Upload
endang-frida-siahaan
View
578
Download
1
Embed Size (px)
Citation preview
METODEKULTUR PUS
Pembimbing: dr. B. Rina A. Sidharta, SpPKPresentan: M. Endang Frida S
PPDS I PK FK UNS/RSDMSurakarta
Pendahuluan
Pus: - Cairan kental, biasanya
berwarna kuning dan berbau busuk
- Terbentuk dari:- Sel kulit yang mati- Netrofil yang mengalami
degradasi dan mati- bakteri
Kuman penyebab tersering Staphylococcus aureus
Infeksi yang menghasilkan pus Infeksi purulenBakteri penyebab infeksi bakteri piogenik
Pendahuluan...
Pus
Permukaan kulit (epidermis)
Pustula
Celah antar jaringan
Abses
Organ dalam
TulangOtakHati
Saluran cerna
Pendahuluan...
Kultur bakteri
Kultur bakteri (wikipedia):– Suatu metode untuk memperbanyak bakteri
dengan mengembangbiakkan dalam suatu media khusus dibawah pengawasan khusus
laboratorium– Suatu metode diagnostik– Untuk menentukan penyebab penyakit
Pendahuluan...
Kultur Pus
Suatu metode untuk memperbanyak bakteri dari pus dengan
mengembangbiakkan dalam suatu media khusus dalam kondisi laboratorium untuk
mengetahui kuman penyebab pus
Pendahuluan...
Metode Kultur Pus
• Pengambilan spesimen dan transport
Pra Analitik
Pengambilan Spesimen dan Transport Spesimen
Lakukan desinfektan pada kulit Alkohol 70% atau iodine 2% mengurangi kontaminasi flora normal di kulit
1
Pra Analitik......
Pengambilan sampel dengan menggunakan:•Syringe 0,5 – 5 mL•Swab 2 buah swab•Masukkan sampel ke botol steril atau media transport
2
Pra Analitik: Pengambilan Spesimen dan Transport Spesimen...
• Media transport (aerob dan anaerob)– BBL Port-A-Cul Tubes untuk swab– BBL Port-A-Cul Vials untuk spesimen cair
• Media transport :– Bakteri bertahan hidup– Bakteri tidak berkembang biak
Pra Analitik: Pengambilan Spesimen dan Transport Spesimen...
Pengiriman Sampel•Beri Label •Segera kirim ke laboratorium•Jika ditunda ( < 2jam) biarkan di suhu ruangan
3
Pra Analitik: Pengambilan Spesimen dan Transport Spesimen...
Sampel ditolak:
• Sampel kurang (pus) atau kering (swab)• Label tidak ada / tidak lengkap atau tidak
sesuai• Media transport tidak sesuai atau expired• Pengiriman sampel ditunda > 2 jam
Pra Analitik: Pengambilan Spesimen dan Transport Spesimen...
Pewarnaan Gram (awal)
• Sebelum kultur lakukan pemeriksaan mikroskopis dengan pewarnaan gram memudahkan pemilihan media yang tepat bagi bakteri yang akan ditanam
Analitik...
Pewarnaan gram
Perhatikan warna dan morfologi bakteri
Analitik: Pewarnaan Gram (awal)...
Pewarnaan Gram ....
Pewarnaan Gram ....
Hasil pewarnaanPewarnaan Gram ....
Identifikasi bakteri pada pus Pewarnaan gram
Bakteri (+):Gram negatifGram positif
Bakteri (-) atau
Bakteri gram (-)
KULTUR
Evaluasi ulang
Analitik: Pewarnaan Gram (awal)...
Kultur
• Pus mengandung bakteri yang banyak dan terdiri dari berbagai tipe organisme digunakan berbagai media kultur
Analitik...
Kuman utama penyebab pus(warren;2008):- Epidermis (superfisial) gram (+) cocci
(Staphylococcus aureus, Streptococcus pyogenes)
- Dermis (tengah) gram (-) bacili (Pseudomonas aeruginosa)
- Hypodermis (dalam) anaerob (Clostridium)
Kuman penyebab pus dan pilihan media
Staphylococcus aureus
Streptococcus pyogenes
Pseudomonas aeruginosa Anaerob
Agar DarahAgar Manitol (MSA) Agar Darah
Agar MacConkeyAgar TSI (triple
sugar iron)Tioglikolat
Analitik...
