Expose Yvon Gervaise Rrennes colloque adria maison de l' agriculture 6-11-14

APPROCHE ANALYTIQUE DE LA DÉTECTION

DES FRAUDES : COMMENT GARANTIR L’AUTHENTICITÉ DES

MATIÈRES PREMIÈRES ET DES PRODUITS FINIS?

M. Yvon GERVAISE

Expert près la Cour d’Appel de Rouen

Expert Français auprès de l’OCDE

Directeur SGS Multilab

RENNES 6-11-2014

2 © SGS Multilab Rouen, Yvon Gervaise – ADRIA – Colloque fraudes alimentaires- 06/11/2014 - RENNES

INNOVATION ANALYTIQUE

AUTHENTIFICATION DES MATIÈRES PREMIÈRES

ET DES PRODUITS

DÉTECTION DES FRAUDES

Matière première Produits finis de

consommation

Recherche

Développement

Enregistrement

Nouvelle

technique

analytique

Sélection matières

premières

Fabrication

Commercialisation

Caractérisation pureté

Quantification impureté

Mise sur le marché

Conformité technique et

règlementaire


POINTS CLÉS POUR CONDUIRE UNE ANALYSE

DE RISQUE PERTINENTE ET DÉFINIR SA CHAINE

D’APPROVISIONNEMENT

De la pureté à l’impureté, de l’infiniment grand à

l’infiniment petit

Typologie d’une fraude

Tromperie sur l’origine et la qualité substantielle

– Facteurs d’authentification, appellation

Origine naturelle / origine biologique

Falsification chimique de denrées périmées pouvant entrainer de

graves intoxications

Importations de produits prohibés via des trafics d’étiquettes

Utilisation de substances prohibées : pesticides, médicaments

vétérinaires sur des denrées végétales, animales

Loyauté du produit par rapport à éventuelle tromperie

Historique : quelques exemples avérés





HISTORIQUE – QUELQUES EXEMPLES AVÉRÉS

Huile frelatée en Espagne (T.O.S.) 100 morts année 1980

Glycols dans les vins Autrichiens début années 1980

Année 1999 : contamination des aliments poulets en

Belgique par PCB (pyralène)

Blanchiment cargaison de sucre par bleu d’outremer

Alcool frelaté par du méthanol (1986)





HISTORIQUE – QUELQUES EXEMPLES AVÉRÉS

-> Problème ancien et nouveau

de l’Antiquité à nos jours

– Ancienne Rome : coloration des vins

– 13è siècle : 1ère règlementation pour protéger les populations

– 1516: Loi sur la pureté de la bière en Allemagne

– 18-19è siècle : les boulangers utilisent des agents de

blanchiment pour les pains

– 1820 : Frederick Carl Accum publie un livre décrivant les

pratiques et les effets de l’altération des aliments

– 1860 : Docteur John Postgate introduit les premiers moyens de

détection

– 1er août 1905 : Loi sur la Répression des fraudes dans la vente

des marchandises et des falsifications des denrées alimentaires

et produits agricoles


FACTEURS À INTÉGRER DANS

L’ÉLABORATION D’UN PLAN DE CONTRÔLE

AUTHENTIFICATION / DÉTECTION FRAUDE DÉTECTER, PRÉVENIR ET GÉRER LA FRAUDE

Contexte de crise économique

Occurrence d’un indice suspect

Alerte

Investigation

Indices

Analyses poussées

Détecter

Gestion alerte

Identification du caractère frauduleux

Gestion des priorités et traitement de l’alerte avec

ressources adéquates


ÉVOLUTION DE L’ANALYSE DES FRAUDES

Plan performance 2013/2014

Faire parler la matière

– Abaisser la limite de quantification

– Substance profiling

– Faire parler les isotopes stables et instables

– Lancement de la fête de la science

– Création d’un écosystème numérique

PCA traitement mathématique

Intervalle de confiance

Développement du traitement de données


COMPRENDRE ET CERNER LES FACTEURS ET

CONSÉQUENCES DU RISQUE DE FRAUDE

Reconnaitre les mécanismes / situer les contextes

Appliquer les techniques de détection

Organiser / Association of Certified Fraud Examiners

(ACFE) : professionnels de l’anti-fraude

Avoir développé des méthodes et une expertise

Retours d’expériences (expériences à l’international)

Retour d’expérience de la pratique de l’expertise judiciaire

Colloque fraude de composition en 2010 SECF : SGS

MULTILAB

Maîtriser l’investigation basée sur principe que tout produit,

tout phénomène a une signature chimique ou biochimique


AUTHENTIFICATION DES MATIÈRES PREMIÈRES

ET DES PRODUITS


« TOUT EST MÉLANGE »

Le corps pur s’apparente à une conjecture et n’admet de définition qu’opératoire.

N’est-il qu’un inaccessible idéal éloigné de toute réalité?

Le cristal vient infirmer ce pessimisme radical

- cristaux de sucrose dans un pot de confiture (sont de pureté acceptable)

Résultat d’une collision moléculaire en microseconde


PURETÉ DE L’ALIMENT AUTHENTICITÉ


Critères de pureté de matières premières dans les produits de consommation alimentaires

Méthodes d’analyses pour en assurer leur contrôle

Traçabilité de la détermination de la teneur et de la pureté

Pureté importante pour l’évaluation des produits

- matières premières agricoles

- aliments (additifs alimentaires)

- produits première transformation

- produits de consommation alimentaire


PRINCIPE D’AUTHENTIFICATION DES PRODUITS

VALEUR AJOUTÉE

La détermination du degré de pureté consiste à quantifier les impuretés dans une substance, les marqueurs d’origine, les produits d’altération

2 grandeurs complémentaires

- teneur des composants principaux (pureté)

+ - teneur des impuretés

Traçabilité de la détermination de la teneur et de la pureté

= 100% ?


