Contribution A L'étude Des Effets De Quelques Venins De Serpents Sur La Coagulation Du Sang In Vivo

m M v e s Intcrnatlonales de Phgslologlc, 1939, Vol: XLVIII, Fuse. 1. 1

R e p le 9 decembre 1938.

CONTRIBUTION A L’ETUDE DES EFFETS DE QUELQUES VENINS DE SERPENTS

SUR LA COAGULATION DU SANG (( IN VIVOr

PAR

Charles-Joseph H A N U T ( L a b ~ a t o i r e de Phartnacodyitarlrie et de Thdrapeutique de 1’Universilt de Bruxetles)

I. - Introduction

Dans une sCrie de communications antCrieures ( I ) , nous avons etudiC les effets de diffirents venins ophidiques sur la coagulation sanguine in Iritro. I1 nous a paru intiressant d’entreprendre des investigations avec ces mCmes venins in vivo afin de tenter de prC- ciser quelques points relatifs au mCcanisme de leur action sur la coagulation sanguine. Mais avant d’exposer les rhultats de nos recherches, il convient de rappeler succinctement 1’Ctat de nos connaissances actuelles relativement ii I’action des venins de serpents sur la coagulation sanguine in vivo.

Nous envisagerons en premier lieu I’action des venins in vivo sur 1es principaux constituants du plasma qui interviennent lors de la coagulation, puis sur les trois phases essentielles du processus coagulant. Nous examinerons ensuite si les venins modifient le nombre des plaquettes dans le sang circulant.

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A. - ACTION DES VENINS (1 I N VIVO n SUR LES PRINCIPAUX CONSTITUANTS DU PLASMA QUI INTERVIENNENT LORS DE LA COAGULATION

1) Fibrinogine. - L‘action thrombinique des venins coagulants in vifro nous fait facilement comprendre leur action diphasique in vivo; d a m la phase positive, il y a precipitation du fibrinogkne ; dans l a phase negative, le sang est difibrini. La difibrination du sang se fait soit par une thrombose vasculaire nette, soit par un dipdt progressif de fibrine sur les globules rcuges, en rapport avec I’augrnentation de leur resistance A l’hemolyse pendant la phase positive [L. AQUINO (2)] et sur les endothi- liurns. Cette pricipitation ne s’effectue pas seulement au niveau des endothiliums hipatiques, mais de tous les endotheliums en general,

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cornrne le dirnontrent les experiences sur les anirnaux ivisceris ou ceux A foie et intestins lies. Cette interpretation rksulte des travaux de HOUSSAY et SORDELLI (3).

D’aprks ces auteurs, les venins anticoagulants diminuent le fibrinogene sanguin, rnais ce n’est nullernent la cause de leur action anticoagulante.

2) Cytozyme. - Dora POTICK (4) a montre que les venins de Cobra e t de Bothrops Neuwiedi agissent sur les lipides plasmatiques in vivo et plus particulierernent sur les phosphoarninolipides. On conqoit donc que les venins anticoagulants dktruisent le cytozyme in vivo. Signalons encore que le venin de Crotalus adurnanteus, dont I’action anticoagulante n’est pas adrnise par tous les auteurs, detruit aussi le cytozyme, suivant HOUSSAY et SORDELLI (3).

Le venin d’ Ancistrodon piscivorus, anticoagulant in vifro, est coagulant in vivo, en bonne partie A cause de la faiblesse de son pouvoir anti- cyt ozyrnique.

3) Sbozyme. - On peut faire la mime remarque que dam I’etude in vitro : il y a attaque du serozyme par les venins anticoagulants, y compris le Crotalus adamanteus, rnais cette attaque est beaucoup plus faible que celle du cytozyrne.

4) Antithrombine. - ARTHUS (5) prktendait que le venin de Cobra fait apparaitre dans l’organisrne une antithrornbine. Au contraire, d’aprks HOUSSAY et SORDELLI (3), il est excessivernen‘t rare d’observer I’apparition de I’antithrombine dans le plasma des animaux envenimes ; c’est le venin de Crotalus adamanteus qui la faisait le plus souvent survenir dans les experiences de ces auteurs. II n’y a donc rien d’etonnant B ce que I’extirpation complete et sirnultanee du foie, de I’estomac e t des reins ne rnodifie pas I’action des venins sur la coagulation du sang.

5) Ions calcium. - Nous ne disposons pas d’elirnents precis A propos de l’influence des venins sur la teneur du plasma en ions calcium, bien qu’on ait recherchi si la reserve alcaline et la reaction du plasma subissent des modifications aprks injection de venin A I’anirnal.

Selon HOUSSAY et ses collaborateurs (6), la reserve alcaline baisse au moment du choc provoque par les venins de Bothrops alternafa, de Bothrops Neuwiedi et de Naja fripudians, pour revenir A la normale 30 A 60 minutes plus tard et souvent m&rne la depasser quelque peu. Ceci n’est pas particulier aux venins et se retrouve dans tous les i t a t s de choc.

Le pH augmente toujours d’environ 0.04 A 0.16, ce qui est parfois la consequence de la polypnee, mais dont la cause nous ichappe d’autres fois.

GAUTRELET, HALPERN et CORTEGGIANI (7) retrouvent des variations analopes du pH et de la reserve alcaline, apres injection du venin de Vipera uspis. VELLARD et MIGUELOTE-VIANNA (8) montrent que la baisse Iigkre de la rtserve alcaline n’existe qu’au debut de I’intoxication par les venins de Naja fripudians, de Crotalus terrificus et de Bothrops atrox ; lors de la piriode preagonique, la chute de la reserve alcaline s’accentue

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YENINS DE SERPENTS ET COAGULATION SANGUINE 3

dans le cas du venin de Cobra et devient trks considerable avec les venins des deux Crofalinks. CHOPRA, MUKERJEE et CHOWHAN (9) observent, aprks injection du venin d e Cobra au Singe, des oscillations du pH fort variables comme sens et comme intensite.

MENTEN (10) a dirnontri en 1920 que le venin de Cobra ne modifiait @ere la rCaction du.sang, mais que si I’on provoque un i t a t d’acidose par l’anesth6sie B l’ether, 1’incoagulabilitC du sang due 8 l’injection de ce venin s’attenue au fur et A mesure que la reaction alcaline du plasma devient plus faible.

B. - ACTION DES VENINS IN VIVO SUR LES PHASES DE LA COAGULATION

ARTHUS (5) admet, in vivo cornme in vitro, une action du venin de Cobra sur l a transformation du skrozyme en thrombine. HOUSSAY et SORDELLI (3) rapportent l’action anticoagulante, in vivo cornme in vitro,

la destruction du cytozyme. Les venins de Daboia e t de Bungarus fusciatus acciI4rent fortement

la production de thrombine; ils produisent, par 18, une phase positive disproportionnee avec leur pouvoir coagulant in vitro (puisque l’un est faiblement coagulant et I’autre anticoagulant).

