LA RECHERCHE DANTICORPS ANTI-ERYTHROCYTAIRES J. Gargouri, CRTS – Sfax

LA RECHERCHE D’ANTICORPS LA RECHERCHE D’ANTICORPS ANTI-ERYTHROCYTAIRESANTI-ERYTHROCYTAIRES

J. Gargouri, CRTS – Sfax

INTRODUCTION 

Intérêt du sang et de ses dérivés en médecine :

Sauvegarde de vie : "sang source de vie",

Amélioration de la qualité de vie,

Action pour le bien être social,

Autorisation d’actes et gestes de soins intensifs/

transplantations et greffes.

Risques multiples +++

SECURITE IMMUNO-HEMATOLOGIQUE

Objectifs :

Eviter la rencontre Ag-Ac chez le receveur,

Prévenir toute immunisation aux Ag érythrocytaires.

Moyens :

GS ABO et Rh,

Phénotypage,

RAI,

Test de compatibilité au laboratoire,

EULM,

Fiche transfusionnelle.

DEUX APPROCHES DE PREVENTION DES AC ANTI-

ERYTHROCYTAIRES

choisit la RAI avant toute transfusion.

recherche d’Ac dans le sérum du patient au moyen d’un

panel.

permet de préciser le type d’anticorps choisir les

phénotypes des CGR à distribuer.

n’évite pas l’immunisation.

1/- l’approche européenne

DEUX APPROCHES DE PREVENTION DES AC ANTI-

ERYTHROCYTAIRES

privilégie le test de compatibilité au laboratoire avant toute

distribution de CGR.

recherche d’Ac personnalisée.

la seule réponse est : poche compatible ou pas incapable

de préciser le type d’anticorps en cas d’incompatibilité.

n’évite pas l’immunisation.

* Cas de la Tunisie.

2/- l’approche anglo-saxone*

REALISATION DES RAI

4 exigences :

Un bon panel.

Un éventail de techniques.

Une bonne technique de Coombs indirect.

Le bon moment.

UN BON PANEL

permettant de mettre en évidence les Ac les plus dangereux :

choix de la composition antigénique +++

plusieurs pays ont défini les Ag qui doivent en faire partie

(circulaire 49/05).

plusieurs types de panels :

dépistage : 2-4 hématies comportant les Ag suivants : D, C, c, E, e,

K, k, Fya, Fyb, Jka, Jkb, Lea, Leb, M, N, S, s, P1, Lua, Lub.

réponse : présence ou absence d’Ac contre les Ag décrits.

UN BON PANEL

PANEL DE G.R Lot N° : 161 Négatif : 0 Exp. Le 15/11/09 Positif : +

: Panel de dépistage Faible : W ++++0+

N°

Rhésus

Kell

Duffy

Kidd

Lewis

MNS

P

Luth.

G.R D C c E e Kell k Fya Fyb Jka Jkb Lea Leb M N S s P1 Lua Lub

1 + 0 + 0 + + + 0 + 0 + 0 + 0 0 + + 0 +

2 + + 0 0 + 0 0 + 0 + 0 + 0 + + + + 0 +

3 + 0 + + 0 0 + 0 + + 0 + 0 + 0 + + 0 +

4 + + + 0 + + + 0 + + + 0 0 + 0 + + + +

5 + + + + 0 0 0 + + + 0 0 0 + + + + 0 +

6 + + 0 0 + + 0 + + + + 0 0 + 0 + 0 0 +

7 0 0 + 0 + + + + 0 + 0 + 0 + 0 + + 0 +

8 0 + + 0 + 0 0 + + + 0 0 + 0 0 + + 0 +

9 0 + + 0 + 0 + + 0 + + 0 + + + 0 + 0 +

10 0 0 + 0 + 0 0 0 + 0 0 0 0 + 0 + 0 0 +

11 0 0 + 0 + 0 + + 0 + 0 + + 0 + 0 + 0 +

12 0 0 + 0 + 0 0 + + 0 0 + 0 + 0 + + 0 +

UN BON PANEL

permettant de mettre en évidence les Ac les plus dangereux : choix de la composition antigénique +++

plusieurs pays ont défini les Ag qui doivent en faire partie (circulaire 49/05).

plusieurs types de panels : dépistage

identification : - 10 hématies ou plus.

