BPL LTID

5/10/2018 BPL LTID - slidepdf.com

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ENTRÉE ET SORTIE DU LABORATOIRE

Entrée dans le laboratoire

Le professeur ouvre la porte du laboratoire et autorise l’entrée desélèves.1. Déposer le sac sous la paillasse de son poste de travail2. Accrocher ses vêtements dans le vestiaire3. Revêtir sa blouse4. Ôter bagues, bracelets, montre… et les ranger soigneusement5. Attacher les cheveux6. Décontaminer la paillasse avec de la javel, laisser sécher7. Se laver les mains9. Installer sur la paillasse le matériel personnel indispensable, le reste étantdans le sac ou sur le haut de paillasse.

Sortie temporaire du laboratoire1. Ôter sa blouse et la plier sommairement sur le tabouret du poste detravail2. Se laver les mains3. Remettre éventuellement ses vêtements d’extérieur.

Retour après une sortie temporaire

1. Accrocher ses vêtements dans le vestiaire2. Revêtir sa blouse3. Se laver les mains.

Sortie du laboratoire en fin de TP1. Ranger ses affaires personnelles dans le sac2. Décontaminer la paillasse avec de la javel, laisser sécher3. Vider la poubelle de paillasse dans la grande poubelle4. Ranger les différents éléments du poste de travail dans le bac à dissectionattribué à chaque poste (vérifier concordance des N°)

5. ranger la blouse dans le vestiaire6. Se laver les mains!7. Remettre ses bagues, bracelets, montre…8. Reprendre ses vêtements et son sac9. Sortir du laboratoire.Le professeur referme la porte de la salle.

- Mise en place des Bonnes Pratiques de Laboratoire (BPL) au laboratoire de Microbiologie au LTID-Stéphanie MAS professeur stagiaire de Biotechnologies Biochimie-génie biologique IUFM de TOULOUSE-FRANCE



MOYENS DE PROTECTION DU MANIPULATEUR

Protection passive

− Blouse propre et fermée− Cheveux attachés en arrière, les mèches et franges retenues à l’aide debarrettes.

Protection active

− Respect des règles de sécurité et des procédures − Nettoyage systématique des matériels, équipements et surfaces de travail− Conscience permanente de n’être pas seul dans le laboratoire− Matériels spécifiques, bien utilisés et bien entretenus

LE LAVAGE DES MAINS

− Ouvrir le robinet− mouiller les mains−

se savonner les mains pendant au moins 30 secondes sans oublier lesespaces interdigitaux et les ongles

− rincer soigneusement




GESTION DES RISQUES CHIMIQUE ET BIOLOGIQUE

Risque chimiqueEn cas de contamination personnelle− Cesser tout mouvement− garder son calme− informer immédiatement l’enseignant qui dirige la suite des opérationso une partie non sensible (mains…) du corps est concernée!: lavageabondanto une partie sensible du corps est concernéeœil: retrait immédiat d’éventuels lentilles de contact, lavage abondant,paupières

maintenues écartées. Rinçage final abondant des yeux avec un collyre ou àdéfaut avecde l’eau physiologiquebouche: rinçage abondant à l’eaudès l’intervention, l’infirmière est informée

En cas de contamination de son environnement− Informer (faire informer) l’enseignant

− suivre les consignes données par l’enseignant

− se laver les mains en fin d’opération

Risque biologiqueEn cas de contamination personnelle− Cesser tout mouvement− garder son calme− informer immédiatement l’enseignant qui dirige la suite des opérationso une partie non sensible (mains…) du corps est concernée: lavage abondantavec undétergento une partie sensible du corps est concernée:oeil: retrait immédiat d’éventuels lentilles de contact, lavage abondant,

paupièresmaintenues écartées. Rinçage final abondant des yeux avec un collyre ou àdéfaut avecde l’eau physiologique,bouche: rinçage abondant à l’eau,dès l’intervention, l’infirmière est informéeo les vêtements touchés sont systématiquement ôtés et traités à l’aide d’undétergent(et lavés ultérieurement).




o se laver les mains en fin d’opération.

En cas de contamination de son environnement− Traiter largement, s’il n’y a pas de risque d’extension de la contamination,la zonecontaminée à l’aide de javel

UTILISATION COURANTE DES MICROSCOPES

Début de séance

− Prendre un microscope dans l’armoire le sortir de sa boîte− Ι nstaller le microscope au niveau du poste de travail.

