Europ. 07. Cancer Vol. 4, pp. 413--424. Pergamon Press 1968. Printed in Great Britain

Sur les Interactions entre une Tumeur Maligne et un Teratome Exp6rimental, chez la Souris et le Rat

II. Evolution sur le me:me H6te d'une Tumeur Maligne et d'une Tumeur B6nigne

J. SALAON Institut d'Embryologie Exp&imentale du CoU~ge de France et du G.N.R.S.*

I. INTRODUCTION D,Ns la premiere partie de notre travail [1], nous avons montr6 que de la pulpe d'embryons de Rat et de Poulet, inject6e ~t des animaux adultes, 6volue en une tumeur appel6e t6ra- tome. Le t6ratome, malgr6 un volume parfois tr6s important, ne provoque pas la mort de l'h6te. C'est une tumeur b6nigne, localis6e ~t l 'endroit de l'injection. Sa croissance, souvent consid6rable, n'est pas illimit6e; apr6s quelque temps, 1-2 mois, elle est d6finitivement ter- min6e.

Nous avons utilis6 le t6ratome pour ~tudier l'infiuence qu'exercent, l 'une sur l 'autre, deux tumeurs, l 'une b6nigne, l 'autre maligne, lors- qu'elles sont r~unies sur le m~me h6te.

Que se passe-t-il lorsqu'on injecte le tissu malin ~t un animal porteur d 'un t6ratome ?

Le cancer et la tumeur b6nigne vont-ils coexister, ou, au contraire, entrer en com- petition ?

Une comp&ition a 6t~ observ~e, en parti- culier par Csaba, Acs et Horvath [2] entre le greffon intra-p6riton~al et le greffon sous-eutan~ d 'une m~me tumeur maligne, introduits sur le m~me h6te. Le greffon intra-p6riton~al nuit au d~veloppement du greffon sous-cutan& Pour les auteurs, il s'agit d 'une concurrence bio-

*Directeur: Professeur Etienne Wolff.

413

logique entre les deux implants. La tumeur intra-p6riton6ale accapare certaines substances nutritives au d~triment de la tumeur sous- cutan~e.

2. RESULTATS EXPERIMENTAUX 1. Greffe d'une tumeur maligned un h6te porteur d'un tdratome bien dgveloppg

Nous avons greffe l'6pith61ioma T8 chez 29 Rats porteurs de t6ratomes volumineux. Ces t6ratomes 6taient form6s depuis 2 ~t 19 tools.

Nous avons introduit l'fipith61ioma sur le m~me flanc que celui sur lequel se d6veloppe le t~ratome, dans 10 cas, et sur le fiance oppos6, dans 16 cas. Dans les 3 derniers cas, nous avons greff6 l '6pithdioma chez des Rats porteurs de t~ratomes intrap~riton~aux.

Dix-huit Rats t~moins ont re~u un nodule malin de volume semblable ~t celui du greffon introduit dans les animaux en exp6rience. Nous avons choisi ces t6moins parmi des Rats adultes ~tg6s de 4 ~t 20 mois, afin de comparer l'~volution de la tumeur maligne dam les 2 groupes d'animaux. L'~pith~lioma se d~veloppe plus lentement sur ces h6tes ~tg~s que sur les Rats utilis6s habituellement. Mais l'6volution de l'6pith~lioma est tout ~t fair idenfique chez les tfimoins et chez les Rats porteurs de t~ratomes.

L'6pith~lioma prolif~re dam 24 cas sur 29

414 07. SalaUn

Tableau I. Association sur le m~me Rat de la tumeur T8 et d'un te'ratome volumineux

Age du t6ratome Nombre de cas Resultats T~ratome T8

2 mols 3 mols 4 roots 6 tools 7 tools 9 morn

12 mo~s 18 mols 19 moxs

3 3+ 3+ 2 2+ 1 + I - - 6 6+ 5+1-- 3 3+ 3+ 2 2+ I + 1 - - 2 2+ 2+ 3 3+ 2+1- - 4 4+ 3+1-- 4 4+ 4+

Total 29 29+ 24+ 5--

chez les Rats en exp6rience, et dans 15 cas sur 18 chez les t6moins.

Dam les deux groupes d'animaux, les Rats meurent entre le 50e et le 70e jour apr~s la greffe du cancer.

Le t6ratome ne subit aucune modification; les deux tumeurs coexistent et ne semblent pas exercer d'influence l 'une sur l 'autre (Tableau 1 et Figs. 1, 2).

Cependant, lorsque les deux tumeurs 6voluent sur le m~me flanc, la tumeur maligne s'accroit et finit par rejoindre le t6ratome. Les deux tumeurs ne sont plus s6par6es que par un tissu lfmhe. Dans 6 cas, nous avons pr61ev6 et greff6, ~ de nouveaux Rats, des fragment de ce tissu limitant les deux tumeurs. Une tumeur T8 se d6veloppe ~t partir de ces greffons.

Nous avons repiqu6 des fragments de 7 t~ratomes associ~s ~ l'~pith~lioma. Les greffons 6voluent comme le ferment les greffons de t6ratomes normaux; ils se maintiennent, sans prolif6rer, sur ce nouvel h6te.

Nous avons enfin effectuE le repiquage de 5 tumeurs malignes associ6es ~ un t6ratome. Un 6pitMlioma absolument identique aux tumeurs malignes t6moins se d6veloppe dans chaque cas.

L'6tude histologique, effectu6e sur 6 t6ra- tomes et 4 tumeurs cancEreuses, associEs sur le m6me h6te, montre 6galement que chaque type de tumeur a conserve sa structure habituelle.

Conclusion La presence, sur un Rat, d 'un t~ratome

massif et ~tendu n'inhibe pas la proliferation de l'~pitMlioma T8 greff~ ultfirieurement cet animal. Lorsque la greffe est fake contro- latEralement, le Rat porte deux tumeurs ind~pendantes, l 'une bfinigne rau t re maligne. Lorsque les deux tumeurs se trouvent sur le mfime flanc, la tumeur maligne s'6tend ~ c6t6 de la tumeur b~nigne et finit par la recouvrir

en plusieurs endroits. Nous pensons qu'il ne s'agit pas d 'une agression de la tumeur maligne contre le tEratome, mais que la tumeur maligne, Evoluant rapidement, tend, comme chez les t~moins, ~ envahir le plus d'espace possible.

La mort des h6tes survient dam les m~mes d61ais que celle des t6moins. Le d6veloppement de l '@itMlioma ne subit aucune modification.

