Upload
vuongdiep
View
220
Download
0
Embed Size (px)
Citation preview
Apport de l’anatomo-cyto-pathologie (ACP)Missions, Moyens, Exemples
DIU d’onco-gériatrie5 février 2014Dr Jean-François Côté
PLAN{ ACP
z Prélèvement cytologie/histologie{ Bon d’envoi{ Étapes techniques
{ Rôle pathologiste:z Dépistage z Diagnostic (outils utilisés)z Pronostic
{ Aide à la thérapeutiquez Proposition thérapeutiquez Appréciation de la réponse au traitement
{ Recherche{ Exemples stratégies
z Cancer du poumon
« Les médecins pathologistes ont un rôleméconnu mais irremplaçable encancérologie tant dans le domaine deshémopathies que des tumeurs solides »
Plan cancer 2009-2013
ACPCarrefour de multiples spécialités
Chirurgie
Radiologie
Médecine
Biologie
Chirurgie
Radiologie
Médecine
Biologie
ACP
ACPCarrefour de multiples spécialités
Prélèvement (Rappel)Différentes étapes
{ Réception du prélèvement (cyto/histo) + son bon d’envoi
{ Enregistrement{ Technique (obligatoire){ Examen des lames{ Compte-rendu+++{ Archivage blocs et lames
Réception du prélèvement Enregistrement
{ À la réception du prélèvement (cyto/histo) avec bon d’envoi signéz Ne peut se faire que si le bon d’envoi
est entièrement rempliz Logiciel de gestion des examens propre à l’ACP
z Numéro d’examen « ACP » : numéro d’identification unique, retranscrit sur les blocs et les lames
Transmission / Réception de l’échantillon cytologique
+
Réception du prélèvement cytologique
{ Liquide:z A acheminer le plus vite
possiblez Après fermeture du labo : à
garder au frigo jusqu’au lendemain matin
z LBA : transport dans la glace
{ Frottis / étalements sur lames
{ Appositions sur lames
Appositions sur lames
Prélèvement cytologique
{ Liquides spontanément émis
{ Liquides de ponction{ Par raclage{ Par brossage{ Aspiration{ Ponction à l’aiguille
Technique des liquides
{ Cytocentrifugationz Sur lame de verre pastille
{ Séchage à l’air (MGG) ou { fixation alcool-éther ou spray laque fixante
(Papanicolaou)
{ Colorationz May-Grunwald-Giemsaz Papanicolaouz Autre…
{ Inclusion en paraffine du culot de centrifugation (bloc): histologie
Technique d’étude cytologique
Transmission /Réception du prélèvement histologique
+
Réception du prélèvementLe bon d’envoi
{ Doit arriver en même temps que le prélèvement
{ Correctement rempliz Identification du patientz Identification du médecin
prescripteur/préleveurz Acte opératoirez Siège du prélèvementz Renseignements cliniquesz Signature du médecin
Réception du prélèvement histologique
{ Pièce fraîche:z Pièces opératoires +++z Biopsies (peau, rein,…)z Permet congélation pour extraction
ADN, ARNz Doit être acheminée dès que le
prélèvement est faitz Examen extemporané*
Réception du prélèvement histologique
{ Pièce fixée (biopsies +++)z Formolz Fixateur non formolé (ADN, ARN…)
{ En quantité suffisante +++z 10 fois le volume de la pièce
Réception du prélèvement histologique
{ Le récipientz Taille adaptéez Correctement
identifié (étiquette){ Identification du
patient{Siège ou sous-
numéro si plusieurs prélèvements
Repérage des lésions/degré d’extension,prélèvements pour congélation
Macroscopie fraiche (sein)
Fixation Formol tamponné 10%
Conservation de l’échantillon (pièce op.)
Préparation à l’échantillonnage macroscopique
24-48 Heures
Examen extemporané
{ URGENCE{ Justifié s’il peut modifier le geste
opératoire{ Dès que le prélèvement est effectué{ Échantillon non fixé (état frais){ Macroscopie, cytologie, congélation
avec coupe histologique +++ avec coloration rapide (bleu de Toluidine ou HE)
Examen extemporané
{ Per-opératoire pouvant éviter les inconvénients d’une ré-intervention chirurgicale
{ Congélation = technique rapide (remplace l’inclusion en paraffine) mais artéfacts dus au froid = Mauvaise qualité morphologique
{ Diagnostic de présomption = altérations cellulaires et tissulaires / biais d’échantillonnage
{ À valider par histologie définitive
Examen extemporané
TechniquePièce opératoire (fixée)
Étape préalable{ Examen macroscopique
z Pièce mesurée, pesée, disséquéez +/- schémasz photos
{ Sélection des territoires à prélever pour examenz Histologiquez Prélèvements de 2 x 0,3 cm d’épaisseur
max.{ Mise en cassettes puis automate
Macroscopie Fixée
TechniquePrélèvement tissulaire
{ Mise en cassettes J1{ Déshydratation (alcool){ Solvants (xylène){ Imprégnation
z (paraffine liquide 56 °C){ Enrobage J2{ Coupe (microtome) 3 à 5 μm{ Etalement des coupes sur lames{ Coloration
Automate/nuit
Mise en cassettes (Ex. biopsie)
B 20090209
Automate over night
Inclusion en paraffine (enrobage)
Coupe (microtome) et étalement
Technique coloration
{ Coloration standard (HE ou HES)z Colorant basique nucléaire
{ (hématéine, hématoxyline)z Colorant acide cytoplasmique
{ (éosine, érythrosine…)z +/- safran qui se fixe sur collagène
{ Colorations spéciales:z demandées par le pathologiste, après
examen de la lame sur coloration standard
Coloration (automate)
Montage et microcopie
Plateau de lames Détail de lames
Technique d’étude histologique : de la pièce fraiche à la lame de verre!
