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This article was downloaded by: [Western Kentucky University] On: 31 May 2013, At: 11:24 Publisher: Taylor & Francis Informa Ltd Registered in England and Wales Registered Number: 1072954 Registered office: Mortimer House, 37-41 Mortimer Street, London W1T 3JH, UK Acta Botanica Gallica Publication details, including instructions for authors and subscription information: http://www.tandfonline.com/loi/tabg20 Effet de la distillation fractionnée sur la composition chimique et l'activité antimicrobienne des huiles essentielles du Myrte (Myrtus communis L.) du Maroc Badr Satrani a b , Abdellah Farah c & Mohammed Talbi b a Centre de recherches forestières, BP 763, Agdal, Rabat, 10050, Maroc E-mail: b Laboratoire de Chimie analytique et structurale associé au CNRSTP, UFR Sciences et Procédés d'Analyses, Faculté des Sciences Ben M'Sik, BP 7955, Casablanca, Maroc c Institut national des plantes médicinales et aromatiques, BP 7048, Fes-Ezohour, Fes, Maroc Published online: 27 Apr 2013. To cite this article: Badr Satrani , Abdellah Farah & Mohammed Talbi (2006): Effet de la distillation fractionnée sur la composition chimique et l'activité antimicrobienne des huiles essentielles du Myrte (Myrtus communis L.) du Maroc, Acta Botanica Gallica, 153:2, 235-242 To link to this article: http://dx.doi.org/10.1080/12538078.2006.10515539 PLEASE SCROLL DOWN FOR ARTICLE Full terms and conditions of use: http://www.tandfonline.com/page/terms- and-conditions This article may be used for research, teaching, and private study purposes. Any substantial or systematic reproduction, redistribution, reselling, loan,

Effet de la distillation fractionnée sur la composition chimique et l'activité antimicrobienne des huiles essentielles du Myrte ( Myrtus communis L.) du Maroc

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This article was downloaded by: [Western Kentucky University]On: 31 May 2013, At: 11:24Publisher: Taylor & FrancisInforma Ltd Registered in England and Wales Registered Number: 1072954Registered office: Mortimer House, 37-41 Mortimer Street, London W1T 3JH,UK

Acta Botanica GallicaPublication details, including instructions for authorsand subscription information:http://www.tandfonline.com/loi/tabg20

Effet de la distillationfractionnée sur la compositionchimique et l'activitéantimicrobienne des huilesessentielles du Myrte (Myrtuscommunis L.) du MarocBadr Satrani a b , Abdellah Farah c & MohammedTalbi ba Centre de recherches forestières, BP 763, Agdal,Rabat, 10050, Maroc E-mail:b Laboratoire de Chimie analytique et structuraleassocié au CNRSTP, UFR Sciences et Procédésd'Analyses, Faculté des Sciences Ben M'Sik, BP 7955,Casablanca, Marocc Institut national des plantes médicinales etaromatiques, BP 7048, Fes-Ezohour, Fes, MarocPublished online: 27 Apr 2013.

To cite this article: Badr Satrani , Abdellah Farah & Mohammed Talbi (2006): Effet dela distillation fractionnée sur la composition chimique et l'activité antimicrobiennedes huiles essentielles du Myrte (Myrtus communis L.) du Maroc, Acta BotanicaGallica, 153:2, 235-242

To link to this article: http://dx.doi.org/10.1080/12538078.2006.10515539

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Acta Bot. Gallica, 2006, /53 (2). 235-242.

Effet de Ia distillation fractionnee sur Ia composition chimique et l'ac­tivite antimicrobienne des huiles·essentielles du Myrte (Myrtus commu­nis L.) du Maroc

par Badr Satrani( 1•2), Abdellah Farahe) et Mohammed Talbicl)

(1) Centre de recherchesforestieres, BP 763, Agdal, Rabat. 10050, Maroc; badrsat@yahoofr