L‘action coagulante in vivo du venin d’Ancistrodon piscivorus, anticoagulant in vitro, s’expliquerait non sedement comme nous l’avons vu, par la faiblesse du pouvoir anticytozymique, mais aussi par une forte acceleration de la troisikrne phase.

c. - ACTION DES VENINS SUR LES PLAQUETTES SANGUINES

Les plaquettes sont la source principale du cytozyme qui, suivant BORDET e t DELANGE (11) joue un rBle primordial dans le mecanisme de la coagulation. I1 importe donc de connaitre de fagon precise les variations du nombre des thrombocytes a p r b administration de venin.

Peu d’auteurs ont CtudiC ce p rob lhe , B notre connaissance. ROYER (12) et OTSUKA (13) signalent une diminution du nombre des plaquettes a p r h injection de venin de Cobra e t une augmentation, au contraire, aprks administration de venin de Trimeresums okinuvensis.

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11. - Technique

Griice A 1’amabilitC de plusieurs savants auxquels nous adressons nos vifs remerciements, nous avons eu A notre disposition les venins secs suivants :

l o Les venins de Cobra (Naja tripudians) (khantillon I), de Vipera aspis, de Cerastes aegyptiacus et de Crotalus terrificus (khantillon I), provenant de 1’Institut Pasteur de Paris, envoyis par M. CESARI.

20 Les venins de Bothrops alfernufa, Bothrops Neuwiedi, Bothrops fanceolata et Crotalus terrificus (khantillon 11) provenant de 1’Institut de Butantan, ti Sao Paulo, envoyis par M. Vital BRAZIL.

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30 Les venins de Du6oiu eleguns et de Co6rra (ichantillon 11) offerts par le Colonel S. TAYLOR, de Kasauli (Inde).

40 Les venins de Bothrops atrox et de Bothrops nummifera, envoy& par M. C. PICADO, de San Josi (Costa Rica).

Nous avons dissous ces venins soit dans I’eau physiologique (EP), soit dans le milieu tampon de Sllrensen A pH = 7.347 constitui par un melange de 4 parties de solution 1/15 rnoleculaire de phosphate bisodique Na,HPO, + 2H,O (contenant 11 g. 876 mg. par litre d’eau bidistillee) et d’une partie de solution 1/15 moliculaire de phosphate monopotassique KH,P04 (renfermant 9 g. 78 mg. par litre d’eau bidistillie). Les solutions de venin ont toujours i t i employies aussitbt aprks leur obtention.

Nos recherches ont i t i effectuies le plus souvent chez des Lapins de 2 B 2.5 kg, maintenus B jeun depuis la veille, auxquels nous avons prilevi du sang B la carotide, en ayant soin de rejeter les premieres gouttes qui auraient pu Ctre contaminees par du suc de tissu. Ce sang a i t i recueilli lors de l a plupart des experiences dans un dixitme de son volume de solution oxalatie isotonique (NaCI 650 mg., oxalate sodique 1 g., eau distillee q. s. p. 100 cc.). Nous avons immidiatement soumis ce sang oxalati A une centrifugation d’environ 20 minutes B vitesse moyenne (3000 A 4000 tours i~ la minute). Nous avons ensuite dicanti le plasma et nous I’avons soumis A une d e u x i h e centrifugation de 20 A 30 minutes A grande vitesse (7000 A 9000 tours B la minute) de manikre B iliminer la majeure partie des ilirnents figuris encore en suspension, y compris les plaquettes. Ce plasma oxalate tres limpide a servi B priparer le plasma dioxalati diluk (utilisi comme solution de fibrinogene) et le serum diluC (employe comme solution de sirozyme).

Nous avons eu recours B des Lapins pesant 3 A 4 kilogr. lors des expiriences o i ~ nous avons i tud i i I’equilibre protiique du plasma.

Lors de certaines expiriences nous avons purifii le plasma dioxalati dilui en le traitant au moyen de phosphate tricalcique, ce qui fait dis- paraitre en particulier les traces de cytozyme. On est en droit de considirer ce plasma dioxalati purifii comme une solution de fibrinogkne privie de la plus grande partie de ses impuretis.

Nous avons, pour le dosage du fibrinogkne, recueilli le sang carotidien dans un dixikme de son volume de solution aqueuse de citrate sodique A 3.55% e t nous avons obtenu du plasma citrati trks fluide en centrifugeant de la mtme maniere que lors de la preparation du plasma oxalate trks fluide.

Nous avons utilisi de la solution physiologique ou E P (8 g. 500 mg. de NaCl par litre d‘eau bidistillie), de la solution physiologique calcique forte ou EPCa (8 g. 500 mg. NaCI, 1 g. 50 mg. CaCI, par litre d’eau bidistillie). La suspension de cytozyme a eti obtenue en partant de muscles de Lapin.

Les diffirentes solutions employees au cours des essais ont i t6 pri- parees en partant d‘eau bidistillie et de produits chimiques aussi purs que possible. Elles ont i t6 conservees B la glacikre.

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VENINS DE SERPENTS ET COAGULATION SANGUINE 5

L’itude de l’influence Cventuelle des diffirents venins sur les trois phases principales de la coagulation et la quantit i de thrombine a kt6 effectuie de la mCme manikre que dans nos pricidentes recherches sur les effets des venins in vifro.

pour itablir le temps nicessaire B la coagulation, nous avons eu recours g des tubes en pyrex de 12 mm. de diametre et de 60 mm. de hauteur. ~ o u s avons considire comme temps de coagulation le nombre de minutes, mesure au moyen d’un chronomktre A arrit, necessaire pour obtenir un caillot bien constifui. La ditermination fut faite en double, triple ou quadruple. Les donnies mentionnies A titre d’exemples dans les divers tableaux reprisentent la moyenne de 2, 3 ou 4 risultats concord.ants. L’icart admis entre les rkul ta t s varie avec l a grandeur du temps de coagulation mesuri ; il doit Ctre infirieur A 2 minutes si la coagulation a lieu en mohs de 20 minutes tandis qu’il peut dipasser ligkrement ce chiffre pour une coagulation beaucoup plus lente.

Sauf en certains cas spicialement mentionnis, tous les. essais ont Cti effectues 5 la temperature du laboratoire, c’est-&dire aux environs de 20 A 220 c.