Exp#iences tdmoins Nous avons r~alis~ plusieurs experiences

d'associations t~moins. (1) Association de 2 greffons de la mSme

tumeur maligne (2) Association de 2 tfiratomes. (1) Nous avons inocul6 le sarcome S180 ~ 6

Souris pr~alablement inject~es avec ce m~me sarcome. Le premier sarcome a 12 jours au moment de la seconde injection; fl forme un petit nodule de la grosseur d 'un pois sur le flanc gauche de l'animal. Nous avons fait la deuxi6me injection sur le flanc droit. Le deuxi~me sarcome se d~veloppe dam tous lea cas. Les Souris meurent 20-30 jours apr~s la seconde injection (soit pratiquement dam lea mSmes d61ais que les Souris porteuses d 'un seul sarcome).

Chaque flanc est envahi par un gros nodule t

cancereux. Nous avons 6galement greff6 un fragment

de tumeur T8 ~t 10 Rats auxquels nous avions greff6 cette tumeur. Les 2 greffes sont faites ~t 13 jours d'intervalle, l 'une sur le flanc droit, l 'autre sur le flanc gauche. La mort survient 20-30 jours apr~s la 2e op6ration.

Nous constatons que, comme chez la Souris, une tumeur maligne s'est d6velopp6e sur chacun des flancs.

Ainsi, dans ces exp6riences, nous n 'avom observ6 aucune concurrence entre les 2 greffons sous-cutan6s de la m~me tumeur maligne. Le premier greffon, quoique bien 6volu~ au

Fig. 1 et 2. Associations entre un t~ratome volumineux de 18 mois et la tumeur maligne T8. Coexistence des deux tumeurs. T: t~ratome. T8 : tumeur T8. (Gr. x 0,5)

Fig. 3. Risultats des injections de culot de s3dimentation de l'extrait de lYpithdlioma T8, ?~ des Rats porteurs de jeunes t&atomes ag3s de 3 a 10 jours: inhibition de la croissance des t3ratomes traitis. T .T . : Tdratomes tgmoins. Tx -Te : tiratomes traitds, de la mgme s¢rie expirimentale que celle des

t~moins 7". 2-. ( Gr. x 1)

(to face p. 414)

Sur les Interactions entre une Tumeur Maligne et un Teratome Experimental, chez la Souris et le R a t - - I I 415

moment de la seconde intervention, n'inhibe pas le d6veloppement du 2e greffon.

(2) Nous avons inject~ 1 cmZ de pulpe d'embryons ~t 8 Rats d6j~t porteurs d 'un t6ratome sous-cutan6. La 2e injection est faite sur le m~me flanc que la premi&e dans 3 cas, et sur le flanc oppos~ dans 5 cas. L'gtge du t6ratome au moment de la 2e op6ration varie entre 10 jours et 3 mois. Un 2e t6ratome se d6veloppe sur chacun de ces Rats, sans que l'6volution du ler t&atome semble modifi& (nous avons r6sum6 ces exp6riences t6moins dans le Tableau 2).

Dans ce type d'association, aucune concur- rence ne paralt s'&ablir entre les deux tumeurs b6nignes. La presence d 'un t6ratome, m6me tr~s volumineux, n 'emp&he pas la formation d 'un deuxi6me t6ratome.

La mort survient dans les m6mes dflais chez les Souris trait&s et les Souris canc6reuses tdmoins (soit 30-40 jours apr6s l'injection du s a r c o m e ) .

Le t6ratome ne s'est d6velopp6 que sur 10 Souris. I I n e forme qu 'un petit nodule de la grosseur d 'un pois, aplati contre le cancer.

On ne retrouve aucune trace le la pulpe d'embryons sur les 12 autres Souris (Tableau 3).

La 23e Souris, sur laquelle le sarcome n'a pas pris, porte un t~ratome de la taille d 'un haricot.

Sur les Souris t6moins, inject&s avec la pulpe d'embryons seulement, un t6ratome s'est d&elopp~ dans 7 cas sur 11.

Ce t6ratome est tr$s volumineux dans 3 cas; il forme un nodule de 0,5 cm 8 environ sur les 4 autres Souris. Bien que le nombre des

Tableau 2. Associations thnoins rlalisles sur le mbne Mte entre 2 greffons d'une mbne tumeur maligne d' une part, et 2 t~ratomes d' autre part

Type d'association Nombre de cas Resultat l~re Tumeur 2e Tumeur

S180+S180 6 + +

T8 + T 8 10 + --b

T6ratome + 8 + +

T6ratome

2. Greffe d'un cancer d un h6te porteur d'un jeune t~ratome en vole de dgveloppement

Nous avons r6alis6 ce type d'association chez la Souris et chez le Rat.

La technique est la suivante: nous injectons, ou nous greffons, une tumeur maligne ~t des animaux r6cemment inject6s avec de la pulpe d'embryons. Des animaux t6moins re~oivent les uns la pulpe d'embryons seulement, les autres la tumeur maligne seulement.

Chez la Souris. Nous n'avons pu faire que 23 associations.

Dans 19 cas, nous avons inject6 la pulpe d'embryons dam le tissu sous-cutan6 du flane des Souris h6tes; puis, 4-5 heures apr6s, et sur le m~me flanc, le sarcome S180.

Dam les 4 derniers cas, nous avons inject6 le sarcome ~t des Souris porteuses de jeunes t~ratomes de 5 jours. T~moins: 11 Souris t~moins re~oivent 1 cm 3 de

pulpe d'embryons, 5 autres Souris re~oivent le sarcome S180.

Le sarcome se d&eloppe sur 22 des 23 animaux trait~s, et sur les 5 animaux tdmoins.

exp6riences soit restreint, on peut conclure que, dam ce type d'association, le sarcome 6volue absolument comme sur les Souris t6moins. En revanche, le t6ratome subit une nette inhibition. I1 ne se d6veloppe pas dam 12 cas sur 22. Lorsqu'il apparalt, il reste de volume r6duit, inf6rieur ~t celui des t6ratomes t6moins.

Ces premiers r6sultats ont &6 confirm& par les exp&iences r6alis&s chez le Rat.

Chez le Rat. Nous avons fair 74 associations entre l'6pith61ioma T8 et le t6ratome Ag6 de 5 heures ~t 20 jours.

Dans 6 cas, l'6pith61ioma T8 n'a pas pris. Sur les 68 cas restants, l'association a 6t6

r6alisde sur le m6me flanc dans 38 cas, et sur le flanc oppos6 dam 30 cas.

Trente-neuf Rats t6moins n'ont re~u que la pulpe d'embryons.

Vingt-cinq Rats n 'ont requ que la Tumeur T8.

On constate que sur les Rats en exp6rience, la Tumeur T8 6volue comme sur les Rats t6moins.

Des m&astases apparaissent dam le gan-

416

Tableau 3.

