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Avant propos « Analyse de la diversité génétique à l’aide des marqueurs moléculaires : module d’enseignement », est le second des deux supports pédagogiques produits dans le but de promouvoir l’application raisonnée des techniques moléculaires dans les études de biodiversité. Il complète le premier module, « Utilisation des marqueurs moléculaires dans les études de diversité génétique des plantes : module d’enseignement » et vise également à diffuser la connaissance relative à la technologie des marqueurs moléculaires pour l’évaluation de la diversité génétique et fournir ainsi une base pour comprendre les analyses de données et leur interprétation au-delà de l’utilisation courante des technologies par phénomène de mode. L’organisation par l’IPGRI d’un séminaire de formation sur les technologies moléculaires en Chine, avec la participation de chercheurs impliqués dans la diversité génétique des fruits tropicaux de Chine, d’Inde, d’Indonésie, de Malaisie, des Philippines, du Sri Lanka et de Thaïlande, a été le facteur déclenchant la production de ce module de formation. A la fin de la formation l’enseignement des techniques avait abouti à faire d’excellents techniciens de laboratoire. Cependant si des chercheurs compétents dans la gestion et l’utilisation des ressources génétiques doivent être formés, les partenaires de l’IPGRI doivent disposer d’outils d’interprétation et d’analyse de données. Le module de formation s’adresse tout particulièrement à des chercheurs qui sont intéressés par l’évaluation de la diversité génétique et qui ont une connaissance de base en biologie et en génétique, qui sont familiers avec les technologies moléculaires et qui ont besoin d’un appui pour planifier leur recherche et pour analyser et interpréter leurs résultats. Les auteurs espèrent que les utilisateurs de ces modules de formation ne trouveront pas seulement l’information éclairante mais également pratique et que l’utilisation des technologies des marqueurs moléculaires peut être une approche stimulante et utile pour quiconque oriente sa recherche sur l’analyse de la diversité génétique.

Avant propos - Bioversity International · rnell University, 2003 Traduction française: Cirad & SupAgro, 2006 Introduction 2 f La méthode scientifique •Définir la question biologique

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Page 1: Avant propos - Bioversity International · rnell University, 2003 Traduction française: Cirad & SupAgro, 2006 Introduction 2 f La méthode scientifique •Définir la question biologique

Avant propos « Analyse de la diversité génétique à l’aide des marqueurs moléculaires : module d’enseignement », est le second des deux supports pédagogiques produits dans le but de promouvoir l’application raisonnée des techniques moléculaires dans les études de biodiversité. Il complète le premier module, « Utilisation des marqueurs moléculaires dans les études de diversité génétique des plantes : module d’enseignement » et vise également à diffuser la connaissance relative à la technologie des marqueurs moléculaires pour l’évaluation de la diversité génétique et fournir ainsi une base pour comprendre les analyses de données et leur interprétation au-delà de l’utilisation courante des technologies par phénomène de mode. L’organisation par l’IPGRI d’un séminaire de formation sur les technologies moléculaires en Chine, avec la participation de chercheurs impliqués dans la diversité génétique des fruits tropicaux de Chine, d’Inde, d’Indonésie, de Malaisie, des Philippines, du Sri Lanka et de Thaïlande, a été le facteur déclenchant la production de ce module de formation. A la fin de la formation l’enseignement des techniques avait abouti à faire d’excellents techniciens de laboratoire. Cependant si des chercheurs compétents dans la gestion et l’utilisation des ressources génétiques doivent être formés, les partenaires de l’IPGRI doivent disposer d’outils d’interprétation et d’analyse de données. Le module de formation s’adresse tout particulièrement à des chercheurs qui sont intéressés par l’évaluation de la diversité génétique et qui ont une connaissance de base en biologie et en génétique, qui sont familiers avec les technologies moléculaires et qui ont besoin d’un appui pour planifier leur recherche et pour analyser et interpréter leurs résultats. Les auteurs espèrent que les utilisateurs de ces modules de formation ne trouveront pas seulement l’information éclairante mais également pratique et que l’utilisation des technologies des marqueurs moléculaires peut être une approche stimulante et utile pour quiconque oriente sa recherche sur l’analyse de la diversité génétique.

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Ce que vous devez savoir à propos de ce module. Quand vous vous lancez dans une recherche, il est crucial de bien définir les questions auxquelles vous cherchez à répondre même si d’autres questions viennent ensuite et impliquent des changements dans le plan d’origine au fur et à mesure de l’avancement du projet. Vous devez aussi connaître quelques principes de mise en place des expérimentations afin de s’assurer d’obtenir des résultats convaincants. Dans le contexte de votre travail avec les ressources génétiques vous devez être familier avec les bases fondamentales de la diversité génétique et avec les outils disponibles pour examiner vos données afin de pouvoir les interpréter correctement. Quelques uns des outils et concepts discutés comprennent : • les stratégies d’échantillonnage; • les bases de la génétique de population; • les mesures mathématiques utilisées pour décrire la diversité génétique, les indices de distance génétique et les méthodes utilisées pour exprimer les liens de parenté entre échantillons; • les logiciels et ressources internet disponibles. Les calculs qui sous-tendent dans les concepts clés de la génétique des populations, les mesures de diversité génétique, les indices et méthodes de regroupement sont illustrés avec des exemples qui ont été spécifiquement préparés pour cette publication. L’utilisateur peut immédiatement voir comment les formules mathématiques sont appliquées. De plus, nous voulons montrer, même si ces calculs sont souvent obtenus avec l’aide d’un logiciel, que la plupart peuvent s’effectuer manuellement. Même si un logiciel est utilisé nous pensons que le chercheur doit comprendre ce que l’ordinateur fait et doit être capable de développer ses propres critères pour décider quelle méthode utiliser. Ce module de formation est destiné à aider ceux qui veulent analyser la diversité génétique avec l’aide des données moléculaires. Comme tel, ce n’est pas un outil complet pour apprendre ou enseigner la génétique des populations. Cependant nous avons listé des références bibliographiques pour appuyer des notions importantes de génétique des populations, pour expliciter les formules mathématiques et fournir une meilleure compréhension de comment appliquer ces méthodes dans des situations de recherche courante. L’idée est que ce module peut être utilisé comme un outil autonome pour faciliter l’acquisition de connaissances, en particulier pour aider les étudiants, et notamment les étudiants de deuxième cycle, pour comprendre comment choisir parmi les techniques moléculaires appliquées en étude de diversité génétique et être capable de les appliquer dans leurs projets de recherche. Il peut être également utilisé pour l’enseignement et la préparation de cours en salle ou comme guide de référence pour les professionnels qui ont besoin d’appliquer les techniques moléculaires, les méthodes statistiques et les analyses de données nécessaires pour mettre en œuvre leur recherche. Les utilisateurs de ce module doivent avoir une connaissance de base de la génétique. De plus s’ils ne sont pas familiers avec les technologies des marqueurs moléculaires, nous leur recommandons fortement de débuter la formation par le premier module: « Utilisation des

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marqueurs moléculaires dans les études de diversité génétique des plantes : module d’enseignement ». Une fois que les principes de bases sont acquis le second module peut être suivi avec une meilleure base pour comprendre les algorithmes mathématiques. Nous avons organisé le module de formation en sous-modules complémentaires et indépendants, de manière à ce que l’utilisateur puisse sélectionner à tout moment l’unité qui l’intéresse. Dans certains cas nous avons donné une information supplémentaire, ajoutée en annexe pour ne pas trop compliquer l’essentiel, ou encore fourni des formules mathématiques additionnelles ou des exemples pour ceux qui les trouveraient utiles pour une parfaite compréhension. Ce module de formation est présenté de façon à ce que l’on puisse utiliser les diapositives soit seules soit avec leur notes d’accompagnement. Vos commentaires sur cette publication sont extrêmement importants pour nous car nous sommes convaincus qu’elle peut être améliorée. Pour mieux répondre à nos partenaires et aux besoins d’autres utilisateurs, nous apprécierions d’avoir votre avis sur l’organisation, le contenu et l’utilité de cet outil aux adresses suivantes : M.Carmen de Vicente International Plant Genetic Resources Institute (IPGRI) Via dei Tre Denari 472/a 00057 Maccarese Rome, Italy E.mail : [email protected] César Lopez Universidad Nacional Agraria « La Molina » Av. La Universidad s/n Apdo. 456 Lima 12 Lima, Peru E.mail: [email protected] Theresa Fulton Institute for Genomic Diversity 130 Biotechnology Building Cornell University Ithaca, New York 14583, USA E.mail: [email protected] Nous espérons que ce module complète le module précédent, « Utilisation des marqueurs moléculaires dans les études de diversité génétique des plantes : module d’enseignement » , et que les deux modules réunis offrent à nos partenaires, tout spécialement à ceux des pays en développement qui ont un accès limité aux technologies avancées et à la formation ou à la littérature scientifique, une chance pour conduire une recherche avancée en diversité génétique des plantes et contribuer ainsi aux connaissances mondiales sur ces ressources de grande valeur. M.Carmen de Vicente Cesar Lopez Theresa Fulton IPGRI Univ. La Molina IGD, Cornell University

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Objectifs de ce module : Ce module vise à permettre aux les utilisateurs : • de comprendre les concepts scientifiques de la diversité génétique au travers des bases fondamentales de la génétique des populations. • de se familiariser avec les expressions mathématiques utilisées pour décrire la diversité génétique et d’ être capable d’exécuter les calculs indispensables en utilisant les données de marquage moléculaire. • d’acquérir les connaissances de base nécessaires pour appliquer les technologies moléculaires à l’évaluation de la diversité génétique et interpréter les données moléculaires.