III. - Action (( in vivo 1) des venins sur la coagulation du plasma sanguin

Meme lorsqu’on Ctudie l’action des venins sur la coagulation in vifro, on ne doit pas s’attendre a un rbultat toujours quantita- tivement le mCme au cours de diverses experiences. Cette variabilite rbulte de ce que :

1) le plasma oxaiatC provient, lors de chaque essai, d’un Lapin different; dts lors les teneurs en fibrinogkne, en proserozyme, en cytozyme et en antithrombine ne sont pas ntcessairement constantes ;

2) les paillettes de venin utiliskes lors d’une experience peuvent montrer des differences dans leurs propriCtb vis-h-vis d’autres portions du mCme venin employ& lors d’autres essais.

Toutefois s’il peut exister des variations dans les effets des venins in vitro, celles-ci ne sont jamais trks considCrables.

Les conditions sont beaucoup moins bonnes lorsqu’on Ctudie Ies effets d’un venin in vim.

On injecte a un Lapin une quantitd dCterminCe de venin et on recherche la coagulabilitC du plasma prClevC avant I’injection, puis a des moments divers a p r b celle-ci. Le grand facteur de varia- biliti des rbultats d’une expirience a l’autre est la riat ion indi- viduelk du lapin au venin : et il y a la, en realite, une foule de diffi-

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6 CHARLES- JOSEPH HANUT

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rence possible d’absorption, de ripostes vasculaires, de rCaction hCpatique avec formation d’antithrombine, de reactions nerveuses meme (dkcharge d ’adrknaline, en particulier).

Prenons le venin de Cerastes pour exposer la technique employee : nous injectons dans la veine saphkne d’un Lapin normal, a jeun, d’environ 2 kg., 1 cc. (par kg.) (l) de solution de venin dam l’eau physiologique a 1 : 10 OOO, 1 :25 000, 1 :50 OOO ou 1 : 100 000. Nous prdevons du sang A la carotide avant I’injection puis 10 minutes et une demi-heure a p r b celle-ci. Nous preparons du plasma oxalate t r b limpide de Lapin et nous recalcifions 0.2 cc. de ce

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C. sans rec.

TABLEAU I

Numkro de

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(0.2 cc. de plasma oxalate + 0.8 cc. d’EPCa)

avant I’inj ection

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a p r h I’injection

(l) Les doses injectkes sont toujours indiqukes par kilogramme de poids corporel.

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plasma avec 0.8 cc. d’EPCa. Le tableau I rQume les rbultats ainsi obtenus. (l).

Qmme on le voit, pour le venin de Cermtes, les diffkrences d’action d’un Lapin $I l’autre ne sont pas tr& marquCes.. Aprks chaque injection de 1 cc. de solution B 1 : 10 000, 1 : 25 OO0 ou B 1 : 50 OOO, il y a accClCration de la coagulation (2). Chez les Lapins 3, 5, 7 et 8, on note, 10 minutes aprks l’injection, une coagulation spontanCe du plasma non recalcifik. La solution de venin A 1 : 100 0oO (Lapins 13 et ‘14) n’a pas modifiC de f a p n appreciable la coagulation. Le tableau I1 rassemble Ies rQultats obtenus aprks I’injection

intrasaphkne de 1 cc. de l’un des venins suivants : Vipera uspis, Cobra (Cchantillons I et 11), Crotalus terrificus (Cchantillon 11).

Comme on le voit, le venin de Yipera aspis s’est montrC coagulant dans toutes les expiriences, sauf dans une (No 4) o i ~ il n’a eu aucun effet rCel. L’Cchantillon I1 de venin de Cobra est anticoagulant aux concentrations de 1 : 1O.OOO et de 1 : 25,000. A I :50 OOO et 1 : 100 OOO il y a absence d’effet ou action legkrement coagulante suivant le moment du prdkvement. A la concentration de 1 : 10OO0, 1’Cchan- tilloq I de venin de Cobra a parfois manifesti une t r h ICgkre action anticoagulante.

Pour le venin de Crotalus terrificus (Cchantillon 11) on remarque des differences t r h apprkciables d’un Lapin B l’autre. Chez 4 h p i n s (18 21 21)’ ce venin a acctlCrC la coagulation ; chez d e w autres (22 et 23) il l’a retardee. Enfin chez un dernier Lapin (24) on a constate successivement un retard puis une accCICration de la ma- gulation. ces divergences ne doivent pas trop nous surprendre. Nous avons, en effet, constate que le venin de Crotalus terr@cus (et principalement 1’Cchantillon 11) possCdait in vitro en m&me temps des proprietis coagulantes et antimagulantes.

Recherchons maintenant chez le Lapin les effets de I’injection intrasaphkne de 1 cc. de solution de venin de Bothrops atrox a diverse dilutions. Le tableau I11 groupe les rbultats ainsi obtenus.

Cornme on le voit, le venin de Bothrops atrox a une action coagulante jusqu’a la dilution de 1 : 10OOOO0OO0O; elle se manifeste

(l) Nous utilisons dam les tableaux les abreviations suivantes : C. C. = caillot complet ; C. V. = caillot en voile. Ouand la coagdation (par exemple du plasma oxalati) se produit, sous I’inffuence d’un venin, avant ]’addition d’eau physiologique, nous l’indiquons par l’abrbviation It C. sans rec. n.

(*) Les caillots observks lors ‘des experiences des tableaux I i I V ont toujours k t k complets. Aussi ne le mentionnons-nous pas dans ces tableaux.

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soit par une acceleration de la coagulation du plasma recalcifik, soit par une coagulation du plasma oxalate avant la recalcification. Ce dernier phinomkne est frequent aux dilutions de 1 :5OO.O00 a 1 :5 OOOOOO. On l’observe exceptionnellement a la dilution de 1 : 1 OOOOOOOOO. A la dose de 1 :500000, on constate de I’hCmo- lyse en mCme temps que l’action coagulante.

Nous avons Cgalement CtudiC l’action des venins d’autres esptces de Bothrops sur la coagulation in vim, mais seulement a la concentration relativement elevee de 1 : 10000. Comme le tableau IV le montre, le venin de Bofhrops nurnrnifera a une action coagulante modCree. Les venins de Bothrops alternafa et de Bofhrops Neuwiedi ont un effet tr& coagulant (coagulation du plasma oxalate non recalcifie) suivi, une heure a p r b l’injection, d’une action anticoagulante (le plasma oxalate recalcifie ne coagule pas). Cette (( phase negative 1) ou piriode secondaire d’incoagulabilite s’observe aussi avec certaines concentrations du venin de Bothrops atrox.

Signalons, enfin, que le venin de Daboia a egalement une action coagulante trts intense (tableau IV).