COMMENT NOUS CONNAISSONS LES MATIÈRES PREMIÈRES

ET ÉVALUONS LES PRODUITS FINIS :

L’EXPERTISE ANALYTIQUE? AUTHENTIFICATION PRODUITS

Techniques du vivant:

Biochimie Biologie moléculaire

Processus de l’analyse de la

matière

Traitement de l’échantillon

Techniques spectrométriques

- Radioactivité

- Spectrométrie de masse

Techniques séparatives

Chromatographie

Techniques du vivant : Écotoxicologie

Evolution de l’expertise analytique

1

2

3

5

4


LES DÉTERMINANTS DES PLANS DE CONTRÔLES : NORMES,

RÈGLEMENTATION L’ENVIRONNEMENT

CONCURRENTIEL DES ÉCHANGES

Orientent

Structurent

Contraignent

D’un port à l’autre …

Les normes transportent des approches techniques juridiques

favorisant ou défavorisant des intervenants

Normes ont pour objet:

Sécuriser les échanges

Facilité interopérabilité du commerce

Principe protéger le consommateur : traçabilité -

durabilité

L’environnement concurrentiel

des échanges

Normes et

régulation

internationales

Connaissance

Evaluation

marchandise

produit

Sciences

analytiques

Caractérisation

expertise


CONTRÔLE DES MATIÈRES PREMIÈRES ET DES PRODUITS

(ASPECTS TECHNIQUES ET RÈGLEMENTAIRE) DANS LES

ÉCHANGES MONDIAUX

AUTHENTIFICATION DES PRODUITS

DÉTECTION DE FRAUDE

Intérêt des entreprises, des opérateurs à maitriser la

conformité:

• Eviter des déconvenues

• Favoriser le positionnement

• Soutenir des stratégies à long terme

Développement des échanges et corollaire

• Augmentation des normes et règles

• Acteurs publics et privés participent à leur élaboration.

• Tendance des États et organisations à déléguer l’élaboration aux

experts

Produits de consommation CPSIA (Consumer Product Safety

Improvement Act- USA)


RECONNAISSANCES DU LABORATOIRE

L’ÉVALUATION DE CONFORMITÉ A AUSSI DES EXIGENCES…

Compétence du laboratoire

• moyens efficaces : réduire le risque d’importations de produits

défectueux

• Conformité aux normes, règlements suivant des tests

Accréditation et instrument de reconnaissance de la compétence

du laboratoire

• Exactitude, fiabilité, confiance des résultats

Reconnaissance BPL (Bonnes Pratiques de Laboratoire)

Accréditation doit être reconnue au niveau international

• COFRAC, organisme qui accrédite suivant ISO 17025.

• reconnaissance à travers des évaluations très rigoureuses de

l’organisme ILAC (International Laboratory ACcreditation)

• MRA (Mutual Recognition Agreement): laboratoire reconnu

globalement pour faciliter l’acceptation les résultats de test qui

accompagnent

CIR (Crédit Impôt

Recherche)

http://1.bp.blogspot.com/_g4teiHNtQuU/S9iZs9VvclI/AAAAAAAAAA0/jTmCsjJ5Hc0/s1600/ILAC logo.jpg


CONNAISSANCES ET RECONNAISSANCES DU

LABORATOIRE DANS LA FILIÈRE CHIMIE, PHARMACIE,

COSMÉTIQUE, CHIMIE FINE…

- Accréditation ISO 17025 COFRAC, EA, ILAC

- Agréments ministériels ,santé, environnementaux, ASN

FOSFA (Federation of Oils, Seeds

and Fats Association)

KFDA (Autorités coréeenes)

COFRAC (Comité Français

d’ACcréditation)

BPL (Bonnes Pratiques de

laboratoire)

GAFTA (Grain and Feed

Trade Association)


CONFORMITÉ DES PRODUITS ET LES INSTANCES

DE LA RÉGULARISATION INTERNATIONALE

GHS, REACH, etc …


LA PERFORMANCE À L’ÈRE NUMÉRIQUE ET

L’INTERACTION CLIENT

Évolution technique / marché

Normes

Réglement

http://twitter.com/expertscience

– Information en temps réel (1600 comptes officiels)

– Laboratoire SGS Multilab partenaire capable d’assurer une veille scientifique, technique, réglementaire

– Monde connecté, interaction

Veille scientifique, analytique, et produit - procédé

Veille normative

Veille réglementaire

-> Nouvel outil : twitter

@expertscience

L’ écosystème numérique de SGS MULTILAB…



OUTILS DE SCREENING DE COMPOSÉS NON

CIBLÉS, TRAITEMENT A POSTERIORI

Contrôle de l’origine

Analyses des composants -> pureté

Analyses des constituants mineurs -> impuretés

Analyses des marqueurs d’origines, de procédés

Analyses de molécules –> analyses élémentaires

Analyses d’isotopes stables, instables

– Exemple des vins: analyse par Carbone 14

– Origine produits: origine géographique : certains ratio

isotopiques


PANORAMA DES PRINCIPALES MÉTHODES

D’ANALYSES UTILISÉES 1/4

Analyses physico-chimiques de composition

Identification et quantification des composants cibles

Isotopes instables et stables

Origine des molécules et des produits

Screening / profiling

Empreintes chromatographiques : HPLC/MS/MS

Empreintes spectrales: GC/MS/MS

Recherche de marqueurs spécifiques

Origine de biologie moléculaire

PCR

Biologie souche

Identification d’espèces et variétés


IDENTIFICATION ET QUANTIFICATION

DES ESPÈCES

A partir des protéines

– Iso-électrofocalisation (produits laitiers, poissons)

– Détection d’antigènes

– Spectrométrie de masse en développement

A partir de l’ADN

– ADN nucléaire, ADN mitochondriaux (produits transformés)

– PCR toutes espèces

LES MÉTHODES DE PROFILAGE CHIMIQUE ET

BIOCHIMIQUE




LES MÉTHODES DE PROFILAGE CHIMIQUE ET

BIOCHIMIQUE



Analyse chimique

- réaction en solution

- analyse titrimétrique

- analyse gravimétrique

- analyses électrochimiques, chimiométrie

- spectroscopie à émission atomique,

- spectroscopie électronique moléculaire U.V.

