1. Carcinogense hpatique dorigine virale science et dpistage Pr. Olivier Rosmorduc Service dHpatologie Ple dHpato-Gastroentrologie UMR_S 938 CDR St-Antoine Hpital Saint-Antoine Paris

2. 0 1 2 3 4 5 40 30 20 10 0 0 1 2 3 4 5 annes annes HCV (Japon) HCV (Europe and US) HBV ( Taiwan et Singapour) HBV (Europe) Hmochromatose Alcool CBP % Incidence du CHC (%) Incidence Cancer primitif du foie en Europe en fonction de ltiologie 40 30 20 10 0

3. Rsultats du dpistage du CHC

4. Intrt du dpistage du CHC: tude randomise

• Etude randomise

• 18816 patients VHB+ (sans cirrhose)

• chographie + FP / 6 mois pendant 5 ans

• Compliance = 60 %

• Baisse de la mortalit par CHC de 37 %

Zhang, J Cancer Res Clin Oncol 2004

5. Priodicit optimale : 3 vs 6 mois ?

• 1200 malades avec cirrhose Child A ou B randomiss

• Echographie hpatique /6 mois ou /3 mois

• Dtection de lsions dans le groupe 3 mois: 41 vs 36 %

• Incidence des CHC 5 ans : 6.7 vs 7.8 % (p = 0.74)

• Survie identique 5 ans

Trinchet, Hepatology 2011

6. Le dpistage semestriel amliore la survie par rapport au dpistage annuel Santi, J Hepatol 2010

7. Alcool VHB VHC Hpatite chronique Cirrhose Cancer du foie Carcinognes chimiques Prdisposition gntique Facteurs hormonaux aflatoxine B1 nitrosamine hmochromatose tyrosinmie strognes andrognes Facteurs mtaboliques obsit diabte

8. Virus de lhpatite B

9. Organisation gntique du VHB

10. Evolution des infections chroniques VHB

11. Hpatocarcinome et VHB

• CHC AgHBs + AgHBs -

• Asie 80 % Asie 20 %

• Prvalence Afrique 60 % Afrique 20 %

• Europe/USA 10-20 % Europe/USA 80-90 %

• ADN du VHB 90 % 50 - 60 %

• dans les tumeurs 1-10 copies/cell. 1 copie/10-100 cell.

• Association

• au VHC faible 10 % forte 40 - 90 %

12. Incidence du CHC en fonction du status srologique VHB Yang, N Engl J Med, 2002 Marqueurs VHB Sujets CHC Incidence (cas/10 5 -an) AgHBs ngatif AgHBe ngatif 9532 29 39,1 (26,2-56,1) AgHBs positif AgHBe ngatif 1991 50 324.3 (240,7-427,5) AgHBs positif AgHBe positif 370 32 1169,4 (799,9-1650,9)

13. Incidence du CHC en fonction de la rplication virale B Chen, JAMA 2006 3653 patients Ag HBs + Incidence du CHC % Annes >10 6 10 5- 10 6 10 4- 10 5 300 - 10 4 < 300 Copies/ml 2925 patients Ag HBe- Alat N Absence de cirrhose (6 mois)

14. Incidence du CHC en fonction de lvolution de la virmie B et des transaminases Chen, Gastroenterology 2011 Eleves Fluctuantes Normales Ht Normales Bas Diminution 10 6 - 10 7 Persistance > 10 7 Diminution 10 5 - 10 6 Diminution < 10 4 ou Persistance 10 4 10 5 Incidence du CHC Incidence du CHC

15. Incidence du CHC chez les patients poteur inactifs du VHB Chen, Gastroenterology 2010 Porteurs inactifs 0.06 % / an Contrles 0.02 % / an ADN VHB Incidence 10 5 par an < 300 copies/ml 56 300-10 4 Copies/ml 71

16. Influence du gnotype sur lvolution de lhpatite Lin, J Gastroenterol Hepatol 2011

17. Influence de la vaccination sur lincidence du carcinome hpatocellulaire chez les enfants de 6 14 ans Ta iwan * Campagne massive de vaccination des nouveau-ns partir de 1984 Chang, JAMA 2000 Anne du diagnostic Incidence globale Incidence garons Incidence fille 1981-1984* 0,67 1,08 0,24 1984-1990 0,61 0,87 0,32 1990-1996 0,26 0,49 0,26

18. Prvention du CHC par linterfron chez les patients cirrhotiques AgHBe + Lin, J Hepatol 2007 Incidence du CHC: 12,5 vs 2,7 % ns