IV. - MBcanisme de l’action des venins sur la coagulation (( in vivo 1)

Nous venom de difinir I’action de diffkrents venins de Serpents sur la coagulation du plasma sanguin. Essayons maintenant d’en saisir le micanisme pour chacun des venins que nous avons eu 1’00 casion d’ktudier.

1) Venins des Bothrops Le phknomtne predominant dans l’action des venins des Bofhrops

(sauf celui de Bofhrops nurnrnifera) sur la coagulation in viva, c’est qu’aprts leur injection, le plasma oxalate non recalcifie coagule spontankment. Tout se passe comme si le plasma obtenu aprts l’injection de venin contenait une thrombine qui le ferait coaguler. Dans ce cas, puisque le mecanisme ordinaire de la coagulation n’est pas mis en jeu, nous devons nous attendre a retrouver du proserozyme dans le liquide de defibrination du caillot. En est-il ainsi ? Voici, a titre d’exemple, le compte rendu d’une experience faite a ce propos.

un Lapin i jeun d’environ 2 kg., 1 cc. (par kg.) de venin de Bofhrops afrox a 1 : 500 OOO. On prClkve 10 minutes aprts

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l’injection, 30 cc. de sang oxalate. Aprb une courte centrifugation (10 minutes, sinon il y a coagulation du sang total au cows de la centrifugation), on separe Ies globules rouges. On centrifuge une deuxieme fois plus longuement (30 minutes) : le plasma oxalate -at coaguli. On le defibrine et on filtre sur laine de verre. On ajoute 4 volumes d’EPCa a 1 volume du Iiquide de defibrination. Aprk des laps de temps variables, on met en contact 5 gouttes de ce melange et 5 gouttes de plasma dioxalate purifie. Le tableau Vresume les r&uItats ainsi obtenus.

TABLEAU V

Laps de temps entre la preparation dumelange de 1 vol. de liquide de defibrination e t de 5 vol. d’EPCa et l’addition de 5 gouttes de plasma dioxalatk purifie A 5 gouttes de ce

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Comme on le voit dans le tableau V, 15 minutes aprks l’addition de I’EPCa au liquide de defibrination, ce melange a acquis la pro- priCt.6 de coaguler le fibrinogene (present dans le plasma dioxalate purifie). Le laps de temps nicessaire pour la coagulation diminue et atteint son minimum a partir de la 25e minute consicutive a l’addition d’EPCa au liquide de dkfibrination. Par consequent, il persiste du proserozyme dans le liquide de defibrination du plasma oxalate, obtenu a p r b injection de venin de Bofhrops afrox et ayant coagulk spontanement. On est donc autorise a admettre que c e plasma a coagule parce qu’il renfermait une thrornbine.

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2) Venin de Cerastes

Nous allons Ctudier en detail l’action du venin de Cerastes sur Ies tmis phases de la coagulation in vivo ; ceci nous permettra d’exposer ensuite plus schimatiquement les rQultats obtenus avec les autres venins.

Action sur la premidre phase de la coagulation. - Nous avons inject6 a un Lapin normal et a jeun, d’environ 2 kg., 1 cc. (par kg.) de venin de Cerastes a 1 : 10 OOO par voie intrasaphbne. Nous avons prklevi du sang 21 la carotide avant I’injection, puis 10 et 30 minutes a p r b celle-ci. Ces trois echantillons ont servi a prCparer du plasma oxalate trks limpide. A chacun de ces trois plasmas nous avons ajoutC 2 volumes de solution de staphylocoagulase (l). Un caillot s’est produit dans chacun de ces melanges. Nous avons dCfibrinC au bout de 30 minutes puis nous avons laisse les liquides ainsi obtenus encore 20 minutes a l’ituve. Aucune nouvelle coagulation n’ayant eu lieu, nous avons preleve un volume de chacun de ces (( plasmas de staphylocoagulase 1) et nous y avons ajoutC 4 volumes d’EPCa. Aprks des laps de temps variables nous avons preleve a la pipette 5 gouttes de ces melanges et nous les avons introduites dans des tubes contenant 5 gouttes de plasma dioxalatk purifie. Le tableau VI reproduit les donnCes ainsi recueillies.

Quelles conclusions pouvons-nous tirer de ce tableau? La toute premikre apparition de skrozyme a lieu entre 1 et 5 minutes pour l’echantillon prCIeve avant l’injection, entre 20 et 25 minutes pour celui recueilli 10 minutes aprb cette dernikre et entre 5 et 10 minutes pour la prise faite 30 minutes aprbs I’injection de venin. Comme on le voit, la transformation du proserozyme en sirozyme est retardee par l’injection de venin de Cerastes. Ceci est evident pour l’lchantillos de plasma prClevC I0 minutes a p r b I’injection. Avec l’echantilion de plasma recueilli 30 minutes aprks I’injection, on constate, a mesure que le plasma de staphylocoagulase est rest6 fluide plus longtemps en contact avec l’EPCa, tout d’abord une acceleration de la coagulation du melange total, puis un retard de plus en plus marque par rapport aux constatations effectudes dans les mCmes conditions avec l’ichantillon de plasma recueilli avant

(l) Nous tenons A remercier M. le Dr Willy MUTSAARS qui a bien voulu pr&. parer cette solution.

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l’injection de venin de Cerustes. C’est un phinomhe analogue a celui que nous avons observC en Ctudiant l’action des venins de Vip& rinks sur la premiere phase in vitro. Nous devons donc admettre qu’il y a d’abord augmentation croissante du sCrozyme, puis inactivation du sirozyme formi, soit par le venin se trouvant en petite quantiti dam le plasma, soit sous I’influence de principes lytiques ayant pris naissance a p r b l’injection du venin.

Action sur les 20 et 3e phases de la coagulation. - Nous r6u- merons une expirience faite a ce sujet, puis nous donnerons un tableau des diffirents rbultats obtenus et nous essayerons d’en tirer une conclusion.

Nous avons inject6 a un Lapin a jeun, d’environ 2 kg., 1 cc. (par kg.) de venin de Cerastes a 1 150 OOO. Nous avons prelevC du sang avant l’injection, puis 10 et 30 minutes a p r b celle-ci. Nous avons prCparC des plasmas oxalatQ qui nous ont servi a obtenir des sirums diluis et des plasmas dioxalatb diluk.

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Nous avons eu recours au serum dilut, employe a 1’Ctat frais (comme solution de thrombine). Afin d’essayer de reconnaitre si la qwntite de thrombine avait subi des modifications sous I’influence du venin, nous avons ajoute, a 0.4 cc. de chacun des serums frais, 0.4 cc. de plasma dioxalate vieilli purifii (provenant d’un autre Lapin normal et servant tie solution de fibrinogkne).

