Biosécuritéen Pisciculture Marine · Biosécuritéen Pisciculture Marine Cas du nodavirus. Title:...

JournJournéée SFAM 2016e SFAM 2016

David Piquemal, Montpellier

Biosécurité en Pisciculture Marine

Cas du nodavirus

Constats actuels sur les ressources en poisson

Augmentation de la consommation mondiale de poisson

� En mer et océansDiminution des stocks

� ElevageDéveloppement des méthodes de production intensive

Emergence de maladies liées au stress, à la

nourriture…

Introduction d’une démarche

de Biosécurité

� Virus à ARN simple brin mesurant 25 à 40 nm de

diamètre.

� Famille Nodaviridae

� A l’origine de la Nécrose Nerveuse Virale (NNV)

� Perte d’appétit, léthargie, incoordination motrice, désorientation,

hyperexcitabilité, gonflement de la vessie gazeuse, coloration

noire du poisson

� Infection rapide � mortalité très élevée chez les alevins

� Existence de porteurs sains / asymptomatiques (Immuno. positif)

Symptômes

Cas du Nodavirus

Cas de … Gilles BREUIL2008

Mise au point d’un outil de détection du Nodavirus

Besoins identifiés

� Sensibilité & Reproductibilité inter-laboratoires

� Spécificité poisson/hôte, localisation géographique

� Rapidité d’obtention du résultat

� Stabilité pour le transport

� Facilité d’utilisation

� Facilité d’interprétation

� Nécessitant peu de matériel de laboratoire

Spécificité avec

amorces PCR

Hybridation

spécifique

Principe du test

ARN viralPas d’ARN viral

RT-PCR

Dénaturation

Hybridation sur membrane

miniarray "prête à l’emploi"

Révélation colorimétrique

� Ombrine

� Paraha peue (Platax)

� Cobia

� Lates (bar tropical)

Poissons analysés

Tissus ciblés

Les échantillons DROM

� Ovocyte/Sperme

☺ Nageoire

� Branchie

� Tégument

☺ Œuf (ponte)

☺ Larve

� Cerveau

� Gonade

Le kit NODA virus

Le kit NODA virus : prélèvement

3mm3

Le kit NODA virus : prélèvement

RNAlaterThermo, Ambio,

Qiagen, Maison …

0,5ml +4°C

Réunion Mayotte Martinique Polynésie Française

Sciaenops ocellatus

Ombrine

Rachycentron canadum

Cobia

Platax orbicularis

Paraha peue

De L’Outre-Mer …

… aux côtes françaises

Dicentrarchus labrax

Loup / Bar

Epinephelus marginatus

mérou brun

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David Piquemal, Montpellier

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Cas du nodavirus