : une source d’alpha amylase

thermostable

LEFAIDA Cherifa(1,2), MEDJMEDJ Maya(2), BOUDEMAGH Allaoueddine (2)

(1)Laboratoire de génie microbiologique et application, Département de

microbiologie. Faculté des sciences de la nature et de la vie (2) Département de microbiologie. Faculté des sciences de la nature et de la vie

Université des frères Mentouri Constantine1, Constantine-Algérie

[email protected]

Résumé

Les actinobactéries thermophiles isolées à partir des eaux thermales sont

très mal étudiées et nécessitent des investigations approfondies afin de

comprendre leurs aptitudes métaboliques uniques. A cause de l’intérêt

biotechnologique avéré des enzymes thermostables, les chercheurs se sont

orientés ces dernières années, vers l’étude des capacités de production à

partir de ces bactéries thermophiles. L'alpha-amylase est une enzyme

industrielle, qui coupe les bandes alpha 1-4 glycosidiques internes de

l'amidon et d'autres polysaccharides pour produire plusieurs produits tels

que le glucose et le maltose. Cette enzyme commerciale est la plus

largement utilisée. Plusieurs travaux de recherche tentent de manipuler

génétiquement certains microorganismes afin de produire de l'alpha-

amylase avec de nouvelles caractéristiques telles que la thermosabilité.

Cependant certains écosystèmes extrêmes, peuvent offrir des producteurs

microbiens adaptés à différentes conditions comme la chaleur élevée.

Dans ce contexte, cette étude a été consacrée à l’isolement par méthodes

microbiologiques conventionnelles, d’actinobactéries thermophiles à partir

de la source thermale de TLEGHMA située dans l’Est Algérien. Tous les isolats

obtenus ont été caractérisés morphologiquement et par des méthodes

physiologiques. Ces caractères ont permis de les assigner au genre

Streptomyces. Parmi ce lot, deux isolats ont présenté des capacités à

produire une amylase thermostable. Ces deux actinobactéries ont été

identifiées par le séquençage du gène de l’ARN16s comme étant

Streptomyces albidoflavuset Streptomyces fulvissimus à 99% de similarité.

Ces deux souches sont capables de produire de l’amylase thermostable qui

résiste à une température allant jusqu’à 70°C. Cette enzyme est également

résistante à un pH de 11.Ces résultats montrent que les actinobactéries et

spécialement les Streptomyces thermophiles provenant des eaux chaudes,

sont une source d’amylase thermostable.

Mots-clés : Actinobactéries, sources thermales, amylase thermostable.


63



CP6.1 Isolement, Screening et caractérisation de levures productrices

d’enzymes à intérêt biotechnologique

LABBANI Fatima-Zohra Kenza1*, DAKHMOUCHE Schehrazed1*, BENNAMOUN

Leila2*, AIT-KAKI Amel3*, NOUADRI Taher2*

(*)Laboratoire de Génie Microbiologique et Applications, Faculté des Sciences de

la Nature et de la Vie, Université des frères Mentouri Constantine 1.

(1) Ecole Normale Supérieure Assia Djebar de Constantine.

(2) Département de Biochimie et Biologie Moléculaire et Cellulaire, Faculté des

Sciences de la Nature et de la Vie, Université des frères Mentouri Constantine 1.

(3) INATAA, Université des frères Mentouri Constantine 1.

[email protected]

Résumé:

Les amylases et les protéases sont parmi les enzymes les plus importantes

en biotechnologie. Elles ont des applications potentielles dans divers

domaines tels que, l’industrie des détergents, l’industrie du textile, la

papeterie, les biocarburants, l’industrie alimentaire et pharmaceutique. Les

levures se sont révélées être une excellente source d’enzymes. Elles sont

généralement considérées comme une microflore importante de

nombreux produits alimentaire, en raison de leur capacité à se développer

sur des substrats riches en protéines, lipides, sucres et acides organiques. Il

est important d’isoler des levures qui produisent des enzymes hydrolytiques

pour développer un nouveau procédé de synthèse des produits d’intérêt

biotechnologique.

Dans le présent travail, 15 souches de levures ont été isolées à partir des

pelures de betteraves achetées d’un marché local à Constantine (Algérie).

