Rétroinhibition ultra courte de la sécrétion de TSH par action de masse

BIOCHIMIE, 1971, 53, 1213-1217.

Rdtroinhibition ultra courte de la sderdtion de TSH par action de masse.

Alain LEONI, Bernard HAYE et Claude JACQUEMIN. L a b o r a t o i r e de B i o c h i m i e e t C e n t r e de B io log ic et de B i o c h i m i e du D d v e l o p p e m e n t ,

F acu l t d des S c i e n c e s , B.P. n ° 347, 5 1 - R e i m s (France) . (22-7-1971).

S u m m a r y . - - We report evidence obtained' in vitro for a new type of control of TSH secretion by an ultra-short feedback mechanism in which the concentration of hormone bathing the pituitary affects further release of the hormone by a mass action effect.

This effect is specific and eventually the TSH synthesis is affected. The physiological significance is discussed.

INTRO,DUCTION.

Au eours d 'un t ravai l ant6rieur [11 dans lequel nous avons d6eri t la biosynth6se in v i t ro de la thyr6ost i lnul ine tri t i6e de mouton (TSH) et sa purif icat ion nous avons retrouv6 un r6sultat de SOLOMON et MACKENZIE [2] tendant h mon t r e r l ' exis tence d 'un contr61e par r6 t ro inhib i t ion de la l ib6rat ion de cette hormone dans le mi l ieu d ' in- cubation. La l ib6rat ion de prot6ines marqu6es, rap ide au d6but de l ' incubat ion de tissu ant6- hypophysa i re en pr6sence de 3H-tyrosine, d iminue progress ivement pour s 'annuler apr6s 15 minutes. Le changement du mi l ieu d ' incubat ion pe rme t une repr ise de la l ib6rat ion de prot6ines trit i6es et son arr~t dans des condi t ions analogues. Nous avons 1 m obtenir la l ib6rat ion de prot6ines tri t i6es avec une vitesse constante en renouvelant le mil ieu cont inuel lement h l ' a ide d 'une poinpe doseuse. Ces exp@iences nous avaient conduits h consid6rer que le eontr61e de la << s6er6tion >> des prot6ines hypophysa i res in v i t ro 6tait dfi "~ l ' accumula t ion de celles-ei dans le mil ieu d ' incubat ion. Nous ne pouvons cependant pas '5 l ' a ide de ees r6sultats, 6carter l '6ventnalit6 d 'un 6puisenaent du mil ieu per turbant la biosynth6se et par vote de cons6- quence la l ibbrat ion des prot6ines dans le milieu. Nous avons donc repr is l '6tude de ee ph6nom6ne de mani6re h isoler la TSH parrot l ' ensemble des prot6ines exportables hypophysa i res pour en 6va- luer la sp6cificit6.

MAT]~RIEL ET MI~THODES.

L'activit6 biologique de TSH a 6t6 d6termin6e par la mesure de la s t imulat ion de l ' i nco rpora t ion de 32p (CEA Saclay France) dans les phospho- l ipides thyro id iens [,3-5]. Une gamme 6talon est

faite avec de la TSH porc ine (0,5 mU/mg) (*). Les glandes de porcs sont obtenues aux abattoirs (**) et utilis6es dans l 'heure qui suit le sacrifice des animaux. Les thyroides sont d6coup6es avec un rasoir de Stadie Riggs. Dans le cas de l ' incubat ion des ant6hypophyses , les glandes sont coup6es sagi t ta lement de faqon h p r6pare r deux lots aussi semblables que possible. L ' ineuba t ion des lots (400 mg/ml) est poursu iv ie h 37 ° dans un mil ieu d6crit pa r CAMPAGNE et GnUBEn [6]. Pour les 6tudes d ' incorpora t ion , la ty ros ine est remplac6e par H3-tyrosine (12,8 Ci/mM) h ra ison de 0,4 mCi / nil de mil ieu. A la fin de l ' i ncuba t ion les tissns sont ret ir6s du milieu, r inc6s et d6shydrat6s h l 'ac6tone. Les glycoprot6ines sont extrai tes de la poudre ac6tonique par percola t ion alcool ique [7]. Les mi l i eux d ' incubat ion sont percol6s sur S6pha- dex G~0 ( tampon (NH 4) HCO 3 10 -2 M, pH 9,1) pour 61trainer 3H-tyrosine.