- spectroscopie de vibration IRFT

- spectroscopie XRF

- spectrométrie de masse

- techniques séparatives

- GC/MS/MS

- HPLC/MS/MS

Évolution de la chimie analytique avancée


LES OUTILS DE DÉTECTION DE FRAUDE

Spectrométrie de masse

UPLC/APGC-TOF/QTRAP

Méthode multimolécules / couverture chimique large de la

trace (ppt) aux ultratraces. Identification par spectre de

masse

Autres méthodes

Spectroscopie infrarouge

RMN

Fluorescence X

ICP/AES et ICP/MS

Spectrométrie Ɣ, α, β (isotope instable)

GC, profil chromatographique GC haute résolution




LES RÉCENTES APPLICATIONS EN LC/MS/MS

AUTHENTIFICATION DES PRODUITS ET

INNOVATION ANALYTIQUE


Nouvelles préoccupations en réponse aux

nouvelles exigences

Sûr

Conforme aux étiquetages

Conforme à la sécurité et aux

attentes consommateurs

Authenticité

Qualité Sécurité Intégrité produit

alimentaire

NOUVELLES PRÉOCCUPATIONS EN RÉPONSE

AUX NOUVELLES EXIGENCES


Authenticité -> l’authentification consiste à user d’outils

aptes à rendre un produit authentique aux yeux du

consommateur

Indication sur les produits, marque régionale (produits

locaux)

Multiplication des indications : naturel, tradition

Authentification via la communication : un message peut

véhiculer que la marchandise serait authentique

Evaluer l’efficacité de l’authentification

Préoccupations actuelles de sécurité, de qualité

Le débat sur le nouvel étiquetage nutritionnel

Authentification perçue – authentification prouvée

NOUVELLES PRÉOCCUPATIONS, TENDANCE :

L’AUTHENTICITÉ

NOUVELLES PRÉOCCUPATIONS, TENDANCE :

L’AUTHENTICITÉ


QUELLES NOUVELLES PRÉOCCUPATIONS

DANS LA FILIÈRE VÉGÉTALE ?

Origine

AOC? OGM?

Contaminants

chimiques?

Métaux

lourds?

Nouvel

ingrédient ?

Adjonction

d’eau au

produit?

Dioxines

PCB?

Présence de

pesticides?

L’emballage

est-il adapté?

Pays de

provenance?


DANS LA FILIÈRE VÉGÉTALE ?



DANS LA FILIÈRE CARNÉE ET AQUATIQUE?

AOC? OGM?

Contaminants

chimiques?

Mode

d’élevage?

Métaux

lourds?

Quelle

espèce

animale?

Dioxines

PCB?

Présence de

pesticides, de

bactéries?

Présence de

résidus

médicamenteux ?

Pays de

provenance?

Adjonction

d’eau au

produit?

Perturbateurs

endocriniens?


NOUVELLES PRÉOCCUPATIONS

L.A.A.F (Loi Avenir Agriculture et Forêt)

Principe de mise en transparence des résultats de contrôle

Appui sur des organismes délégataires

Meilleure utilisation des phytosanitaires, antibiotiques

Qualité/Sécurité/Authenticité

Préserver l’authenticité initiative Food Integrity

– INCO DG SANCO (DG de la santé et de la protection du

consommateur) 1169/2011

– Indication origine pour les produits carnés (ex. : 1337/2013)

– Etiquetage nutritionnel : qui lit et comment

GFSI : Global Food Safety Initiative


NOUVELLES PRÉOCCUPATIONS, NOUVELLES

APPROCHES :

LE CONTRÔLE NOUVEAU EST ARRIVÉ ?

Tirer les conséquences de la modernisation des moyens

de contrôle

Authenticité perçue – Authenticité prouvée

Décret 2014-1109 du 30 septembre publié le 20 octobre

Nouveaux pouvoirs de la DGCCRF

Performance et innovation méthodologique des analyses

de laboratoire

Capacité à apporter rapidement des réponses fiables et

pertinentes à la demande client

Innovation analytique du laboratoire Valeur ajoutée pour le

client


DE NOUVELLES PRÉOCCUPATIONS À

NOUVELLES APPROCHES ANALYTIQUES

Quels étaient les verrous de l’analyse ?

Extraction des composés ou molécules d’intérêt

– Choix des techniques

– Effet des matrices

– Dispositif de prétraitement échantillon

Caractérisation et quantification

– Coût

– Mono-paramètre

– Processus lent

– Performance analytique limite


AUTHENTIFICATION ET SÉCURITÉ : QUELS

DÉTERMINANTS ?

Qualité nutritionnelle

Acides gras

Antioxydants

Minéraux

Vitamines

Fibres

…

Sécurité sanitaire

Métaux lourds

Contaminants

Pesticides

Résidus médicamenteux

Authenticité

Isotopes

Polyphénols

Carotenoïdes

Acides gras

Traceurs

LA PERFORMANCE APPLIQUÉE À L’ANALYSE EN

GC/MS/MS, ICP/MS & LC/MSMS… :

• Multi-résidus mycotoxines

• Multi-résidus antibiotiques

• Multi-résidus pesticides

• Multi-résidus médicaments vétérinaires

• Multi-résidus perturbateurs endocriniens

• Multi-résidus contaminants chimiques

• Multi-profil nutritionnel

• Multi-profil minéral


LA PERFORMANCE APPLIQUÉE À L’ANALYSE

EN GC/MS/MS & LC/MSMS :

PROBLÉMATIQUES :

Développement de méthodes multi-résidus

(Pesticides, Antibiotiques, Mycotoxines, Vitamines Organophosphorés, ….)

Forte sélectivité de l’analyseur pour compenser une préparation

d’échantillon non sélective

Forte sensibilité pour injecter la quantité de matrice la plus faible

possible

Optimisation du temps pré/in & post analytique

Problématique

Générale

LMR

nombre de molécules

Laboratoire

Coût

Qualité

Temps d’analyse


EFFETS MATRICES

Utilisation d’EI marqués

Correction :

• Effets matrices

• Taux de récupération

• Variations analytiques

Coût important

Vérification des LQ

HCB HCB C13

Purification H2SO4

Perte de composés

Limite de quanti

Dilution 1/10

Pas de perte

Limite de Quanti x10 HCB C13

Famille de composés

Mono résidu

Multi-résidus

Réduction des effets matrices

GC conventionnelle 30m x 0,25mm x 0,25µm

29 min

Fast GC 20m x 0,15mm x 0,15µm

11 min


GC CONVENTIONNELLE = POLYVALENCE

Huile de

poisson

Exemples

d’application

au

laboratoire

20 ppb

Huiles

essentielles

50 ppb

HCH


30 min.