Voici les resultats ainsi obtenus :

avant l’injection ............. C. C. 42‘ 5’‘’ 10 minutes aprks celle-ci ...... C. C. 47’ 20”, 30 minutes a p r b celle-ci ...... C. V. 51’ 20”.

Aprb l’injection de venin de Cerustes, on constate donc un leger retard de la coagulation. Ceci est dO ou bien ii une diminution de la quantite de thrombine, ou bien a l’augmentation de la teneur du serum en antithrombine.

Les mCmes skrums, qu’on a laissk vieillir la tempkrature ordinaire, ont etC employ& le lendemain, pour etudier la transformation du serozyme en thrombine (2e phase). A 0.3 cc. de skrum vieilli, provenant d’un autre Lapin normal, on ajoute 1 goutte de suspension de cytozyme et 0.3 cc. d’EPCa puis, a p r b 20 minutes, 0.3 cc. de chacun des plasmas dioxalatb vieillis. Voici les temps de coagulation ainsi obtenus :

avant l’injection ................... 4‘ ZO”, 10 minutes aprks celle-ci ............ 3‘ 25“’ 30 miy te s apres celle-ci ............ 2‘ 35“.

Comme on le voit, le venin de Cerasfes accilkre l’action de la thrombine sur le fibrinoghe.

’ Nous avons naturellement eu soin de verifier que I’injection du venin de Cerastes a eu un effet accklkrateur sur la coagulation du plasma oxalate recalcifie. Dans ce but nous awns preleve 0.2 cc. de chaque Cchantillon de plasma oxalate frais, provenant de l’animal en expkrience et nous y avons ajoute 0.8 cc. d’EPCa. Nous avons obtenu de cette manikre les valeurs suivantes :

avant I’injection .................. 25’ 35”,

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Le tableau VII rbume les rbultats obtenus pour la coagulation totale et Iors de I’Ctude des deuxikme et troisikme phases dans 1’expC- rience prCcCdente (111 du tableau) et dans 3 autres essais a p r b l’injection intrasaphkne de 1 cc. de solution de venin de Cerastes 3 1 :ZOO0 ou 1 :50000.

Dans les experiences I et 11, nous constatons un effet entravant tr& marque sur la transformation dn sirozyme en thrombine et dans l’experience I11 une action legkrernent inhibitrice suivie d’un effet quelque peu favorisant. Lors de l’expirience IV, oh la coagulation du plasma oxalate recalcifie n’a C t C que ICgtrement accC1Cree sous I’influence du venin de Cerustes a 1 :5OOOO, on n’a pas note la rnoindre action sur la deuxikme phase de la coagulation.

Dans les experiences I , 111 et IV, on a remarque une influence accClCrante sur la troisikme phase, il est vrai relativement faible 2 fois sur 3 ; lors de l’expbience 11, aucun effet n’a pu &re mis en evidence.

Dans la majorit6 des cas, on constate donc une inhibition plus ou moins prononcee de la deuxieme phase et une acceleration de la troisikme phase aprks l’injection de venin de Cerustes aux concentrations de 1 : 25 000 ii 1 : 50 OOO.

L’influence inhibitrice sur la deuxikme phase est d’accord avec l’observation de l’inactivation du serozyme naissant 30 minutes aprQ l’injection de venin, observte lors de I’expCrience d u tableau VI.

Ainsi qu’on devait s’y attendre, apr& l’injection de 1 cc. de solution de venin de Cerustes A 1 : 100 000, qui ne modifie pas la coagulation du plasmd oxalate recalcifii, on ne remarque pas non plus le moindre changement dans, l’allure des deuxikme et troisikrne phases.

En rkume, voici les effets de l’injection de venin de Cerustes chez le Lapin :

1) Retard dans la transformation du proserozyme en skrozyme; 2) Inactivation du sCrozyme form6 ; 3) Retard de la transformation du sCrozyme en thrornbine, dans la

4) Le plus souvent effet favorisant sur la troisi6me phase; 5) LCgkre diminution de la thrombine ou apparition d’une faible

Comme on le voit, l’action coagulante du venin de Cerastes repose essentiellement sur I’acceleration de la troisitrne phase. Au contraire, les autres actions Ctudiees tendent plutbt a ralentir la coagulation.

plupart des cas;

quantite d’antithrombine.

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Plasma provenant du sang prilevk

avant I’injection ..................... 30 minutes apris celle-ci . . . . . . . . . . . . . . 60 minutes apr is celle-ci . . . . . . . . . . . . . .

3) Venin de Vipera aspis

Nous avons recherche le moment de la transformation du proserozyme en serozyme, avant et apres I’injection de 1 cc. de venin de Vipera aspis a 1 : 50 000 en suivant la technique exposee pour le venin de Cerastes. Voici les rksultats d’une experience faite a ce propos.

Moment d’apparition du sirozyme

10 A 1 5 minutes 2 A 4 minutes 2 A 4 minutes

Comme on le voit, le venin de Vipera aspis accilere beaucoup la premiere phase de la coagulation.

Le tableau VIII rbsume les rbultats de quatre experiences dans lesquelles on a Ctudie I’action du venin de Vipera aspis sur les deuxikme et troisieme phases ainsi que sur la quantite de thrombine formee dans le plasma oxalate provenant du s m g carotidien prCleve 10 et 30 minutes a p r b l’injection de 1 cc. de solution de venin de Vipera aspis h 1 : 10000, 1 :SO00 ou 1 : 100O00.

Aprks l’injection de venin de Vipera aspis on constate 3 fois sur 4 une accileration de la deuxikme phase 10 minutes apres l’injection et, au contraire, un retard dans un cas (experience 11) ; une demi- heure a p r b I’injection il y a toujours un retard plus ou moins accuse.

Deux fois sur 4 on observe une legere acceleration de la troisikme phase, plus marquee au bout d’une demi-heure qu’au bout de 10 minutes. Les deux autres fois le laps de temps necessaire i la transformation du fibrinogkne en fibrine sous l’influence de la thrombine n’a pas subi de modifications reelles aprks I’jnjection de venin de Vipera aspis.

La quantite de thrombine parait avoir subi une diminution soit 10 minutes (experience IV), soit une demi-heure (experience 111) apres I’injection de venin de Vipera aspis. Mais il se pourrait que ceci soit db h l’augmentation de la quantiti d’antithrombine pre- sente dans le plasma.

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En difinitive, l’action coagulante du venin de Viperu uspis repose essentiellement sur I’accderation de la transformation du pros& rozyme en serozyme.

