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par IgE-inhibition dans 28 lots, corrèle avec la teneur en Ole e 1 (r 2 = 0,95), mesurée par ELISA de type sandwich (ALK, Madrid). Discussion.Cette étude menée dans un pays dépourvu de frêne européen montre que chez les 30 patients allergiques étudiés, 90 % présentent également des IgE contre l’olivier et le frêne européen, 87 % contre Ole e 1, et seulement 63,3 % contre le frêne américain. Les IgE anti-olivier et anti-frêne européen sont bien corrélées avec les IgE anti-nOle e 1. L’activité allergénique des extraits est proportionnelle à leur teneur en Ole e 1. Conclusion.La réaction croisée entre l’olivier et le frêne européen est fortement dépendante d’Ole e 1, mais pas de l’espèce d’oléacée à l’origine de la sensibilisation. Ces résultats confirment qu’Ole e 1 est le paramètre pertinent pour définir l’activité allergénique des extraits de pollen d’olivier. doi: 10.1016/j.reval.2012.02.037 31 Identification de pollens de gramine ´es par immunoem- preinte H. Chabre, N. Berjont, M.N. Couret, C. Berrouet, L. Mascarell, T. Batard, P. Moingeon Stallergenes, Antony Introduction.Les pollens de graminées communément utilisées en immuno- thérapie des allergies (Dactylis glomerata, Phleum pratense, Lolium perenne, Poa pratensis et Anthoxanthum odoratum) sont récoltés sur des périodes se chevauchant et identifiés indirectement sur la base de la morphologie de la plante. Une fois récoltées, il n’est plus possible de différencier ces pollens sur la base de leurs caractéristiques microscopiques. Le but de la présente étude est la mise au point d’un test d’identification de ces pollens de graminées par méthode d’immunoempreinte fondée sur l’utilisation d’anticorps monoclonaux (AcM). Matériel et méthode.Des souris ont été immunisées avec des fractions d’extrait de pollen ou des allergènes polliniques purifiés pour générer des AcM spécifiques de l’une ou l’autre des 5 espèces de pollens de graminées. Après clonage des hybridomes correspondants, ces AcM sont testés pour leur spécificité vis-à-vis de l’espèce de graminée en question en comparaison avec les quatre autres espèces et avec d’autres sources d’allergènes (acariens, moisissures, phanères d’animaux). Résultat.Pour chacune des 5 espèces de pollens de graminées, un AcM spécifique a été sélectionné. Selon les espèces, les AcM obtenus reconnaissent comme marqueur spécifiques des allergènes (ex. Phl p 6) ou des protéines non allergéniques. La spécificité de chaque AcM a été confirmée en analysant 50 lots de pollens provenant de 3 fournisseurs différents et, comme contrôles négatifs, les extraits des autres sources d’allergènes, ainsi que des extraits de mélanges de pollens de graminées ne contenant pas le pollen de l’espèce reconnue par l’AcM en question. Conclusion.Un test d’identification de pollens de 5 espèces de graminées différentes a été développé par méthode d’immunoempreinte basée sur l’utilisation d’AcM. Cette méthode permet une identification de matières premières polliniques mais aussi l’identification des espèces dans des extraits de 5 pollens de graminées. doi: 10.1016/j.reval.2012.02.038 32 E ´ valuation de dosages multiparame ´triques pour la quanti- fication d’allerge `nes M. Hrabina a , A. Huet a , J. Barberon a , A. Plantin b , C. Josson b , E. Panier b , C. Esteves a , D. Faccenda a , B. Gouyon a , T. Batard a , P. Moingeon a a Stallergenes SA, Antony b Indicia Biotechnology SA, Oullins Introduction.Deux méthodes multiparamétriques ont été développées pour doser conjointement, d’une part, Der p 1, Der f 1 et Der p/f 2 dans des mélanges d’extraits de D. pteronyssinus (Dp) et de D. farinae (Df) et, d’autre part, les allergènes de groupe 1 et 5 dans des extraits de pollens de graminées. Matériel et méthode.Des microbilles marquées avec des ratios différents de 2 fluorophores ont été adsorbées avec différents