La confection du frottis sanguin

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Le frottis sanguin

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1. But Le frottis sanguin permet : - D’observer et de noter la morphologie des GR. - D’établir la formule leucocytaire, c'est-à-dire d’identifier les différents types de leucocytes et d’établir le pourcentage de chacun. - D’observer les plaquettes (étude qualitative).

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2. Principe

Il s’agit de préparer un étalement mince d’une goutte de sang sur une lame de verre ; après une coloration appropriée, le frottis est observé au microscope avec l’objectif à immersion.

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3. Matériel - lames de verre propres et dégraissées, Il ne faut jamais poser les doigts sur la surface pour ne pas laisser d’empreintes grasses. - lame à bords rodés ou lame plus étroite que les précédentes, pour que les bords du frottis soient à distance des bords de la lame facilitant ainsi l’observation au microscope.

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Déposer une goutte de sang de 2mm de diamètre (prélèvement veineux ou capillaire) à 1 cm de l’extrémité de la lame.

4.Technique

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Placer le bord de la lame rodée sur une lame et glisser celle-ci jusqu'à ce quelle entre en contact avec la goutte, en maintenant un angle d’environ 45° .la goutte de sang s’étale le long de l’arête par capillarite.

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D’un mouvement souple et régulier, étaler la goutte de sang.

Sécher complètement le frottis à l’air pour bien conserver la forme des GR et éviter la formation d’artéfacts.

Identifier le frottis à une extrémité de la lame.

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Qualité du frottis Le frottis sanguin doit être régulier (sans coupures), avec des bords parallèles à la lame mais distants de ceux-ci et avec l’extrémité arrondie ou en pinceau. Ne doit pas présenter de trous ni de stries (lame mal dégraissée).Le frottis sanguin ne doit pas être trop épais ni trop mince.

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Ce qu’il ne faut pas faire

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• un étalement rapide donnera un frottis plus épais (utile dans les anémies)

• un étalement lent donnera un frottis plus mince (utile dans les polyglobulies et les leucoconcentrations).

Variations

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• l’angle de la lame rodée peut affecter l’épaisseur du frottis .si l’angle est supérieur à 45°, le frottis sera plus épais et plus court, par contre, si l’angle est inferieur à 45°, le frottis sera plus mince et plus long

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Merci pour votre attention