(2) Laboratoire de Chimie analytique et structurale associe au CNRSTP. UFR Sciences et Procedes

d'AnaZvses, Faculte des Sciences Ben M'Sik, BP 7955, Casablanca, Maroc

(3) 1nstitut national des plantes medicinales et aromatiques. BP 7048, Fes-Ezohour, Fes, Maroc

arrive le 11 mai 2005, accepte le 31 aotit 2005

Resume.- L'huile essentielle extraite a partir du Myrte du Maroc et ses fractions obtenues par Ia distillation fractionnee sont analysees par les methodes chro­matographiques (GC et GC/MS). L'huile essentielle du Myrte marocain est constituee de l'a-pinene (10%), le 1,8-cineole (43%) et l'acetate de myrtenyl (25%) comme composes majoritaires. La rectification de l'huile du Myrte a donne quatre principales fractions. La premiere est riche en a-pinene (42-54,8%) et 1,8-cineole (27-53,6%), Ia seconde fraction en 1,8-cineole (83-95,8%), Ia troi­sieme en acetate de myrtenyl (36-55%) et 1,8-cineole (12-36%) et Ia quatrieme en acetate de myrtenyl (62-65%). L'activite antimicrobienne testae avec les prin­cipales fractions de l'huile du Myrte a montre qu'elle a ete essentiellement obser­vee dans Ia troisieme fraction contenant particulierement !'a-terpineol et le myrtenol ainsi que le 1,8-cineole.

Mots cles : Myrtus communis L. - distillation fraction nee - 1,8-cineole - acetate de myrtenyl - activite antimicrobienne.

Abstract.- The essential oil extracted from Moroccan Myrtle and fractions obtai­ned by fractional distillation were analysed by chromatographic methods (GC and GCIMS). Moroccan Myrtle essential oil was found to contain a-pinene (1 0%), 1,8-cineole (43%) and myrtenyl acetate (25%) as major components. The rectification of Myrtle oil gives four principal fractions. The first was rich in a-pine­ne (42-54.8%) and 1,8-cineole (27-53.6%), the second fraction in 1,8-cineole (83-95.8%), the third in myrtenyl acetate (36-55%) and 1,8-cineole (12-36%) and the fourth in myrtenyl acetate (62-65%). The fractional distillation improves the quality of essential oil. An antimicrobial activity test carried out with principal frac­tions of the essential oil showed that the activity was mainly observed in third fraction containing a-terpineol and myrtenol, in particular, and 1,8-cineole.

Kev words : Myrtus communis L. - fractional distillation - 1,8-cineole - myrtenyl acetate - antimicrobial activity.

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I. INTRODUCTION

L'Homme est generalement sensible a !'intoxication alimentaire dont les agents declen­chants augmentent dans des proportions inquietantes. Plusieurs additifs alimentaires sont utilises pour prolonger Ia duree de conservation des aliments et inhiber le developpement des microorganismes pathogenes. Au cours de ces dernieres annees, I 'inten!t croissant porte a !'utilisation des substances naturelles a Ia place des composes synthetiques a fait promouvoir des etudes plus approfondies pour !'exploitation des ressources des plantes (Thangadurai et a/., 2002). Les plantes superieures et leurs huiles essentielles utilisees depuis I' Antiquite en medecine traditionnelle et pour Ia conservation des aliments fournis­sent un grand nombre de composes qui possedent des activites antifongiques et antimicro­biennes (Cowan, 1999).

Au Maroc, Les plantes aromatiques et medicinales representent une valeur considerable pour l'economie marocaine. Les activites menees dans ce secteur sont liees a differentes plantes aromatiques comme Ia Menthe (Mentha pulegium), les Lavandes (Lavandula stoe­chas. Lavandula dentata), Ia Rose (Rosa damascena), le Romarin (Rosmarinus officina­lis), l'Armoise blanche (Artemisia herba-alba), le Cedre (Cedrus atlantica) et le Myrte (Myrtus communis L.). En 2003, les exportations en huiles essentielles ont ete estimees a 17 millions de dollars. Cependant, si le pays exporte des huiles essentielles brutes, il importe en echange des produits plus raffines (Office d'echange, 2003 ).

Le Myrte (Myrtus communis L.) est un arbuste a feuilles persistantes appartenant a Ia famille des Myrtaceae. II se developpe spontanement au Maroc ou il est rencontre depuis les reboisements forestiers appartenant a Ia serie thermo-mediterranneenne jusqu'a Ia cote atlantique a une altitude de I I 00 m. II pousse generalement sur un sol siliceux et dans un bioclimat semi-humide a humide (Benabid 1997). Les avantages du Myrte sont divers. Les differentes parties de Ia plante sont utilisees en cosmetologie et en medecine. Les feuilles, les fruits, les fleurs et les racines sont indiques comme remede contre plusieurs maladies (Bellakhdar et a/., 1994 ; Sijelmassi, 1991 ). L'huile essentielle obtenue par hydrodistilla­tion de Ia plante entiere est employee dans Ia composition des liqueurs et des parfums.

