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Biocapteurs pour le monitoring des écosystèmes aquatiques
NANTES - 27 et 28 NOVEMBRE 2007
LES PLÉNIÈRES 2007 DU LCPCSciences et techniquesdu Génie Civil JOURNÉES
EAU ET ENVIRONNEMENT
Des Biocapteurs à cellules algales pour le monitoring des sites récepteurs
de déversoirs d’orage
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Contexte•Préservation du milieu aquatique
Qualité de la ressource en eau
Protection des écosystèmes
•Outil de contrôle en laboratoireAnalyses chimiques : GC MS, ICP MS…Tests algues, lentilles, diatomées, daphnies…..
•Outil d’alerte : Early Warning SystemSur site, en temps réel et en continu
Identification des analyses chimiques à réaliser
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Principe de fonctionnement d’un biocapteur
Deux composants principaux :
Biorécepteur (enzyme, cellule, antigène…)
Transducteur (fibre optique, electrode conductimétrique…)
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Le biorécepteur algalChlorella vulgaris (7µm)Algue verte unicellulaire de la famille dechlorophycées
Facilité de mise en culture
Accumulation des pollutions
Grande sensibilité aux stressPrésence d’enzymes membranaires permettant
le suivi de leur activité à partir de la cellule entière
Mesure de la production d’oxygèneMesure de la fluorescence chlorophylienne
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Spécificité d’action de différentes familles de toxiques sur des voies métaboliques algales
Fluorescence chlorophylienne
Pesticides organophosphorésUrées substituées
Activité phosphatase alcaline
Métaux lourds
Activité estérase Pesticides organophosphorés
Activité Nitrate réductase
Ammoniac
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Principe du biocapteur à fibres optiques
ENREGISTREUR
SOURCE DETECTEUR
Membrane algale
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Cellule de mesure
Entrée fluxSortie du fluxSortie flux
Fibre optique
Membrane algale
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Boîtier de mesure
Fibres optiques
Pompe péristaltique
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30 mm
5mm
Miniaturisation du système
contactMembrane en époxy
électrodes1.4mm*1.5m
m
Transducteur électrochimique
Variations locales de conductivité
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Microcapteur conductimétrique
Zone de depôt
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Produit enzymatique
Interface transducteurInterface transducteur
La sensibilité du capteur est dépendante de la concentration algale déposée
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Immobilisation des cellules algales en gel
Les gels de silice possèdent des propriétés intéressantes
hydrophylie
transparence
réservoir d’eau
bonne rétention des cellules
protection contre l’attaque microbienne
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Principe de l’assemblage en monocouches de cellulesSelf Assembly Monolayer (SAM)
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Immobilisation des algues en monocouches d’autoassemblageSAM (Self Assembly Monolayer)
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50 100 150 2000
10
20
30
Time (min)
Inte
nsity
(a.u
.)Témoin
Effluent toxique
Analyse de la toxicité d’un effluent
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Calibration de la réponse aux métaux de microcapteurs conductimétriques
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y = -50,144x + 111,98R2 = 0,9302
0
20
40
60
80
100
120
140
0% 20% 40% 60% 80% 100% 120%
Dillution(%)
AP
A re
s(%
)
Activité Phosphatase Alcaline de cellules de Chlorella vulgarispréalablement exposées à des eaux de pluie
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0
20
40
60
80
100
120
1ppb 10ppb 100ppb
AtrazineDiuronMPO
Pesticides
Calibration de la réponse aux pesticides de microcapteurs conductimétriques
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Activités enzymatiques de cellules de Chlorella vulgaris
après contact avec des eaux d’orage
0
20
40
60
80
100
120
A B C
phosphataseEsterase
Sortie de déversoir
Act
ivité
rési
duel
le
(% té
moi
n)
A : début d’épisode; B : milieu d’épisode; C : fin d’épisode
Métal Zn Pb Cu Cr Ni Cd Fe Al
Concentration(µg / L)
740 46,6 146 8,8 3,3 0,23 1,81 0,94
Concentration en ions métalliques de l’eau d’orage
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Site d’ Orcemont
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Biocapteur phosphatase en entrée de station site d’Orcemont
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3/5/07 7/5/07 22/5/07 16/7/07 9/10/07
Entrée STEP NF 80 72 45 60 76
Sortie STEP NF 92 85 80 80 150
Amont NF 95 80 85 95 159
Aval NF 89 76 75 85 155
Entrée STEP F 95 85 55 92 140
Sortie STEP F 105 80 80 95 162
Amont F 103 101 92 89 158
Aval F 110 98 75 91 176
Activité résiduelle Estérase : Orcemont
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3/5/07 7/5/07 22/5/07 16/7/07 9/10/07
Entrée STEP NF 3 40 70 52 9
Sortie STEP NF 12 55 88 76 20
Amont NF 82 82 92 80 58
Aval NF 110 92 85 91 57
Entrée STEP F 65 92 92 70 35
Sortie STEP F 77 85 99 85 55
Amont F 78 77 78 85 57
Aval F 82 91 84 98 58
Activité résiduelle Phosphatase Alcaline Orcemont