anticorps monoclonaux anti- allergènes d’acariens ou de pollens de graminées. Ces billes ont été utilisées dans des dosages multiplex basés sur la technologie Luminex 1 . Après leur mise en contact avec les extraits, les allergènes capturés sont détectés par des anticorps de révélation. Les fluorescences associées à ces anticorps et aux billes sont mesurées après excitation par deux lasers. Résultat.Les deux dosages multiparamétriques ont été développés avec succès. La répétabilité varie entre 1,8 et 3,3 % en fonction de l’allergène. La fidélité intermédiaire est de 5 % pour les allergènes d’acariens et de 15 % pour les allergènes de pollens de graminées. Les limites basse et haute de quantification sont de 0,12-7,8 ng/mL pour Der p 1 et Der f 1, 0,041,56 ng/mL pour Der p/f 2, et 0,05758 ng/mL et 1,0634 ng/mL, respectivement, pour les allergènes de groupes 1 et 5 de pollens de graminées. Les coefficients de corrélation entre les teneurs obtenues par dosage multiparamétrique et par des ELISA correspondants sont de 0,94 pour Der p 1, 0,97 pour Der f 1, 0,98 pour Der p/f 2, et 0,99 pour les allergènes de groupes 1 et 5 de pollens de graminées. Conclusion.La répétabilité, la fidélité intermédiaire et la limite basse de quantification des dosages multiparamétriques sont au moins aussi bonnes que celles obtenues par dosage ELISA. La corrélation entre les deux technologies est excellente pour tous les allergènes étudiés. doi: 10.1016/j.reval.2012.02.039 33 Sensibilisation au blanc d’œuf chez les enfants a ` Maputo, Mozambique S. Mavale-Manuel Hospital central de Maputo, Maputo, Mozambique Introduction.Les maladies allergiques sont de plus en plus fréquentes dans les pays africains. L’objectif de notre travail a été de décrire la sensibilisation au blanc d’œuf à Maputo, Mozambique. Matériel et méthode.Nous avons étudié tous les enfants qui ont été soumis au test cutané au blanc d’œuf, en consultation d’allergologie de 2007 à 2011, à Maputo. Les extraits et pricks stallergènes ont été utilisés. Résultat.On note que 1005 patients ont été inclus. La plupart d’entre eux avaient moins de 15 ans ; 53 % étaient du sexe masculin et 47 % du sexe féminin. Un quart des enfants (254) avaient un test cutané positif au blanc d’œuf. Cette sensibiliation a été plus couramment observée chez les enfants de 6-12 mois (44 %) ; et moins courante chez les enfants de 8 à 15 ans (12 %). Les principales pathologies associées à la sensibilisation au blanc d’œuf étaient par ordre de fréquence étaient : la dermatite atopique, l’urticaire, l’asthme, la rhinite et finalement la toux chronique. Discussion.Les tests cutanés allergologiques doivent être systématiquement réalisés chez les enfants souffrant de dermatite atopique. La sensibilisation cutanée au blanc d’œuf est fréquemment retrouvée à Maputo, principalement chez ces enfants. Conclusion.Le blanc d’œuf est la principale cause d?allergie alimentaire chez les enfants à Maputo. doi: 10.1016/j.reval.2012.02.040 34 Analyse d’un questionnaire de suivi chez des personnes pre ´sentant une allergie aux acariens et utilisant des housses anti-acariens N. Boukhettala, S. Bourgeon, A. Pore ´e, T. Pore ´e Laboratoire Protec’Som, Valognes Introduction.Le but de l’étude a été d’évaluer sur un mode déclaratif, les symptômes ressentis par les patients et l’impact de l’utilisation d’une gamme de housses anti-acariens en coton microtissé (CMT) ou en polyester polyamide non tissé (PNT) chez des volontaires présentant une allergie aux acariens. Matériel et méthode.Cette étude est une enquête descriptive basée sur un questionnaire de suivi distribué à un groupe de 419 volontaires présentant une allergie aux acariens. Il a été reçu 150 questionnaires dont 109 ont pu être exploités. Le principal critère d’exclusion a été l’absence d’une ou plusieurs Allergènes / Revue française d’allergologie 52 (2012) 255262 260

