Colonnes pour la HPLC / UHPLCftp.mn-net.com/francais/Flyer_Catalogs/Chromatographie/... · 2013-02-27 · NUCLEODUR® · Silice de haute pureté pour la HPLC 110 ... mum de la courbe

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Chromatographie liquide

HPLC · Sommaire

Colonnes pour la HPLC / UHPLCColonnes remplies avec les phases NUCLEODUR® NUCLEODUR® · Silice de haute pureté pour la HPLC 110Particules de 1,8 µm pour augmenter l’efficacité de séparation 111Aperçu des phases 112Colonnes HPLC remplies avec les silices NUCLEODUR® 116

Colonnes remplies avec les phases NUCLEOSHELL® NUCLEOSHELL® · silice core-shell pour la HPLC 144Colonnes analytiques remplies avec les silices NUCLEOSHELL® 148

Colonnes remplies avec les phases NUCLEOSIL® NUCLEOSIL® · Silice standard pour la HPLC 154Aperçu des phases 155Colonnes HPLC remplies avec les silices NUCLEOSIL® 157

Colonnes analytiques remplies avec les silices LiChrospher ® 166

Colonnes HPLC pour des applications spécialesAperçu 167Colonnes analytiques et préparatives pour des applications spéciales 168

Systèmes de colonnes HPLC MN 189Accessoires pour colonnes en inox 196Accessoires en PEEK 197

Adsorbants pour la chromatographie liquideMatériaux de remplissage pour la HPLCNUCLEODUR® · Silice sphérique de haute pureté pour la HPLC préparative 198POLYGOSIL® · Silice irrégulière pour la HPLC analytique 200POLYGOPREP · Silice irrégulière pour la HPLC préparative 202

Matériaux de remplissage pour la chromatographie liquide à basse pressionSilice standard, oxydes d’aluminium, kieselguhr, Florisil®, polyamide et cellulose 204

[email protected]

Colonnes pour la HPLC

NUCLEODUR® · Silice HPLC de haute pureté

NUCLEODUR® est une silice totalement synthétique de type B (silice de 3ème génération) qui présente de remarquables propriétés physiques : forme des particules complètement sphériques, remarquable homogénéité de la microstructure de surface, stabilité aux pressions et faible teneur en ions métalliques.NUCLEODUR® est un matériel de base pour la HPLC moderne. Ceci est le résultat de presque 50 années de recherche en chromatographie.

En chromatographie de phase inverse l’efficacité d’un remplissage est fortement affectée par la qualité du gel de silice. Des imperfections au niveau de la géométrie de la surface des particules ou des contaminants mé-talliques sont des raisons majeures d’un recouvrement inadéquat des alkylsilanes dans les étapes suivantes de dérivatisation. Il est bien connu qu’un faible recouvre-ment de la surface et, par conséquent une activité éle-vée des silanols libres entraînent des traînées de pics (tailing) ou des adsorptions, particulièrement avec des composés basiques.

Forme des particules et symétrie de surface

Les silices NUCLEODUR® sont synthétisées par un pro-cédé unique et soigneusement contrôlées lors du pro-cessus de fabrication. Ce procédé permet d’obtenir des particules de silice totalement sphériques.

PuretéComme cela est mentionné ci-dessus, une silice de haute pureté est nécessaire pour obtenir des pics sy-métriques et une résolution maximale. Les inclusions ex. du fer ou des ions métalliques alcalino-terreux dans la surface de la silice sont largement responsables d’interactions non souhaitées avec des analytes ioni-sables, ex. les amines ou les composés phénoliques.NUCLEODUR® est sans impuretés métalliques et pré-sente une faible acidité silanolique. L’analyse élémen-taire de NUCLEODUR® 5 µm mesurée par AAS est dé-crite ci-contre.

Analyse élémentaire (ions métalliques) de NUCLEODUR® 100-5

Aluminium < 5 ppmFer < 5 ppmSodium < 5 ppmCalcium < 10 ppmTitane < 1 ppmZirconium < 1 ppmArsénique < 0,5 ppmMercure < 0,05 ppm

Stabilité aux pressionsCe gel de silice totalement sphérique et 100 % synthé-tique présente une incroyable résistance mécanique, même à de hautes pressions et à des débits élevés.D’autre part, après plusieurs cycles de remplissages, aucune augmentation significative de la pression n’a été observée.