10 min.

HPLC 0.3 mL/min

UHPLC 0.5 mL/min

SCREENING DE 400 PESTICIDES : DIMINUTION PAR 3 DU TEMPS

D’ANALYSE

Sensibilité Vitesse d’acquisition Temps d’analyse


-Aflatoxines

-Fumonisines

-HT-2 et T2

-DON

-ZEA

-DAS

-Neosolaniol

-Ochratoxine

ANALYSE DE MYCOTOXYNES PAR LC-MS/MS

FCT° DEMANDE CLIENTS

Attention aux effets matrices Préparation peu spécifique


Diverses matrices :

- céréales

- alimentations animales

- fruits secs

- plats préparés

- épices

Utilisation d’EI nécessaire pour corriger les effets matrices

Coût de la méthode trop important dans le cas d’un screening de

plus d’une dizaine de molécules

Un étalon marqué par famille

Utilisation d’une gamme matrice

Adapté la purification

Dilution de l’extrait

ANALYSE DE MYCOTOXYNES PAR LC-MS/MS


ANALYSE DES PESTICIDES DANS DU THÉ

0,0

20,0

40,0

60,0

80,0

100,0

120,0

Purification CaCl2

Purification GCB

Dopage à la LOQ : 10 µg/kg

Extraction de 2 grammes de thé

Utilisation de différentes méthodes de purification

Dilution de l’extrait avant injection

AMÉLIORATION DES RENDEMENTS / DIMINUTION DES EFFETS MATRICES

http://www.cuisineattitude.com/leblog/wp-content/uploads/2013/03/thé-noir.jpg


RETRAITEMENT DES DONNÉES : CALCUL DES

RENDEMENTS

Calcul des rendements de dopage (multirésidus)

Solution de dopage (étalon / SF) : LC1-2-3-4 SF3

Echantillon Non

Dopé :

Volume de dopage : 0,100 mL Echantillon Dopé :

Masse échantillon dopé : 5,024 g

Limite min ND 2 Limite max ND 20

Molécule Concentration

(ng/mL) Dopage

(µg/kg)

Teneur ND

(µg/kg)

Teneur D

(µg/kg)

Rendement

(%)

Rendement

hors de [70%

; 120%]

Acéphate 997,6 19,86 11,30 56,9 X

Acétamipride 995,4 19,81 17,60 88,8

Aclonifen 1003,2 19,97 18,10 90,6

Alachlor 1002,1 19,95 17,00 85,2

Aldicarbe 997,5 19,85 17,60 88,6

Aldicarbe-Sulfone 997,4 19,85 21,90 110,3

Amitraz 998,2 19,87 12,10 60,9 X

Atrazine 1000,6 19,92 19,40 97,4

Azimphos-Ethyl 1001,1 19,93 17,30 86,8

Azimphos-Methyl 1004,9 20,00 15,50 77,5

Azoxystrobine 994 19,79 20,30 102,6

Benalaxyl 1001,2 19,93 18,40 92,3

Bendiocarbe 997,8 19,86 16,90 85,1

Bifenox 998,6 19,88 14,20 71,4


RETRAITEMENT DES DONNÉES : DÉTERMINATION

DE LA LQ

Rendements exportés le : 26/02/201415:35:38 Matrice : Blé

Volume d'extraction : 10,0 mL LQ limite : 10

Masse la plus petite : 4,950 g (de façon à majorer le calcul des LQ)

Molécule Concentration

LQ (ng/mL)

Accuracy

QC (%)

Rendement

autocontrôle

(%)

LQ

calculée

(µg/kg)

Poivre Blé Thé Baie de

Goji

Acéphate 2,0 81,9 66,5 6,1 Acétamipride 2,0 86,8 96,4 4,0

Aclonifen 4,0 88,4 76,7 8,1 Alachlor 2,0 40 94,0 10,1 X

Aldicarbe 2,0 87,6 95,4 4,0 Aldicarbe-Sulfone 2,0 89,9 101,6 4,0

Fenthion 2,0 48,9 73,9 8,3 Atrazine 2,0 113 91,8 4,0

Azimphos-Ethyl 4,0 81,7 94,4 8,1 Azimphos-Methyl 4,0 73,4 100,0 8,1

Azoxystrobine 2,0 88 100,3 4,0 Benalaxyl 2,0 98,2 90,0 4,0

Bendiocarbe 2,0 93,4 99,8 4,0


RETRAITEMENT DES DONNEES SOUS EXCEL : TENEURS SUPÉRIEURES À 2 PPB

Sample Name Sample TypeSample CommentDilution Factor Analyte Peak Name Analyte Peak AreaCalculated Concentration (µg/kg)Rdt% CV% Détection

2 140321 RN14-05381.001 d20 Unknown riz 40,064 Buprofezine 115,10 93,1 13,6 Positif3 140321 RN14-05381.001 Unknown riz 2,003 Buprofezine 125,63 93,1 13,6 Positif

4 140321 RN14-05442.001 Unknown riz 2 Buprofezine 2,50 93,1 13,65 140321 RN14-05381.001 Unknown riz 2,003 Carbendazime 11,45 91,8 15,0 Positif6 140321 RN14-05442.001 Unknown riz 2 Carbendazime 7,28 91,8 15,07 140321 RN14-05381.001 Unknown riz 2,003 Chlorpyrifos 3,60 99,3 19,9

8 140321 RN14-05625.001 d20 Unknown ble 40,38 Chlorpyrifos-Methyl 205,33 91,2 18,5 Positif

9 140321 RN14-05625.001 Unknown ble 2,019 Chlorpyrifos-Methyl 197,05 91,2 18,5 Positif