Des par t ies aliquotes des extra i ts glycopro- t6iques ou des mi l ieux d ' incubat ions sont analy- s6es par 61ectrofocalisation sur colonne d 'Ampho- lines (LKB 8101 - LKB-Produkter AB - Bromma 1 - Su6de). Le gradient de pH s'6tend de 7 h 10 et est stabilis6 par un gradient de densit6 de saccharose de 0 h 46 p. cent (P/P). Dans ces condi t ions exp6- r imentales , on dist ingue essent ie l lement trois frac- tions prot6iques (fig. 2 a). Pour rep6re r la posi- t ion des hormones ant6hypophysaires , nous avons effectu6 des analyses par 61ectrofocalisation h dif- f6rents stades de la pur i f ica t ion de TSH par les m6thodes classiques [7, 8], dont nous allons rap- peler les 6tapes pr inc ipa les :

(*) Nous remercions les laboratoires Endopancrinc qui nous ont donn6 cette prdparation.

(**) Nous remercions les abattoirs de Reims qui nous ont fourni les glandes.

1 2 1 4 Alain Leoni, Bernard Huge et Claude Jacquemin .

1. L ' e x t r a i t g l y c o p r o t 6 i q u e , q u i r e n f e r m e TSH, LH, F S H et de pe t i t e s q u a n t i t 6 s de GH, est c h r o - m a t o g r a p h i 6 s u r c a r b o x y m 6 t h y l - c e l l u l o s e (CM-C) h p H 6,2. D a n s ces c o n d i t i o n s , la F S H n ' e s t p a s r e t e n u e [9!. LH et TSH, f ix6es s u r la c o l o n n e , s o n t

t i ons , L H en m a j e u r e p a r t i e , n ' e s t pus r e t e n u e [10]. La TSH est 61u6e p a r u n g r a d i e n t de f o r c e i o n i q u e . L ' 6 1 e c t r o f o c a l i s a t i o n de la f r a c t i o n r e t e n u e m o n t r e u n e i m p o r t a n t e d i m i n u t i o n d u d e u x i 6 m e p i c ( p o i n t i so61ec t r ique m o y e n = 7,5) ( t a b l e a u I).

TABLEAU ~[.

Contrdle de la purification de TSH par ~lectrofocalisation sur colonne d'Ampholines (pH 7-10).

Ext ra i t g lycoprot ( ! ique renfermant TSH. LH, FSH.

F r a c t i o n r e t e n u e sur CM-C renfermant LH et TSH.

F r a c t i o n r e t e n u e sur DEAE-C renfermant TSH.

R6partition des prot6ines eup . cent dabs les fractions

d'dlectrofocalisation

l ]I III

27 11 62

75 13 12

85 3 12

Activit6 TSII U/rag

0,5

2 ,4

11,0

61u6es p a r u n g r a d i e n t de f o r c e i o n i q u e . L '61ectro- f o c a l i s a t i o n de la f r a c t i o n r e t e n u e m o n t r e u n e t r6s f o r t e d i m i n u t i o n du t r o i s i b m e p i c ( p o i n t iso61ec- t r i q u e m o y e n = 4,5) ( t a b l e a u I).

