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Etude de la diversité des ectomycorhizes dans deux forêts naturelles du Sud de Sumatra Journées francophones sur les mycorhizes, 5-7 septembre 2012, Nancy. Session 2 : « BIODIVERSITÉ, ÉCOLOGIE FONCTIONNELLE ET GÉNÉTIQUE DES POPULATIONS » Noorchat M.U. (1) , Galiana A. (2) , Lee S.S. (3) , Le Roux C. (2) , Patahayah M. (3) , Eny F. (4) , Prin Y. (2) , Duponnois R. (2) , Ducousso M. (2) (1) FORDA, Palembang Agency, South-Sumatra, Kolonel Haji Burlian km 6.5, Punti Kayu, Palembang, Indonésie ; (2) CIRAD, UMR LSTM, TA A-82 / J Campus International de Baillarguet, 34398 Montpellier Cedex 5, France ; (3) FRIM, Biodiversity Division, 52109 Ke pong, Selangor, Malaisie ; (4) Gadjah Mada University, Laboratory Tree Physiology and Forest Soil, Faculty of Forestry, Université Gadjah Mada, Indonésie. Contexte général de l’étude Les parcelles étudiées Caractérisation des arbres dans les dispositifs de Sungai Telang et Rimbo Candi Champignons saprophytes (S) et ectomycorhiziens (E) observés à Sungai Telang et Rimbo Candi Conclusions 1- Grande diversité des arbres ectomycorhizés : 13 espèces différentes sur une parcelle de 20 individus adultes à Sungai Telang et 7 et 5 espèces différentes sur 12 dans les 2 transects de Rimbo Candi. 2- Peu de champignons ont pu être observés, saprophytes ou ectomycorhiziens ; Faible temps de prospection à des périodes peu favorables. 3- Plus de 200 morphotypes différents observés : de 1 à 8 morphotypes différents par arbre, 4,8 en moyenne. 4- Les premiers résultats d'analyses moléculaires mettent en évidence l’importance du genre Tomentella dont les fructifications n’ont pas encore été observées pendant les prospections. Les forêts du Sud-Est asiatique ont fait l’objet d’une surexploitation qui a conduit à leur quasi disparition en plaine pour des cultures d’Hévéa et de palmier à huile notamment ; en altitude, l’extension de la culture du café engendre leur régression continue. La préservation et la restauration des forêts sont devenues des priorités notamment pour assurer la production durable de bois d’œuvre et la préservation des sols. Toutefois, leur régénération est très largement dépendante du maintien dans les sols de leurs partenaires symbiotiques ectomycorhiziens. Aussi, dans le cadre du projet BioAsia Mycodipt et d’un partenariat Hubert Curien Nusantara, le premier objectif de notre travail a été de décrire les diversités des arbres ectomycorhizés et de leurs champignons associés dans deux forêts naturelles du Sud de Sumatra. Le site de Sungai Telang (parcelle de 2 ha) a été établi dans une forêt de plaine dominée par des Diptérocarpacées (01.69635° S ; 101.78889° E ; alt. 300 m). Un second site, Rimbo Candi (2 transects de 50 m) a été établi dans une forêt de montagne dominée par des Fagacées (04.16563° S ; 103.19810° E ; alt. 1450 m). Dans ces trois dispositifs, nous avons prélevé : 1- des échantillons d’aubier pour l’identification anatomique et la caractérisation par séquençage partiel du gène chloroplastique trnL, 2- les sporophores de champignons ectomycorhiziens ont été photographiés et décrits sur le frais pour leur identification et 3- des échantillons de racines ectomycorhizées ont été récoltés pour décrire les différents morphotypes et procéder à la caractérisation par séquençage des ITS. La diversité fongique élevée, observée à ce stade de notre travail, tant au niveau des champignons ectomycorhiziens que saprophytes confirme l’ampleur du risque de disparition d’une des composantes clé de la diversité et du fonctionnement des forêts dans le Sud-Est asiatique. Espèce diamètre localisation GPS N°2: Meranti batu 240 cm S: 01.70999; E: 