J. Salaiin

Injection du Sarcome S180 ~ des Souris r&emment injeete'es avec de la pulpe d' emboJons

Age du t6ratome au moment de l'injection

du sarcome

Nombre R6sultat de cas S180 Tdratome

Sarcome Pas de T6ratome Pas de sarcome t~ratome

4-5 H

5 jours

19 19 0 9 10

4 3 0 1 2

0 1 1 0

glions lymphatiques. Les animaux meurent 30 ~t 45 jours apr~s la greffe de la tumeur maligne. Le t6ratome, mesur~ avec un palmer au moment de la greffe de l'6pith61ioma, est ~t nouveau mesur6 au moment de la mort de l'h6te, et, dans certains cas, pr61ev6 et fix& Ces dimensions sont compar6es aux premieres dimensions et ~t celles des t~ratomes tfimoins.

Les r6sultats sont consign~s dans le Tableau 4. Le Tableau 5 montre l'6volution des tdra-

tomes t~moins. Les rfisultats sont particuli~rement nets darts

le cas des associations r~alis~es sur le mfime flanc entre l'@ith~lioma et le jeune t~ratome. La r6gression du tfiratome est alors importante

(19 cas sur 38 soit 50%). Dans 15 cas, le volume du t~ratome a

diminu6; le t~ratome n'est plus qu 'un petit amas cartilagineux appliqu~ contre la tumeur maligne.

Dans 4 cas, le volume de la tumeur b~nigne n'a pas subi de changement appr~ciable; le t~ratome s'est maintenu, et les deux tumeurs sont accol~es l 'une ~t l 'autre. Un tissu lgtche les s~pare cependant.

Dans aucun cas, le t~ratome n'a progress6 de fa~on sensible, alors que 18 t~ratomes sur 39 t~moins, ont, dans le mfime temps, nettement proliffir~, allant parfois jusqu'~t doubler de volume.

Tableau 4. R/sultats de la greffe de l'dpitheTioma T8 ~ des Rats porteurs de jeunes t&atomes

Age du tdratome au

moment de la greffe de l'epithd- lioma T8

Nombre de cas

Evolution du tdratome

Disparition R6duction Maintien Croissance

M~me flanc 5-48 H 8 5 3 0 0 3-8 jours 9 4 4 1 0

10-20 jours 21 I0 8 3 0

Total 38 19 (50%) 15 (39%) 4 (11%) 0 (0%) 89% 11%

Flanc oppos6 5-48 H 3 3 0 0 0 3-8 jours 24 4 14 6 0

10-20 jours 3 0 3 0 0

Total 30 7 (24%) 17 (56%) 6 (20%) 0 (0%) 8o% 2o%

Tableau 5. Rdsultats de l'injection de la pulpe d'embryons ?z des Rats normaux

Evolution des t6ratomes Nombre de cas Disparition R6duetion Maintien Croissance

39 8 5 8 18 20% 10% 20% 50%

30% 70%

Sur les Interactions entre une Tumeur Maligne et un Tgratome Experimental, chez la Souris et le Rat - - I I 417

Dans le cas d'association controlatfirale, le t~ratome ne disparait compl~tement que dans 7 cas. Son 6volution est cependant inhib6e, puisque ses dimensions dirninuent dans 17 cas.

Aucune croissance notable ne se produit. Nous avons examinfi, au microscope, 11

t~ratomes de volume rfiduit, associ~s ~ l'6pith6- lioma sur le mfime flanc et sur le flanc oppos& Ils se composent essentiellement de cartilage.

Nous avons repiqu6, sur de nouveaux Rats, 5 petits t6ratomes associ~s ~ l'fipith~lioma sur le m~me flanc, et 5 t~ratomes associ6s sur le flanc oppose. Le t~ratome entier est repiqu6; c'est un petit nodule de 0,5 cm de diam~tre environ. Neuf de ces greffons fivoluent comme les repiquages de t~ratomes normaux. Ils survivent sur le nouvel h6te, mais ne subissent aucune croissance. Le dernier t~ratome, au contraire, augmente rapidement de volume.

I1 s'agit d 'un t6ratome d~velopp~ sur le flanc d 'un Rat . L'fipith~lioma a fit6 greff6, sur le flanc droit, 6 jours apr~s l'injection de la pulpe d'embryons. Nous avons sacrifi~ ce Ra t 43 jours apr~s la greffe de la tumeur canc~reuse. L'animal est prostr~, les m~tastases et la tumeur principale sont volumineuses. Le t6ratome, tr~s petit et plat, est transplant6 sur un nouveau Rat. A partir de ce tfiratome, se d6veloppe une tumeur importante. Nous avons sacrifi~ ce nouvel h6te apr~s 55 jours, et prfilevfi des fragments de la tumeur. Certains sont fixes et soumis ~t l'histologie, les autres greff6s ~t de nouveaux Rats. Nous constatons que cette tumeur est une tumeur canc~reuse, identique

l'6pithfilioma T8. Dans ce cas, la tumeur b6nigne et la tumeur maligne, fixfies chacune sur un flanc de l'h6te, ne sont pas entr~es en contact. Le t~ratome ~tait figalement 6loign6 des m~tastases. Cependant des cellules canc~r- euses sont venues coloniser le t6ratome. Ce rfisultat bien qu'unique, nous parait int6ressant. On peut se demander pourquoi des cellules canc~reuses envahissent ainsi le tfiratome. Sont- elles sp~cialement attir6es par la tumeur b~nigne ou bien le hasard seul intervient-il dans ce ph~nom~ne ? I1 est difficile de rfipondre

cette question. Nous pensons que, au moment de la formation des mfitastases, des cellules cancfireuses ont migrfi vers les ganglions lymphatiques, et que certaines d'entre elles se sont fix~es sur le t~ratome, sans qu'on puisse pr~ciser pourquoi. Mais cette observation est rest6e unique. Dans tous les autres t~ratomes fitudi~es histologiquement ou repiqu6s sur de nouveaux h6tes, nous n'avons jamais not~ la prfisence de cellules cancfireuses.

Nous avons compl6t~ ces expfiriences d'asso- ciation entre l'fipith~lioma et un jeune tfiratome

en injectant de la pulpe d'embryons ~ des Rats sur lesquels l'~pith~lioma se ddveloppe depuis plusieurs jours.

Douze Rats, porteurs de l'dpithdlioma depuis 12 ~ 15 jours, sont injectfis avec 1 cm 3 de pulpe d'embryons. Nous faisons l'injection sur le m~me flanc dans 4 cas, et sur le flanc oppos6 dans 8 cas. Les animaux meurent 35-45 jours apr~s la greffe du cancer.