10 140321 RN14-05381.001 Unknown riz 2,003 Clothianidin 3,53 100,9 17,3

14 140321 RN14-05442.001 Unknown riz 2 Difenoconazole 8,16 87,9 16,7

15 140321 RN14-05381.001 Unknown riz 2,003 Hexaconazole 7,36 88,5 17,8

16 140321 RN14-05381.001 Unknown riz 2,003 Imidachlopride 10,16 102,5 19,4 Positif

17 140321 RN14-05442.001 Unknown riz 2 Imidachlopride 5,96 102,5 19,4

25 140321 RN14-05424.001 Unknown orge 2,012 Piperonyl Butoxyde 21,53 85,3 19,1 Positif

26 140321 RN14-05625.001 Unknown ble 2,019 Pirimiphos-Methyl 50,77 94,4 17,5 Positif

27 140321 RN14-05381.001 Unknown riz 2,003 Profenophos 10,85 91,0 18,4 Positif

28 140321 RN14-05381.001 Unknown riz 2,003 Propiconazole 66,92 90,3 19,0 Positif

29 140321 RN14-05442.001 Unknown riz 2 Propiconazole 4,33 90,3 19,0

33 140321 RN14-05625.001 Unknown ble 2,019 Terbacil 2,51 92,4 18,6

34 140321 RN14-05381.001 Unknown riz 2,003 Thiamethoxam 15,29 99,0 13,3 Positif

36 140321 RN14-05381.001 Unknown riz 2,003 Triazophos 31,32 98,0 16,6 Positif

37 140321 RN14-05442.001 Unknown riz 2 Triazophos 13,31 98,0 16,6 Positif


CARTE de CONTRÔLE : CV + RENDEMENTS MOYENS

EXIGENCE QUALITÉ, DES RÉSULTATS À

VALEUR AJOUTÉE POUR LE CLIENT:

• Validation des protocoles

analytiques selon l’ISO 17025 • Participation à des essais

interlaboratoires (BIPEA) • Accréditation COFRAC • Accréditation à portée flexible

type B • Etudes BPL (OCDE) • Audit interne au regard du

manuel qualité SGS Multilab

6

LES SERVICES DISPONIBLES POUR

CONTRÔLER ET ANALYSER CES PRODUITS:

• Laboratoire d’analyse et de certification

• Labellisation (Agriculture biologique, Ecolabel …)

But: Prendre en charge la sécurité du consommateur et de l’environnement. Encourager une production plus responsable.

5

POLITIQUES ET RÉGLEMENTATION:

"teneur minimale en analyte dans un échantillon qui doit

être au moins détectée et confirmée"

4

• SANCO (Direction générale de la

santé et de consommateurs)

• Règlement (CE)

• Plan Ecophyto 2018

• REACH (règlement sur

l’enregistrement, l’évaluation,

l’autorisation et les restrictions des

substances chimiques)

• MRLs (EU Pesticides Database)

• Normalisation (ISO)

3

POLITIQUES ET RÉGLEMENTATION:

LES PROBLÉMATIQUES:

Intégrité des produits de consommation et des rejets dans

l’environnement

Mise en conformité vis-à-vis de la réglementation en vigueur

(producteur/transformateur)

Augmentation toujours croissante du nombre de substances

chimiques naturelles ou synthétiques présentant un risque

sanitaire avéré ou suspecté et susceptibles d’être retrouvées

dans notre alimentation

Fraude de composition (Mélamine dans les produits laitiers)

Marketing produit (agriculture biologique, absence bisphenol

A…)

Perception du consommateur (confiance)


Préparation d’une analyse de résidus :

Matrices analysées

Molécules recherchées

Techniques extraction/purification

Injection en HPLC-MS/MS

Principes appareillages

Traitement de données


TECHNIQUES EXTRACTION/PURIFICATION

L'extraction des composés à doser: étape

particulièrement importante

Plusieurs méthodes d’essais existantes en

fonction de la matrice et de la molécule

recherchée

Méthodes en perpétuel développement

pour optimiser les temps de préparation et les

rendements d’extraction



Méthode basée sur la différence de solubilité d’un soluté dans deux phases

non miscibles

En chimie organique, on utilise habituellement une phase aqueuse et une phase

organique

Etape d’agitation importante

Centrifugation pour séparer les deux phases

Recherche de molécules polaire/utilisation de solvants polaires

(Méthanol/Acétonitrile)

Extraction liquide-liquide



Procédé de séparation par adsorption sélective sur une phase solide en

fonction des propriétés physico-chimiques du composé que l’on cherche à extraire

Utilisée pour concentrer et purifier des échantillons avant leur analyse

Extraction en phase solide (SPE: Solid Phase Extraction)



Technique de purification qui implique

l’utilisation d’agents adsorbants

Le composé d’intérêt reste dans le solvant

d’extraction tandis que les autres molécules

(eau, acide gras …) sont adsorbées par le

mix solide.

Différente composition du mix en fonction de

la matrice (riche en eau, en graisse…) PSA/MgSO4

C18

Purification SPE dispersive (dSPE)



Méthode Multirésidus QuEChERS:

(Quick, Easy, Cheap, Effective, Rugged and Safe)

Peser

Centri. 5 min/~3000g

Ajout Sels Agitation 1 min 10 mL ACN

Agitation 1 min

Purification

Prélever 6 mL surnageant





Méthode Multirésidus QuEChERS:

(Quick, Easy, Cheap, Effective, Rugged and Safe)

HPLC-MS/MS

Agitation 1 min D-SPE Centri. 5 min/~3000g

Prélever 4 mL Ajuster ph avec HCOOH



Réponse du détecteur (SM) pas parfaitement

proportionnelle à la concentration de l’analyte

cible

Étalonnage interne: ajout dans les solutions

étalons et échantillons, d’une molécule

servant de référence

Permet de corriger cet écart de linéarité

Quantité parfaitement connue et unique

Ne doit pas se trouver dans l’échantillon

Être distinguable des analytes cibles

Avoir des propriétés physiques et chimiques

proches

Molécule le plus souvent deutérée

Rôle de l’étalon interne

Atrazine D5


INJECTION EN HPLC-MS/MS: PRINCIPES APPAREILLAGES

La spectrométrie de masse couplée à la

chromatographie liquide a été

conceptualisée en 1973 par McLafferty.