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upA

gro,

200

6In

trod

uctio

n13

fE

st-c

equ

ele

s do

nnée

sco

nfor

tent

l’hyp

othè

se?

fQ

uels

outil

sdo

it-on

util

iser

pour

l’an

alys

e?

fA

utre

sbe

soin

s:

•C

once

pts

scie

ntifi

ques

sous

-jace

nts

àla

not

ion

de

dive

rsité

, par

ex

:−

Niv

eaux

de d

iver

sité

biol

ogiq

ue−

Var

iatio

n en

tre

et v

aria

tion

àl’i

ntér

ieur

−R

elat

ion

entr

eph

énot

ype

and

géno

type

•C

once

pts

de b

ase

en g

énét

ique

des

popu

latio

ns

Ana

lyse

r et

inte

rpré

ter

les

donn

ées

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Uni

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ity, 2

003

Tra

duct

ion

fran

çais

e: C

irad

& S

upA

gro,

200

6In

trod

uctio

n14

1.D

iver

sité

intr

a-po

pula

tion

(= d

iver

sité

géné

tique

)

2.D

iver

sité

entr

e le

s es

pèce

s

3.D

iver

sité

au s

ein

de l’

écos

ystè

me

Niv

eaux

de

dive

rsité

biol

ogiq

ue

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Uni

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003

Tra

duct

ion

fran

çais

e: C

irad

& S

upA

gro,

200

6In

trod

uctio

n15

fLa

var

iabi

téou

pol

ymor

phis

me

peut

êtr

e év

alué

e au

x di

ffére

nts

nive

aux

de l’

orga

nisa

tion

fLa

dis

trib

utio

n de

s po

lym

orph

ism

es e

st

obse

rvée

pou

r di

ffére

nts

nive

aux

hiér

arch

ique

s (a

ires,

régi

ons,

pop

ulat

ions

, sou

s-po

pula

tions

, in

divi

dus)

Mes

urer

la v

aria

bilit

égé

nétiq

ue

Air

e 1 P

opul

atio

n1

Rég

ion

1R

égio

n2

Rég

ion

3

Pop

ulat

ion

j Pop

ulat

ion

k

Pop

ulat

ion

u

Pop

ulat

ion

tP

opul

atio

ni

Pop

ulat

ion

s

Indi

vidu

Pop

ulat

ion

2

Pop

ulat

ion

3

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003

Tra

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fran

çais

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irad

& S

upA

gro,

200

6In

trod

uctio

n16

•P

héno

type

–S

péci

fique

duca

ract

ère

•M

arqu

eurs

mol

écul

aire

s–

Div

ersi

téne

utre

–A

DN

ou

prot

éine

•S

éque

nce

d’A

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–D

iver

sité

allè

lique

•E

xpre

ssio

n–

Niv

eau

de l’

AR

N

Rel

atio

n en

tre

le p

héno

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et le

géno

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A1

Chr

omos

ome

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AR

NA

Pol

ypep

tide

(Į1

enzy

me)

OH

O

Pré

curs

eur

du p

igm

ent

Pig

men

t ro

uge

A1G

énot

ype

Phé

noty

pe

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Uni

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003

Tra

duct

ion

fran

çais

e: C

irad

& S

upA

gro,

200

6In

trod

uctio

n17

fU

nean

alys

ede

div

ersi

tégé

nétiq

uedo

itsu

ivre

une

mét

hode

scie

ntifi

que

fA

vant

d’ét

udie

rla

div

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tégé

nétiq

ue, i

lfau

tpo

ser

la q

uest

ion

biol

ogiq

ue

fIl

faut

suiv

rele

s co

nsei

lsd’

écha

ntill

onna

ge, n

on

seul

emen

tpou

r le

s in

divi

dus,

mai

sau

ssip

our

les

popu

latio

ns e

t le

géno

me

fO

n ne

peut

inte

rpré

ter

les

donn

ées

sans

avo

irde

s co

nnai

ssan

ces

de b

ases

con

cern

antl

es

conc

epts

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s-ja

cent

la d

iver

sité

biol

ogiq

ueet

àla

gén

étiq

uede

s po

pula

tions

En

résu

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003

Tra

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fran

çais

e: C

irad

& S

upA

gro,

200

6In

trod

uctio

n18

fLe

s pr

inci

pale

sét

apes

de la

mis

een

pla

ce

d’un

eex

périe

nce

fL’

impo

rtan

ced’

iden

tifie

rla

prin

cipa

lequ

estio

n da

nsvo

tre

rech

erch

e

fLe

s po

ints

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tsà

cons

idér

erlo

rsde

l’é

chan

tillo

nnag

e

fLe

s co

ncep

ts d

e ba

se s

ous-

jace

nts

àla

div

ersi

tégé

nétiq

ue

A p

artir

de

mai

nten

ant,

vous

dev

ez c

onna

ître

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003

Tra

duct

ion

fran

çais

e: C

irad

& S

upA

gro,

200

6In

trod

uctio

n19

Réf

éren

ces

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nell

Uni

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003

Tra

duct

ion

fran

çais

e: C

irad

& S

upA

gro,

200

6In

trod

uctio

n20

fC

once

pts

de b

ase

de la

gén

étiq

uede

s po

pula

tions

fM

esur

esde

la d

iver

sité

géné

tique

fP

rogr

amm

epo

ur a

naly

ser

la d

iver

sité

géné

tique

fG

loss

aire

A s

uivr

e

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nell

Uni

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ity, 2

003

Gén

étiq

ue d

es p

opul

atio

ns1

Tra

duct

ion

fran

çais

e: C

irad

& S

upA

gro,

200

6

Ana

lyse

de la

div

ersi

tégé

nétiq

ueà

l’aid

ede

mar

queu

rsm

oléc

ulai

res

: M

odul

e de

form

atio

n

Con

cept

s de

bas

e en

nétiq

uede

s po

pula

tions

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Uni

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003

Gén

étiq

ue d

es p

opul

atio

ns2

Tra

duct

ion

fran

çais

e: C

irad

& S

upA

gro,

200

6

fD

éfin

ition

s

fLe

prin

cipe

de H

ardy

-Wei

nber

g

fE

xem

ples

de c

alcu

lde

fréq

uenc

esal

lèliq

ues

fR

epro

duct

ion

et s

ystè

mes

de r

epro

duct

ions

fF

orce

s in

fluan

tsur

la d

iver

sité

géné

tique

fA

nnex

e1

: Val

eurs

seui

lde

la d

istr

ibut

ion

duχ2

Con

tenu

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Uni

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ity, 2

003

Gén

étiq

ue d

es p

opul

atio

ns3

Tra

duct

ion

fran

çais

e: C

irad

& S

upA

gro,

200

6

fM

esur

ede

la v

aria

bilit

égé

nétiq

ueen

déc

rivan

tle

s ch

ange

men

tsde

s fr

éque

nces

allè

lique

sd’

un

cara

ctèr

epa

rtic

ulie

rau

cou

rsdu

tem

ps

fA

naly

sede

s ca

uses

con

duis

antà

ces

chan

gem

ents

Déf

initi

ons

: Gén

étiq

uede

s po

pula

tions

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Uni

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ity, 2

003

Gén

étiq

ue d

es p

opul

atio

ns4

Tra

duct

ion

fran

çais

e: C

irad

& S

upA

gro,

200

6

fLa

des

crip

tion

de to

usle

s ca

ract

ères

d’un

in

divi

duco

ncer

nant

sam

orph

olog

ie, s

aph

ysio

logi

e, s

esre

latio

ns é

colo

giqu

eset

son

co

mpo

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ent

fQ

uelq

ueso

itle

mom

ent d

e la

mes

ure,

le

phén

otyp

ees

tle

résu

ltatd

e l’i

ntér

actio

nen

tre

les

gène

sde

l’in

divi

duet

son

env

ironn

emen

t

Un

phén

otyp

e, c

’est

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Uni

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ity, 2

003

Gén

étiq

ue d

es p

opul

atio

ns5

Tra

duct

ion

fran

çais

e: C

irad

& S

upA

gro,

200

6

Ros

eC

rèm

eR

ose

sout

enu

Bla

ncB

leu

clai

rV

iole

t

Crè

me

sout

enu

Jaun

eR

ouge

Var

iatio

n ph

énot

ypiq

ue

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Uni

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ity, 2

003

Gén

étiq

ue d

es p

opul

atio

ns6

Tra

duct

ion

fran

çais

e: C

irad

& S

upA

gro,

200

6

fU

n gè

nees

tl’u

nité

de b

ase

phys

ique

et

fonc

tionn

elle

de l’

héré

dité

, tra

nsm

etta

ntde

s in

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atio

nsd’

une

géné

ratio

la s

uiva

nte

fU

n al

lèle

estu

nede

s di

ffére

ntes

form

esd’

un

gène

/locu

s

Gèn

eet

allè

le

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Uni

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ity, 2

003

Gén

étiq

ue d

es p

opul

atio

ns7

Tra

duct

ion

fran

çais

e: C

irad

& S

upA

gro,

200

6

fLa

des

crip

tion

dupa

nel c

ompl

etde

s gè

nes

dont

un in

divi

duhé

rite

de s

espa

rent

s

fLe

gén

otyp

ed’

un in

divi

dure

ste

le m

ême

tout

au

long

de

savi

e, q

uelq

ueso

itso

n en

viro

nnem

ent

Le g

énot

ype,

c’e

st…

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Uni

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ity, 2

003

Gén

étiq

ue d

es p

opul

atio

ns8

Tra

duct

ion

fran

çais

e: C

irad

& S

upA

gro,

200

6

fLa

var

iatio

n gé

nétiq

uees

tass

ocié

eau

con

cept

de

gén

otyp

e

fLa

var

iatio

n gé

nétiq

ueay

antu

n ef

fets

urun

trai

t ex

iste

dans

la p

lupa

rtde

s po

pula

tions

na

ture

lles,

mai

sce

str

aits

son

tinf

luen

cés

par

les

allè

les

de n

ombr

eux

gène

s, a

uxqu

els

s’aj

oute

ntle

s ef

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de l’

envi

ronn

emen

t

fIl

estd

iffic

iled’

asso

cier

les

diffé

renc

esph

énot

ypiq

ues

aux

effe

tsde

gèn

espa

rtic

ulie

rs

Var

iatio

n gé

nétiq

ue

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003

Gén

étiq

ue d

es p

opul

atio

ns9

Tra

duct

ion

fran

çais

e: C

irad

& S

upA

gro,

200

6

f‘P

rése

nce

de p

lusi

eurs

form

es’

fE

n te

rmes

géné

tique

s, c

ela

se r

éfèr

la

coex

iste

nce

d’au

moi

nsde

uxph

énot

ypes

alte

rnat

ifsda

nsun

epo

pula

tion

ouen

tre

popu

latio

ns. E

n gé

néra

l, ce

sdi

ffere

nts

phén

otyp

esso

ntca

usés

par

les

dive

rs a

llèle

sd’

un m

ême

gène

.

fA

u ni

veau

mol

écul

aire

, le

poly

mor

phis

me

se

réfè

reà

la c

oexi

sten

ce d

e di

ffére

ntes

band

es,

ouva

riant

s A

DN

, sii

lsso

ntré

vélé

spa

r un

em

étho

dede

dét

ectio

ndo

nnée

Qu’

est-

cequ

ele

pol

ymor

phis

me?