Microscope optique +++Scanner de lames (Lames virtuelles):
Extemporané à distanceStockées et visualisées ultérieurement sur un ordinateurEnseignement
Compte-rendu
{ Écrit{ Description des lésions{ Interprétation{ Conclusion : diagnostic ou
hypothèses diagnostiquesz En fonction des lésions et des
renseignements cliniquesz Tumeurs: éléments pronostiques (grade, stade…)
Anatomie pathologique et Cancer
{Rôle pathologiste:z DépistagezDiagnostic (outils utilisés)z Pronostic
Anatomie pathologique et Cancer
{Dépistage (exemples)z Cancer du col utérin : frottis
cervico-vaginauxz Cancer de la prostate : TR, PSA
+/- biopsiesz Cancer du sein : mammographie
+/- biopsiesz …
Ex.: Cancer du col utérinCytologie Frottis cervico-utérin
Normal Pathologique
Coloration : Papanicolaou
Anatomie pathologique et Cancer
{ Dépistage { Diagnostic
z Macroscopiquez Microscopique :
{ Technique standard : colorations + HES{ Immunohistochimie : anticorps { Autres techniques : FISH, Cytogénétique
z Tumeur primitive : { Épithéliale : carcinome{ Conjonctive : sarcome{ Lymphoïde : lymphome{ …
z Tumeur secondaire : retrouver le cancer primitif
Carcinome tubulo-papillaire Adénocarcinome à cellules claires F4, pT4
Carcinome tubulo-kystique
Macroscopie
Le diagnostic
anatomopathologique
aujourd’hui est d’abord
morphologique
Aspect typique d’un carcinome rénal à cellules claires
Microscopie
Colorations spéciales
{ Histochimie:z Mise en évidence de
constituants cellulaires à partir de leur composition chimique et affinités tinctoriales :
z PAS, Bleu Alcian, Perls, Rouge congo, réticuline…
Immunohistochimie
{ Technique complémentaire{ Mise en évidence de sites antigéniques
(récepteur, cluster de différenciation, facteur de transcription…) par l’utilisation d’un anticorps spécifique couplé à un chromogène (réaction enzymatique) ou à un fluorochrome (IF)z Coupe de tissu fixé et inclus en paraffine +++z Cytologiez Coupe de tissu congelé
{ IF directe: microscope à fluorescence
Immunohistochimie
Analyse in situ des protéines :Immunohistochimie (routine depuis fin années 80)
Immunohistochimie (exemples)
Marquages nucléairesMarquages membranaires
Marquages cytoplasmiques
Apports de l’IHC en cancérologie
1- Déterminer la nature ou l’origine d’une tumeur dans une démarche algorithmique (si dg difficile)
2- Mieux visualiser certains éléments cellulaires ou certaines lésions mal identifiables sur l’HES
3- Marqueurs spécifiques d’organes, utiles si métastases inaugurales
4- Certains marqueurs sont histopronostiques (ou des critères de réponse au traitement)
5- Peut être nécessaire dans la définition OMS d’une tumeur
AE1AE3, CD 45, PS100
Tumeur indifférenciée
AE1AE3 cytokératines → tumeur épithéliale
CD45 antigène commun leucocytaire → lymphome
PS100 protéine du tissu neuro-ectodermique(nerfs, mélanocytes) → tumeurs
nerveuses, mélanome
1- Déterminer la nature ou l’origine d’une tumeur dansune démarche algorithmique (si dg difficile)
AE1AE3,CD 45, PS100
Tumeur indifférenciée
AE1/AE3
CD 45
PS100
AE1/AE3
CD 45
PS100
AE1/AE3
CD 45
PS100
-
-
-
-
-
+ -
-
+
AE1/AE3
CD 45
PS100 -
-
+
Sarcome Mélanome Lymphome Carcinome
Carcinome embryonnaireChoriocarcinome (AFP ou B HCG)
PS100 Cytokératine
Mélanome nodulaireHMB45Melan A
Carcinome peu différenciéAdénocarcinome de site inconnu
CHCCarcinome rénalADK prostate
ADK colorectal
ADK poumonCarcinome seinCarcinome endomètreCarcinome thyroïdeCarcinome cholangiocellulaireCarcinome non mucineux ovaireCarcinome urothélial
Carcinome mucineux ovaireCarcinome urothélialCarcinome pancréatique *Carcinome gastriqueCarcinome biliaire
CK7 - CK20 -
CK7 + CK20 -CK7 + CK20 +
CK20 +CK7 -
Exemples : Recherche de micrométastases dans le(s) ganglion(s) sentinelle(s) :
- en routine pour le sein
- en routine pour le col utérin
2- Mieux visualiser certains éléments cellulaires oucertaines lésions mal identifiables sur l’HES