19. Effet de la Lamivudine sur lincidence du CHC chez les patients AgHBe + Liaw, N Engl J Med, 2004 Placebo Lamivudine

20. Incidence du CHC chez les patients sous analogues pour hpatite chronique B Papatheodoridis, J Hepato 2010

21. Carcinognse hpatique lie au VHB VHB CAH Cirrhose Facteur de croissance (IGF-II) Oncognes Rarrangements chromosomiques Effets directs 1) Mutagense insertionnelle 2) Transactivation 3) Rarrangements chromosomiques VHB Oncogne ADN cellulaire ADN cellulaire ADN VHB Protine X PreS 2 /S dlte X CANCER DU FOIE (11p, 4q, 17p, 1)

22. ADN du VHB dans le gne de la cycline A Daprs Wang, Nature, 1990

23. Multiples intgrations de lADN du VHB dans le gnome tumoral Murakami, Gut 2005 hHERT IRF2 MUC16 PDGFRB MGMT MLL2 SERCA1

24. Stress oxydatif et inhibition de la rparation de lADN augmentent lapoptose et le nombre de sites intgration du VHB Dandri, Hepatology 2002 Apoptose Tmoins H2O2 3AB Sites dintgration VHB sous H2O2 et 3AB

25. Altrations gntiques associes au Carcinome Hpatocellulaire Instabilit chromosomique Infection VHB Aucune LOH spcifique LOH 9p, 6q Mutation de P53 LOH 13q Mutations de laxine1 LOH 1p, 4q, 16p, 16q Stabilit chromosomique Mutation de la -catnine LOH 8p Peu diffrenti Mauvais pronostic Pas dinfection VHB Volumineuse tumeur Laurent-Puig, Gastroenterology 2001

26. Classification des CHC par analyse du transcriptome Boyault, Hepatology 2007

27. Modles animaux de CHC : la marmotte

• 100 % des animaux infects la naissance dveloppent un CHC

• 50 % des tumeurs prsentent une insertion virale dans la famille myc

• 100 % des souris transgniques exprimant myc sous contrle du WHV dveloppent un CHC

Fourel, Nature, 1990 Etiemble, Oncogene, 1994

28.

29. Squences transactivatrices HBx et prS/S et CHC

• 60 80 % des squences VHB intgres codant pour HBx et/ou prS/S.

• Accumulation slective des transcrits codant pour HBx dans les CHC.

• Squences intgres codant pour HBx frquemment tronques ou mutes dans les CHC.

• Rle de ces mutations HBx dans la transformation ?

Schluter, Oncogene, 1994 Paterlini, Hepatology, 1995 Hsia, BBRC, 1997

30. Effet des mutations du promoteur de capside (rgion HBx) sur la dgradation de p21 et sur la prolifration cellulaire Huang, Gastroenterology 2011 A1762T/G1764A Combo TA WT

31. Souris transgniques et HBx

• Dveloppement dadnomes et de carcinome hpatocellulaire sans ncrose, ni inflammation.

• Inactivation fonctionnelle de p53 in vivo.

• Augmentation de la sensibilit des carcinognes chimiques.

Kim, Nature, 1991 Koike, Hepatology, 1994 Ueda, Nature Genet, 1995 Slagle, Mol. Carcinog., 1996

32. Effet mutagne de laflatoxine B1

33. VHB et carcinognes chimiques

• Augmentation du nombre, de la taille ou de la vitesse dapparition des tumeurs chez les souris transgniques prS/S ou HBx traites par DEN ou Aflatoxine B1.

• Anomalies de la rparation de lADN cellulaire au cours des cirrhoses B :

• • Squestration de lalkyl-guanine-ADN-alkyltransfrase

• • Diminution de O 6 mthyl-guanine-ADN-mthyltransfrase

Sell, Cancer Res, 1991 Slagle, Mol. Carcinog., 1996 Lee, Hepatology, 1996 Collier, J. Hepatol, 1996

34. VHB, VHC, alcool Inflammation, ncrose Rgnration prolifration cellulaire Mutagnse de lADN cellulaire Cancer du foie Carcinognes chimiques (Aflatoxine B1) Facteurs gntiques - p53 - Rb VHB - X / p53 - cis activation - trans activation - rarrangements chromosomiques

35. Organisation gntique du VHC

36. Prvalence des anti-VHC et CHC

• Anti-VHC + Patients CHC (%) Population gnrale (%)

• France 20 - 58 0,3 - 0,5

• Italie 58 - 76 0,8 - 1

• Espagne 6 - 75 0,8 - 1

• Portugal 42 0,5 - 1

• Etats-Unis 29 - 50 0,5 - 1

• Japon 70 - 80 1,5

• Asie du SE 6 - 55 ND

• Mozambique 10 1

• Afrique du Sud 30 1

37. Le traitement dentretien par Interfron ne prvient pas la survenue du CHC Lok, Gastroenterology, 2008 Fartoux, Clin Gastroenterol Hepatol, 2007 Cardosa, EASL 2010 Etude HALT-C

