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Cristina Cariello Travail de diplôme 2011-2012 LA SPECTROMÉTRIE DE MASSE MALDI-TOF ET LE DIAGNOSTIC MICROBIOLOGIQUE Cristina Cariello ICHV, Laboratoire de microbiologie, Sion Travail de diplôme 2011-2012 Mentor : Lysiane Tissières Lovey

LA SPECTROMÉTRIE DE MASSE MALDI-TOF ET LE …©trie-de... · Cristina Cariello Travail de diplôme 2011-2012 1 LA SPECTROMÉTRIE DE MASSE MALDI-TOF ET LE DIAGNOSTIC MICROBIOLOGIQUE

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Cristina Cariello

Travail de diplôme 2011-2012 1

LA SPECTROMÉTRIE DE MASSE

MALDI-TOF

ET LE DIAGNOSTIC MICROBIOLOGIQUE

Cristina Cariello

ICHV, Laboratoire de microbiologie, Sion

Travail de diplôme

2011-2012

Mentor : Lysiane Tissières Lovey

La spectrométrie de masse MALDI-TOF et le diagnostic microbiologique

Cristina Cariello

Travail de diplôme 2011-2012 2

Sommaire

La spectrométrie de masse MALDI-TOF est une nouvelle technologie apparue ces dernières

années en microbiologie. Si les techniques conventionnelles d’identification des différents

germes se basent sur leurs aspects phénotypiques, il est possible aujourd’hui d’identifier les

microorganismes en analysant directement leurs protéines.

Depuis février 2011, le laboratoire de bactériologie de l’ICHV à Sion s’est muni d’un Vitek MS

utilisant la spectrométrie de masse MALDI-TOF. Le but de ce travail est d’analyser les

performances de cet appareil. 1022 souches de diverses espèces ont été testées sur le MS

en comparaison avec les méthodes usuelles d’identification : le Vitek 2 et les galeries de

tests biochimiques.

Les résultats du Vitek MS se sont avérés fiables avec un pourcentage d’identification au

genre de 99%, à l’espèce de 94% et les identifications sans résultats ne représentent que

5.6% des cas. Les atouts majeurs du Vitek MS sont la fiabilité des résultats, la rapidité et le

faible coût de l’analyse.

Mots–clés

Spectrométrie de masse MALDI-TOF

Ionisation douce

Vitek MS

Vitek 2

Galeries de tests biochimiques

Identification de bactéries et de levures

La spectrométrie de masse MALDI-TOF et le diagnostic microbiologique

Cristina Cariello

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Summary

MALDI-TOF mass spectrometry is a new technology appeard recently in microbiology.

Conventional techniques of bacterial identification are based on phenotypic

characterizations. Since a few years, it is possible to identify microorganisms by using

protein identification.

Since February 2011, the laboratory of microbiology of the ICHV in Sion, has acquired a

Vitek MS using the MALDI-TOF mass spectrometry method. The aim of this study is to

analyse performances of this apparatus. 1022 isolates of different species have been tested

on Vitek MS in comparison with conventionnal methods : Vitek 2 and inoculated strips tests.

Vitek MS results are reliable, with 99% of correct identifications to the genus level, 94% to

the species level and the percentage of identifications with no results in 5.6% of cases. The

most important benefits of Vitek MS are the fiability, the rapid indentification and the low cost

of analysis.

Keywords

MALDI-TOF mass spectrometry

Soft ionization

Vitek MS

Vitek «2

Inoculated strips tests

Bacterial and yeast identification

La spectrométrie de masse MALDI-TOF et le diagnostic microbiologique

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Table des matières

1 Introduction .................................................................................................................... 6

1.1 La spectrométrie de masse ..................................................................................... 6

1.2 La spectrométrie de masse MALDI-TOF ................................................................. 7

1.2.1 Principe ............................................................................................................ 7

1.2.2 La matrice ........................................................................................................ 7

1.2.3 Désorption-Ionisation ....................................................................................... 7

1.2.4 La spectrométrie à temps de vol (TOF) ............................................................ 8

1.2.5 Le spectre ........................................................................................................ 9

2 Objectif de l’étude ..........................................................................................................10

3 Matériel et méthode .......................................................................................................10

3.1 Vitek MS .................................................................................................................10

3.1.1 Présentation de l‘instrument ............................................................................10

3.1.2 Matériel ...........................................................................................................11

3.1.3 Mode opératoire ..............................................................................................12

3.1.4 Traitement des échantillons : ...........................................................................12

3.1.5 Préparation des échantillons : .........................................................................13

3.1.6 Lecture et interprétation des résultats .............................................................15

3.2 Vitek 2 ....................................................................................................................15

3.2.1 Principe ...........................................................................................................15

3.2.2 Matériel ...........................................................................................................15

3.2.3 Mode opératoire ..............................................................................................16

3.2.4 Lecture et interprétation ..................................................................................16

3.3 Galeries de tests biochimiques ...............................................................................16

3.3.1 Principe ...........................................................................................................16

3.3.2 Matériel ...........................................................................................................17

3.3.3 Mode opératoire ..............................................................................................18

3.3.4 Lecture et interprétation ..................................................................................18

4 Analyse des résultats ....................................................................................................19

4.1 Résultats ................................................................................................................19

4.2 Interprétation : points forts et points faibles ............................................................24

4.2.1 Cocci Gram positif ...........................................................................................24

4.2.2 Cocci Gram négatif et Haemophilus ................................................................24

4.2.3 Germes difficiles ..............................................................................................25

4.2.4 Bacilles Gram positif aérobies .........................................................................25

4.2.5 Entérobactéries ...............................................................................................25

4.2.6 Campylobacter ................................................................................................26

4.2.7 Non-fermentatifs ..............................................................................................26

4.2.8 Germes anaérobies .........................................................................................26

4.2.9 Levures ...........................................................................................................26

4.2.10 Champignons ..................................................................................................26

4.2.11 Mycobactéries .................................................................................................26

5 Discussion .....................................................................................................................27

5.1 Améliorations de l’identification des germes en routine ..........................................27

5.1.1 Staphylocoques ...............................................................................................27

5.1.2 Lactobacillus ...................................................................................................27

5.1.3 Gardnerella vaginalis .......................................................................................27

La spectrométrie de masse MALDI-TOF et le diagnostic microbiologique

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Travail de diplôme 2011-2012 5

5.1.4 Levures ...........................................................................................................27

5.1.5 Urotubes .........................................................................................................27

5.1.6 Entérocoques ..................................................................................................28

5.1.7 Contaminations ...............................................................................................28

5.1.8 Peudomonas aeruginosa ................................................................................28

5.1.9 Campylobacter ................................................................................................28

5.2 Lacunes du Vitek MS .............................................................................................28

5.2.1 Shigella ...........................................................................................................28

5.2.2 Champignons ..................................................................................................29

5.2.3 Mycobactéries .................................................................................................29

5.3 Avantages et inconvénients du MS ........................................................................29

6 Conclusion ....................................................................................................................31

7 Références bibliographiques .........................................................................................32

8 Lexique .........................................................................................................................34

9 Remerciements .............................................................................................................35

10 Annexes.....................................................................................................................36

10.1 Annexe 1: Résultats des souches testées ..............................................................36

10.1.1 Staphylocoques ...............................................................................................37

10.1.2 Entérocoques ..................................................................................................41

10.1.3 Streptocoques .................................................................................................43

10.1.4 Streptococcus pneumoniae traités ..................................................................47

10.1.5 Autres coques Gram positif .............................................................................48

10.1.6 Neisseria/Branhamella ....................................................................................48

10.1.7 Gardnerella vaginalis .......................................................................................49

10.1.8 Corynébactéries ..............................................................................................50

10.1.9 Autres bacilles Gram positif aérobes ...............................................................51

10.1.10 Entérobactéries ...........................................................................................52

10.1.11 Pseudomonas sp .........................................................................................60

10.1.12 Autres non-fermentatifs ...............................................................................62

10.1.13 Germes difficiles ..........................................................................................63

10.1.14 Haemophilus sp ...........................................................................................64

10.1.15 Campylobacter sp ........................................................................................66

10.1.16 Anaérobies ..................................................................................................67

10.1.17 Levures ........................................................................................................71

10.1.18 Champignons ..............................................................................................73

10.1.19 Mycobactéries .............................................................................................74

10.2 Annexe 2: Tableau des galeries de tests biochimiques ..........................................75

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1 Introduction

Ce travail de diplôme a été effectué au laboratoire de bactériologie de l’ICHV à Sion et a

pour but d’étudier les performances d’un spectromètre de masse MALDI-TOF dans le

diagnostic microbiologique.

En microbiologie, l’identification traditionnelle des bactéries se fait principalement en étudiant

leurs aspects morphologiques (macro- ou microscopiquement) et leurs caractères

biochimiques. Ces tests requièrent la croissance des bactéries dans des galeries de tests

biochimiques et nécessitent une incubation allant de 4 à 18 heures.

Une nouvelle méthode basée sur la spectrométrie de masse peut être utile au laboratoire de

bactériologie pour l’identification rapide des différents pathogènes. Contrairement aux

méthodes classiques, la spectrométrie de masse analyse directement les macromolécules

des différents germes, notamment les protéines, permettant ainsi d’obtenir des résultats plus

rapidement.

1.1 La spectrométrie de masse

La spectrométrie de masse consiste à séparer et identifier des molécules selon leur masse

et leur charge [12]. Les applications de la spectrométrie de masse sont nombreuses et

touchent divers domaines: en biotechnologies pour l’analyse des peptides1 ou

oligonucléotides, en pharmacologie pour le dosage de médicaments, dans le domaine de

l’environnement pour l’analyse de l’eau, en clinique pour la recherche de drogues [1], etc.

Il existe plusieurs types de spectromètres de masse pouvant séparer des molécules plus ou

moins grandes et leurs méthodes ont toutes en commun les étapes suivantes [7] :

Préparation et introduction de l’échantillon

Ionisation des molécules d’intérêt

Séparation des ions en fonction de leur rapport masse/charge

Détection et amplification du signal

Analyse des données et identification de l’échantillon

Les premiers spectromètres de masse datent du début du 20ème siècle et ont servi en

physique à rechercher les différents isotopes d’un élément chimique. C’est Francis William

Aston qui conçut le premier spectromètre de masse en 1922. Il réussit à démontrer

l’existence des isotopes en les séparant selon leur masse et leur charge [11].

Au cours du 20ème siècle, la spectrométrie de masse prend de plus en plus d’ampleur et de

nombreuses nouvelles techniques d’ionisation et de séparation des ions ont été mises en

place.

Le développement de la méthode MALDI-TOF se fait dans les années 80. À cette période,

l’ionisation se faisait sur des molécules ayant une taille d’environ 1000 Daltons et il était

impensable d’ioniser des molécules excédant 10 000 Daltons car trop fragiles [4]. En 1985,

Koichi Tanaka, chimiste japonais ayant reçu un Prix Nobel en 2002, constate que des

macromolécules peuvent être séparées en mélangeant l’échantillon avec une solution

contenant de la poudre métallique ultrafine et du glycérol [8]. Il réussit à ioniser la molécule

de lysozyme d’une taille de 14 300 Daltons. Durant la même période, Michael Karas et

Franz Hillenkamp réussissent à ioniser l’albumine possédant une taille de 66 600 Daltons [9].

Les différentes recherches menées pas les équipes de K. Tanaka et Karas/Hillenkampf ont

permis de mettre au point la technique de spectrométrie de masse MALDI-TOF utile dans

l’analyse des biomolécules.

1À partir de ce point, les mots soulignés sont cités dans le lexique.

La spectrométrie de masse MALDI-TOF et le diagnostic microbiologique

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1.2 La spectrométrie de masse MALDI-TOF

1.2.1 Principe

Le spectromètre de masse MALDI-TOF est un spectromètre utilisant une source d’ionisation

laser assistée par une matrice (MALDI = Matrix-Assisted Laser Desorption/Ionisation) et un

analyseur à temps de vol (TOF = Time-Of-Flight) [10]. La séparation des molécules par cette

technique est plus douce qu’avec les autres méthodes. Elle permet d’ioniser des molécules

de grande taille, peu volatiles et sensibles à la chaleur sans les dégrader [13]. La méthode

MALDI-TOF s’applique aux biomolécules plus fragiles comme les peptides, les protéines, les

glycoprotéines et les oligonucléotides [1].

L’échantillon est mélangé à la matrice et placé sur une lame. Le dépôt (ou spot) formé est

appelé cible. Une source laser est dirigée sur la cible afin d’ioniser les molécules de

l’échantillon. Les ions sont ensuite détectés en mesurant le temps que mettent les différentes

particules à atteindre le détecteur. La vitesse de chaque particule dépend du rapport

masse/charge. Les molécules plus grandes mettront plus de temps à atteindre le détecteur,

tandis que les molécules plus petites arriveront plus vite. Une fois l’ion arrivé au détecteur, le

signal est amplifié et envoyé à un ordinateur qui traite les données et donne les résultats

sous forme de spectre [9].

1.2.2 La matrice

La matrice est constituée de molécules cristallisées dont les plus utilisées sont l’acide 2,5

dihydroxybenzoïque (DHB), l’acide sinapinique et l’acide α-cyano-4-hydroxycinnamique

(CHCA). Ces molécules sont ajoutées à un solvant (acétonitrile, éthanol ou acide

trifluoroacétique) [10]. Le DHB convient pour l’analyse des échantillons organiques

hydrophobes ou des polymères aromatiques, tandis que l’acide sinapinique et l’acide α-

cyano-4-hydroxycinnamique sont destinés pour l’analyse des protéines [6].

Un solvant composé d’eau et d’acétonitrile est ajouté à la matrice [6] afin de permettre aux

substances de l’échantillon de se dissoudre dans le mélange : les substances hydrophobes

de l’échantillon auront une affinité pour l’acétonitrile et les substances hydrophiles auront une

affinité pour l’eau [10].

Après avoir mélangé la matrice à l’échantillon, le spot est séché à l’air. Le solvant va ainsi

s’évaporer et il ne restera plus que la matrice cristallisée et l’analyte à l’intérieur [10].

Les composants de la matrice doivent avoir plusieurs caractéristiques :

ils doivent pouvoir se mélanger avec les solvants organiques et l’eau [10]

ils doivent être assez grands afin de ne pas s’évaporer lors de la préparation de

l’échantillon ou lorsque celui-ci est introduit dans le spectromètre [10], [5]

ils doivent être assez petits afin d’avoir une bonne volatilité et se vaporiser sous

l’action du rayon laser [5]

ils doivent être acides afin de transmettre des protons à l’analyte et ainsi l’ioniser [10],

[5]

ils doivent pouvoir absorber fortement et rapidement les rayons ultra-violets du laser

[10]

1.2.3 Désorption-Ionisation

Un laser UV (337 nm de longueur d’onde) d’azote (N2) est pulsé en direction de la cible. La

matrice ayant une grande réactivité pour l’absorption de la lumière UV absorbe l’énergie du

laser protégeant ainsi les molécules protéiniques de la dégradation. L’énergie du laser

produit deux phénomènes : tout d’abord, la matrice se vaporise libérant les peptides

(désorption), ensuite, elle transfert ses protons à l’analyte qui s’ionise [5].

La spectrométrie de masse MALDI-TOF et le diagnostic microbiologique

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Travail de diplôme 2011-2012 8

Les ions peuvent être chargés positivement ou négativement selon leur nature. Les

protéines et peptides ont des groupements accepteurs de protons et sont ionisé

positivement. Les oligonucléotides et les saccharides ont des groupements qui perdent un

proton et sont ionisés négativement [1].

Peptides :

R-NH2 + H+ → R-NH3+ (ionisation positive)

Saccharides :

Acides carboxyliques R-CO2H → R-CO2- (ionisation négative)

Fonction alcoolique R-OH → R-O- (ionisation négative)

1.2.4 La spectrométrie à temps de vol (TOF)

La spectrométrie à temps de vol est une technique séparant les substances ionisées en

fonction de leur charge et de leur poids moléculaire. La séparation se fait entre une anode et

une cathode dirigeant ainsi les molécules ionisées vers l’électrode portant la charge inverse

des ions à analyser [5]. Les ions passent ensuite à travers un champ électrique de force

connue accélérant leur progression [9]. Le spectromètre mesure le temps que mettent les

différents ions à atteindre le détecteur. Les grosses molécules mettent plus de temps à

atteindre le détecteur que les petites molécules. Elles sont ainsi séparées en fonction de

leur rapport masse/charge [5].

Figure 1: Principe d'ionisation par la technique MALDI.

L’analyte (en vert) est cristallisé dans la matrice (en violet).

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Figure 2: Technique Time of flight (TOF)

Le détecteur envoie ensuite les informations enregistrées à l’analyseur qui va traiter les

données et les présenter sous forme de spectre.

1.2.5 Le spectre

Les données enregistrées sont calculées afin de transposer les résultats dans un spectre où

chaque pic correspond à un type de molécule. L’axe des ordonnées représente l’intensité

relative du signal et l’axe des abscisses indique la taille de la molécule en Daltons.

L’appareil intègre les différents pics enregistrés et recherche dans la base de données

l’identification du germe correspondant.

Figure 3: Spectre MALDI-TOF

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2 Objectif de l’étude

En janvier 2011, le laboratoire de microbiologie a fait l’acquisition d’un spectromètre de

masse, le Vitek MS, utilisant la méthode MALDI-TOF. La spectrométrie de masse est une

toute nouvelle technologie en microbiologie pouvant offrir un gain de temps dans

l’identification des germes pathologiques en routine.

L’objectif de cette étude est de tester différents germes sur le Vitek MS en comparant les

résultats obtenus avec les résultats des méthodes d’identification de références du

laboratoire, notamment l’automate Vitek 2 et les galeries d’identification.

L’analyse des résultats du Vitek MS a pour but de mettre en évidence les points forts et les

points faibles de l’appareil et d’énumérer les avantages et les inconvénients de cette

technologie dans le diagnostic microbiologique.

3 Matériel et méthode

3.1 Vitek MS

3.1.1 Présentation de l‘instrument

Figure 4: Vitek MS Figure 5 : Fonctionnement du Vitek MS

Face avant, avec la porte (1) qui

permet de charger les échantillons

et des diodes (2), témoins du

fonctionnement de l’appareil.

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3.1.2 Matériel

Pipettes (0.1-3 µl) et embouts (0.1-10 µl)

Anses jetables de 1µl

Lames DS 48 puits (cibles)

ECAL: Escherichia coli ATCC 8739 pour la calibration

Acide formique 25%

Matrice : CHCA (Acide α-cyano-4-hydroxycinnamique)

Isolats à tester

Pour ce travail, 1022 souches ont été testées sur le Vitek MS. Les souches utilisées

proviennent soit de la souchothèque, soit d’échantillons de la routine. Les souches de la

souchothèque ont été analysées par moi-même, tandis que les souches de la routine ont été

traitées par les techniciennes en analyses biomédicales du laboratoire de microbiologie qui

m’ont ensuite transmis leurs résultats.

Sur l’ensemble des résultats de l’étude, j’ai testé 250 souches provenant de la souchothèque

et récolté 772 résultats de la routine.

Voici une répartition représentant la proportion des différents groupes de germes utilisés :

Plus de la moitié des souches testées concernent des bactéries que l’on rencontre le plus

souvent en routine, c'est-à-dire les entérobactéries, les staphylocoques, les anaérobies et les

streptocoques. Ces germes sont suivis par les non-fermentatifs, constitués par la plupart de

Pseudomonas sp, les Entérocoques et les levures. Les germes difficiles sont composés de

bactéries à culture lente et requérant des milieux de culture spéciaux. Ils sont constitués

majoritairement par des Legionella et des Pasteurella.

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Travail de diplôme 2011-2012 12

Les « b+ aérobies » sont constitués principalement par des Bacillus, des Lactobacillus et des

Listeria monocytogenes. Les « autres c+ » sont composés par des coques Gram positif,

catalase négative (Aerococcus urinae et Leuconostoc lactis).

3.1.3 Mode opératoire

Calibration

La calibration se fait à l’aide d’une

souche d’Escherichia coli ATCC 8739.

Cette souche est stockée au

congélateur à une température de -

80°C. Une subculture S1 est effectuée

sur gélose au sang et conservée au

frigo durant quatre semaines. La

souche calibrante est obtenue en

repiquant la souche S1 sur gélose au

sang. Celle-ci est repiquée tous les

jours afin d’avoir une souche fraîche

pour la calibration. Une fois par

semaine, la souche calibrante est

repiquée à partir de la souche S1

conservée au frigo.

Après quatre semaines, la souche S1 est repiquée sur gélose au sang pour obtenir la

souche S2, conservée également à son tour au frigo pendant quatre semaines et repiquée 1

fois par semaine pour la souche calibrante.

On procède ainsi de suite jusqu’à la souche S7, après laquelle, on repart à partir de la

souche stockée au congélateur.

En pratique, on a constaté qu’il n’y a pas besoin de changer la souche du frigo tous les mois.

Ainsi, la souche congelée est repiquée seulement s’il y a des problèmes de calibration (on

ne s’arrête pas à la souche S7).

Le dépôt de la souche calibrante se fait sur la lame DS, sur un puits prévu à cet effet. Le

puits est légèrement plus petit que les autres et est situé au milieu de chaque série de 16

échantillons (cf. Figure 7). Le calibrateur est lu avant et après chaque série et le résultat doit

être bon pour pouvoir valider les résultats des échantillons. Si le MS n’arrive pas à intégrer

les pics et à identifier la souche calibrante, il n’analyse pas les échantillons.

3.1.4 Traitement des échantillons :

Les souches provenant de la souchothèque sont traités de la manière suivante :

Les différentes souches sont recherchées dans la souchothèque du laboratoire à

l’aide du logiciel « Access 2002 ».

Les souches choisies sont décongelées et isolées sur une gélose adéquate, puis

incubées pendant 24 heures à l’étuve.

Le 2ème jour, les germes sont testés sur le Vitek MS.

Remarque : Les bactéries testées sur le MS doivent être si possible fraîches. Il est

déconseillé d’utiliser des souches incubées plus de 72 heures car les pics seront décalés

(shift) et les résultats peuvent être faussés. Les conditions de culture ont une influence

sur l’expression des protéines et peuvent ainsi altérer les résultats du MS [2].

La spectrométrie de masse MALDI-TOF et le diagnostic microbiologique

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Travail de diplôme 2011-2012 13

3.1.5 Préparation des échantillons :

La préparation des échantillons se fait à partir de la Prep Station (Figure 6). C’est un module

constitué d’un ordinateur et d’un scanner optique servant à introduire les différentes données

des échantillons (NLAB, bactérie, levure) et leur emplacement sur la lame. La Prep Station

est reliée au programme Myla qui intègre et gère les résultats du Vitek MS et du Vitek 2

avant leur transfert au SIL (système informatique du laboratoire).

Figure 6: Prep Station

À l’aide d’une anse calibrée de 1 µl, prélever une colonie à tester et la déposer sur les

puits cibles. Tester l’échantillon à double.

Sur les 2 dépôts, ajouter 1µl de matrice CHCA.

Pour les levures et certaines bactéries pour lesquelles une extraction des protéines

est nécessaire (Strepto. pneumoniae), déposer l’échantillon et traiter avec 0.5 µl

d’acide formique. Laisser sécher, puis ajouter 1µl de matrice.

Pour la calibration, faire un dépôt avec la souche E. coli 8739 dans le puits prévu à

cet effet, puis déposer 1µl de matrice.

Indiquer les emplacements de chaque échantillons sur la lame en spécifiant s’il s’agit

de bactéries ou de levures car les spectres d’acquisition sont séparés dans deux

bases de données différentes.

Une fois la lame terminée, transférer les données de la Prep Station vers le Vitek MS,

placer la lame (Figure 7) sur le porte-lame (Figure 8), l’introduire dans le Vitek MS et

lancer l’analyse.

Figure 7: Lame DS Figure 8 : Porte-lames

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Pour les champignons et les mycobactéries, il faut réaliser une étape d’inactivation avant de

faire le dépôt de l’échantillon sur la lame DS afin d’éviter que les spores ne se disséminent

dans l’instrument :

Travailler sous la hotte.

Préparer un microtube de 2 ml pour chaque échantillon contenant 50 µl de TFA

(Trifluoroacetic acid).

Prélever une quantité suffisante de culture de germes et l’introduire dans le tube

contenant le TFA. Il faut prélever assez de matériel pour qu’il soit visible au fond du

tube à l’œil nu.

Mélanger en vortexant le tube durant quelques secondes.

Laisser incuber sous la hotte pendant 30 minutes.

Diluer la suspension à 1/10 en ajoutant 450 µl d’eau déminéralisée dans le microtube.

Vortexer quelques secondes.

Déposer 1 µl de suspension sur le puits.

Bien laisser sécher, puis déposer 1 µl de matrice.

Tester la lame immédiatement.

Schéma : Préparation de l’échantillon

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3.1.6 Lecture et interprétation des résultats

Une fois l’analyse terminée le MS affiche les résultats dans le programme « Myla » et

indique le pourcentage d’identification. Les résultats sont classés par famille dans des

tableaux Excel (cf. Annexe 1 : Résultats des souches testées) afin de déterminer le

pourcentage d’identification pour les différents germes.

Les souches provenant de la routine, sont testées sur le MS en parallèle avec une méthode

de référence afin de pouvoir confirmer l’identification. En cas de discordance, une troisième

méthode est utilisée pour confirmer le résultat (galeries de tests biochimiques, optochine,

séquençage, Gram, etc.).

Les souches de la souchothèque n’ont pas besoin d’être testées parallèlement avec une 2ème

méthode car elles ont déjà été identifiées au préalable. Seuls les germes présentant des

résultats discordants sont gardés afin de procéder à une confirmation avec une troisième

méthode.

3.2 Vitek 2

3.2.1 Principe

Le Vitek 2 permet d’effectuer de manière automatisée des identifications et des

antibiogrammes à l’aide de cartes contenant des cupules avec différents réactifs ou des

doses précises d’antibiotiques. Pour ce travail, seulement des identifications ont été

réalisées : la procédure des antibiogrammes ne sera donc pas décrite.

Les cartes d’identification sont constituées de cupules étanches contenant différents réactifs

nécessaires pour les tests biochimiques. Une suspension bactérienne de Mac Farland 0.55-

0.65 est effectuée dans un tube en plastique qui est placé sur un portoir spécial. Une paille

accolée à la carte est introduite dans le tube. L’appareil prend ensuite en charge toutes les

dilutions nécessaires, l’aspiration de la suspension dans chaque cupule et l’incubation de la

carte. Le module analytique procède à des lectures toutes les 15 minutes en mesurant le

trouble ou le changement de couleur présent dans chaque cupule. Il donne ensuite une

identification du germe en fonction des profils biochimiques trouvés.

3.2.2 Matériel

Tubes en plastiques

Module de préparation de l’échantillon comprenant :

o Un portoir pour poser les tubes et les cartes

o Un lecteur de code barre pour lire les numéros d’échantillon et les cartes

o Un ordinateur récoltant les informations nécessaires (numéro de

l’échantillon, numéro de la carte, positions sur le portoir…)

o Un densitomètre

Module d’analyse de l’échantillon Vitek 2

Figure 9 : Carte Vitek 2

La spectrométrie de masse MALDI-TOF et le diagnostic microbiologique

Cristina Cariello

Travail de diplôme 2011-2012 16

B A

Figure 10: Module de préparation de l'inoculum (A) et module analytique (B) du Vitek 2

Le module analytique est relié à un ordinateur permettant d’accéder aux résultats et de les

imprimer.

