Biology of the Cell. Volume 63, 1988

REGULATION DU CORTEX ET DU CYTOSQUELETTE INTERNE CHEZ DES CYBRIDES DE PARAMECIE OBTENUS PAR ELECTROFUSION. Francine IFTODE, dacek GAERTIG, Anne FLEURY et Andr~ ADOUTTE. Labo~atoire de Biologic Ce~lu~aire 4~ B~timent 444, Universit~ Paris-Sud, 8140~ ORSAY-Cedez~ France.

Des cybrides stables ou instables sont obtenus chez la Param~cie apr~s fusion des cellules dans un champs #lectrique suiv~ ou non par des trans-sections d'une pattie d'une des deux cellules. La descen- dance de cybrides homopolaires r~gule en 24 het donne des doublets parfaits ou imparfaits. Par contre les cybrides h~t~ropolaires sont inviables, ou engendrent des monstres au coups de divers processus morphog~n~tiques : un clone ~ cin~ties invers~es a cependant ~t~ obtenu par trans-section d'une pattie d'un de ces cybrides. Le devenir de ces syst~mes a ~t~ suivi pendant plusieurs mois, par le protargol et par immunocytochimie indirect, (anti-, tubuline ac~tyl~e fourni par G. Piperno et anti-tubuline de cerveau de poPc 16D3 fourni par J.14. Gallo).

Le retour au pattern "singlet" se fait chez le doublet selon le processus d~crit par Kaczanowska (1983) apr~s environ 3 cycles d'autogamie. Mais il ,st li~ ~ ]a r~sorption de l'une des deux bouches, la plus ant~rieure, et des cin~ties surnum~raires qui lui sont associ~es, par phagocytose dans la zone de suture. Par contre le comportement d'une face ventrale exc~dentaiPe, localis~e dorsalement, bien que d~pourvue de bouche, ,st morphog~n~tiquement identique ~ celui d'une face ventrale compl~te. Ceci mon- tre que des territoires morphog~n~tiques precis conservent leurs propri~t~s sp~cifiques dans un envi- ronnement cortical profond~ment modifi~. Cette propri~t~ est applicable aux portions de cellules portant des cin~ties invers~es. N~anmoins dans ces deux types de cellules, de profondes anomalies du positionnement du macronoyau sont observe,s, r~v~lant des liens ~troits avec le cortex (r~seau micro- tubulaire des vacuoles pulsatiles et de la zone adorale li~e ~ la bouche). L'~limination des groupes de cin~ties invers~es a lieu au coups d'un nombre limit~ de divisions, par s~paration puis cassures et ~victions successives de cin~ties entre proter et opisthe, avec Potation de droite ~ gauche sup le cortex, accompagn~e d'une importante anomalie du r~seau interne microtubulaire ac~tyl~, donnant une forme "twisted" ~ la cellule.

Cette approche ouvre la vole ~ l'analyse des m~canismes de r~gulation de la morphogen~se cellulaire chez la Param~cie.

ANALYSE DE LA MUHPHOGSN~S~ CUHTI~ALZ UMSZ ~A VAHAMSGi5 A ~'ALUK U'A~TICUHF~ MUNUChO~MUA. Jean-Claude CLEROT, Rachel JEANMAIRE-WOLF, Francine IFTODE, Andr~ ADOUTTE. Laborato~re de Biologic CeZ~uZaire 4, Bdt~men~ 444, Universit~ Paris-Sud, 81405 ORSAY-Cedex, France.

Une collection d'anticoPps monoclonaux dirig~s contre les prot~ines corticales de la Param@cie a~t~ obtenue (Cl~rot et a~., ~o~. CeZZ, 60, 9a, 1987). Deux d'entre eux constituent d'excellents outils pour une analyse fine de la morphogen~se des unit~s corticales (ensemble de territoires superficiels juxtaposes, compos~s d'~l~ments membranaires et cytosquelettiques). Chaque unit~ corticale, centre, autour d'un (ou deux) cin~tosomes, ,st recouverte par la membrane plasmique et par des alv~oles membra- naires et sous-tendue par une couch, cytosquelettique appos~e ~ la membrane alv~olaire interne, l'~pi- plasme, En micPoscopie ~ fluorescence, le premier, I4B7, d~core la totalit~ de l'unit~ cortical,, r~v~- lant la disposition en ~cailles de l'~piplasme. Le second, I3D3, ne d~core, en interphase, que la p~ri- ph~rie de l'unit~, de manY,re tr~s fine, m~nageant un liser~ non marqu~ entre unit~s adjacentes. (Cet ,space ,st oecup~ par un materiel fibrillaire ("outer lattice") dont la d~coratlon et la dynamique ont ~t~ d~crltes par Cohen et al. (Ce~ Mot. CHtoske~., ?, 315, 1987)). En microscopic ~lectronlque, sup cellules perm~abilis~es au Triton, Is compl~mentarit~ des deu× anticorps se confiPme ; tous deux d~co- rent la face externe de l'~piplasme (o~ se sltue la membrane alv~olaire interne) : 14B v sup tout, son 4tendue et I~D 3 ~ Is p~rlph~rie. Au coups de la division, lea deux anticorps permetten£ de viaualiser l'allongemen~ puis le clolsonnement des unit6s corticales qui suivent de pP~s la duplication des cln~- tosomes. Ace stade l'Intenslt~ du marquage s'att~nue pour les deux antlcorps, en correlation avec l'~tlrement probable du mat~rlel sous-jacent. Les nouvelles cloisons, d~cor~es per 13D_ , semblent ' 'organiser ~ partir du centre de l'unlt~ corticale, la fragmentation de l'6pip]asme s~effectuant, ,lle, ~ partir de la p~rlph~rle. Les s~quences morphog~n~tlq,les ainsi d~cPites soullgnent ~ nouveau le rSle preponderant du cln~tosome comme centre organlsateuP des nouvelles unit~s corticales.

STRAIGHT arachnoidal INTR.~CISTERNAL TUBULES IN ROUGH ENDOPL~SMIC RETICULUM OF

MIXTE NEPVER/MAI.IGNANT MELANOMA MET.~STASIS.

I. KRTVOSIC 1 M. JOMIN 2 A. DEST~.E 3 Ph D~VOS 4, P. STOEBNER 5 A. nUPONT 1

(1! Labo,to;to~¢ d'A,o;~nmi, P=tho~ogiqao_ A CHU LTLLE, Pao~e.JJ~eu~ A. OIIPONT, (2) Sza~,~cz dE .~!¢uu~och~uAgie 8 CHLI LILLE, P.~ode..s~,eu~ M..~OMIN, (3) SE~,,~co de..~!euAo~ogJ~e A CHU LTLLF, P~od~,seu~ ,~. ¢I4ROT, (41 Se.~u,dce de IVe,~oP.og~e H~p~ OUCHE;~.NE 80LILOGNE SqR MER,

We present a case of ~traight intraci~ternal tubules in ro, luh endo- arachnoidal

plasmic r~ti~ulum in malignant melanoma. It, was intrac~anial mixte nerves/Inca-

lisation operatmd 1! years after resection of melanoma of t~ght. Histological

9spect evoked a mel~noma but light and el~ctron microscopy did not show evidence

of mel~nosomes. Pre~en-e of tubules in rough endeplasmic reticulum wgs retained

for 4 s~milar cases (i, 2) as arg,,ment of melanotie origin.

(I) VAN HAEST UJf~4 and R. HOLLAND : Ult~astruct. Pathology !987, II : 787-791

(2) ~HADIALLY FN "lqtras=ructural path~logy of the cell and matrix" Second Edition 9UTTER NOKTS.

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