4) .Venin de Crotulus terrificus Voici les moments d’apparition du skrozyme avant et a p r b

l’injection de 1 cc. (par kg.) de venin de Crotulus terr@cus (Cchan- tillon 11) h 1 : 10 O00 a un Lapin ii jeun :

Avant l’injection . . . . . . . . 10 minutes aprks celle-ci . . 30 minutes aprks celle-ci . .

15 a 25 minutes 20 a 25 minutes pas d’apparition de sCrozyrne

Lors de cette experience, l’injection de venin de Crotale a empCche, au bout de 30 minutes, l’apparition de skrozyme. Dans d’autres essais, on a observe un retard notable de l’apparition du sCrozyme soit deja 10 minutes, soit seulernent 30 minutes apris l’injection.

Le tableau IX risume les risultats de quatre expiriences oh nous avons CtudiC Ies effets de I’injection intrasaphkne de 1 cc. de venin de Crotulus terrificus (CchantiIIon 11) sup les 2 e et 3e phases et dans un cas sur la quantite de thrombine formee.

Le tableau IX met en evidence le fait suivant : quelIe que soit l’action de l’injection de venin de Crotulus terrificus sur la coagulation du plasma oxalate recalcifii (accilkration lors de I’experience I , retard lors des experiences 11 et 111, retard puis acceleration Iors de l’experience IV), la 2e phase prksente une acckleration surtout marquee au.bout de 10 minutes. Quant a la 3e phase de la coagulation, elle subit un t r h ICger retard 10 minutes aprks l’injection et tend a revenir a la normale 20 minutes plus tard. Enfin lors de la seule expirience oh I’on ait cherchi B se rendre compte de la quantitC de thrombine formie, on a observe un retard trks accuse de la coagulation 10 minutes aprks l’injection du venin et au contraire une ligkre acciliration 20 minutes plus tard. Le serum diluC a l’etat frais a paru uniquement subir, 10 minutes a p r k I’injection, ou bien une diminution nette de la quantitC de thrombine ou bien une augmentation de la. quantitk d’antithrombine.

5 ) Venin de Cobra Comme nous I’avons vu dans le tableau 11, l’ichantillon I 1 du

venin de Cobra a une action anticoagulante manifeste in vim, aux concentrations de 1 : 10 OOO et de 1 : 25 OOO. A celles de 1 : 50 000

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et de 1 : 100 OOO, il n’a plus d’action ou une action ICgkrement coagulante.

Le plasma prClevC apres injection intrasaphkne de ce venin aux concentrations de 1 : IOOOO et de 1 :25 OOO, et additionne de staphylocoagulase, ne coagule qu’au bout d’un temps de skjour a 370, trks long (5 a 6 heures) et encore la coagulation n’est-elle pas complkte : il est par consequent impossible d’ktudier par ce procCdC la transformation du proserozyme en skrozyme.

Voici, groupies dans le tableau X, les donnees recueillies en Ctudiant les effets de l’injection de 1 cc. (par kg.) de venin de Cobra a 1 : 10 OOO sur les deuxikme et troisikme phases et sur la quantitC de thrombine par les mCmes techniques que pour le venin de Cermtes. ,

TABLEAU X

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Comme on le voit, la seule action anticoagulante du venin de Cobra consiste en une diminution de la quantitk de thrombine dans Ie serum diluC, examine a 1’etat frais, mais peut-&tre s’agit-il plutBt d’un accroissement de la teneur en antithrombine. En tout cas cette action est peu intense.

Une fois sur trois on a observe m e acceleration nette de la deu- x i h e phase (exp. 11) ; les deux autres fois on n’a constate aucune ’

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modification appreciable. Sur la troisikme phase, nous n’avons observe aucun effet reel.

Au tatal, l’etude des phases n’kclaire donc que fort imparfaitement le mode d’action des venins sur la coagulation in vim.

V. - Action des venins sur la teneur du plasma en ions calcium

Pour evaluer la quantitk d’ions Ca, nous avons eu recours a la methode indirecte, baske sur la riserve alcaline et la reaction du plasma. Rappelons que divers auteurs ont dija mesure soit la reserve alcaline, soit le pH du plasma, soit tous deux a p r b injection de venins de serpents, mais ils ne disent rien propos de la teneur du plasma en ions Ca. Nous nous sommes bask pour la calculer sur la formule de RONA et TAKAHASHI (14) en tenant compte des judicieuses remarques de BIGWOOD (15). Dans ce but, nous avons preleve, sous huile de paraffine dans des tubes A centrifugation contenant de l’oxalate sodique sec afin d’empCcher toute coagulation, du sang a la carotide avant l’injection dans la jugulaire de 0.75 cc. 1 cc. (par kg. de poids corporel) des divers venins envisagks, puis 20 a 30 minutes plus tard. En centrifugeant sous huile de paraffine, nous avons sCpare le plasma des dements figures. Nous avons ensuite dose d’une part la reserve alcaline du plasma par la methode de VAN SLYKE, STILL- MAN et CULLEN (16), en nous conformant aux prescriptions de VAN SLYKE et STADIE (17), d’autre part la reaction de ce mCme plasma par le procede de HASTINGS et SENDROY Jr (18).

On trouvera dans le tableau XI les diverses donnees ainsi recueillies.

Les experiences du tableau XI n’ont pas permis de mettre en evidence de variations sensible de la teneur du plasma en ions calcium 30 minutes aprks l’injection des venins des Vipirinis (Viperu uspis, Cerasfes, Daboiu) : la plus grande difference observke est de 1 mg. par litre de plasma, ce qui rentre dans les causes d’erreur de la met hod e .

Le venin de Crotule, dont les effets sur la coagulation in vivo sont si variables, n’a pas non plus d’action constante sur la teneur du plasma en ions calcium. Dans une expirience, il diminue celle-ci ; dans une autre, il l’augmente; dam une troisikme il est sans effet appreciable sur les ions calcium (diminution de 1 mg. par litre de plasma).

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Les venins des Bothrops exercent sur les ions calcium une influence qui varie beaucoup d’une espece a l’autre. Le venin de Bothrops alternata n’a pas d’effet sensible sur la teneur du plasma en ions calcium. Celui de Bothrops nurrzmifera la diminue tantdt nettement (Lapins 4 et 5)’ tantdt Egkrement (Lapin 6). Enfin levenin de Bothrops atrox a 1 : 5 OOO 000 augmente la teneur du plasma en ions calcium, une fois (experience 3) sur trois, les deux autres fois (experiences 1 et 2) il n’a pas manifeste d’action notable; quant au venin de Bothrops Neuwiedi il a augmente beaucoup la quantite des ions calcium une fois (experience 10) sur deux.