Les isolats ont fait l’objet d’une caractérisation morphologique (forme des

cellules et aspect des colonies sur milieu solide) ainsi qu’un séquençage de

la région D1/D2 du gène ARNr 26S. Les activités amylase et protéase ont été

testées sur les milieux AAM (Amylase Activity Medium) et SMA (Skimmed Milk

Agar), respectivement. Parmi les 15 levures isolées, 03 souches ont présenté

la capacité à produire des activités enzymatiques. Les souches actives

appartiennent aux genres : Candida, Hanseniaspora et Pichia. De plus, la

souche de Candida sp. s’est révélée à la fois productrice d’amylase et de

protéase. Par leurs activités enzymatiques, nous pouvons conclure que les

souches de levures Candida sp., Hanseniaspora sp., et Pichia sp. présentent

un intérêt biotechnologique.

Mots-clés: Levures, screening, enzymes, intérêt biotechnologique.

64



CP6.2 Highlighting of cellulolytic, saccharolytic, pectinolytic activity

and scereening of antibio-resistants prokaryotic species

involved in soft rots of vegetables, collected from different arid

areas in the North-eastern of Algeria. Preliminary study

MERIBAI Abdelmalek1 , DIAFAT Abdelouaha1, BACHENE Abderahmane2

1 Laboratoire de Caractérisation et de valorisation des Ressources Naturelles

(L.C.V.R.N)

Faculté SNV- STU- Université Al Bachir Al Ibrahimi - Bordj Bou Arreridj – Algerie 2 La Faculté ST- Université Al Bachir Al Ibrahimi - Bordj Bou Arreridj - Algerie boratoire

de Caractérisation et de valorisation des Ressources Naturelles (L.C.V.R.N)

Abstract

Backround: Vegetable harvests, tubers and fruits, by their richness in proteins,

vitamins, mineral and trace elements, provide a balanced diet. They are divided

into leafy vegetables, seed vegetables, fruit vegetables and root vegetables

(tubers). Among these, we find the potato (Solanum tuberosum), carotte), carrot

(Daucus carota), rich in proteins and vitamins respectively, are the most sensitive to

the prokaryotic enzymes attacks responsible for soft rot. Aim: various negative and

positive Gram prokaryotic species, soft rot responsible targeting tubers and fruits,

which causes high economic losses in the fields during harvest and / or during

storage/transportation. Aim Study aimed the Highlighting of enzymes and screening

of bacterial species, most responsible for soft rot of vegetables, from five plant

species, Potato (Solanum tuberosum), Carrots (Daucus carota), Turnip (Brassica

rapa), Beet (Beta vulgaris) and Zucchini (Cucurbita pepo). Collected from local

markets in arid areas (Bordj Bou Arreridj province) North-Eastern of Algeria. Results:

Isolation, purification on five selectifs bacteriological medias: (LPGA, King A, King B,

Citrimide- Agar and nutitritif agar), bacteriological, biochemical characterization

by conventional micro-galleries, and API 20E, API 20NE, API 10S (Bio-Merieux) and

physiological by cultures on extreme-hostile media at various pH, and various media

different concentrations of (NaCl), culture and / or incubation at various

temperatures, allowed the selection of eight prokaryotic species with a Gram

negative, potentially saccharolytic, exhibiting a very pectinolytic/cellulotic power

(in vivo). After Api-Web software identification, these procaryotic species were:

Erwinia sp, Erwinia carotovora, Pseudomonas sp) (carrots), Pseudomons fluorescens,

Enterobacter cloaceae, Ralstonia sp (potatoes), Pasteurella sp (Turnip),

Pseudomonas fluorescens from betterave. Establishment of strains antibiograms

profils showed: 78% were resistant 15% sensitive and 08% intermediate.

Conclusion: Study allowed the establishment, by cryopresesrvation, of a strains bank

collection for most involved in soft rot phenomena (Collection will be used for further

studies). However, the intensity of enzymatic activities in different hostile

environment and the rate of poly-antibiotic-resistant of strains deserves further, more

detailed Enzymatic genetic, para-genetic and molecular investigations.

Keywords: Vegetable, Enzymes, Soft Rot, Procaryot, Antibiogram.