Bakteri pus
Aerob Anaerob
AgarDarah
AgarMacConkey
Thioglikolat
Analitik...
Media Kultur Pus
Agar Darah Agar MacConkey Tioglikolat
-Media diferensial- mengandung 5% darah domba- Prinsip: reaksi hemolisis ( alpha, beta dan gamma) eksotoksin hemolisin dari Streptococci
-Media selektif dan diferensial- selektif gram negatif- diferensial fermentasi laktosa
-Media anaerob dan enrichment- kaya nutrisi
Analitik...
Metode Kultur
Siapkan media dan alatSterilisasi inokulator
(kawat loop)
Beri label
1 3
2
aerob
Analitik...
Ambil spesimen
Lakukan streak pertama
4
5
5a
Hasil streak pertama
Analitik: Metode kultur aerob
Lakukan streak kedua
Panaskan lagi inokulator dinginkan
7
6
Ulangi langkah
ke-6 dan 7
Inkubasi
8
9
Streak penuh
Analitik: Metode kultur aerob
http://inst.bact.wisc.edu
anaerob
Analitik: Metode kultur anaerob
Inkubasi secara
anaerob
Identifikasi Bakteri
Inkubasi
Identifikasi Bakteri
Morfologi Kultur
Pewarnaan Gram
Reaksi Kimia
Aerob/Anaerob
35⁰C24-48 jam
Pasca Analitik...
Reaksi Hemolisishttp://iws2.collin.edu
Hemolisis lengkapContoh: S. pyogenes,
Staphylococcus
Hemolisis partial (sebagian)Contoh:
S. pneumoniae, S. viridans
Tidak terjadi hemolisis
Contoh: E. faecalis
Pasca Analitik...
Fermentasi Laktosa
Agar MacConkey- Selektif gram
negatif (gram positif akan dihambat)
- Diferensial fermentasi laktosa
(+)
Contoh: E. coli, Klebsiella
(-)Contoh:
P. Aeruginosa, Proteus sp
http://en.wikipedia.org
Pasca Analitik...
Reaksi terhadap oksigen
http://iws2.collin.edu
1 = b anerob obligat2 = a aerob obligat3 = d anaerob aerotolerant4 = c anaerob fakultatif
Pasca Analitik...
Pewarnaan Gram
Pewarnaangram
Pasca Analitik...
Morfologi bakteriPasca Analitik...
Reaksi Kimia
• Ada berbagai macam reaksi kimia untuk identifikasi bakteri
• Lakukan sesuai hasil pewarnaan gram• Untuk pus dari kulit biasanya untuk
identifikasi– Staphylococcus aureus– Streptococcus pyogenes– Pseudomonas aeruginosa
Pasca Analitik...
Reaksi KimiaIdentifikasi bakteri
Identifikasi bakteri penyebab pus
Staphylococcus aureus
Streptococcus pyogenes
Pseudomonas aeruginosa
Anaerob (Clostridium)
Gram (+) cocci Gram (+) cocci Gram (-) bacili Gram (+) bacili
Aerob Aerob Aerob Spora (+)
Catalase (+) Catalase (-) Fastidious Anaerob
Fermentasi glukosa (+) Hemolisis β Oksidase (+)
Coagulase (+) Bacitracin sensitif Glukosa oksidase (+)
Pigmen hijau (+)
Pasca Analitik...
Pelaporan Hasil
• Mikroskopis:– Gram bakteri (sesuai hasil pewarnaan gram di
awal menerima sampel)• Kultur:
– Bakteri tumbuh:• Signifikan secara klinis (dengan pewarnaan gram dan
lokasi pengambilan sampel)• Tidak signifikan secara klinis (polimikrobial flora)
– Tidak ada bakteri yang tumbuh
Pasca Analitik...
Terima Kasih