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Uni

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ity, 2

003

Gén

étiq

ue d

es p

opul

atio

ns10

Tra

duct

ion

fran

çais

e: C

irad

& S

upA

gro,

200

6

fD

’un

poin

t de

vue

écol

ogiq

ue:

Un

grou

ped’

indi

vidu

sde

la m

ême

espè

cevi

vant

dan

sun

ezo

ne g

éogr

aphi

que

rest

rein

teau

sei

nde

laqu

elle

deux

indi

vidu

sse

repr

odui

sent

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’un

poin

t de

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géné

tique

:U

n gr

oupe

d’in

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dus

qui p

arta

gent

des

gène

sen

co

mm

unet

qui

ont

la p

ossi

bilit

éde

se

repr

odui

re

Une

popu

latio

n, c

’est

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Uni

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ity, 2

003

Gén

étiq

ue d

es p

opul

atio

ns11

Tra

duct

ion

fran

çais

e: C

irad

& S

upA

gro,

200

6

Tro

isni

veau

xde

str

uctu

re d

e po

pula

tion

sont

iden

tifié

s:

•O

rgan

ism

e•

Sou

s-po

pula

tion

•P

opul

atio

n to

tale

La s

truc

ture

des

pop

ulat

ions

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Uni

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003

Gén

étiq

ue d

es p

opul

atio

ns12

Tra

duct

ion

fran

çais

e: C

irad

& S

upA

gro,

200

6

Pop

ulat

ion

X

p =

0.10

(fr

éque

nce

de l’

allè

leA

)q

= 0.

90 (f

réqu

ence

de

l’allè

lea)

Mig

rant

de la

po

pula

tion

Y

Les

inse

ctes

pol

linis

ateu

rs

port

ent d

es g

rain

s de

po

llen

de la

pop

ulat

ion

Y

(alle

lea

> al

lele

A) v

ers

la

popu

latio

nX

p =

0.80

(fr

éque

nce

de l’

allè

le A

)q

= 0.

20 (f

réqu

ence

de

l’allè

lea)

Flux

de

gène

s

a

a

Aa

aa

Aa

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Uni

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ity, 2

003

Gén

étiq

ue d

es p

opul

atio

ns13

Tra

duct

ion

fran

çais

e: C

irad

& S

upA

gro,

200

6

fLa

fréq

uenc

eal

lèliq

uees

tle

conc

ept u

tilis

épo

ur

quan

tifie

r la

var

iatio

n gé

nétiq

ue

fM

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A1

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G1

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esà

G0

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A2

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+ ½Ȉ j

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A

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n et

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ctio

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ne

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nité

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nell

Uni

vers

ity, 2

003

Gén

étiq

ue d

es p

opul

atio

ns31

Tra

duct

ion

fran

çais

e: C

irad

& S

upA

gro,

200

6

fIl

com

pare

la p

ropo

rtio

n ré

elle

de g

énot

ypes

hété

rozy

gote

celle

qu’o

nat

tend

qua

ndil

y a

des

croi

sem

ents

aléa

toire

s

fF

est

le c

oeffi

cien

t de

cons

angu

inité

, ilm

esur

ele

déf

icit

en h

étér

ozyg

otes

()

0

0

HH

HF

−=

Coe

ffic

ient

de

cons

angu

inité

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ht: I

PG

RI e

tCor

nell

Uni

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ity, 2

003

Gén

étiq

ue d

es p

opul

atio

ns32

Tra

duct

ion

fran

çais

e: C

irad

& S

upA

gro,

200

6

0

1

2

3

4

5

6

7

8

Gén

érat

ions

100.

0

75.5

50.0

25.5 0.0%

Pro

port

ion

d’ho

moz

ygot

es

Pro

port

ion

d’hé

téro

zygo

tes

Que

se p

asse

-t-il

en c

asd’

auto

féco

ndat

ion

?

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Uni

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ity, 2

003

Gén

étiq

ue d

es p

opul

atio

ns33

Tra

duct

ion

fran

çais

e: C

irad

& S

upA

gro,

200

6

fM

utat

ion

fM

igra

tion

fR

ecom

bina

ison

fS

élec

tion

fD

ériv

e

Forc

es in

fluen

çant

la d

iver

sité

géné

tique

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ity, 2

003

Gén

étiq

ue d

es p

opul

atio

ns34

Tra

duct

ion

fran

çais

e: C

irad

& S

upA

gro,

200

6

fC

’est

la p

rem

ière

sou

rce

de v

aria

tion.

Elle

peu

têt

reca

usée

par

:•

Des

err

eurs

lors

de la

rép

licat

ion

de l’

AD

N•

Dom

mag

essu

bis

par

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Nlo

rsde

rad

iatio

ns

fLe

s m

utat

ions

aug

men

tent

la d

iver

sité

mai

s,

parc

equ

ele

s m

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ions

spo

ntan

ées

sont

rare

s,

le ta

uxde

cha

ngem

entd

es fr

éque

nces

allè

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ses

tbas

fLa

mut

atio

n se

ule

n’en

trai

nepa

s l’é

volu

tion

des

popu

latio

ns e

t des

esp

èces

Mut

atio

n

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ity, 2

003

Gén

étiq

ue d

es p

opul

atio

ns35

Tra

duct

ion

fran

çais

e: C

irad

& S

upA

gro,

200

6

fC

’est

le d

épla

cem

entd

es in

divi

dus

outo

ute

form

ed’

intr

oduc

tion

de g

ènes

d’un

epo

pula

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dans

une

autr

e

fLa

mig

ratio

n au

gmen

tela

div

ersi

téet

son

taux

peut

être

impo

rtan

t, ca

usan

tdes

cha

ngem

ents

sign

ifica

tifs

dans

les

fréq

uenc

es

fLe

cha

ngem

entd

es fr

éque

nces

allè

lique

ses

tpr

opor

tionn

elà

la d

iffér

ence

en fr

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nces

entr

ela

pop

ulat

ion

d’or

igin

eet

la p

opul

atio

n d’

arriv

ée

Mig

ratio

n

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Uni

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003

Gén

étiq

ue d

es p

opul

atio

ns36

Tra

duct

ion

fran

çais

e: C

irad

& S

upA

gro,

200

6

fC

’est

le p

rocé

dépa

r le

quel

une

cellu

le g

énèr

ede

no

uvel

les

com

bina

ison

sch

rom

osom

ique

s, c

ompa

rées

àce

ttece

llule

ou

àce

lles

de s

ade

scen

danc

e

fC

ela

necr

éepa

s de

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ersi

téno

uvel

le, m

ais

génè

rede

no

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les

com

bina

ison

sde

la d

iver

sité

exis

tant

e

fLa

var

iabi

lité

géné

tique

obte

nue

par

reco

mbi

nais

onpe

utap

para

ître

très

rapi

dem

ent,

d’au

tant

plus

qu’

ilex

iste

des

allè

les

ségr

égan

tsà

diffé

rent

slo

ci.

Rec

ombi

nais

on

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Uni

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003

Gén

étiq

ue d

es p

opul

atio

ns37

Tra

duct

ion

fran

çais

e: C

irad

& S

upA

gro,

200

6

C’e

stl’a

ptitu

dehé

ritée

des

orga

nism

esà

surv

ivre

et à

se r

epro

duire

. Elle

agi

tde

telle

sort

equ

ela

fr

éque

nce

des

géno

type

ssu

périe

urs

augm

ente

avec

le te

mps

.

Sél

ectio

n

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003

Gén

étiq

ue d

es p

opul

atio

ns38

Tra

duct

ion

fran

çais

e: C

irad

& S

upA

gro,

200

6

Zygo

tes

a

Aa

a

aa

a

AA A

AA

aA

AA

aa

aa

AA

aA

aA

aA

AA

AA

aA

AA

aa

aa

AA

aA

AA

AA

a

a

a

aa

aA

A

AA

A

a a

aa

a

AA

aa

aa

aA

AA

a

a

a

aa

aA

A

a a

aa

aa

aa

a

aa

aa

a

a

a

a

aa

a

a a

aa

aa

aa

a

aa

a

aa

aa

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Ens

embl

e de

s gè

nes

Ech

antil

lonn

age

des

gam

ètes

G0

p =

0.5

q

= 0.

5

G1

p =

0.62

5 q

= 0.

375

G2

p =

0.31

25

q =

0.68

75

G3

p =

0.0

q =

1.0

La d

ériv

e

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003

Gén

étiq

ue d

es p

opul

atio

ns39

Tra

duct

ion

fran

çais

e: C

irad

& S

upA

gro,

200

6

fN

ees

tle

nom

bre

de p

aren

ts r

espo

nsab

les

de la

co

mpo

sitio

n gé

nétiq

ueà

la g

énér

atio

nsu

ivan

te

fN

ees

tgén

éral

emen

tplu

s pe

tit q

ueN

àca

use

de

•La

var

iatio

n de

la ta

ille

de la

pop

ulat

ion

d’un

egé

néra

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àl’a

utre

•U

n se

xera

tio in

égal

•U

n ch

evau

chem

entd

e gé

néra

tions

•U

nedi

sper

sion

géo

grap

hiqu

ede

s po

pula

tions

Eff

ectif

effic

ace

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Uni

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003

Gén

étiq

ue d

es p

opul

atio

ns40

Tra

duct

ion

fran

çais

e: C

irad

& S

upA

gro,

200

6

fD

ériv

e gé

nétiq

ue, a

vec

une

varia

tion

aléa

toire

de

s fr

éque

nces

allè

lique

s f

Con

sang

uini

téf

Hom

ozyg

otie

: fix

atio

n et

per

te d

’allè

les

fD

iffér

enci

atio

n en

tre

sous

-pop

ulat

ions

aaA

a

AA

AA

AA

aa

aa Aa

AA

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aaaaA

a

AA

AA

aa

aa

AaA

A

AA

aa

aa

Aa

Aa A

aAa A

aA

a

Aa

AA

AA

aa

Aa

AA

AA

Aaaa

AA

AA

aaAa

AA

AA

AAA

A

Diff

éren

ciat

ion

de

sous

-pop

ulat

ions

Rep

rodu

ctio

n en

tre

appa

rent

és

La ta

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de la

po

pula

tion

rédu

ite

aa

AA A

aaa

aaaa

aaaa

AA

AA

AA

AA

AA

AA

AA

AA

AA

Aug

men

tatio

n de

l’h

omoz

ygot

ie

aaaa

aaaa

aa

aaaa

aa

aa

Fixa

tion

Con

séqu

ence

sd’

une

dim

inut

ion

de la

taill

ed’

une

popu

latio

n

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003

Gén

étiq

ue d

es p

opul

atio

ns41

Tra

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ion

fran

çais

e: C

irad

& S

upA

gro,

200

6

fU

n go

ulot

d’é

tran

glem

ent s

e dé

velo

ppe

quan

d la

ta

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de la

pop

ulat

ion

dim

inue

rap

idem

ent

fU

n ef

fet d

e fo

ndat

ion

appa

rait

quan

d pe

u d’

indi

vidu

s s’

inst

alle

nt d

ans

un n

ouve

l en

viro

nnem

ent

N

tem

ps

Gou

lot d

’étr

angl

emen

t

A1A

2

A1A

1

A2A

2

A2A

2A

2A2

A2A

2A

2A2

A2A

2A

2A2

A2A

2

A2A

2

A1A

2A

1A2

A1A

2A

1A2

A1A

2

A1A

2

A1A

2A

1A1

A1A

1

A1A

1A

1A1

A1A

1

A1A

1

A1A

1

A2A

2

A2A

2A

2A2

A2A

2A

2A2

A2A

2A

2A2

A2A

2A

2A2

A2A

2A

2A2

A2A

2A

2A2

A2A

2A

2A2

A2A

2A

2A2

p =

0.5

(fré

quen

ce d

eA

1)q

= 0.