65



CP6.3

Inhibition de l’activité de la xanthine oxydase par les extraits de

feuilles et de l’écorce de Fraxinus angustifolia

MEDJAHED Zineb#1, ATMANI –KILANI Dina*2, ATMANI djebbar#3

# Laboratoire de Biochimie appliquée, Université Abd Rahmane Mira Bejaia, Algerie,

[email protected]

Résumé

Fraxinus angustifolia, une plante appartenant à la famille des Oléacées très

répondues dans le bassin méditerranéen est largement utilisée comme anti-

inflammatoire, anti-diarrhéique, et comme un agent favorisant la circulation

sanguine. Notre travail se propose d’évaluer l’effet inhibiteur de l’alpha amylase de

5 extraits des feuilles et de l’écorce de F. angustifolia. L’activité de la xanthine

oxydase est traduite par la mesure de la formation de l’acide urique à 295 nm. La

xanthine déshydrogénase et la xanthine oxydase (XD/XO) catalysent la

transformation de l’hypoxanthine et la xanthine en acide urique, la formation de

l’acide urique a été mesurée par min pendant 6 min, cette réaction a été exprimée

sous forme d’une cinétique linéaire, la réaction a été arrêtée par l’ajout de

l’inhibiteur de la xanthine oxydase (20 µl), suite à cela la concentration minimale

inhibitrice CI50 a été calculée. L’allopurinol, la catéchine, l’acide caféique, l’acide

gallique et la quercetine (50 µg/ml) ont été utilisés comme inhibiteurs de référence.

L’activité de la xanthine oxydoréductase a été calculée à partir de la moyenne

des pentes des spectres des trois essais obtenus. Le pourcentage d’inhibition de la

xanthine oxydase a été calculé pour chaque extrait. Les résultats obtenus montrent

que tous les extraits ont exercé un effet inhibiteur significatif (p < 0,001) sur l’activité

de la XO. Les pourcentages d’inhibition obtenus montrent que l’extrait aqueux

d’acétate d’éthyle de feuilles semble avoir l’effet inhibiteur le plus puissant, parmi

tous les extraits testés, avec un pourcentage de 43,93% ± 3,45, suivi par l’extrait

d’acétate d’éthyle de feuilles, puis l’extrait chloroforme de l’écorce (32,90% ± 5,65

; 30,75% ± 3,38). Ces valeurs restent inférieures à celles rapportées pour les standards

testés (acide caféique 100% ; acide gallique 62,16% ± 8,54 ; quercetine 98,66% ±

5,54), excepté la catéchine qui inhibe la xanthine oxydase de 28,84% ± 6,76. Les

extraits ont étés analysés par HPLC, plusieurs flavonoïdes ont été caractérisés.

D’après les résultats présentés, les feuilles et l’écorce de F. angustifolia peuvent

contenir les composés phénoliques suivants: Oleuropeine, Acide coumarique,

Apegénine, Pinoresinol, Lutoline, Acide sinapique, Tyrosol, Quercetine, Acide

benzoique, Acide cinnamique, 1.3 DHN, et Acide caféique.

Mots-clés : Fraxinus angustifolia, Xanthine oxydase, Allopurinol, HPLC, Quercetine


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CP6.4

Cc-PDE,new purified phosphodiesterase enzyme from snake

venom with biotechnological impact

KIHELI Hamida#1, CHERIFI Fatah *2, LARABA-DJEBARI Fatima#3

#Laboratoire De Biologie Cellulaire Et Moleculaire, Université des sciences et

technologies HOUARI BOUMEDIENNE

[email protected]

Abstract

Blockade of membrane receptors or neutralization of intracellular pathways, are

two primary modes of platelet inhibition. Both of them have proven benefits in the

prevention and resolution of atherothrombotic events. With regard to intracellular

inhibition, phosphodiesterases are fundamental for platelet function.This report

focuses on an exo-nucleotidase isolated from Cerastes cerastes venom acting as

a potent platelet inhibitor and aim to report pharmacological properties of this

phosphodiesterase accentuating the beneficial contribution of the enzyme to

biotechnology

Cc-PDE purification from Cerastes cerastes venom was yielded by three successive

chromatographies; G75-Sephadex size exclusion, DEAE exchange

chromatography and affinity using Sildenafil (PDEs’ specific inhibitor). Molecular

weight was demonstrated by SDS-PAGE.Flow cytometry assay was assessed to

proved inhibition of P-selection secretion inducing platelet aggregation by

Thrombin Receptor Activator Peptide-6 (TRAP-6)agonist . Aggregomtetry test was

also realized by stimulating platelet aggregation by ADP and ATP.