Données physique de NUCLEODUR®

Surface spécifique (BET) 340 m2/gTaille des pores 110 ÅVolume des pores 0,9 mL/g

Les greffages NUCLEODUR®

Durant ces dernières années, différentes modifica-tions de la surface du gel de silice NUCLEODUR® ont été développées. Ainsi MN propose plusieurs phases spécifiques permettant ainsi de répondre à un grand nombre de séparations.

NUCLEODUR® C18 Gravity et C8 Gravity NUCLEODUR® C18 Isis NUCLEODUR® C18 Pyramid NUCLEODUR® PolarTec Nouveau ! NUCLEODUR® PFP Nouveau ! NUCLEODUR® Sphinx RP NUCLEODUR® C18 HTec NUCLEODUR® C18 ec et C8 ec NUCLEODUR® HILIC NUCLEODUR® CN et CN-RP NUCLEODUR® NH2 et NH2-RP

Pour un aperçu des propriétés importantes des phases NUCLEODUR®, voir page 112.

www.mn-net.com 111



Particules de 1,8 μm pour une séparation efficace Caractéristiques principales :

• Réduction des temps d’analyses (ultra fast HPLC)• Haute efficacité de séparation avec des colonnes plus courtes • Amélioration significative de la résolution et de la sensibilité de détection• Utilisable en LC/MS et en UHPLC/MS en raison d’un très faible bleeding

Contre pression limitée grâce au fractionnement des particules NUCLEODUR® 1,8 µm. Phases NUCLEODUR® disponibles en 1,8 µm : C18 Gravity, C8 Gravity, C18 Isis, C18 Pyramid, PolarTec, PFP, Sphinx RP, C18 HTec, HILIC

Avantages des particules de 1,8 µm La miniaturisation en HPLC a commencé très tôt dans le développement de la HPLC avec la réduction de la taille des particules de 10 µm via 7 µm au standard 5 µm, qui reste encore la taille de particule la plus utilisée en HPLC analytique, vers les particules sphériques de 3 µm. Avec le lancement des particules NUCLEODUR® 1,8 µm, les chercheurs sont passés à une nouvelle technologie en HPLC. Les colonnes remplies avec ces particules sub-2 µm montrent une extraordinaire amé-lioration : du nombre de plateaux théoriques, de l’effi-cacité et de la résolution en comparaison à leurs homo-logues en 3 µm.

Augmentation de l’efficacité de séparation par un nombre de plateaux théoriques plus élevés (N) : 50 x 4,6 mm NUCLEODUR® C18 Gravity 3 µm : N ≥ 100 000 plateaux/m (h ≤ 10) 1,8 µm : N ≥ 166 667 plateaux/m (h ≤ 6)

L’augmentation du nombre de plateaux théoriques/m ~ 67 % permet une utilisation de colonnes plus courtes (pour un même nombre de plateaux théoriques), et d’avoir des temps d’analyses plus courts

Amélioration significative de la résolution

Rs =N4

ki’+1ki’

1αα–

Rs = résolution, α = sélectivité (facteur de séparation), ki’ = rétention, N = nombre de plateaux avec N ∝ 1/dP, dP = diamètre des particules

Résolution par rapport à la taille des particulesColonne : 50 x 4 mm NUCLEODUR® C18 Gravity

A) 3 μm, B) 1,8 μmEluant : acétonitrile – eau (80:20, v/v)Débit : 2 mL/minDétection : UV, 254 nmPics : 1. Naphtalène, 2. Ethylbenzène

1

2

1

2

0,4 0,6

A)3 μmRs = 1,1180 bars

0,4 0,6 min

B)1,8 μmRs = 1,42160 bars

L’utilisation de particules 1,8 µm à la place de 3 µm permet d’accroître la résolution par un facteur de 1,29 (29 %) alors que la résolution est inversement propor-tionnelle à la racine carrée de la taille des particules.