5 (f

réqu

ence

de

A2)

p =

0.0

(fré

quen

ce d

eA

1)q

= 1.

0 (f

réqu

ence

de

A2)

Con

séqu

ence

s…

(sui

te)

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Gén

étiq

ue d

es p

opul

atio

ns42

Tra

duct

ion

fran

çais

e: C

irad

& S

upA

gro,

200

6

fLe

taux

d’h

étér

ozyg

otes

dim

inue

:

H1

= (1

–1/

2N)H

0

fLe

s al

lèle

s so

nt p

erdu

s :

P =

p2N

+ q2N

Ave

c un

gou

lotd

’étr

angl

emen

tou

un e

ffet

de fo

ndat

ion

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Gén

étiq

ue d

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opul

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Tra

duct

ion

fran

çais

e: C

irad

& S

upA

gro,

200

6

Ann

exe

1

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003

Gén

étiq

ue d

es p

opul

atio

ns44

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ion

fran

çais

e: C

irad

& S

upA

gro,

200

6

Pou

r an

alys

eret

inte

rpré

ter

des

donn

ées

de

dive

rsité

géné

tique

, on

doit

être

fam

ilier

avec

:•

Que

lque

sdé

finiti

ons

de b

ase

de la

gén

étiq

uede

s po

pula

tions

Le p

rinci

pede

Har

dy-W

einb

erg

•C

alcu

ler

les

fréq

uenc

esal

lèliq

ues

et g

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ypiq

ues

•Le

s ca

uses

orig

inel

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de c

hang

emen

tdan

sla

di

vers

itégé

nétiq

ue: m

utat

ion,

mig

ratio

n,

reco

mbi

nais

on, s

élec

tion

et d

ériv

e

En

résu

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003

Gén

étiq

ue d

es p

opul

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Tra

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çais

e: C

irad

& S

upA

gro,

200

6

fLe

s dé

finiti

ons

de b

ase

en g

énét

ique

des

popu

latio

ns

fLe

prin

cipe

de H

ardy

-Wei

nber

g

fC

omm

ent c

alcu

ler

des

fréq

uenc

esal

lèliq

ues

avec

des

don

nées

de m

arqu

eurs

fL’

effe

tdu

régi

me

de r

epro

duct

ion

sur

la d

iver

sité

géné

tique

fLe

s pr

inci

pale

sso

urce

s de

var

iatio

n et

leur

sco

nséq

uenc

es

Vou

sde

vez

déso

rmai

sco

nnaî

tre

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003

Gén

étiq

ue d

es p

opul

atio

ns46

Tra

duct

ion

fran

çais

e: C

irad

& S

upA

gro,

200

6

Siv

ous

voul

ezen

sav

oir

plus

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Uni

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Gén

étiq

ue d

es p

opul

atio

ns47

Tra

duct

ion

fran

çais

e: C

irad

& S

upA

gro,

200

6

fLe

s m

esur

esde

la d

iver

sité

géné

tique

fP

rogr

amm

esin

form

atiq

ues

pour

ana

lyse

rla

di

vers

itégé

nétiq

ue

fG

loss

aire

A s

uivr

e

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1

Annexe 1 : Concepts de base en génétique des populations Valeurs seuil de la distribution de Chi2

0.05 0.01

1 3.84 6.64 2 5.99 9.21 3 7.81 11.34 4 9.49 13.28 5 11.07 15.09

6 12.59 16.81 7 14.07 18.48 8 15.51 20.09 9 16.92 21.67

10 18.31 23.21

11 19.68 24.72 12 21.03 26.22 13 22.36 27.69 14 23.68 29.14 15 25.00 30.58

16 26.30 32.00 17 27.59 33.41 18 28.87 34.80 19 30.14 36.19 20 31.41 37.57

21 32.67 38.93 22 33.92 40.29 23 35.17 41.64 24 36.41 42.98 25 37.65 44.31

26 38.88 45.64 27 40.11 46.96 28 41.34 48.28 29 42.56 49.59 30 43.77 50.89

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t Uni

vers

itéde

Cor

nell,

200

3 M

esur

es 1

Tra

duct

ion

fran

çais

e pa

r le

CIR

AD

, 200

5

Ana

lyse

de

la d

iver

sité

géné

tique

àl’a

ide

de m

arqu

eurs

mol

écul

aire

s:M

odul

e d’

appr

entis

sage

Mes

ures

de

dive

rsité

géné

tique

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3 M

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çais

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, 200

5

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, 200

5

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tion

intr

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gion

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tc.

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ent

re in

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dus,

po

pula

tions

, rég

ions

, etc

.

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sent

atio

n de

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ns à

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don

nées

diff

éren

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Ind 5

Ind 3

Ind 6

Ind 4

Ind 2

Ind 1

Ana

lyse

s fo

ndam

enta

les

00,

460,

370,

560,

560,

3306

00,

280,

370,

430,

3205

00,

500,

260,

4704

00,

330,

3303

00,

5602

001

0605

0403

0201

D o n n é e s0

00

11

11

10

10

1

00

11

00

11

00

01

01

01

10

11

00

01

10

11

01

Indi

vidu

s

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çais

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CIR

AD

, 200

5

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ativ

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nce

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soi

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:−

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es :

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s or

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omin

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non

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Dis

crèt

es, e

ntiè

res

ou d

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Var

iabl

es

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)

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, 200

5

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95

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P

j = q

�0,

99

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phis

me

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ism

e (P

j)

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, 200

5

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ci p

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r le

no

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phes

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),

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re :

P =

npj

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tal

Pro

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ion

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ci p

olym

orph

es

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, 200

5

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nom

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ns u

n éc

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les

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re à

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n m

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e, e

lle s

oit é

gale

à0

Ric

hess

e en

allè

les

(A)

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r le

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, 200

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e lo

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le C

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s (A

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C’e

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lèle

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i peu

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e pr

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dans

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= 1/

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p i2

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n fr

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ise

par

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D, 2

005

⎯0,

30⎯

⎯⎯

⎯F

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le 4

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0,50⎯

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0,502

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A2

A2

A2

A2

A2

A1

A1

A1

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n 2

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0,404

B4

B4

B1

B1

B1

B4

B2

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B1

B3

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2,94

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Nom

bre

effe

ctif

d’al

lèle

s

0,00

0,66

0,54

0,54

Hét

éroz

ygot

ie (

h)

0,00

0,40

0,30

0,30

Fré

quen

ce d

e l’a

llèle

3

0,00

0,30

0,10

0,10

Fré

quen

ce d

e l’a

llèle

2

1,00

0,30

0,60

0,60

Fré

quen

ce d

e l’a

llèle

1

13

33

Nom

bre

d’al

lèle

s

C1

C1

C3

C3

B3

B3

A3

A3

Indi

vidu

5

C1

C1

C2

C3

B1

B3

A1

A3

Indi

vidu

4

C1

C1

C1

C3

B1

B1

A1

A1

Indi

vidu

3

C1

C1

C2

C2

B1

B2

A1

A2

Indi

vidu

2

C1

C1

C1

C1

B1

B1

A1

A1

Indi

vidu

1

Pop

ulat

ion

1Lo

ci (A

, B, C

)

Cal

cul d

eA

e: U

n ex

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e

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2T

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ctio

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D, 2

005

fC

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roba

bilit

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nné,

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lèle

s qu

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s j b

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–q2

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cus

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llèle

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= 1

–Ȉp

i2

•M

oyen

ne d

e pl

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urs

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= Ȉ

jL hj/L

fLa

moy

enne

de

He

pour

tous

les

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est

un

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l'ét

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la v

aria

bilit

égé

nétiq

ue d

e la

pop

ulat

ion

Hét

éroz

ygot

ie m

oyen

ne a

tten

due

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ce [D

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dive

rsité

géné

tique

de

Nei

)

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D, 2

005

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itéav

ec u

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eur

mol

écul

aire

cod

omin

ant In

divi

dus

Locu

s A

Locu

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Locu

s E

Locu

s C

Locu

s D

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23

45

67

89

10

Gel

1112

1314

1516

1718

1921

2223

2425

2627

2829

2030

Cod

age

des

donn

ées

Locu

s A

Locu

s B

Locu

s E

Locu

s C

Locu

s D

1,1

0,1

1,1

0,

1 0

,1

0,1

0,1

0,

1 0

,1

1,0

0,1

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1 1

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0,1

0,

1 0

,1

0,1

0,1

0,

1

1,0

0,1

0,

1 1

,1 0

,1 0

,1 0

,1

M1

23

45

67

89

1011

1213

1415

1617

1819

2122

2324

2526

2728

2920

30

0,1

0,1

0,1

0,

1 0

,1 1

,1

0,1

0,1

0,

1 0

,1

0,1

0,1

0,1

1,0

1,

0 1

,0

0,1

0,1

0,

1 0

,1

0,1

0,1

1,

0

0,1

1,1

0,

1 1

,0 1

,0 1

,0 1

,1

1,0

1,0

1,0

1,

0 1

,0 1

,0

1,0

1,0

1,

0 1

,0

1,0

1,0

1,0

1,0

1,

0 1

,0 1

,0 1

,0

1,0

1,0

1,

0 1

,0

1,0

1,

0 1

,0

1,0

1,0

1,0

1,0

1,0

1,0

1,0

1,0

1,

0 1

,0 1

,0

1,0

1,0

1,

0 1

,0

1,0

1,0

1,0

1,0

1,

0 1

,0 1

,0 1

,0

1,0

1,0

1,

0 1

,0

1,0

1,

0 1

,0

1,0

1,0

1,0

1,0

1,0

0,1

1,1

0,1

1,

1 0

,1 1

,0

1,1

1,0

1,

1 1

,1

1,1

1,0

1,0

1,0

1,

0 1

,0 1

,0 1

,0

1,0

0,1

0,

1 1

,0

1,0

1,

0 1

,0

1,0

1,1

1,1

0,1

0,1

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radu

ctio

n fr

ança

ise

par

le C

IRA

D, 2

005

0,22H

i

0,46

0,41

0,23

h j=

(1 -

p2-q

2 )

0,37q

0,72q

0,87q

0,63p

0,28p

0,13pFréq

uenc

eal

léliq

ue

1301

Tota

l

1301

Tota

l

1301

Tota

l

E2

E2

E1

E2

E1

E1

Gén

otyp

es

Eq2

2pq

p2Fr

q. g

én. (

atte

ndue

)

78

15N

b d'

indi

vidu

s

P22

= 0

,23

P12

= 0

,27

P11

= 0

,50

Frq.

gén

. (o

bs,)

B2

B2

B1

B2

B1

B1

Gén

otyp

es

Bq2

2pq

p2Fr

q. g

én.