En resume : 10 a une action variable du venin de Crotale sur la coagulation in vivo, correspond un effet variable sur la teneur du plasma en ions calcium; 20 parmi les venins coagulants, ceux de Bothrops atrox et de Bothrops Neuwiedi augmentent parfois de faqon appreciable le calcium ionise ; le venin de Bothrops alternata le diminue au contraire.

I1 ne parait donc pas exister de relations bien nettes entre les actions des venins sur le taux en ions calcium et sur la coagulation.

VI. - Action des venins sur le nombre des plaquettes dans le sang circulant

L’etude de I’action des venins sur les plaquettes pourrait peut- Ctre cklairer Ie mecanisme des effets des venins sur la coagulation in vivo, puisque, theoriquement,. on peut imaginer une relation entre le nombre de plaquettes du sang circulant et la quantite de cytozyme libCree au cours des phenomhes de la coagulation.

Nos experiences ont ete effectuees chez des Lapins de 2 kg. a 2 kg. 500. Nous leur avons prelevk du sang carotidien avant et a p r b I’injection de venin. Nous avons dilue ces Cchantillons de sang 400 fois dans du liquide de Aynaud. Nous avons determine a la chambre de Biirker le nombre des plaquettes et nous I’avons ensuite calculi par mm3 de sang. Dans certaines experiences, nous avons fait en mCme temps une numeration des globules rouges.

On trouvera dans le tableau XI1 les donnkes ainsi recueillies. La figure ci-jointe permet de se rendre plus aisiment compte des rbul ta ts auxquels nous sommes arrivk.

Deux ii 30 minutes aprks l’injection de venin de Bothrops atrox a 1 : 10.000 ou a 1 : 250 OOO (Lapins 1 a 4) il se produit une aggluti- nation qui s’oppose a toute numeration. Quarante a 60 minutes

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FIGURE : De haut en bas : I B 19 = numkros des exukriences.

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5‘ A 60’ = minutes apr$s’l’injection du venin. Variation des plaquettes en yo de la valeur initiale. Variation des globules rouges en yo de la valeur initiale. Limite deserreurs dansl’kvaluationdesvariationsdesplaquettes(+ 9-1 S:?).

aprks I’injection intraveineuse de venin de Bofhrops atrox a 1 : 250 000, on observe une augmentation d u nombre des plaquettes (Lapins 4 et 5). On note aussi un accroissement du nombre des plaquettes 20 minutes a p e s l’injection de venin de Bothrops afrox a 1 : 5 OOO 000 (Lapin 6). Quand la solution de ce venin est trks diluke (Lapin 7, 1 : 20 000 OOO) on constate au contraire deja au bout de 15 minutes une diminution de ces elements figurQ q,ui s’accentue ensuite et s’accompagne d’une chute considerable du nombre des globules rouges 40 minutes aprks I’injection.

Aprb administration de venin de Cobra a 1 : 10000 (Lapins 8 a lo), on observe une diminution plus ou moins accusCe du nombre des plaquettes, coi‘ncidant avec une augmentation parfois notable du nombre des hematies.

L’injection de venin de Vipera aspis est suivie d’une diminution parfbis trks considerable (Lapin 11) du nombre des plaquettes ; toutefois dans une experience (Lapin 14) un stade transitoire d’augmentation a prCcCdC cette reduction. En mCme temps le nombre des globules rouges decroit, mais ce phinomkne est toujours moins accuse que la diminution du nombre des plaquettes et il se produit

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aussi, il est vrai de faqon t r b modCrCe, quand le nombre des plaquettes s’accroit de faqon transitoire (Lapin 14).

Apres I’injection de venin de Cerastes a 1 : 25 OOO, 3 fois (Lapins 15 3 17) on a note une augmentation du nombre des plaquettes, les 2 autres fois (Lapins 18 et 19) on a au contraire remarque la diminution de ces dements figuris. Quant au nombre des hematies, qui n’a Cte recherche que chez deux animaux, il a augmente chez le Lapin 17, tout comme le nombre des plaquettes, mais de fason moderke. Au contraire, chez le Lapin 18 plaquettes et globules rouges ont diminue sensiblement dans la m&me preparation.

Les donnies du tableau XI1 permettent les constatations suivantes :

1) L’elkvation du nombre des plaquettes observie 40 a 60 minutes apres I’injection de venin de Bothrops atrox a 1 : 250 000 et 20 minutes a p r b l’injection de ce venin a 1 : 5 OOO 000 pourrait expliquer en partie l’action coagulante in vivo de ce venin.

2) La diminution du nombre des plaquettes provoquke par l’injection du venin de Cobra a 1 : 10 000 est en rapport avec son action anticoagulante.

3) La rarefaction des plaquettes observCe presque toujours a p r b l’injection de venin de Vipera aspis tend a s’oppser a I’action coagulante du verlin, qui doit trouver son explication ailleurs. 4) L’effet coagulant du venin de Cermtes a 1 : 25 000 ne peut pas

s’expliquer entikrement par I’action sur les plaquettes puisqu’on n’a observe d’augmentation de leur nombre que 3 fois sur 5 experiences.

VII. - Action du venin de Bothrops atrox sur 1’Bquilibre protbique du plasma

ThCoriquement, une modification de I’Cquilibre proteique du plasma pourrait altkrer la vitesse de coagulation de ce milieu recalcifii. D’autre part les auteurs n’ont guere etudie que I’influence des venins sur la teneur du sang en fibrinogbne. I1 nous a paru interessant de rechercher tous les changements de 1’Cquilibre proteique se pro- duisant aprks l’injection de venin de Bothrops atrox. Pour cela, nous avons injecte des Lapins de 3 A 4 kg. 0.5 cc. (par kg.) de solution de venin a 1 :25OOOO dans la jugulaire. Nous avons prelevC 15 cc. de sang carotidien avant I’injection et 45 minutes a p r b celle-ci. Nous I’avons recueilli dans 1/1Oe de son volume de solution de citrate sodique a 3.55%. Nous l’avons soumis A deux centrifugations,

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cornme le sang omlati lde maniere a obtenir du plasma citratC trks limpide.

Nous avons dose le fibrinogene par la mithode de GRAM (19) puis I’amte proteique par la micromethode de KJELDAHL, en em- ployant la technique de PREGL (20) et en utilisant comme catalyseur a la fois des sulfates cuivrique et potassique et du perhydrol selon 1s indications de SACCARDI (21). Nous avons ensuite separe les globulines des albumines au moyen de sulfate sodique d’aprb le procede de HOWE (22). Nous avons Cte ainsi a m&me de determiner 1s proportions d’azote proteique existant sous forme soit de globulines, soit d’alburnines.