On constate qu 'aucun tdratome ne se dfiveloppe sur les 4 Rats de la l~re sdrie ni sur 3 Rats de la 2e s~rie. Trois autres Rats de la 2e s6rie portent un tr~s petit kyste cartilagineux. Enfin, sur les 2 derniers Rats, un tdratome d'~ peine 0.5 cm 3 s'est ddvelopp~; nous avons repiqu6 ces deux tdratomes; les greffons ne montrent aucune croissance sensible.

Dans ce type d'association, le d~veloppement de l'6pithdlioma n'est pas modifi~, alors que celui du tfiratome est rdduit.

Conclusion Lorsque nous greffons l'fipith61ioma T8

un Rat, porteur d 'un jeune t~ratome, forms depuis moins de 20 jours, l'6pith~lioma T8 prolif~re. En revanche, le tfiratome subit une nette inhibition, particuli~rement importante si les 2 tumeurs sont situfies sur le mfime flanc. Le t6ratome peut disparaitre compl~tement, il peut aussi ne former qu 'un tr~s petit kyste cartilagineux. Dans aucun cas il ne prolif~re; il ne forme jamais d'amas volumineux comme le font certains t~ratomes t6moins.

La tumeur maligne nuit au dfiveloppement de la jeune tumeur b6nigne. S'agit-il d 'une con- currence nutritive ou d 'une action toxique de la tumeur maligne. I1 serait en effet possible que s'6tablisse une compfitition entre les deux tumeurs, ~ ~volution si difffirente. La tumeur maligne, prolif6rant tr~s rapidement, utiliserait les r6serves nutritives du milieu sur lequel elle ~volue, au d6triment de la tumeur b6nigne. On peut penser que l'h6te, trop fipuis6 par la tumeur cancfireuse, ne peut nourrir le t~ratome. Mais rappelons que 2 greffons canc~reux d'~ge difffirent se d6veloppent sur le mfime h6te et forment 2 tumeurs volumineuses. Aucune limite ~ la proliffiration des 2 tumeurs ne semble intervenir dans ce cas.

Dans l'historique de ce travail, nous avons cit6 les conclusions de nombreux auteurs sur l'existence, dans certalnes tumeurs canc6reuses, de substances soit stimulatrices, soit inhibi- trices, de la croissance.

L'inhibition du t~ratome serait-elle provo- qu6e par une telle substance 6mise par la tumeur maligne ? Nous nous sommes proposes d'injecter des extraits de tumeur T8 ~ des Rats

41S y. Salaiin

porteurs de jeunes t~ratomes, et de suivre l'~volution de la tumeur b~nigne. C'est ce que nous traitons dans le chapitre suivant.

3. Action d'extraits de tumeur 2-8 sur un jeune tgratome

(a) Prgparation de l'extrait. Nous utilisons un broyeur ~lectrique, tournant ~ la vitesse de 8000 tours/min. La pulpe obtenue est centri- fug6e pendant ½ heure, ~ la vitesse de 10.000 tours/min. Nous recueillons le surnageant d 'une part, le culot d 'autre part, et nous les con- servons dans des tubes plac6s dans un con- g~lateur ~ - -20 °. Nous avons v~rifi~, au microscope, que les cellules ~taient d~truites.

(b) Expgriences t~moins. Nous avons inject~ le surnageant, et le culot de l'extrait canc6reux, /k des Rats normaux, afin de savoir si les animaux pourront supporter plusieurs injec- tions successives d'extraits.

Douze Rats re~oivent ainsi 1 cm 3 de surn- ageant par jour, pendant 10 jours, dans le tissu sous cutan6 du flanc gauche.

Apr6s la 5e ou 6e injection, les Rats pr6sentent un gonflement ~ l 'endroit des piqflres. Mais ce gonflement finit par se r6sorber. Les animaux sont sacrifi6s 3 mois apr~s la derni6re injection. Ils sont absolument normaux.

Sept Rats sont inject~s, pendant 6 jours, avec le culot de l'extrait dilu6 par du Tyrode,

raison de 1 cm 3 par jour. Des petits nodules sont sensibles ~t l 'emplace-

ment des piqflres, mais ils se r6sorbent peu peu. Nous avons sacrifi6 ces animaux deux mois apr6s la derni6re injection.

Aucune tumeur ne se d6veloppe ~ partir des injections r6p~t6es de culot ou de surnageant de rextrait. Les animaux r6sistent parfaitement aux inoculations successives.

(c) Injections du surnageant i~ des Rats porteurs de jeunes tgrtomes. Nous avons inject6 1 cm ~ du surnageant de l'extrait, conge1~, puis r6chauff~

la temperature du laboratoire, dans le tissu sous-cutan6 du flanc gauche de 15 Rats. Ces animaux portent, sur ce m6me flanc, des t6ratomes ~tg6s de 3 ~ 12 jours.

Sept t6moins sont inject6s avec la pulpe d'embryons seulement. Les Rats en experience subissent 10 ~t 16 injections d'extrait canc6reux,

raison de 1 injection par jour. Nous les sacrifions 30-40 jours apr~s la derni~re injec- tion. Les t6ratomes sont pr6levds et compar6s aux t6ratomes t6moins. Le t6ratome persiste dans 11 cas sur 15 chez les Rats en exp6rience, et dans 5 cas sur 7 chez les t6moins. Dans 1 cas, le t6ratome trait6 est tr~s petit, mais dans 8 cas, il forme un amas de la taille d 'une noisette. Dans les deux derniers cas, enfin, c'est une

tumeur importante, plus volumineuse que celle des t6moins correspondant aux t6ratomes.

Aucune inhibition du d6veloppement de la tumeur b6nigne ne se manifeste dans ces essais. Nous avons pens6 que, peut-~tre, le s~jour au cong6lateur alt6rait l 'extrait canc6reux. Nous avons alors entrepris une nouvelle s6rie d'exp6- riences en utilisant un extrait frais pour chaque injection.

De plus, nous avons fair plusieurs injections d'extrait avant d'introduire la pulpe d'em- bryons.

Onze Rats sont inject6s, pendant 5 jours, avec 1 cm s d'extrait frais. Le 5e jour, chaque animal re~oit 1 cm3 de pulpe d'embryons sur le flanc trait6 pr6alablement par l'extrait.

Six Rats t~moins sont inocul~s avec la pulpe d'embryons.

Nous avons fair 1 injection quotidienne d'extrait frais aux 11 animaux, pendant nouveau 14 et 15 jours. Les Rats sont sacrifi~s 35 jours apr~s la derni6re op6ration. Un t~ratome s'est d6velopp6 sur 9 de ces animaux. Cinq t6ratomes sont de volume r6duit, inf~rieur ~t 1 cm 3, mais les 4 autres forment des tumeurs massives.