(att

endu

e)

203

7N

b d'

indi

vidu

s

P22

= 0

,67

P12

= 0

,10

P11

= 0

,23

Frq.

gén

. (o

bs)

P22

= 0

,80

P12

= 0

,13

P11

= 0

,07

Freq

. gén

. (ob

s.)

Ana

lyse

de

donn

ées

Locu

s

2p2

A1

A1

244

Nb

d'in

divi

dus

q22p

qFr

q. g

én. (

atte

ndue

)

A2

A2

A1

A2

Gén

otyp

es

ACal

cul d

e di

vers

itéav

ec u

n m

arqu

eur

mol

écul

aire

cod

omin

ant (

suite

)

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200

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esur

es 1

5T

radu

ctio

n fr

ança

ise

par

le C

IRA

D, 2

005

Locu

s A

Locu

s B

Locu

s E

Indi

vidu

s

Locu

s C

Locu

s D

M1

23

45

67

89

1011

1213

1415

1617

1819

2122

2324

2526

2728

2920

30

Cod

age

des

donn

ées

1

0

1

0

0

0

0

0

0

1

0

0

0

0

0

1

0

0

0

0

0

0

0

1

0

0

1

0

0

0

M1

23

45

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C A

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C G

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∗0,2

∗(5/

30)]

= 0,

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…GACTGATTTCCACGGCACTGACGAATTCGA…AGTGAATTCTTACTTAAGCTAGCCTGAATTCGATAC…

…CTGACTAAAGGTGCCGTGACTGCTTAAGCT…

TCACTTAAGAATGAATTCGATCGGACTTAAGCTATG…

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A

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d XY

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7017

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F =

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0,65

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1) +

0,1

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1) +

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A2

5/20

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,25

A1

Fréq

. Xi

2019

1817

1615

1413

1211

109

87

65

43

21

Séq

.

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1,001 3 4 2

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re

regr

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men

t et o

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s

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s ca

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tique

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1

Analyse de la diversité génétique

à partir de données moléculaires:

Module d'enseignement

Adventice: • En agriculture, une plante individuelle ou une espèce poussant où elle n'est

pas souhaitée. • En écologie, une plante capable de pousser dans des habitats ouverts ou

perturbés, par exemple après un feu ou des perturbation dues à l'homme. ADN microsatellite: Type d'ADN répété constitué de répétitions de très courts motifs comme des di, des tri ou des tétranucléotides. Aussi appelé simple sequence repeats (SSRs). AFLP: Amplified fragment length polymorphism (polymorphisme de longueur des fragments amplifiés). Méthode très sensible pour détecter du polymorphisme dans l'ADN. L'ADN subit d'abord une digestion enzymatique et un sous-ensemble des fragments obtenus est alors sélectionné pour une amplification par PCR et une visualisation. Allèle: L'une des différentes formes d'un gène qui peut exister à un locus. Allèles multiples: Existence de plusieurs allèles connus d'un gène. Allogamie: Transfert de pollen (c'est-à-dire pollinisation) des anthères des fleurs d'une plante aux stigmates des fleurs d'une plante génétiquement différente de la première. Aussi appelé hybridation, pollinisation croisée ou xénogamie. AMOVA: Analyse de variance moléculaire. C'est une méthode pour étudier la variation moléculaire au sein d'une espèce. Autofécondation: Fertilisation d'une plante à partir du pollen de la même plante. Autogamie: • Transfert de pollen (pollinisation) des anthères des fleurs d'une plante aux

stigmates des fleurs de la même plante ou, parfois, à ceux d'une plante génétiquement identique.

• Possibilité pour de nombreuses espèces de plantes de s'auto-fertiliser naturellement avec succès. Aussi appelé auto-pollinisation.

Auto-pollinisation: Voir Autogamie.

Glossaire

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Amélioration des plantes: Multiplication et manipulation génétique par hybridation ou croisement délibéré de plantes dans le but de sélectionner des descendances améliorées. Biodiversité: Ensemble des gènes, espèces et écosystèmes d'une région donnée, que cela soit un micro habitat ou le monde entier. Aussi appelé diversité biologique. Caractérisation: Evaluation des caractères des plantes qui sont hautement héritables, faciles à voir à l'oeil nu, également exprimés dans tous les environnements et utilisables pour distinguer des phénotypes. Collection (de ressources génétiques): • Rassemblement d'individus domestiqués (variétés traditionnelles, cultivars

anciens et modernes, et lignées améliorées), et d'espèces apparentées sauvages ou adventices.

• Le matériel rassemblé lors de ces collectes est appelé collection. Consanguinité: Croisement d'individus apparentés. Croisement d'une succession de parents appartenant à la même race. Aussi appelé endogamie. (voir Pollinisation croisée) Conservation: Gestion de l'utilisation de la biosphère par l'homme de manière à ce qu'elle puisse produire le plus grand bénéfice durable pour les générations actuelles tout en maintenant sa capacité à répondre aux besoins et aspirations des générations futures. De cette manière, la conservation est positive, associant la préservation, le maintien, l'utilisation durable, la restauration et l'amélioration de l'environnement naturel. Conservation ex situ: • Méthode de conservation qui suppose de retirer les ressources génétiques

(semences, pollen, sperme, organismes individuels) de leur habitat d'origine ou de leur environnement naturel.

• Conservation des composantes de la biodiversité vivantes en dehors de leur habitat d'origine ou de leur environnement naturel.

(voir conservation in situ) Conservation in situ: Méthode de conservation qui essaye de préserver l'intégrité génétique des ressources en gènes en les conservant dans les écosystèmes à évolution dynamique de leur habitat d'origine ou de leur environnement naturel. (voir Conservation ex situ) Dérive génétique: Changement imprévisible des fréquences alléliques qui se produit dans des populations de petite taille. Diploïde: Jeu complet de matériel génétique, constitué de paires de chromosomes, avec un chromosome de chaque jeu parental. La plupart des cellules animales, à l'exception des gamètes, ont un nombre diploïde de chromosomes. (Voir Haploïde)

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Distance génétique: Degré d'apparentement entre sous-groupes ou populations évalué par divers indices. Diversité des espèces: Fonction de la distribution et de l'abondance des espèces. Sens identique à richesse en espèces. Dans la littérature plus technique, comprend des considérations sur la régularité de l'abondance des espèces. Un écosystème est considéré comme ayant une diversité supérieure, d'après la définition la plus technique, si les espèces présentes ont des populations de tailles identiques, et une diversité inférieure si de nombreuses espèces sont rares et certaines très communes. Diversité génétique: Variation dans la composition génétique d'individus d'une espèce ou d'individus d'espèces différentes; variation génétique héritable intra- ou inter-populations. Domestication: Evolution des plantes ou animaux, soit naturellement soit par sélection artificielle, en des formes plus utiles à l'homme, par exemple au travers de la disparition de l'égrenage naturel. Enzyme de restriction: Endonucléase qui reconnaît une séquence spécifique et qui coupe l'ADN en ce point Equilibre de Hardy-Weinberg: Distribution de fréquence stable des génotypes, AA, Aa, et aa, dans des proportions p², 2pq, et q², (où p et q sont les fréquences des allèles A et a), qui est la conséquence de croisements au hasard en l'absence de mutation, migration, sélection naturelle ou dérive aléatoire. Erosion génétique: Perte de diversité génétique au fil du temps entre ou au sein de populations, ou réduction de la base génétique d'une espèce. Espèce sauvage apparentée: Espèce apparentée à l'espèce cultivée qui pousse hors des champs et qui n'est pas utilisée dans un but agricole. Flux de gènes: Echange de matériel génétique entre populations. Ce terme peut être utilisé dans le sens de la reproduction de la plante (c'est-à-dire être dû à la dispersion des gamètes et des zygotes) ou être dû à l'influence humaine, comme l'introduction de nouvelles variétés cultivées par les paysans. Gène: Unité physique et fonctionnelle de base de l'hérédité, qui transmet l'information d'une génération à une autre. C'est un segment d'ADN qui inclut la partie transcrite et l'élément régulateur qui permet sa transcription. Génétique des populations: Etude quantitative et mesure de populations en termes statistiques, par exemple étude de phénomènes génétiques en terme de paramètres génétiques standards tels que des tables et distributions de fréquence, des moyennes, des variances et des écarts-types. Génome: Ensemble du matériel génétique d'un organisme. Haploïde: Jeu unique de chromosome représentant la moitié du jeu complet de matériel génétique, présent dans chaque ovule ou cellule spermatique des animaux et dans chaque ovule et grain de pollen des plantes (du grec haploos, unique).

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(voir Diploïde) Haplotype: Profil allélique particulier à un ensemble de loci appartenant à un groupe de liaison bien défini. Hétérozygote: Individu diploïde qui a des allèles différents à un ou plusieurs loci (du grec heteros, autre) (voir Homozygote) Homozygote: Individu diploïde qui a des allèles identiques à un ou plusieurs loci (du grec homos, le même) (voir Hétérozygote) Isozyme: Formes multiples d'une enzyme dont la synthèse est contrôlée par plus d'un gène. Locus (pluriel locus ou loci): Position spécifique sur un chromosome où est situé un gène ou un segment particulier d'ADN. Marqueur: Site d'un chromosome identifiable physiquement et dont la transmission peut être suivie (par exemple gène, site de restriction ou marqueur RFLP). Marqueur génétique: Allèle, bande sur un gel ou caractère qui sert de preuve expérimentale pour identifier un individu ou une de ses caractéristiques. Migration: Mouvement d'individus entre des populations qui seraient sinon en isolement reproductif. Mutation: Terme décrivant un changement brutal et héritable du phénotype. Tout changement permanent et héritable de la séquence d'ADN. Les types de mutations incluent des mutations ponctuelles, des délétions, des insertions et des changements dans le nombre et la structure des chromosomes. Pollinisation croisée: Système de croisement allogame dans lequel les croisements se font entre individus moins apparentés que les paires moyennes choisies au hasard dans la population. Appelé aussi exogamie. (Voir Consanguinité) Phylogénie: Histoire évolutive d'une espèce. Diagramme illustrant l'histoire évolutive reconstituée de populations d'organismes apparentés. Polymorphisme: Existence de formes différentes associées à des allèles différents d'un gène ou homologues d'un chromosome. Population: En génétique, groupe d'individus qui partagent un même fond génétique et qui peuvent s'intercroiser. Purine: Un composé de base contenant de l'azote, à double anneau, se rencontrant dans les acides nucléiques. Les purines de l'ADN et de l'ARN sont l'adénine et la guanine.