It was revealed that these proteins involve in certain biological pathways as a

regulator of hemostatic disorders by adopting inhibitory effect against blood

coagulation and platelet aggregation.Furthermore, Cc-PDE also showed a potent

anti-platelet effect inhibition of ADP- and ATP-induced aggregation by hydrolyzing

ADP and ATP , due to its ADPase and ATPase activities .This leads to inactivation of

platelets and this blockade may be irreversible. Flow cytometry assay proved further

in addition to platelet clumping-prohibition, Cc-PDE also dose-dependently

reduced the P-Selectin release from platelet α-granules, when the platelet

activation was induced by a positive control TRAP-6 (Thrombin Receptor-Activating

Peptide-6) Functionally, Cc-PDE exhibited both in vivo and in vitro coagulation

blockade.

Taking together, all these pharmaco-biological properties may confer to Cc-PDE

interesting features to be a good therapeutic tool for thromboembolic diseases

according to side effects of synthesized molecules .Furthermore ,identification of

molecules from natural sources, notably snake venoms, affecting platelet

aggregation at specific stage could have potential in developing new drug leads

in the treatment of haemostatic disorders.

Keywords : Cc-PDE,Anticoagulant,Antiplatelet aggregation, ADPase

,biotechnology.


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CP6.5

Rôle potentiel des inhibiteurs de protéases d’Echinococcus

granulosus dans l’action anticancéreuse: apport de l’analyse

protéomique

ZEGHIR-BOUTELDJA Razika #1, TOUIL-BOUKOFFA Chafia #2

# Laboratoire de biologie cellulaire et moléculaire, Faculté des sciences

biologiques, université des sciences et technologies Houari Boumediene, Bab

Ezzouar, Alger, Algérie. 1Faculte des sciences de la nature et de la vie et des sciences de la terre,

Département des sciences biologiques, université Akli Mohand Oulhadj, Bouira,

Algérie. 2 Faculté des sciences biologiques, université des sciences et technologies Houari

Boumediene, Bab Ezzouar, Alger, Algérie.

[email protected]

Résumé

Les inhibiteurs de protéases sont caractérisés par un potentiel thérapeutique

contre le cancer. Il est admis que les protéases sont hautement impliquées

dans les processus de carcinogenèse et la progression du cancer.

Récemment, de nombreux inhibiteurs de protéases d’origine végétale ont

été introduits dans les essais cliniques humains. L’échinococcose kystique

est une parasitose endémique en Algérie, elle est causée par le stade

larvaire d’un cestode. Dans cette optique, plusieurs études ont rapporté

l’action anti-tumorale des éléments constituant le kyste hydatique

notamment le liquide hydatique, les protoscolex, les produits de sécrétion

et d’excrétion du protoscolex. Au cours de cette parasitose, des systèmes

d’interaction sont établis entre la larve hydatique et les tissus de l’hôte. Ces

systèmes impliquent des enzymes d’origine parasitaire sous le contrôle des

inhibiteurs de protéases afin de contrecarrer la réponse immunitaire mise en

jeu par l’hôte. Dans ce contexte, l’analyse du protéome de liquide

hydatique de la larve hydatique a permis d’identifier plusieurs inhibiteurs de

protéases exprimant des propriétés anti-tumorales, nous citons : ‘’Kunitz

type protease inhibitor’’, ‘’Serpin A3-1‘’, ‘’ Serpin A3-3’’, ‘’Serpin A3-5’’,

‘’Serpin A3-6‘’, ‘’Serpin A3-7’’ et l’Ag B. Il en ressort et ce, d’après nos

résultats, que le kyste hydatique pourrait constituer une source importante

de bio-molécules à intérêt thérapeutique. Des études plus approfondies et

analytiques sont nécessaires dans la compréhension des mécanismes

d’action anti-tumorale de de ces bio-molécules.

Mots-clés: Echinococcus granulosus, liquide hydatique,

protéomique, inhibiteurs de protéases, cancer.