Quatre fonction principales:

La quantification

La qualification

La sensibilité

La spécificité

Principe général


Chaines HPLC-MS/MS

Quattro micro API Tandem Quadrupole System

AB SCIEX QTRAP® 5500 LC/MS/MS

4000 QTRAP® LC/MS/MS




Principe général

échantillon HPLC ionisation m/z

séparation fragment

m/z séparation

détection

EI

ESI

MALDI

CID

MS1

Ion

précurseur

MS2

Ion

fragment

APCI

Q1 Q2 Q3


Technique chromatographique la plus utilisée en chimie organique et analytique

Séparation des molécules en fonction de l’hydrophobicité

Rapidité (débit élevé)

Résolution élevée (fine granulométrie de la phase stationnaire entre 2-10 µm)

HPLC : Chromatographie liquide haute pression/haute performance

« haute performance »





Tandem MS type Triple Quadripôles:

Collision cell

Q2 MS1

Q1

MS2

Q3



Utilisation d’un gaz inerte à haute

pression dans le Q2 (Argon, helium…)

CAD: collisionally activated dissociation)

Ou CID: Collision-induced dissociation



Outils informatiques

• Appareillage contrôlé par des logiciels

informatiques:

• Analyst® Software (contrôle des

instruments, batch, analyse des

données, audit de suivi… )

• Chromélion (Contrôle de la HPLC)

• Dionex (éditeur méthodes)



Utilisé comme monomère de résines

époxydes et polycarbonates

Interdit depuis 2010 dans les biberons

Directive UE n°8/2011

1er janvier 2015: tous les contenants

alimentaires destinés aux bébés et femmes

enceintes

Perturbateur endocrinien oestrogèno-

mimétique



ANALYSE DU BISPHÉNOL A DANS LES PLASTIQUES

Aliquotage (5x5 mm)

Pesée de 0,5g

(1g si peu homogène)

Chromopack 20 mL

125 µl EI de prépa (2 µg/mL)

Ajout 2 mL CH2C2

Sertir

Extraction 10 min/40 °C/ultrason

Ajout 2 mL MeOH Filtrer sur Millex

(0,45 µm)

Evaporer à sec sous flux d’N2

Ajout 1,5 mL MeOH + 1 mL d’eau

Agiter et filtrer sur Millex (0,45 µm)

Blanc de préparation et son dopé

Dopage à 20 et 40 ppb

Mise en pillulier:

1000 µL d’échantillon

475 µL de gamme + 50 µL EI à 2

µg/mL + 475 µl d’eau


ANALYSE DU BISPHÉNOL A DANS LES PLASTIQUES

Résultat


ANALYSE DE LA MÉLAMINE DANS LE LAIT EN POUDRE

• Fraude à la mélamine

• Introduite volontairement dans les

aliments pour accroitre de façon

artificielle son taux de protéine

• Adjuvant illégal dans la plupart des pays

• Cause de néphropathies

• Attention portée sur les produits

provenant de Chine

• Utilisée comme retardateur de flamme

dans les plastiques ou comme fertilisant


Pesée de 2g 100 µl EI de prépa

(200 µg/mL) Ajout 20 mL H2O (2%

HCOOH)

Agitation 30 min Centrifugation 5 min/5°C/3500trs/min

Millexer

Blanc de préparation

Dopage à 500 ppb

Mise en pilulier:

1000 µL d’échantillon

900 µL de gamme + 100 µL EI à 1

µg/mL

ANALYSE DE LA MÉLAMINE DANS LE LAIT EN POUDRE



GC/MS/MS & LC/MSMS : CONCLUSIONS

Lors du processus d’analyses, chaque étape est importante et

ne doit pas être négligée.

La qualité de l’analyse est la somme de toutes les étapes. Une

seule phase avec un mauvais rendement rend le résultat nul.

Les nouvelles préparations de type QuEChERS permettent

d’améliorer les performances des analyses. Toutefois cette

méthode a ses limites :

Matrices grasses ou complexes (huiles essentielles).

Certains composés ne sont pas extraits (polaires…) ou sont

bloqués par la purification.

Les solvants employés (Acétonitrile) ne sont pas adaptés à la

technique analytique.



GC/MS/MS & LC/MSMS : CONCLUSIONS

L’utilisation de ces méthodes d’extractions peu sélectives ont

été rendus possibles par l’arrivée sur le marché d’appareils plus

sensibles et plus sélectives (GC/MSMS et UPLC/MSMS).

Au niveau du laboratoire, la technique UPLC/MSMS nous

donne entière satisfaction (robustesse et sensibilité).

Pour la GC/MSMS, l’idéal serait d’avoir un appareil 10 fois plus

sensible pour les matrices type Baby Food ou des molécules

peu sensibles (Endrine – Aldrine…).

Screening LC-MS/MS Antibiotiques

169 molécules dans un extrait de produit carné 2-Amino-5-benzoylbenzimidazole Ceftiofur Erythromycin Leucogentian violet Ormetoprim Sulfamethazine

2-Aminoflubendazole Cephalosporine Etodolac Leucomalachite green Oxacillin Sulfamethizole

2-Hydroxymethyl-1-methyl-5-nitro-imidazol Cephalosporine Febantel Lincomycin Oxfendazole Sulfamethoxazole

2-mercaptobenzimidazole Chloramphenicol Fenbendazole Lomefloxacin Oxfendazole Sulfone Sulfamethoxypyridazine

2-Nitrobenzaldehyde Semicarbazone Chlormadinone acetate Fenbendazole Sulfone Maduramycin Oxibendazole Sulfamonomethoxine

2-NP-AHD Chlortetracycline Fenbendazole Sulfoxide Malachite green Oxolinic Acid Sulfamoxole

2-NP-AMOZ Cinoxacin Florfenicol Marbofloxacin Oxyphenbutazone Sulfanilamide

2-NP-AOZ Ciprofloxacin Florfenicol Amine Mebendazole Oxytetracycline Sulfanitran

2-quinoxalinecarboxylic acid Clindamycin Flubendazole Medroxyprogesterone 17-acetate Penicillin G Sulfaphenazole