Plusieurs travaux ont ete realises sur les huiles essentielles du Myrte d'origine mediter­raneenne (Asllani, 2000 ; Boelens & Jimenez, 1991, 1992 ; Bradesi eta/., 1997 ; Chalchat & Garry, 1992 ; Lawrence, 1993 ). La composition chimique des huiles essentielles de dif­ferentes regions a ete precedemment citee dans Ia litterature (Lawrence, 1990, 1993 ). La plupart des huiles ont une teneur elevee en I ,8-cineole (19-45% ). Parmi ces huiles, deux groupes peuvent etre distingues selon Ia presence a des teneurs elevees ou faibles d'aceta­te de myrtenyl. Chaque groupe peut etre aussi divise en deux sous-groupes selon le rapport entre !'a-pinene et !'acetate de myrtenyl (Boelens & Jimenez, 1991, 1992; Chalchat & Garry, 1992; Gauthier eta/., 1988; Frazao eta/., 1974) ou !'a-pinene et le 1,8-cineole (Chalchat & Garry, 1992 ; Weyerstahl et a/., 1994 ; Tateo & Picci, 1982). Les huiles d'Espagne sont caracterisees par une grande teneur en acetate de myrtenyl (Boelens & Jimenez, 1991, 1992). Cependant, les huiles essentielles du Myrte originaire de Grece (Gauthier eta/., 1988), de Californie (Lawrence, 1993) et de Russie (Lawrence, 1990) sont dominees par le linalol et le limonene en plus de !'a-pinene et du 1,8-cineole.

Cependant, Ia rectification de I 'huile essentielle de Myrtus communis du Maroc ainsi que les proprietes antimicrobiennes des principales fractions de cette essence n' ont, semble-t-il, jamais fait !'objet d'une etude auparavant.

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Au cours de ce travail, Ia distillation fractionnee des huiles essentielles du Myrte a ete realisee et les fractions obtenues ont ete analysees par GC et GC/MS. L'activite antimicro­bienne de l'huile essentielle brute du Myrte ainsi que ses fractions a ete testee.

II. MATERIELS ET METHODES

A. Materiel vegetal et extraction des huiles essentielles La recolte des echantillons du Myrte a ete etfectuee en mai (2004) dans Ia region de

Dardara (province de Chefchaouen, nord-est du Maroc) a une altitude approximative de 800 m.

L'extraction des huiles essentielles est etfectuee par entrainement a Ia vapeur d'eau, dans une unite industrielle en fer noir et a feu nu de capacite de 3,5 m3. L'injection de Ia vapeur d'eau se fait par Ia partie inferieure de l'alambic. La vapeur d'eau chargee par les produits volatiles est conduite vers le serpentin refroidi par un bain d'eau. Les huiles sont ensuite separees par difference de densite, sechees et stockees a basse temperature.

B. Rectification des huiles essentielles La rectification a ete etfectuee par un appareil de distillation continue sous pression

atmospherique. II est equipe d'une colonne en verre de 3 m de hauteur et de 5 em de dia­metre interieur. Cette derniere est formee de trois plateaux de I m chacun. Le remplissage de Ia colonne est realise par des anneaux en verre de type « Rasching 6 x 6 ». La recupe­ration des fractions est assuree avec une cuvette graduee reliee au refrigerant par une cana­lisation en verre de 3m de longueur. Le melange, eau/huile essentielle du Myrte, est place dans un bouilleur de 2 litres de capacite, situe en bas de Ia colonne. Ce bouilleur est relie a un ballon thermostate de 25 litres par une pompe doseuse avec un debit de 20 1/h et connectee a un distributeur qui permet une alimentation continue ou discontinue en eau chaude selon les besoins. Dans chaque essai, 500 ml d'huile essentielle ont ete traites et au moins trois repetitions avec Ia meme quantite d'huile ont ete realisees. Des fractions ont ete recueillies a des intervalles de temps reguliers de I 0 minutes. Deux heures ont ete necessaires a l'epuisement total de l'huile essentielle brute du Myrte et douze fractions numerotees de F 1 a F 12 ont ete obtenues.