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CP6.6

Cc-5’NTase a promising alternative biomolecule in CD73 lack-

related immunodeficiency

SAOUD Samah1,2, CHERIFI Fatah1, LARABA-DJEBARI Fatima1*

1USTHB, Faculty of Biological Sciences; Laboratory of Cellular and Molecular Biology,

BP 32 El Alia, Bab Ezzouar, Algiers, Algeria. 2Faculty of Sciences, Department of Natural and Life Sciences, University of Algiers

1, Algeria

[email protected], [email protected]

Abstract

Background: The ecto-5'-nucleotidase (CD73) is widely expressed in immune cells.

It is involved in the production of immunosuppressive adenosine which can

influence different immune cells through the specific adenosine receptors (1, 2). A

hereditary deficiency of CD73 occurs in a variety of immunodeficiency diseases (3).

“Cc-5’NTase” is a 70 kDa 5’-nucleotidase purified from Cerastes cerastes venom

through three chromatographic steps.

Objectives: This study aimed to characterize the snake venom 5’-nucleotidase Cc-

5’NTase and its comparison with human CD73.

Materials and methods: Nucleotidase activities were determined by assessment of

orthophosphate release from different nucleotides. The docking of Cc-5'NTase and

CD73 with their substrates was achieved using the Glide and SwissDock tools.

Pairwise comparison of Cc-5'NTase and CD73 was performed using Muscle and

Fatcat tools.

Results: As CD73, Cc-5’NTase efficiently hydrolyzes mono-, di- and triphosphate

adenylated nucleotides. Furthermore, molecular docking showed that CD73 and

Cc-5’NTase exhibited similar affinities to adenylated nucleotides appearing in their

similar interaction energies. Additionally, a significant similarity was also observed

when both nucleotidases’ structure was compared. Moreover, sequences’

alignment showed many conserved residues between both enzymes. Blast analysis

confirms and also reveals high similarity between snake venom and human

nucleotidases.

Obtained results also showed that Cc-5’NTase is not toxic even at a high dose of 5

mg/kg body weight, by ip route.

Conclusion: Taken together, obtained results open perspectives to Cc-5’NTase

pharmacological use as alternative diagnostic and/or therapy tool in the case of

immunodeficiency related to CD73 lack.

Keywords: Snake venom, Cc-5’NTase, CD73, molecular docking,

immunodeficiency References:

1. Adam T, Mathes A, Isayev O, Philippov PP, Werner J, Karakhanova S, Bazhin AV (2019) In Vivo Immunological Effects of CD73

Deficiency. Cell Physiol Biochem 52: 1192-1202.

2. Resta R, Yamashita Y, Thompson LF (1998) Ecto-enzyme and signaling functions of lymphocyte CD73. Immunol Rev 161: 95-109.

3. Tomita M (1999) Biochemical background of paroxysmal nocturnal hemoglobinuria. Biochimica et Biophysica Acta (BBA) - Molecular

Basis of Disease 1455: 269-286.



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CP6.7 Etude de l’activité enzymatique bioinsecticide de souches

d’actinomycètes isolées à partir de différents sols contre le

Tribolium Rouge de la farine (Tribolium castaneum)

BENSLAMA Ouided*#, MANSOURI Nadjwa# , ARHAB Rabah#

# Laboratoire de Biotechnologie des Substances naturelles et Applications,

Département des sciences de la nature et de la vie, Université Larbi Ben M’Hidi,

Oum El Bouaghi

[email protected], [email protected]

Résumé

La sécurité alimentaire est devenue un intérêt mondial. Cependant, les

pertes de récolte se produisent chaque année en raison des insectes

nuisibles. Parmi les insectes ravageurs, le tribolium de la farine (Tribolium

castaneum) qui attaque les céréales stockés et d'autres produits

alimentaires causant des pertes économiquement importantes. Les

pesticides chimiques sont très efficaces pour lutter contre les insectes

nuisibles. Cependant, ils polluent l'écosystème et affectent la santé

humaine. Les activités insecticides des microbes ont été largement étudiées

et de nombreux rapports indiquent que les actinomycètes jouent un rôle

important dans la lutte contre les insectes. Dans cette étude 26 souches

d’actinomycètes ont étaient isolées à partir de quatre échantillons de sol

de différentes régions. Les isolats ont fait l’objet d’une étude de leur aptitude