6-phenyl-2-thiouracil Clopidol Flumequine Megestrol acetate Penicillin V Sulfapyridine

Acetylgestagene Closantel Flunixin Melengestrol acetate Phenylbutazone Sulfaquinoxaline

Albendazole Cloxacillin Fluorchinolone Metronidazole Ractopamine Sulfasalazine

Albendazole Sulfone Coccidiostat Fluoroquinolone Metronidazole-OH Rafoxanide Sulfathiazole

Albendazole Sulfoxide Danofloxacin Gentian Violet Minocycline Ronidazole Sulfisomidine

Albendazole-2-aminosulfone Dapsone Halofuginone Monensin Roxithromycin Sulfisoxazole

Amoxicillin Decoquinate Hydroxymebendazole Nafcillin Sarafloxacin Sulfonamide

Ampicillin Demeclocycline Hydroxythiabendazole Nalidixic Acid Semduramicin Tetracycline

Amprolium Desethylene Ciprofloxacin Ibuprofen Naproxen Spiramycin Tetramisole

Anti parasite Diaveridine Indomethacin Narasin Sulfabenzamide Thiabendazole

Antibiotic Diclofenac Nicarbazin Sulfacetamide Thiamphenicol

Aprinocid Dicloxacillin Ipronidazole Niclosamide Sulfachloropyridazine Thyrostatica

Bacitracin Difloxacin Ipronidazole-OH Nitrofurane Sulfaclozine Tiamulin

Benzimidazole Dimetridazole Isochlortetracycline Nitromidazole Sulfadiazine Tilmicosin

Brilliant green Dipyrone Josamycin Norfloxacin Sulfadimethoxine Tolfenamic acid

Cambendazole Doxycycline Ketoprofen Novobiocin Sulfadoxine Triclabendazole

Carbadox Enoxacin Ketotriclabendazole NSAID Sulfaguanidine Triclabendazole Sulfone

Cefazolin Enrofloxacin Laidlomycin propionate -Ammonium Ofloxacin Sulfamerazine Triclabendazole Sulfoxide

Cefoperazone epi-Tetracycline Lasalocid Orbifloxacin Sulfameter Trimethoprim

Tylosin


Amoxicillin (50 µg/kg) Doxycycline (50 µg/kg) Nafcillin (50 µg/kg)

Ampicillin (50 µg/kg) Halofuginone (10 µg/kg) Narasin (100 µg/kg) Sulfadiazine (50 µg/kg)

Chloramphenicol (0.3

µg/kg) Lasalocid (100 µg/kg) Oxacillin (50 µg/kg) Sulfadimethoxine (50 µg/kg)

Chlortetracycline (50 µg/kg) Leucomalachite green (1 µg/kg)

Oxytetracycline (50

µg/kg) Sulfadoxine (50 µg/kg)

Cloxacillin (50 µg/kg) Maduramycin (10 µg/kg) Penicillin G (50 µg/kg) Sulfamethoxypyridazine (50 µg/kg)

Demeclocycline (50 µg/kg) Malachite green (1 µg/kg) Penicillin V (50 µg/kg) Tetracycline (50 µg/kg)

Dicloxacillin (50 µg/kg) Monensin (100 µg/kg) Salinomycin (50 µg/kg)

MULTI RÉSIDUS ANTIBIOTIQUES DEVELOPPÉS À

SGS MULTILAB Rouen

- Technique performante en LC/MS/MS, prix de revient : très dépendant du

nombre d’échantillons, du prix des étalons, de la méthodologie utilisée (screening

ou quantification)

-4 Familles : Pénicillines, Anticoccidiens, Tétracyclines, Sulfamides

77 © SGS Multilab Rouen, Yvon Gervaise – ADRIA – Colloque fraudes alimentaires- 06/11/2014 - RENNES © SGS Multilab Rouen

AUTHENTIFICATION MÉTHODE ISOTOPIQUE ET

ISOTOPE STABLE ET INSTABLE

MESURE ÉMISSION RADIOACTIVITÉ

-Détermination origine naturelle

-Authentification du cru d’un vin

- Vérification allégation produit naturel :

o arôme,

o colorant,

o…

- Authentification

o matière première

o produit brut

o produit fini


AUTHENTIFICATION DU CRU D’UN VIN

Mesure de la radioactivité

Contrôle non destructif :

– Bouteille fermée

– Quantité intacte

Datation de la bouteille

Datation du vin


AUTHENTIFICATION DU CRU D’UN VIN :

PRINCIPE


AUTHENTIFICATION DE L’ORIGINE :

ANALYSE DES ISOTOPES STABLES

QUANTIFICATION MULTI-métaux lourds

dans les produits alimentaires par icp-MS

LE CONTRÔLE NOUVEAU DES

MÉTAUX LOURDS EST ARRIVÉ


ANALYSES MULTI-MÉTAUX LOURDS ET

CONTEXTE NORMATIF DU DÉVELOPPEMENT

ANALYTIQUE ET EXIGENCES - Mode de minéralisation

- Mode de quantification

L’analyse multi-métaux en deux normes: La minéralisation,

NF EN 13805, l’analyse, NF EN 15763

Pourquoi valider ? s’appuyer sur un plan d’expériences

afin de s’assurer de la justesse de notre analyse, de

pouvoir rendre des limites de quantification toujours de

plus en plus basses, et de pouvoir étendre le domaine

d’application (le nombre d’éléments et d’autres matrices

au-delà de la norme.

Être reconnu par le Comité Français d’Accréditation


MODE DE MINÉRALISATION

Broyage /

Homogénéisation

Reprise du minéralisat/

dilution

Préparation

(ne garder que la partie comestible)

Pesée dans un tube 0.3-

0.5g + 3mL HNO3

Chauffage micro-ondes

fermé Ultrawave 15mn

Quantification et Analyse des éléments en un

run en ICP-MS

Céréales, légumes et fruits , produits diététiques et de régime produits riches en huile ( graines

oléagineuses), Produits laitiers ( fromage, lait), produits d’origine animales (poissons, matières

grasses, produits de la pêche) , aliments pour animaux ( farine de poissons, aliments composés…)

huile de poissons huiles végétales


RÉSULTAT DE L’INNOVATION

précise et robuste : nécessaire pour les mesures de

métaux lourds dans les aliments afin d'assurer la

conformité aux règlements.