101.79607 N°3: Meranti kunyit 185 cm S: 01.70999; E: 101.79604 N°4: Mersawa 127 cm S: 01.70997; E: 101.79597 N°5: Meranti batu 140 cm S: 01.70986; E: 101.79578 N°6: Mangu 165 cm S: 01.70984; E: 101.79576 N°7: Meranti bawang 185 cm S: 01.70970; E: 101.79556 N°8: Meranti semut 150 cm S: 01.70975; E: 101.79560 N°9: Meranti hijau 145 cm S: 01.70956; E: 101.79572 N°10: Meranti kunyit 175 cm S: 01.70957; E: 101.79578 N°11: Meranti bawang 285 cm S: 01.70975; E: 101.79582 N°12: Karanyi 175 cm S: 01.70972; E: 101.79505 N°13: Tenam 395 cm S: 01.70965; E: 101.79636 N°14: Mersawa 125 cm S: 01.70935; E: 101.79613 N°15: Mangu 170 cm S: 01.70935; E: 101.79623 N°16: Sapat 340cm S: 01.70922; E: 101.79620 N°17: Mangu 245 cm S: 01.70907; E: 101.79615 N°18: Keruing 220 cm S: 01.70905; E: 101.79608 N°19: Mangu 195 cm S: 01.70900; E: 101.79604 N°20: Mangu 190 cm S: 01.70896; E: 101.79590 N°21: Meranti kunyit 175 cm S: 01.70901; E: 101.79590 Sungai Telang Russula annulata (E) Russula cf. xerampelina (E) Paneolus sp. (S) Microporus xanthopus (S) Microporus sp. (S) Mycena sp. (S) Podoscypha sp. (S) Collybia sp. (S) Cookenia sp. (S) Lepiota sp. (S) Schizophyllum commune (S) Mycomycète jaune vif (S) Marasmius sp. (S) Stereum sp. (S) Pycnoporus sanguineus (S) Rimbo Candi Laetiporus sulfureus (S) Boletus sp. (E) Inocybe gr fastigata (E) Lactarius sp1. (E) Lactarius sp2. (E) Lactarius sp3. (E) Lactarius sp4. (E) Russula annulata (E) Russula virescens(E) Russula sp1. (E) Russula sp2. (E) Russula sp3. (E) Russula sp4. (E) Russula sp5. (E) Lentinus sp. (S) Pluteus sp. (S) Marasmius sp. (S) Polyporus tenuiculus (S) Ceratomyxa fruticulosa (S) Microporus xanthopus (S) Ochroporus ingnarius (S) Daldinia concentrica (S) Stereum sp. (S) Lycoperdon cf perlatum (S) Espèce diamètre localisation* Transect N°1 (sommet : S: 04.16579°; E: 103.19825°; altitude: 1468 m, base : S: 04.16590°; E: 103.19853°; altitude: 1457 m) N°22: Tenam 150 cm 0,5d/00,0 N°23: Pasang 135 cm 3,0g/07,5 N°24: Kapas 100 cm 4,3d/13,0 N°24: Pasang 52 cm 4,7d/11.2 N°25: Tenam 80 cm 0,1d/17,0 N°26: Tenam 80 cm 1,1g/22.8 N°27: Pasang 110 cm 4,5d/26,0 N°28: Tenam 80 cm 0,1g/30,0 N°29: Medang 140 cm 3,0d/34,0 N°30: Tenam 40 cm 1,0d/40,0 N°31: Medang 75 cm 1,2d/44,0 N°31: Kayu Darah 60 cm 4,5d/45,0 N°32: Medang 55 cm 1,0d/50,0 Transect N°2 (sommet : S: 04.16565°; E: 103.19811°; altitude: 1462 m, base : S: 04.16516°; E: 103.19817°; altitude: 1455 m) N°33: Kayu Darah 70 cm 1,0d/00,0 N°34: Medang 64 cm 2,0g/05,5 N°35: Medang 51 cm 2,0d/09,5 N°36: Gemiling Hutan 45 cm 3,0d/15,0 N°37: Waru 72 cm 2,0g/17,0 N°38: Duku 26 cm 1,0g/22,0 N°39: Medang 52 cm 4,0d/24,0 N°40: Medang Cabe 53 cm 2,0g/28,0 N°41: Siru 82 cm 2,0g/35,0 N°42: Siru 50 cm 1,5g/38,0 N°43: Pasang Putih 95 cm 3,0d/45,0 N°44: Medang Cabe 55 cm 1,0g/50,0 *: Distance de l’axe du transect/distance du sommet en m Identification in situ et position (GPS) des arbres dans le dispositif de Sungai Telang (N°2 à 21) et des transects dans celui de Rimbo Candi (N°22 à 44). Russula sp1. Russula sp6. Russula sp7. Russula sp3. Russula annulata Lactarius sp1. Boletus sp. Analyses morphologiques des ectomycorhizes 200 morphotypes différents d’ectomycorhizes ont été séparés pour analyses moléculaires. Analyses moléculaires de la diversité des ectomycorhizes Au stade actuel, 68 apex ectomycorhiziens ont été traités pour caractérisation moléculaire du partenaire fongique. Les PCR, ciblées sur l’ITS (amorces ITS 1F et ITS 4B) de l’opéron ribosomique ont permis d’obtenir des amplifiats de 600 à 700 bp, sur 60% des échantillons en moyenne. Les PCR ont été également testées sur l’ADN de quelques sporophores. Le séquençage de ces amplifiats est en cours danalyse.