Les cartes à dispositions sont les suivantes et sont choisies selon le germe à identifier :

Cartes Vitek 2 Germes

GN Bacilles Gram négatif

GP Cocci Gram positif

YST Levures

ANC Anaérobies

Corynébactéries

3.2.3 Mode opératoire

À partir d’une culture fraîche, prélever à l’aide d’un écouvillon stérile quelques

colonies bien isolées et les dissoudre dans 3 ml d’eau déminéralisée en effectuant un

Mac Farland de 0.55-0.65

Vérifier la pureté de la suspension bactérienne en ensemençant une plaque de

pureté

Placer le tube sur le portoir et introduire la paille de la carte correspondante dans le

tube

Placer le portoir dans le module analytique

3.2.4 Lecture et interprétation

L’analyse dure entre 4 et 10 heures et le programme imprime les résultats obtenus lorsque

l’analyse est terminée. Sur la feuille de résultat, apparaissent le nom du germe identifié ainsi

que le pourcentage de l’identification. S’il y a le message « Low Discrimination », cela

signifie que l’automate hésite entre plusieurs identifications et il faut procéder à des tests

complémentaires afin de choisir le germe adéquat.

3.3 Galeries de tests biochimiques

3.3.1 Principe

Les galeries de tests biochimiques sont utilisées pour étudier les différents caractères

biochimiques des bactéries et ainsi permettre de les identifier à l’aide d’une base de

données. Chaque galerie permet l’identification du genre et de l’espèce d’un certain nombre

de germes indiqués dans la notice d’utilisation.

Les galeries de tests biochimiques sont constituées de microtubes ou de cupules contenant

des substrats réactionnels. En incubant une suspension bactérienne avec les différents

La spectrométrie de masse MALDI-TOF et le diagnostic microbiologique

Cristina Cariello

Travail de diplôme 2011-2012 17

substrats, il se crée un changement de couleur spontané ou révélé à l’aide d’un révélateur.

Chaque galerie a sa méthode d’inoculation et son temps d’incubation.

3.3.2 Matériel

Composition d’un kit :

Galeries de tests biochimiques (microtubes ou cupules) emballées individuellement

avec un déshydratant

Boîtes d’incubation et couvercles

Notice du kit contenant le protocole et les résultats du test

Ampoules contenant un milieu spécial (facultatif)

Figure 11 : Galerie à microtubes (API 20 A)

Figure 12: Galerie à cupules (API ID 32 STAPH)

Matériel non fourni :

Densitomètre

NaCl 0.85% 3 ml

Pipettes en verre

Pipettes calibrées et embouts

Pipettes automatiques et embouts ATB

Galeries de tests biochimiques disponibles au laboratoire :

Plusieurs galeries ont été utilisées pour confirmer l’identification d’une souche testée au

Vitek MS suite à une discordance. Les galeries de tests biochimiques sont choisies selon les

différents groupes auxquels le germe appartient. Voici un tableau des différentes galeries de

tests biochimiques mises à disposition pour ce travail et les groupes de germes pouvant être

identifiés :

Galeries Germes

Rapid ID 32 E Entérobactéries

ID 32 E Entérobactéries

Rapid ID 32 STREP Streptocoques

ID 32 STAPH Staphylocoques

ID 32 C Levures

Rapid ID 32 A Anaérobies

La spectrométrie de masse MALDI-TOF et le diagnostic microbiologique

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Travail de diplôme 2011-2012 18

3.3.3 Mode opératoire

Chaque galerie a un mode opératoire différent. Il faut respecter le protocole pour la

préparation de l’inoculum et le remplissage des galeries de tests biochimiques selon le

tableau « Tableau des galeries de tests biochimiques » (cf. Annexe 2).

3.3.4 Lecture et interprétation

Après incubation, les résultats sont lus à l’aide de la notice fournie avec le kit.

Lire les réactions spontanées en les indiquant comme positives (+) ou négatives (-)

selon le changement de couleur indiqué dans la notice.

Ajouter 1 goutte des réactifs demandés dans les microtubes et lire les résultats en

respectant le temps d’incubation.

Rem : certains microtubes sont bifonctionnels et peuvent permettre la réalisation de 2

réactions dans le même tube en lisant le résultat avant et après adjonction du réactif

demandé.

Une fois les résultats notés, les introduire dans le logiciel Api Web après avoir choisi

la galerie correspondante et ensuite, imprimer le rapport avec l’identification du

germe.

Api Web est un lien internet qui met à disposition la banque de données des

différentes bactéries. Ce service de Biomérieux permet l’identification des

microorganismes testés. Après avoir introduit les résultats obtenus avec les galeries

de tests biochimiques, le logiciel donne l’identification correspondante.

Remarque : parfois le logiciel hésite entre plusieurs identifications. Il faut procéder à des

tests complémentaires afin de déterminer la bonne espèce.

Galeries Germes

API Coryne Corynébactéries

API NH Neisseria

Haemophilus

API 20 NE Bacilles Gram négatif

Non-fermentatifs

API 20 E Entérobactéries

API 20 A Anaérobies

API 20 STREP Streptocoques

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Travail de diplôme 2011-2012 19

4 Analyse des résultats

4.1 Résultats

Ce tableau reprend les résultats obtenus pour la totalité des souches testées sur le Vitek

MS. Les différentes bactéries ont été classées par groupes dans différents tableaux (cf.

Annexe 1: Résultats des souches testées). Pour chaque espèce, le pourcentage

d’identification correcte a été calculé afin de pouvoir comparer les résultats entre les

différentes espèces.

Les discordances au genre représentent des erreurs du MS pour lesquels les identifications

sont mauvaises pour le genre. Ce sont des discordances majeures car le MS a donné un

résultat complètement différent.

Les discordances à l’espèce correspondent aux erreurs d’identification à l’espèce

uniquement. Ces erreurs représentent des discordances mineures car le MS a donné une

identification correcte au genre, mais incorrecte à l’espèce.

La colonne « aucun résultat » représente les cas pour lesquels le Vitek MS n’a pas donné de

résultat. Ces cas peuvent être dues à différentes raisons : mauvaise qualité du spot,

insuffisance du nombre de pics d’intégration, échec de calibration ou absence de l’espèce

dans la base de données du Vitek MS (microorganismes en rouge dans la colonne

« Catégorie »).

Catégorie Total

souches

Discord. au

genre

Discord. à

l'espèce

Aucun

résultat

% d’id.

correctes

au genre

% d’id.

correctes

à l'espèce

% d’id.

sans

résultat

Staphylocoques

S.aureus

S.capitis

S.caprae

S.epidermidis

S.haemolyticus

S.hominis

S.lugdunensis

S.saprophyticus

S.schleiferi

S.simulans

S.warneri

S.xylosus

126

43

7

1

44

8

9

4

3

2

3

1

1

0

0

0

0

0

0

0

0

0

0

0

0

0

0

0

0

0

0

0

0

0

0

0

0

0

0

2

0

0

0

2

0

0

0

0

0

0

0

0

100

100

100

100

100

100

100

100

100

100

100

100

100

100

100

100

100

100

100

100

100

100

100

100

100

100

1.6

0

0

0

4.5

0

0

0

0

0

0

0

0

Entérocoques

E.avium

E.casseliflavus

E.durans

E.faecalis

E.faecium

E.gallinarum

Enterococcus sp

68

5

2

1

34

23

2

1

0

0

0

0

0

0

0

0

2

0

0

0

0

0

2

0

1

0

0

0

0

0

0

1

100

100

100

100

100

100

100

100

97

100

100

100

100

100

0

100

1.5

0

0

0

0

0

0

100

La spectrométrie de masse MALDI-TOF et le diagnostic microbiologique

Cristina Cariello

Travail de diplôme 2011-2012 20

Catégorie Total

souches

Discord. au

genre

Discord. à

l'espèce

Aucun

résultat

% d’id.

correctes

au genre

% d’id.

correctes

à l'espèce

% d’id.

sans

résultat

Streptocoques

Abiotrophia defectiva

S.agalactiae

S.alactolyticus

S.anginosus

S.constellatus

S.dysgalactiae

S.gallolyticus

S.gordonii

S.infantarius

S.intermedius

S.mitis/oralis

S.parasanguinis

S.pneumoniae

S.pneumoniae traîtés2

S.pyogenes

S.salivarius

110

2

23

1

13

9

6

3

2

2

2

10

3

21

23

8

5

0

0

0

0

0

0

0

0

0

0

0

0

0

0

0

0

0

3

0

0

0

0

1

1

0

0

1

0

0

0

0

0

0

0

9

0

0

0

0

0

1

0

0

1

0

2

0

5

1

0

0

100

100

100

100

100

100

100

100

100

100

100

100

100

100

100

100

100

97

100

100

100

100

89

83

100

100

50

100

100

100

100

100

100

100

8.2

0

0

0

0

0

17

0

0

50

0

20

0

24

4.3

0

0

Autres c+ aérobies

Aerococcus urinae

Leuconostoc lactis

4

3

1

0

0

0

1

0

1

0

0

0

100

100

100

75

100

0

0

100

100

Neisseria/Branhamella

B. catarrhalis

M. non-liquefaciens

Moraxella sp

N. gonorrhoeae

N. meningitidis

Neisseria sp

N. zoodegmatis

23

9

1

1

5

4

2

1

0

0

0

0

0

0

0

0

0

0

0

-

0

0

-

0

0

0

0

0

0

0

0

0

100

100

100

100

100

100

100

100

100

100

100

-

100

100

-

100

0

0

0

0

0

0

0

0

Gardnerella vaginalis 17 0 1 0 100 94 0

Corynebactéries

Arcano. haemolyticum

C.amycolatum

C.diphteriae

C.glucoserum

C.glucuronolyticum

C.jeikeium

C.pseudodiphteriticum

C.striatum

C.urealyticum

Turicella otidis

Corynebacterium sp

41

2

6

1

1

1

7

15

1

2

1

4

3

0

0

0

0

1

0

1

0

0

1

0

9

0

6

0

0

0

0

0

0

0

0

3

6

0

0

0

1

0

3

1

0

0

0

1

93

100

100

100

100

0

100

93

100

100

0

100

78

100

0

100

100

100

100

100

100

100

100

25

15

0

0

0

100

0

43

6.7

0

0

0

25

2 Streptococcus pneumoniae traités à l’acide formique (ne sont pas comptabilisés dans le nombre de souches totales).

La spectrométrie de masse MALDI-TOF et le diagnostic microbiologique

Cristina Cariello

Travail de diplôme 2011-2012 21

Catégorie Total

souches

Discord. au

genre

Discord. à

l'espèce

Aucun

résultat

% d’id.

correctes

au genre

% d’id.

correctes

à l'espèce

% d’id.

sans

résultat

Autres b+ aérobies

Bacillus sp

Erysipel. rhusiopathiae

Lactobacillus sp

Listeria monocytogenes

Nocardia sp

Rhodococcus equi

Rothia dentocariosa

20

4

1

7

5

1

1

1

1

0

0

0

0

0

1

0

2

2

0

0

0

0

0

0

1

0

0

0

0

1

0

0

95

100

100

100

100

100

0

100

90

50

100

100

100

100

100

100

5

0

0

0

0

100

0

0

Entérobactéries

Citrobacter braakii

Citrobacter freundii

Citrobacter koseri

Citrobacter youngae

Edwardsiella tarda

Enterobacter aerogenes

Enterobacter cloacae

Enterobacter sakazakii

Escherichia coli

Hafnia alvei

Klebsiella oxytoca

Klebsiella pneumoniae

Kluyvera ascorbata

Morganella morganii

Plantoa agglomerans

Proteus mirabilis

Proteus penneri

Proteus stuartii

Proteus vulgaris

Salmonella sp

Salmonella enteritidis

Salmonella typhi

Salmonella typhimorium

Serratia liquefaciens

Serratia marcescens

Serratia odorifera

Shewanella putrefaciens

Shigella sp

Shigella sonnei

Vibrio parahaemolyticum

Yers. pseudotuberculosis

Yokenella regensburgei

226

2

4

4

2

1

4

18

1

87

3

11

26

1

5

1

14

1

1

2

12

4

1

1

1

8

1

1

3

2

1

2

1

6

0

0

0

0

0

0

0

0

0

0

1

0

0

0

0

0

0

0

0

0

0

0

0

0

0

0

0

3

2

0

0

0

25

1

0

0

1

0

0

14

0

0

0

0

0

0

0

0

0

0

0

1

-

4

1

1

0

0

1

1

-

0

0

0

0

4

1

0

1

1

0

0

0

0

0

0

0

1

0

0

0

0

0

0

0

0

0

0

0

0

0

0

0

0

0

0

0

0

97

100

100

100

100

100

100

100

100

100

100

91

100

100

100

100

100

100

100

100

100

100

100

100

100

100

100

100

0

0

100

100

100

89

50

100

100

50

100

100

22

100

100

100

100

100

100

100

100

100

100

100

50

-

0

0

0

100

100

0

0

-

100

100

100

100

1.8

50

0

25

50

0

0

0

0

0

0

0

3.8

0

0

0

0

0

0

0

0

0

0

0

0

0

0

0

0

0

0

0

0

La spectrométrie de masse MALDI-TOF et le diagnostic microbiologique

Cristina Cariello

Travail de diplôme 2011-2012 22

Catégorie Total

souches

Discord. au

genre

Discord. à

l'espèce

Aucun

résultat

% d’id.

correctes

au genre

% d’id.

correctes

à l'espèce

% d’id.

sans

résultat

Pseudomonas

P.aeruginosa

P.fluorescens

P.oryzihabitans

P.pseudoalcaligenes

P.putida

Pseudomonas sp

46

40

1

2

1

1

1

0

0

0

0

0

0

0

1

0

0

0

0

1

-

0

0

0

0

0

0

0

100

100

100

100

100

100

0

98

100

100

100

100

0

-

0

0

0

0

0

0

0

Autres non-fermentatifs

Acinetobacter johnsonii

Acinetobacter baumanii

Acinetobacter lwoffii

Acinete. radioresistens

Acinetobacter sp

Alcaligenes faecalis

Bordetella bronchiseptica

Burkholderia cepacia

Rhizobium radiobacter

Steno.maltophilia

22

1

2

1

1

2

1

2

8

1

3

0

0

0

0

0

0

0

0

0

0

0

8

0

0

0

0

0

0

0

8

0

0

1

0

0

0

0

1

0

0

0

0

0

100

100

100

100

100

100

100

100

100

100

100

64

100

100

100

100

100

100

100

0

100

100

4.5

0

0

0

0

50

0

0

0

0

0

Germes difficiles

Bergeyella zoohelcum

Capnocytophaga sp

Cardiobacter hominis

Eikenella corrodens

Kingella denitrificans

Legionella sp

Legionella anisa

Legionella pneumophila

Legionella taurinensis

Pasteurella bettyae

Pasteurella multocida

39

1

1

1

2

2

6

2

12

2

1

9

0

0

0

0

0

0

0

0

0

0

0

0

1

0

0

0

0

0

-

0

0

0

0

1

11

0

0

0

0

0

6

2

0

2

1

0

100

100

100

100

100

100

100

100

100

100

100

100

97

100

100

100

100

100

-

100

100

100

100

89

28

0

0

0

0

0

100

100

0

100

100

0

Haemophilus

Aggr.aphrophilus

H.influenzae

H. parahaemolyticus

H.parainfluenzae

49

3

31

2

13

0

0

0

0

0

2

1

0

0

1

2

0

2

0

0

100

100

100

100

100

94

67

100

100

92

4

0

6.5

0

0

Campylobacter

C.coli

C.fetus

C.jejuni

20

6

1

13

0

0

0

0

1

1

0

0

0

0

0

0

100

100

100

100

95

83

100

100

0

0

0

0

La spectrométrie de masse MALDI-TOF et le diagnostic microbiologique

Cristina Cariello

Travail de diplôme 2011-2012 23

Catégorie Total

souches

Discord. au

genre

Discord. à

l'espèce

Aucun

résultat

% d’id.

correctes

au genre

% d’id.

correctes

à l'espèce

% d’id.

sans

résultat

Germes anaérobies

Actinomyces sp

Bacteroides fragilis

Bact. thetaiotaomicron

Bacteroides vulgatus

Bifidobacterium sp

Clostridium difficile

Clostridium perfringens

Clostridium ramosum

Clostridium sordelii

Clostridium sp

Eggerthella lenta

Finegoldia magna

Fusobacter. mortiferum

Fusobact. necrophorum

Fusobact. nucleatum

Parabacter. distanosis

Parvimonas micra

Peptino.asaccharolyticus

Peptostreptococcus sp

Porphyro.asaccharolytica

Prevotella bivia

Prevotella denticola

Prevo.melaninogenica

Propionibacterium acnes

Propionibacterium sp

Staph.saccharolyticus

Veillonella sp

122

8

21

5

1

1

2

6

2

1

1

7

6

1

6

7

1

6

2

2

1

6

1

1

13

6

6

2

1

0

0

0

0

0

0

0

0

0

0

0

0

0

1

0

0

0

0

0

0

0

0

0

0

0

0

0

2

-

0

0

0

-

0

0

0

0

-

0

0

0

0

1

0

0

0

-

0

0

0

1

0

-

0

-

13

8

0

0

0

0

0

0

0

0

0

0

0

1

0

1

0

0

0

0

1

0

0

0

1

0

0

1

99

100

100

100

100

100

100

100

100

100

100

100

100

100

83

100

100

100

100

100

100

100

100

100

100

100

100

100

98

-

100

100

100

-

100

100

100

100

-

100

100

100

100

86

100

100

100

-

100

100

100

0

100

-

100

-

10.6

100

0

0

0

0

0

0

0

0

0

0

0

100

0

14.3

0

0

0

0

100

0

0

0

7.7

0

0

50

Levures

Candida albicans

Candida dubliniensis

Candida glabrata

Candida kefyr

Candida krusei

Candida lusitaniae

Candida parapsilosis

Candida pelliculosa

Candida tropicalis

Candida sp

Crypto.neoformans

Geotrichum capitatum

Rhodo.mucilaginosa

Saccharo.cerevisae

65

16

1

16

1

2

1

12

1

8

1

1

1

2

2

1

0

0

0

0

0

0

0

0

0

1

0

0

0

0

0

0

0

0

0

0

0

0

0

0

0

0

0

0

0

0

0

0

0

0

0

0

0

0

0

0

0

0

0

0

98

100

100

100

100

100

100

100

100

100

0

100

100

100

100

100

100

100

100

100

100

100

100

100

100

100

100

100

100

100

0

0

0

0

0

0

0

0

0

0

0

0

0

0

0

La spectrométrie de masse MALDI-TOF et le diagnostic microbiologique

Cristina Cariello

Travail de diplôme 2011-2012 24

Catégorie Total

souches

Discord. au

genre

Discord. à

l'espèce

Aucun

résultat

% d’id.

correctes

au genre

% d’id.

correctes

à l'espèce

% d’id.

sans

résultat

Champignons

Aspergillus flavus

Aspergillus fumigatus

Apergillus niger

Aspergillus terreus

Aspergillus versicolor

Trichosporon mucoides

16

3

4

3

1

4

1

0

0

0

0

0

0

0

0

0

0

0

0

0

0

6

0

0

1

1

4

0

100

100

100

100

100

100

100

100

100

100

100

100

100

100

38

0

0

33

100

100

0

Mycobactéries 8 0 4 1 100 50 13

TOTAL SOUCHES 1022 12 61 57 99 94 5.6

4.2 Interprétation : points forts et points faibles

4.2.1 Cocci Gram positif

De manière générale, le MS donne une bonne identification des cocci Gram positif, avec

néanmoins des résultats moins satisfaisants pour les pneumocoques.

Il est excellent dans l’identification au genre et à l’espèce des Staphylocoques et des

Entérocoques. Les seules erreurs pour les Staphylocoques concernent l’espèce S.

epidermidis (42/44)3. Pour ce qui concerne les Entérocoques, les erreurs d’identification se

portent sur l’Enterococcus gallinarum (0/2) pour lequel il ne donne pas de bonne

identification à l’espèce.

Concernant les cocci Gram positif, catalase négative, le MS est bon pour l’identification des

Aerococcus urinae (3/3).

En ce qui concerne les Streptocoques, il est très bon pour l’identification des S. agalactiae

(23/23) et S. pyogenes (8/8), un peu moins pour les S. dysgalactiae (4/6). Les autres

Streptocoques sont également bien identifiés même si parfois le MS ne donne pas de

résultat pour les S. mitis/oralis (8/10).

Le point faible du Vitek MS en ce qui concerne les cocci Gram positif sont les

pneumocoques. Parfois, il ne donne pas de résultats (16/21). On a pu constater que ces

erreurs sont dues à l’étalement de la cible : si la colonie est difficile à prélever ou trop

muqueuse, le Vitek MS ne donne aucun résultat. Une étude complémentaire sur les

pneumocoques a été effectuée. 23 souches de la souchothèque ont été reprises et traitées

avec de l’acide formique 25%, avant de rajouter la matrice. Les pneumocoques ont donc été

traités comme des levures. Les résultats se sont avérés très satisfaisants avec seulement

4% d’identifications ne donnant pas de résultat, au lieu de 24% sans traitement. Il est donc

conseillé de traiter les pneumocoques avec l’acide formique pour obtenir de meilleures

identifications.

4.2.2 Cocci Gram négatif et Haemophilus

L’identification des Neisseria et des Branhamella est excellente. La réussite d’identification

au genre et à l’espèce est de 100% (23/23).

Les Haemophilus sont également bien identifiés avec le MS. Dans 2 cas sur 31, il ne donne

pas de résultat pour l’Haemophilus influenzae et n’arrive pas à identifier l’Haemophilus

parainfluenzae à l’espèce dans 1 cas sur 13. Mais dans l’ensemble, les résultats sont très

satisfaisants.

3 Entre parenthèses : score des bonnes identifications au genre et à l’espèce (nbre d’identifications

correctes/nbre de souches testées).

La spectrométrie de masse MALDI-TOF et le diagnostic microbiologique

Cristina Cariello

Travail de diplôme 2011-2012 25

4.2.3 Germes difficiles

Les germes difficiles sont bien identifiés par le MS. Les bactéries du groupe HACEK4 testées

(Capnocytophaga, Eikenella et Kingella) ont été bien identifiées. Les souches de

Cardiobacter hominis et Bergeyella zoohelcum ont également été correctement identifiées.

Le nombre de souches testées est cependant insuffisant pour s’exprimer sur les

performances du MS concernant ces germes.

La Pasteurella multocida est également bien identifiée (8/9).

Par contre, si le MS identifie très bien les Legionella pneumophila (12/12), il n’en est pas de

même pour les autres Légionelles (L. anisa et L. taurinensis). Le Vitek MS ne possède pas

ces dernières espèces dans sa base de données, ce qui rend l’identification impossible.

4.2.4 Bacilles Gram positif aérobies

Le MS identifie bien les Bacillus au genre, mais pas à l’espèce. Le point positif est que le

Vitek MS peut différencier les différents groupes de Bacillus, notamment le Brevibacillus.

Une souche d’Erysipelothrix rhusiopathiae a été testée et l’identification est correcte pour le

genre et l’espèce.

Les Corynébactéries sont bien identifiées au genre (93%), un peu moins à l’espèce (78%).

Certaines espèces ne donnent pas de résultats car elles ne sont pas dans la base de

données comme C. glucoserum, C. glucurolonyticum et Turicella otidis. Le MS ne différencie

pas le C. amycolatum du C. xerosis et n’identifie que la moitié des C. jeikeium (4/7). Par

contre, l’identification du C. pseudodiphteriticum (13/15) et C. striatum (2/2) sont très

satisfaisantes.

Les Nocardia autres que N. asteroïdes et Rhodococcus equi ne peuvent pas être identifiés

par le MS car la base de données ne contient pas ces espèces.

Un point fort et utile pour la routine, est l’excellente identification des Lactobacillus (7/7) et

des Gardnerella vaginalis (16/17). La seule mauvaise identification pour les Gardnerella

vaginalis comporte une discrimination entre Gardnerella vaginalis et Bifidobacterium sp.

4.2.5 Entérobactéries

Les entérobactéries sont bien identifiées par le MS de manière générale.

Parmi les Citrobacter, c’est le C. freundii qui est le mieux identifié à l’espèce (4/4), suivi par

le C. koseri (3/4). Les Citrobacter braakii et C. youngae sont mal identifiés par le MS. Pour

ce genre d’entérobactéries, on peut dire que le Vitek 2 est plus performant.

En ce qui concerne les Enterobacter, le MS ne différencie pas l’E. asburiae de l’E. cloacae

(4/18). Le Vitek 2 identifie mieux ce genre de bactéries que le MS.

Par contre, le MS identifie mieux les Klebsiella que le Vitek 2. Il différencie très bien les K.

pneumoniae des K. oxytoca. L’identification des Klebsiella présente parfois quelques

problèmes. Parfois, elles sont difficiles à prélever et à obtenir un dépôt homogène. Dans ce

cas, le Vitek MS ne donne aucun résultat.

L’identification des E. coli, des Morganella morganii et des Proteus est très bonne.

Les salmonelles sont bien identifiées au genre, mais pour l’identification à l’espèce, il faut

recourir à la sérologie (recherche des antigènes O, H et, Vi).

Le point négatif le plus problématique est l’identification des Shigella. Le MS fausse

complètement le diagnostic : à la place de Shigella, il donne le résultat Escherichia coli. Il ne

faut donc pas utiliser le MS en cas de suspicion de Shigella.

4 Bactéries responsables d’endocardites sur valves lésées ou prothétiques. Le groupe HACEK est constitué des

germes suivants : Haemophilus spp, Actinobacillus actinomycetemcomitans, Capnocytophaga spp,

Cardiobacterium hominis, Eikenella corrodens, Kingella kingae.

La spectrométrie de masse MALDI-TOF et le diagnostic microbiologique

Cristina Cariello

Travail de diplôme 2011-2012 26

4.2.6 Campylobacter

Les résultats sont très bons en ce qui concerne les Campylobacter. L’identification est fiable

pour le genre et l’espèce (19/20) que ce soit pour le C. coli ou le C. jejuni.

4.2.7 Non-fermentatifs

Les non-fermentatifs sont bien identifiés au genre et à l’espèce. Les erreurs d’identification

sont peu nombreuses et ne concernent que quelques espèces précises.

Par exemple, il identifie très bien les Pseudomonas (44/46), les Stenotrophomonas

maltophilia (3/3) et les Acinetobacter (6/7).

Par contre, il ne différencie pas les différentes espèces de Burkholderia et n’identifie pas

bien le Pseudomonas putida à l’espèce.

4.2.8 Germes anaérobies

De manière générale, les résultats d’identification des germes anaérobies sont satisfaisants.

Le MS est excellent pour l’identification au genre et à l’espèce des Bacteroides (27/27), des

Clostridium (12/12) et Parvimonas micra (6/6) où les résultats sont meilleurs que le Vitek 2. Il

identifie également très bien les Eggerthella lenta (7/7), Finegoldia magna (6/6) et

Propionibacterium (18/19).

Les Prevotella sont bien identifiés (7/8). Il reconnaît également moins bien les

Fusobacterium (10/14) et ne reconnaît pas les Actinomyces car ils ne sont pas présents

dans la base de données.

4.2.9 Levures

Les identifications des levures sont excellentes au genre et à l’espèce (64/65). Le Vitek MS

donne de meilleurs résultats que le Vitek 2 (52/65).

4.2.10 Champignons

Les résultats obtenus ne sont pas très bons (63%). Le MS identifie bien l’Aspergillus flavus,

l’A. fumigatus, et le Trichosporon mucoides.

Par contre, il identifie moyennement bien les Aspergillus niger (2/3) et mal les Aspergillus

terreus (0/1) et A. versicolor (0/4).

4.2.11 Mycobactéries

Les résultats sont mauvais pour les mycobactéries car la base de données du MS reste

limitée. L’appareil n’a identifié correctement que l’espèce M. fortuitum (3/3) car elle figure

dans la base de données. Les autres espèces n’y figurant pas (M. goodii et M. gordonae)

n’ont pas pu être correctement identifiées.