2. A p r 6 s c h a n g e m e n t de t a m p o n , la f r a c t i o n r e t e n u e s u r CM-C est p e r c o l 6 e h p H 9,5 s u r d i 6 t h y l - a m i n o 6 t h y 1 - c e l l u l o s e (DEAE-C) . DaBs ces c o n d i -

Les r6 su l t a t s de ce t r a v a i l p r 6 1 i m i n a i r e , n o u s o n t c o n d u i t s h c o n s i d 6 r e r que le p r e m i e r p i c r e n f e r m e TSH, le s e c o n d , L H et le t r o i s i 6 m e , FSH. L ' h 6 t 6 r o - g6n6i t6 de TSH s u r c o l o n n e d ' A m p h o l i n e s , d 6 c r i t e p a r FAWCE=TT et coll . a 6t6 r e t r o u v 6 e [11]. L o r s q u e l ' 6 1 e c t r o f o c a l i s a t i o n es t e f fec tu6e d i r e c t e m e n t s u r u n m i l i e u d ' i n c u b a t i o n , la t r o i s i 6 m e f r a c t i o n r e n - f e r m e en o u t r e L T H et GH.

TABLEAU I I .

Dosage de l'activit~. TSH par mesure de la stimulation << i n v i t r o >> de l'incorporation de 8zp

dans les phospholipides de coupes de thyroi'de de porc.

A - - Milieu d ' incuba t ion d 'h6mian t6hypophyses de pore apr6s 30, 60 et 90 minu tes duns le mdme mil ieu.

B - - Mil ieux d ' incuba t ions d 'h6mian t6hypophyses de porc apr6s. 30, 60 et 90 minutes , le mi l i eu est chang6 apr6s 30 et 60 minutes .

3up incorpor6 dans les phospholipides thyroidiens 3 h.

fi 37 o (cpm/mg de tissu)

T6moin . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . / 18,3 -+- 1,2 I

30 r a n . . . 24,9 ~___ 1,4 Expdrience A 60 m n . . . 24,0 -]- 0 ,6

90 r a n . . . 28,6 -4- 4 ,0

30 m n . . . 25,5 -~- 1,5 Experience B 60 r a n . . . 27,3 ___~ 4,1

90 r a n . . . 22,6 -~- 2 ,6

p. cent de stimulation par rapport au t~moit~

IO0

,

156

139 149 132

Une st , imulat ion moyenne de 140 p. cent correspond d'apr6s la courbe d 'dtalon- nage h une concent ra t ion de 137 _ 7 m U / m l mi l i eu /g antdhypophyse .

BIOCHIMIE, 1971, 53, n ° 11- 12.

Rdlroinhibi t ion ultra courte de la sdcrdtion de TSH par action de masse. 1215

RI~SULTATS.

P o u r v6r i f ie r que la c o n c e n t r a t i o n de la T S H l ib~r6e dans un m i l i e u d ' i n c u b a t i o n de t i ssu ant6- h y p o p h y s a i r e a t t e in t r a p i d e m e n t une c o n c e n t r a - t ion l imi te , nous a v o n s effectu6 deux e x p 6 r i e n c e s parall61es. Dans la p r e m i 6 r e (A) un dosage de l ' a c t iv i t6 T SH p r 6 s e n t e dans le m i l i e u a 6t6 effee- tu6 sur des pa r t i e s a l iquo tes pr61ev6es apr6s 3,0, 60 et 90 m i n u t e s d ' i n c u b a t i o n . Dans la s e c o n d e (B) les t issus son t chang6s de m i l i e u apr6s 30 et 60 minu te s , l ' a c t iv i t6 TSH est dos6e su r des al i- quo tes de c h a q u e m i l i e u soi t apr6s 30, 60 et 90 mi - nutes d ' i n c u b a t i o n . Les r6sul ta ts son t r a p p o r t ~ s dans le t ab leau II.