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Pyrimidine: Un composé de base contenant de l'azote, à simple anneau, se rencontrant dans les acides nucléiques. Les pyrimidines de l'ADN sont la cytosine et la thymine. Les pyrimidines de l'ARN sont la cytosine et l'uracile. RAPD: Random amplified polymorphic DNA (ADN polymorphique amplifié au hasard). Technique d'amplification de morceaux d'ADN anonymes, faisant appel à une PCR avec des amorces arbitraires. Recombinaison: Production d'une molécule d'ADN avec des morceaux dérivés de plus d'une molécule parentale d'ADN. Chez les eucaryotes, ceci s'obtient par l'échange réciproque d'ADN entre chromatides non sœurs au sein d'une paire de chromosomes homologues durant la prophase de la première division de méiose. La recombinaison permet aux chromosomes de réarranger leur matériel génétique, accroissant de ce fait le potentiel de diversité génétique. Egalement appelé crossing-over. Réjuvénation ou régénération (de collections de ressources génétique): • Culture d'échantillons de semences d'une accession de manière à restaurer

la viabilité des semences de l'accession originelle. Ceci est généralement réalisé quand la faculté germinative du matériel originel tombe en dessous de 85%.

• Processus permettant l'obtention d'une plante entière à partir de cellules individuelles par culture in vitro.

Reproduction asexuée: Formation de nouveau individus à partir de cellules d'un seul parent. Il n'y a pas de recombinaison ou de mélange des formes parentales. RFLP: Restriction fragment length polymorphism (polymorphisme de longueur des fragments de restriction). Variations entre individus détectés par des différences de longueur des fragments d'ADN après une restriction enzymatique. Système de croisement: Nature des croisements entre individus d'une population, incluant des facteurs tel que degré de consanguinité, association par paires et nombre de croisements simultanés. Le système de croisement est d'une importance essentielle pour déterminer à la fois la structure génétique et le potentiel évolutif de populations naturelles. Systèmes de reproduction: Système par lequel une espèce se reproduit. Il y a plusieurs systèmes de reproduction chez les plantes. Voir par exemple allogamie et autogamie. Reproduction sexuée: Production de nouveaux individus, suivant le mélange dans une cellule unique des gènes de deux cellules différentes -généralement des gamètes- provenant généralement de parents différents. SSR: Voir ADN microsatellite. Sympatrique: Se rencontrant dans la même zone géographique.

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IPGRI - L’institut international des ressources génétiques végétales (InternationalPlant Genetic Resources Institute , IPGRI) est une organisation scientifiqueinternationale et autonome, financée par le groupe consultatif sur la recherche agricoleinternationale (CGIAR). Le mandat de l’IPGRI est de favoriser la conservation et l’utilisation de la diversité génétique pour le bien-être des générations présente et àvenir. L’IPGRI a ses quartiers généraux à Rome (Italie), et des bureaux répartis dans 22 pays du monde. Il fonctionne en trois programmes: (1) Le programme des ressourcesgénétiques végétales; (2) Le programme support des ressources génétqiue du CGIAR; et (3) Le réseau international pour l’amélioration de la banane et du plantain (INIBAP).

IGD - L’institut pour la diversité du génome (Institute for Genomic Diversity) est situé àl’université de Cornell à Ithaca, New York (USA). Les missions de l’IGD sont de développer, transférer et fournir des technologies et ressources éducatives pourrésoudre les problèmes affectant la conservation de la biodiversité et la sécuritéalimentaire. De façon spécifique, nos objectifs sont: d’utiliser la génomique évolutive et comparative pour résoudre des problèmes appliqués; de développer et transférer des technologies appliquées en génomique et bioinformatique; de proposer un supportcontinu pour des efforts nationaux et internationaux de conservation, d’agriculture et d’amélioration des plantes; enfin d’éduquer et former par la recherche à tous les niveaux(inclus mais non limité à ce niveau des étudiants avant ou après le niveau master, des scientifiques invités, des enseignants du supérieur, des professeurs).

Copyright © 2003 by the International Plant Genetic Resources Institute (IPGRI) and Institute for Genomic Diversity (IGD), Cornell University.

A l’exception d’une autorisation spécifique, les droits de copie et autres droitsliés à ce travail reviennent à l’IPGRI et l’université de Cornell. Toute personnepeut copier et imprimer gratuitement ce matériel pour des objectifsd’enseignement ou autres propos non commerciaux, sans avoir à en demanderl’autorisation préalable des détenteurs des droits de copie. La reconnaissance de l’origine du matériel est requise pour cela.

Citationde Vicente, M.C. and Fulton, T. (eds.). 2003. Using Molecular Marker Technology in Studies on Plant Genetic Diversity Studies: Learning Module. International PlantGenetic Resources Institute (IPGRI), Rome, Italy.

M. Carmen de Vicente, PhD, est généticienne moléculaire végétale à l’IPGRIAmeriques—Bureau Regional, Cali, Colombie; et Theresa Fulton, PhD, est directricedes activités de vulgarisation a l’institut de diversité génomique de l’niversité de Cornell, Ithaca, NY, USA.

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Fiche d'évaluation Le contenu de ce module change en permanence, rendant nécessaires des mises à jours périodiques. Pour cette raison, nous proposons ce module sous forme électronique. Pour nous aider dans les mises à jour, nous apprécierions de recevoir des commentaires pertinents ainsi que des suggestions des utilisateurs pour améliorer encore ce module. Vos commentaires sur l'utilité de cet outil nous seraient aussi très utiles. Nous avons posé ci-dessous quelques questions pour vous guider dans vos réponses. Vous pouvez nous les envoyer directement en cliquant sur le bouton 'Soumettre' à la fin de cette page, par fax (no: 57-2 445 0096), par courrier à votre contact à l'IPGRI ou par e-mail soit à [email protected], soit à [email protected], soit à [email protected] Questions:

1. Comment avez-vous utilisé cet outil?

2. Pensez-vous que le module: a. Fournit une vue générale des concepts de base de la

génétique des populations permettant d'évaluer la diversité génétique?

Oui Non Pourquoi?

b. Montre comment l'utilisation de technologies de marquage

moléculaire peut être une approche pratique pour toute personne préparant des analyses de diversité génétique?

Oui Non Pourquoi?

c. Donne des informations sur comment analyser et interpréter des données de marquage moléculaire?

Oui Non Pourquoi?

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2

d. Donne une liste des ressources bibliographiques actuelles pour chacun des sujets abordés?

Oui Non Pourquoi?

3. Dites-nous ce que vous avez aimé et ce que vous changeriez dans les éléments suivants:

a. Contenu général

b. Structure des sous-modules

c. Dessins et schémas

d. Annexes

e. Autres

4. Qu'ajouteriez-vous au module pour le rendre plus utile dans votre cas

particulier?

a. Des références de base

b. Des exemples d'application

c. Des informations supplémentaires sur: I. Les concepts de génétique des populations II. Les mesures de diversité génétique III. Les logiciels présentés

d. Autres éléments

5. Quels autres sujets voudriez-vous voir abordés dans ce module?

6. Vous a-t-il été difficile de télécharger le module ou des partie du module? Pourquoi?

Soumettre

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Remerciements La réalisation du module d’enseignement sur l’analyse de la diversité génétique à l’aide des marqueurs moléculaires a été possible grâce à une collaboration entre l’International Plant Genetic Resource Institute ( IPGRI) et Institute for Genetic Diversity (IGD) de l’université de Cornell. Les remerciements des auteurs s’adressent plus particulièrement aux organismes et aux personnes suivantes : - Le bureau régional Pacifique et Océanie d’ IPGRI Asie, à travers le projet arbres fruitiers tropicaux, lui-même supporté par la Banque Asiatique de Développement ( ADB), qui a contribué au financement de ce module. - Felix Alberto Guzman (bureau régional IPGRI Amérique), pour son appui dans la clarification de l’information et dans l’adaptation de la version finale aux corrections des différents collègues et de l’éditeur. -Amanda Garris (IGD) et Steve Tanksley (département d’Amélioration des Plantes) tous deux à l’université Cornell, pour nous avoir permis d’utiliser information et figures extraites de leurs diapositives. -Joanne Labate pour les « discussions virtuelles » et Alexandra Casa et Martha Hamblin de l’IGD pour leur avis sur les programmes à discuter. - Humberto Gomez Paniagua, Centro Internacional de Agricultura Tropica (CIAT), pour ses précieux commentaires ayant permis l’amélioration du contenu et de la présentation didactique du produit. - Myriam Cristina Duque (CIAT) pour son aide à la préparation du plan de ce module et la clarification des concepts sur les mesures de la diversité génétique. Marilyn Warburton Centre de biotechnologie appliquée , Centro internacional par Mejoramiento de maiz y Trigo (CIMMYT, Mexico), pour ses suggestions d’amélioration des diapositives relatives aux méthodes de clustering. - L’équipe de l’unité des ressources génétiques, CIAT (Colombie) pour avoir partagé l’image des haricots comme toile de fond pour un des sous-modules. -Le professeur Heiber Cardenas ( département de biologie, université de Valle, Cali, Colombie), pour avoir testé le module d’enseignement auprès de cinq de ses étudiants (Ivan Andres Gonzales, Maria Fernanda Castillo, Carmenza Montoya, Fernando Rondon Gonzales et Diego Mauricio Villamarin Miranda) et pour avoir formulé des commentaires constructifs pour le module. -Luigi Guarino, Ramanatha Rao, Issiaka Zougrana, Margarita Baena, Zongwen Zhang, Mikkel Grum, Jan Engels et Elisabeth Golberg (IPGRI) pour leurs commentaires et suggestions notamment dans l’amélioration de la convivialité du module. -Elizabeth L.McAdam, pour sa contribution dans l’édition du manuscrit et ses suggestions pertinentes quant au format du produit et Lynn Menendez pour la coordination de l’édition du manuscrit et pour la suggestion de plusieurs modifications très utiles. -Gladys Rodriguez (CIAT) pour son aide dans la relecture du produit.

