Quand comment diagnostic génétique.carrié

Quand et Comment demander un Quand et Comment demander un bilan gbilan géénnéétique dans les tique dans les

dyslipiddyslipidéémiesmies ??Alain Carrié

Centre de Génétique Moléculaire et ChromosomiqueLaboratoire Biochimie Endocrinienne et Oncologique (Pr J. Chambaz)UF Endocrinologie Moléculaire et Oncologique, GH Pitié-Salpêtrière

Inserm U939 (Dr J. Chapman), Hôpital de la Pitié Paris, France

Pourquoi ...Pourquoi ...

Vendredi 4 juin 2010

Hegele RA. Nat Rev Genet. 2009 ;10(2):109-21

Hyperlipoprotéinémie de type IIa (1/20)

Autosomique Dominante:- LDL-R 1/500 (79%)- ApoB 1/1000 (5 à 7%)- PCSK9- Hchola 4 / 5 !

Autosomique Récessive:- LDLRAP1 (Très rare)

Formes Familiales d’hypercholestérolémiesMonogéniques

(pour revue Varret M. et al. Clin Genet. 2008: 73: 1-13)

Tall A. N Engl J Med. 2006, 354 (12): 1310-1312

Statin Treatment in Children with Familial hypercholesterolemia: The Younger, the betterRodenburg J. et al. Circulation. 2007: 116: 664-668

Phénotype variable…Risque d’atteinte coronaire>50% chez ♂ de 50 ans>30% chez ♀ de 60 ans

Dépistage de ces patients

Identification des sujets à Risquetrès élevé

Simon Broome Register (HEART UK) depuis 1980:FH certaine: CT > 2,9 g/L, LDL-C > 1,9 g/L (adulte) + Xanthomes

CT > 2,6 g/L, LDL-C > 1,6 g/L (< 16 ans) + Xanthomes

FH possible: ATCD familial IDM 1er degré (<50ans) 2ème degré (60ans)ou CT > 2,9 g/L chez parents 1er degré ou 2ème degré

MED PED (US + 14 pays) depuis 1995:Valeurs CT et LDL-C > 95ème percentile / âge et sexexanthomes, ATCD personnel ou familial IDM 1er degré

“Dutch Lipid Clinic Criteria” (1999):

Scores Diagnostic:> 8, Certain6 – 8 Probable3 – 5 Possible

Diagnosis scoring for clinical identification of children with hFH.Benlian P et al. J Pediatr Gastroenterol Nutr. 2009 Apr;48(4):456-63

Identification des sujets à Risquetrès élevé

Clinico-biologique versus Génétique !

Diagnostic Génétique en cascade: Cas Index: sélection Clinico-Biologique + identification mutation.

puis recherche mutation chez apparentés

Identification des sujets à Risquetrès élevé

Norvège, Pays-Bas, Angleterre: Efficacité: Lors du dépistage génétique des apparentés mutés- 38% Pays-Bas, 53% Norvège n’étaient pas traités (93%, 89% après)- 6% étaient aux objectifs thérapeutiques (Norvège)- 32% CT > 3 g/L (Angleterre)- uniquement 10% étaient correctement traités (Angleterre)

Bien toléré:2% Pays-Bas, 5% Norvège regrettent d’y avoir été soumis

Coût: / année de vie gagnée: 3300 £ (UK); 8700$ (Pays-Bas)à comparer aux 13300 $ par année de vie gagnée en prévention IIaire

Diagnostic Génétique en cascade: Notre expérience: LDL-C > 2,2 g/L + composante familiale>1100 sujets testés

- 850 cas index: 490 mutés (57%, dont 92% LDL-R, 8% apoB)- 280 apparentés: 200 mutés (71%)

Critères suggérés: LDL-C > 2,0 g/L + composante familiale

Identification des sujets à Risquetrès élevé

ApoCApoC--IIApoCApoC--IIII

PhospholipidePhospholipide

ApoAApoA--IIII

ApoEApoE

ApoAApoA--II

CholestCholestéérolrolNonNon--esterifiesterifiéé

Kannel WB. Am J Cardiol 1983;52:9B–12B.