On cons ta te que dans l ' e x p 6 r i e n c e A la c o n c e n - t r a t i on de TSH qu i est de 137 __ 7 m U / m l / g apr6s 30 minu t e s ne v a r i e p lus s i g n i f i c a t i v e m e n t apr6s 60 ou 90 minu t e s d ' i n c u b a t i o n . Dans l ' e x p 6 r i e n c e B le c h a n g e m e n t de m i l i e u apr6s 3,0 et 60 m i n u t e s d ' i n c u b a t i o n p e r m e t la l i b6 ra t i on en 30 m i n u t e s d ' u n e nouve l l e quan t i t 6 de T S H qui est 6gale fi cel le s6cr6t6e apr6s les 30 p r e m i 6 r e s minu te s . P o u r

Absorption o 276 nm Cpmx10-31

] '' ! I !

o,3- 41 I I

,,,, .if \h + / " ' \ ,/7 7:.: h,l

°' l ,, \ ~'L,~Y "° l~i " K!

a p p o r t e r u n e d 6 m o n s t r a t i o n du r61e de TSH dans ce eontr61e et 6ca r t e r l ' 6ven tna l i t6 d ' u n ph6no- m6ne non sp6c i f ique se r 6 p e r c u t a n t su r la s6cr6- t ion de l ' e n s e i n b l e des p ro t6 ines nous avons 6t6 amen6s fi d 6 c r i r e une m 6 t h o d e a n a l y t i q u e p e r m e t - tan t la s 6 p a r a t i o n d i r ec t e et non 6 q u i v o q u e de TSH des au t res h o r m o n e s h y p o p h y s a i r e s .

L ' 61ee t ro foca l i s a t i on sur A m p h o l i n e s app l iqu6e fi un m a t 6 r i e l brfit , ne cons t i t ue pas , en toute r igueur , u n e m 6 t h o d e de pur i f i ica t ion des h o r - mones a n t 6 h y p o p h y s a i r e s . I1 ne fa i t pa s de dou te

~Absorphon ~ 276nm CpmJ xl0- '10

14 . . . . . . . . . . . . . . . . . I ' °

I I i o ~10

a //\'I i TSH

25 50 75 m[

Absorption ~ 2 7 6 nm Cpm to ~ x lO-3! ,#'----....

' ",- . . . . I 1

° ~> "/ i ' /".-.J I

I I I~0 t l ,, Y XLJ

, f:"\ /Go# '- \ 7

AbsorpHon 6 276nm Cprn-3

! ~0]pH x~0

T l i . . . . . . . . . . . ~

i 'I ~; ¢ "%

o 25 50 75 "too ml

Fro. 1. - - Analyse par 61eetrofoealisation sur ampho- lines (pH 7-10) des prot6ines contenues dans le mil ieu d ' ineubation d'ant6hypophyses de porc. a) - - mil ieu t6moin. b) - - mil ieu suppl6ment6 avee TSH 300 mU/ml .

Absorption h 276 nm - - ¢ - - o - - Radioaetivit6 - - 0 - - 0 •

FIG. 2. - - Analyse par 61ectrofocalisation sur ampho- lines (pH 7-10) des prot6ines contenues dans un extrai t d 'ant6hypoohyses de porc, incub6es. a) - - dans un mil ieu t6moin. b) - - dans un mil ieu suppl6ment6 avec TSH 300

mU/ml . Absorption h 276 nm- -O o - - R a d i o a c t i v i t 6 --O O--

que les t ro i s f r a c t i o n s que nous a p p e l o n s TSH, LH et FSH, ne son t pas cons t i tu6es e x c l u s i v e m e n t p a r des p r o t 6 i n e s dou6es d ' ac t iv i t6 h o r m o n a l e . N6an- moins , la r 6 p a r t i t i o n p r o p o s 6 e de TSH, L H et F S H en t re les t ro i s f r ac t i ons , est c o m p a t i b l e avec l '6vo- lu t ion de l e u r t e n e u r en p r o t 6 i n e s au cou r s de la p u r i f i c a t i o n de T S H ( tableau I).