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Annexe 1 : Concepts de base en génétique des populations Valeurs seuil de la distribution de Chi2

0.05 0.01

1 3.84 6.64 2 5.99 9.21 3 7.81 11.34 4 9.49 13.28 5 11.07 15.09

6 12.59 16.81 7 14.07 18.48 8 15.51 20.09 9 16.92 21.67

10 18.31 23.21

11 19.68 24.72 12 21.03 26.22 13 22.36 27.69 14 23.68 29.14 15 25.00 30.58

16 26.30 32.00 17 27.59 33.41 18 28.87 34.80 19 30.14 36.19 20 31.41 37.57

21 32.67 38.93 22 33.92 40.29 23 35.17 41.64 24 36.41 42.98 25 37.65 44.31

26 38.88 45.64 27 40.11 46.96 28 41.34 48.28 29 42.56 49.59 30 43.77 50.89

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1

Annexe 2 à: Mesures de la diversité génétique

Analyse de variance moléculaire: Exemple 1 Ce modèle, aussi appelé AMOVA, mesure la diversité génétique entre populations en référence à des zones d'une région d'un continent (situation 3, diapositive 26). Nous avons: i = individus, j = allèles, k = populations

Yki(j) = Y + ak + bk(i) + wki(j) Où,

Yki(j) = valeur comprise entre 0 et 1 pour l'allèle j de l'individu i issu de la population k

ak = effet de la population k, de variance 2a bk(i) = effet de l'individu i issu de la population k, de variance 2b wki(j) = effet du locus j de l'individu i issu de la population k, de variance 2w

n = produit de i, j et k, soit le nombre total d'observations

Sources de variation ddl SC CM ECM

Entre populations (k – 1) X...k2/ij – X…2/ijk CMa 2w + 2 2b + 2n 2a

Entre individu/pop. k(i – 1) Xi...k2/j – ...k2/ij CMb 2w + 2 2b

Intra-individu ki(j – 1) Xijk2 – Xi...k2/j CMw 2w

Total kij – 1 Xijk2 – X…2/ijk

Variances et estimateurs des statistiques F

2a = FST 2 FIT = ( 2a + 2b)/ 2

2b = (FIT – FST) 2 FST = 2a/ 2

2w = (1 – FIT) 2 FIS = 2b/( 2b + 2w)

2 = 2w + 2b + 2a Où,

2a = variance entre populations qui possèdent des allèles identiques. Cette variance est estimés par (CMa – CMb)/2n

2b = variance entre individus au sein de chaque population. Cette variance est estimée par (CMb – CMw)/2

2w = variance intra-individu ou mesure de la probabilité que les allèles à un locus soient différents. Cette variance est estimée par le carré moyen intra-individu (CMW)

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Annexe 3 de: Mesures de la diversité génétique

Analyse de variance moléculaire: Exemple 2 Comme décrit dans l'annexe 2, ce modèle (AMOVA) mesure la diversité génétique entre populations, cette fois en référence à des populations dans une zone d'une région d'un continent (situation 4, diapositive 26). Un nouveau niveau hiérarchique est introduit (la région) avec ses paramètres spécifiques et estimateurs des carrés moyens. Nous avons: i = individus, j = allèles, k = populations, l = régions

Ylki(j) = Y + rl + al(k) + blk(i) + wlki(j) Où,

Ylki(j) = valeur comprise entre 0 et 1 pour l'allèle j de l'individu i issu de la population k de la région I

rl = effet de la région I, de variance 2r al(k) = effet de la population k de la région I, de variance 2a blk(i) = effet de l'individu i de la population k de la région I, de variance

2b wlki(j) = effet du locus j de l'individu i de la population k de la région I, de

variance 2c n = produit de i, j, k et l, soit le nombre total d'observations

Sources de variation ddl CM ECM

Entre régions l – 1 CMr 2w + 2 2b + 2n 2a + 2nl 2r Entre populations d'une région l(k – 1) CMa 2w + 2 2b + 2n 2a

Entre individus/ population/ région Ik(i – 1) CMb 2w + 2 2b

Intra-individus lki(j – 1) CMw 2w

Total Ikij – 1

Variance totale (%) % 2r = ( 2r/ 2) 100 % 2a = ( 2a / 2) 100

2 = 2r + 2w + 2b + 2a % 2b = ( 2b / 2) 100 % 2w = ( 2w / 2) 100 2r est la variance entre régions, estimée par (CMa – CMb)/2nl. Dans les estimateurs de la variance, le signe ‘%’ a été ajouté car nous pouvons exprimer la variance due à chaque source de variation (régions, populations d'une région, individus d'une population) comme une fonction de la variance totale et, de ce fait, nous pouvons déterminer laquelle de ces sources de variation est la plus importante. Par exemple, si la valeur de la variation due aux régions était élevée et celles des autres sources étaient faibles, nous pourrions conclure que les populations au sein d'une région ont des fréquences alléliques homogènes mais que les populations de différentes régions diffèrent notablement en terme de fréquences alléliques.

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1

Annexe 4 à : Mesures de la Diversité Génétique

Distance géométrique Variables quantitative La distance géométrique, connue aussi comme distance taxonomique (Sokal, 1961), est mesurée par une distance euclidienne, selon la formule suivante :

dij = [ k(Xik – Xjk)2]1/2

Xik = valeur de la variable k de l'individu i Voir annexe 5 pour un exemple de calcul Variables mixtes Si il y a des variables mixtes, elles doivent d'abord être standardisées selon la formule suivante Où

Xij = valeur du caractère i de l'individu j Xi = moyenne du caractère i si = écrat type du caractère i

P nombre de variables Si il y a p variables, la distance doit être pondérée pour devenir indépendante du nombre de variables, selon la formule suivante : Référence Sokal, R. 1961. Distance as a measure of taxonomic similarity. Syst. Zool.

10(2):40-51.

i

iijijstand

sX-XX =

P

)X-(X

d

2

kk

jkik

2ij

∑ ⎥⎦⎤

⎢⎣⎡

= ı

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1

Annexe 5 de: Mesures de la diversité génétique

Transformation des variables quantitatives: Un exemple Nous avons trois caractères mesurés chez 4 individus:

• Taille de la plante (m) • Pois du grain (g) • Diamètre du grain de pollen (µ)

Avant de calculer les distances, nous devons d'abord standardiser les données en utilisant la formule:

mstand = m - m/

Les unités de mesure disparaissent avec la standardisation.

m mstand g gstand µ µstand

Indiv. 1 1,50 0,35 0,02 0,00 80,00 -0,15

Indiv. 2 1,20 -1,41 0,03 1,00 70,00 -1,32

Indiv. 3 1,45 0,06 0,01 -1,00 90,00 1,02

Indiv. 4 1,60 0,94 0,02 0,00 85,00 0,44

Moyenne (Xi) 1,44 0,02 81,25

Ecart-type (si) 0,17 0,01 8,54

Les distances peuvent alors être calculées pour chaque paire d'individus en utilisant la formule déjà connue:

dij = [ (Xij – Xkj)2]1/2

d12 = [(0,35 – (-1,41))2 + (0,0 – 1,0)2 + (-0,15 – (-1,32))2]1/2 = 2,34 d11 = 0

d13 = [(0,35 – 0,06)2 + (0,0 – (-1,0))2 + (-0,15 – 1,02)2]1/2 = 1,57 d22 = 0

d14 = [(0,35 – 0,94)2 + (0,0 – 0,0)2 + (-0,15 – 0,44)2]1/2 = 0,83 d33 = 0

d23 = [(-1,41 – 0,06)2 + (1,0 – (-1,0))2 + (-1,32 – 1,02)2]1/2 = 3,41 d44 = 0

d24 = [(-1,41 – 0,94)2 + (1,0 – 0,0)2 + (-1,32 – 0,44)2]1/2 = 3,10

d34 = [(0,06 – 0,94)2 + (-1,0 – 0,0)2 + (1,02 – 0,44)2]1/2 = 1,45 Une fois calculées les distances de chaque paire, il est possible d'identifier des groupes en utilisant la méthode UPGMA (voir détails dans les diapositives 58 et 59 du module).

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2

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3

D'abord, nous organisons les distances calculées en les plaçant dans un tableau symétrique:

I1 I2 I3 I4

I1 0

I2 2,34 0

I3 1,57 3,41 0

I4 0,83 3,10 1,45 0

Pour le premier cycle, nous commencons par choisir la distance la plus courte, qui est, dans notre exemple, d1,4 = 0.83. Une nouvelle matrice peut alors être créée en regroupant les individus I1 et I4 et en calculant les distance combinées:

d2(1,4) = (d1,2 + d2,4)/2 = (2,34 + 3,10)/2 = 2,72 d3(1,4) = (d1,3 + d3,4)/2 = (1,57 + 1,45)/2 = 1,51

I1,4 I2 I3

I1,4 0

I2 2,72 0

I3 1,51 3,41 0

La distance la plus courte est maintenant celle qui sépare l'individu I1,4 de l'individu I3. Dans le cycle suivant, une nouvelle matrice est créée en regroupant ces individus en un individu I(1,4)3 et en calculant sa distance à l'individu I2 d((1,4)3)2 = 3,07

I1,4(3) I2

I1,4(3) 0

I2 3,07 0

Il est maintenant possible à partir de ces résultats de tracer un dendrogramme positionnant les 4 individus de l'exemple les uns par rapport aux autres:

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4

1,50 1,002,00 0,03,00

1

4

3

2

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1

Annexe 6 de: Mesures de la diversité génétique

Application du coefficient de simple matching à des caractères morphologiques (variables qualitatives à modalités) Nous avons trois caractères:

• Pilosité des feuilles: rare (1), commune (2), abondante (3) • Couleur des pétales: blanc (1), jaune (2), rouge (3) • Longueur du pétiole: court (1), moyen (2), long (3)

Nous commençons par transformer les données mesurées en données binaires. Les trois caractères initiaux sont transformés en 9 caractères binaires. Ceci peut conduire à augmenter le poids accordé à ces caractères au détriment d'autres utilisés dans l'analyse.

