TraceFinder 4.1とCompound Discoverer 2.1を組み合わせた ......Mass tolerance を5 ppm...

d:\tracefinderdata\...\180608_veg_006 06/08/18 22:02:32 vege, 21TG5SilMS, 30m x 0.25mm, df0.25um, prepcycle sequential derivatization

RT: 11.982 - 12.429

12.00 12.05 12.10 12.15 12.20 12.25 12.30 12.35 12.40Time (min)

0

1000000000

2000000000

3000000000

4000000000

5000000000

6000000000

7000000000

8000000000

9000000000

10000000000

Rel

ative

Abun

danc

e

NL:1.00E10m/z= 174.11205-174.11379 MS 180608_veg_010NL:1.00E10m/z= 173.61292-174.61292 MS 180608_veg_010

RT: 11.982 - 12.429

12.00 12.05 12.10 12.15 12.20 12.25 12.30 12.35 12.40Time (min)

0

100000000

200000000

300000000

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600000000

700000000

800000000

900000000

1000000000

Rel

ative

Abun

danc

e

NL:1.00E9m/z= 174.11205-174.11379 MS 180608_veg_006NL:1.00E9m/z= 173.61292-174.61292 MS 180608_veg_006

174.04 174.05 174.06 174.07 174.08 174.09 174.10 174.11 174.12 174.13 174.14 174.15 174.16 174.17m/z

0

5000

10000

15000

20000

0

20

40

60

80

100

Rel

ative

Abun

danc

e

174.09440

174.11243

174.10105

NL:2.75E8180608_veg_006#3287-3304 RT: 12.190-12.240 AV: 18 T: FTMS + p EI Ful l ms [50.0000-700.0000]

NL:2.04E4

c7 h 20 n 1si 2 *0.60 + c7 h 16 o 2 n 1si 1*1.00: p (gss, s/p:40) Chrg 1R: 10000 Res.Pwr . @FWHM

Thermo Fisher Scientific • 3-9 Moriya-cho, Kanagawa-ku • Yokohama, Kanagawa 221-0022 • www.thermofisher.com

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山本 五秋サーモフィッシャーサイエンティフィック株式会社 クロマトグラフィー＆MS事業部 CMSアプリケーション部

TraceFinder 4.1とCompound Discoverer 2.1を組み合わせたGC Orbitrapシステムのための探索的解析ワークフロー

INTRODUCTIONThermo ScientificTM GC OrbitrapTMシステムにより取得したデータについて、解析ソフトウェアThermo Scientific TraceFinderTM 4.1 とThermo Scientific Compound DiscovererTM 2.1 を組み合わせた探索的解析ワークフローを適用し、食品関連サンプルの差分解析を行った事例をご紹介します。

Thermo Scientific Q Exactive™ GC

最大分解能 120,000 （FWHM @ m/z 200）

質量精度 4

Sample AGABA 多

Sample BGABA 少

赤：±0.5 Da黒：±5 ppm

赤：±0.5 Da黒：±5 ppm

✓ ×XICm/z 174.11292

XICm/z 174.11292

Sample BGABA 少

Matrix GABA

図8. Compound Discverer 2.1による差分解析結果

図9. TraceFinder 4.1のデコンボリューションとライブラリサーチ結果（GABA 3TMSの例）

サンプル4、5

拡大

180621_tea_arrow_006 06/22/18 00:34:09 tea 4TG-WaxMS, 30m x 0.25mm,df0.25um

RT: 11.000 - 14.000 SM: 5G

11.0 11.2 11.4 11.6 11.8 12.0 12.2 12.4 12.6 12.8 13.0 13.2 13.4 13.6 13.8 14.0Time (min)

0

1000000

2000000

3000000

4000000

5000000

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11000000

12000000

13000000

14000000

15000000

160000000

1000000

2000000

3000000

4000000

5000000

6000000

7000000

8000000

9000000

10000000

11000000

12000000

13000000

14000000

15000000

Relativ

e Ab

unda

nce

NL:6.27E7m/z= 133.07593-133.07727 MS 180621_tea_arrow_006

NL:6.49E7m/z= 132.57660-133.57660 MS 180621_tea_arrow_006

Mass toleranceを5 ppmにすることで、ユニットマス分解能では干渉を受けるような場合でも信頼性の高い類縁体探索が可能となります。

まとめ TraceFinder 4.1のデコンボリューション機能により、ピーク検出－デコンボ

リューション－ライブラリサーチをセミオートで実施することができます。

TraceFinder 4.1により得られたピークリストをCompound Discoverer 2.1にインポートし、ピークピッキングから多変量解析まで実施することで、効率的な差分解析が可能です。

Orbitrapの高分解能／高質量精度のスペクトルにより、マトリックスの影響が最小限に抑えられた解析結果が得られます。

図1. Q Exactive GC システムの特長

図2. TraceFinder 4.1 with Deconvolution Plug-inによるデコンボリューション／ライブラリサーチの流れ

図3. TraceFinder 4.1 with Deconvolution Plug-inによるデコンボリューション

図4. TraceFinder 4.1 with Deconvolution Plug-inによるHigh Resolution Filtering Scoring

図5. デコンボリューション／ライブラリサーチ結果の例

SI（スペクトル類似度）、HRFスコアといったマススペクトル情報だけでなくRetention Indexによる評価も可能です。

図6. Compound Discoverer 2.1を用いた解析の流れ

図7. TriPlus RSH（左側写真）によるシーケンシャル誘導体化のスケジュール画面

図13. C8H9N2のフラグメント（m/z 133. 07660）のXIC比較上段：Mass tolerance ±5 ppm、下段：Mass tolerance ±500 mmu

図12. 差分解析により抽出されたピラジン類とそのXIC

分解能 60000で測定することでマトリックス干渉を完全に回避できました。

PCAにて分離不十分なサンプル4と5についてVolcanoプロットで詳細に差分解析しました。