C. Analyses chromatographiques Les analyses chromatographiques ont ete etfectuees sur un chromatographe en phase

gazeuse a regulation electronique de pression de type Hewlett-Packard (serie HP 6890), equipe d'une colonne capillaire HP-5 (30 m X 0,25 mm) avec une epaisseur du film de 0,25 mm, d'un detecteur FID regie a 260 ac et alimente par un melange de gaz Hz!air et d'un injecteur split-splitless regie a 275 ac. Le mode d'injection est split (rapport de fuite : 1/50, debit 66 ml/min). Le gaz vecteur utilise est !'azote avec un debit de 1,7 mllmin. La temperature de Ia colonne est programmee de 50 a 250 ac a raison de 4 ac /min. L'appareil est pilote par un systeme informatique de type « HP ChemStation », gerant le fonctionne­ment de l'appareil et permettant de suivre !'evolution des analyses chromatographiques.

L'identification des constituants a ete realisee en se basant sur leurs indices de Kovats (IK) et sur Ia chromatographie en phase gazeuse couplee a Ia spectrometrie de masse (GC­MS ). Cette derniere est realisee sur un chromatographe en phase gazeuse de type Hewlett­Packard (serie HP 6890) couple avec un spectrometre de masse (serie HP 5973 ). La fragmentation est etfectuee par impact electronique sous un champs de 70 eV. La colonne

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utilisee est une colonne capillaire HP-5MS (30m x 0,25 mm), l'epaisseur du film est de 0,25 mm. La temperature de Ia colonne est programmee de 50 a 250 oc a raison de 4°C/min. Le gaz vecteur est l'helium dont le debit est fixe a 1,5 mllmin. Le mode d'in­jection est split (rapport de fuite : 1/70, debit 112 ml/min). L'appareil est relie a un syste­me informatique gerant une bibliotheque de spectres de masse NIST 98.

D. Tests antimicrobiens Les micro-organismes testes dans ce travail sont choisis pour leurs frequences elevees a

contaminer les denrees alimentaires et pour leur pathogenicite : - Bacteries : Escherichia coli, Bacillus subtilis, Micrococcus luteus et Staphylococcus aureus; - Champignons : Penicillium digitatum et Aspergillus niger.

Les quatre souches bacteriennes sont des lots de « american type culture collection » (ATCC) ; elles sont entretenues par repiquage sur gelose nutritive favorable a leur crois­sance. Les deux moisissures sont cultivees sur le milieu nutritif « potato dextrose agar )) (PDA). Les concentrations minimales inhibitrices (CMI) des fractions de l'huile essentiel­le du Myrte sont determinees selon Ia methode rapportee par Remmal et a/. ( 1993) et Satrani et a/. (200 I).

III. RESULTATS ET DISCUSSION

A. Rendement et composition chimique de l'huile essentielle du Myrte La distillation des feuilles de Myrte du Maroc donne une huile jaune-ambre. Le rende­

ment moyen en huile varie de 0,3 a 0,4% et il est calcule a partir de Ia matiere vegetale seche. II est sensiblement plus eleve que celui du Myrte de Tunisie (Chalchat & Garry, 1992 ; Lawrence, 1993 ). Au laboratoire, les rendements obtenus peuvent varier de 0,4 a 0,6% selon plusieurs facteurs comme Ia saison de recolte, l'origine de Ia plante et Ia metho­de d' extraction (Ismaili et a/., 2001 ).

Les methodes d'analyses chromatographiques employees au cours de cette etude ont permis d'identifier 45 composes (Tableau I). )'a-pinene ( 10%), le I ,8-cineole (43%) et I' acetate de myrtenyl (25%) sont les constituants majoritaires de cette essence et qui repre­sentent environ les trois quarts de Ia composition chimique totale. D'autres composes sont aussi presents avec un taux moyen comme )'a-terpineol (3,8%), le y-terpinene (2,9%) et )'acetate de geranyl (2,8%). En general, l'huile du Myrte marocain est constituee de quatre groupes de produits : les monoterpenes (a-pinene, sabinene, myrcene ... ), les sesquiter­penes (a-copaene, 6-patchoulene ... ), les esters isobutyriques (isobutyrate de geranyl et de cetronellyl, les acetates de l'a-terpenyl, geranyl, isoeugenol, myrtenyl, carvyl, verbenyl et linalyl) et les alcools terpeniques (a-terpineol, linalol, fenchol, terpinene-4-ol, geraniol, myrtenol ... ). Les esters participent a Ia note fruitee caracteristique de )'essence du Myrte du Maroc. Actuellement, I 'huile essentielle du Myrte marocain est lancee sur le marche so us I' appellation « myrte a cineole )) .