Caractère 1 Caractère 2 Caractère 3

Ind 1 2 1 2

Ind 2 2 3 3

Ind 3 1 2 1

Ind 4 3 3 1

Caractère 1 (code binaire)

Caractère 2 (code binaire)

Caractère 3 (code binaire)

Rare CommuneAbondante Blanc Jaune Rouge Court Moyen Long

Ind 1 0 1 0 1 0 0 0 1 0

Ind 2 0 1 0 0 0 1 0 0 1

Ind 3 1 0 0 0 1 0 1 0 0

Ind 4 0 0 1 0 0 1 1 0 0

Nous utilisons ensuite le coefficient de simple matching pour calculer les distance entre paires d'individus:

Comparaison par paires pour tous les caractères

IND 1 vs. 2 1 0 IND 1 vs. 3 1 0 IND 1 vs. 4 1 0

1 a = 1 b = 2 1 a = 0 b = 3 1 a = 0 b = 3

0 c = 2 d = 4 0 c = 3 d = 3 0 c = 3 d = 3

IND 2 vs. 3 1 0 IND 2 vs. 4 1 0 IND 3 vs. 4 1 0

1 a = 0 b = 3 1 a = 1 b = 2 1 a = 1 b = 2

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2

0 c = 3 d = 3 0 c = 2 d = 4 0 c = 2 d = 4

Nous pouvons maintenant utiliser la méthode qui permet d'identifier des groupes et tracer le dendrogramme correspondant:

I1 I2 I3 I4

I1 0

I2 0,56 0

I3 0,33 0,33 0

I4 0,33 0,56 0,56 0

Coefficient

0,25 0,44 0,63 0,81 1,00

Dendrogramme basé sur les phénotypes

1

2

3

4

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1

Annexe 7 de: Mesure de la diversité génétique

Calcul de la distance génétique de Nei Tout d'abord, avec les données issues de l'exemple (voir diapositive 48), nous construisons une matrice de distance comme suit: Durant le premier cycle, nous choisissons la distance la plus courte: d1,3 = 0,0107 Dans le second cycle, une nouvelle matrice est établie en regroupant l'individu P1 avec l'individu P3 et en calculant leurs distances combinées à l'individu P2:

d2(1,3) = (d1,2 + d2,3)/2 = (0,0852 + 0,044)/2 = 0,0646 Nous pouvons maintenant dessiner le dendrogramme:

P1 P2 P3

P1 0

P2 0,0852 0

P3 0,0107 0,0440 0

P1,3 P2

P1,3 0

P2 0,0646 0

0,02 0,01 0,0 0,08 0,03 0,06 0,05 0,04 0,07

2

3

1

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1

Annexe 8 de: Mesures de la diversité génétique

Similarités morphologiques et moléculaires

Disons que nous avons trois roses (1, 2, 3). Les roses 2 et 3 semblent identiques morphologiquement alors que la rose 1 semble différente. Si nous regardons les fragments d'ADN, que nous supposons engendrés par un marqueur moléculaire, nous voyons que les roses 1 et 2 semblent plus proches. Qu'est-il arrivé? Ceci montre l'importance d'étudier la diversité génétique à tous les niveaux possibles. La combinaison des informations provenant de différents types de marqueurs -c'est à dire ceux qui correspondent aux gènes fonctionnels et ceux qui montrent du polymorphisme dans les régions génomiques d'intérêt- donnera la meilleur approximation de l'étendue de la variation génétique existante. Le même principe pourrait s'appliquer à la combinaison des données morphologiques et moléculaires. Dans cette annexe, nous montrons le type d'erreurs que nous pouvons faire si nos conclusions sont basées sur un seul type de données de marquage.

Individu1

1 3 4 5

6 7 8

9 10

11 12

2 3 + 4 2 5

6 7 + 8

9 + 10

11 12

1 21 3 4 5

6 7 8

9 10

11 12

1 22

ADN

Individu2 Individu3

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2

Sur la base du profil de bandes d'ADN obtenu sur un gel pour les 3 individus, les distances entre paires d'individus sont calculées en utilisant le coefficient de Jaccard. Nous pouvons alors établir la matrice de distance et tracer le dendrogramme:

Ind1 Ind2 Ind3

Ind 1

1

Ind 2

0,786 1

Ind 3

0,400 0,294 1

Ind12 Ind3

Ind 12

1

Ind 3

0,347 1

cba

aJ

a = 11 b = 1

c = 2 d = 3Indi

v. 1

Indiv. 2

a = 5 b = 8

c = 4 d = 0Indi

v. 2

Indiv. 3

a = 6 b = 6

c = 3 d = 2Indi

v. 1

Indiv. 3

Ind.1 Ind.2 Ind.3

21

3

4

5

67

9

10

1112

1

22

2

3+4

7+8

9+10

a = 11 b = 1

c = 2 d = 3Indi

v. 1

Indiv. 2

a = 5 b = 8

c = 4 d = 0Indi

v. 2

Indiv. 3

a = 6 b = 6

c = 3 d = 2Indi

v. 1

Indiv. 3

Ind.1 Ind.2 Ind.3

21

3

4

5

67

9

10

1112

1

22

2

3+4

7+8

9+10

0.7862111

11J1,2 =++

= 0.400366

6J1, 3 =++

= 0.294485

5J2,3 =++

=

0.342

S S S 2,3 1,3

1,2,3

0,347 2

SSS

2,3 1,31,2,3

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3

Ce dendrogramme a été établi à partir des données moléculaires. Nous pouvons le comparer avec le dendrogramme ci-dessous établi à partir des données morphologiques et analyser les différences. Selon le dendrogramme moléculaire, les individus 1 et 2 sont proches alors que les données morphologiques suggèrent que les individus 2 et 3 sont plus proches. Mais nous pouvons également utiliser les deux types de données en les combinant et refaire l'analyse avec les deux jeux de données simultanément.

a = 11 b = 2

c = 2 d = 3

Indi

v. 1

Indiv. 2

a = 6 b = 8

c = 4 d = 0

Indi

v. 2

Indiv. 3

a = 6 b = 7

c = 3 d = 2

Indi

v. 1

Indiv. 3

Ind.1 Ind.2 Ind.3

21

3

4

5

6

7

8

9

10

11

12

1

22

2

3+4

7+8

9+10

a = 11 b = 2

c = 2 d = 3

Indi

v. 1

Indiv. 2

a = 6 b = 8

c = 4 d = 0

Indi

v. 2

Indiv. 3

a = 6 b = 7

c = 3 d = 2

Indi

v. 1

Indiv. 3

Ind.1 Ind.2 Ind.3

21

3

4

5

6

7

8

9

10

11

12

1

22

2

3+4

7+8

9+10

Dendrogramme moléculaire

Dendrogrammemorphologique

0.0 1.0

Ind 1 I 1 Ind1

Ind2

Ind3

0.0 1.0 0.8 0.6 0.4 0.2

Ind2

Ind3

Ind1

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4

Le dendrogramme combinant les deux types de données montre des distances de regroupement qui diffèrent à la fois de celles des dendrogrammes établis sur les seules données morphologiques ou sur les seules données moléculaires. Nous pouvons donc en conclure que l'information fournie par la combinaison des deux jeux de données est plus proche de la

réalité de la situation.

733.02211

11J1,2 =++

= 375.0376

6J1,3 =++

= 333.0486

6J2,3 =++

=

Ind3Ind2Ind1

Ind3

Ind2

Ind1 10.733 10.375 0.333 1

Ind3Ind2Ind1

Ind3

Ind2

Ind1 10.733 10.375 0.333 1

1

0.554 1

Ind3Ind12

Ind 3

Ind 1

2

0.5542SSS 2,31,3

(1,2)3 =+=

1

0.554 1

Ind3Ind12

Ind 3

Ind 1

2

0.5542SSS 2,31,3

(1,2)3 =+=

Ind2

0,0 1,0 0,8 0,6 0,4 0,2

Ind3

Ind1

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1

Annexe 9 de: Logiciels d'analyse de la diversité génétique

Référence des logiciels Arlequin Schneider, S., D. Roessli and L. Excoffier. 2000. Arlequin: A Software for

Population Genetics Data Analysis, Version 2.000. Genetics and Biometry Laboratory, Dept. of Anthropology, University of Geneva, Switzerland.

CLUSTAL W Thompson, J.D., D.G. Higgins and T.J. Gibson. 1994. CLUSTAL W: improving the

sensitivity of progressive multiple sequence alignment through sequence weighting, position-specific gap penalties and weight matrix choice. Nucleic Acids Res. 22:4673-4680.

DnaSP Rozas, J. and R. Rozas. 1995. DnaSP, DNA sequence polymorphism: an

interactive program for estimating population genetics parameters from DNA sequence data. Comput. Appl. Biosci. 11:621-625.

GDA Lewis, P.O. and D. Zaykin. 1999. Genetic Data Analysis: Computer Program for

the Analysis of Allelic Data, Version 1.0 (d12). Distribué par les auteurs. GENEPOP Raymond, M. and F. Rousset. 1995. GENEPOP (version 1.2): Population

genetics software for exact tests and ecumenicism. J. Hered. 86:248-249. GeneStrut Constantine, C.C., R.P. Hobbs and A.J. Lymbery. 1994. FORTRAN programs for

analysing population structure from multilocus genotype data. J. Hered. 85:336-337.

MacClade Maddison, D.R. and W.P. Maddison. 2000. MacClade. Version 4. Sinauer

Associates, Sunderland, MA.

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2

MALIGN Janies, D. and W.C. Wheeler. 1998. MALIGN.pdf: Documentation for MALIGN,

software for multiple alignments of DNA sequences. Distribué par les auteurs via Internet à <ftp://ftp.amnh.org/pub/molecular/malign/>.

MEGA2 Kumar, S., K. Tamura, I.B. Jakobsen and M. Nei. 2001. MEGA2: Molecular

Evolutionary Genetics Analysis software. Bioinformatics 17(12):1244-1245. NTSYSpc Rohlf, F.J. 2002. NTSYS pc: Numerical Taxonomy System, Version 2.1. Exeter

Publishing, Setauket, NY. PAUP* Swofford, D.L. 2002. PAUP*: Phylogenetic Analysis Using Parsimony (*and Other

Methods), Version 4. Sinauer Associates, Sunderland, MA. PHYLIP Felsenstein, J. 1993. PHYLIP (Phylogeny Inference Package), Version 3.5c.

Distribué par l'auteur. POPGENE Yeh, F.C., R.C. Yang, T.B.J. Boyle, Z.H. Ye and J.X. Mao. 1997. POPGENE, the

User-Friendly Shareware for Population Genetic Analysis. Molecular Biology and Biotechnology Centre, University of Alberta, Canada.

PowerMarker Liu, J. 2003. PowerMarker: New Genetic Data Analysis Software, Version 3.0.

Logiciel gratuit distribué par l'auteur via Internet à <http://www.powermarker.net>

SITES Hey, J and J. Wakeley. 1997. A coalescent estimator of the population

recombination rate. Genetics 145:833-846. Structure Pritchard, J.K., M. Stephens and P. Donnelly. 2000. Inference of population

structure using multilocus genotype data. Genetics 155:945-959.

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3

TFPGA Miller, M.P. 1997. Tools for Population Genetic Analysis (TFPGA), 1.3: A

Windows Program for the Analysis of Allozyme and Molecular Population Genetic Data. Distribué par l'auteur.