BIODIVERSITÉ, ÉCOLOGIE FONCTIONNELLE ET … · Etude de la diversité des ectomycorhizes dans deux forêts naturelles du Sud de Sumatra Journées francophones sur les mycorhizes,

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Page 1: BIODIVERSITÉ, ÉCOLOGIE FONCTIONNELLE ET … · Etude de la diversité des ectomycorhizes dans deux forêts naturelles du Sud de Sumatra Journées francophones sur les mycorhizes,

Etude de la diversité des ectomycorhizes dansdeux forêts naturelles du Sud de Sumatra

Journées francophones sur les mycorhizes, 5-7 septembre 2012, Nancy. Session 2 : « BIODIVERSITÉ, ÉCOLOGIE FONCTIONNELLE ET GÉNÉTIQUE DESPOPULATIONS »

Noorchat M.U.(1), Galiana A.(2), Lee S.S.(3), Le Roux C.(2), Patahayah M.(3), Eny F.(4), Prin Y.(2), Duponnois R.(2), Ducousso M.(2)(1) FORDA, Palembang Agency, South-Sumatra, Kolonel Haji Burlian km 6.5, Punti Kayu, Palembang, Indonésie ; (2) CIRAD, UMR LSTM, TA A-82 ⁄ J Campus International de Baillarguet, 34398 Montpellier Cedex 5, France ; (3) FRIM, Biodiversity Division, 52109 Kepong, Selangor, Malaisie ; (4) Gadjah Mada University, Laboratory Tree Physiology and Forest Soil, Faculty of Forestry, Université Gadjah Mada, Indonésie.

• Contexte général de l’étude • Les parcelles étudiées

• Caractérisation des arbres dans les dispositifs de Sungai Telang et Rimbo Candi • Champignons saprophytes (S) et ectomycorhiziens(E) observés à Sungai Telang et Rimbo Candi

• Conclusions

1- Grande diversité des arbres ectomycorhizés : 13 espèces différentes sur uneparcelle de 20 individus adultes à Sungai Telang et 7 et 5 espèces différentes sur 12dans les 2 transects de Rimbo Candi.

2- Peu de champignons ont pu être observés, saprophytes ou ectomycorhiziens ;Faible temps de prospection à des périodes peu favorables.