Voici dans le tableau XI11 un exemple des rbultats ainsi recueillis.

TABLEAU XI11

Recherches faites

Azote proteique 1 SOUS 1 de globulines . en g. par 100 cc. forme d’albumines . .

total . . . . . . . . . . , . . . . . yo de I’azote protiique sous forme de globu-

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45 minutes Iprks l’injection

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36.5 360

6.670.000

Comme on le voit, les quantites de fibrinogkne, de globulines et d’albumines ne diminuent guke et le pourcentage en globulines de I’azote proteique r a t e constant. Or, c’est ce pourcentage qui irnporte essentiellement, car l’augmentation de la proportion des globulines coincide d’ordinaire avec une coagulation p h i rapide du plasma. La teneur du sang carotidien en globules rouges n’a pas subi de modifications appreciables, ce qui tend a faire adrnettre que le volume du plasma par rapport a celui des elements cellulaires n’a g d r e varie.

Deux autres experiences effectuees dans Ies mCmes conditions en injectant soit 0.75, soit 1 cc. de venin de Cobra a 1 : 250 OOO et en prilevant le sang carotidien trois-quarts d’heure la premi2r-e fois, une heure la deuxikme fois a p r h I’introduction du venin dans la

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circulation n’ont pas, non plus, rive16 de modific$ions apprkciables de l’equilibre proteique sanguin et du nombre d’hematies par mil- limbtre cube de sang.

VIII. - Action du venin de Bothrops atrox chez les Lapins dCcapsul6s

A cause de l’intensite de I’action coagulante in vivo du venin de B. afrox, nous nous sommes demand6 si l’action thrombinique du venin Ctait bien la seule en cause. Nous avons recherche en particulier si I’exclusion de l’incrktion surrenalienne ne modifiait pas l’action du venin de Bofhrops afrox sur la coagulation chez le Lapin.

Dans ce but, nous avons anesthhik des Lapins a jeun, d’environ 2 kg. au moyen de nakonumal (62 mg. par kg.) ou de nembutal (48.6 B 64.8 mg. par kg.) administrh par la veine auriculaire. Dans une experience, nous avons fait une anesthlsie de base B I’urethane par voie rectale puis nous avons inject6 32.4 mg. de nembutal. Les pedicules surrenaux ont ete abordis par voie posterieure et ligaturb. Nous avons maintenu les animaux sur tapis bien chaud, dans une chambre a 370 C, de faqon a Cviter tout rekoidissement. Une heure plus tard, nous avons prelevC 3 cc. de sang oxalate, puis nous avons injecte dans la jugulaire 1 cc. par kg. de venin de Bofhrops atrox aux concentrations de 1 : 500 OOO a 1 : 50 OOO OOO. Nous avons recueilli de nouveaux echantillons de sang oxalate aprks divers laps de temps a la suitede l’injection. Nous avons prepare du plasma oxalate suivant la technique habituelle et recherche les temps de coagulation de melanges contenant 0.2 cc. de ce plasma et 0.8 cc. d’EPCa. Nous avons rassemble ces donnees dans le tableau XIV.

Cornme on le voit, l’action coagulante du venin de Bothrops afrox persiste a p r h dtcapsulation. Si I’on compare les tableaux I11 et XIV, on constate qu’il n’y a , en rCalitC, pas de differences ii ce point de vue entre le Lapin dkapsule et le Lapin normal.

Par consequent, des modifications de la dkcharge de l’incretion surrhalienne dans le sang ne paraissent pas intervenir pour expliquer I’action coagulante du venin de Bofhrops atrox.

Conclusions

l o Les venins des Bofhrops sont tous coagulants in vivo. L’injection de venin de Bofhrops nurnmifera B 1 : 10 OOO accklbre la coagulation

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du plasma oxalate recalcifii. I1 en est de mCme de l’injection de solutions trks dilutes de venin de Bothrops afrox (1 : 50 0oO OOO 5 I ; 10 000 000 OOO) mais pas de faqon constante ; la coagulation du plasma oxalate non recalcifie risque, dans ces circonstances, de passer inapercpe, car elle est souvent tardive. Pour les solutions de venin de Bothrops atrox plus concentrkes (1 : 5 000 000 a 1 : 500 000) il y a habituellement coagulation rapide du plasma non recalcifii. On observe ce m&me phknomkne avec des concentrations elevees ( 1 : 10 000) de venin de Bothrops alfernafa et de venin de Bothrops Neuwiedi, mais a l’action coagulsnte sucdde dans ces circonstances, 1 heure a p r b I’injection, une periode d’incoagulabilite (phase niga. tive) du’ plasma oxalate recalcifie.

20 Les venins des Viperim’s (Vipera aspis, Cerastes, Daboia) sont coagulants. Le plus coagulant est celui de Daboia. L’injection de ces venins peut exceptionnellement amener une coagulation du plasma non recalcifik.

30 Le venin de Crotalus terrificus a une action tant6t coagulante, tan t6t anticoagulante.

40 Un Cchantillon (1) de venin de Cobra n’a pas manifeste d’actim anticoagulante constante. Un autre Cchantillon (2) a eu un effet anticoagulant net aux concentrations de 1 : 10 OOO et de 1 : 25 000. A des dilutions plus fortes cet Cchantillon de Cobra a Cte soit depourvu d’action, soit coagulant, suivant le moment du prdtvement.

So L’action coagulante in uivo du venin de Bothrops atrox s’ex- plique essentiellement par son action thrombinique. Accessoirernent interviennent peut-etre I’augmentation du nombre des plaquettes et parfois une elkvation de la teneur du plasma en ions calcium. La dicapsulation ne change rien a l’action de ce venin sur la coagulation. L’injection de venin de Bothrops atrox ne modifie pas le rapport albumines/globulines dans le plasma. 60 Le venin de I’kchantillon de Crotalus terrificus examin6 a eu

m e action fort variable sur la coagulation in uivo et sur la teneur du plasma en ions calcium. Ce venin a toujours retardi l’apparition du sirozyme ( Ire phase de la coagulation), a au contraire favoris6 l’apparition de la thrombine (2. phase de la coagulation). I1 n’a gutre d’effet sur I’action de la thrornbine sur le fibrinogkne (3e phase de la coagulation). Ou bien il diminue la quantitC de thrombine, ou bien i l accroit la teneur du plasma en antithrombine.

70 L’acceleration de la coagulation in uivo sous I’influence du venin

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Contribution A L'étude Des Effets De Quelques Venins De Serpents Sur La Coagulation Du Sang In Vivo