Conclusion Le surnageant de l'extrait frais, comme le

surnageant de l'extrait congel~, ne provoque aucune modification de l'~volution des t~ra- tomes. Les injections, r~p~t~es pendant plu- sieurs jours, ne nuisent en aucune fa~on ~ la "prise" et au d~veloppement de la tumeur b~nigne. Nous avons pourtant inject~ l'extrait canc~reux le plus pr6s possible du t~ratome. Mais les t~ratomes trait~s sont tout ~t fait comparables aux t~ratomes t~moins.

Si une substance est responsable de l'inhibi- tion de la croissance du t6ratome, observ~e 1orsque l'~pith6lioma et le t~ratome se d6velop- pent sur le m6me h6te, cette substance n'est pas pr6sente dans le surnageant de l'extrait, ou bien sa concentration n'est pas suffisante pour qu'elle puisse exercer une action appr6- ciable.

Nous avons alors essay6 ract ion du culot de l'extrait cancdreux

(d) Injection du culot g~ des Rats porteurs de jeunes tgratomes. Dans un premier temps, nous avons voulu savoir si 1'injection du culot de l'extrait canc6reux emp~chait la "prise" du t6ratome. Nous avons inject~ simultandment le culot et la pulpe d'embryons dans le flanc des Rats. Les 2 injections se font ~t 4 cm environ l 'une de 1'autre. Puis, nous avons inoculfi aux animaux 1 cm8 de culot chaquejour, pendant 8-10jours.

Dans certains cas, 1'injection du culot prfic6de

Sur les Interactions entre une Tumeur Maligne et un Tgratome Experimental, chez la Souris et le R a t - - I I 419

de plusieurs jours celle de la pulpe. Dans un second temps, nous avons 6tudi6 l'action du culot de l'extrait sur de jeunes t~ratomes en vole de d6veloppement.

Premier groupe d' exp~riences C'est toujours le culot congel6, puis r6chauff6

progressivement ~ la temp6rature ambiante, et enfin dilu6 de moiti6 par du liquide de Tyrode, que nous avons utilis& Nous avons fair 48 associations.

Dans 33 cas, nous injectons le culot de l'extrait; puis, 4 ~ 5 heures apr~s, la pulpe d'embryons. Nous faisons ensuite 1 injection quotidienne de culot, pendant 9 jours.

Dans 15 cas, les animaux subissent 5 injec- tions pr6alables de culot ~ raison de 1 injection par jour, puis re~oivent la pulpe d'embryons.

Apr~s l'injection de la pulpe, les Rats sont trait6s, pendant 5 jours encore, avec le culot de l'extrait canc6reux.

Trente-sept Rats t6moins re~oivent unique- ment la pulpe d'embryons, et 10 autres Rats, 10 injections de culot canc6reux.

Nous sacrifions les animaux 2 ~ 6 mois apr~s l'injection de la pulpe d'embryons.

Sur 48 Rats trait6s, 3 seulement portent un t6ratome de la taille d 'un pois.

Sur les 45 autres, aucune tumeur ne s'est d6velopp6e.

Les Rats t6moins, inject6s avec le culot de l'extrait, ne portent pas de tumeur; ils semblent parfaitement normaux.

Les t~ratomes t~moins se sont d6velopp6s dans 30 cas sur 37. Neuf ont un volume r6duit, 8 sont de la grosseur d 'une noisette, et 13 forment des tumeurs massives et ~tendues (Tableau 6).

Conclusion L'injection r6p6t6e de culot de s6dimentation

de l'extrait canc6reux emp~che la formation du

t~ratome dans la grande majorit~ des cas (45 sur 48 essais). Les r6sultats sont identiques dans le cas off l'injection de la pulpe et celle du culot sont faites le m~me jour, et dans le cas off plusieurs injections du culot sont faites avant les injections de pulpe d'embryons. L'injection du culot ne provoque pas la forma- tion d 'une tumeur canc~reuse.

I1 se forme, apr~s plusieurs injections du culot, des petites boursouflures qui disparais- sent totalement apr~s une dizaine de jours. Les animaux, ~ l'autopsie, ne prdsentent plus aucune anomalie.

Deuxi~me groupe d' expgriences Dans cette s6rie, des Rats porteurs de

t6ratomes de 3 ~ 10 jours sont trait6s par le culot de l'extrait canc~reux. Les injections d'extrait sont fakes dans le tissu sous-cutan6, au voisinage du t6ratome.

Dans 13 cas, nous injectons le culot de s6dimentation du broyat canc6reux T8 ~ des Rats porteurs de t6ratomes de 10 jours, et, dans 6 cas, ~ des Rats porteurs de t6ratomes de 3 jours.

Quatorze Rats porteurs de t~ratomes sont gard6s comme t~moins. Les tumeurs b6nignes ont sensiblement la taille d 'une noisette.

Nous continuons les injections pendant 9 jours cons~cutifs.

Quarante-cinq jours apr~s la derni~re injec- tion de l'extrait canc~reux, nous sacrifions les animaux. La t6ratome a disparu sur 5 des 13 premiers Rats trait6s; dans 6 cas, il forme un tr~s petit kyste cartilagineux, dans 2 cas enfin, c'est une tumeur de la taille d 'une noisette, c'est-~-dire de 1 cm de diam~tre environ (Fig. 3).

Sur les 6 Rats de la deuxi~me s6rie, un petit t~ratome s'est maintenu dans 1 seul cas.

Dans les 5 autres cas, le tumeur b~nigne a compl~tement r~gress&

Tableau 6. Evolution de la pulpe d' embryons, injectde ~ des Rats traitds par le culot de l' extrait cancdreux d'une part, et g~ des Rats tdmoins d'autre part

Injection de Nombre Evolution du t6ratome pulpe d'em- d'injection

bryons de eulot Pas de Petit t6ratome T~ratome de T~ratome Nombre de canc6reux tdratome de la taille la taille d'une volurnineux

cas d'un pois noisette

(diarn~tre (diam~tre va0,5 cm) v ~ 1 era)

33 10 31 2 0 0 (¢6%)

15 5+5 14 1 0 0 (~6%)

37 0 7 9 8 13 k ) y -

(81%)

420 07. Salaiin

Chez les 14 t6moins, le t6ratome a disparu dans 2 cas; il forme un petit amas ne d~passant pas 0,5 cm de diam6tre dans 4 cas; dans 3 cas, il a sensiblement 1 diam~tre de 1 cm; mais, dans 5 cas, c'est une tumeur tr6s volumineuse (Fig. 3).

Nous avons repiqu6, sur deux nouveaux Rats, deux petits tfratomes trait6s. Les greffons ne s'accroissent pas.

Nous avons examin6 au microscope 4 autres t6ratomes trait6s par le culot de l'extrait canc6reux.

Ce sont de petits kystes de cartilage.