- mêmes Ag.

- donne la spécificité de l’Ac.

- validation statistique !!!

UN BON PANELPANEL DE G.R

Lot N° : 161 Négatif : 0 Exp. Le 15/11/09 Positif : +

N°

Rhésus

Kell

Duffy

Kidd

Lewis

MNS

P

Luth.

G.R D C c E e Kell k Fya Fyb Jka Jkb Lea Leb M N S s P1 Lua Lub

1 + 0 + 0 + + + 0 + 0 + 0 + 0 0 + + 0 +

2 + + 0 0 + 0 0 + 0 + 0 + 0 + + + + 0 +

3 + 0 + + 0 0 + 0 + + 0 + 0 + 0 + + 0 +

4 + + + 0 + + + 0 + + + 0 0 + 0 + + + +

5 + + + + 0 0 0 + + + 0 0 0 + + + + 0 +

6 + + 0 0 + + 0 + + + + 0 0 + 0 + 0 0 +

7 0 0 + 0 + + + + 0 + 0 + 0 + 0 + + 0 +

8 0 + + 0 + 0 0 + + + 0 0 + 0 0 + + 0 +

9 0 + + 0 + 0 + + 0 + + 0 + + + 0 + 0 +

10 0 0 + 0 + 0 0 0 + 0 0 0 0 + 0 + 0 0 +

11 0 0 + 0 + 0 + + 0 + 0 + + 0 + 0 + 0 +

12 0 0 + 0 + 0 0 + + 0 0 + 0 + 0 + + 0 +

UN BON PANEL

permettant de mettre en évidence les Ac les plus dangereux : choix de la composition antigénique +++

plusieurs pays ont défini les Ag qui doivent en faire partie (circulaire 49/05).

plusieurs types de panels :

dépistage 

identification 

autres panels : "Référence", Rhésus, Public négatif, Privé.

UN BON PANEL

UN EVENTAIL DE TECHNIQUES

plusieurs techniques. compte tenu des « comportements » des différents Ac susceptibles

d’être mis en évidence : Saline 22° ou 4° → surtout Ac naturels : anti-Lewis, anti-P1, anti-

Lua, anti-M, anti-N, anti-H Technique enzymatique à 37° (papaine, broméline, ficine,…) : anti-

Rh (D,C, c, E, e), anti-K, certains anti-P1, anti-Lewis,… Coombs indirect : Ac des systèmes immunogènes. Coombs indirect BFI ou LISS Coombs sur hématies traitées par enzymes (Coombs trypsiné) Coombs trypsiné en BFI Techniques automatiques : auto-analyseur

UN EVENTAIL DE TECHNIQUES

quelle association utiliser pour la meilleure sensibilité aux Ac ?

Coombs indirect - technique enzymatique.

support de la réaction : tube, microplaque, techniques

automatiques, gel filtration.

gel filtration  Coombs indirect sans perte de sensibilité.

avantages de rapidité et de coût.

intérêt médico-légal (archivage !!!).

UNE BONNE TECHNIQUE DE COOMBS INDIRECT

Concentration globulaire.

Lavage des GR.

Propreté de la verrerie.

Précision de la technique

Qualité de l’antiglobuline +++

un anti-Fya nécessite une bonne activité anti-IgG.

bon nombre d’anti-Lea nécessite une bonne activité anti-C3d.

En pratique :

- Dépistage bonne antiglobuline polyvalente valide, conforme,

soigneusement manipulée et correctement conservée.

- Identification, surtout en cas de mélange d’Ac antiglobulines

spécifiques.

LE BON MOMENT

surtout chez le polytransfusé.

en raison de la cinétique des Ac et de leur éventuelle

absorption par les hématies transfusées en cas de transfusions

répétées sur une période limitée.

