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RSérodiagnostic de l’Echinococcose

(Par hémagglutination passive)

Par : S / Abdessemed

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Généralités

L'échinococcose humaine est une maladie parasitaire provoquée par des ténias du genre Echinococcus. Ses deux formes principales sont l'échinococcose cystique (hydatidose) et l'échinococcose alvéolaire.

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L'infestation de l'homme se fait par l'ingestion d'œufs de parasites présents dans les aliments, l'eau ou la terre, ou par le contact direct avec les animaux hôtes.

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Le traitement, souvent coûteux et complexe, peut nécessiter une intervention chirurgicale lourde et/ou une chimiothérapie prolongée.

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Les programmes de prévention portent sur la vermifugation du chien, l'amélioration de l'hygiène des abattoirs et les campagnes de sensibilisation du grand public.

La vaccination du mouton, actuellement à l'étude, pourrait compléter ces interventions.

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• L'OMS va valider d'ici à 2018 une série de stratégies efficaces de lutte contre l'échinococcose cystique.

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(Par hémagglutination passive)

Sérodiagnostic de l’Echinococcose

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Principe

Des hématies de mouton stabilisées par la glutaraldéhyde et sensibilisées par un extrait de liquide hydatique de mouton sont agglutinées lorsqu’elles sont mises en présence de dilutions de sérums contenant les anticorps homologues.

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Réactifs

Conservation à 2-8 C jusqu’à la date de péremption indiquée sur le coffret.Réactif 1 : hématies sensibilisées à 0.5% Réactif 2 : hématies témoin à 0.5% Réactif 3 : hématies pour absorption à 20%Réactif 4 : PBS (phosphate buffered saline

0.15 mol/l)Réactif 5 : sérum témoin positif (lapin)

lyophiliséRéactif 6 : sérum témoin négatif (lapin)

lyophilisé

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Matériel

Diluteur permettant d’effectuer les dilutions de sérum sous un volume de 50µl

Plaques pour microtitration

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Mode opératoire

N° des cupules

1 2 3 4 5 6 7 8

Dilutions

sériques

Sérum

témoin

1/100 1/200 1/400 1/800 1/1600 1/3200 1/6400

PBS (R4)

Sérum (1/100)

Hématies tests

Hématiestémoin

s

50

50

---

50

50

50

---

50

50

50

---

50

50

50

---

50

50

50

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50

50

50

---

50

50

50

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50

50

50

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Diluer les sérums à tester et les sérums témoins au 1/100 en PBS Répartir en µl :

Homogénéiser. Laisser reposer 2 heures à la température du Laboratoire

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Lecture

témoin sérum : sédimentation des hématies.

réaction positive : hémagglutinationavec voile d’hématies tapissant au moins la moitié de la cupule.

Le titre est l’inverse de la dernière dilution présentant une telle hémagglutination .

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Remarque :

On doit retrouver le titre de sérum témoin positif indiqué sur l’étiquette

(à -/+ 1 dilution )

En cas d’agglutination du témoin sérum (cupule n° 1) il est nécessaire de recommencer la réaction après avoir absorbé les agglutinines naturelles :

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Technique d’absorption :

Sérum : 50 µl.

Hématies pour absorption (R3) : 5 gouttes (soit 250µl)

Agiter et laisser deux heures à la température du laboratoire.

Aprés centrifugation, décanter le surnageant (= dilution au 1/5 du sérum).

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Interprétation :

Cette réaction est quantitative : la positivité de la réaction à la dilution du 1/100 du sérum peut évoquer une échinococcose ( hydatidose –échinicoccose alvéolaire).

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Cependant, en raison des réactions croisées existant avec d’autres parasitoses, la spécificité de l’infection devra être confirmée par une réaction qualitative du type coélectrosynérèse ou immunoélectrophorèse.

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