•  Varia0on  de  la  quan0té  d’ADN  au  cours  du  temps    Avec  A  =  Phase  G1  B  =  Phase  S,  C  =  phase  G2  

Durant la phase S la quantité d’ADN est doublée ; elle est ensuite divisée par 2 lors de la mitose. Pb : comment se réalise la duplication du matériel génétique lors de la phase S ?

TP1  –  La  duplica1on  de  l’ADN  

Objec0fs  de  la  séance  :  raisonner  pour  comprendre  les  mécanismes  qui  permeVent  la  réplica1on  de  l’ADN  précédent  la  division  cellulaire  et  communiquer  ses  résultats  par  un  schéma.    Consigne  :  À  par1r  des  documents  proposés,  retrouver  la  démarche  historique  et  les  résultats  obtenus  par  Meselson  et  Stahl.  Schéma0ser  les  résultats  de  la  réplica1on  de  l’ADN  durant  deux  généra1ons  chez  les  levures.    Documents  :    

 -­‐  livre  p  22  document  1  et  2      -­‐  site  interac1f  :  hVp://pedagogie.ac-­‐toulouse.fr/svt/serveur/lycee/gueraut/stahl/  

     

Démarche  historique  

Meselson  et  Stahl  partent  d’un  constat  :  Durant  la  phase  S  (B  sur  le  doc  ci-­‐dessus),      la  molécule  d’ADN  est  recopié,  les  2  brins  formés  doivent  porter  la    même  informa1on  géné1que.    

Hypothèses  émises  

Protocole  expérimental  

L’azote est un constituant des nucléotides, il a pour formule chimique N, il existe 2 isotopes (nombre de neutrons différents) 14N et 15N. Ces 2 isotopes se distinguent par leurs poids moléculaires 15N>14N. Si on cultive des bactéries en présence d’azote 14, l’ADN synthétise sera un ADN de densité légère ; les bactéries cultivées en présence 15N synthétiseront un ADN lourd. Les différences de densités sont mises en évidence par centrifugation.

Témoins

Expériences

Les  résultats  

Témoins   Résultats  sur  3  généra1ons  

Comment à partir de ces résultats valider une des 3 hypothèse émise ?

Hypothèse  1  :  hypothèse  conserva1ve  

Dans cette hypothèse on devrait obtenir dans les tubes une bande d’ADN lourd et une bande d’ADN léger. Ce n’est pas ce qui est obtenu expérimentalement => l’hypothèse est réfutée

Hypothèse  2  :  hypothèse  semi  -­‐  conserva1ve  

Pour les 3 générations ce modèle de duplication est concordant avec les résultats expérimentaux. C’est hypothèse est validée

Hypothèse  3  :  hypothèse  dispersive  

Dans ce cas : 1er génération les résultats sont concordants et ne permettent

pas de réfuter cette hypothèse. 2ième et 3ième génération : modèle de réplication non conforme aux résultats

expérimentaux (une seule bande de densité comprise entre 1,710 et 1,717)

Donc sur les 3 hypothèses émises seule la duplication semi-conservative de l’ADN permet d’expliquer les résultats expérimentaux obtenus par Meselson et Stahl.