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test de Lyme Disease antigène réalisée par cytométrie de flux permet de détecter la maladie de Lyme et Borrelia burgdorferi
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Un nouveau test de diagnostic pour la
maladie de Lyme par cytométrie en flux
Cliff Threlkeld, D.O.Central Florida Research
Un nouveau test de diagnostic pour la maladie de Lyme par cytométrie en flux
Introduction - Utilisation de la cytométrie en flux pour détecter Borrelia burgdorferi (Bb)Principes de base de la cytométrie en fluxDemande de dépistage des maladies de LymeComparaison de cytométrie en flux pour d'autres méthodes de dépistage des maladies de LymeDisponibilité de la cytométrie en flux la maladie de Lyme essais
Un nouveau test de diagnostic pour la maladie de Lyme par cytométrie en flux
Bases de la cytométrie en flux◦ cytomètre de flux typique -électriques, mécaniques et de détection et système informatiqueinstallation par défautChambre de mesureComment sont les événements détectés?Comment anticorps travail
Cytomètre en flux typique
Computer SystemDétecteur &Mécanique
Puissance
Cytometer
Puissance
Computer
Specimen Tube
InjecteurPointe
FluorescenceSignaux
laser focaliséfaisceau
•Gainefluide
Flow Cytometry
PMT FITC
PMT PE
PMT ECD
PMT PC5
Filtresdichroïques
Laser
1
2
3
4
Chambre de mesure
Passe-bande des filtres
Comment fonctionne le Abs
319
ZAP
70
5
FS
SS
Un nouveau test de diagnostic pour la maladie de Lyme par cytométrie en flux
Application de la cytométrie en flux pour le dépistage des maladies de Lyme◦ Traditionnels d'essai de deux test d'anticorps du
protocole - ELISA et Western Blot (WB)méthodes de détection bactérienne - Culture et de la réaction en chaîne par polymérase (PCR) - La cytométrie en flux sous-utilisésEn utilisant la cytométrie en flux pour détecter Borrelia burgdorferi dans le sang du patient Anticorps avec l'étiquette de la fluorescéine
(chèvre, KPL) ajouté à aliquote de sang du patient (EDTA)Incubation 1 heure à 37 ° CAnalyser le FC - Bb sont lumineuses fluorescentes événements
Cytométrie en flux de Borrelia burgdorferi positive patients
Un nouveau test de diagnostic pour la maladie de Lyme par cytométrie en flux
Comparaison des FC à la Banque mondiale et PCR◦ Étude de phase 1 par rapport FC avec la Banque mondiale66 patients avec diagnostic clinique de la LD
5 positifs par WB, 4 de ces positive par le FC28 autres patients positifs par le FC
Un nouveau test de diagnostic pour la maladie de Lyme par cytométrie en flux
Comparaison des FC à la PCR◦ Phase 2 par rapport au FC PCR chez 42 patients avec un diagnostic clinique de la LD16 patients positifs par le FC et 18 positifs par PCR
8 patients positifs par PCR et le FCSéquençage des gènes, effectuée le 14 PCR positive patients (5 FC positive)Bb 8 stricto sensu (4 CF)7 Bb lato sensu (nouveau sous-groupe, 2 par le FC)
Résultats
Un nouveau test de diagnostic pour la maladie de Lyme par cytométrie en flux
La sensibilité et la spécificité des FC et de la BM par rapport◦ Sensibilité FC Spécificité = 66% = 92%
◦ WB Sensibilité Spécificité = 52% = 100%
Un nouveau test de diagnostic pour la maladie de Lyme par cytométrie en flux
La sensibilité et la spécificité des FC et de la PCR par rapport◦ Sensibilité FC Spécificité = 62% = 100%
◦ PCR Sensibilité Spécificité = 64% = 100%
Un nouveau test de diagnostic pour la maladie de Lyme par cytométrie en flux
Disponibilité de la cytométrie en flux LD essais◦ Recherche de la Floride centrale, Winter Haven, Floride
site Web - Http: / / www.centralfloridaresearch.com
Un nouveau test de diagnostic pour la maladie de Lyme par cytométrie en flux
Les applications futures◦ Test de la maladie transmise par les tiques multiples pathogènes simultanément
◦ Ajouter anticorps espèces européennes de Borrelia
◦ Rechercher des antigènes dans les monocytes Bb