Des caracteristiques chimiques identiques ont ete signalees pour les huiles du Myrte mediterraneen. Pour celle etudiee, l'acetate de mytenyl est detecte avec un taux d'environ 25% contre 35,9% pour l'huile d'Espagne (Boelens & Jimenez, 1991, 1992) et seulement I% pour celle de Tunisie (Chalchat & Garry, 1992).

L'huile essentielle du Myrte tunisien est distinguee par Ia presence du couple a-pinene I 1,8-cineole. Avec le taux de 50%, !'a-pinene est le constituant le plus abondant suivi du

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1 ,8-cineo1e (20%) (Chalchat & Garry, 1992 ; Lawrence, 1993 ). Cette huile contient en outre le limonene (environ 8%), le linalol (2 a 3%), !'acetate de geranyl (2%), !'a-terpineol (I a 2%) et le p-cyme­ne (I a 2%).

B. Rectification des huiles essentielles du Myrte La distillation fractionnee de I 'huile essentielle du

Myrte a permis d'obtenir douze fractions avec une perte evaluee a 4% (Tableau II). Les analyses chro­matographiques des fractions, recuperees aux inter­valles reguliers de 10 mn, indiquent que les trois premieres fractions (F 1, F 2 et F 3) sont riches en a­pinene (respectivement 54,8%, 42,8% et 42,6%). Le pourcentage en a-pinene diminue a partir de Ia qua­trieme fraction (2,30%) pour devenir constant apres Ia cinquieme fraction(> 0,30%). Au contraire, le 1,8-cineole atteint sa valeur maximale dans F 4 (95,8%) apres 40 mn de distillation. Cette fraction represente 19% des huiles traitees. La cinquieme fraction (F 5),

qui represente 14,6% de Ia totalite des huiles, livre ce compose avec une teneur de 83%. La purification de ce constituant a partir de F 4 et F 5 peut se faire par cristallisation (Farah eta/., 200lb). Ce processus a ete applique pour purifier le I ,8-cineole des huiles essentielles d 'Euca(vptus. L' eucalyptol (I, 8-cineole) est un principe actif tres recherche par les industries pharmaceutiques, alimentaires et cosmetiques (Small, 1981 ). Le y-terpinene, I' a-terpineol et le myrtenol sont seulement detectes apres 50 mn de dis­tillation. La teneur de !'acetate de myrtenyl augmen­te progressivement de 3,6% pour F 5 a 65% pour F 11 .

Cette derniere fraction represente environ 4% de toute l'huile essentielle. La fraction F 10 (environ 5% de l'huile totale) est dominee par !'acetate de myrte­nyl avec un pourcentage de 63, 7%. Ce compose est trouve dans Ia derniere fraction (F 12) avec une teneur d'environ 62%. En general, Ia distillation fractionnee a donne quatre principaux groupes :

- groupe A (0 a 30 mn) riche en a-pinene (42 a 55%) et en 1,8-cineole (27 a 53%) ; il represente environ 29% de l'huile totale ; - groupe B (30 a 50 mn) est domine par le I ,8-cineole (83 a 95%) ; il assure une production esti­

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Tableau 1.- Composition chimique de l'huile essentielle du Myrte du Maroc (Myrtus communis L).

Table 1.- Chemical composition of Moroccan Myrtle ( Myrtus com­munis L) essential oil.