Conclusion Les r6sultats sont condens6s dans le Tableau

7. Malgr~ le nombre r6duit d'exp6riences, nous pouvons conclure que le jeune teratome subit une nette inhibition en prfsence du culot de centrifugation du broyat de l '~pithdioma T8.

I1 disparalt compl~tement dans 53% des cas (au lieu de 14% chez les t6moins). Dans les autres cas, il ne s'accroh pas de fa~on appreci- able; il forme tout au plus un petit nodule de la grosseur d 'une noisette, alors que 36% des tdratomes tfmoins sont des tumeurs volumi- neuses.

Les injections du culot de l'extrait canc6reux ne provoquent pas la formation de tumeur maligne. Les nodules, observ6s h la suite des injections successives, finissent par disparakre compl6tement.

I1 semble bien qu'une substance toxique, prfsente dans le culot de l'extrait utilis6, soit responsable de l'inhibition du d6veloppement des tumeurs.

Nous nous sommes demand6 si cette inhibi- tion pouvait ~tre provoqu6e par des extraits d'organes de Rats adultes normaux. La tumeur T8 6tant un 6pith6lioma ut6rin, il nous a paru int6ressant d'essayerl'action des broyats d'ut6rus d 'animaux sains. Nous avons ~galement utilis6 des broyats de foie de Rats normaux.

Nous broyons les ut6rus et nous les centri- fugeons ½ heure h la vitesse de 10.000 tours par minute; le culot, dilu6 par du liquide de Tyrode, est seul conservC

Le foie est simplement hach6 aux ciseaux fins et aux ciseaux de Pascheff. On obtient une pulpe facilement injectable.

Nous injectons 1 cm 3 de pulpe d'embryons ~t 10 Rats; 5 de ces animaux re~oivent ensuite 1 cm3 d'extrait ut6rin, les 5 autres 1 cm 8 de pulpe de foie. Nous continuons le traitement pendant 10 jours. Comme dans le cas des injections d'extrait canc6reux, il se forme de petites nodules, ~t l 'endroit des piqfires, mais ces nodules disparaissent apr~s quelque temps.

Nous sacrifions les animaux 40 jours apr6s la derni6re injection.

Les 5 Rats trait~s par le broyat d'ut6rus portent un t6ratome dont 2 sont volumineux, et 3 sont de la grosseur d 'une noisette.

Sur les 5 Rats inject6s avec la pulpe de foie, 2 portent un t~ratome de la taille d 'un haricot, 2 un petit nodule de la grosseur d 'un pois. Sur le dernier, aucune tumeur ne s'est d~vel0pp6e. I1 ne se forme pas de tumeur chez des Rats t6moins, trait~s uniquement par le broyat d'ut6rus, ou de la pulpe de foie. Ainsi, les extraits de tissus normaux n'exercent aucune action sur l'6volution des jeunes t6ratomes. Les t~ratomes ~voluent sur les Rats trait~s par ces broyats, comme ils le feraient sur des Rats normaux.

Dans nos conditions exp6rimentales, seuls les broyats de l'6pith61ioma T8 manifestent une action sur l'6volution des tumeurs b6nignes.

3. C O N C L U S I O N S Dans tousles cas off nous avons r~uni, sur le

m6me h6te, le tissu embryonnaire et le tissu canc6reux (S180 et T8), la tumeur b6nigne et la tumeur maligne, nous avons observ6 le maintien et la prolif6ration de la tumeur maligne, d 'une part, l'inhibition de la croi~- sance du t6ratome, d 'autre part.

Tableau 7. Rgsultats de l'injection du culot de centrifugation de broyat de tumeur 7"8 h des Rats porteurs de tgratomes de 10 et 3 jours. Evolution de ces tgratomes et des tgratomes tdmoins

Tdratome Nombre d'injec- Evolution du t~ratome Nombre Age tions du culot Disparition R6duction Maintien Forte de cas canc6reux croissance

13 10 jours 10 5 6 2 0 6 3 jours 10 5 1 0 0

Total 19 10 53% 7 37% 2 10%

90% 10% 14 0 2 4 3 5

14% 28% 22% 36% 42% 58%

Sur les Interactions entre une Tumeur Maligne et un Tgratome Experimental, chez la Souris et le R a t - - I I 421

[ [ I~moin

, ~ m ~:unnC:rTmSb+ryome m~me , lanc o ~° ~ cancer T8 +

gO" .jeune embryorne rlanc oppos6 ','~'_ ~ culoL canc~reux ÷ __~ ~ pulpe d'embryons

80. ~ ~ culoL canc&reux+" "jeune embryome

70.

60'

501 ~ t __ :._~: ---..

3~ ~ !.:.: f / : . . , . '

" . . .

- -= i:i!: i

Fig. 4 Inhibition de la formation du tdratome chez les Rats tlmoins et d~z les Rats cancbeux ou inject~s avec le culot de s~dimentation de l'extrait canc~reux.

Si nous greffons la tumeur T8 ~t un Rat porteur d 'un t6ratome volumineux, la tumeur T8 se d6veloppe. Elle n'est pas inhib6e par la pr6sence de la tumeur b6nigne qui ne modifie ni la "prise", ni la croissance de la tumeur maligne. La tumeur maligne ne semble pas non plus g~ner le t~ratome massif.

Comme nous l'avons montr6 dans la premi6re partie de ce travail, les tissus con- jonctif, cartilagineux, osseux sont abondants dans les t~ratomes ~tgfs. Ces tissus r6sistants permettent sans doute au t6ratome de se maintenir, malgr6 le pr6sence de la tumeur maligne. Les deux tumeurs coexistent alors sur le m6me animal.

En revanche, lorsque l '6pithflioma T8 se d6veloppe sur un Rat porteur d 'un jeune tfratome, nous constatons un effet inhibiteur de l'6pith61ioma sur le maintien et la croissance du t6ratome. Le t6ratome dispara~t dans un grand nombre de cas (50% si l'~pith6lioma et le t6ratome se d6veloppent sur le m~me flanc, 24% lorsqu'ils se d~veloppent sur les flancs

opposds). Lorsqu'il persiste, il forme de petits kystes atteignant rarement le volume d 'une noisette. Jamais il ne prolif~re de fa~on sensible.

I1 ne semble pas que cet effet soit li6 ~t une mauvaise nutrition de la tumeur b6nigne, mais

une action toxique de la tumeur canc6reuse. Depuis plusieurs ann6es, de nombreux auteurs ont pensd qu'il existait, dans les tumeurs malignes, une ou des substances toxiques. D~s 1948, Nakahara et Fukuoka [3] isolent une substance, ~t parfir de diff6rentes tumeurs canc6reuses; cette substance inhibe l'activit6 enzymatique de la catalase du foie de Rats normaux. Ils l 'appellent la "Toxohormone". Greenstein [4, 5] observe 6galement cet effet sur la catalase du foie, en utilisant des extraits de plusieurs tumeurs malignes. En associant en parabiose deux Rats, l 'un canc6reux, l 'autre sain, Lucke et collaborateurs [6] con- statent que des substances toxiques passent du Rat cancdreux vers le Rat sain. Ces toxines r6duisent l'activit6 de la catalase du foie du Rat normal.