L ' e x p 6 r i e n c e a 0 6 c o n d u i t e de la m a n i 6 r e sui- van te : deux lots i d e n t i q u e s de t i ssu a n t 6 h y p o p h y - sa i re sont i ncub6s avec ZH-tyros ine en p r 6 s e n c e

BIOCHIM1E, 1971, 53, n ° 11- 12. 82

1216 A lain Leoni, Bernard Hage et Claude Jacquemin .

ou non de TSH exog6ne h la concent ra t ion de 300 m U / m l . Apr6s 3 heures d ' incubat ion, les tissus sont s6par6s des mi l ieux ; ces derniers sont perco- 16s sur S6phadex G~0 pour les d6barrasser de 3H- tyros ine et de I 'ACTH. D'autre par t les g lycopro- t6ines sont extrai tes des tissus. Les prot6ines des deux extraits glycoprot6iques et des deux mi l i eux d ' incuba t ion sont analys6es sur colonne d 'Am- pholines.

la synth6se ; la radioact iv i t6 sp6cifique de TSH 6tant diminu6e par rappor t h celle du t6moin (tableau IIIb).

DIISCUSSION.

Les r6sultats que nous venons de r appor t e r mont ren t que la concent ra t ion de TSH dans le mil ieu d ' incuba t ion de coupes d ' an t6hypophyse de

TABLEAU III.

Concentration et activitd sp~cifique des hormones hgpophgsaires pr~- sentes dans les milieax d'incubation et les extraits glycoprotdiques d'antdhypophyses incub~es 3 heures en prdsence ou en absence de TSH exog~ne (300 mU/ml).

(a)

Milieux d'incubation

T&noin . . . . . Concentration mg/ml -~- TSH . . . . .

Radioactivit~ sp~cifique Tfimoin . . . . . cpm/mg -~ TSH . . . . .

I

(TSH)

4,48

8 200 0

II

(LH)

1,2 1,2

27 000 21 000

III~ (FSH et autres

prot6ines acides)

5.8 5,6

40 000 33 000

(b)

Extraits glycoproteiques

T~moin . . . . . Concentration mg/ml -~- TSH . . . . .

Radioactivitd sp6ciflque T6moin . . . . . cmp/mg -~- TSH . . . . .

I (TSH)

1,02 0,90

12 300 7 900

(LH)

0 ,34 0,34

39 000 42 000

III

(FSH)

1,97 2,20

66 000 61 000

La figure 1 repr6sente le profil d'61ution de la colonne aprbs 61ectrofocalisation des prot6ines des mi l ieux d ' incuba t ion : on constate que clans le mi l ieu qui contenai t de la TSH exog6ne ( lb) , le p remie r p ic ne r en fe rme pas de prot6ines tri- ti6es alors que celles-ci sont pr6sentes dans le mi- l ieu t6moin (la). Les p ropor t ions relat ives des autres prot6ines ne sont pas s ignif ica t ivement affect6es par l ' i n t roduc t ion de TSH exog6ne au d6but de l ' incubat ion (tableau IIIa). La figure 2 mont re les r6sultats de la m6me analyse effectu6e sur les extrai ts glycoprot6iques des coupes t6moins (2a) et incub6es en pr6sence de TSH exog6ne (2b).

On constate que TSH a 6t6 n6osynth6tis6e clans les deux cas mais que n6anmoins l ' inh ib i t ion de la s6cr6tion par la TSH exog6ne s'est r6percut6e sur

BIOCH1MIE, 1971, 53, n ° 11- 12.

porc ne d6passe jamais une valeur moyenne de 137 m U / m l / g soit 1,22. 10-7 M si l 'on assigne une masse mol6cula i re de 28 000 h cette ho rm one et une activit6 b io logique de 40 U/mg) . L 'ana lyse du mi l ieu d ' incuba t ion ou d 'un extrai t g lycoprot6 ique par 61ectrofocalisation sur amphol ines pe rmet la s6paration de TSH des autres prot6ines hypo- physaires .