38. Alcool VHB VHC Hpatite chronique Cirrhose Cancer du foie Carcinognes chimiques Prdisposition gntique Facteurs hormonaux aflatoxine B1 nitrosamine hmochromatose tyrosinmie strognes andrognes Facteurs mtaboliques obsit diabte

39. Rle direct du VHC dans la carcinognse hpatique Capside Transactivation (fos, myc, INF Trans-suppression (p53) Transformation Apoptose ROS NS3 Transformation Phosphorylation histones Transduction du signal NS5A Domaine transactivateur PKR Apoptose; ROS Transformation CHC E1-E2 Stress du reticulum endoplasmique NS4B Rseau membranaire (Rafts)

40. CORE Oncognique in vitro (3T3) Coopration avec Ras Oncognique in vivp Statose Adnome Hpatocarcinome

• Liaison lipoprotines

• Rcepteur TNF

• Rcepteur lymphotox.B

Transactivation Fas/Myc/INF VHB Apoptose: Fas-dpendante Stress oxidatif Mitochondrial et RE p53 P21/WAF Smad3/TGF Mismatch repair genes

• Fonction p53

• DNA binding

• Activit transcription

Activation voies transduction [NF B-AP-1-SRE] Apoptose (TNF) Moriya, Nat. Med., 1998; Kato, Hepatology, 2000 Tai, Hepatology, 2000; Otsuda, J. Biol. Chem., 2000 Korenaga, J Biol Chem 2005; Pavio, Oncogene 2005 + + - -

41. Activation dlments de rponse enhancer par les protines du VHC Kato, Hepatology, 2000

42. NS5A Domaine C terminal transactivateur Apoptose induite par TNF PKR eIF 2 Blocage traduction Rsistance interfron Persistance virale (chappement apoptose induite par ds RNA Transformation (perte du contrle du cycle cellulaire) Chung, Mol Cells, 1997 Gale, J. Virol., 1999 Ghosh, Virus Res., 2000 - - P - -

43. Gense dun stress oxydatif du RE

44. Effet des protines du VHC sur la survie cellulaire Expression des genes du VHC (rplicon) Stress oxidatif / ROS (mitochondrie) Activation de NF-kB COX-2 / PGE2 PI-3 kinase / phosphorylation de Akt Survie cellulaire PG rcepteur coupl une Protine G Rplication VHC celecoxib Waris, J Virol 2005

45. Stimulation de Cox-2 par un rplicon subgnomique du VHC Waris, J Virol 2005 Transfection transitoire Transfection stable

46. Core et NS5A CHC Stress oxydatif Inflammation Stress oxydatif Transduction du signal VHC Raction immune

47. Modles animaux VHC

• Souris transgniques capside

• • Statose

• • Adnome

• • Carcinome hpatocellulaire

• Souris transgniques capside et E1-E2

• • Aucune lsion histologique

• • Hepatite

• Souris transgniques NS5A

• • Aucune lsion histologique

Moriya, Nat. Med., 1998 Moriya, Cancer Res 2001 Kawamura, Hepatology 1997 Majumder, Febs Letter 2003

48. Induction de cytokines TNF et IL-1 Activation des MAPK et AP1 Stress oxydatif ROS sans inflammation Synergie core et alcool Interaction core RXR et PPAR Rsistance linsuline Statose par inhibition de MTTP Inhibition des SOCS-1 Interaction avec lactivateur du protasome PA28 Core

49. Moriya, Cancer Research 2001 lysosomes lipofuschine Tmoins Transgnique Transgnique Stress oxydatif dans le modle de souris transgnique exprimant la protine core du VHC

50. Stress oxydatif dans le modle de souris transgnique exprimant la protine core du VHC Moriya, Cancer Research 2001 Alcool CCl4 +

51. Localisation mitochondriale de la protine core et inhibition du transport des lectrons Korenaga, J Biol Chem 2005

52. Kim, Hepatology 2004 VHB, VHD et VHC

53. Machida, PNAS 2004

54. Coinfections et CHC

• Rplication faible du VHB et du VHC

• Effet inhibiteur de la capside du VHC sur lencapsidation du VHB

• Effet synergique sur la carcinognse hpatique des coinfections (VHB, VHC, VHD, VIH)

Pontisso, Gastroenterology, 1993 Shih, J. Virol., 1993 Tsai, Br J. Cancer, 1997 Donato, Int. J. Cancer, 1998

55. Agression tissulaire Inflammation ncrose Rgnration prolifration cellulaire Mutagnse de lADN cellulaire Cancer (p53, Rb, -catnine) VHB (Virus, alcool, fer) (COX2, NF B, TNFa, Radicaux libres) (EGF, TGF , IL 6, TNF ) Carcinognes chimiques VHC Fer X X X X