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Travail de diplôme 2011-2012 27

5 Discussion

5.1 Améliorations de l’identification des germes en routine

5.1.1 Staphylocoques

En routine, il est important de distinguer les Staphylocoques aureus des autres

Staphylocoques. Le laboratoire utilise plusieurs tests pour différencier ces deux groupes : la

DNase et le Slidex Staph Plus.

La fiabilité du Vitek MS en ce qui concerne l’identification des Staphylocoques, permet de ne

plus effectuer de DNase et ainsi gagner 24 heures dans le diagnostic. Il peut également être

utile en cas de Slidex Staph Plus douteux, pour confirmer ou infirmer le résultat.

De plus, le Vitek MS permet d’obtenir rapidement l’identification à l’espèce de tous les

Staphylocoques non-aureus. Ce dernier point est très utile pour l’identification des

Staphylocoques non-aureus responsables d’infections nosocomiales dues à des corps

étrangers (prothèses osseuses, valves cardiaques, cathéters…) ou à des infections urinaires

(Staphylococcus saprophyticus).

On peut dire que le Vitek MS est un atout majeur dans l’identification des Staphylocoques.

Sa rapidité d’analyse permet de prendre les dispositions nécessaires (antibiogramme,

recherche de MRSA…) de manière plus fiable et rapide, utile surtout pour l’identification des

germes dans les hémocultures positives.

5.1.2 Lactobacillus

Avant d’avoir le MS, cette bactérie ne pouvait pas être identifiée autrement que par le Gram

et la résistance à la vancomycine. L’identification des Lactobacillus est utile lorsque le germe

est présent dans les hémocultures. Avec le MS, on peut avoir une identification du genre et

de l’espèce sans envoyer la souche pour le séquençage.

5.1.3 Gardnerella vaginalis

Ce germe ne peut être identifié que par sa morphologie au Gram. Le Vitek MS permet une

identification plus fiable, surtout pour les prélèvements autre que vaginaux, comme le

sperme par exemple.

5.1.4 Levures

Auparavant, les levures étaient repiquées sur CAN2 (milieu chromogène) afin de distinguer

les différentes espèces de Candida. Leur croissance peut prendre entre 48 et 72 heures

(Candida glabrata). De plus, pour les Candida autres que C. albicans, on effectuait

également une identification au Vitek 2, ce qui prend 24 heures supplémentaires au

diagnostic.

L’identification des levures par le MS est très bonne. La différenciation des différentes

espèces de Candida permet d’avoir des résultats fiables en peu de temps sans devoir

repiquer les germes sur CAN2.

5.1.5 Urotubes

Les urotubes permettent de différencier les germes urinaires par plusieurs moyens : ils sont

sélectifs grâce aux milieux de culture CLED et Mac Conkey, et différentiels de part la couleur

que prennent les colonies sur les différents milieux. Les urotubes aident à l’identification des

germes urinaires, mais nécessitent des tests supplémentaires pour leur identification (Vitek

2, repiquage sur un milieu de culture).

Le Vitek MS permet une identification rapide des germes sans devoir attendre le lendemain.

Par exemple, pour l’identification du Staphylococcus saprophyticus, il fallait lancer une carte

au Vitek 2 et le résultat était obtenu le lendemain matin. Avec le Vitek MS, l’identification se

La spectrométrie de masse MALDI-TOF et le diagnostic microbiologique

Cristina Cariello

Travail de diplôme 2011-2012 28

fait le jour même. De même pour les Entérobactéries, l’identification des Escherichia coli ne

nécessitent plus la confirmation de l’aspect morphologique sur Mac Conkey et le spot indole,

ce qui permet de gagner 24 heures.

5.1.6 Entérocoques

Avant le MS, l’identification des Entérocoques dans l’urine ne se faisait qu’au genre car cela

suffisait pour effectuer l’antibiogramme. Avec le MS, l’identification systématique à l’espèce

est utile en cas de septicémie pour savoir si le germe retrouvé dans l’urine est le même que

celui retrouvé dans le sang.

5.1.7 Contaminations

Le Vitek MS permet également d’identifier des bactéries dont on a un doute sur leur

pathogénécité. Le Vitek MS permet d’identifier les éventuelles contaminations d’un

prélèvement et ainsi ne pas continuer les recherches inutilement (économie de cartes Vitek 2

ou galeries de tests biochimiques).

5.1.8 Peudomonas aeruginosa

Le Vitek MS est très bon pour l’identification des Pseudomonas. Il permet ainsi d’éliminer

l’utilisation de la gélose PAID pour le Pseudomonas aeruginosa.

Il est également pratique dans la différenciation des Pseudomonas des autres non-

fermentatifs, oxydase positive (Schewanella, Agrobacterium, Alcaligenes). Cette

différenciation est nécessaire pour l’antibiogramme : l’antibiogramme des Pseudomonas se

fait sur le Vitek 2, alors que pour les autres non-fermentatifs, l’antibiogramme se fait

manuellement avec la méthode de Kirby-Bauer.

5.1.9 Campylobacter

Les Campylobacter sont des bactéries à croissance lente (48 heures). Leur identification se

fait à l’aide du Gram, du test de l’hippurate et de la résistance à l’acide nalidixique. Le

Campylobacter jejuni ne peut être identifié qu’après avoir effectué un Gram et le test à

l’hippurate (positif) qui prend 4 heures. Pour les Campylobacter coli, il faut confirmer

l’identification par un disque d’acide nalidixique (sensible). Si le germe est résistant, on

l’envoie à Zürich pour l’identification à l’espèce.

Le Vitek MS permet non seulement une identification rapide des Campylobacter, mais il évite

d’envoyer les souches à Zürich pour le séquençage.

5.2 Lacunes du Vitek MS

5.2.1 Shigella

Non seulement le MS n’identifie pas les Shigella au genre, mais en plus, il donne comme

résultat Escherichia coli. Les résultats du MS faussent complètement le diagnostic. D’ailleurs

ce problème est bien connu par le fournisseur et la remarque suivante apparaît dans le

logiciel Myla lorsqu’un E. coli est identifié :

Attention!: Escherichia coli identifié, possibilité de Shigella spp ou Escherichia coli O157.

Les Shigella sont des entérobactéries extrêmement proches des E. coli [3] et peuvent parfois

être confondues avec les tests biochimiques en cas de présence d’E. coli immobiles (indole

négatif et ne fermentant pas le lactose en 24 heures).

Les ressemblances génotypiques des Shigella et des E. coli expliquent la confusion du MS à

les distinguer. Par contre, dans le diagnostic microbiologique, il est très important de ne pas

les confondre et de ne pas passer à côté d’une Shigella de part son pouvoir de

pathogénécité. L’utilisation du MS est donc déconseillée en cas de suspicion de Shigella.

Dans ce cas, il faut recourir aux méthodes d’identification habituelles.

La spectrométrie de masse MALDI-TOF et le diagnostic microbiologique

Cristina Cariello

Travail de diplôme 2011-2012 29

5.2.2 Champignons

Le MS ne convient pas pour l’identification des champignons. La principale difficulté réside

dans la formation du dépôt. Les champignons sont très friables et secs, il est difficile

d’obtenir un dépôt homogène et les filaments mycéliens ne se mélangent pas facilement

avec la matrice. On a constaté qu’on obtient de meilleurs résultats si on n’effectue pas

l’étape d’inactivation et qu’on traite les champignons avec de l’acide formique à 25% avant

de laisser sécher le dépôt et d’ajouter la matrice.

5.2.3 Mycobactéries

Le MS n’identifie bien que M. fortuitum. Les autres espèces sont mal différenciées ou

incorrectement identifiées, car elles sont absentes de la base de données. Le séquençage

reste la meilleure méthode d’identification des Mycobactéries.

5.3 Avantages et inconvénients du MS

Avantages :

Rapidité de l’identification

Le Vitek MS est la technique d’identification la plus rapide. Alors qu’il faut entre 4 et 8

heures pour les identifications sur le Vitek 2 et entre 4 et 18 heures sur les galeries de

tests biochimiques, avec le Vitek MS, une demi-heure suffit pour lire une lame contenant

24 échantillons.

Simplicité de l’analyse

La préparation de l’échantillon est simple à réaliser. Contrairement au Vitek 2 ou aux

galeries, il n’y a pas besoin de faire de suspension du germe à analyser ou de plaque de

pureté.

Petit volume d’échantillon nécessaire

Il faut très peu de matériel pour effectuer le dépôt. En général, une colonie bien isolée

suffit, parfois plusieurs si elles sont très petites. Avec le Vitek 2 ou les galeries, il faut

assez de colonies pour effectuer un Mac Farland de 0.5, voire plus pour certains germes

ayant du mal à pousser (cf. Annexe 2).

Coûts

Voici trois tableaux représentant approximativement les coûts pour une analyse

effectuée sur le Vitek MS, le Vitek 2 et avec les galeries d’identification.

N.B : Les prix des automates et des maintenances n’ont pas été pris en considération pour

l’évaluation du coût de l’analyse.

Vitek MS

Désignation du

matériel

Prix en

CHF Unités

Unité/analyse Prix/analyse

Bactéries Levures Bactéries Levures

Lame DS

Embouts 0.1-10 µl

Anses 1 µl

Matrice CHCA

Acide formique 25%

14.40

98.20

125.80

98.30

98.30

48 puits

960

1000

2.5 ml

2.5 ml

2

2

2

2 µl

-

2

4

2

2 µl

1 µl

0.60

0.20

0.25

0.08

-

0.60

0.40

0.25

0.08

0.04

Total 1.15 1.35

La spectrométrie de masse MALDI-TOF et le diagnostic microbiologique

Cristina Cariello

Travail de diplôme 2011-2012 30

Vitek 2

Désignation du

matériel Prix en CHF Unités Unité/analyse Prix/analyse

Cartes Vitek 2

Plaque de pureté

179.50

26.30

20

20

1

1

9.00

1.30

Total 10.30

Galeries d’identification

Désignation du matériel Prix/analyse en CHF

Galerie

NaCl 0.85% (3 ml)

Plaque de pureté

7.00 (Entérobactéries) à 12.50 (Corynébactéries)

1.20

1.30

Total 9.50 à 15.00

Les analyses sur le Vitek 2 ou les galeries nécessitent du matériel (cartes, galeries) et des

réactifs (révélateurs pour les tests biochimiques en galeries qui n’ont pas été pris en

considération dans les calculs). On peut constater que les analyses sur le Vitek MS

requièrent peu de réactif et du matériel moins cher. De plus, ces tableaux montrent qu’une

analyse du MS coûte presque dis fois moins cher qu’une analyse au Vitek 2 ou avec les

galeries.

Inconvénients :

Ne convient pas pour certaines espèces qui ne sont pas dans la base de données du Vitek

MS, notamment les Actinomyces et les Legionella autre que pneumophila.

En revanche, la liste de la base de données est exhaustive est peut être mise à jour afin

d’élargir le panel des espèces pouvant être identifiées par le MS.

Hémocultures :

Dans les bouteilles d’hémoculture, il y a du charbon. Lorsqu’on a des petites colonies, le

Vitek MS ne donne aucun résultat. Il semblerait que le charbon interfère avec l’analyse. Le

Vitek MS ne convient donc pas pour les hémocultures lorsque les colonies sont très petites.

Il est préférable d’utiliser dans ce cas le Vitek 2.

Urotubes :

Il est important de noter que certaines bactéries sur urotube sont difficiles à prélever,

notamment les entérobactéries, et que par conséquent, l’étalement des colonies sur la lame

est mauvais rendant l’identification difficile.

Germes difficiles à prélevés ou trop muqueux :

Les bactéries trop muqueuses (Klebsiella, pneumocoques) ou difficiles à prélevées

(Haemophilus parainfluenzae) ne sont pas bien identifiées par le MS. Ce problème n’est pas

dû à l’appareil, mais à la qualité de l’étalement. L’échantillon doit être bien étalé sur le puits

et mélangé à la matrice de façon homogène. Si ce n’est pas le cas, le MS ne peut pas

identifier le germe. La qualité de l’étalement est un point important à respecter pour

l’identification correcte des germes.

La spectrométrie de masse MALDI-TOF et le diagnostic microbiologique

Cristina Cariello

Travail de diplôme 2011-2012 31

6 Conclusion

Malgré certains points faibles du MS (Shigella, bactéries granuleuses ou muqueuses), la

spectrométrie de masse MALDI-TOF est une technique donnant des résultats fiables et dans

un délai plus court que les méthodes habituelles (Vitek 2 et galeries). Les avantages du Vitek

MS sont la rapidité d’identification, le peu d’échantillon nécessaire et le faible coût de

l’analyse.

L’acquisition du Vitek MS a modifié le processus analytique du laboratoire. Auparavant, les

identifications et les antibiogrammes étaient lancés en même temps dans la matinée et on

attendait le lendemain pour avoir les résultats et lancer éventuellement les analyses

complémentaires. Avec le MS, comme les identifications sont obtenues le jour même, il faut

accorder du temps l’après-midi pour gérer les résultats et effectuer les tests

complémentaires.

En conclusion, cet étude montre que la spectrométrie de masse MALDI-TOF a une grande

utilité dans le diagnostic microbiologique.

Conclusion personnelle

Ce travail m’a permis tout d’abord de connaître une toute nouvelle technologie en

microbiologie qu’est la spectrométrie de masse MALDI-TOF.

J’ai également eu l’occasion de travailler avec un grand nombre d’espèces de bactéries

différentes et de mettre en pratique plusieurs méthodes d’identification. Les bactéries qui

m’étaient inconnues, m’ont permis d’apprendre à faire des recherches de façon autonome

afin de pouvoir étudier leurs caractéristiques biochimiques et les identifier.

Perspectives

Il serait intéressant de mettre en place un protocole utile à l’identification des germes

directement à partir de bouteilles d’hémocultures positives. En effet, il serait possible

d’obtenir des bouteilles d’hémoculture exemptes de charbon afin d’avoir des identifications

avec le Vitek MS sans interférences. Ceci permettrait de gagner du temps dans le

diagnostic.

Une autre perspective serait également de mettre à jour la base de données afin d’élargir le

nombre de germes pouvant être identifiés par le Vitek MS et de poursuivre les tests avec les

nouveaux microorganismes rajoutés.

La spectrométrie de masse MALDI-TOF et le diagnostic microbiologique

Cristina Cariello

Travail de diplôme 2011-2012 32

7 Références bibliographiques

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La spectrométrie de masse MALDI-TOF et le diagnostic microbiologique

Cristina Cariello

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http://fr.wikipedia.org/wiki/D%C3%A9sorption-ionisation_laser_assist%C3%A9e_par_matrice (page

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Figure 2 : Leblanc, B. (15 juillet 2011). Université de Sherbrooke [Page Web]. Accès : http://pages.usherbrooke.ca/bcm-514-bl/6a.html (page consultée le 10 aout 2011)

Figure 3 : Logiciel Myla

Figures 4 et 5 : Biomérieux (2011). Vitek MS : Workflow : User Manual. Marcy l’Etoile : Biomérieux

Figures 6, 7 et 8 : Biomérieux. Vitek MS Workflow. In Société luxembourgeoise de biologie clinique

[Page Web]. Accès: http://www.slbc.lu/fileadmin/editor_uploads/download_files/presentation-

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Figure 9: Yunycom : Medical Equipment and Diagnostic Materials. (2008). Yunycom : Medical

Equipment and Diagnostic Materials [Page Web]. Accès :

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Figure 10 : Les laboratoires Bioxa [Page Web]. Accès : http://unibioreims.pagesperso-

orange.fr/Images/Vitek 2.jpg (page consultée le 23 août 2011)

Figure 11 : Philippon, A.,Oghina, G & Prots, L. Campus de Microbiologie médicale [Page Web]. Accès : http://www.microbes-edu.org/diagnostics/db31/api20A-a.jpg (page consultée le 12 mars 2012)

Figure 12 : , A.,Oghina, G & Prots, L. Campus de Microbiologie médicale [Page Web]. Accès : http://www.microbe-edu.org/professionel/diag/imgsapro/apisapro.jpg (page consultée le 12 mars)

Table des illustrations :

Figure 1: Principe d'ionisation par la technique MALDI. ......................................................... 8

Figure 2: Technique Time of flight (TOF) ............................................................................... 9

Figure 3: Spectre MALDI-TOF ............................................................................................... 9

Figure 4: Vitek MS ................................................................................................................10

Figure 5 : Fonctionnement du Vitek MS ................................................................................10

Figure 6: Prep Station...........................................................................................................13

Figure 7: Lame DS ...............................................................................................................13

Figure 8 : Porte-lames ..........................................................................................................13

Figure 9 : Carte Vitek 2 .........................................................................................................15

Figure 10: Module de préparation de l'inoculum (A) et module analytique (B) du Vitek 2 ......16

Figure 11 : Galerie à microtubes (API 20 A) .........................................................................17

Figure 12: Galerie à cupules (API ID 32 STAPH) .................................................................17

La spectrométrie de masse MALDI-TOF et le diagnostic microbiologique

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Travail de diplôme 2011-2012 34

8 Lexique

Anode : Électrode vers laquelle se dirige les anions (ions négatifs).

Biomolécule : Molécule entrant dans les processus métaboliques des organismes

vivants (glucides, lipides, protéines et acides nucléiques).

Cathode : Électrode vers laquelle se dirigent les cations (ions positifs).

Dalton (Da): Unité de masse des atomes utilisé en biochimie pour mesurer la masse

des molécules. Un Dalton correspond à la masse d’un atome

d’hydrogène. Á titre d’exemple, un acide aminé représente 110 Da, tandis

qu’un nucléotide (base d’ADN+désoxyribose+phosphate) est égal à 330

Da.

Désorption : Rupture des liaisons ioniques entre les molécules et le substrat, ce qui

libère les molécules du substrat.

Électrode : Dispositif conduisant le courant électrique ou ionique.

Ion : Molécule chargée électriquement, soit positivement après avoir perdu un

électron (cation), soit négativement en gagnant un électron (anion).

Ionisation : Transformation d’une molécule neutre en molécule chargée

électriquement.

Isotope : Groupes d’atomes correspondant au même élément chimique, mais ayant

des masses atomiques différentes. Les isotopes d’un élément possèdent

dans leur noyau un nombre de neutrons différent.

Matrice: En biologie, la matrice est une matière englobant des éléments plus

spécifiques. Dans notre cas, la matrice est un réactif utilisé pour

« englober » les molécules fragiles d’intérêt afin d’éviter leur dégradation

sous l’action du laser durant l’analyse.

Oligonucléotide : Segment court d’un brin d’ADN ou ARN.

Organique : Molécule composée d’atomes de carbone et qui entre dans les processus

du monde du vivant.

Peptide : Molécule composée d’au moins deux acides aminés liés par une liaison

peptidique. À partir de dix acides aminés, la molécule forme un

polypeptide.

Polymère aromatique : Composé chimique formé par plusieurs monomères de forme

cyclique (ex : polystyrène).

Protéine : Molécule formée par de très longues chaînes d’acides aminés. Les

protéines sont des constituants essentiels des organismes vivants.

Saccharide : Synonyme de sucre.

Spectre: Graphique sur lequel sont classés les différents ions d’une molécule selon

leur masse et leur charge.

Volatile [16]: Qui a la capacité de se vaporiser.

La spectrométrie de masse MALDI-TOF et le diagnostic microbiologique

Cristina Cariello

Travail de diplôme 2011-2012 35

9 Remerciements

Je souhaite remercier tout d’abord le Dr. Gérard Praz, médecin chef du laboratoire de

bactériologie, qui m’a permis de réaliser ce travail au sein du laboratoire de bactériologie de

l’ICHV à Sion.

Je remercie également toute l’équipe du laboratoire de bactériologie pour leur disponibilité,

leur patience, leurs conseils et pour avoir contribué à la partie pratique de cette étude.

Je remercie tout particulièrement Mme Lysiane Tissières Lovey, laborantine cheffe du

laboratoire de bactériologie et mentor de mon travail de diplôme, pour m’avoir accordé son

temps et ses précieux conseils tout au long de mon travail théorique et pratique.

La spectrométrie de masse MALDI-TOF et le diagnostic microbiologique

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Travail de diplôme 2011-2012 36

10 Annexes

10.1 Annexe 1: Résultats des souches testées

Les différents germes testés ont été classés par catégories dans plusieurs tableaux. Dans

chaque tableau, figurent le nombre de souches testées, le numéro NLAB pour la traçabilité

des échantillons, le résultat du Vitek MS avec le pourcentage d’identification, le résultat de la

deuxième méthode utilisée ainsi que la méthode utilisée entre parenthèses et l’identification

rendue au final. La colonne « Confirmation » indique le résultat d’une éventuelle troisième

méthode utilisée en cas de discordance entre le Vitek MS et la deuxième méthode.

Pour les germes provenant de la souchothèque, une deuxième méthode a été effectuée

uniquement pour les résultats présentant une discordance. Pour les souches provenant de la

routine, signalées en gras, la deuxième méthode d’identification a été effectuée en parallèle

avec l’analyse du Vitek MS afin de pouvoir comparer les résultats rendus par celui-ci.

On peut constater en regardant les tableaux des Staphylocoques et des Entérocoques que

certains résultats ont été rendu à l’espèce sans avoir effectué de tests approfondis. Par

exemple, il a été rendu Enterococcus faecium en ayant uniquement un test de PYR positif. Il

est important de préciser qu’il n’a pas été possible d’effectuer des analyses sur le Vitek MS

pour la totalité des ces bactéries et que les identifications rendues sont fiables car ils

correspondent aux résultats rendus par la technicienne en analyse biomédicale en routine.

Cristina Cariello

Travail de diplôme 2011-2012 37

10.1.1 Staphylocoques

N° NLAB Vitek MS %

2ème méthode

% Confirmation Identification

1 21103-19299 S.aureus 87.7

S.aureus (slidex+)

Staphylococcus

aureus

2 21103-19450 S.aureus 93.2

S.aureus (slidex+)

Staphylococcus

aureus

3 21103-27348

S.aureus 99.6 S.aureus (slidex+)

Staphylococcus

aureus

4 21103-25185

S.aureus 99.9 S.aureus (slidex+)

Staphylococcus

aureus

5 21103-24015

S.aureus 99.9 S.aureus (Vitek2)

99 Staphylococcus

aureus

6 21103-25164

S.aureus 99.9 S.aureus (Vitek2)

99 Staphylococcus

aureus

7 21103-21477

S.aureus 99.8 S.aureus (Vitek2)

99 Staphylococcus

aureus

8 21103-36667 S.aureus 99.9

S.aureus (slidex+)

Staphylococcus

aureus

9 21103-33000 S.aureus 99.9

S.aureus (slidex+)

Staphylococcus

aureus

10 21103-33814 S.aureus 99.9

S.aureus (slidex+)

Staphylococcus

aureus

11 21104-03926 S.aureus 99.9

S.aureus (slidex+)

Staphylococcus

aureus

12 21104-23915 S.aureus 99.9

S.aureus (slidex+)

Staphylococcus

aureus

13 21104-22819 S.aureus 99.9

S.aureus (Vitek2)

Staphylococcus

aureus

14 21104-23140

S.aureus 99.9 S.aureus (slidex+)

Staphylococcus

aureus

15 21104-23516 S.aureus 99.9

S.aureus (slidex+)

Staphylococcus

aureus

N° NLAB Vitek MS %

2ème méthode

% Confirmation Identification

16 21104-22325

S.aureus 99.9 S.aureus (slidex+)

Staphylococcus

aureus

17 21104-22817

S.aureus 99.9 S.aureus (slidex+)

Staphylococcus

aureus

18 21104-20276

S.aureus 99.9 S.aureus (slidex+)

Staphylococcus

aureus

19 21103-30884

St. aureus 99.9 St.aureus (slidex+)

Staphylococcus

aureus

20 21103-35257

St. aureus 99.9 St.aureus (slidex+)

Staphylococcus

aureus

21 21103-34427

St. aureus 99.9 St.aureus (slidex+)

Staphylococcus

aureus

22 21104-06664

St. aureus 99 St.aureus (Vitek2)

100 Staphylococcus

aureus

23 21104-06522

St. aureus 99 St.aureus (Vitek2)

95 Staphylococcus

aureus

24 21104-05895

St. aureus 99 St.aureus (Vitek2)

95 Staphylococcus

aureus

25 21104-04317

St. aureus 99.9 St.aureus (Vitek2)

99 Staphylococcus

aureus

26 21103-41161

St. aureus 99.9 St.aureus (slidex+)

Staphylococcus

aureus

27 21103-02723

Sta. aureus 99.9 Sta.aureus

(Vitek2) 100

Staphylococcus aureus

28 21103-16125

Sta.aureus 77.7 Sta.aureus

(slidex+)

Staphylococcus aureus

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Travail de diplôme 2011-2012 38

N° NLAB Vitek MS %

2ème méthode

% Confirmation Identification

29 21103-20483 Sta.aureus 98

Sta.aureus (slidex+)

Staphylococcus

aureus

30 21103-20745

Sta.aureus 99 Sta.aureus

(Vitek2) 99

Staphylococcus aureus

31 21104-25580

St.aureus 99.9 Sta.aureus

(slidex+)

Staphylococcus aureus

32 21105-01971

Sta.aureus 99.9 Sta.aureus

(slidex+)

Staphylococcus aureus

33 21103-02607

Staph. aureus 99.9 Staph. aureus Staphylococcus

aureus

34 21102-01075

Staph. aureus 88.2 Staph. aureus Staphylococcus

aureus

35 21101-08517

Staph. aureus 99.9 Staph. aureus Staphylococcus

aureus

36 21010-31331

Staph. aureus 99.9 Staph. aureus Staphylococcus

aureus

37 21007-04980

Staph. aureus 99.9 Staph. aureus Staphylococcus

aureus

38 21006-10775

Staph. aureus 98.3 Staph. aureus Staphylococcus

aureus

39 21005-12046

Staph. aureus 99.9 Staph. aureus Staphylococcus

aureus

40 21105-14596 S.aureus 99.9

S.aureus (slidex+)

Staphylococcus

aureus

41 21105-27192

S.aureus 99.9 S.aureus (slidex+)

Staphylococcus

aureus

42 21105-21206 S.aureus 99.9

S.aureus (slidex+)

Staphylococcus

aureus

43 21106-16011 S.aureus 99.9

S.aureus (slidex+)

Staphylococcus

aureus

N° NLAB Vitek MS %

2ème méthode

% Confirmation Identification

44 21103-25973

Sta.capitis 96.7 Sta.capitis

(Vitek2) 99

Staphylococcus capitis

45 21103-32175

Sta.capitis 99.6 Staphylococcus capitis (Vitek2)

99 Staphylococcus

capitis

46 21105-00344

Sta.capitis 99.9 Sta.coag.neg

(slidex-)

Staphylococcus capitis

47 21104-35262

Sta.capitis 99.9 Sta.capitis

(Vitek2) 98

Staphylococcus capitis

48 21103-01417

Staphylococcus capitis

99.9 Staphylococcus

capitis

Staphylococcus capitis

49 21105-34326

Sta.capitis 99.9 Sta.capitis Sta.caprae

(Vitek2)

Staphylococcus capitis

50 21105-04648

Sta.capitis 99.9 Sta.capitis

(Vitek2) 99

Staphylococcus capitis

51 21105-35638

Sta.caprae 99.9 Sta.caprae

(Vitek2) 99

Staphylococcus caprae

52 21105-26396

Sta.epidermidis 99.9 Sta.coag.neg

(slidex-)

Staphylococcus epidermidis

53 21103-19347

S.epidermidis 72.8 Sta. coag.neg

(slidex-)