3- Plus de 200 morphotypes différents observés : de 1 à 8 morphotypes différentspar arbre, 4,8 en moyenne.

4- Les premiers résultats d'analyses moléculaires mettent en évidence l’importancedu genre Tomentella dont les fructifications n’ont pas encore été observéespendant les prospections.

Les forêts du Sud-Est asiatique ont fait l’objetd’une surexploitation qui a conduit à leurquasi disparition en plaine pour des culturesd’Hévéa et de palmier à huile notamment ; enaltitude, l’extension de la culture du caféengendre leur régression continue. Lapréservation et la restauration des forêts sontdevenues des priorités notamment pourassurer la production durable de bois d’œuvreet la préservation des sols. Toutefois, leurrégénération est très largement dépendante dumaintien dans les sols de leurs partenairessymbiotiques ectomycorhiziens. Aussi, dansle cadre du projet BioAsia Mycodipt et d’unpartenariat Hubert Curien Nusantara, lepremier objectif de notre travail a été dedécrire les diversités des arbresectomycorhizés et de leurs champignonsassociés dans deux forêts naturelles du Sudde Sumatra.

Le site de Sungai Telang (parcelle de 2 ha) aété établi dans une forêt de plaine dominéepar des Diptérocarpacées (01.69635° S ;101.78889° E ; alt. 300 m). Un second site,Rimbo Candi (2 transects de 50 m) a étéétabli dans une forêt de montagne dominéepar des Fagacées (04.16563° S ; 103.19810°E ; alt. 1450 m). Dans ces trois dispositifs,nous avons prélevé : 1- des échantillonsd’aubier pour l’identification anatomique et lacaractérisation par séquençage partiel dugène chloroplastique trnL, 2- lessporophores de champignonsectomycorhiziens ont été photographiés etdécrits sur le frais pour leur identification et3- des échantillons de racinesectomycorhizées ont été récoltés pourdécrire les différents morphotypes etprocéder à la caractérisation par séquençagedes ITS.

La diversité fongique élevée, observée à ce stade de notre travail, tant auniveau des champignons ectomycorhiziens que saprophytes confirmel’ampleur du risque de disparition d’une des composantes clé de ladiversité et du fonctionnement des forêts dans le Sud-Est asiatique.

N° Espèce diamètre localisation GPS N°2: Meranti batu 240 cm S: 01.70999; E: 101.79607N°3: Meranti kunyit 185 cm S: 01.70999; E: 101.79604N°4: Mersawa 127 cm S: 01.70997; E: 101.79597N°5: Meranti batu 140 cm S: 01.70986; E: 101.79578N°6: Mangu 165 cm S: 01.70984; E: 101.79576N°7: Meranti bawang 185 cm S: 01.70970; E: 101.79556N°8: Meranti semut 150 cm S: 01.70975; E: 101.79560N°9: Meranti hijau 145 cm S: 01.70956; E: 101.79572N°10: Meranti kunyit 175 cm S: 01.70957; E: 101.79578N°11: Meranti bawang 285 cm S: 01.70975; E: 101.79582N°12: Karanyi 175 cm S: 01.70972; E: 101.79505N°13: Tenam 395 cm S: 01.70965; E: 101.79636N°14: Mersawa 125 cm S: 01.70935; E: 101.79613N°15: Mangu 170 cm S: 01.70935; E: 101.79623N°16: Sapat 340cm S: 01.70922; E: 101.79620N°17: Mangu 245 cm S: 01.70907; E: 101.79615N°18: Keruing 220 cm S: 01.70905; E: 101.79608N°19: Mangu 195 cm S: 01.70900; E: 101.79604N°20: Mangu 190 cm S: 01.70896; E: 101.79590N°21: Meranti kunyit 175 cm S: 01.70901; E: 101.79590