ICP-MS élémentaire et isotopique offre la possibilité

d'analyser toute une série d'éléments dans un même

essai,

Gain de productivité (coût et temps): fiabilité et rapidité

du résultat permettant un relais plus rapide auprès du

fabricant, de l’importateur, du consommateur


INNOVATION ANALYTIQUE : UNE NOUVELLE APPROCHE

PLUS PERFORMANTE

VALEUR AJOUTÉE POUR LE LABORATOIRE ET LE CLIENT

La technologie permet aux laboratoires de sécurité

alimentaire afin d'améliorer sensiblement leur

productivité, avec plus de 50 échantillons analysés par

heure.

Autres avantages importants de l'ICP-MS comprenant une

sensibilité accrue, un rapport signal sur bruit élevé et la

flexibilité d'analyser n'importe quel élément du tableau

périodique.

La méthode offre de beaucoup plus faibles limites de

détection par rapport à l’absorption atomique en four

graphite (GFAA) et inductif spectrométrie d'émission

optique à plasma (ICP-OES) tout en produisant moins

d'interférences que ICP-OES.


Pesée de l’échantillon

Hydrolyse enzymatique

B12 Enzyme : pepsine et/ou α-

amylase Bain 37°C-30min Bain 100°C-30 min

B9/B8 Enzyme : pancréatine Bain 37°C-30min Bain 100°C- {20 min B9

{30 min B8

B5 Enzyme : pepsine et phosphatase alcaline Bain 50°C-3h Bain 20°C-18h

Purification sur colonnes immunoenzymatiques spécifiques

Purification sur cartouches échangeuses d’anions et de cations

B12

Eluant : TFA 0.025% Détection : HPLC/UV 361 nm Colonne Ascentis C18 Vinjecté: 100µL

B9

Eluant : TFA 0.1% Détection : HPLC/UV 280 nm Colonne Aquasil C18 four 37 °C Vinjecté: 100µL

B8

Eluant : TFA 0.025%/CH3CN (90/10) Détection : HPLC/UV 204 nm Colonne Nucleoshell RP 18,2,7 µm Four 37°C Vinjecté: 100µL

B5

Eluant : tampon KH2PO4 + Eluant de dérivation post-colonne Détection : HPLC/FLUO

Ex : 345 nm/Em :455 nm Colonne Lichrospher 100RP18 end capped 5µm Four 90°C Vinjecté: 100µL

QUALITÉ ALIMENTAIRE

PROFIL NUTRITIONNEL INNOVATION ANALYTIQUE

DOSAGE MULTI-VITAMINES


GESTION D’ALERTE – INNOVATION VERS UNE

NOUVELLE MÉTHODE

Arsenic dans les boissons et aliment : le cas du riz

Méthode classique : mesure As total

As minéral, As organique ?

Spéciation méthode appliquée aux matrices riz, produits à

base de riz, jus de fruits

IC-ICP/MS : Chromatographie ionique couplée à la détection

ICP/MS

Implication de l’AOAC

Importance de la spéciation pour une mesure pertinente

de l’exposition de la population


Règlement européen n° 10/2011 du 14 janvier qui définit la limite

de migration spécifique pour les matériaux en contact

Phtalates : plastifiant, souplesse, PVC, Epoxy, PGT

Boissons alcoolisées, utilisation de nombreuses matières

plastiques : cuves, revêtement, tuyaux, transport

Phtalates solubles dans ETOH

Les seuils maximaux admis pour les phtalates dans les vins et

spiritueux sont les suivants :

0,3 mg/kg pour DBP

1,5 mg/kg pour DEHP

9 mg/kg pour DINP/DIDP

30 mg/kg pour BBP

Méthodes et technologie GC/MS conforme à la recommandation

OIV n° 477-2013 et 521-2013

PHTALATES DANS LES BOISSONS ALCOOLISÉES

ET DOSAGE GC/MS


CONCLUSION

Besoin qualité, sécurité, authenticité des produits

L’innovation en méthodologie d’analyses déterminé par de

nouvelles approches

Méthodes multi-analyte développée à SGS MULTILAB

Multi-résidus pesticides

Multi mycotoxines

Multi résidus médicamenteux

Multi métaux lourds

Optimisation des plans de contrôles en réponse aux

exigences de nos clients

PRÉOCCUPATION

INNOVATION

SOLUTION

OPTIMISATION


DÉVELOPPEMENT PRESTATION ANALYTIQUE Innovation réalisée sous la contrainte

Résolution de problématique des plans de contrôles

Suivi de la mise sur le marché : service à plus haute valeur

ajoutée

-> Suivi de l’usage qu’en feront nos clients par rapport à leurs

besoins

Derrière toute méthode il y a une philosophie

Ces innovations analytiques déterminent l’augmentation de la

valeur ajoutée des services et prestations de notre laboratoire

pour nos clients

CONCLUSION


Innovation et création espace numérique

du laboratoire interaction avec ses clients

et veille technique, scientifique et

réglementaire

https://mobile.twitter.com/expertscience/st

atus/483882987285917696

13 janvier 2015 : INNOVATION AU

LABORATOIRE

Inauguration de l’extension du laboratoire

EN SAVOIR PLUS… POUR INFORMATION

https://mobile.twitter.com/expertscience/status/483882987285917696





Yvon GERVAISE

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Directeur, SGS Multilab Rouen

65 rue Ettore Bugatti - BP 90014 –

76801 Saint Etienne du Rouvray

t 02 35 07 91 80 f 02 35 07 91 25

Merci de votre attention

Les conférences

et interventions

du labo

Vidéo du

laboratoire

Journal

collaboratif

© SGS Multilab Rouen, Yvon Gervaise – Secur’Food – 14/10/2014


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