Staphylococcus epidermidis

54 21103-19730 S.epidermidis 99.9

Sta. coag.neg (slidex-)

Staphylococcus

epidermidis

55 21103-20793 S.epidermidis 63.9

Sta. coag.neg (slidex-)

Staphylococcus

epidermidis

56 21103-19300

S.epidermidis 95.9 Sta. coag.neg

(slidex-)

Staphylococcus epidermidis

57 21104-25127 Sta.epidermidis 99.9

Sta. coag.neg (slidex-)

Staphylococcus

epidermidis

58 21103-18102

Sta.epidermidis 99.2 Staph.

epidermidis (Vitek2)

99 Staphylococcus

epidermidis

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Travail de diplôme 2011-2012 39

N° NLAB Vitek MS %

2ème méthode

% Confirmation Identification

59 21103-19833

Sta.epidermidis 99.9 Staph.

epidermidis (Vitek2)

98 Staphylococcus

epidermidis

60 21103-19972

Sta.epidermidis 94.4 Staph.

epidermidis (Vitek2)

99 Staphylococcus

epidermidis

61 21103-25973

Sta.epidermidis 98.4 Staph.

epidermidis (Vitek2)

99 Staphylococcus

epidermidis

62 21103-22717

Pas de résultat Staph.

epidermidis (Vitek2)

99 Staphylococcus

epidermidis

63 21103-25311

Pas de résultat Staph.

epidermidis (Vitek2)

98 Staphylococcus

epidermidis

64 21103-27896

Sta.epidermidis 66.2 Sta.coag.neg

(slidex-)

Staphylococcus epidermidis

65 21103-27727

Sta.epidermidis 97.1 Staph.

epidermidis (Vitek2)

99 Staphylococcus

epidermidis

66 21104-15189

Sta.epidermidis 99.9 Staph.

epidermidis (Vitek2)

99 Staphylococcus

epidermidis

67 21104-25023 Sta.epidermidis 99.9

Sta.coag.neg (slidex-)

Staphylococcus

epidermidis

68 21104-19033 Sta.epidermidis 99.9

Sta.coag.neg (slidex-)

Staphylococcus

epidermidis

69 21104-22012 Sta.epidermidis 99.9

Sta.coag.neg (slidex-)

Staphylococcus

epidermidis

70 21104-19401

Sta.epidermidis 99.9 Staph.

epidermidis (Vitek2)

99 Staphylococcus

epidermidis

71 21104-20276 S.epidermidis 99.9

Sta.coag.neg (slidex-)

Staphylococcus

epidermidis

72 21103-34672

Sta.epidermidis 95.7 Staph.

epidermidis (Vitek2)

99 Staphylococcus

epidermidis

73 21103-36174

Sta.epidermidis 99.9 Staph.

epidermidis (Vitek2)

99 Staphylococcus

epidermidis

N° NLAB Vitek MS %

2ème méthode

% Confirmation Identification

74 21104-12031

Sta.epidermidis 99.9 Staph.

epidermidis (Vitek2)

95 Staphylococcus

epidermidis

75 21105-02088

Sta.epidermidis 99.9 Sta.coag.neg

(slidex-)

Staphylococcus epidermidis

76 21104-35266

Sta.epidermidis 99.9 Staph.

epidermidis (Vitek2)

99 Staphylococcus

epidermidis

77 21104-17755

Sta.epidermidis 99.9 Staph.

epidermidis (Vitek2)

100 Staphylococcus

epidermidis

78 21104-35441

Sta.epidermidis 99.9 Staph.

epidermidis (Vitek2)

99 Staphylococcus

epidermidis

79 21104-30846

Sta.epidermidis 99.9 Staph.

epidermidis (Vitek2)

99 Staphylococcus

epidermidis

80 21105-37394

Sta.epidermidis 99.9 Sta.coag.neg

(slidex-)

Staphylococcus epidermidis

81 21105-32723

Sta.epidermidis 99.9 Sta.coag.neg

(slidex-)

Staphylococcus epidermidis

82 21105-38801 Sta.epidermidis 99.9

Sta.coag.neg (slidex-)

Staphylococcus

epidermidis

83 21105-26391

Sta.epidermidis 99.9 Sta.coag.neg

(slidex-)

Staphylococcus epidermidis

84 21105-20060

Sta.epidermidis 99.9 Sta.coag.neg

(slidex-)

Staphylococcus epidermidis

85 21105-11040

Sta.epidermidis 99.9 Staph.

epidermidis (Vitek2)

93 Staphylococcus

epidermidis

86 21105-03698

Sta.epidermidis 99.9 Sta.coag.neg

(slidex-)

Staphylococcus epidermidis

87 22105-05781

Sta.epidermidis 99.9 Staphylococcus

epidermidis (Vitek2)

98 Staphylococcus

epidermidis

La spectrométrie de masse MALDI-TOF et le diagnostic microbiologique

Cristina Cariello

Travail de diplôme 2011-2012 40

N° NLAB Vitek MS %

2ème méthode

% Confirmation Identification

88 21105-02401

Sta.epidermidis 99.9 Staph.

epidermidis (Vitek2)

95 Staphylococcus

epidermidis

89 21105-03675

Sta.epidermidis 98.5 Sta.coag.neg

(slidex-)

Staphylococcus epidermidis

90 21105-39683

Sta.epidermidis 99.9 Staph.

epidermis (Vitek2)

98 Staphylococcus

epidermidis

91 21105-03382

Sta.epidermidis 99.9 Staph.

epidermis (Vitek2)

99 Staphylococcus

epidermidis

92 20909-02453

Staphylococcus epidermis

99.9 Staphylococcus

epidermis

Staphylococcus epidermis

93 20908-04900

Staphylococcus epidermis

99.9 Staphylococcus

epidermis

Staphylococcus epidermis

94 21101-30921

Staphylococcus epidermis

99.9 Staphylococcus

epidermis

Staphylococcus epidermis

95 21106-14920

Sta. epidermidis 99.9 Staph.

epidermidis (Vitek2)

99 Staphylococcus

epidermis

96 21103-21477 Sta.haemolyticus 99.7

Sta.coag.neg (slidex-)

Staphylococcus haemolyticus

97 21103-35066

Sta.haemolyticus 68.4 Sta.coag.neg

(Novo: S)

Staphylococcus haemolyticus

98 21104-16225

Sta.haemolyticus 99.9 Staph.

haemolyticus (Vitek2)

95 Staphylococcus haemolyticus

99 21105-00552 Sta.haemolyticus 99.9

Sta.coag.neg (slidex-)

Staphylococcus haemolyticus

100 21104-35470 Sta.haemolyticus 99.9

Sta.coag.neg (slidex-)

Staphylococcus haemolyticus

101 21101-29296

Staphylococcus haemolyticus

99.9 Staphylococcus haemolyticus

Staphylococcus haemolyticus

102 21105-20060

Sta.haemolyticus 99.9 Sta.coag.neg

(slidex-)

Staphylococcus haemolyticus

N° NLAB Vitek MS %

2ème méthode

% Confirmation Identification

103 21106-06379

Sta.haemolyticus 99.9 Sta.coag.neg

(slidex-)

Staphylococcus haemolyticus

104 21103-14493

Sta.hominis 99.9 Sta.hominis

(Vitek2) 98

Staphylococcus hominis

105 21103-25310

Sta.hominis 99.9 Sta.hominis

(Vitek2) 88

Staphylococcus hominis

106 21104-04400

Sta.hominis 99.9 Sta.hominis

(Vitek2) 98

Staphylococcus hominis

107 21104-21714

Sta.hominis 99.9 Sta.hominis

(Vitek2) 98

Staphylococcus hominis

108 21105-01016

Sta.hominis 99.9 Sta.hominis

(Vitek2) 94

Staphylococcus hominis

109 21105-02076

Sta.hominis 99.9 Sta.hominis

(Vitek2) 95

Staphylococcus hominis

110 21103-12048

Staphylococcus hominis

99.9 Staphylococcus

hominis

Staphylococcus hominis

111 21012-06407

Staphylococcus hominis

99.9 Staphylococcus saprophyticus

98 Staphylococcus hominis (Vitek2)

Staphylococcus hominis

112 21105-03617

Sta.hominis 99.9 Sta.hominis

(Vitek2) 93

Staphylococcus hominis

113 21104-03781 Sta.lugdunensis 99.9

Sta.lugdunensis (Vitek2)

99 Staphylococcus

lugdunensis

114 21104-00465 Sta.lugdunensis 99.9

Sta.lugdunensis (Vitek2)

99 Staphylococcus

lugdunensis

115 21104-22363

Sta.lugdunensis 99.9 Sta.coag.neg

(slidex-)

Staphylococcus lugdunensis

116 21105-27022

Sta.lugdunensis 99.9 Sta.lugdunensis

(Vitek2) 99

Staphylococcus lugdunensis

117 21103-17872

S.saprophyticus 99.9 S.saprophyticus

(Novo: R)

Staphylococcus saprophyticus

La spectrométrie de masse MALDI-TOF et le diagnostic microbiologique

Cristina Cariello

Travail de diplôme 2011-2012 41

N° NLAB Vitek MS %

2ème méthode

% Confirmation Identification

118 21103-08993

Sta.saprophyticus 99.9 Staph.

saprophyticus (Novo: R)

Staphylococcus saprophyticus

119 21103-26758

Sta.saprophytucus 99.9 Staph.

saprophyticus (Novo: R)

Staphylococcus saprophytucus

120 21104-25383

Sta.schleiferi 99.9 Sta.coag.neg

(slidex-)

Staphylococcus schleiferi

121 21103-13209

Staph. schleiferi 99 Staph. schleiferi

(Vitek2) 93

Staphylococcus schleiferi

122 21105-00307

Sta.simulans 99.9 Sta.simulans

(Vitek2) 94

Staphylococcus simulans

123 21106-01220

Sta.simulans 99.9 Sta.coag.neg

(slidex-)

Staphylococcus simulans

124 21106-06220 Sta.simulans 99.9

Sta.simulans (Vitek2)

98 Staphylococcus

simulans

125 21103-02930

Sta.warneri 99.9 St. warneri

St.lugdunensis (Vitek2)

50 50

Staphylococcus

warneri

126 21101-27100

Staphylococcus xylosus

99.9 Staphylococcus

xylosus

Staphylococcus xylosus

10.1.2 Entérocoques

N° NLAB Vitek MS % 2ème méthode % Confirmation Identification

1 21103-32682

Ent.avium 99.9 Enterococcus sp

(PYR+)

Enterococcus avium

2 21104-23810

Ent.avium 99.9 Ent.avium

(Vitek2) 86

Enterococcus avium

3 21104-11944 En.avium 99

Ent.avium (Vitek2)

99 Enterococcus

avium

4 21101-12332

Enterococcus avium

97.1 Enterococcus

avium

Enterococcus avium

N° NLAB Vitek MS % 2ème méthode % Confirmation Identification

5 21105-32013

Ent.avium 99.9 Ent.avium

(Vitek2) 99

Enterococcus avium

6 20902-08335

Enterococcus casseliflavus

99.9 Enterococcus casseliflavus

Enterococcus casseliflavus

7 20809-27226

Enterococcus casseliflavus

99.9 Enterococcus casseliflavus

Enterococcus casseliflavus

8 21012-02892

Enterococcus durans

99.9 Enterococcus

durans

Enterococcus durans

9 21103-09162

Ent.faecalis 90.2 Ent.faecalis

(Vitek2) 99

Enterococcus faecalis

10 21103-10394

Ent.faecalis 99 Ent.faecalis

(Vitek2) 99

Enterococcus faecalis

11 21103-19481

Ent.faecalis 92.5 Enterococcus sp

(PYR+)

Enterococcus faecalis

12 21103-12285

Ent.faecalis 99.9 Enterococcus sp

(PYR+)

Enterococcus faecalis

13 21103-20335

Ent.faecalis 99.9 Enterococcus sp

(PYR+)

Enterococcus faecalis

14 21103-28659

Ent.faecalis 99.8 Enterococcus sp

(PYR+)

Enterococcus faecalis

15 21103-28771

Ent.faecalis 99.9 Enterococcus sp

(PYR+)

Enterococcus faecalis

16 21103-29398

Ent.faecalis 99.9 Enterococcus sp

(PYR+)

Enterococcus faecalis

17 21103-31949

Ent.faecalis 99.9 Enterococcus sp

(PYR+)

Enterococcus faecalis

18 21103-31772

Ent.faecalis 96.5 Enterococcus sp

(PYR+)

Enterococcus faecalis

19 21103-34435 Ent.faecalis 99.9

Enterococcus sp (PYR+)

Enterococcus

faecalis

La spectrométrie de masse MALDI-TOF et le diagnostic microbiologique

Cristina Cariello

Travail de diplôme 2011-2012 42

N° NLAB Vitek MS % 2ème méthode % Confirmation Identification

20 21104-15933

Ent.faecalis 99.9 Enterococcus sp

(PYR+)

Enterococcus faecalis

21 21104-16292

Ent.faecalis 99.9 Ent.faecalis

(Vitek2) 99

Enterococcus faecalis

22 21104-22325

Ent.faecalis 99.9 Enterococcus sp

(PYR+)

Enterococcus faecalis

23 21104-21952

Ent.faecalis 99.9 Enterococcus sp

(PYR+)

Enterococcus faecalis

24 21104-22325

Ent.faecalis 99.9 Enterococcus sp

(PYR+)

Enterococcus faecalis

25 21104-22130

Ent.faecalis 99.9 Enterococcus sp

(PYR+)

Enterococcus faecalis

26 21104-22050

Ent.faecalis 99.9 Enterococcus sp

(PYR+)

Enterococcus faecalis

27 21104-19453

Ent.faecalis 99.9 Enterococcus sp

(PYR+)

Enterococcus faecalis

28 21105-03925 Ent.faecalis 99.9

Enterococcus sp (PYR+)

Enterococcus

faecalis

29 21104-35700

Ent.faecalis 99.9 Enterococcus sp

(PYR+)

Enterococcus faecalis

30 21104-36213

Ent.faecalis 99.9 Enterococcus sp

(PYR+)

Enterococcus faecalis

31 21104-34076

Ent.faecalis 99.9 Ent.faecalis

(Vitek2) 99

Enterococcus faecalis

32 21106-01351

Ent.faecalis 99.9 Enterococcus sp

(PYR+)

Enterococcus faecalis

33 21106-02182

Ent.faecalis 99.9 Enterococcus sp

(PYR+)

Enterococcus faecalis

34 21105-39657

Ent.faecalis 99.9 Enterococcus sp

(PYR+)

Enterococcus faecalis

N° NLAB Vitek MS % 2ème méthode % Confirmation Identification

35 21105-36374

Ent.faecalis 99.9 Enterococcus sp

(PYR+)

Enterococcus faecalis

36 21105-24570

Ent.faecalis 99.9 Enterococcus sp

(PYR+)

Enterococcus faecalis

37 21105-11076

Ent.faecalis 99.9 Ent.faecalis

(Vitek2) 99

Enterococcus faecalis

38 21105-03863

Ent.faecalis 99.9 Enterococcus sp

(PYR+)

Enterococcus faecalis

39 21106-08178

Ent.faecalis 99.9 Ent.faecalis

(Vitek2) 99

Enterococcus faecalis

40 21106-05889

Ent.faecalis 99.9 Enterococcus sp

(PYR+)

Enterococcus faecalis

41 21106-06040

Ent.faecalis 99.9 Enterococcus sp

(PYR+)

Enterococcus faecalis

42 21106-04829 Ent.faecalis 99.9

Enterococcus sp (PYR+)

Enterococcus

faecalis

43 21101-25338

Enteroccocus faecium

99.9 Enteroccocus

faecium

Enterococcus faecium

44 21103-13002

E.faecium 99.9 E.gallinarum

(Vitek2) 99

E.faecium (Rapid ID 32 Strep)

Enterococcus faecium

45 21103-16419

Ent.faecium 99.7 Enterococcus sp

(PYR+)

Enterococcus faecium

46 21103-18917

Ent.faecium 99.7 Enterococcus sp

(PYR+)

Enterococcus faecium

47 21103-27911

Ent.faecium 99.5 Enterococcus sp

(PYR+)

Enterococcus faecium

48 21103-32233

Ent.faecium 99.9 Enterococcus sp

(PYR+)

Enterococcus faecium

49 21003-32682

Ent.faecium 99.9 Enterococcus sp

(PYR+)

Enterococcus faecium

La spectrométrie de masse MALDI-TOF et le diagnostic microbiologique

Cristina Cariello

Travail de diplôme 2011-2012 43

N° NLAB Vitek MS % 2ème méthode % Confirmation Identification

50 21104-25029

Ent.faecium 99.9 Enterococcus sp

(PYR+)

Enterococcus faecium

51 21104-25025

Ent.faecium 99.9 Enterococcus sp

(PYR+)

Enterococcus faecium

52 21003-30578

Ent.faecium 98.6 Enterococcus sp

(PYR+)

Enterococcus faecium

53 21105-00553

Ent.faecium 99.9 Ent.faecium

(Vitek2) 97

Enterococcus faecium

54 21104-31733

Ent.faecium Enterococcus sp

(PYR+)

Enterococcus faecium

55 21104-31167

Ent.faecium 99.9 Ent.faecium

(Vitek2) 99

Enterococcus faecium

56 21003-10248

Enter.faecium 98.8 Enter.faecium Enterococcus

faecium

57 21103-07446

Enter.faecium 99.9 Ent.faecium

(Vitek2) 90

Enterococcus faecium

58 21105-28584 Ent.faecium 99.9

Ent.faecium (Vitek2)

96 Enterococcus

faecium

59 21105-30452

Ent.faecium 99.9 Ent.faecium

(Vitek2) 96

Enterococcus faecium

60 21105-31077

Ent.faecium 99.9 Ent.faecium

(Vitek2) 96

Enterococcus faecium

61 21105-12622

Ent.faecium 99.9 E.gallinarum 99 Ent.faecium

(Rapid ID 32STREP)

Enterococcus faecium

62 21105-20135

Ent.faecium 99.9 Ent.sp (PYR+) Enterococcus

faecium

63 21105-08100

Ent.faecium 99.9 Ent.faecium

(Vitek2) 97

Enterococcus faecium

64 21105-37414

Ent.faecium 99.9 Ent.faecium

(Vitek2) 99

Enterococcus faecium

N° NLAB Vitek MS % 2ème méthode % Confirmation Identification

65 21106-16270

Ent.faecium 99.9 Ent.faecium

(Vitek2) 96

Enterococcus faecium

66 21105-35642

E.gallinarum L. mesent.

99.9 99.9

Ent.gallinarum (Vitek2)

98 Enterococcus

gallinarum

67 20907-11597

Enterococcus faecium

99.9 64.4

Enterococcus gallinarum

54 Rapid ID 32

STREP Enterococcus

gallinarum

68 21103-35280

Pas de résultat Enterococcus sp

(PYR+) Enterococcus sp

10.1.3 Streptocoques

N° NLAB Vitek MS % 2ème méthode % Confirmation Identification

1 21102-26680

Abiotrophia defectiva

99.9 Abiotrophia

defectiva

Abiotrophia defectiva

2 21007-03820

Abiotrophia defectiva

99.9 Abiotrophia

defectiva

Abiotrophia defectiva

3 21103-21365

Streptococcus agalactiae

99.9 Strepto. gr. B

(Agglut. Gr. B+)

Streptococcus agalactiae

4 21103-21364

Streptococcus agalactiae

99.9 Strepto. gr. B

(Agglut. Gr. B+)

Streptococcus agalactiae

5 21103-30377

Streptococcus agalactiae

99.1 Strepto. gr. B

(Agglut. Gr. B+)

Streptococcus agalactiae

6 21103-21849

Streptococcus agalactiae

99 Strepto. gr. B

(Agglut. Gr. B+)

Streptococcus agalactiae

7 21103-27277

Streptococcus agalactiae

99.9 Strepto. gr. B

(Agglut. Gr. B+)

Streptococcus agalactiae

8 21103-28901

Streptococcus agalactiae

91.5 Strepto. gr. B

(Agglut. Gr. B+)

Streptococcus agalactiae

9 21103-33805

Streptococcus agalactiae

98.1 Strepto. gr. B

(Agglut. Gr. B+)

Streptococcus agalactiae

La spectrométrie de masse MALDI-TOF et le diagnostic microbiologique

Cristina Cariello

Travail de diplôme 2011-2012 44

N° NLAB Vitek MS % 2ème méthode % Confirmation Identification

10 21104-01105

Streptococcus agalactiae

99.9 Strepto. gr. B

(Agglut. Gr. B+)

Streptococcus agalactiae

11 21104-03926

Streptococcus agalactiae

99.9 Strepto. gr. B

(Agglut. Gr. B+)

Streptococcus agalactiae

12 21104-15282

Streptococcus agalactiae

99.9 Strepto. gr. B

(Agglut. Gr. B+)

Streptococcus agalactiae

13 21105-02416

Streptococcus agalactiae

99.9 Strepto. gr. B

(Agglut. Gr. B+)

Streptococcus agalactiae

14 21103-08812

Streptococcus agalactiae

99.4 Strepto. gr. B

(Agglut. Gr. B+)

Streptococcus agalactiae

15 21103-08778

Streptococcus agalactiae

98.2 Strepto. gr. B

(Agglut. Gr. B+)

Streptococcus agalactiae

16 21103-08782

Streptococcus agalactiae

98.2 Strepto. gr. B

(Agglut. Gr. B+)

Streptococcus agalactiae

17 21103-15566

Streptococcus agalactiae

99.8 Strepto. gr. B

(Agglut. Gr. B+)

Streptococcus agalactiae

18 21103-15320

Streptococcus agalactiae

99.7 Strepto. gr. B

(Agglut. Gr. B+)

Streptococcus agalactiae

19 21011-22853

Streptococcus agalactiae

86.2 Strepto. Groupe

B

Streptococcus agalactiae

20 20908-29404

Streptococcus agalactiae

99.9 Strepto. gr. B (Agglut gr. B+)

Streptococcus

agalactiae

21 21103-07806

Streptococcus agalactiae

99.9 Streptococcus

agalactiae

Streptococcus agalactiae

22 21105-38912

Str.agalactiae 99.9 Strepto. gr. B

(Agglut. Gr. B+)

Streptococcus agalactiae

23 21105-40499

Str.agalactiae 99.9 Strepto. gr. B

(Agglut. Gr. B+)

Streptococcus agalactiae

N° NLAB Vitek MS % 2ème méthode % Confirmation Identification

24 21105-19536

Str.agalactiae 99.9 Strepto. gr. B

(Agglut. Gr. B+)

Streptococcus agalactiae

25 21106-15043

Str.agalactiae 99.9 Strepto. gr. B

(Agglut. Gr. B+)

Streptococcus agalactiae

26 21102-22815

Streptococcus alactolyticus

99.9 Streptococcus alactolyticus

Streptococcus alactolyticus

27 21103-15240

S.anginosus 99.6 S.anginosus

(Vitek2) 97

Streptococcus anginosus

28 21105-01595

S.anginosus 99.9 S.anginosus +

autres (Vitek2)

Streptococcus

anginosus

29 21103-10033

Str. anginosus 62

Str. anginosus Str. gordonii Str. sanguis

(Vitek2)

Streptococcus

anginosus

30 21103-25071

Str.anginosus 99 Str.gordonii Str.sanguinis

(Vitek2)

Streptococcus anginosus

31 21104-00326 Str.anginosus 99.9

Str.anginosus (Vitek2)

94 Streptococcus

anginosus

32 21104-00470

Str.anginosus 99.9 Str.anginosus

(Vitek2) 93

Streptococcus anginosus

33 21104-11915

Str.anginosus 99.9 Str.anginosus Str.sanguinis

(Vitek2)

Streptococcus anginosus

34 21003-18197

Str.anginosus 77 Str.anginosus Str. grodonii

(Vitek2)

Streptococcus anginosus

35 21103-06723

Strepto. anginosus 97 Strepto.

anginosus (Vitek2)

97 Streptococcus

anginosus

36 21103-18197

Streptococcus anginosus

99.9 Streptococcus

anginosus

Streptococcus anginosus

37 21105-33381

St.anginosus 99.9 Str.anginosus Str.gordonii

(Vitek2)

Streptococcus anginosus

La spectrométrie de masse MALDI-TOF et le diagnostic microbiologique

Cristina Cariello

Travail de diplôme 2011-2012 45

N° NLAB Vitek MS % 2ème méthode % Confirmation Identification

38 21105-35621

St.anginosus 99.9 Str.anginosus Str.gordonii

(Vitek2)

Streptococcus anginosus

39 21105-30924

Str.anginosus 99.9 Str.anginosus

(Vitek2) 94

Streptococcus anginosus

40 21104-24556

Streptococcus constellatus

99.9 Streptococcus constellatus

Str. anginosus (Poss. Str.

constellatus) (Agglut gr.C +RapID 32

STREP)

Streptococcus constellatus

41 21104-34833 Str. constellatus 99.9

Str.alpha-hémolytique

Streptococcus constellatus

42 21104-21656

Str.constellatus Str.anginosus

99.9 84.3

Str.constellatus (Vitek2)

Streptococcus constellatus

43 21104-21639 Str.constellatus 87.3

Str.constellatus (Vitek2)

97 Streptococcus constellatus

44 21104-07719

Strept. constellatus

97.9 Pas de résultat

(Vitek2)

Strepto. constellatus (Api

20 Strep)

Streptococcus constellatus

45 21104-12034

Strepto. constellatus

999 Pas de résultat

(Vitek2) 98

Strepto. constellattus

(Api 20 Strept)

Streptococcus constellatus

46 21105-35638

Str.constellatus 99.9 Str.constellatus

pharyngis (Vitek2)

85 Streptococcus constellatus

47 21105-12475

Str.constellatus 99.9 Str.constellatus

(Vitek2) 86

Streptococcus constellatus

48 20810-16500

Streptococcus constellatus

99.9 Streptococcus morbillorum

61 Rapid ID 32

STREP Streptococcus constellatus

49 21103-06955

Strepto. dysgalactiae

99.7 Strepto. gr. B

(Agglut. Gr. B+)

Streptococcus dysgalactiae

50 21103-24138

Pas de résultat Str.dysgalactiae

(Vitek2) 99

Streptococcus dysgalactiae

51 911-27322

Strepto. dysgalactiae/

equisimilis 95.6

Strepto. dysgalactiae

Streptococcus dysgalactiae

N° NLAB Vitek MS % 2ème méthode % Confirmation Identification

52 21104-25491

Str. dysgalactiae ssp dys./ssp equi.

99.9 Streptococcus

dysgalactiae ssp equisimilis

99 Agglut gr. G

RapID 32 STREP

Streptococcus dysgalactiae ssp

equisimilis

53 09-00948

Str. dysgalactiae ssp equisimilis/ssp

dysgalatiae 99.9

Streptococcus gr. G

Streptococcus dysgalactiae ssp equisimilis/ssp

dysgalatiae

54 912-26526

Strepto. dysgalactiae ssp dysgalaciae/ ssp

equisimilis

60 Streptococcus

gr. G

Streptococcus dysgalactiae/

equisimilis

55 21104-20282

Str.gallolyticus 99.9 Str.gallolyticus

(Vitek2) 96

Streptococcus gallolyticus

56 21010-19728

Strepto. gallolyticus ssp

pasteurianus ssp gallolyticus

99.9 Streptococcus

gallolyticus

Streptococcus gallolyticus

57 20804-18428.2

Strepto. gallolyticus ssp pasteurianus/ ssp

gallolyticus

99.9 Streptococcus

gallolyticus

Streptococcus gallolyticus

58 21103-31678

Str. gordonii 99.1 Str. mitis/oralis

(Vitek2)

Connu pour gordonii

Streptococcus gordonii

59 21103-23608

Streptococcus gordonii

99.9 Streptococcus

gordonii

Streptococcus gordonii

60 21103-19691

Pas de résultat Strepto.

infantarius (Vitek2)

97 Streptococcus

infantarius

61 21103-19691

Str. bovis/Str. infantarius ssp infantarius/Str. infantarius ssp coli=lutetiensis

99.9 Streptococcus

gr. bovis 97

Streptococcus infantarius ssp

infantarius (Vitek2)

Streptococcus infantarius ssp

infantarius

62 21103-14784

Str.intermedius 99.9 S.intermedius S.constellatus

(Vitek2)

Str.intermedius (Rapid ID 32

Strep)

Streptococcus intermedius

63 21105-29543

Str.intermedius 99.9 Str.intermedius

Str.gordonii (Vitek2)

Streptococcus intermedius

64 21104-02059

Strepto. mitis/oralis

98.4 Strepto. alpha-

hémol.