SCHEMA DU BON MOMENT

LE BON MOMENT

Meilleur schéma

RAI avant toute transfusion Ac naturels, anti-publics,

immuns (grossesse +++)

Et 7 à 21 jours après la dernière d’une série +++

LIMITES DE LA RAI

Ac anti-privés

Liée à la constitution même du panel

Ne constitue pas un réel danger pour le receveur

Intérêt du test de compatibilité

Certains demandent l’association des deux tests : RAI et test de

compatibilité au laboratoire surcroît de coût sans beaucoup

d’intérêt pour la sécurité immuno-hématologique des patients.

APPLICATION PRATIQUE

RAI - Sécurité des receveurs

- Mettre en évidence la présence éventuelle d’Ac anti-

érythrocytes chez les femmes enceinte ou accouchées.

En Tunisie - RAI indiquée avant les transfusions de CGR.

- Seul le test de compatibilité est obligatoire

(circulaire 49/05).

EXPERIENCE DU CRTS DE SFAXEvolution technique

Année Nombre total

RAI RAI +

Technique

Dépistage Identification

2000 252340 40 Tube (liss + papaine) Carte en gel liss

2001 2910 32 Tube (liss + papaine) Carte en gel liss

2002 3230 39Microplaque (liss +

papaine) Carte en gel liss

2003 3689 43Microplaque (liss +

papaine)Carte en gel liss

2004 4121 27Microplaque (liss +

papaine)Carte en gel liss

2005 4283 69Carte en gel liss +

microplaque papaineCarte en gel liss

2006 4126 91Carte en gel liss +

microplaque papaineCarte en gel liss

2007 3534 55 Carte en gel liss Carte en gel liss

2008 3474 56 Carte en gel liss Carte en gel liss

Total 31890 452

Nombre total de RAI, RAI positives et techniques utilisées 2000 - 2008

D>E>K>C>Leb>Lea>Fya>S>Jka et HLA>c>M>P>e, public et k

EXPERIENCE DU CRTS DE SFAX

172 patients (102 hommes et 70 femmes).

Entre janvier 1994 et septembre

Quinze patients (8,72%) : 9 allo, soit 5,23% et 6 auto, soit 3,49%.

1/- Aplasies médullaires :

EXPERIENCE DU CRTS DE SFAX

54 patients drépanocytaires

Entre Mars 1990 et Septembre 2009

Quatorze patients immunisés (25,92%) : 8 allo, 5 auto et 1 auto et

allo.

2/- Drépanocytose :

EXPERIENCE DU CRTS DE SFAX

404 patients.

Entre Janvier 2000 et Août 2009.

Dix sept patients (4,2 %) avaient une At.I et/ou une Al.I

Quinze patients (3,72%) avaient un TCD positif lors du suivi

(13 TCD IgG et 2 TCD IgG + C’).

3/- SLP ou SMP :

EXPERIENCE DU CRTS DE SFAX

28 parmi les 34 patients répertoriés.

Entre 1994 et 2009.

Sept patients (25%) ont développé une immunisation :

6 patients (21%) 9 alloanticorps

un seul patient une autoimmunisation avec un TCD

positif type IgG.

4/- THROMBOPATHIES CONSTITUTIONNELLES/

EXPERIENCE DU CRTS DE SFAX

12 797 DDS

Entre le 1er Mars et 31 Août 2009

Allo anticorps 3 DDS féminin, soit 0,02%, (0,17% des

femmes).

Auto anticorps de type IgM (agglutinines froides) 4 cas

(0,03%).

5/- RAI CHEZ LES DONNEURS DE SANG

EXPERIENCE DU CRTS DE SFAX

6/- ALLO-IMMUNISATION ET GROSSESSE

2093 femmes enceintes.

Taux d’immunisation croissant avec le nombre de

gestations : 1,08% pour les primigestes (Ac autres que

l’anti-D) à 7,71% pour 4 gestations et plus.

CONCLUSION