− Connecter l’ampoule de l’appareil au secteur

− les microscopes doivent être manipulés avec beaucoup dedélicatesseo ne pas faire glisser le microscope,o soulever légèrement le microscope par la base du statif et par lapartie arrière de la potence

− inspection rapide du microscope, parties optiques incluses

Utilisation du microscope

− Objectif à immersion: 100X; 90X nécessitent de l’huile àimmersion

− autres objectifs: 10X, 40X. Ils sont altérés par l’huile. En casd’erreur!:o procéder au nettoyage selon les consignes fournies,Il faut impérativement respecter les règles suivantes:

− effectuer la mise au point initiale à l’aide de l’objectif 10X

− passer à l’objectif 40X ou passer à l’objectif 100X sans déplacerla platine (un simple réglage micrométrique fin suffit).

Nettoyage

− Lors de chaque utilisation, et chaque fois que nécessaire(objectif à sec souillé par de l’huile) avec du xylène




Fin de séance

− Nettoyer soigneusement les oculaires et les objectifs avec dupapier de texture fine. Cette opération est remplacée par lenettoyage à l’éther de fin de journée

−

Débrancher l’ampoule et la ranger soigneusement en veillant àne pas endommager le filtre et l’ampoule

− Remettre le microscope dans la boîte où vous l’avez pris





3RBPrévention des Risques Biologiques

Protocole de Bonnes Pratiques deLaboratoire - fiche n°11

LivretSécurit

é

Conduite à tenir en cas d'accidentexposant à un produit potentiellement infectieux

Rester calme

Donner immédiatement les premiers soins

En cas de projection sur les muqueuses et dans les yeux

• Rincer abondamment à l'eau (eau courante ou lave-œil si eau changée

quotidiennement) ou au sérum physiologique (si port de lentilles decontact, laisser l'eau les décoller)

En cas de contact avec la peau (sans lésion provoquée)

• Nettoyer la zone atteinte à l'eau et au savon, puis rincer.

• Désinfecter avec de l'eau de Javel à 1,2 degrés chlorométriques ou del'alcool à 70°

En cas de piqûre ou blessure

• Nettoyer la zone cutanée lésée à l'eau et au savon, puis rincer

• Désinfecter par un bain prolongé (au moins 5 minutes) dans undésinfectant (eau de Javel à 1,2 degrés chlorométriques ou alcool à 70°)

Appeler ou faire appeler les services de soin et d'urgence

Traiter les surfaces et les matériels contaminés

http://3rb.free.fr/bonnes_pratiques.htm

http://3rb.free.fr/sommaire.htm



3RBPrévention des Risques Biologiques

Protocole de Bonnes Pratiques de Laboratoire - fiche n°0

LivretSécurit

é

Règles de base

Respecter les bonnes pratiques de laboratoire• Porter une blouse non inflammable, propre, couvrante (en particulier les

manches), fermée et réservée au laboratoire.

• Avoir les cheveux attachés et les ongles courts.• Ne porter aucun bijou aux poignets ou aux doigts.• Se laver les mains régulièrement.

• Ne rien mettre à la bouche (ni boire, ni manger, ni mâcher du chewing-gum, ni fumer).

• Ne jamais pipeter à la bouche.• Utiliser du matériel adapté et conforme.• Limiter et remplacer dans la mesure du possible le matériel coupant et

piquant.

• Eliminer les produits et matériels contaminés.• Utiliser des moyens de protection collective (PSM : Poste de Sécurité

Microbiologique) et individuelle (gants, lunettes, masques,...)lorsqu’ils

sont nécessaires et connaître leurs limites.

• Nettoyer et désinfecter paillasse et matériel après manipulation.

Avoir une attitude réfléchie

• Considérer la salle de Travaux Pratiques comme un laboratoire

• Gérer le temps et l’espace.

• Organiser le poste de travail et les manipulations : Analyses de

Protocoles.

• Gérer l’élimination des déchets sans oublier le risque chimique.

Savoir agir en cas d’accident



http://3rb.free.fr/pbp01.htm







http://3rb.free.fr/analyses_de_protocoles.htm
























Réflexion sur la prise en compd'attitude sécuritaire au moment de

examePrise en compte systématique de la sécurité en regard du risque biologique lors épreuves pratiques des examens de l'éducation nationale aux laboratoires debiochimie- biologie

Consignes à respecterLes consignes indiscutables :

Blouse couvrante, fermée mise à l'entrée du laboratoire et enlevée à sa sortie.