Streptococcus mitis/oralis

La spectrométrie de masse MALDI-TOF et le diagnostic microbiologique

Cristina Cariello

Travail de diplôme 2011-2012 46

N° NLAB Vitek MS % 2ème méthode % Confirmation Identification

65 21103-02716

Strepto. mitis/oralis

71.8 Strepto

mitis/oralis

Streptococcus mitis/oralis

66 21101-39772 Pas de résultats

Strepto mitis/oralis

Streptococcus

mitis/oralis

67 21103-27815

Pas de résultat Strepto.

mitis/oralis (Vitek2)

Streptococcus

mitis/oralis

68 21104-13157

Strepto. mitis/oralis

99.9 Strepto.

mitis/oralis (Vitek2)

99 Streptococcus

mitis/oralis

69 21104-10349

Strepto. mitis/oralis

99.9 Granulicatella

adjacens (Vitek2)

93 Streptococcus

mitis/oralis

70 21103-35480

Strepto. mitis/oralis

99.9

Strepto. mitis/oralis K.

kristinae (Vitek2)

Streptococcus

mitis/oralis

71 21105-37221

Str.mitis/oralis 99.9 Strepto.

mitis/oralis (Vitek2)

99 Streptococcus

mitis/oralis

72 21105-18630

Str.mitis/oralis 99.9 Strepto.

mitis/oralis (Vitek2)

99 Streptococcus

mitis/oralis

73 21103-02716

Streptococcus mitis/oralis

99.9 Streptococcus

oralis

Streptococcus oralis

74 21103-17736 S.parasanguinis 99

S.parasanguinis (Vitek2)

99 Streptococcus parasanguinis

75 21008-37598

Streptococcus parasanguinis

99.9 Streptococcus parasanguinis

Streptococcus parasanguinis

76 21005-02678

Streptococcus parasanguinis

99.9 Streptococcus parasanguinis

Streptococcus parasanguinis

77 21103-21693 Pas de résultat

S.pneumoniae (Vitek2)

97 Streptococcus pneumoniae

78 21103-21622

Pas de résultat S.pneumoniae

(OPT S)

Streptococcus pneumoniae

79 21104-10478

S.pneumoniae 99.9 S.pneumoniae

(OPT S)

Streptococcus pneumoniae

N° NLAB Vitek MS % 2ème méthode % Confirmation Identification

80 21104-12235

S.pneumoniae 99.9 S.pneumoniae

(OPT S)

Streptococcus pneumoniae

81 21104-22058

Pas de résultat S.pneumoniae

(OPT S)

Streptococcus pneumoniae

82 21007-04972

Strepto. pneumoniae

98.1 Strepto.

pneumoniae

Streptococcus pneumoniae

83 20808-29759

Pas de résultats Strepto.

pneumoniae

Streptococcus pneumoniae

84 20807-01044

Strepto. pneumoniae

98.4 Strepto.

pneumoniae

Streptococcus pneumoniae

85 20801-09812

Strepto. pneumoniae

85.8 Strepto.

pneumoniae

Streptococcus pneumoniae

86 20711-21440

Strepto. pneumoniae

84.2 Strepto.

pneumoniae

Streptococcus pneumoniae

87 20711-14070 Pas de résultats

Strepto. pneumoniae

Streptococcus pneumoniae

88 20710-30013

Strepto. pneumoniae

68.6 Strepto.

pneumoniae

Streptococcus pneumoniae

89 20706-04719

Strepto. pneumoniae

99.1 Strepto.

pneumoniae

Streptococcus pneumoniae

90 21104-33987

Streptococcus pneumoniae

99.9 S.pneumoniae

(OPT S)

Streptococcus pneumoniae

91 21104-29303

Streptococcus pneumoniae

99.9 S.pneumoniae

(OPT S)

Streptococcus pneumoniae

92 21104-29337

Streptococcus pneumoniae

99.9 S.pneumoniae

(OPT S)

Streptococcus pneumoniae

93 21104-22058

Streptococcus pneumoniae

99.9 S.pneumoniae

(OPT S)

Streptococcus pneumoniae

94 21104-19204

Streptococcus pneumoniae

99.9 S.pneumoniae

(OPT S)

Streptococcus pneumoniae

La spectrométrie de masse MALDI-TOF et le diagnostic microbiologique

Cristina Cariello

Travail de diplôme 2011-2012 47

N° NLAB Vitek MS % 2ème méthode % Confirmation Identification

95 21104-01166

Streptococcus pneumoniae

99.9 S.pneumoniae

(OPT S)

Streptococcus pneumoniae

96 21104-01049

Streptococcus pneumoniae

99.9 S.pneumoniae

(OPT S)

Streptococcus pneumoniae

97 21103-30389

Streptococcus pneumoniae

99.9 S.pneumoniae

(OPT S)

Streptococcus pneumoniae

98 21105-01892 Str.pyogenes 99.9

Strepto. gr. A (Agglut gr. A+)

Streptococcus

pyogenes

99 21105-01697 Str.pyogenes 99.9

Strepto. gr. A (Agglut gr. A+)

Streptococcus

pyogenes

100 21103-39877

Strepto.pyogenes 99.9 Strepto. gr. A (Agglut gr. A+)

Streptococcus

pyogenes

101 21103-39876

Strepto.pyogenes 99.9 Strepto. gr. A (Agglut gr. A+)

Streptococcus

pyogenes

102 21103-35421 Strepto. pyogenes 98.7

Strepto. gr. A (Agglut gr. A+)

Streptococcus

pyogenes

103 21102-29418

Streptococcus pyogenes

99.9 Streptococcus

pyogenes

Streptococcus pyogenes

104 21006-02081

Str.pyogenes 99.9 Strepto. gr. A (Agglut gr. A+)

Streptococcus

pyogenes

105 21105-35691 Str.pyogenes 99.9

Strepto. gr. A (Agglut gr. A+)

Streptococcus

pyogenes

106 21103-17736 Str.salivarius 99.9

Str.salivarius (Vitek2)

99 Streptococcus

salivarius

107 21104-21328 Str.salivarius 99.9

Str.salivarius (Vitek2)

97 Streptococcus

salivarius

108 21104-17965

Strepto. salivarius 99.9 Leuconostoc

(Vitek2)) 89 Vanco: S

Streptococcus salivarius

109 21105-08327 Str.salivarius 99.9

Leuconostoc (Vitek2)

91 Streptococcus

salivarius

110 21102-28953

Streptococcus salivarius ssp

salivarius 99.9

Streptococcus salivarius

Streptococcus

salivarius

10.1.4 Streptococcus pneumoniae traités

N° NLAB Vitek MS % 2ème méthode % Confirmation Identification

1 21007-04972

Streptococcus pneumoniae

99.9 Streptococcus pneumoniae

(OPT: S)

Streptococcus pneumoniae

2 20808-29759

Streptococcus pneumoniae

99.9 Streptococcus pneumoniae

(OPT: S)

Streptococcus pneumoniae

3 20807-01044

Streptococcus pneumoniae

99.9 Streptococcus pneumoniae

(OPT: S)

Streptococcus pneumoniae

4 20801-09812

Streptococcus pneumoniae

99.9 Streptococcus pneumoniae

(OPT: S)

Streptococcus pneumoniae

5 20711-21440

Streptococcus pneumoniae

99.9 Streptococcus pneumoniae

(OPT: S)

Streptococcus pneumoniae

6 20711-14070

Streptococcus pneumoniae

99.9 Streptococcus pneumoniae

(OPT: S)

Streptococcus pneumoniae

7 20710-30013

Streptococcus pneumoniae

99.9 Streptococcus pneumoniae

(OPT: S)

Streptococcus pneumoniae

8 20706-04719

Streptococcus pneumoniae

99.9 Streptococcus pneumoniae

(OPT: S)

Streptococcus pneumoniae

9 21203-04579

Streptococcus pneumoniae

99.9 Streptococcus pneumoniae

(OPT: S)

Streptococcus pneumoniae

10 21202-41531

Streptococcus pneumoniae

99.9 Streptococcus pneumoniae

(OPT: S)

Streptococcus pneumoniae

11 21202-38970

Streptococcus pneumoniae

99.9 Streptococcus pneumoniae

(OPT: S)

Streptococcus pneumoniae

12 21202-35233

Streptococcus pneumoniae

99.9 Streptococcus pneumoniae

(OPT: S)

Streptococcus pneumoniae

13 21202-30386

Streptococcus pneumoniae

99.9 Streptococcus pneumoniae

(OPT: S)

Streptococcus pneumoniae

14 21202-20746

Streptococcus pneumoniae

99.9 Streptococcus pneumoniae

(OPT: S)

Streptococcus pneumoniae

La spectrométrie de masse MALDI-TOF et le diagnostic microbiologique

Cristina Cariello

Travail de diplôme 2011-2012 48

N° NLAB Vitek MS % 2ème méthode % Confirmation Identification

15 21202-12098

Streptococcus pneumoniae

99.9 Streptococcus pneumoniae

(OPT: S)

Streptococcus pneumoniae

16 21110-30741

Streptococcus pneumoniae

99.9 Streptococcus pneumoniae

(OPT: S)

Streptococcus pneumoniae

17 21110-30665

Streptococcus pneumoniae

99.9 Streptococcus pneumoniae

(OPT: S)

Streptococcus pneumoniae

18 21110-17503

Streptococcus pneumoniae

99.9 Streptococcus pneumoniae

(OPT: S)

Streptococcus pneumoniae

19 21110-15528

Streptococcus pneumoniae

99.9 Streptococcus pneumoniae

(OPT: S)

Streptococcus pneumoniae

20 21110-12074

Streptococcus pneumoniae

99.9 Streptococcus pneumoniae

(OPT: S)

Streptococcus pneumoniae

21 21109-35072

Streptococcus pneumoniae

99.9 Streptococcus pneumoniae

(OPT: S)

Streptococcus pneumoniae

22 21109-32205

Streptococcus pneumoniae

99.9 Streptococcus pneumoniae

(OPT: S)

Streptococcus pneumoniae

23 21109-31914

Pas de résultat 99.9 Streptococcus pneumoniae

(OPT: S)

Streptococcus pneumoniae

10.1.5 Autres coques Gram positif

Nbre NLAB Vitek MS % 2ème méthode % Confirmation Identification

1 21103-22722 Aerococcus urinae 99.8

Aerococcus urinae (Vitek2)

93 Aerococcus

urinae

2 21104-35440 Aerococcus urinae 99.9

Pas de résultat (Vitek2)

Aerococcus

urinae

3 21106-12586

Aerococcus urinae 99.9 Granulicatella

adjacens (Vitek2)

Aerococcus

urinae (Rapid ID 32 Strep)

Aerococcus urinae

4 21012-13672

Leuconostoc lactis Leuc.

mesenteroïdes 99.9

Leuconostoc lactis

Leuconostoc

lactis

10.1.6 Neisseria/Branhamella

N° NLAB Vitek MS % 2ème méthode % Confirmation Identification

1 21104-16521

Branhamella catarrahalis

99.9 Branhamella catarrahalis

(Vitek2) 100

Branhamella catarrahalis

2 21103-21110

Branhamella catarrahalis

99.9 Branhamella catarrahalis

(API NH) 100

Branhamella catarrahalis

3 21103-36840

Branhamella catarrahalis

99.9 Branhamella catarrahalis

(API NH)

Branhamella catarrahalis

4 21103-34427

Branhamella catarrahalis

99.9 Branhamella catarrahalis

(API NH)

Branhamella catarrahalis

5 21105-37225

Branhamella catarrahalis

99.9 Branhamella catarrahalis

(API NH)

Branhamella catarrahalis

6 21006-10768

Branhamella catarrhalis

99.9 Branhamella catarrhalis

Branhamella catarrhalis

7 20810-25854

Branhamella catarrhalis

99.9 Branhamella catarrhalis

Branhamella catarrhalis

8 20708-30360

Branhamella catarrhalis

99.9 Branhamella catarrhalis

Branhamella catarrhalis

9 20506-09614

Branhamella catarrhalis

99.9 Branhamella catarrhalis

Branhamella catarrhalis

10 21011-12835

Moraxella non-liquefaciens

99.9 Moraxella non-

liquefaciens

Moraxella non-liquefaciens

11 21103-17729

Moraxella osloensis

93.6 Moraxella sp Moraxella sp

12 21008-03092

Neisseria gonorrhoeae

99.9 Neisseria

gonorrhoeae

Neisseria gonorrhoeae

13 21101-15911

Neisseria gonorrhoeae

99.9 Neisseria

gonorrhoeae

Neisseria gonorrhoeae

14 21007-03488

Neisseria gonorrhoeae

99.9 Neisseria

gonorrhoeae

Neisseria gonorrhoeae

La spectrométrie de masse MALDI-TOF et le diagnostic microbiologique

Cristina Cariello

Travail de diplôme 2011-2012 49

N° NLAB Vitek MS % 2ème méthode % Confirmation Identification

15 21106-15904

Neisseria gonorrhoeae

99.9 Neisseria

gonorrhoeae (API NH)

99 Neisseria

gonorrhoeae

16 20910-33086

Neisseria gonorrhoeae

99.9 Neisseria

gonorrhoeae

Neisseria gonorrhoeae

17 21101-35517

Neisseria meningitidis

99.9 Neisseria

meningitidis

Neisseria meningitidis

18 21101-35347

Neisseria meningitidis

99.9 Neisseria

meningitidis

Neisseria meningitidis

19 21101-35252

Neisseria meningitidis

99.9 Neisseria

meningitidis

Neisseria meningitidis

20 21103-02711

Neisseria meningitidis

99.9 Neisseria

meningitidis

Neisseria meningitidis

21 21104-15835

Neisseria mucosa 99.9 Neisseria sp Neisseria sp

22 21104-22303

Neisseria subflava 99.9 Neisseria sp Neisseria sp

23 20911-14399

Neisseria zoodegmatis

99.9 Neisseria

zoodegmatis

Neisseria zoodegmatis

10.1.7 Gardnerella vaginalis

N° NLAB Vitek MS % 2ème méthode % Confirmation Identification

1 21011-12295

Gardnarella vaginalis

99.9 Gardnarella

vaginalis

Gardnerella vaginalis

2 21103-11266

Gardnerella vaginalis

99.9 Gardnerella

vaginalis (Gram)

Gardnerella vaginalis

3 21104-03829

Gardnerella vaginalis

99.9 Gardnerella

vaginalis (Gram)

Gardnerella vaginalis

4 21104-05598

Gardnerella vaginalis

99.9 Gardnerella

vaginalis (Gram)

Gardnerella vaginalis

N° NLAB Vitek MS % 2ème méthode % Confirmation Identification

5 21104-13647

Gardnerella vaginalis

99.9 Gardnerella

vaginalis (Gram)

Gardnerella vaginalis

6 21104-13160

Gardnerella vaginalis

99.9 Gardnerella

vaginalis (Gram)

Gardnerella vaginalis

7 21104-15114

Gardnerella vaginalis

99.9 Gardnerella

vaginalis (Gram)

Gardnerella vaginalis

8 21104-16504

Gardnerella vaginalis

99.9 Gardnerella

vaginalis (Gram)

Gardnerella vaginalis

9 21104-22536

Gardnerella vaginalis

99.9 Gardnerella

vaginalis (Gram)

Gardnerella vaginalis

10 21104-32347

Gardnerella vaginalis

99.9 Gardnerella

vaginalis (Gram)

Gardnerella vaginalis

11 21104-33703

Gardnerella vaginalis

99.9 Gardnerella

vaginalis (Gram)

Gardnerella vaginalis

12 21104-35304

Gardnerella vaginalis

99.9 Gardnerella

vaginalis (Gram)

Gardnerella vaginalis

13 21105-12909

Gardnerella vaginalis

99.9 Gardnerella

vaginalis (Gram)

Gardnerella vaginalis

14 21105-30811

G.vaginalis Bifido. sp

99.9 99.4

Gardnerella vaginalis (Gram)

Gardnerella

vaginalis

15 21105-31861

Gardnerella vaginalis

99.9 Gardnerella

vaginalis (Gram)

Gardnerella vaginalis

16 21105-04914

Gardnerella vaginalis

99.9 Gardnerella

vaginalis (Gram)

Gardnerella vaginalis

17 211006-14394

Gardnerella vaginalis

99.9 Gardnerella

vaginalis (Gram)

Gardnerella vaginalis

La spectrométrie de masse MALDI-TOF et le diagnostic microbiologique

Cristina Cariello

Travail de diplôme 2011-2012 50

10.1.8 Corynébactéries

N° NLAB Vitek MS % 2ème méthode % Confirmation Identification

1 Souche BM

Arcano. haemolyticum

99.9 Arcano.

haemolyticum

Arcanobact.

haemolyticum

2 Souche BM

Arcano. haemolyticum

99.9 Arcano.

haemolyticum

Arcanobact.

haemolyticum

3 21103-16303

C. amycolatum C. xerosis

99.9 99.9

C. amycolatum (Vitek2)

91 Corynebact. amycolatum

4 20911-14393

Coryne amycolatum

Coryne. xerosis 99.9

Corynebact. amycolatum

Corynebact. amycolatum

5 21102-05026

Coryn. amycolatum

Coryn. xerosis 99.9

Corynebact. amycolatum

Corynebact. amycolatum

6 21008-24775

Coryn. amycolatum

Coryn. xerosis 99.9

Corynebact. amycolatum

Corynebact. amycolatum

7 21106-26885

C.amycolatum C.xerosis

99.9 C.amycolatum

(Vitek2) 89

Corynebact. amycolatum

8 21104-06365

C. xerosis C. amylocatum

99.9 C. amylocatum

(Vitek2) 98

Corynebact. amylocatum

9 20909-34793

Corynebacterium diptheriae

99.9 Corynebact. diptheriae

Corynebact. diptheriae

10 Souche BM

Pas de résultat (pas dans la base

de données)

Coryne. glucoserum

Corynebact. glucoserum

11 Souche BM

Plusieurs résultats autres (pas dans la base de données)

Coryne. glucuro-

nolyticum

Corynebact. glucuro-

nolyticum

12 Souche BM

Coryne.jeikeium 99.9 Coryne. jeikeium

Corynebact.

jeikeium

13 21104-07135

Pas de résultat Corynebact.

jeikeium (Vitek2)

92 Corynebact.

jeikeium

14 Souche BM

Corynebact. jeikeium

99.9 Corynebact.

jeikeium

Corynebact. jeikeium

N° NLAB Vitek MS % 2ème méthode % Confirmation Identification

15 20906-14113

Pas de résultats 99.9 Corynebact.

jeikeium

Corynebact. jeikeium

16 21101-34941

Pas de résultats Corynebact.

jeikeium

Corynebact. jeikeium

17 21006-30034

Corynebacterium jeikeium

99.9 Corynebact.

jeikeium

Corynebact. jeikeium

18 21106-01220

C. jeikeium 99.8 Low discrimin.

Corynebact. (Vitek2)

Corynebact.

jeikeium

19 21103-05632

Corynebacterium peudodipht.

97.3 Corynebact. peudodipht.

(Vitek2) 99

Corynebact. pseudodipht.

20 21104-07208

Corynebacterium peudodipht.

99.9 Corynebact. peudodipht.

(Vitek2) 91

Corynebact. peudodipht.

21 21104-05810

Corynebacterium peudodipht.

99.9 Corynebact. peudodipht.

(Vitek2) 95

Corynebact. pseudodipht.

22 21103-13129

Pas de résultat Corynebact.

pseudodipht. (Vitek2)

91 Corynebact.

pseudodipht.

23 21103-26742

Corynebact. pseudodipht.

96.4 Corynebact.

pseudodipht. (Vitek2)

99 Corynebact.

pseudodipht.

24 21104-26991

Coryne. pseudodipht.

99.9 Coryne.

pseudodipht. (Vitek2)

99 Corynebact.

pseudodipht.

25 21101-31679

Corynebacterium pseudo-

diphteriticum 99.9

Corynebact. pseudo-

diphteriticum

Corynebact. pseudo-

diphteriticum

26 21008-09708

Plusieurs résultats autres

99.9 Corynebact.

pseudo-diphteriticum

Corynebact.

pseudo-diphteriticum

27 21105-26382

Coryne. pseudodipht.

99.9 Coryne.

pseudodipht. (Vitek2)

99 Corynebact.

pseudo-diphteriticum

28 21105-27966

Coryne. pseudodipht.

99.9

Low discrimin. Coryne.

pseudodipht. (Vitek2)

Corynebact.

pseudo-diphteriticum

La spectrométrie de masse MALDI-TOF et le diagnostic microbiologique

Cristina Cariello

Travail de diplôme 2011-2012 51

N° NLAB Vitek MS % 2ème méthode % Confirmation Identification

29 21106-03541

Coryne. pseudodipht.

99.9 Coryne.

pseudodipht. (Vitek2)

99 Corynebact.

pseudo-diphteriticum

30 21105-25604

Coryne. pseudodipht.

99.9 Coryne.

pseudodipht. (Vitek2)

99 Corynebact.

pseudo-diphteriticum

31 21105-07679

Coryne. pseudodipht.

99.9 Coryne.

pseudodipht. (Vitek2)

99 Corynebact.

pseudo-diphteriticum

32 21105-11512

Coryne. pseudodipht.

99.9 Coryne.

pseudodipht. (Vitek2)

99 Corynebact.

pseudo-diphteriticum

33 21106-23993

Coryne. pseudodipht.

99.9 Coryne.

pseudodipht. (Vitek2)

99 Corynebact.

pseudodipth.

34 21103-41437

Pas de résultat Coryne. sp

(Gram) Corynebact. sp

35 21105-00344

C. amycolatum C. xerosis

99.9 99.9

Coryne. sp (Vitek2)

Corynebact. sp

36 21105-34045

C.pseudodiph. C.xerosis

C.amycolatum

Pas de résultat (Vitek2)

Corynebact. sp

37 21106-15690

C.xerosis C.amycolatum

99.9 99.9

Low discrimin. Corynebact.

(Vitek2) Corynebact. sp

38 21105-23044

Coryne.striatum 99.9 Coryne. striatum (Vitek2)

95 Corynebact.

striatum

39 Souche BM

Coryne. urealyticum

99.9 Coryne.

urealyticum

Corynebact. urealyticum

40 Souche BM

Corynebact. urealyticum

99.9 Corynebact. urealyticum

Corynebact. urealyticum

41 Souche BM

Plusieurs résultats autres (pas dans la base de données)

Turicella otitidis Turicella otitidis

10.1.9 Autres bacilles Gram positif aérobes

N° NLAB Vitek MS % 2ème méthode % Confirmation Identification

1 21008-23499

Bacillus pumilus 99.9 Bacillus Bacillus pumilus

2 21011-36003

Bacillus cereus Bacillus

thuringiensis Bacillus mycoïdes

99.9 Bacillus Bacillus sp

3 21011-25628

Bacillus cereus Bacillus

thuringiensis Bacillus mycoïdes

99.9 Bacillus Bacillus sp

4 21009-11977

Brevibacillus5 spp 99.9 Bacillus Brevibacillus spp

5 Souche BM

Erysipelothrix rhusiopathiae

99.9 Erysipelothrix rhusiopathiae

Erysipelothrix rhusiopathiae

6 21105-04633

Lactobacillus acidophilus

97.9 Lactobacillus sp

(Gram) Lactobacillus sp

7 21106-05322

Lactobacillus fermentum

99.9 Lactobacillus sp

(Gram) Lactobacillus sp

8 21103-41446

Lactobacillus rhamnosus

99.9 Lactobacillus sp

(Vanco R) Lactobacillus sp

9 21101-30103

Lactobacillus rhamnosus

99.9 Lactobacillus sp Lactobacillus sp

10 21009-30782

Lactobacillus rhamnosus

99.9 Lactobacillus sp Lactobacillus sp

11 21003-13267

Lactobacillus rhamnosus

99.9 Lactobacillus sp Lactobacillus sp

12 21001-15536

Lactobacillus rhamnosus

99.9 Lactobacillus sp Lactobacillus sp

13 21103-41613

Listeria monocytogenes

99.9 Listeria

monocytogenes (Vitek2)

99 Listeria

monocytogenes

5 Le genre Bacillus est divisé en plusieurs groupes dont Brevibacillus.

La spectrométrie de masse MALDI-TOF et le diagnostic microbiologique

Cristina Cariello

Travail de diplôme 2011-2012 52

N° NLAB Vitek MS % 2ème méthode % Confirmation Identification

14 21104-19598

Listeria monocytogenes

99.9 Listeria

monocytogenes (Vitek2)

95 Listeria

monocytogenes

15 21105-32571

Listeria monocytogenes

99.9 Listeria

monocytogenes (Vitek2)

99 Listeria

monocytogenes

16 21105-34550

Listeria monocytogenes

99.9 Listeria

monocytogenes (Vitek2)

99 Listeria

monocytogenes

17 20910-33063

Listeria monocytogenes

99.9 Listeria mono-

cytogenes

Listeria mono-cytogenes

18 21102-01065

Pas de résultats (seulement

N.asteroides dans la base de données)

Nocardia spp Nocardia spp

19 21001-12289

Plusieurs résultats (pas dans la base

de données) 99.9

Rhodococcus equi

Rhodococcus

equi

20 20911-14398

Rothia dentocariosa

99.9 Rothia

dentocariosa

Rothia dentocariosa

10.1.10 Entérobactéries

N° NLAB Vitek MS % 2ème méthode % Confirmation Identification

1 21103-25974

Pas de résultat Citrobacter

braakii (Vitek2)

95 Citrobacter

braakii

2 21104-21878

Citrobacter freundii

Citrobacter braakii

99.3 99.9

Citrobacter braakii (Vitek2)

99 Citrobacter

braakii

3 21104-22325

Citrobacter freundii

99.6 Citrobacter

freundii (Vitek2)

98 Citrobacter

freundii

4 21105-27900

Citrobacter freundii

99.9 Citrobacter

freundii (Vitek2)

99 Citrobacter

freundii

N° NLAB Vitek MS % 2ème méthode % Confirmation Identification

5 21105-27973

Citrobacter freundii

99.9 Citrobacter

freundii (Vitek2)

97 Citrobacter

freundii

6 21105-30860

Citrobacter freundii

99.9 Citrobacter

freundii (Vitek2)

99 Citrobacter

freundii

7 21103-25983

Pas de résultat Citrobacter

koseri (Vitek2)

99 Citrobacter

koseri

8 21103-28588

Citrobacter koseri 91.7 Citrobacter

koseri (Vitek2)

99 Citrobacter

koseri

9 21104-11187

Citrobacter koseri 99.9 Citrobacter

koseri (Vitek2)

98 Citrobacter

koseri

10 21105-40385

Citrobacter koseri 99.9 Citrobacter

koseri (Vitek2)

89 Citrobacter

koseri

11 21003-36840

Pas de résultat Citrobacter

youngae (Vitek2)

95 Citrobacter

youngae

12 21106-10145

Citrobacter youngae/freundii

99.9 Citrobacter

youngae (Vitek2)