Sensibilisation au blanc d’œuf chez les enfants à Maputo, Mozambique

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Allergènes / Revue française d’allergologie 52 (2012) 255–262260

par IgE-inhibition dans 28 lots, corrèle avec la teneur en Ole e 1 (r2 = 0,95),mesurée par ELISA de type sandwich (ALK, Madrid).Discussion.– Cette étude menée dans un pays dépourvu de frêne européenmontre que chez les 30 patients allergiques étudiés, 90 % présentent égalementdes IgE contre l’olivier et le frêne européen, 87 % contre Ole e 1, et seulement63,3 % contre le frêne américain. Les IgE anti-olivier et anti-frêne européensont bien corrélées avec les IgE anti-nOle e 1. L’activité allergénique desextraits est proportionnelle à leur teneur en Ole e 1.Conclusion.– La réaction croisée entre l’olivier et le frêne européen estfortement dépendante d’Ole e 1, mais pas de l’espèce d’oléacée à l’origine de lasensibilisation. Ces résultats confirment qu’Ole e 1 est le paramètre pertinentpour définir l’activité allergénique des extraits de pollen d’olivier.

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Identification de pollens de graminees par immunoem-preinteH. Chabre, N. Berjont, M.N. Couret, C. Berrouet, L. Mascarell, T. Batard, P.

Moingeon

Stallergenes, Antony

Introduction.– Les pollens de graminées communément utilisées en immuno-thérapie des allergies (Dactylis glomerata, Phleum pratense, Lolium perenne,Poa pratensis et Anthoxanthum odoratum) sont récoltés sur des périodes sechevauchant et identifiés indirectement sur la base de la morphologie de laplante. Une fois récoltées, il n’est plus possible de différencier ces pollens sur labase de leurs caractéristiques microscopiques. Le but de la présente étude est lamise au point d’un test d’identification de ces pollens de graminées par méthoded’immunoempreinte fondée sur l’utilisation d’anticorps monoclonaux (AcM).Matériel et méthode.– Des souris ont été immunisées avec des fractionsd’extrait de pollen ou des allergènes polliniques purifiés pour générer des AcMspécifiques de l’une ou l’autre des 5 espèces de pollens de graminées. Aprèsclonage des hybridomes correspondants, ces AcM sont testés pour leurspécificité vis-à-vis de l’espèce de graminée en question en comparaison avecles quatre autres espèces et avec d’autres sources d’allergènes (acariens,moisissures, phanères d’animaux).Résultat.– Pour chacune des 5 espèces de pollens de graminées, un AcMspécifique a été sélectionné. Selon les espèces, les AcM obtenus reconnaissentcomme marqueur spécifiques des allergènes (ex. Phl p 6) ou des protéines nonallergéniques. La spécificité de chaque AcM a été confirmée en analysant50 lots de pollens provenant de 3 fournisseurs différents et, comme contrôlesnégatifs, les extraits des autres sources d’allergènes, ainsi que des extraits demélanges de pollens de graminées ne contenant pas le pollen de l’espècereconnue par l’AcM en question.Conclusion.– Un test d’identification de pollens de 5 espèces de graminéesdifférentes a été développé par méthode d’immunoempreinte basée surl’utilisation d’AcM. Cette méthode permet une identification de matièrespremières polliniques mais aussi l’identification des espèces dans des extraits de5 pollens de graminées.

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Evaluation de dosages multiparametriques pour la quanti-fication d’allergenesM. Hrabinaa, A. Hueta, J. Barberona, A. Plantinb, C. Jossonb, E. Panierb,