Lorsque l ' incuba t ion a 6t6 effectu6e dans un mi- lieu renfe rmant de la tyros ine trit i6e et de la TSt t exog6ne ~ la concen t ra t ion de 300 m U / m l , on constate une absence complbte de s6cr6tion de 3H-TSH. Les autres prot6ines hypophysa i re s lib6- r6es dans le mi l ieu ne pr6sentent pas, des radio- activit6s sp6cifiques s ignif icat ivement diff6rentes

R d l r o i n h i b i t i o n u l t r a c o u r t e de la s d c r d t i o n de T S H p a r a c t i o n de m a s s e . 1217

de ce l les qu ' e l l e s o n t d a n s u n e e x p 6 r i e n c e t 6 m o i n . On p e u t r e m a r q u e r "& ce t t e o c c a s i o n que tou te s

les p r o t 6 i n e s h y p o p h y s a i r e s ne p r 6 s e n t e n t p a s ]a m 6 m e r a d i o a c t i v i t 6 sp6c i f ique , ce q u i p e r m e t d ' e n - v i s a g e r que l e u r s v i t e s se s de s y n t h 6 s e s o n t diff6- r e n t e s , p o u r a u t a n t que l e u r t e n e u r e n t y r o s i n e so i t du m 6 m e o r d r e . De m S m e a p r 6 s u n e i n c u b a - t i o n longue , l o r s q u e la c o n c e n t r a t i o n des p r o t 6 i n e s l i b 6 r @ s d a n s le m i l i e u cesse d ' a u g m e n t e r , o n c o n s t a t e que la r a d i o a c t i v i t 6 sp6c i f ique de c h a c u n e des t r o i s f r a c t i o n s s 6 p a r 6 e s h p a r t i r de l ' e x t r a i t g l y c o p r o t 6 i q u e des i i s sus , est s u p 6 r i e u r e h cel le des f r a c t i o n s c o r r e s p o n d a n t e s i so l6es h p a r t i r du m i l i e u d ' i n c u b a t i o n . Le r a l e n t i s s e m e n t de la b io - s y n t h 6 s e p r o t 6 i q u e que l ' o n o b s e r v e l o r s d e F in - c u b a t i o n in v i tro de t i s su a n t 6 h y p o p h y s a i r e es t d o n c dO h u n e i n h i b i t i o n de la l i b 6 r a t i o n d a n s le m i l i e u des p r o t 6 i n e s n 6 o s y n t h 6 t i s 6 e s . Cet a r r 6 t de <~ s 6 c r 6 t i o n >~ t o u c h e l ' e n s e m b l e des p r o t 6 i n e s ] ib6- r6es p a r le t i s s u a n t 6 h y p o p h y s a i r e en effe t l e u r r a d i o a c t i v i t 6 g loba l e n ' 6 v o l u e p l u s au b o u t de 30 m i n u t e s [ l J . L a g6n6ra l i t6 de ce t ef fe t n ' e s t c e p e n d a n t p a s u n i n d i c e de n o n sp6c i f i c i t6 , c a r i l est p o s s i b l e d ' a g i r s 6 1 e c t i v e m e n t s u r la s 6 c r 6 t i o n d ' u n e seule e s p 6 c e p r o t 6 i q u e . Nous d 6 c r i v o n s i c i u n n o u v e a u m o d e de r 6 g u l a t i o n de la p r o d u c t i o n de la TSH p a r a c t i o n de m a s s e que n o u s p r o p o - s o n s d ' a p p e l e r r 6 t r o i n h i b i t i o n u l t r a - c o u r t e << u l t r a s h o r t f e e d - b a c k >>. D ' a p r 6 s les r 6 s u l t a t s p r61 imi - n a i r e s r 6 c e n t s de KASTIN et coll . [9~ i l s e m b l e q u ' u n p h 6 n o m b n e a n a l o g u e i n t e r v i e n n e d a n s la r 6 g u l a t i o n de la s 6 c r 6 t i o n de la MSH.