99 Citrobacter

youngae

13 21106-09633

Edwarsiella tarda 99.9 Edwarsiella

tarda 95

Edwardsiella tarda

14 21105-02000

Enterobacter aerogenes

99.9 Enterobacter

aerogenes (Vitek2)

98 Ent.aerogenes

15 09-35463

Enterobacter aerogenes

99.7 Enterobacter sp Enterobacter

aerogenes

16 21102-31183

Enterobacter aerogenes

99.9 Enterobacter

aerogenes (Vitek2)

99 Enterobacter

aerogenes

17 21105-30452

Enterobacter aerogenes

99.9 Enterobacter

aerogenes (Vitek2)

98 Enterobacter

aerogenes

18 21104-21904

Enterobacter cloacae

99.8 Enterobacter

cloacae

Enterobacter cloacae

La spectrométrie de masse MALDI-TOF et le diagnostic microbiologique

Cristina Cariello

Travail de diplôme 2011-2012 53

N° NLAB Vitek MS % 2ème méthode % Confirmation Identification

19 21103-29267

Ent.cloacae Ent.asburiae

Enterobacter

cloacae (Vitek2)

Enterobacter cloacae

20 21103-29272

Ent.cloacae Ent.asburiae

Enterobacter

cloacae (Vitek2) 99

Enterobacter cloacae

21 21103-28136

Ent.cloacae 99.3 Enterobacter

cloacae (Vitek2) 94

Enterobacter cloacae

22 21103-08020

Enterobacter cloacae

Enterobacter asburiae

92.4 92.4

Plusieures résultats

Enterobacter (Vitek2)

99 Enterobacter

cloacae (Rapid 32E)

Enterobacter cloacae

23 21103-26166

Enterobact. cloacae

Enterobact. asburiae

99.9

Plusieures résultats

Enterobacter (Vitek2)

Enterobacter

cloacae

24 21103-08264

Enterobacter cloacae

80.1 Enterobacter

complex cloacae (Vitek2)

Enterobacter

cloacae

25 21105-21092

Ent.cloacae 99.9 Enterobacter

cloacae (Vitek2)

Enterobacter cloacae

26 21105-03385

Ent.cloacae Ent.asburias

99.9 99.9

Ent.cloacae complex (Vitek2)

98 Enterobacter

cloacae complex

27 21103-20483

Ent.asburiae Ent.cloacae

Ent.cloacae

complex (Vitek2)

98 Enterobacter

cloacae complex

28 21104-21709

Ent.asburiae Ent.cloacae

99.9 99.9

Ent.cloacae complex (Vitek2)

Enterobacter

cloacae complex

29 21105-12161

Ent.cloacae Ent.asburias

99.9 99.9

Ent.cloacae complex (Vitek2)

99 Enterobacter

cloacae complex

30 21105-03698

Ent.cloacae Ent.asburias

99.9 99.9

Ent.cloacae complex (Vitek2)

99 Enterobacter

cloacae complex

31 21104-03711

Enterobacter cloacae/asburiae

99.9

Plusieurs résultats

Enterobacter (Vitek2)

Enterobacter

cloacae complex

N° NLAB Vitek MS % 2ème méthode % Confirmation Identification

32 21106-17541

Ent.cloacae Ent.asburias

99.9 99.9

Ent.cloacae complex (Vitek2)

99 Enterobacter

cloacae complex

33 21106-15944

Ent.cloacae Ent.asburias

99.9 99.9

Ent.cloacae complex (Vitek2)

99 Enterobacter

cloacae complex

34 21106-06716

Ent.cloacae Ent.asburias

99.9 99.9

Ent.cloacae complex (Vitek2)

98 Enterobacter

cloacae complex

35 21104-33876

Ent.asburiae Ent.cloacae

99.9 99.9

Ent. cloacae complex (Vitek2)

99 Enterobacter

cloacae complex

36 11-12293

Cronobacter sakazakii

98.4 Enterobacter

sakazakii

Enterobacter sakazakii

37 21105-29203

E.coli 99.9 E.coli

(L+, indole+) Escherichia coli

38 21105-28203

E.coli 99.9 E.coli

(L+, indole+) Escherichia coli

39 21105-30516

E.coli 99.9 E.coli

(L+, indole+) Escherichia coli

40 21105-09954

E.coli 99.9 E.coli

(Vitek2) 98 Escherichia coli

41 21105-35733

E.coli 99.9 E.coli

(Vitek2) 99 Escherichia coli

42 21105-27165

E.coli 99.9 E.coli

(Vitek2) 99 Escherichia coli

43 21105-24862

E.coli 99.9 E.coli

(L+, indole+) Escherichia coli

44 21105-13138

E.coli 99.9 E.coli

(L+, indole+) Escherichia coli

45 21105-21910

E.coli 99.9 E.coli

(L+, indole+) Escherichia coli

La spectrométrie de masse MALDI-TOF et le diagnostic microbiologique

Cristina Cariello

Travail de diplôme 2011-2012 54

N° NLAB Vitek MS % 2ème méthode % Confirmation Identification

46 21105-21883 E.coli 99.9

E.coli (Vitek2)

99 Escherichia coli

47 21105-21628

E.coli 99.9 E.coli

(Vitek2) 99 Escherichia coli

48 21105-21370

E.coli 99.9 E.coli

(indole+) Escherichia coli

49 21105-21331

E.coli 99.9 E.coli

(indole+) Escherichia coli

50 21105-15674

E.coli 99.9 E.coli

(Vitek2) 96 Escherichia coli

51 21105-15239

E.coli 99.9 E.coli

(Vitek2) 99 Escherichia coli

52 21105-11355

E.coli 99.9 E.coli

(L+, indole+) Escherichia coli

53 21105-11898

E.coli 99.9 E.coli

(L+, indole+) Escherichia coli

54 21105-04072

E.coli 99.9 E.coli

(Vitek2) 99 Escherichia coli

55 21105-05773

E.coli 99.9 E.coli

(Vitek2) 97 Escherichia coli

56 21105-05821

E.coli 99.9 E.coli

(Vitek2) 98 Escherichia coli

57 21106-06335

E.coli 99.9 E.coli

(L+, indole+) Escherichia coli

58 21106-06530

E.coli 99.9 E.coli

(L+, indole+) Escherichia coli

59 21106-17541

E.coli 99.9 E.coli

(Vitek2) 99 Escherichia coli

60 21106-06712 E.coli 99.9

E.coli (L+, indole+)

Escherichia coli

N° NLAB Vitek MS % 2ème méthode % Confirmation Identification

61 11-29492

E. coli 99.9 E. coli Escherichia coli

62 09-09346

E. coli 97.9 E. coli Escherichia coli

63 08-03100

E. coli 92.4 E. coli Escherichia coli

64 06-10736

E. coli 99.5 E. coli Escherichia coli

65 04-14622

E. coli 92.9 E. coli Escherichia coli

66 03-03028

E. coli 99.9 E. coli Escherichia coli

67 03-04004

E. coli 99.8 E. coli Escherichia coli

68 21103-08991

E.coli 99.6 E.coli

(Vitek2) 99 Escherichia coli

69 21103-08666

E.coli 89.4 E.coli

(Vitek2) 93 Escherichia coli

70 21103-16247

E.coli 99.9 E.coli

(Vitek2) 98 Escherichia coli

71 21103-14349

E.coli 99.9 E.coli

(Vitek2) 99 Escherichia coli

72 21103-17503

E.coli 87 E.coli

(Vitek2) 98 Escherichia coli

73 21103-18288 E.coli 99.8

E.coli (L+, indole+)

Escherichia coli

74 21103-19794 E.coli 99.9

E.coli (Vitek2)

98 Escherichia coli

75 21103-20335 E.coli 99.9

E.coli (Vitek2)

96 Escherichia coli

La spectrométrie de masse MALDI-TOF et le diagnostic microbiologique

Cristina Cariello

Travail de diplôme 2011-2012 55

N° NLAB Vitek MS % 2ème méthode % Confirmation Identification

76 21103-27421

E.coli 99.9 E.coli

(L+, indole+) Escherichia coli

77 21103-27368

E.coli 99.9 E.coli

(Vitek2) 99 Escherichia coli

78 21103-25804

E.coli 98.1 E.coli

(Vitek2) 97 Escherichia coli

79 21103-31772

E.coli 93.9 E.coli

(L+, indole+) Escherichia coli

80 21103-31665

E.coli 65.2 E.coli

(L+, indole+) Escherichia coli

81 21103-31583

E.coli 99.9 E.coli

(Vitek2) 99 Escherichia coli

82 21103-31818

E.coli 78.1 E.coli

(Vitek2) 97 Escherichia coli

83 21103-33135

E.coli 99.9 E.coli

(L+, indole+) Escherichia coli

84 21103-35935

E.coli 99.9 E.coli

(L+, indole+) Escherichia coli

85 21103-35710

E.coli 83.7 E.coli

(L+, indole+) Escherichia coli

86 21104-04774

E.coli 99.9 E.coli

(Vitek2) 99 Escherichia coli

87 21104-05835

E.coli 99.9 E.coli

(Vitek2) 97 Escherichia coli

88 21104-03407

E.coli 99.9 E.coli

(Vitek2) 98 Escherichia coli

89 21104-06963

E.coli 99.9 E.coli

(Vitek2) 99 Escherichia coli

N° NLAB Vitek MS % 2ème méthode % Confirmation Identification

90 21103-41136

E.coli 99.9 E.coli

(L+, indole+) Escherichia coli

91 21103-41232

E.coli 99.9 E.coli

(Vitek2) 99 Escherichia coli

92 21104-02490

E.coli 99.9 E.coli

(Vitek2) 99 Escherichia coli

93 21104-04115

E.coli 99.9 E.coli

(Vitek2) 96 Escherichia coli

94 21104-04904

E.coli 99.9 E.coli

(Vitek2) 99 Escherichia coli

95 21104-03606

E.coli 99.9 E.coli

(L+, indole+) Escherichia coli

96 21104-05240

E.coli 99.9 E.coli

(L+, indole+) Escherichia coli

97 21104-23810

E.coli 99.9 E.coli

(L+, indole+) Escherichia coli

98 21104-23352

E.coli 99.9 E.coli

(Vitek2) 99 Escherichia coli

99 21104-22531

E.coli 99.9 E.coli

(Vitek2) 99 Escherichia coli

100 21104-22039

E.coli 99.9 E.coli

(Vitek2) 97 Escherichia coli

101 21104-2250

E.coli 99.9 E.coli

(L+, indole+) Escherichia coli

102 21104-20856

E.coli 99.9 E.coli

(Vitek2) 99 Escherichia coli

103 21104-20194

E.coli 99.9 E.coli

(L+, indole+) Escherichia coli

La spectrométrie de masse MALDI-TOF et le diagnostic microbiologique

Cristina Cariello

Travail de diplôme 2011-2012 56

N° NLAB Vitek MS % 2ème méthode % Confirmation Identification

104 21103-07051

E.coli 99.8 E.coli

(Vitek2) 99 Escherichia coli

105 21103-19702

E.coli 93.5 E.coli

(Vitek2) 99 Escherichia coli

106 21103-20987

E.coli 99.9 E.coli

(Vitek2) 98 Escherichia coli

107 21103-27362

E.coli 99.9 E.coli

(Vitek2) 99 Escherichia coli

108 21103-30144

E.coli 99.8 E.coli

(L+, indole+) Escherichia coli

109 21103-27818

E.coli 73.5 E.coli

(Vitek2) 99 Escherichia coli

110 21104-21160

E.coli 99.9 E.coli

(Vitek2) 99 Escherichia coli

111 21104-22191

E.coli 99.9 E.coli

(Vitek2) 95 Escherichia coli

112 21104-26324

E.coli 99.9 E.coli

(L+, indole+) Escherichia coli

113 21104-21033

E.coli 99.9 E.coli

(Vitek2) 95 Escherichia coli

114 21104-33373

E.coli 99.9 E.coli

(L+, indole+) Escherichia coli

115 21104-34193

E.coli 99.9 E.coli

(Vitek2) 99 Escherichia coli

116 21104-33930

E.coli 99.9 E.coli

(L+, indole+) Escherichia coli

117 21104-33794

E.coli 99.9 E.coli

(Vitek2) 99 Escherichia coli

N° NLAB Vitek MS % 2ème méthode % Confirmation Identification

118 21104-35423

E.coli 99.9 E.coli

(L+, indole+) Escherichia coli

119 21105-01790

E.coli 99.9 E.coli

(Vitek2) 99 Escherichia coli

120 21105-03384

E.coli 99.9 E.coli

(L+, indole+) Escherichia coli

121 21105-02620

E.coli 99.9 E.coli

(L+, indole+) Escherichia coli

122 21105-01436

E.coli 99.9 E.coli

(L+, indole+) Escherichia coli

123 21104-35550

E.coli 99.9 E.coli

(L+, indole+) Escherichia coli

124 21103-02620

Hafnia alvei 99.9 Hafnia alvei

(Vitek2) 96 Hafnia alvei

125 03-02620

Hafnia alvei 99.9 Hafnia alvei Hafnia alvei

126 21106-14327

Hafnia alvei 99.9 Hafnia alvei

(Vitek2) 95 Hafnia alvei

127 21104-15924

K.oxytica 99.9 K.oxytoca (Vitek2)

99 Klebsiella oxytoca

128 21104-22064

K.oxytica 99.9 K.oxytoca (Vitek2)

99 Klebsiella oxytoca

129 21104-22067

K.oxytica 99.9 K.oxytoca (Vitek2)

99 Klebsiella oxytoca

130 21104-07208

Klebs.oxytoca 99.9 Klebs.pneumo. Klebs.oxytoca

(Vitek2)

Klebsiella oxytoca

(indole +)

Klebsiella oxytoca

131 21104-04341

Klebs.oxytoca 99.9 Klebs.pneumo. Klebs.oxytoca

(Vitek2)

Klebsiella oxytoca

(indole +)

Klebsiella oxytoca

La spectrométrie de masse MALDI-TOF et le diagnostic microbiologique

Cristina Cariello

Travail de diplôme 2011-2012 57

N° NLAB Vitek MS % 2ème méthode % Confirmation Identification

132 21104-04344

Klebs.oxytoca 99.9 Klebs.pneumo. Klebs.oxytoca

(Vitek2)

Klebsiella oxytoca

(indole +)

Klebsiella oxytoca

133 21104-04320

Klebs.oxytoca 99.9 Klebs.oxytoca

(Vitek2) 100

Klebsiella oxytoca (Rapid

ID 32E)

Klebsiella oxytoca

134 21104-03486

Raoultella ornithinolytica

99.9 Raoultella planticola (Vitek2)

99 indole+ Klebsiella oxytoca

135 21106-14327

K.oxytoca 99.9 K.oxytoca (Vitek2)

95 Klebsiella oxytoca

136 21106-14429

K.oxytoca 99.9 K.oxytoca (Vitek2)

99 Klebsiella oxytoca

137 21103-20693

K. oxytoca 99.6 K. oxytoca

K. pneumoniae (Vitek2)

Klebsiella oxytoca

(Indole+)

Klebsiella oxytoca

138 21105-25228

K.pneumoniae 99.9 K.pneumoniae

(Vitek2) 99

Klebsiella pneumoniae

139 91103-06578

K. pneumoniae 74.3 K. pneumoniae

(Vitek2) 99

Klebsiella pneumoniae

140 21103-08386

K. pneumoniae 99.6 K. pneumoniae

(Vitek2) 99

Klebsiella pneumoniae

141 21103-26751

K. pneumoniae 98.8 K. pneumoniae

(Vitek2) 99

Klebsiella pneumoniae

142 21104-12058

K.pneumoniae 99.9 K.pneumoniae

K.oxytoca (Vitek2)

Klebsiella

pneumoniae (Indole-)

Klebsiella pneumoniae

143 21104-23046

K.pneumoniae 99.6 K.pneumoniae

(Vitek2) 99

Klebsiella pneumoniae

144 21104-15005

Kl.pneumoniae 99.9 Klebs.pneumo. Klebs.oxytoca

(Vitek2)

Klebsiella pneumoniae

(Indole-)

Klebsiella pneumoniae

145 21103-26496

Klebs.pneumoniae 99.4 K.pneumoniae

K.oxytoca (Vitek2)

Klebsiella

pneumoniae (indole-)

Klebsiella pneumoniae

N° NLAB Vitek MS % 2ème méthode % Confirmation Identification

146 21103-28490

Klebs.pneumoniae 92.2 Klebs.

pneumoniae (Vitek2)

99 Klebsiella

pneumoniae

147 21103-31887

Klebs.pneumoniae 99.9 Klebs.

pneumoniae (Vitek2)

99 Klebsiella

pneumoniae

148 21104-11272

Klebs.pneumoniae 99.9 Klebs.

pneumoniae (Vitek2)

99 Klebsiella

pneumoniae

149 21104-04774

Klebs.pneumoniae 99.9 Klebs.

pneumoniae (Vitek2)

97 Klebsiella

pneumoniae

150 21104-04774

Pas de résultat Klebs.

pneumoniae (Vitek2)

94 Klebsiella

pneumoniae

151 21104-03022

Klebs.pneumoniae 99.9 Klebs.

pneumoniae (Vitek2)

99 Klebsiella

pneumoniae

152 21104-02621

Klebs.pneumoniae 99.9 Klebs.

pneumoniae (Vitek2)

97 Klebsiella

pneumoniae

153 03-02731

Klebs. pneumoniae 95.6 Klebs.

pneumoniae

Klebsiella pneumoniae

154 10-31335

Klebs. pneumoniae 99.9 Klebs.

pneumoniae

Klebsiella pneumoniae

155 21103-31982

Klebs.pneumoniae 99.9 Klebs.

pneumoniae (Vitek2)

99 Klebsiella

pneumoniae

156 21105-36374

K.pneumoniae 99.9 Klebs.

pneumoniae (Vitek2)

99 Klebsiella

pneumoniae

157 21105-12867

K.pneumoniae 99.9 Klebs.

pneumoniae (Vitek2)

99 Klebsiella

pneumoniae

158 21105-21895

K.pneumoniae 99.9 Klebs.

pneumoniae (Vitek2)

99 Klebsiella

pneumoniae

159 21105-21410

K.pneumoniae 99.9 Klebs.

pneumoniae (Vitek2)

99 Klebsiella

pneumoniae

La spectrométrie de masse MALDI-TOF et le diagnostic microbiologique

Cristina Cariello

Travail de diplôme 2011-2012 58

N° NLAB Vitek MS % 2ème méthode % Confirmation Identification

160 21105-21405

K.pneumoniae 99.9 Klebs.

pneumoniae (Vitek2)

99 Klebsiella

pneumoniae

161 21105-03925

K.pneumoniae 99.9 Klebs.

pneumoniae (Vitek2)

99 Klebsiella

pneumoniae

162 21105-05337

K.pneumoniae 99.9 Klebs.

pneumoniae (Vitek2)

99 Klebsiella

pneumoniae

163 21106-15069

K.pneumoniae 99.9 Klebs.

pneumoniae (Vitek2)

99 Klebsiella

pneumoniae

164 21106-05004

Kluyvera ascorbata

99.9 Kluyvera ascorbata (Vitek2)

97 Kluyvera ascorbata

165 21103-11855

Morganella morganii

99.9 Morganella

morganii (Vitek2)

95 Morganella

morganii

166 21104-01835

Morganella morganii

99.9 Morganella

morganii (Vitek2)

95 Morganella

morganii

167 21104-32042

Morganella morganii

99.9 Morganella

morganii (Vitek2)

95 Morganella

morganii

168 21105-02214

Morganella morganii

99.9 Morganella

morganii (Vitek2)

95 Morganella

morganii

169 21106-00413

Morganella morganii

99.9 Morganella

morganii (Vitek2)

92 Morganella

morganii

170 21106-04777

Pantoea agglomerans

99.9 Pantoea

agglomerans (Vitek2)

95 Pantoea

agglomerans

171 21104-24874

P.mirabilis 99.9 P.mirabilis

(Vitek2) 99

Proteus mirabilis

172 21104-23915

P.mirabilis 99.9 P.mirabilis

(Vitek2) 99

Proteus mirabilis

173 21103-16295

P.mirabilis 99.9 P.mirabilis

(Vitek2) 99

Proteus mirabilis

N° NLAB Vitek MS % 2ème méthode % Confirmation Identification

174 21105-02013

P.mirabilis 99.9 P.mirabilis (indole-)

Proteus mirabilis

175 21105-00805

P.mirabilis 99.9 P.mirabilis (indole-)

Proteus mirabilis

176 21104-05674

Proteus mirabilis 99.9 P.mirabilis

(Vitek2) 99

Proteus mirabilis

177 21104-16302

Proteus mirabilis 99.9 P.mirabilis

(Vitek2) 98

Proteus mirabilis

178 21104-20137

Proteus mirabilis 99.9 P.mirabilis

(Vitek2) 99

Proteus mirabilis

179 02-05504

Proteus mirabilis 99.8 Salmonella sp P.mirabilis

(gélose SM2) Proteus mirabilis

180 21102-35230

Proteus mirabilis 99.9 P.mirabilis

(Vitek2) 99

Proteus mirabilis

181 21105-32663

P.mirabilis 99.9 P.mirabilis (indole-)

Proteus mirabilis

182 21105-12765

P.mirabilis 99.9 P.mirabilis (indole-)

Proteus mirabilis

183 21105-03309

P.mirabilis 99.9 P.mirabilis

(Vitek2) 99

Proteus mirabilis

184 21105-04211

P.mirabilis 99.9 P.mirabilis

(Vitek2) 99

Proteus mirabilis

185 21103-08699

Proteus penneri 99.9 Proteus penneri

(Vitek2) 100 Proteus penneri

186 21103-41313

P.stuartii 99.9 P.stuartii (Vitek2)

95 Proteus stuartii

187 21103-20832

P. vulgaris 99.9 P. vulgaris

(Vitek2) 99 Proteus vulgaris

La spectrométrie de masse MALDI-TOF et le diagnostic microbiologique

Cristina Cariello

Travail de diplôme 2011-2012 59

N° NLAB Vitek MS % 2ème méthode % Confirmation Identification

188 21104-23810

P.vulgaris P.penneri

99.9 P.vulgaris (indole+)

Proteus vulgaris

189 08-04907

Salmonella group 95.7 Salmonella enteritidis

Salmonella enteritidis

190 04-12246

Salmonella group 98.5 Salmonella enteritidis

Salmonella enteritidis

191 904-17336

Salmonella group 92.1 Salmonella enteritidis

Salmonella enteritidis

192 702-05825

Salmonella group 80.4 Salmonella enteritidis

Salmonella enteritidis

193 21103-25667

Salmonella group 62.7 Salmonella

group (Vitek2)

99 Salmonella sp

194 21104-33834

Salmonella group 99.9 Salmonella

group (Vitek2)

93 Salmonella sp

195 21105-12765

Salmonella group 99.9 Salmonella

group (Vitek2)

91 Salmonella sp

196 21105-39774

Salmonella group 99.9 Salmonella

group (Vitek2)

91 Salmonella sp

197 21106-02718

Salmonella group 99.9 Salmonella

group (Vitek2)

91 Salmonella sp

198 21106-14595

Salmonella group 99.9 Salmonella

group (Vitek2)

91 Salmonella sp

199 21104-13589

Salmonella sp 99.9 Acineto.sp

(Vitek2) 86

Salmonella (ID 32E)

Salmonella sp

200 02-01068

Salmonella group 99.9 Salmonella sp Salmonella sp

201 08-03096

Salmonella group 99.6 Salmonella sp Salmonella sp

N° NLAB Vitek MS % 2ème méthode % Confirmation Identification

202 05-12044

Salmonella group 99.2 Salmonella sp Salmonella sp

203 09-34795

Salmonella group 97.7 Salmonella sp Salmonella sp

204 21011-21611

Salmonella group 95.4 Salmonella sp Salmonella sp

205 06-04709

Salmonella group 99.9 Salmonella typhi Salmonella typhi

206 701-07683

Salmonella group 90.7 Salmonella

typhimorium

Salmonella typhimorium

207 21104-22014

S.liquefaciens 99.9 S.liquefaciens

group (Vitek2)

95 Serratia

liquefaciens group

208 21104-06738

S.marcescens 99.9 S.marcescens

(Vitek2) 99

Serratia marcescens

209 21103-40859

S.marcescens 99.9 S.marcescens

(Vitek2) 99

Serratia marcescens

210 21103-19676

S.marcescens 96.1 S.marcescens

(Vitek2) 99

Serratia marcescens

211 21104-25408

Serratia marcescens

99.9 Serratia

marcescens (Vitek2)

Serratia

marcescens

212 21101-33449

Serratia marcescens

99.9 Serratia

marcescens (Vitek2)

99 Serratia

marcescens

213 21105-38524

S.marcescens 99.9 S.marcescens

(Vitek2) 99

Serratia marcescens

214 21105-15256

S.marcescens 99.9 S.marcescens

(Vitek2) 99

Serratia marcescens

215 21105-06736

S.marcescens 99.9 S.marcescens

(Vitek2) 99

Serratia marcescens

La spectrométrie de masse MALDI-TOF et le diagnostic microbiologique

Cristina Cariello

Travail de diplôme 2011-2012 60

N° NLAB Vitek MS % 2ème méthode % Confirmation Identification

216 21105-08347

S.odorifera S.liquefac.