HDL-C (g/L)

4.0

3.0

2.0

1.0

0,25 0,45 0,65ri

squ

eC

V

2.0

1.0

0

4.0

0.30.3 0.40.4

1010èèmeme

percentile percentile

Ferrières J, et al. Arch Mal Coeur Vaiss. 2005; 98(2):127-32

50 % à 70% de la variabilitéaurait un déterminisme génétique

Heller DA. et al., N Engl J Med, 1993, 328 ; 1150-1156Prenger VL. et al., Am J Hum Genet, 1992, 51 ; 1047-1057

Hypo-HDL

ApoCApoC--IIApoCApoC--IIII

PhospholipidePhospholipide

ApoAApoA--IIII

ApoEApoE

ApoAApoA--II

CholestCholestéérolrolNonNon--esterifiesterifiéé

Kannel WB. Am J Cardiol 1983;52:9B–12B.

HDL-C (g/L)

4.0

3.0

2.0

1.0

0,25 0,45 0,65ri

squ

eC

V

2.0

1.0

0

4.0

Hypo-HDL

50 % à 70% de la variabilitéaurait un déterminisme génétique

Génétique

Heller DA. et al., N Engl J Med, 1993, 328 ; 1150-1156Prenger VL. et al., Am J Hum Genet, 1992, 51 ; 1047-1057

MacrophageFoie

A-I

CECELCATECEC

CLCL

Bile

SCARBI

ECECCLCLFC

A-I

ABCA1

HDL MatureHDL

Naissante

Étiologies moléculaires d’hypoHDLémiesprimitives

apoAI, LCAT, ABCA1

MacrophageFoie

A-I

CECELCAT

ECECCLCL

Bile

SCARBI

ECEC

CLCLFC

A-I

ABCA1

HDL MatureHDL

Naissante

Étiologies moléculaires d’hypoHDLémiesprimitives

apoAI

Brewer (1978) séquence peptideBreslow (1982) Clonage gène

Plus de 30 mutants identifiés(Faux Sens+++)

Notion de Co-dominance“Homozygotes” > hétérozygotes

Opacités cornéennes possibles (Norum…)

Athérosclérose non systématiqueApoAI-Milano (Franceschini 1980)R173C… (IV, Nissen 2003)

MacrophageFoie

A-I

CECELCAT

ECECCLCL

Bile

SCARBI

ECEC

CLCLFC

A-I

ABCA1

HDL MatureHDL

Naissante

Étiologies moléculaires d’hypoHDLémiesprimitives

LCAT

Mac Lean (1986) Clonage gène

Norum et Gjone (1967)

Étiologies moléculaires d’hypoHDLémiesprimitives

LCAT

http://www.lcat.it

Défaut d’estérication du CholestérolMesure rapport

cholestérol estérifiécholestérol total

Anémie

Glomérulosclérose

Opacité Cornéenne

“Global”

DéficitFamilialLCAT(FLD)

“ciblé HDL”Maladie

YeuxPoisson

(FED)

MacrophageFoie

A-I

CECELCAT

ECECCLCL

Bile

SCARBI

ECEC

CLCLFC

A-I

ABCA1

HDL MatureHDL

Naissante

Étiologies moléculaires d’hypoHDLémiesprimitives

ABCAI

Tangier…Captain John Smith

(1608)

John Crockett(1686)

Dr Fredrickson(1960)

Étiologies moléculaires d’hypoHDLémiesprimitives

ABCAITangier…

Autosomique Récessif

Hépato-splénomégalieNeuropathie périphérique…

HypoHDLémieFamiliale

Co-Dominante

“Homozygotes” > hétérozygotes

Oram JF, Vaughan AM. Circ Res. 2006;99:1031-1043

Athérosclérose inconstante mais avérée:MT risque vasculaire 3 à 6 fois supérieur(Assmann G et al. In: Scriver C, Beaudet A, Sly W, et al., eds. The Metabolic and Molecular Bases of Inherited Diseases. 8th ed. New York: McGraw-Hill; 2001:2937-2960)50% des MT auraient une atteinte coronaire après 45 ans(Serfaty-Lacrosniere C et al. Atherosclerosis. 1994;107:85-98)

