PATOGENICIDAD DEL COMPLEJO DE Phytophthora alni Y DE P

PATOGENICIDAD DEL COMPLEJO DE Phytophthora alni Y DE P. plurivora EN PLÁNTULAS

DE Alnus glutinosa

Cristina Zamora Ballesteros1

Jorge Martín García1,2, Julio J. Díez Casero1,2

1 Departamento de Producción Vegetal y Recursos Forestales. E. T. S. de Ingenierías Agrarias. Universidad de Valladolid. Campus “La Yutera”, Avda. Madrid, 44. 34004. Palencia.2 Instituto Universitario de Investigación en Gestión Forestal Sostenible UVA-INIA. Campus “La Yutera”, Avda. Madrid, 44. 34004. Palencia.

29 de junio de 2017 en Plasencia

Phytophthora xmultiformis

Phytophthora uniformis

Phytophthora xalni

DECAIMIENTO DEL AISO

COMPLEJO DE Phytophthora alni

PATOGENICIDAD DEL COMPLEJO DE Phytophthora alni Y DE P. plurivora EN PLÁNTULAS DE Alnus glutinosa

INTRODUCCIÓN

Phytophthora plurivora(Jung & Burgess, 2009)


INTRODUCCIÓN

El objetivo principal de este estudio fue

investigar y comparar la patogenicidad del complejo de

Phytophthora alni

(Phytophthora xalni, P. uniformis y P. xmultiformis) y

Phytophthora plurivora

en plántulas de Alnus glutinosa


OBJETIVOS

MATERIAL VEGETAL

INÓCULO

Especie AislamientoAño de

aislamientoHospedante de

aislamientoLugar

Nº acceso GenBank

Phytophthora xalni PA4017 2010Alnus

glutinosaFresno Alhandiga

(Salamanca, España)KJ659839

P. xalni PA8055 2011 A. glutinosa Ciudad Rodrigo (Salamanca, España)

KJ659837

P. xalni PA02 2012 A. glutinosa Bretocino (Zamora, España)

-

P. xalni PAA314 2008 A. glutinosa Francia -

P. uniformis PAU300 2008 A. glutinosa Francia -

P. xmultiformis PAM393 2009 A. glutinosa Francia -

P. plurivora LAMASA1 2012 A. glutinosa La Maya (Salamanca, España)

KF413074

P. plurivora SORLDD4 2012 A. glutinosa Langa de Duero (Soria, España)

KF413075


MATERIAL Y MÉTODOS

Medio selectivo (V8A-PARPH)

► MÉTODO DE INOCULACIÓN: Secciones agarizadas con micelio

Variables a analizar:

Mortalidad

Necrosis del tronco

Altura

Diámetro

Peso seco


MATERIAL Y MÉTODOS

► PRUEBAS DE INOCULACIÓN: Secciones agarizadas con micelio en tallo

Colocación del inóculo Sellado con parafilm

Preparación ≈6 cm sobre el cuello de la raíz Corte Extracción del inóculo


MATERIAL Y MÉTODOS

0 5 10 15 20 25 30 35

0.0

0.2

0.4

0.6

0.8

1.0

Tiempo (Semanas)

Pro

babi

lidad

de

Sup

ervi

venc

ia

CONTROLP. plurivora (LAMASA1)P.plurivora (SORLDD4)

0 5 10 15 20 25 30 35

0.0

0.2

0.4

0.6

0.8

1.0

Tiempo (Semanas)

Pro

babi

lidad

de

Sup

ervi

venc

ia

CONTROLP. alni (MMSPA8055)P.alni (PFSPA4017)P. alni (ZABRE02)

Phytophthora plurivora vs. Control Phytophthora alni vs. Control

SÍ hay diferencias

significativas entre P. plurivora y

control

Sólo se produjerondiferencias entre el aislamiento

PA02 y control (χ2 = 4,7, P = 0,031)El aislamiento PA8055 no tuvo diferencias respecto al control, aunque próximas al límite de

significación (χ2 = 3,3, P = 0,069)

► PRUEBAS DE PATOGENICIDAD: Análisis de la probabilidad de supervivencia


RESULTADOS Y DISCUSIÓN

0 5 10 15 20 25 30 35

0.0

0.2

0.4

0.6

0.8

1.0

Tiempo (Semanas)

Pro

babi

lidad

de

Sup

ervi

venc

ia

P.plurivora (LAMASA1)P.alni (MMSPA8055)P.alni (PFSPA4017)P.plurivora (SORLDD4)P.alni (ZABRE02)

0 5 10 15 20 25 30 35

0.0

0.2

0.4

0.6

0.8

1.0

Tiempo (Semanas)

Pro

babi

lidad

de

Sup

ervi

venc

ia

P.alni ssp. alni-España (MMSPA8055)P.alni ssp. alni-Francia (PAA314)P.alni ssp. multiformis-Francia (PAM393)P.alni ssp. uniformis-Francia (PAU300)P.alni ssp. alni-España (PFSPA4017)P.alni ssp. alni-España (ZABRE02)

