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JournJournéée SFAM 2016e SFAM 2016
David Piquemal, Montpellier
Biosécurité en Pisciculture Marine
Cas du nodavirus
Constats actuels sur les ressources en poisson
Augmentation de la consommation mondiale de poisson
� En mer et océansDiminution des stocks
� ElevageDéveloppement des méthodes de production intensive
Emergence de maladies liées au stress, à la
nourriture…
Introduction d’une démarche
de Biosécurité
� Virus à ARN simple brin mesurant 25 à 40 nm de
diamètre.
� Famille Nodaviridae
� A l’origine de la Nécrose Nerveuse Virale (NNV)
� Perte d’appétit, léthargie, incoordination motrice, désorientation,
hyperexcitabilité, gonflement de la vessie gazeuse, coloration
noire du poisson
� Infection rapide � mortalité très élevée chez les alevins
� Existence de porteurs sains / asymptomatiques (Immuno. positif)
Symptômes
Cas du Nodavirus
Cas de … Gilles BREUIL2008
Mise au point d’un outil de détection du Nodavirus
Besoins identifiés
� Sensibilité & Reproductibilité inter-laboratoires
� Spécificité poisson/hôte, localisation géographique
� Rapidité d’obtention du résultat
� Stabilité pour le transport
� Facilité d’utilisation
� Facilité d’interprétation
� Nécessitant peu de matériel de laboratoire
Spécificité avec
amorces PCR
Hybridation
spécifique
Principe du test
ARN viralPas d’ARN viral
RT-PCR
Dénaturation
Hybridation sur membrane
miniarray "prête à l’emploi"
Révélation colorimétrique
� Ombrine
� Paraha peue (Platax)
� Cobia
� Lates (bar tropical)
Poissons analysés
Tissus ciblés
Les échantillons DROM
� Ovocyte/Sperme
☺ Nageoire
� Branchie
� Tégument
☺ Œuf (ponte)
☺ Larve
� Cerveau
� Gonade
Le kit NODA virus
Le kit NODA virus : prélèvement
3mm3
Le kit NODA virus : prélèvement
RNAlaterThermo, Ambio,
Qiagen, Maison …
0,5ml +4°C
Réunion Mayotte Martinique Polynésie Française
Sciaenops ocellatus
Ombrine
Rachycentron canadum
Cobia
Platax orbicularis
Paraha peue
De L’Outre-Mer …
… aux côtes françaises
Dicentrarchus labrax
Loup / Bar
Epinephelus marginatus
mérou brun
JournJournéée SFAM 2016e SFAM 2016
David Piquemal, Montpellier
Biosécurité en Pisciculture Marine
Cas du nodavirus