à produire des substances bioinsecticides par l’utilisation de leurs extraits

extracellulaires après une fermentation sous conditions contrôlées. Pour

cela ils ont été soumis à un test préliminaire contre la saumure de crevette

Artemia salina. Les résultats du test d’artémia montrent que sur 26 souches

testées, 09 isolats ont été nettement plus efficaces et sembles être dotés

d’une forte activité insecticide, et ont été pris pour un test ultérieur contre T.

castaneum. Les résultats du test de biocontrôle contre T. castaneum

montrent que la souche SAS13 possède l’activité insecticide la plus

importante suivie par les souches SAS19, SDS16, SBS31 et SDS8 avec des taux

de mortalité de 53,33, 53,33, 53,33 et 40%, respectivement. Pour toutes les

souches, le temps médian de mortalité (LT50) est atteint après 72h de

l’expérience. Par conséquent, ces isolats assignés au genre Streptomyces

peuvent être des bactéries très prometteuses dans le domaine du

biocontrôle contre le ravageur des céréales T. castaneum.

Mots-clés : Actinomycètes, bioinsecticide, biocontrôle, Artemia Salina,

Tribolium castaneum


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CP6.8 Anti-platelet aggregation activity of a novel phospholipase A2

an enzyme purified from Vipera lebetina snake venom: New tool

with biotechnological applications

Kadi-Saci Amel#1 AND Laraba-Djebari Fatima*2

#*USTHB, Faculty of Biological Sciences; Laboratory of Cellular and Molecular

Biology, BP 32 El-Alia, Bab Ezzouar, Algiers, Algeria.

[email protected]

Abstract

Antiplatelet therapy reduces atherothrombotic risk and has therefore become a

cornerstone in the treatment of cardiovascular disease. Aspirin, adenosine

diphosphate P2Y12 receptor antagonists, glycoprotein IIb/IIIa inhibitors, and the

thrombin receptor blocker are effective antiplatelet agents but significantly

increase the risk of bleeding. Advances in the understanding of thrombus formation

and hemostasis, over the last years, led to the discovery of various new receptors

and signaling pathways of platelet activation. Several new antiplatelet agents with

high antithrombotic efficacy with moderate effects on regular hemostasis have

been developed yielding to promising results in preclinical and early clinical studies.

In our study, we focus on new antiplatelet molecules purified from snake venom.

Snake venoms are known to be natural libraries of biomolecules targeting

hemostasis and thrombosis. Some components act directly on factors involved in

blood coagulation. Several active molecules including phospholipase A2, serine

proteinases (SVSPs), metalloproteinases (SVMPs)/disintegrins, snake C-type lectin-

like proteins (snaclecs) were investigated for their pro- and antithrombotic/

coagulant effects. Phospholipases A2 (PLA2s) are important enzymes present in

snake venoms and are related to a wide spectrum of pharmacological effects. The

present study describes the isolation and enzymatic characterization of a new PLA2

from Vipera lebetina snake venom. The enzymatic and biological profiles of this

phospholipase A2 named VLPLA2 were determined using different substrates. Its

anticoagulant as well as platelet aggregation activities were also tested. The

venom was fractionated in three chromatographic steps: gel filtration, ion

exchange and reversed phase. VLPLA2 presents a molecular mass of 14 kDa and

specific activity about 440.36 U/mg. Acting on plasma coagulation, VLPLA2 showed

an anticoagulant activity and was able to inhibit human platelet aggregation

induced by ADP. The antiplatelet effect of VLPLA2 involved the AMP/GMPc

signaling pathway which was modulated by the high level of NO induced by

VLPLA2. Obtained results suggest that VLPLA2 has a potent antiplatelet activity and

may be used not only for the treatment and prevention of thrombosis, but also in

biotechnological applications as research probes and drug leads.

Keywords : Venom, Phospholipase A2, Antiplatelet, Hemostasis



Ecole Nationale Supérieure de Biotechnologie “Toufik Khaznadar”Ville universitaire Ali Mendjeli

Constantine - Algériehttp://ensbiotech.edu.dz/

em@il: [email protected]

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RECUEIL DES RÉSUMÉS