Tableau 8. Influence r~ciproque exerce'e par lYpitMlioma T8 et les tdratomes associgs in vivo

Type d'exp6rience Evolution du t6ratome Evolution du cancer T8

Tissu canc6reux m6lang6 la pulpe d'embryons

Tumeur canc6reuse +

t6ratome bien dfvelopp6

Tumeur canc6reuse +

jeune t6ratome

Culot de l'extrait canc6reux +

jeune tfratome

Inhibition

Aucune modification

Inhibition

Inhibition

Favorisde

Aucune modification

Aucune modification

422 o7. Salaiin

Depuis, la "Toxohormone" a donn6 lieu ~t de nombreuses recherches. Les auteurs se sont efforc6s de purifier la substance. On trouvera, dans l'ouvrage de Busch [7], l'historique de la question. Nous nous contenterons de pr6ciser ici qu'il s'agirait d 'un polypeptide de faible poids mol~culaire. II ne semble pas que cette substance soit sp6cifique des tumeurs malignes. Elle existerait 6galement, en petite quantit6, dans certains tissus normaux.

Cependant, selon Yunoki et Griffn [8], une fraction de la Toxohormone, la fraction TH2, ne se trouverait que dans les tissus malins. Le probl~me reste encore complexe, mais il semble bien que des substances toxiques soient 61abor6es par les tumeurs canc6reuses.

Nous avons pr~par6 des broyats de l'~pith6- lioma T8. Le culot de centrifugation de ces broyats, inject6 pendant plusieurs jours ~ des animaux reeevant une injection de pulpe d'embryons, manifeste une forte action inhibi- trice sur le d~veloppement de la tumeur b~nigne. Si l'injection de la pulpe d'embryons est faite lejour de la 6re inoculation de l'extrait canc~reux, aucun t~ratome ne se d~veloppe dans 94% des eas. Si le t~ratome est d6j~t form~ lorsque d6bute le traitement par l'extrait canc~reux, le t~ratome disparait dam 53% des eas; dans 37%, il forme un petit areas carti- lagineux de dimensions r~duites. Son volume est toujours inf~rieur ~ celui des t6ratomes t~moins (les r~sultats sont r~unis dans la Fig. 4).

Ainsi, les eulots de centrifugation des broyats de la tumeur T8, emp~chent la croissance de la

tumeur bdnigne. Les injections du surnageant de l'extrait

canc6reux, d'une part, de broyats de foie et d'ut6rus normaux, d'autre part, sont sans action sur l'6volution du t6ratome.

Le traumatisme, produit par les piqflres r6p6t6es, et la pr6sence de nodules 6trangers au t6ratome, ne sont done pas responsables de l'involution de la tumeur bdnigne.

Ces exp6riences sugg~rent que l'action mani- fest6e par le culot de s6dimentation des broyats de la tumeur maligne T8 pourrait ~tre due un facteur toxique pr6sent dans l'extrait utilis6, que nous tenterons d'analyser dans un travail ult6rieur.

Nous pouvons conclure, d~s ~ pr6sent, que:

(1) l'6volution du Sarcome S180 et de l'6pith6lioma ut6rin T8 est favoris6e par les cellules embryonnaires lorsque les 2 types de cellules sont m~lang~es avant d'etre injeet6es l'h6te;

(2) la tumeur maligne (S180 et TS) exerce une action inhibitrice sur le d6veloppement des jeunes t6ratomes;

(3) cette action inhibitriee ne d~pend pas de la pr6sence de cellules canc6reuses intactes. Elle se manifeste ~galement lorsque nous injectons le culot de s~dimentation du broyat de la tumeur maligne T8.

Ces r6sultats sont consign6s dans le Tableau 8. Signalons que le jeune t~ratome, comme le

t6ratome bien d6velopp6, n'exerce aucune influence sur la tumeur maligne qui se d6veloppe comme elle le ferait sur des Rats normaux.

R E S U M I ~ Nous avons rduni, sur le mgme h#te, un tgratome et une tumeur maligne, et dtudii l'influence qu'exercent l'une sur l'autre ces deux tumeurs. Q uelques essais sont faits chez la Souris avec le sarcome S180, mais le plus grand hombre d'expdriences sont faites chez le Rat avec lYpithdlioma utdrin T8. 1. Lorsqu' on greffe la tumeur 2-8 ~ un Rat porteur d'un t6ratome massif, dgveloppg depuis plusieurs mois, la tumeur maligne et le tdratome coexistent sur l'animal et ne semblent pas exercer d'influence l'un sur l'autre. En particulier, le tdratome, mgme trks volumineux, n'empgche nullement la proliflration de l'tpitMlioma qui se dgveloppe comme le font les tumeurs 7"8 tdmoins. 2. Lorsqu'on greffe la tumeur T8 ?tun Rat rIcemment injectg avec la pulpe d'emb~yons, on constate une inhibition du dgveloppement du tgratome. Le ddveloppement de la tumeur maligne, lui, ne subit aucune modification. L'inhibition du tgratome est particuli~rement nette lorsque les deux tumeurs gvoluent sur le m~me flanc. EUe se manifeste par une augmentation des pourcentages de la disparition du t~ratome ou de la rdduction de son volume, par rapport aux pourcentages tgmoins (50% au lieu de 20% pour la disparition, 39% au lieu de 10% pour la rdduction du volume). La croissance du tdratome est arrgtde. Les tgratomes inhibds sont constitu6s de fibroblastes et de cartilage. Nous n'y avons jamais observg de cellules malignes. 3. Nous nous sommes demandd si cette action de la tumeur T8 sur la croissance du tdratome gtait due ~ une compdtition nutritive entre les deux tumeurs ou ~ une action toxique du cancer. Nous avons t~rdpard des extraits de tumeur T8 et constatd que le culot de

Sur le Interactions entre une Tumeur Maligne et un Tgratome Experimental, chez la Souris et le Rat - - I I 423

centrifugation de l' extrait, injectg pendant plusieurs jours ~ des Rats recevant une injection de pulpes d'embryons au dgbut du traitement, empgchait la formation du tgratome dans 94% des cas. Les injections de culot exercent ~galement une action ddfavorable au ddveloppement d' un tgratome dgg de 3 g~ l O jours. La rggression des tgratomes est augmentge, leur croissance est bloquge (53% des tgratomes disparaissent au lieu de 14% chez les tgmoins). 4. Des broyats de tissus normaux -foie et utgrus- de Rats adultes n'ont aucun effet sur lYvolution des tgratomes. 5. En conclusion, l'action inhibitrice de lYpitMlioma utgrin T8 sur le maintien et la croissance du t#atome serait due ~ des facteurs toxiques produits par la tumeur maligne et prgsents dans le culot de centrifugation de l' extrait de cette tumeur.