99.9 99.9

S.odorifera (Vitek2)

99 Serratia

odorifera

217 03-02632

Shewanella algae 99.9 Shewanella

putrefasciens 97

Shewanella putrefasciens

(ID 32 E)

Shewanella putrefasciens

218 21004-14616

E. coli 99.9 Shigella sp 99 Shigella group

(Vitek2) Shigella group

219 907-16192

E. coli 99.9 Shigella sp 99 Shigella group

(Vitek2) Shigella group

220 808-29763

E. coli 99.9 Shigella sp 99 Shigella group

(Vitek2) Shigella group

221 10-31325

E. coli 99.9 Shigella sonnei Shigella sonnei (Vitek2 + Rapid

ID 32 E) Shigella sonnei

222 911-14395

E. coli 99.8 Shigella sonnei 99 Shigella sonnei

(ID 32 E) Shigella sonnei

223 Souche BM

Vibrio. Para-haemolyticum

99.9 Vibrio. para-

haemolyticum (Vitek2)

Vibrio. para-

haemolyticum

224 21106-09629

Yersinia pseudo-tuberculosis

99.9

Yersinia pseudo-

tuberculosis (Vitek2)

99 Yersinia peudo-

tuberculosis

225 11-29481

Yersinia pseudo-tuberculosis

99.9 Yersinia sp Yersinia pseudo-

tuberculosis

226 21104-04138

Yokenella regensburgei

99.9 Yokenella

regensburgei (Vitek2)

99 Yokenella

regensburgei

10.1.11 Pseudomonas sp

N° NLAB Vitek MS % 2ème méthode % Confirmation Identification

1 21103-15433

Ps. aeruginosa 99.8 Ps.aeruginosa

Ps. putida (Vitek2)

Ps.aeruginosa

(42 °C) Ps. aeruginosa

2 21103-29134

Ps. aeruginosa 98.9 Ps.aeruginosa

(Vitek2) 96 Ps. aeruginosa

N° NLAB Vitek MS % 2ème méthode % Confirmation Identification

3 21103-5820

Pseudo. aeruginosa

99.5 Ps.aeruginosa (42°C, PAID)

Ps. aeruginosa

4 21103-09824

Pseudo. aeruginosa

99.9 Ps.aeruginosa (42°C, PAID)

Ps. aeruginosa

5 21103-30510

Pseudo. aeruginosa

99.9 Ps.aeruginosa (42°C, PAID)

Ps. aeruginosa

6 21103-31846

Pseudo. aeruginosa

99.9 Ps.aeruginosa (42°C, PAID)

Ps. aeruginosa

7 21103-36343

Pseudo. aeruginosa

99.8 Ps.aeruginosa (42°C, PAID)

Ps. aeruginosa

8 21103-41021

Pseudo. aeruginosa

99.9 Ps.aeruginosa (42°C, PAID)

Ps. aeruginosa

9 21104-01975

Pseudo. aeruginosa

99.8 Ps.aeruginosa (42°C, PAID)

Ps. aeruginosa

10 21107-16454

Pseudo. aeruginosa

99.9 Pseudo.

aeruginosa (Vitek2)

99 Ps. aeruginosa

11 21104-15863

Pseudo. aeruginosa

99.9 Pseudo.

aeruginosa (Vitek2)

99 Ps. aeruginosa

12 21104-25445

Pseudo. aeruginosa

99.9 Ps.aeruginosa (42°C, PAID)

Ps. aeruginosa

13 21104-25379

Pseudo. aeruginosa

99.9 Ps.aeruginosa (42°C, PAID)

Ps. aeruginosa

14 21104-02623

Pseudo. aeruginosa

99.8 Ps.aeruginosa (42°C, PAID)

Ps. aeruginosa

15 21104-35728

Pseudo. aeruginosa

99.9 Ps.aeruginosa (42°C, PAID)

Ps. aeruginosa

16 21105-01698

Pseudo. aeruginosa

99.9 Ps.aeruginosa (42°C, PAID)

Ps. aeruginosa

17 21104-23907

Pseudo. aeruginosa

99.9 Pseudo.

aeruginosa (Vitek2)

99 Ps. aeruginosa

La spectrométrie de masse MALDI-TOF et le diagnostic microbiologique

Cristina Cariello

Travail de diplôme 2011-2012 61

N° NLAB Vitek MS % 2ème méthode % Confirmation Identification

18 21104-26911

Pseudo. aeruginosa

99.9 Ps.aeruginosa (42°C, PAID)

Ps. aeruginosa

19 21104-33938

Pseudo. aeruginosa

99.9 Ps.aeruginosa (42°C, PAID)

Ps. aeruginosa

20 21104-20264

Pseudo. aeruginosa

99.9 Ps.aeruginosa (42°C, PAID)

Ps. aeruginosa

21 21104-35028

Pseudo. aeruginosa

99.9 Ps.aeruginosa (42°C, PAID)

Ps. aeruginosa

22 21009-00959

Pseudomonas aeruginosa

99.9 Pseudomonas

aeruginosa Ps. aeruginosa

23 21005-12048

Pseudomonas aeruginosa

99.9 Pseudomonas

aeruginosa Ps. aeruginosa

24 20908-04900

Pseudomonas aeruginosa

99.9 Pseudomonas

aeruginosa Ps. aeruginosa

25 20906-11059

Pseudomonas aeruginosa

99.9 Pseudomonas

aeruginosa Ps. aeruginosa

26 21105-37184.1

Pseudo. aeruginosa

99.9 Ps.aeruginosa (42°C, PAID)

Ps. aeruginosa

27 21105-37184.2

Pseudo. aeruginosa

99.9 Ps.aeruginosa (42°C, PAID)

Ps. aeruginosa

28 21105-29434

Pseudo. aeruginosa

99.9 Ps.aeruginosa (42°C, PAID)

Ps. aeruginosa

29 21105-29044

Pseudo. aeruginosa

99.9 Ps.aeruginosa (42°C, PAID)

Ps. aeruginosa

30 21106-02959

Pseudo. aeruginosa

99.9 Ps.aeruginosa (42°C, PAID)

Ps. aeruginosa

31 21105-13912.1

Pseudo. aeruginosa

99.9 Ps.aeruginosa (42°C, PAID)

Ps. aeruginosa

32 21105-13912.2

Pseudo. aeruginosa

99.9 Ps.aeruginosa (42°C, PAID)

Ps. aeruginosa

N° NLAB Vitek MS % 2ème méthode % Confirmation Identification

33 21105-30452

Pseudo. aeruginosa

99.9 Ps.aeruginosa (42°C, PAID)

Ps. aeruginosa

34 21105-18837

Pseudo. aeruginosa

99.9 Pseudo.

aeruginosa (Vitek2)

94 Ps. aeruginosa

35 21105-12729

Pseudo. aeruginosa

99.9 Ps.aeruginosa (42°C, PAID)

Ps. aeruginosa

36 21105-03589

Pseudo. aeruginosa

99.9 Ps.aeruginosa (42°C, PAID)

Ps. aeruginosa

37 21105-5773

Pseudo. aeruginosa

99.9 Ps.aeruginosa (42°C, PAID)

Ps. aeruginosa

38 21106-04234

Pseudo. aeruginosa

99.9 Ps.aeruginosa (42°C, PAID)

Ps. aeruginosa

39 21106-14512

Pseudo. aeruginosa

99.9 Ps.aeruginosa (42°C, PAID)

Ps. aeruginosa

40 21103-27521

Pseudo. aeruginosa

93.1

Ps.aeruginosa Ps.fluorescens

Ps.putida (Vitek2)

Ps. aeruginosa (42 °C, PAID)

Ps. aeruginosa

41 21104-22014

Ps.fluorescens 99.9 Ps.aeruginosa Ps.fluorescens

(Vitek2) Ps. fluorescens

42 21103-19833

Ps. putida 99 P.aeruginosa P. fluorescens

P.putida

PS.putida Ps.fluorescens (séquençage)

Pseudomonas sp

43 21103-24134

Pseudo. oryzihabitans

99.9 Pseudo.

oryzihabitans (Vitek2)

95 Ps.

oryzihabitans

44 20810-33696

Pseudomonas oryzihabitans

99.9 Pseudomonas oryzihabitans

Ps. oryzihabitans

45 20010-661598

Pseudomonas pseudo-alcaligenes

99.9 Pseudomonas

alcaligenes 56

Possibilité de Pseudo.

pseudoalcali-genes (API 20

NE)

Ps. pseudo-alcaligenes

46 20607-17824

Ps. putida Ps. stutzeri

99.9 84.9

Pseudomonas putida

60 Ps.putida

(API 20 NE) Ps. putida

La spectrométrie de masse MALDI-TOF et le diagnostic microbiologique

Cristina Cariello

Travail de diplôme 2011-2012 62

10.1.12 Autres non-fermentatifs

N° NLAB Vitek MS % 2ème méthode % Confirmation Identification

1 21104-25735

Acineto. johnsonii

99.9

Alc.faecalis Achromo sp Acineto. sp

(Vitek 2)

Oxydase nég. Acinetobacter

johnsonii

2 21009-09333

Acinetobacter baumanii

99.9 Acinetobacter

baumanii

Acinetobacter baumanii

3 21105-09681

Acineto.baumannii complex

99.9 Acineto.baumannii complex (Vitek2)

99 Acinetobacter

baumannii complex

4 21005-29174

Acinetobacter lwoffii

99.9 Acinetobacter

lwoffii

Acinetobacter lwoffii

5 21103-27461

Acineto. radioresistens

Acineto lwoffi

(Vitek2) 99

Acineto. radioresistens

(API NE)

Acinetobacter radioresistens

6 21103-05980

Pas de résultat Acineto.

haemolyticus/ lwoffi (Vitek2)

Acinetobacter

sp

7 21105-29707

Acineto.lwoffi 99.9 Acineto sp Acinetobacter

sp

8 21104-15717

Alcaligenes faecalis

99.9 Alcaligenes

faecalis (Vitek2) 99

Alcaligenes faecalis

9 21009-09350

Bordetella bronchiseptica

99.9 Bordetella

bronchiseptica

Bordetella bronchiseptica

10 21105-14601

Bordetella bronchiseptica

99.9 Bordetella

Bronchiseptica (Vitek2)

99 Bordetella

bronchiseptica

11 21001-12265

Burk. cepacia Burk.

vietnamiensis 99.9

Burkholderia cepacia

Burkholderia

cepacia

12 20905-35019

Burk. cepacia Burk.

vietnamiensis Burk. gladioli

95.9 99.9 70.3

Burkholderia cepacia

Burkholderia

cepacia

N° NLAB Vitek MS % 2ème méthode % Confirmation Identification

13 20806-05906

Burk. cepacia Burk.

vietnamiensis Burk. stabilis

99.9 Burkholderia

cepacia

Burkholderia cepacia

14 20805-26803

Burk. cepacia Burk.

vietnamiensis

99.9 99.7

Burkholderia cepacia

Burkholderia

cepacia

15 20607-17737

Burk. cepacia Burk.

vietnamiensis 99.9

Burkholderia cepacia

Burkholderia

cepacia

16 20607-14520

Burk. cepacia Burk.

vietnamiensis

98.5 78.1

Burkholderia cepacia

Burkholderia

cepacia

17 20607-21140

Burk. cepacia Burk.

vietnamiensis

99.9 92.8

Burkholderia cepacia

Burkholderia

cepacia

18 20511-00391

Burkholderia multivorans

99.9 Burkholderia

cepacia (Vitek 2)

100 Burkholderia

cepacia (API 20 NE)

Burkholderia cepacia

19 21003-04015

Rhizobium radiobacter

99.9 Rhizobium radiobacter

Rhizobium radiobacter

20 21102-01063

Stenotrophomonas maltophilia

99.9 Stenotropho-

monas maltophilia

Stenotropho-monas

maltophilia

21 21106-05878

S.maltophilia 99.9 S. maltophilia

(Vitek2) 95

Stenotropho-monas

maltophilia

22 21106-14457

S. maltophilia 99.9 S. maltophilia

(Vitek2) 91

Stenotropho-monas

maltophilia

La spectrométrie de masse MALDI-TOF et le diagnostic microbiologique

Cristina Cariello

Travail de diplôme 2011-2012 63

10.1.13 Germes difficiles

N° NLAB Vitek MS % 2ème méthode % Confirmation Identification

1 Souche BM

Bergeyella zoohelcum

99.9 Bergeyella zoohelcum

Bergeyella zoohelcum

2 Souche BM

Capnocytophaga sputigena

99.9 Capnocyto-

phaga sp

Capnocyto-phaga sp

3 Souche BM

Cardiobact. hominis

99.9 Cardiobact.

hominis

Cardiobacter hominis

4 Souche BM

Eikenella corrodens

99.9 Eikenella corrodens

Eikenella corrodens

5 Souche BM

Eikenella corrodens

99.9 Eikenella corrodens

Eikenella corrodens

6 21003-04013

Kingella denitrificans

99.9 Kingella

denitrificans

Kingella denitrificans

7 20706-06178

Kingella denitrificans

99.9 Kingella

denitrificans

Kingella denitrificans

8 2001-04cl

Pas de résultat (pas dans la base

de données) Legionella anisa Legionella anisa

9 2001-09cl

Pas de résultat (pas dans la base

de données) Legionella anisa Legionella anisa

10 Aigle 1

Pas de résultat Legionella autre

que pneumophila

Legionella sp

11 Aigle 2

Pas de résultat Legionella autre

que pneumophila

Legionella sp

12 Aigle 3

Pas de résultat Legionella autre

que pneumophila

Legionella sp

13 Aigle 4

Pas de résultat Legionella autre

que pneumophila

Legionella sp

N° NLAB Vitek MS % 2ème méthode % Confirmation Identification

14 Aigle 5

Pas de résultat Legionella autre

que pneumophila

L Legionella sp

15 St-Amé 4

Pas de résultat Legionella autre

que pneumophila

Legionella sp

16 Martigny 1

Legionella pneumophila

99.9 Legionella

pneumophila 2-14

Legionella

pneumophila 2-14

17 Martigny 2

Legionella pneumophila

99.9 Legionella

pneumophila 2-14

Legionella

pneumophila 2-14

18 Martigny 3

Legionella pneumophila

99.9 Legionella

pneumophila 2-14

Legionella

pneumophila 2-14

19 St-Amé 1

Legionella pneumophila

99.9 Legionella

pneumophila 2-14

Legionella

pneumophila 2-14

20 St-Amé2

Legionella pneumophila

99.9 Legionella

pneumophila 2-14

Legionella

pneumophila 2-14

21 St-Amé 3

Legionella pneumophila

99.9 Legionella

pneumophila 2-14

Legionella

pneumophila 2-14

22 21101-08514

Legionella pneumophilia

99.9 Legionella Legionella

pneumophilia

23 2002-1

Legionella pneumophila

99.9 Legionella

pneumophila gr. 1

Legionella

pneumophila gr. 1

24 2001-11.1s

Legionella pneumophila

99.9 Legionella

pneumophila gr. 10

Legionella

pneumophila gr. 10

25 2001-1s

Legionella pneumophila

99.9 Legionella

pneumophila gr. 10

Legionella

pneumophila gr. 10

26 2001-06s

Legionella pneumophila

99.9 Legionella

pneumophila gr. 4

Legionella

pneumophila gr. 4

27 2001-20m

Legionella pneumophila

99.9 Legionella

pneumophila gr. 8

Legionella

pneumophila gr. 8

La spectrométrie de masse MALDI-TOF et le diagnostic microbiologique

Cristina Cariello

Travail de diplôme 2011-2012 64

N° NLAB Vitek MS % 2ème méthode % Confirmation Identification

28 2001-19s

Pas de résultat (pas dans la base

de données)

Legionella taurinensis

Legionella taurinensis

29 2001-11.2s

Pas de résultat (pas dans la base

de données)

Legionella taurinensis

Legionella taurinensis

30 20704-32392

Pas de résultat (pas dans la base

de données)

Pasteurella bettyae

Pasteurella

bettyae

31 21105-03415

P.multocida H.parahaemolyticus

99.9 96.6

P.multocida (Vitek2)

97 Pasteurella multocida

32 21104-38075

P.multocida 99.9 P.multocida

(Vitek2) 98

Pasteurella multocida

33 21103-06564

Pasteurella multocida

99.9 Pasteurella multocida (Vitek2)

93 Pasteurella multocida

34 Souche BM

Pasteurella multocida

99.9 Pasteurella multocida

Pasteurella multocida

35 21009-00948

Pasteurella multocida

99.9 Pasteurella multocida

Pasteurella multocida

36 20809-05235

Pasteurella multocida

99.9 Pasteurella multocida

Pasteurella multocida

37 21006-27254

Pasteurella multocida

99.9 Pasteurella multocida

Pasteurella multocida

38 20708-30532

Pasteurella multocida

99.9 Pasteurella multocida

Pasteurella multocida

39 20708-18634

Pasteurella multocida

99.9 Pasteurella multocida

Pasteurella multocida

10.1.14 Haemophilus sp

N° NLAB Vitek MS % 2ème méthode % Confirmation Identification

1 20409-06843

Aggreg. aphrophilus

Aggreg.actino-mycetemcomitans

99.9 94.3

Pasteurella canis (Vitek2)

91.0

API NH oxy+/ cat- /pas

de dép. en facteurs en suculture

Haemophilus aphrophilus6

2 20410-04426

Aggregatibacter aphrophilus

99.9 Haemophilus

parainfluenzae (facteurs XV)

94

API NH /oxy+ / cat- / XV+ / V+

dép. en facteurs en subculture

Haemophilus paraphrophilus5

3 97-726126

Aggregatibacter aphrophilus

99.9 Haemophilus aphrophilus

94 API NH /cat -

/oxyd +/dép. en fact.V

Haemophilus paraphrophilus5

4 21103-06317

H. influenzae 80.7 H. influenzae (facteurs XV+)

Haemophilus

influenzae

5 21103-19629

H. influenzae 97.7 Past.canis

Actino.ureae (Vitek2)

Facteurs XV+ Haemophilus

influenzae

6 21103-30817

H. influenzae 99.4 H.influenzae

(facteurs XV+)

Haemophilus influenzae

7 21103-30483

H. influenzae 99.9 H.influenzae

(facteurs XV+)

Haemophilus influenzae

8 21103-35931

H. influenzae 99.9 H.influenzae

(facteurs XV+)

Haemophilus influenzae

9 21103-36792

Pas de résultat H.influenzae

(facteurs XV+)

Haemophilus influenzae

10 21104-01968

H. influenzae 99.9 H.influenzae

(facteurs XV+)

Haemophilus influenzae

11 21104-03692

H. influenzae 99.9 H.influenzae

(facteurs XV+)

Haemophilus influenzae

12 21104-01977

H. influenzae 99.9 H.influenzae

(facteurs XV+)

Haemophilus influenzae

6 H.aphrophilus et H.parapharophilus forment une seule espèce depuis 2006: Aggregatibacter

aphrophilus

La spectrométrie de masse MALDI-TOF et le diagnostic microbiologique

Cristina Cariello

Travail de diplôme 2011-2012 65

N° NLAB Vitek MS % 2ème méthode % Confirmation Identification

13 21104-01980 H. influenzae 99.9

H.influenzae (facteurs XV+)

Haemophilus

influenzae

14 21140-14270

H.influenzae 99.9 H.influenzae

(facteurs XV+)

Haemophilus influenzae

15 21104-37193

H.influenzae 99.9 H.influenzae

(facteurs XV+)

Haemophilus influenzae

16 21104-27849

H.influenzae 99.9 H.influenzae

(facteurs XV+)

Haemophilus influenzae

17 21011-29488

Haemophilus influenzae

99.9 Haemophilus

influenzae

Haemophilus influenzae

18 21010-31314

Haemophilus influenzae

99.9 Haemophilus

influenzae

Haemophilus influenzae

19 21003-03016

Haemophilus influenzae

99.9 Haemophilus

influenzae

Haemophilus influenzae

20 20911-29374

Haemophilus influenzae

99.9 Haemophilus

influenzae

Haemophilus influenzae

21 20911-29361

Haemophilus influenzae

99.9 Haemophilus

influenzae

Haemophilus influenzae

22 20907-16207

Haemophilus influenzae

99.9 Haemophilus

influenzae

Haemophilus influenzae

23 20809-05238

Haemophilus influenzae

99.9 Haemophilus

influenzae

Haemophilus influenzae

24 20711-21440

Haemophilus influenzae

99.9 Haemophilus

influenzae

Haemophilus influenzae

25 21105-21086 H.influenzae 99.9

H.influenzae (facteurs XV+)

Haemophilus

influenzae

26 21105-16058

H.influenzae 99.9 H.influenzae

(facteurs XV+)

Haemophilus influenzae

27 21105-03925

H.influenzae 99.9 H.influenzae

(facteurs XV+)

Haemophilus influenzae

N° NLAB Vitek MS % 2ème méthode % Confirmation Identification

28 21105-23517

H.influenzae 99.9 H.influenzae

(facteurs XV+)

Haemophilus influenzae

29 21106-23690

Pas de résultat H.influenzae

(facteurs XV+)

Haemophilus influenzae

30 21106-05874

H.influenzae 99.9 H.influenzae

(facteurs XV+)

Haemophilus influenzae

31 21105-31238

H.influenzae 99.9 H.influenzae

(facteurs XV+)

Haemophilus influenzae

32 21105-32329

H.influenzae 99.9 H.influenzae

(facteurs XV+)

Haemophilus influenzae

33 21106-16178 H.influenzae 99.9

H.influenzae (facteurs XV+)

Haemophilus

influenzae

34 21106-06370 H.influenzae 99.9

H.influenzae (facteurs XV+)

Haemophilus

influenzae

35 Souche BM

Haemophilus parahaemolyticus

99.9 Haemophilus

para-haemolyticus

Haemophilus

para-haemolyticus

36 Souche BM

Haemophilus parahaemolyticus

99.9 Haemophilus

para-haemolyticus

Haemophilus

para-haemolyticus

37 21104-13870

H. parainfluenzae Haemophilus

parainfluenzae (facteur V+)

Haemophilus

parainfluenzae

38 21104-14722

H. parainfluenzae Haemophilus

parainfluenzae (facteur V+)

Haemophilus

parainfluenzae

39 21104-25436

H.parainfluenzae 99 Haemophilus

parainfluenzae (facteur V+)

Haemophilus

parainfluenzae

40 21104-25425

H. parainfluenzae 99.9 Haemophilus

parainfluenzae (facteur V+)

Haemophilus

parainfluenzae

41 21104-22303

Haemophilus parainfluenzae

99.9 Haemophilus

parainfluenzae (API NH)

Haemophilus

parainfluenzae

42 20302-04837

Haemophilus parainfluenzae

99.9 Haemophilus

parainfluenzae

Haemophilus parainfluenzae

La spectrométrie de masse MALDI-TOF et le diagnostic microbiologique

Cristina Cariello

Travail de diplôme 2011-2012 66

N° NLAB Vitek MS % 2ème méthode % Confirmation Identification

43 20111-00731

Haemophilus parainfluenzae

99.9 Haemophilus

parainfluenzae

Haemophilus parainfluenzae

44 99-10464933

Haemophilus parainfluenzae

99.9 Haemophilus

parainfluenzae

Haemophilus parainfluenzae

45 97-742718

Haemophilus parainfluenzae

99.9 Haemophilus

parainfluenzae

Haemophilus parainfluenzae

46 99-10642069

H. influenzea H. haemolyticus

99.9 99.9

Haemophilus parainfluenzae (facteurs XV)

71 API NH Haemophilus

parainfluenzae

47 21105-14128

H.parainfluenzae 99.9 Haemophilus

parainfluenzae (facteur V+)

Haemophilus

parainfluenzae

48 21105-18140

H.parainfluenzae 99.9 Haemophilus

parainfluenzae (facteur V+)

Haemophilus

parainfluenzae

49 21105-04961

H.parainfluenzae 99.9 Haemophilus

parainfluenzae (facteur V+)

Haemophilus

parainfluenzae

10.1.15 Campylobacter sp

N° NLAB Vitek MS % 2ème méthode % Confirmation Identification

1 20603-12337

Campylobacter coli 99.9 Campylobacter

coli

Campylobacter coli

2 21105-38751

Campylo.coli Campylo.jejuni

99.9 99.9

Campylo.coli (Gram, Hipp-)

Campylobacter

coli

3 21105-08915

Campylobacter coli

99.9 Campylo.coli (Gram, Hipp-)

Campylobacter

coli

4 21105-24686

Campylobacter coli

99.9 Campylo.coli (Gram, Hipp-)

Campylobacter

coli

5 21105-01455

Campylobacter coli

99.9 Campylo.coli (Gram, Hipp-)

Campylobacter

coli

6 21105-24090

Campylobacter coli

99.9 Campylo.coli (Gram, Hipp-)

Campylobacter

coli

N° NLAB Vitek MS % 2ème méthode % Confirmation Identification

7 21105-02076

Campylobacter fetus

99.9 Campylo.fetus (séquençage)

Campylobacter

fetus

8 21103-30841

Campylobacter jejuni

99.9 Campylo. jejuni (Gram, Hipp+)

Campylobacter

jejuni

9 21103-30126

Campylobacter jejuni

99.9 Campylo. jejuni (Gram, Hipp+)

Campylobacter

jejuni

10 21104-02581

Campylobacter jejuni

99.9 Campylo. jejuni (Gram, Hipp+)

Campylobacter

jejuni

11 21104-14464

Campylobacter jejuni

99.9 Campylo. jejuni (Gram, Hipp+)

Campylobacter

jejuni

12 21104-12038

Campylobacter jejuni

99.9 Campylo. jejuni (Gram, Hipp+)

Campylobacter

jejuni

13 21104-20180

Campylobacter jejuni

99.9 Campylo. jejuni (Gram, Hipp+)

Campylobacter

jejuni

14 21105-00600

Campylobacter jejuni

99.9 Campylo. jejuni (Gram, Hipp+)

Campylobacter

jejuni

15 21103-02718

Campylobacter jejuni

99.9 Campylobacter

jejuni

Campylobacter jejuni

16 21011-12298

Campylobacter jejuni

99.9 Campylobacter

jejuni

Campylobacter jejuni

17 20707-02736

Campylobacter jejuni

99.9 Campylobacter

jejuni

Campylobacter jejuni

18 20607-03216

Campylobacter jejuni

99.9 Campylobacter

jejuni

Campylobacter jejuni

19 20511-07635

Campylobacter jejuni

99.9 Campylobacter

jejuni

Campylobacter jejuni

20 21105-04872

Campylobacter jejuni

99.9 Campylo. jejuni (Gram, Hipp+)

Campylobacter

jejuni

La spectrométrie de masse MALDI-TOF et le diagnostic microbiologique

Cristina Cariello

Travail de diplôme 2011-2012 67

10.1.16 Anaérobies

N° NLAB Vitek MS % 2ème méthode % Confirmation Identification

1 21104-10349

Pas de résultat (pas dans la base de

données)

Actino. naeslundii

(Vitek2)

Actinomyces naeslundii

2 21102-36028

Pas de résultat (pas dans la base de

données)

Pas de résultat (Vitek2)

56 Actino.meyeri (Rapid ID 32 A)

Actinomyces meyeri

3 21103-20038

Pas de résultat (pas dans la base de

données)

Actinomyces meyeri (Vitek2)

89 Actinomyces

meyeri

4 21106-04074

Pas de résultat (pas dans la base de

données)

Actinomyces meyeri (Vitek2)

99 Actinomyces

meyeri

5 21105-23539

Pas de résultat (pas dans la base de

données)

Actinomyces meyeri (Vitek2)

89 Actinomyces

meyeri

6 21103-15499

Pas de résultat (pas dans la base de

données)

Actinomyces naeslundii

(Vitek2) 95

Actinomyces naeslundii

7 21103-02628

Pas de résultat (pas dans la base de

données)

Actino.neuii (Vitek2)

100 Actinomyces

neuii

8 21105-08239

Pas de résultat (pas dans la base de

données) Actino sp ?

Actino.neuii (séquençage)

Actinomyces neuii

9 21009-35437

Bacteroides fragilis 99.9 Bacteroides

fragilis

Bacteroides fragilis

10 20909-02440

Bacteroides fragilis 99.9 Bacteroides

fragilis

Bacteroides fragilis

11 20906-11079

Bacteroides fragilis 99.9 Bacteroides

fragilis

Bacteroides fragilis

12 20603-07984

Bacteroides fragilis 99.9 Bacteroides

fragilis

Bacteroides fragilis

13 20803-03666

Bacteroides fragilis 99.9 Bacteroides

fragilis

Bacteroides fragilis

14 20610-23324

Bacteroides fragilis 99.9 Bacteroides

fragilis

Bacteroides fragilis

N° NLAB Vitek MS % 2ème méthode % Confirmation Identification

15 21010-01100

Bacteroides fragilis 99.9 Bacteroides capillosus

91 Bacteroides

fragilis (Vitek2)

Bacteroides fragilis

16 21101-28458

Bacteroides fragilis 99.9 Bacteroides sp 98 Bacteroides

fragilis (Vitek2)

Bacteroides fragilis

17 21105-35644

Bact.fragilis 99 Bact. stercoris

(Vitek2) 88

Stercoris = groupe fragilis

Bacteroides fragilis

18 21105-36370

Bact.fragilis 99.9 Bact.fragilis Bacteroides

fragilis

19 21103-06572

Bacteroïdes fragilis 99.9 Prevotella oralis

(Vitek2) 93

Bacteroïdes fragilis

(Rapid ID 32 A)

Bacteroïdes fragilis

20 21103-05694

Bacteroïdes fragilis 90.1 Bacteroïdes

fragilis (Vitek2)

96 Bacteroïdes

fragilis

21 21103-10460

Bacteroïdes fragilis 99.9 Bacteroïdes

fragilis (Vitek2)

98 Bacteroïdes

fragilis

22 21103-10444

Bacteroïdes fragilis 99.9 Bacteroïdes

fragilis (Vitek2)

99 Bacteroïdes

fragilis

23 21103-09644

Bacteroïdes fragilis 99.9 Prevotella oralis

(Vitek) 93

Bacteroïdes fragilis

(Rapid ID 32A)

Bacteroïdes fragilis

24 21103-09644

Bacteroïdes fragilis 99.5 Bacteroïdes

fragilis (Vitek2)

95 Bacteroïdes

fragilis

25 21104-20851

Bacteroïdes fragilis 99.9 Bacteroïdes

fragilis (Vitek2)

98 Bacteroïdes

fragilis

26 21106-04821

Bact.fragilis 99.9 Bact.fragilis / thetaiotao.

