Toxicologie expérimentale « calcul de la DL50 · Les buts finaux de l’évaluation...

Toxicologie expérimentale

« calcul de la DL50 »

Pharmacovigilance

MM

AMM

Essais cliniques (homme)

Toxicologie expérimentale (animale)

Essais près-requis Essais post-requis

Pharmacologie expérimentale (animale)

Etudes physico-chimiques

2

Essais pré-requis

Essais de Mutagenèse Administration unique

Toxicité aigue

Administration réitérée à court terme

Toxicité sub-aigue

Essais post – requis

+

Administration réitérée à long terme

Toxicité chronique

Essais de

cancérogenèse Essais de tératogenèse

Les buts finaux de l’évaluation expérimentale de

la toxicité globale:

la DMT.

les organes, les tissus et les cellules cibles.

Déterminer les fonctions physiologiques altérées.

les risques d’altération génétique et de

cancérogénèse.

les risques de

malformation

congénitale.

Essais de toxicité par

administration unique

TOXICITE AIGUE

Évaluation qualitative et quantitative des

phénomènes toxiques.

Évolution dans le temps.

Dose unique .

symptômes

temps d’apparition

qualitative quantitative

Dose / mort

DMM

DL50

Dose minimale mortelle DMM

Dose minimale / Mort / animal

IV lente et continue (perfusion)

arrêt cardiaque = DMM

But : choix les doses / DL50

Détermination de la dose létale 50 /

DL50 :

Estimation statistique d’une dose unique

capable de tuer la moitié des animaux.

doses croissantes

pourcentage de mortalité 0 et 100%.

Définition

Protocole expérimental

2 espèces de mammifères

Rongeurs (rat et souris) +++

Non rongeur (chien+++)

thérapeutique humaine biodisponibilité absolue

( IV parfois IP)

deux voies

animaux

voies d’administrations

6 doses et +

Rapport / doses successives : 1.2 et 1.5

10 à 20 animaux / lot

Homogènes +++

élevage, espèce, souche, sexe, âge et poids.

Lot témoin : véhicule

Doses administrées

Constitution des lots

14 jours

Heure de la mort

Nombre de morts

Symptômes

Autopsie +++ ( morts et survivants )

examen macroscopique des viscères

examen histopathologique

durée d’observation

Examens

1 . Méthode de Karber et Behrens :

DL50: dose létale 50

DL100 : dose létale 100

a : différence entre deux doses successives.

b : moyenne de mort entre deux doses successives .

n : nombre moyen d’animaux par lot

DL50 = DL100 - (∑ab / n)

Évaluation Relation doses / effets

Calcul de la DL50 :

Probits

Log

dose

Log (dl50)

84

16

2. Méthode de Miller et Tainer : méthode graphique (papier log – probit)

50

Méthode graphique

Pour utiliser les pourcentages 0 et 100 % dont les

probits tendent vers l’infini, ceux-ci sont remplacés par

des valeurs corrigées. :

correction de 0% Y0 = 50 / n

correction du 100% : Y100 = (100n – 50) / n

n est le nombre d’animaux utilisés dans chacun de ces

lots

Résultats:

L’écart type S

S= (DL84% - DL16 %) / 2

L’écart à la moyenne δ :

δ = 2S / √2 n’

n’ : est le nombre total d’animaux dans les lots ayant

donnés des pourcentages de mortalité entre 7% et 93% .

Résultat :

Exprimé en poids du produit (mg) par Kg de poids de

l’animal

DL50= DL50 graphique ± δ écart à la moyenne

Exploitation des résultats :

Évaluation quantitative / dose létale

Nature / effets toxiques aigus

Organes cibles

Signes cliniques / surdosage aigu chez

l’homme

Préparer les protocoles de toxicité par

administration réitérée

Index thérapeutique

Index thérapeutique IT

Marge

De

Sécurité

Zone

thérapeutique

Zone

Toxique

DE50 DL50

50 %

Log

dose

%

Rapport

IT = DL50 / DE50

faible

Toxiques +++

moyen

large

Toxicité

Faible

IT

Molécule

abandonnée

Post- requis

Essais cliniques

Résultats

Pré - requis

Faible

Acceptable Toxicité +++

Merci de votre attention