IK Constituants Pourcentages 939 a-pinene 10.00 953 camphene O.D? 976 sabinene 0.27 991 myrcene 0,11 1005 a-phellandrene 0,20 1018 a-terpinCne 0,09 1031 limonene 0,37 1033 I ,8-cineole 43,03 1062 y-terpinene 2,90 1098 linalol 0,30 1112 fenchol 0,06 1129 allo-ocimene t 1134 terpin-1-ol t 1139 trans-pinocarveol 0,13 1140 verbenol 0,22 1177 terpinene-4-ol 0,32 1189 a-terpineol 3,84 1194 myrtenol 1,55 1217 cis-carveol 0,10 1228 neeral 0,10 1255 geraniol 0,11 1257 acetate de linalyl 0,61 1270 geranial 0,10 1282 acetate de verbenyl 0,96 1295 acetate de bornyl 0,23 1335 acetate de myrtenyl 25,05 1337 acetate de carvyl 0,26 1339 1\-elemene 0,17 1340 acetate de terpin-4-ol 0,24 1344 acetate de terpinyl 0,25 1350 acetate d'a-terpinyl 0,29 1376 a-copaene 0,29 1383 acetate de geranyl 2,85 1401 methyle eugenol 1,07 1418 ~-caryophyllene 0,29 1441 y-patchoulene 0,10 1454 a-humulene 0,30 1482 isobutyrate de citronnellyl 0,11 1493 viriflon!ne 0,12 1514 isobutyrate de geranyl 0,19 1520 butyrate d'isobornyl-2-methyl 0,21 1529 n-butyrate de citronnellyl 0,13 1562 n-butyrate de geranyl 0,20 1563 acetate d'isoeugenol 0,09 1581 oxyde de caryophyllene 0,24

Total 98,18

mee a 33% d'essence de myrte traitee; ce groupe peut etre lance sur le marche sous le nom (( huile a cineole )) ou (( huile a eucalyptol )) ; -groupe C de F6 a F9 (50 a 90 mn: 19,7% de l'huile essentielle traite) est caracterise par Ia presence simultanee du I ,8-cineole (12-36%) et d'acetate de myrtenyl (35,8-

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Tableau 11.- Composition chimique majoritaire des fractions de l'huile essentielle du Myrte (Myrtus communis L.) ; PF : pourcentage des fractions.

Table II.- Majority chemical composition of fractions of Myrtle (Myrtus communis L.) essen­tial oil.

Groupe A B c D Fractions Fl F2 F3 F4 F5 Fo F7 FR F9 FlO Fll F12

PF(%) 8.70 9.80 10.20 1'1.20 14.46 5.00 4.78 5.54 4.45 5.10 4.23 2.28

a-pinene 54,83 42,77 42,57 2,30 0,96 0,23 0,24 0,24 0,25 0,26 0,29 0,29 1,8-cineole 27,05 51,69 53,69 95,84 83,30 36,32 27,94 22,12 12,06 3,83 3,35 1,64 y-terpinene 5.85 8.76 9.16 8.22 6.14 3.63 I.RR 1.40 u-terpineol 1.63 7.50 7.9 8.48 8.60 5.06 4.31 5.25 myrtenol 1.06 3.09 3.35 3.54 3.32 2.17 2.86 2.57 acetate de m~·rtenyl 3,60 35,85 41,18 46,30 54,59 63,68 65,20 62,32 acetate de geranyl - 0.60 1.46 1.80 3.17 4.95 6.93 9.59

Total 81.88 94.46 96.26 98.14 96.40 92.35 90.99 90.46 87.88 84.32 84.54 82.77

54,8%) ; Ia separation entre les deux composant peut se faire par cristallisation a basse

temperature ( -16 a -20 oc) ;

- groupe D ( ~ I 00 mn) est caracterise par le predominance de I' acetate de myrteny I ( 62

a 65%) et qui constitue environ II% de l'huile totale.

La distillation fractionnee a permis d'ameliorer Ia teneur de certains composes. Par

consequent, elle constitue un moyen tres efficace de valorisation des huiles essentielles. Ce

procede a ete aussi employe pour rectifier un certains nombre d'huiles essentielles maro­

caines et de fournir ainsi des produits dotes d 'une haute valeur ajoutee (Farah eta/., 200 I a ;

Insaf eta/., 2000).

C. Bioactivite des huiles essentielles Du fait de Ia similitude des resultats des tests antimicrobiens de certaines fractions de

l'huile essentielle du Myrte, on les a regroupes en quatre principales fractions et qui sont :

Tableau Ill.- Activite antibacterienne et antifongique de l'huile essentielle brute (HM) de Myrtus communis et ses principales fractions (A, B, C et D).

Table Ill.- Antibacterial and antifungal activity of crude essential oil (HM) of Myrtus commu­nis and its mean fractions (A, B, C and D).

T: temoin/control ; - :inhibition ; +:croissance/development ; groupe A: F1-F3 ; groupe B: F4-F5 ; groupe C: F6-F9 ; groupeD: F10-F12.