(Vitek2)

Bacteroïdes fragilis

27 21104-18806

Bacteroïdes fragilis 99.9 Bacteroïdes

stercoris (Vitek2)

95 B.stercoris =

groupe fragilis Bacteroïdes

fragilis

28 21105-37694 Bact.fragilis 99.9 Bact.fragilis

Bacteroïdes fragilis

29 21104-22158 Bactéroïdes fragilis 99.9

Bactéroïdes fragilis (Vitek2)

95 Bactéroïdes

fragilis

La spectrométrie de masse MALDI-TOF et le diagnostic microbiologique

Cristina Cariello

Travail de diplôme 2011-2012 68

N° NLAB Vitek MS % 2ème méthode % Confirmation Identification

30 21103-15700

Bact.thetaiotaomicron 99.9 Bact.

thetaiotao-micron

93 Vitek2 Bacteroides thetaiotao-

micron

31 21003-35694

Bacteroides thetaiotaomicron

99.9 Bacteroides thetaiotao-

micron

Bacteroides thetaiotao-

micron

32 20911-09573

Bacteroides thetaiotaomicron

99.9 Bacteroides thetaiotao-

micron

Bacteroides thetaiotao-

micron

33 21105-37201

Bact.thetaitaomicron 99.9 Bact.

thetaitaomicron (Vitek2)

99 Bacteroides thetaitao-

micron

34 21105-37202

Bact.thetaitaomicron 99.9 Bact.

thetaitaomicron (Vitek2)

97 Bacteroides thetaitao-

micron

35 21105-19621

Bac.vulgatus 99.9 Pas de résultat

(Vitek2)

Bac.vulgatus (Rapid ID 32A)

Bacteroides vulgatus

36 21105-21649

Bifidobacterium sp 99.9 Bifidobacterium

sp (Vitek2)

91 Bifidobact. sp

37 20809-26092

Clostridium difficile 99.9 Clostridium

difficile

Clostridium difficile

38 20811-20213

Clostridium difficile 99.9 Clostridium

difficile 99

Clostridium difficile (Vitek2)

Clostridium difficile

39 21104-12736

Clostridium perfringens

99.9 Clostridium perfringens

(Vitek2) 94

Clostridium perfringens

40 21008-03088

Clostridium perfringens

99.9 Clostridium perfringens

Clostridium perfringens

41 20906-11084

Clostridium perfringens

99.9 Clostridium perfringens

Clostridium perfringens

42 21105-27053

Clos.perfringens 99.9 Pas de résultat

(Vitek2)

Clostridium perfringens

(Camp Test+)

Clostridium perfringens

43 21105-31077

Clos.perfringens 99.9 Clos.

perfringens (Camp Test+)

Clostridium perfringens

N° NLAB Vitek MS % 2ème méthode % Confirmation Identification

44 21105-22956

Clos.perfringens 99.9 Clos.

perfringens (Vitek2)

98 Clostridium perfringens

45 21012-33656

Clostridium ramosum 99.9 Clostridium ramosum

Clostridium ramosum

46 21010-12827

Clostridium ramosum 99.9 Clostridium ramosum

Clostridium ramosum

47 21104-208887

Clostridium sordelii 99.9 Actino.meyeri

(Vitek2) 85

Clost.sordelii (rapid ID32A)

Clostridium sordelii

48 21103-39856

Clostridium tertium 99 Francisella

tularensis !! (Vitek2)

96 Clostridium sp

(Rapid ID ANA II) Clostridium sp

49 21103-10444

E.lenta 99.9 Eggerthella

lenta (Vitek2)

99 Eggerthella

lenta

50 21104-29152

E.lenta 99.9 Eggerthella

lenta (Vitek2)

99 Eggerthella

lenta

51 21103-16203

Egg.lenta 99.9 Eggerthella

lenta (Vitek2)

99 Eggerthella

lenta

52 21103-31901

Eggerthella lenta 99.9 Eggerthella

lenta (Vitek2)

99 Eggerthella

lenta

53 21005-14714

Eggerthella lenta 99.9 Bacteroides ureolyticus

100 Eggerthella lenta

(RapID ANA II) Eggerthella lenta

54 21103-31901

Eggerthella lenta 99.9 Eggerthella lenta Eggerthella lenta

55 21103-16203

Eggerthella lenta 99.9 Eggerthella lenta Eggerthella lenta

56 21103-11938

Finegoldia magna 97.7 Finegoldia

magna (Vitek2)

99 Finegoldia

magna

57 21103-19440

Finegoldia magna 99.7 Finegoldia

magna (Vitek2)

99 Finegoldia

magna

La spectrométrie de masse MALDI-TOF et le diagnostic microbiologique

Cristina Cariello

Travail de diplôme 2011-2012 69

N° NLAB Vitek MS % 2ème méthode % Confirmation Identification

58 21103-38649

Finegoldia magna 99.9 Finegoldia

magna (Vitek2)

99 Finegoldia

magna

59 21103-01023

Finegoldia magna 99.9 Finegoldia

magna (Gram)

Finegoldia magna

60 21104-36717

Finegoldia magna 99.9 Finegoldia

magna (Vitek2)

99 Finegoldia

magna

61 21105-08974

Fingegoldia magna 99.9 Pepto.sp (Gram) Fingegoldia

magna

62 21011-37453

Pas de résultats Fusobacterium

mortiferum

Fusobacterium mortiferum

63 21103-06723

Fusobacterium necrophorum

99.9 Fusobacterium necrophorum

(Vitek2) 99

Fusobacterium necrophorum

64 207-30383

Plusieurs résultats autres

Fusobacterium necrophorum

Fusobacterium necrophorum

65 21102-34188

Fusobacterium necrophorum

99.9 Fusobacterium necrophorum

Fusobacterium necrophorum

66 21106-03393

Fuso.necrophorum 99.9 Fuso.

necrophorum (Vitek2)

Fusobacterium necrophorum

67 21106-16937

Fusobacterium necrophorum

99.9 Fusobacterium necrophorum

(Vitek2) 99

Fusobacterium necrophorum

68 21106-03393

Fuso.necrophorum 99.9 Fuso.

necrophorum (Vitek2)

Fusobacterium necrophorum

69 20906-11083

Fusobacterium nucleatum

99.8 Fusobacterium

nucleatum

Fusobacterium nucleatum

70 21102-22497

Fusobact. nucleatum Bacillus thuringensis

Bacillus mycoides Bacillus cereus

99.9 71.2 71.2 71.2

Fusobacterium nucleatum

Fusobacterium nucleatum

71 21010-27556

Fusobacterium nucleatum

99.9 Fusobacterium

nucleatum

Fusobacterium nucleatum

N° NLAB Vitek MS % 2ème méthode % Confirmation Identification

72 21105-06736

Pas de résultat Fusobacterium

nucleatum (Vitek2)

99 Fusobacterium

nucleatum

73 21106-10078

Fuso.nucleatum 99.9 Fuso.sp (Gram)

Fusobacterium

nucleatum

74 21106-12803

Fuso.nucleatum 99.9 Fuso.sp (Gram)

Fusobacterium

nucleatum

75 21103-18913

Fusobacterium nucleatum

96.1 Fusobacterium

nucleatum (Vitek2)

Fusobacterium

nucleatum

76 20912-12385

Parabacterium distanosis

99.9 Parabacterium

distanosis 99

Parabact. distanosis (Vitek2)

Parabacterium distanosis

77 21102-10563

Parvimonas micra 99.9 Parvimonas

micra

Parvimonas micra

78 21102-16938

Parvimonas micra 99.9 Parvimonas

micra

Parvimonas micra

79 21105-13783

Parvimonas micra 99.9 Parvimonas

micra (Vitek2) 91

Parvimonas micra

80 21106-08204

Parvimonas micra 99.9 Parvimonas

micra (Vitek2) 99

Parvimonas micra

81 21104-21662

Parvimonas micra 99.9 Parv.micra Fin.magna

(Vitek2)

Parvimonas micra

82 21104-35095

Parvimonas micra 99.9 Parvimonas

micra (Vitek2)

98 Parvimonas

micra

83 21103-11938

Peptinophilus asaccharolyticus

99

Fin.magna Peptinophilus

asaccharolyticus (Vitek2)

Peptinophilus

asaccharolyticus

84 21106-04107

Peptinophilus asacch. 99.9 Pepto.sp (Gram)

Peptinophilus

asaccharo-lyticus

85 20906-11074

Peptostreptococcus anaerobius

99.9 Pepto-

streptococcus

Pepto-streptococcus

La spectrométrie de masse MALDI-TOF et le diagnostic microbiologique

Cristina Cariello

Travail de diplôme 2011-2012 70

N° NLAB Vitek MS % 2ème méthode % Confirmation Identification

86 21105-12642

Pepto.anaerobius 99.9 Pepto.

anaerobius (Vitek2)

99 Peptos-

treptococcus anaerobius

87 21004-21350

Pas de résultats 99.9 Porphyromonas asaccharolytica

Porphyromonas asaccharolytica

88 21103-15687

Prevotella bivia 99.9 Prevotella bivia

(Vitek2) 99 Prevotella bivia

89 21103-15320

Prevotella bivia 99.9 Prevotella bivia (Rapid ID 32 A)

Prevotella bivia

90 21105-14422 P.bivia 99.9

P.bivia (connu)

Prevotella bivia

91 21105-12082 P.bivia 99.9

P.bivia (Vitek2)

Prevotella bivia

92 21105-12154 P.bivia 99.9 P.bivia Prevotella bivia

93 21106-03393

Prev.bivia 99.9 Prev.bivia (Vitek2)

99 Prevotella bivia

94 21105-00504

P.denticola 99.9 P.oralis

P.melanino (Vitek2)

Prevotella denticola

95 21103-08702

Prevotella bivia 99.9 Prevotella

melaninogenica (Vitek2)

94 Pigment noir Prevotella melanino-

genica

96 21103-12548

P.acnes 99.8 P. acnes (Vitek2)

95 Propionibact.

acnes

97 21003-13039 P.acnes 99.9 P.acnes

Propionibact. acnes

98 21103-05396

Pas de résultat Propionibact.

acnes (Vitek2)

97 Propionibact.

acnes

99 21102-37288

Propionibacterium acnes

98.8 Propionibact.

acnes (Vitek2)

99 Propionibact.

acnes

100 21103-01372

Propionibacterium acnes

91.2 Propionibact.

acnes (Vitek2)

97 Propionibact.

acnes

N° NLAB Vitek MS % 2ème méthode % Confirmation Identification

101 21103-35370

Propionibact.acnes 99.9 Propionibact.

acnes (Vitek2)

92 Propionibact.

acnes

102 21103-32054

Propionibact.acnes 99.9 Propionibact.

acnes (Vitek2)

97 Propionibact.

acnes

103 21104-28243

Propionibact.acnes 99.9 Propionibact.sp

(Gram) Propionibact. sp

104 21009-35433

Propionibacterium acnes

Propionibact.

acnes

Propionibact. acnes

105 20906-11081

Propionibacterium acnes

99.9 Propionibact.

acnes

Propionibact. acnes

106 21104-25140

Propionibact.acnes 99.9 Propionibact.

acnes (Vitek2) 92

Propionibact. acnes

107 21104-28615

Propionibact.acnes 99.9 Propionibact.

acnes (Vitek2) 99

Propionibact. acnes

108 21104-25099

Propionibact.acnes 99.9 Propionibact.

acnes (Vitek2)

93 Propionibact.

acnes

109 21105-21335

P.acnes 99.9 Propioni.sp

(Gram) Propionibact. sp

110 21105-03481 P.acnes 99.9 P.acnes (Vitek2) 93

Propionibact. acnes

111 21105-03149

P.acnes 99.9 Popioni.sp

(Gram) Propionibact. sp

112 21106-20941 P.acnes 99.9

Popioni.sp (Gram)

Propionibact. sp

113 21105-35454

Prop.avidum Prop.granulosum

99.9 99.7

Pas de résultat (Vitek2)

Propioni.sp

(Gram) Propionibact. sp

114 21105-21411

Propioni.avidum/ granulosum

99.9 Popioni.sp

(Gram) Propionibact. sp

115 21105-05762

Sta.saccharolyticus 99.9 Pas de résultat

(Vitek2)

Staphylococcus saccharolyticus

La spectrométrie de masse MALDI-TOF et le diagnostic microbiologique

Cristina Cariello

Travail de diplôme 2011-2012 71

N° NLAB Vitek MS % 2ème méthode % Confirmation Identification

116 21104-33637

Sta.saccharo. 99.9 Peptostr.sp

Sta.saccharo. (Vitek2)

Staphylococcus saccharolyticus

117 21101-37819

Staphylococcus saccharolyticus

99.9 Staphylococcus saccharolyticus

Staphylococcus saccharolyticus

118 21101-29298

Staphylococcus saccharolyticus

99.9 Staphylococcus saccharolyticus

Staphylococcus saccharolyticus

119 21105-13688

Sta.saccharolyticus 99.9 Pas de résultat Staphylococcus saccharolyticus

120 21104-35173

Sta.saccharolyticus 99.9 Sta.

saccharolyticus (Vitek2)

95 Staphylococcus saccharolyticus

121 21008-35361

Veillonella parvula 99.9 Veillonella sp

Veillonella sp

122 21006-17304

Pas de résultats Veillonella sp Veillonella sp

10.1.17 Levures

N° NLAB Vitek MS % 2ème méthode % Confirmation Identification

1 21103-25080

C.albicans 88.5 C.albicans (Vitek2)

99 Candida albicans

2 21103-24306

C.albicans 99.9 C.albicans (Vitek2)

99 Candida albicans

3 21103-28940

C.albicans 99.9 C.albicans (Vitek2)

98 Candida albicans

4 21104-24735

C.albicans 99.9 C.albicans (Vitek2)

99 Candida albicans

5 21104-38092 C.albicans 99.9

C.albicans (CAN2)

Candida albicans

N° NLAB Vitek MS % 2ème méthode % Confirmation Identification

6 21103-08264

Candida albicans 75.7 C.albicans

(CAN2)

Candida albicans

7 21103-13865

Candida albicans 98.4 C.albicans

(CAN2)

Candida albicans

8 21103-15433

Candida albicans 99.9 Candida albicans Candida albicans

9 21103-10431

Candida albicans 99.9 Candida albicans Candida albicans

10 21012-30064

Candida albicans 99.9 Candida albicans Candida albicans

11 21012-14531 Candida albicans 99.9 Candida albicans Candida albicans

12 21105-38455 Candida albicans 99.9

C.albicans (CAN2)

Candida albicans

13 21105-40082 Candida albicans 99.9

C.albicans (CAN2)

Candida albicans

14 21105-37204

Candida albicans 99.9 C.albicans

(CAN2)

Candida albicans

15 21105-15590 Candida albicans 99.9

C.albicans (Vitek2)

96 Candida albicans

16 21106-04246

Candida albicans 99.9 C.albicans (Vitek2)

96 Candida albicans

17 21105-37258

Candida dubliniensis

99.9 Pas de résultat

(Vitek2)

Candida dubliniensis

18 21106-05931

Candia glabrata 99.9 Candia glabrata

(Vitek2) 99

Candida glabrata

19 21105-26316

Candia glabrata 99.9 Candia glabrata

(Vitek2) 99

Candida glabrata

21 21105-08234

Candia glabrata 99.9 Candia glabrata

(Vitek2) 99

Candida glabrata

La spectrométrie de masse MALDI-TOF et le diagnostic microbiologique

Cristina Cariello

Travail de diplôme 2011-2012 72

N° NLAB Vitek MS % 2ème méthode % Confirmation Identification

22 21103-18881

C.glabrata 99.9 Candia glabrata

(Vitek2) 99

Candida glabrata

23 21104-10349

C.glabrata 99.9 Candia glabrata

(Vitek2) 99

Candida glabrata

24 21103-15421

C.glabrata Low

discrimation (Vitek2)

C.glabrata

(ID32C) Candida glabrata

25 21103-07594

Candida glabrata Candida

sphaerica (Vitek2)

Candida glabrata

(ID 32 C) Candida glabrata

26 21103-41446

Candida glabrata 99.9 Candida glabrata (Vitek2)

99 Candida glabrata

27 21104-01171

Candida glabrata 99.9 Candida glabrata (Vitek2)

99 Candida glabrata

28 21104-04852

Candida glabrata 99.9 Candida glabrata (Vitek2)

95 Candida glabrata

29 21103-37676

Candida glabrata 99.9 C.glabrata

C.magnoliae (Vitek2)

Candida glabrata

29 21104-20198

Candida glabrata 99.9 Candida glabrata (Vitek2)

96 Candida glabrata

30 21104-20256

Candida glabrata 99.9 Candida glabrata (Vitek2)

99 Candida glabrata

31 21005-11550 Candida glabrata 99.9 Candida glabrata Candida glabrata

32 21104-12598

Candida glabrata 99.9

C.lipolytica C. famata

C.sake (Vitek2)

Candida glabrata

33 21105-26554

Candida glabrata 99.9 Pas de résultat

(Vitek2) Candida glabrata

34 21104-00995

Candida kefir 99.9 Candida kefir

(Vitek2) 99 Candida kefir

N° NLAB Vitek MS % 2ème méthode % Confirmation Identification

35 21103-04146 Candida krusei 99.9

Candida krusei (Vitek2)

99 Candida krusei

36 21010-29966 Candida krusei 99.9 Candida krusei Candida krusei

37 21106-03000

Candida lusitaniae 99.9 Candida

lusitaniae (Vitek2)

99 Candida

lusitaniae

38 21106-24012

Candia parapsilosis

99.9 Candia

parapsilosis (Vitek2)

97 Candida

parapsilosis

39 21106-04260

Candia parapsilosis

99.9 Candia

parapsilosis (Vitek2)

96 Candida

parapsilosis

40 21106-13626

Candia parapsilosis

99.9 Candia

parapsilosis (Vitek2)

97 Candida

parapsilosis

41 21105-07904

Candia parapsilosis

99.9 Candia

parapsilosis (Vitek2)

99 Candida

parapsilosis

42 21103-05784

C. parapsilosis 96.8 C. famata

C. parapsilosis (Vitek2)

Candida

parapsilosis

43 21104-16517 C.parapsilosis 99.9

C.parapsilosis (Vitek2)

95 Candida

parapsilosis

44 21104-18810

C.parapsilosis 99.9 Stephanoascus

ciferri (Vitek2)

88 Candida

parapsilosis

45 21103-21206

C.parapsilosis 98.7 C.haemulonii C.parapsilosis

(Vitek2)

Candida parapsilosis

46 21104-04056

Candida parapsilosis

99.9 Candida

parapsilosis (Vitek2)

95 Candida

parapsilosis

47 21103-37676

Candida parapsilosis

99.9 Candida

parapsilosis (Vitek2)

93 Candida

parapsilosis

48 21007-04643

Candida parapsilosis

99.9 Candida

parapsilosis

Candida parapsilosis

49 21105-37781

Candida parapsilosis

99.9 Candida

parapsilosis (Vitek2)

97 Candida

parapsilosis

La spectrométrie de masse MALDI-TOF et le diagnostic microbiologique

Cristina Cariello

Travail de diplôme 2011-2012 73

N° NLAB Vitek MS % 2ème méthode % Confirmation Identification

50 21104-31163

C.pelliculosa 99.9 C.pelliculosa

(Vitek2) 90

Candida pelliculosa

51 21003-13759

S.cerevisiae Low

discrimation (Vitek2)

Candida sp

(ID 32C) Candida sp

52 21104-19038

C.tropicalis 99.9 C.tropicalis

(Vitek2) 98

Candida tropicalis

53 21103-29237

Candida tropicalis 95.4 C.tropicalis

(Vitek2) 99

Candida tropicalis

54 21104-10190

Candida tropicalis 99 C.tropicalis

(Vitek2) 99

Candida tropicalis

55 21104-21001

Candida tropicalis 99.9 C.tropicalis

(Vitek2)

Candida tropicalis

56 21007-16583

Candida tropicalis 99.9 Candida tropicalis

Candida tropicalis

57 21105-27050

Candida tropicalis 99.9 Candida tropicalis (Vitek2)

96 Candida tropicalis

58 21105-08404

Candida tropicalis 99.9 Candida tropicalis (Vitek2)

99 Candida tropicalis

59 21106-04236

Candida tropicalis 99.9 Candida tropicalis (Vitek2)

99 Candida tropicalis

60 Souche BM

Cryptococcus neoformans

99.9 Cryptococcus neoformans

(Vitek2)

Cryptococcus neoformans

61 21103-35821

Geotrichum capitatum

99.9 Geotrichum capitatum

(Vitek2) 96

Geotrichum capitatum

62 21103-17744

Rhodotorula mucilaginosa

99.9

Rhod. mucilaginosa Rhod.glutinis

(Vitek2)

Rhod.

mucilaginosa (ID 32C)

Rhodotorula mucilaginosa

63 21106-08215

Rhodotorula mucilaginosa

99.9 Rhod. glutinis / mucilaginosa

(Vitek2)

Rhodotorula mucilaginosa

N° NLAB Vitek MS % 2ème méthode % Confirmation Identification

64 21106-22638 S.cerevisiae 99.9

S.cerevisiae (Vitek2)

95 Saccharomyces

cerevisiae

65 21106-26515

S.cerevisiae 99.9 Low

discrimination (Vitek2)

Saccharomyces

cerevisiae

10.1.18 Champignons

N° NLAB Vitek MS % 2ème méthode % Confirmation Identification

1 CQ 902-04596

Aspergillus flavus 99.9 Aspergillus

flavus

Aspergillus flavus

2 706-04725

Aspergillus flavus 99.9 Aspergillus

flavus

Aspergillus flavus

3 902-04596

Aspergillus flavus 99.9 Aspergillus

flavus

Aspergillus flavus

4 CQ 501-15832

Aspergillus fumigatus

99.9 Aspergillus fumigatus

Aspergillus fumigatus

5 CQ 21102-

05525

Aspergillus fumigatus

99.9 Aspergillus fumigatus

Aspergillus fumigatus

6 CQ 702-05830

Aspergillus fumigatus

99.9 Aspergillus fumigatus

Aspergillus fumigatus

7 21003-03024

Aspergillus fumigatus

99.9 Aspergillus fumigatus

Aspergillus fumigatus

8 CQ 603-12330

Aspergillus niger 99.9 Aspergillus

niger

Aspergillus niger

9 603-12330

Pas de résultat Aspergillus niger Aspergillus niger

10 809-26073 Aspergillus niger 99.9 Aspergillus niger Aspergillus niger

11 21102-01079

Pas de résultats (pas dans la base

de données)

Aspergillus terreus

Aspergillus

terreus

La spectrométrie de masse MALDI-TOF et le diagnostic microbiologique

Cristina Cariello

Travail de diplôme 2011-2012 74

N° NLAB Vitek MS % 2ème méthode % Confirmation Identification

12 CQ 906-18909

Pas de résultat Aspergillus versicolor

Aspergillus versicolor

13 CQ 2008-2720

Pas de résultat Aspergillus versicolor

Aspergillus versicolor

14 802-06455

Pas de résultats Aspergillus versicolor

Aspergillus versicolor

15 21103-37974

Pas de résultat Aspergillus versicolor

Aspergillus versicolor

16 909-34841

Trichosporon mucoides

97.4 Trichosporon

mucoides

Trichosporon mucoides

10.1.19 Mycobactéries

N° NLAB Vitek MS % 2ème méthode % Confirmation Identification

1 21104-34222

Mycobact. fortuitum

99.9 Mycobact. Fortuitum

(envoi CHUV)

Mycobact. fortuitum

2 21104-15136

Mycobact. fortuitum

99.9 Mycobact. fortuitum

(envoi CHUV)

Mycobact. fortuitum

3 21102-11941

Mycobact. fortuitum

99.9 Mycobact. fortuitum

(envoi CHUV)

Mycobact. fortuitum

4 21103-00599

M.tuberculosis M. bovis

M.scrofulaceum (pas dans la base

de données)

99.9 99.9 99.9

Mycobact. goodii

(envoi CHUV)

Mycobact. goodii

5 21103-09866

M.kansasii (pas dans la base

de données) 99.9

Mycobact. gordonae

(envoi CHUV)

Mycobact. gordonae

6 21103-13868

M.tuberculosis M. bovis

(pas dans la base de données)

99.9 99.9

Mycobact. gordonae

(envoi CHUV)

Mycobact. gordonae

N° NLAB Vitek MS % 2ème méthode % Confirmation Identification

7 21102-09866

M.tuberculosis M. bovis

(pas dans la base de données)

99.9 99.9

Mycobact. Gordonae

(envoi CHUV)

Mycobact. gordonae

8 21104-20871

Pas de résultat Mycobact. sp (envoiCHUV)

Mycobact. sp

Cristina Cariello

Travail de diplôme 2011-2012 75

10.2 Annexe 2: Tableau des galeries de tests biochimiques

Galerie Incubation Bactéries Suspension Mc farland Volume

transféré Milieu d’inoc. Temp/Atm. Vol. cupule

Tests

complémentaires

Rapid ID 32 E 4-5 h Entérobactéries NaCl 0.5 35°C Aérobie 55 µl IND : James

Id 32 E 18-24 h Entérobactéries NaCl 0.5 35°C Aérobie 55 µl IND : James

Rapid ID 32

STREP 4-5 h Streptococcus NaCl 4 35°C Aérobie 55 µl

VP : VP A + VP B

HIP : NIN

APPA à GTA : FB

ID 32 C 24-48 h Levures Susp. Medium 2 250 µl C Medium 30°C Aérobies 135 µl -

Rapid ID ANA

ll System 4 h Anaérobies

Liquide d’inoc.

RapID 3 35°C Aérobie - Réactif RapID ANA

Rapid ID 32 A 4-5 h Anaérobies NaCl 4 35°C Aérobie 55 µl

NIT: NIT1 + NIT2

IND: James

PAL → SerA : FB

ID 32 STAPH 24 h Staphylococcus NaCl 0.5 35°C Aérobie 55 µl

NIT : NIT1 + NIT2

VP : VP A + VP B

βGAL → PyrA : FB

API Coryne 24 h Corynebactéries Susp. Medium

3 ml >6 500 µl

NIT → GEL :

idem milieu

susp. GP

Medium

35°C

Aérobie/Hum. -

NIT : NIT1 + NIT2

PYZ : PYZ

PyrA → βNAG :

ZYM A + ZYM B

API NH 2 h Neisseria

Haemophilus NaCl 4

35°C

Aérobie/Hum. -

ProA, GGT : ZYM B

IND : James

API 20 NE 24-48 h Bacilles Gram-

Non-fermentatifs NaCl 0.5 200 µl

NO3 → PNPG :

idem milieu

susp. AUX

Medium

30°C

Aérobie/Hum. -

NO3 : NIT1 + NIT2

Si NO3 Θ : Zn

TRP : James

API 20 E 18-24 h Entérobactéries H2O dist.

5 ml 1 colonie

35°C

Aérobie/Hum. -

TDA : TDA

IND : James

VP : VP1 + VP2

API 20 STREP 4-24 h Streptococcus Susp. Medium

2 ml 4 500 µl

VP → ADH :

idem milieu

susp. GP

Medium

35°C

Aérobie/Hum. -

VP : VP1 + VP2

HIP : NIN

PyrA → LAP : ZYM

A + ZYM B