C. Estevesa, D. Faccendaa, B. Gouyona, T. Batarda, P. Moingeona

a Stallergenes SA, Antonyb Indicia Biotechnology SA, Oullins

Introduction.– Deux méthodes multiparamétriques ont été développées pourdoser conjointement, d’une part, Der p 1, Der f 1 et Der p/f 2 dans des mélangesd’extraits de D. pteronyssinus (Dp) et de D. farinae (Df) et, d’autre part, lesallergènes de groupe 1 et 5 dans des extraits de pollens de graminées.Matériel et méthode.– Des microbilles marquées avec des ratios différents de2 fluorophores ont été adsorbées avec différents anticorps monoclonaux anti-

allergènes d’acariens ou de pollens de graminées. Ces billes ont été utiliséesdans des dosages multiplex basés sur la technologie Luminex1. Après leur miseen contact avec les extraits, les allergènes capturés sont détectés par desanticorps de révélation. Les fluorescences associées à ces anticorps et aux billessont mesurées après excitation par deux lasers.Résultat.– Les deux dosages multiparamétriques ont été développés avecsuccès. La répétabilité varie entre 1,8 et 3,3 % en fonction de l’allergène. Lafidélité intermédiaire est de 5 % pour les allergènes d’acariens et de�15 % pourles allergènes de pollens de graminées. Les limites basse et haute dequantification sont de 0,12-7,8 ng/mL pour Der p 1 et Der f 1, 0,04–1,56 ng/mLpour Der p/f 2, et 0,057–58 ng/mL et 1,06–34 ng/mL, respectivement, pour lesallergènes de groupes 1 et 5 de pollens de graminées. Les coefficients decorrélation entre les teneurs obtenues par dosage multiparamétrique et par desELISA correspondants sont de 0,94 pour Der p 1, 0,97 pour Der f 1, 0,98 pourDer p/f 2, et 0,99 pour les allergènes de groupes 1 et 5 de pollens de graminées.Conclusion.– La répétabilité, la fidélité intermédiaire et la limite basse dequantification des dosages multiparamétriques sont au moins aussi bonnes quecelles obtenues par dosage ELISA. La corrélation entre les deux technologiesest excellente pour tous les allergènes étudiés.

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Sensibilisation au blanc d’œuf chez les enfants a Maputo,MozambiqueS. Mavale-Manuel

Hospital central de Maputo, Maputo, Mozambique

Introduction.– Les maladies allergiques sont de plus en plus fréquentes dans lespays africains. L’objectif de notre travail a été de décrire la sensibilisation aublanc d’œuf à Maputo, Mozambique.Matériel et méthode.– Nous avons étudié tous les enfants qui ont été soumis autest cutané au blanc d’œuf, en consultation d’allergologie de 2007 à 2011, àMaputo. Les extraits et pricks stallergènes ont été utilisés.Résultat.– On note que 1005 patients ont été inclus. La plupart d’entre euxavaient moins de 15 ans ; 53 % étaient du sexe masculin et 47 % du sexeféminin.Un quart des enfants (254) avaient un test cutané positif au blanc d’œuf. Cettesensibiliation a été plus couramment observée chez les enfants de 6-12 mois(44 %) ; et moins courante chez les enfants de 8 à 15 ans (12 %).Les principales pathologies associées à la sensibilisation au blanc d’œuf étaientpar ordre de fréquence étaient : la dermatite atopique, l’urticaire, l’asthme, larhinite et finalement la toux chronique.Discussion.– Les tests cutanés allergologiques doivent être systématiquementréalisés chez les enfants souffrant de dermatite atopique. La sensibilisationcutanée au blanc d’œuf est fréquemment retrouvée à Maputo, principalementchez ces enfants.Conclusion.– Le blanc d’œuf est la principale cause d?allergie alimentaire chezles enfants à Maputo.

doi: 10.1016/j.reval.2012.02.040

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Analyse d’un questionnaire de suivi chez des personnespresentant une allergie aux acariens et utilisant des houssesanti-acariensN. Boukhettala, S. Bourgeon, A. Poree, T. Poree

Laboratoire Protec’Som, Valognes

Introduction.– Le but de l’étude a été d’évaluer sur un mode déclaratif, lessymptômes ressentis par les patients et l’impact de l’utilisation d’une gamme dehousses anti-acariens en coton microtissé (CMT) ou en polyester polyamide nontissé (PNT) chez des volontaires présentant une allergie aux acariens.Matériel et méthode.– Cette étude est une enquête descriptive basée sur unquestionnaire de suivi distribué à un groupe de 419 volontaires présentant uneallergie aux acariens. Il a été reçu 150 questionnaires dont 109 ont pu êtreexploités. Le principal critère d’exclusion a été l’absence d’une ou plusieurs