Concentration V/V Fractions

Bacteries

A

Escherichia coli Bacillus suhtilis Sluphylococcus aureu.\· +

,\fh'IYJCOCC'IIS flll£'11.\'

Champignons Penicillium digitatum Aspetxillus niger

1!100 B C D Ho,~ A

+ +

I 1250 I 500 I 1000 T B C D H~t A B C D HM A B C D HM

+ -!'" +

+ + + +

+ + +

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groupe A constitue de F 1 a F 3• groupe 8 de F 4 et F 5• groupe C de F 6 a F 9, groupe D de F 10 a F 12 (Tableau III).

Les resultats du bioessai (Tableau III) montrent que l'huile essentielle brute du Myrte et les principales fractions 8 et C presentent une bonne activite antimicrobienne. Les frac­tions A et D ne presentent aucune activite contre Escherichia coli. Staphylococcus aureus et Aspergillus niger, meme a Ia plus grande concentration testee. Les germes les plus sen­sibles sont Bacillus subtilis. Micrococcus luteus et Penicillium digitatwn qui sont inhibes a Ia concentration de 11500 VIV de l'huile essentielle de Ia principale fraction C. L'huile essentielle brute du Myrte et le groupe de fractions 8 montrent Ia meme activite vis-a-vis des microorganismes dont Ia croissance est totalement inhibee a Ia concentration en huile de 11100 V/V Le groupe C (environ 19,7% de l'huile totale) est le plus etficace des frac­tions et qui a inhibe complt!tement tout les germes testes a Ia concentration de I /250 V IV La nature antimicrobienne des huiles essentielles de plusieurs plantes aromatiques et medi­cinales est attribuee a leurs compositions chimiques riches en alcools terpeniques (Kurita & Koike, 1982 ; 8ouchikhi, 1994 ; Tantaoui-Elaraki & 8eraoud 1994 ; Faid eta/., 1996 ; Karaman eta/., 200 I). Ceci est en accord avec nos resultats qui montrent les taux les plus eleves en a-terpineol (7,5 a 8,6%) et en myrtenol (3,09 a 3,54%) dans Ia principale frac­tion C. En plus, Ia presence du I ,8-cineole dans ce groupe de fractions, avec des taux moyens qui varient entre 12,06 et 36,32%, semblent accentuer cette activite contre les microorganismes. En etfet, Felice et a/. (2004) ont demontre que I' eucalyptol (I ,8-cineo­le) peut etre considere comme l'un des constituants des huiles essentielles dotes d'un pou­voir antimicrobien. On peut conclure done que cette activite peut etre le resultat d'un etfet synergique entre plusieurs composes de cette huile essentielle.

IV CONCLUSION

Le but de ce travail est Ia valorisation des huiles essentielles du Myrte par Ia distillation fractionnee et I'etude du pouvoir antimicrobien des fractions. La distillation a l'echelle industrielle de Myrtus communis L. fournit une huile essentielle avec un rendement de 0,3 a 0,4%. Les analyses chromatographiques de ces huiles ont permis de detecter 45 consti­tuants dont le 1,8-cineole (43%), I' acetate de myrtenyl (25%) et I' a-pinene (I 0%) qui sont les principaux composes.

La rectification des huiles essentielles du Myrte donne quatre principales fractions ; le premier groupe (0 a 30 mn) est constitue par I' a-pinene (42 a 54,8%) et le 1,8-cineole (27 a 53,6%), le deuxieme groupe (30 a 50 mn, 33% d'huile traitee) est domine par le 1,8-cineole ( 83-95,8% ), le troisieme groupe est ric he en I ,8-cineole ( 12-36%) et en acetate myrtenyl (35,8-54,6%) et le quatrieme groupe (90 a 120 mn) est caracterise par Ia domi­nance de l'acetate myrtenyl (62-65%). La deuxieme principale fraction est une source de I ,8-cineole, produit connu commercialement sous le nom d'eucalyptol et qui est utilise par les industries pharmaceutiques.

Le biotest realise sur l'huile essentielle brute du myrte et ses fractions a montre que le groupe C est le plus actif en inhibant tout les microorganismes a Ia valeur de 1/250 V/V Cette activite antimicrobienne est due essentiellement a sa richesse en un melange de ter­penols (a-terpineol et myrtenol) et de 1,8-cineole. Cette fraction, qui constitue environ 20% de l'huile totale, peut etre employee dans l'agroalimentaire comme moyen de pre­vention contre les agents pathogenes qui contaminent les denrees alimentaires ou dans d'autre domaines pharmacologique et medical.

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