Sungai TelangRussula annulata (E)Russula cf. xerampelina (E)Paneolus sp. (S)Microporus xanthopus (S)Microporus sp. (S)Mycena sp. (S)Podoscypha sp. (S)Collybia sp. (S)Cookenia sp. (S)Lepiota sp. (S)Schizophyllum commune (S)Mycomycète jaune vif (S)Marasmius sp. (S)Stereum sp. (S)Pycnoporus sanguineus (S)

Rimbo CandiLaetiporus sulfureus (S)Boletus sp. (E)Inocybe gr fastigata (E)Lactarius sp1. (E)Lactarius sp2. (E)Lactarius sp3. (E)Lactarius sp4. (E)Russula annulata (E)Russula virescens(E)Russula sp1. (E)Russula sp2. (E)Russula sp3. (E)Russula sp4. (E)Russula sp5. (E)Lentinus sp. (S)Pluteus sp. (S)Marasmius sp. (S)Polyporus tenuiculus (S)Ceratomyxa fruticulosa (S)Microporus xanthopus (S)Ochroporus ingnarius (S)Daldinia concentrica (S)Stereum sp. (S)Lycoperdon cf perlatum (S)

N° Espèce diamètre localisation*

Transect N°1 (sommet : S: 04.16579°; E: 103.19825°;altitude: 1468 m, base : S: 04.16590°; E: 103.19853°;altitude: 1457 m)N°22: Tenam 150 cm0,5d/00,0N°23: Pasang 135 cm 3,0g/07,5N°24: Kapas 100 cm 4,3d/13,0N°24: Pasang 52 cm 4,7d/11.2N°25: Tenam 80 cm0,1d/17,0N°26: Tenam 80 cm1,1g/22.8N°27: Pasang 110 cm 4,5d/26,0N°28: Tenam 80 cm0,1g/30,0N°29: Medang 140 cm 3,0d/34,0N°30: Tenam 40 cm1,0d/40,0N°31: Medang 75 cm 1,2d/44,0N°31: Kayu Darah 60 cm 4,5d/45,0N°32: Medang 55 cm 1,0d/50,0

Transect N°2 (sommet : S: 04.16565°; E: 103.19811°;altitude: 1462 m, base : S: 04.16516°; E: 103.19817°;altitude: 1455 m)N°33: Kayu Darah 70 cm 1,0d/00,0N°34: Medang 64 cm 2,0g/05,5N°35: Medang 51 cm 2,0d/09,5N°36: Gemiling Hutan 45 cm 3,0d/15,0N°37: Waru 72 cm 2,0g/17,0N°38: Duku 26 cm 1,0g/22,0N°39: Medang 52 cm 4,0d/24,0N°40: Medang Cabe 53 cm 2,0g/28,0N°41: Siru 82 cm 2,0g/35,0N°42: Siru 50 cm 1,5g/38,0N°43: Pasang Putih 95 cm 3,0d/45,0N°44: Medang Cabe 55 cm 1,0g/50,0

*: Distance de l’axe du transect/distance du sommet en m

Identification in situ et position (GPS) des arbres dans le dispositif de Sungai Telang (N°2 à 21) et des transects danscelui de Rimbo Candi (N°22 à 44).

Russula sp1.Russula sp6.

Russula sp7.

Russula sp3.

Russula annulata

Lactarius sp1.

Boletus sp.

• Analyses morphologiques des ectomycorhizes

200 morphotypes différents d’ectomycorhizes ont été séparés pour analyses moléculaires.

• Analyses moléculaires de la diversité des ectomycorhizes

Au stade actuel, 68 apex ectomycorhiziens ont été traités pour caractérisation moléculaire du partenairefongique. Les PCR, ciblées sur l’ITS (amorces ITS 1F et ITS 4B) de l’opéron ribosomique ont permisd’obtenir des amplifiats de 600 à 700 bp, sur 60% des échantillons en moyenne. Les PCR ont étéégalement testées sur l’ADN de quelques sporophores. Le séquençage de ces amplifiats est en coursdanalyse.