Étiologies moléculaires d’hypoHDLémiesprimitives

ABCAI

Cholesterol

ABCA1

LDL-R

HMG-CoA RedsER

Endosome

Freecholesterol

LCATCETPPLTP

HDL3

Peripheral cell

Lipid-freeApoA1

Nascent HDL

Brooks-Wilson A et al. Nat Genet. 1999;22:336-345Bodzioch M et al. Nat Genet. 1999;22:347-351Rust S et al. Nat Genet. 1999;22:352-355

0,1g/L < HDL-C ≤ 0,3 g/L 87 patients1 LCAT “FED” “homozygotes” (2 faux-sens, 0,11g/L)8 ApoA1 hétérozygotes (dont 2xMilano et 2x mut récurrente) 11 ABCA1 hétérozygotes (sur 46 sujets testés)

Épidémiologies moléculaires …

Cohorte de 110 sujets non apparentésHDL-C < 0,3 g/L

HDL-C ≤ 0,1 g/L 23 patients (90% mutés)14 ABCA1 “homozygotes” (8 délétions ou Stop; 20 faux-sens)2 ABCA1 hétérozygotes3 LCAT “FED” “homozygotes” (2 réarrangements; 4 faux-sens)2 ApoA1 hétérozygotes (mut récurrente)2 Non mutés

Étiologies moléculaires d’hypoHDLémiesprimitives

ABCAIFréquentes !!!

HDL-C < 0,3 g/L

HDL-C ≤ 0,1 g/L14/ 23 patients (61%)ABCA1 “homozygotes”

0,1g/L < HDL-C ≤ 0,3 g/L11 / 46 patients (24%)ABCA1 hétérozygotes

Étiologies moléculaires d’hypoHDLémiesprimitives

ABCAI

0,1g/L < HDL-C ≤ 0,3 g/L11 / 46 patients (24%)ABCA1 hétérozygotes…

Genetic variation in ABCA1 predicts ischemic heart disease in the general population.Frikke-Schmidt R. et al. ATVB. 2008 jan; 28: 181-186

Association of loss-of-function mutations in the ABCA1 gene with HDL-C levelsand risk of ischemic heart disease.

Frikke-Schmidt R. et al. JAMA. 2008 jun; 299: 2524-2532

PHRC 2010

Phénotypes !!!Tangier…HDL-C ≤ 0,1 g/L

4ABCA1 “homozygotes” perte de fonctionpseudosyringomyélie

Diagnostic Génétique: Comment ?Aspects législatifs Lois de bioéthique 1994, Décret d’application en 2000

Nouvelles lois de bioéthique en Août 2004Décret d’application en 04/2008

Diagnostic Génétique: Comment ?Prescription de l’examen génétique par équipe pluridisciplinaire (cliniques et génétiques) spécialisée notamment lors d’une hospitalisation (HDJ) pour apprécier le retentissement vasculaire de la dyslipidémie.

Prélèvement, en lui-même très simple:«2» tubes de 7ml sang total sur EDTA

Acheminés à température ambiante (<72h)

Laboratoires du Réseau de diagnostic Génétique des dyslipidémies rares:

Laboratoires du Réseau Nationalde diagnostic Génétique des dyslipidémies rares:

UF Dyslipidémies-CardiobiologieDr Agnès SASSOLAS

Groupement Hospitalier EST 59 Boulevard Pinel

69677 Lyon-Bron Cedex 07

Biochimie-Biologie MoléculaireDr Pascale BENLIAN Hôpital Saint Antoine

184 Rue du Faubourg Saint Antoine 75012 PARIS Cedex 12

Laboratoire de Biochimie et de Génétique MoléculaireDr Jean-Pierre RABÈSHôpital Ambroise Paré

9 Avenue Charles de Gaulle92104 BOULOGNE Cedex

Centre de Génétique Moléculaire et ChromosomiqueDr Alain CARRIÉ

UF Endocrinologie Moléculaire, Bât 6 Lapeyronie, Secteur Pitié

GH Pitié Salpêtrière, 47-83 Bd de l’Hôpital75651 PARIS Cedex 13