SUMMARY A teratoma and a malignant tumour were grafted on the same host and the way they are acting upon each other was studied. A few experiments were carried out on mice with sarcoma S180, but most of the experiences were performed on rats with the uterine epithelioma T8. 1. When a T8 tumour was grafted on a rat bearing a big several months old teratoma, the malignant tumour and the teratoma just co-existed on the animal and did not seem to influence each other. Particularly, even i f very voluminous, the teratoma did not prevent the proliferation of the epithelioma, which developed as the T8 control tumours. 2. When a T8 tumour was grafted on a rat recently injected with embryo pulp, there was inhibition in the development of the teratoma. The development of the malignant tumour did not undergo any modification. The inhibition of teratoma was particularly apparent when both tumours developed on the same side of the body. This could be distinguished by a faster disappearing of the teratoma or by a reduction of its volume in comparison with the controls (50% instead of 20% for the disappearing and 39% instead of lO% for the reduction of volume). The growing of teratoma was stopped. The inhibited teratomas consisted of fibrobIasts and cartilage. Malignant cells were never observed. 3. We were wondering whether this action of the T8 tumour on the growing of the teratoma was due to a nutrition competition between both tumours or to a basic action of the cancer. Extracts of T8 tumour were prepared and we noticed that the centrifugation precipitate of the extract, injected for several days to rats receiving an injection of embryo pulp at the beginning of the treatment, prevented the formation of the teratoma in 94% of the cases. The precipitate also had an unfavourable effect on the development of a teratoma aged 3 to 10 days. The regression of teratomas was increased, their growth was stopped (53% of the teratomas disappear instead of 14% of the controls). 4. Extracts from normal tissues of liver and uterus of adult rats had no effect on the evolution of the teratomas. 5. In conclusion, the inhibitory action of the uterine T8 epithelioma on the maintenance and growth of the teratoma could be due to toxic factors induced by the malignant tumour and present in the centrifugation precipitate of this tumour extract.

ZUSAMMENFASSUNG Wir haben bei einem und demselben Tier ein Teratom und einen b6sartigen Tumor gepflanzt und den Einfluss yon einem auf den anderen untersucht. Einige Versuche sind an Miiusen mit Sarkom S180 durchgefiihrt, abet die gr6sste Zahl von Experimenten wurde bei den Ratten mit Uterusepitheliom T8 untersucht. 1. Wenn man eine Ratte impft, die seit mehreren Monaten einen massiven Teratom entwickelt hat stellt man lest, dass der b6sartige Tumor und das Teratom koegsistieren und sie keinen Einfluss aufeinander ausiiben. Das Teratom, auch dann, wenn es sehr gross ist, verhindert nicht die Entwicklung des Epithelioms, welches das gleiche ist wie bei Kontrolltieren mit einem T8-Tumor. 2. Einer Ratte, der man vor kurzem die Embryonenpulpe injiziert hat und anschliessend einen T8-Tumor geimpft hat, wurde eine Hemmung des Teratoms festgestellt. Die Entwicklung des b6sartigen Tumors ist besonders ausgepriigt, wenn beide Tumoren sich

424 J. Salaiin

auf derselben Flanke entwickelt. Diese Hemmung driickt sich aus in einer Prozenter- h6hung der verschwundenen Teratomen oder in Verminderung ihrer Volumen in Vergleich zu den Kontrolltieren (50% anstatt 20%, fiir das Verschwinden yon Teratomen, 39% anstatt 10% fiir die Volumenvergnderungen). Das Wachstum der Teratome ist unter- brochen. Die gehemmten Teratome bestehen aus Fibroplasten und Knorpel. Die b6sartigen Zellen haben wir nie beobachtet. 3. Wir haben uns gefragt, ob diese Wirkung des T8-Tumors auf das Wachstum des Teratoms einer Erni~hrungskonkurrenz zuzuschreiben ist, oder einer toxischen Wirkung des Karzinoms. Wir haben zwei Extrakte vom T8-Tumor vorbereitet und festgesteUt, dass das Extraktzentrifugat, das den Ratten--die mehrere Tage mit Embryonenpulpe vorbehandelt wurden--injiziert wurde, die Entwicklung des Teratoms in 94% der Fglle dadurch verhinderte. Die Verabreichungen des Zentrifugats beseitigen die Entwicklung eines 3-10 Tage alten Teratoms. Die Riickbildung der Teratomen ist erhiiht und ihr Wachstum blockiert (53% der Teratomen bilden sich zuriick gegeniiber 14% bei KontroUtieren). 4. Das homogenisierte normale Gewebe (Leber und Uterus vonder erwachsenen Ratte) hat keinen Effekt auf die Entwicklung der Teratomen. 5. In Zusammenfassung: Die hemmende Wirkung von T8-Uterusepitheliom auf Erhaltung und Wachstum des Teratoms ist auf toxische Faktoren zuriickzufiihren, die durch einen b6sartigen Tumor entstanden sin& Diese Faktoren sind in Zentrifugat des Tumorextraktes zu finden.

BIBLIOGHAPHIE l. J. SALAIJN, Sur la formation exp6rimentale de t6ratomes chez le Poulet et le Rat.

Archs Anat. microsc. Morph. exp. 57, 11 (1968). 2. G. CSABA, T. Acs and G. HORVATH, Ueber eine biologische Konkurrenz im Falle

gleichzeitiger Tumordoppelimpfungen. Arch. Geschwulstforsch. 18, 17 (1961). 3. W. NAKAHARA and F. FUKUOKA, A toxic cancer tissue constituent as evidenced

by its effect on liver catalase activity. Japan Med. 1, 271 (1948). 4. J. P. GREENSTEIN, Biochemistry of Cancer p. 316. Academic Press, New York (1954). 5. J. P. GREENSTEIN, The in vivo effect on liver catalase by a tumor, o7. nat Cancer Inst.

15, 1603 (1955). 6. B. LUCKE, M. BERWICK and I. ZF.CKWER, Liver catalase activity in parabiotic

rats with one partner tumor bearing. J. nat. Cancer Inst. I3, 681 (1952-1953). 7. H. BUSCH, Toxohormone. Introduction to the Biochemistry of the Cancer Cell.

p. 241. Academic Press, New York (1962). 8. K. YUNOKI and A. C. GRIFFIN, Purification of toxohormone by column chroma-

tography. Cancer Res. 20, 533 (1960).