NO hay diferencias

significativas entre especie

(χ2 = 1.2, P = 0,266)

PAM

NO hay diferencias

significativas

Phytophthora alni vs. P. plurivora P. alni (ES) vs. P. alni (FR)



► PRUEBAS DE PATOGENICIDAD: Análisis de la probabilidad de supervivencia

► PRUEBAS DE PATOGENICIDAD: Evaluación de la extensión del patógeno causando necrosis en el tronco

b

b

ab b

a

0

10

20

30

40

50

60

70

80

90

PFSRA4017 MMSPA8055 ZABRE02 SORLDD4 LAMASA1

Exten

sión

media

de la

necro

sis ve

rtical

(mm)

ESPECIE P. plurivora P. alni Control

P. plurivoraFWe = 2,11P = 0.155

FWe = 45,90P < 0.001

P. alniFWe = 50,49P < 0.001

Control

NO hay diferencias

significativas entre especie

ANOVAs método robusto del test de Welch (proporción de recorte de 0,2)

Phytophthora alni vs. P. plurivora




a

bc

ab

ab

ab

c

0

10

20

30

40

50

60

70

80

90

PFSRA4017 MMSPA8055 ZABRE02 PAA314 PAU300 PAM393

Exten

sión m

edia

de la

necro

sis ve

rtical

(mm)

Existencia de diferencias significativas entre los aislamientos

españoles y franceses(FWe = 8.06, P = 0.002)


P. alni (ES) vs. P. alni (FR)




b

a

0

5

10

15

20

25

30

35

40

SUPERIOR INFERIOR

Exten

sión

media

de la

necro

sis (m

m)

Comparación de la longitud media de la necrosis superior y la necrosis inferior causada por Phytophthora alni y P. plurivora en plántulas de Alnus glutinosa

Necrosis superior vs. Necrosis inferior El test de Wilcoxonconfirmó la

existencia de diferencias

significativas(V = 3.568, P < 0.001)



► PRUEBAS DE PATOGENICIDAD: Anillado

Phytophthora alni

Phytophthora plurivora

NO hubo diferenciación entre especie(FWe = 3.07, P = 0.089)

aa

b0

20

40

60

80

100

120

140

P. alni P. plurivora Control

Área

bajo

la cu

rva de

l pro

ceso

del a

nillad

o

Phytophthora alni vs. P. plurivora





aa a

aa

a

0

20

40

60

80

100

120

140

PFSRA4017 MMSPA8055 ZABRE02 PAA314 PAU300 PAM393

Área

bajo

la cu

rva de

l pro

ceso

del a

nillad

o

Aliso completamente anillado por P. alni ssp. multiformis (PAM393 ),

tras 16 semanas de ensayo

P. alni (ES) vs. P. alni (FR)

A nivel de procedencia España-Francia, se demostró la NOexistencia de diferencias significativas (FWe = 2.56, P = 0.099)

A nivel de aislamientos, tampoco mostraron tener diferencias significativas (FWe = 1.83, P = 0.166)



► PRUEBAS DE PATOGENICIDAD: Anillado

► PRUEBAS DE PATOGENICIDAD: Estudio de la altura, el diámetro y el peso seco de las plántulas


a aa a

aa

aa

a

0

0.002

0.004

0.006

0.008

0.01

0.012

0.014

0.016

PFSRA4017 MMSPA8055 ZABRE02 PAA314 PAU300 PAM393 SORLDD4 LAMASA1 Control

Crec

imien

to re

lativo

de la

altur

a (cm

)

ALTURANO hay diferencias

significativas




a

b

0

0.001

0.002

0.003

0.004

0.005

0.006

0.007

P.alni Control

Crec

imien

to re

lativo

del d

iámetr

o (mm

)

DIÁMETRO

Sólo se produjerondiferencias entre los aislamientos

españoles de P. alni y el control(FWe = 4.96, P = 0.043)

La especie P. plurivora no tuvo diferencias respecto al control,

aunque próximas al límite de significación

(FWe = 3.89, P = 0.064)





PESO SECO: AÉREO

aa

a a a a aa

b

00.20.40.60.8

11.21.41.61.8

2

Peso

seco

aére

o (g)

a a a a a a a aa

00.20.40.60.8

11.21.41.61.8

2

Peso

seco

radic

al (g

)

PESO SECO: RADICAL

NO hay diferencias

significativas entre especies

El análisis del peso seco aéreo reveló que tanto la

especie P. alni(FWe = 10.58, P = 0.015)

como la especie P. plurivora

(FWe = 10.43, P = 0.012) tienen diferencias

significativas con control

NO hay ninguna diferencia

significativa




Los aislamientos españoles de las especies Phytophthora plurivora y P. xalni fueron patogénicos

en plántulas de Alnus glutinosa y mostraron un poder patogénico similar.

Esto alienta a un mayor estudio del rol de P. plurivora en el decaimiento de las masas de aliso.


CONCLUSIONES

AGRADECIMIENTOSClaude Husson, Vivero Forestal Central de la Junta de Castilla y León

[email protected]

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