Lavage des mains avant la sortie du laboratoire

Aucun objet porté à la bouche dans le laboratoire (pipette ou stylo…)

Organisation de la paillasse et gestion des matériels souillés (papiers ou gants) adapt

Ces consignes, si elles ne sont pas respectées, donnent lieu à une pénalité précissur le barème de notation du sujet, ce dernier portant la mention "les règles desécurité courantes seront respectées ; dans le cas contraire, le candidat pourra êsanctionné de … points". Un seul manquement donne lieu à l'intégralité de lapénalisation.

Les autres consignes :

Port de gant à usage unique pour tenir le matériel contenant du sang ou un dérivésanguin (exemple : remplissage de capillaire pour microhématocrite, confection de frottissanguin…)

Pas de contact des gants usagés avec parties de la peau ou vêtements non protégés omatériel personnel utilisé hors du laboratoire

Pas de contact des gants usagés avec du matériel commun (clavier d'ordinateur, despectrophotomètre, microscope,…)

Ces consignes, plus difficiles à évaluer au cours d'une épreuve (erreurs fugitives non consensuelles…) pourront faire l'objet d'une évaluation ponctuelle, le sujetintégrant l'évaluation positive d'un ou plusieurs gestes sécuritaires lors de l'examdes candidats sur une technique précise, le barème en faisant alors explicitemenmention.

Commentaires

Il est parfois difficile de s'accorder sur la qualité sécuritaire ou antisécuritaire d'un geste ou d'unattitude. Aussi, pour guider la réflexion, ayons à l'esprit que d'une manière générale, il s'agit de :

Respecter les bonnes pratiques de laboratoire afin d'éviter la contamination des autrede soi-même et du produit à étudier

Ne porter des équipements de protection individuelle (EPI) que lorsqu'ils n'interfèrentavec la prévention collective ou qu'ils n'entraînent pas un déplacement du risque (latex-chaleur).

Pour réfléchir au port des gants en particulier, on peut s'aider des tableaux suivantsRéflexion sur le port des gants en microbiologie en milieu scolaire


http://3rb.free.fr/communication/reflexgant.htm

http://3rb.free.fr/communication/reflexgant.htm



Réflexion sur le port des gants


http://3rb.free.fr/communication/reflexion_sur_les_gants_en_general.html

http://3rb.free.fr/communication/reflexion_sur_les_gants_en_general.html



3RB Document de synthèse 3RB

Renseignements pratiques en Microbiologie

o Lutage et état frais

La pratique du lutage des états frais n’a pas de signification d’un point de vuesécuritaire.Au contraire, elle impose un surcroît de manipulation de l’échantillon, donc à ce titreaugmente le risque éventuel. Elle n’est plus utilisée pour les états frais de façongénérale, y compris dans le cas de l’étude des dermatophytes comme dans celui desgermes anaérobies (pour ces germes, quand bien même l’absence de lutage nuiraità la mobilité, ce qui n’est pas certain, ce caractère n’est pas nécessaire àl’identification...).

• Il est cependant parfois utilisé pour conserver certaines préparations rares,notamment en parasitologie.

• Dans tous les cas, il convient d'adapter la taille du dépôt à la taille de lalamelle afin d’éviter tout débordement.

o Chocs thermiques

L’ouverture d’ampoules ou de tubes par choc thermique n’est plus une méthodeutilisée en laboratoire.De plus elle n’est pas exempte de risques de brûlures et de projections de produitsou de verre.

Cette technique est donc à déconseiller.

o Fixation à l’alcool à chaud ou à froid ?

La fixation des étalements microbiens à l’alcool se fait par les deux méthodes.Il semble ici s’agir d’une question d’habitude de laboratoire. Il est difficile derecommander une méthode plutôt qu’une autre, on peut néanmoins observer que lafixation à chaud avec flambage de l’alcool présente plus de risques que lafixation à froid, risques de brûlure et de projections de contaminants.

Il est à préciser que la fixation à chaud est déconseillée lors de fixation de produitspathologiques car les cellules qu'ils contiennent seraient abîmées rendant la lecturedifficile.

Lors d’une fixation à froid, le temps de contact avec l'alcool doit êtresupérieur ou égal à 3 minutes.

Voir le document Viabilité bactérienne après fixation


http://3rb.free.fr/communication/viabilite_bacterienne.htm

http://3rb.free.fr/communication/documentation.htm


http://3rb.free.fr/communication/viabilite_bacterienne.htm




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