Le r61e p h y s i o l o g i q u e de ce m o d e de con t r61e r e s l e h d 6 m o n t r e r ; e n p a r t i c u l i e r i l c o n v i e n d r a i t d ' e n 6 t a b l i r la p r o g r e s s i v i t 6 en f o n c t i o n de la dose. Nous p o s s 6 d o n s c e p e n d a n t d ' o r e s et d6j~ u n a rgu- m e n t c o n t r e u n c a r a c t 6 r e de p h 6 n o m 6 n e ~ seui l d e v e n a n t e f f i cace s e u l e m e n t p o u r des doses e x t r a - p h y s i o l o g i q u e s , d a n s le fa i r que la v i t e s s e de l ib6- r a t i o n des p r o t 6 i n e s m a r q u 6 e s dar ts le m i l i e u es t d ' o r d r e 1 d6s le d 6 b u t de l ' i n c u b a t i o n [1]. On p e u t p e n s e r que ce m 6 c a n i s m e de r 6 g u l a t i o n es t i m p l i - qu6 chez des a n i m a u x t h y r o i d e e t o m i s 6 s . E n effet la r 6 t r o i n h i b i t i o n due ~ la t h y r o x i n e << l o n g feed- b a c k >> n ' e x i s t e p l u s et ne p e u t a n t a g o n i s e r la s t i - m u l a t i o n de l ' h y p o p h y s e p a r le T R F [13]. D a n s ces c o n d i t i o n s la r 6 t r o a c t i o n p o s i t i v e c o u r t e << s h o r t f e e d - b a c k >~, d 6 c r i t e p a r MOTTA et coll . [14], qu i p r o v o q u e u n e s t i m u l a t i o n de la s 6 c r 6 t i o n du T R F p a r la T SH d e v r a i t e n t r a i n e r u n e s6cr6- t i on t o u j o u r s p l u s a c c r u e de ce t t e d e r n i 6 r e .

D ' a p r 6 s ces m 6 m e s a u t e u r s la t e n e u r p l a s m a t i q u e en TSH d ' a n i m a u x t h y r o i d e c t o m i s 6 s t r a i t 6 s p a r de la TSH e x o g ~ n e est s u p 6 r i e u r e h ce l le d ' a n i m a u x t 6 m o i n s m a t s n e v a r i e p l u s e n t r e 2 h e t 24 h. Le c o n t r S l e d i r e c t de la s 6 c r 6 t i o n de T S H en f o n c t i o n de sa c o n c e n t r a t i o n p l a s m a t i q u e ¢ u l t r a s h o r t feed- b a c k >> est p e u t O r e r e s p o n s a b l e d e la l i m i t a t i o n de l ' e f fe t de la r 6 t r o a c t i o n p o s i t i v e c o u r t e <~ s h o r t f e e d - b a c k >> de TSH su r l ' h y p o t h a l a m u s .

Remerciements.

Nous remerc ions Monsieur LAMBERT Bernard qui nous a init id h la t e c h n i q u e d '61ectrofoca l i sa t ion sur Amphol ine .

P~SUME.

Ce t r ava i l d6montre l 'exis tence ¢ in vitro >> d 'un nou- veau disposi t i f de contr61e de la s6cr6tion de la thyr6o- s t imul ine en fonct ion de sa propre concen t ra t ion dans le m, ilieu. Cet effet est sp6cifique de 1 'hormone il se r6percute h long terme sur la b iosynth6se dont ]a vitesse d iminue . Son r61e physio logique est diseut6.

ZUSAMMENFASSUNG.

Diese Arbei t beweis t die Exis tenz ¢ in vitro >> eines neuen Kont ro l l sys tems der Thyreos t imul insekre t ion als F u n k t i o n seiner eigenen mi t t l e r en Konzentra t ion. Dieser Effekt ist hormonspezif isch, er wi rk t sich lang- fr is t ig auf die Biosynthese aus, deren Geschvcindigkeit abn immt . Seine physiologische Bedeu tung wird erSrtert .

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