Contre pression de la colonneEn raison de la faible granulométrie, la contre pression augmente selon

ΔP = Φ · LC · η · u

dP2

ΔP = baisse de pressionLC = longueur de la colonneη = viscosité

Φ = résistance au flux (sans dimension)

u = vitesse du flux linéairedP = diamètre des particules

La contre pression reste modérée grâce à la haute sphéricité des particules NUCLEODUR® et une distribu-tion étroite de la taille des particules.

Comparaison de la contre pression : 100 % méthanol, 1,5 mL/min, 22 °C, colonne 50 x 4,6 mm

NUCLEODUR® C18 Gravity Concurrent A3 µm 70 bars –1,8 µm 130 bars 170 bars

Débits plus élevés et temps d’analyses réduitsLe débit optimal pour des particules de 1,8 µm est plus élevé que pour des particules de 3 et 5 µm (voir illus-tration ci-dessous – le débit doit se trouver au mini-mum de la courbe de Van Deemter).

Courbes de Van DeemterColonne 50 x 4,6 mm, CH3CN – H2O (50:50, v/v), analyte toluène

u [mm/s]

5 μm

3 μm

05

10152025

HET

P [μ

m]

0,0 0,5 1,0 1,5 2,0

1,8 μm2,5 3,0 3,5 4,0

Requis techniquesIl est nécessaire que l’appareillage réponde à certaines demandes techniques. Les pompes doivent pouvoir travailler avec des pressions de 250–1000 bars obte-nus avec des débits de 2–3 mL/min. Le volume mort du système doit être réduit au minimum. Il est nécessaire d’avoir un système rapide d’acquisition des données.

[email protected]



Aperçu des phases NUCLEODUR® Phase

NUCLEODUR®Spécifications Caractéristiques* Stabilité et

compatibilitéStructure Applications Phases similaires** Interactions · mécanismes de rétention Page

Phase octadécyle de haute densité, multi-endcapping 18 % C · USP L1

A pH 1-11, utilisable en UHPLC et en MS

NUC

LEO

DUR

®

(Si-

O2)

n

Composés avec une fonction ionisable (composés basiques pharmaceutiques, pesticides)

NUCLEOSIL® C18 HDXterra® RP18 / MS C18 ; Luna® C18(2), Gemini®, Synergi® Max RP ; Zorbax® Extend-C18 ; Inertsil® ODS III ; Purospher® STAR RP-18 ; Hypersil™ BDS

Hydrophobes(interactions van der Waals)

Si(CH3)3N

OH3C

CH3

116

B

C

Phase octyle de haute densité multi-endcapping11 % C · USP L7

A pH 1–11, utilisable en UHPLC et en MS

NUC

LEO

DUR

®

(Si-

O2)

n

Comme C18 Gravity, cependant, en géné-ral temps de réten-tion plus courts pour composés apolaires

NUCLEOSIL® C8 HDXterra® RP8 / MS C8; Luna® C8 ; Zorbax® Eclipse XDB-C8

N

O

OH

OHCH3

CH3Si(CH3)3B

C

Phase octadécyle modification poly-mèrique endcapped20 % C · USP L1


NUC

LEO

DUR

®

(Si-

O2)

n

Haute sélectivité sté-rique, utilisable pour la séparation d’iso-mères de position ou de structure, de mo-lécules planes / non planes

NUCLEOSIL® C18 ABInertsil® ODS-P ; Pro C18 RS ; Zorbax® SB

Stériques et hydrophobes 120B

C

Phase octadécyle avec un endcapping polaire14 % C · USP L1

A stable avec des éluants 100 % aqueux, pH 1–9, utilisable en UHPLC et en MS N

UCLE

OD

UR®

(Si-

O2)

n OH

OH

Composés basiques pharmaceutiques, composés très polaires, acides orga-niques

Aqua, Synergi® Hydro-RP ; AQ ; Atlantis® dC18

Hydrophobes et polaires (liaisons H)

OHN

OH3C

CH3

122B

C

Phase octadécyle avec un groupe polaire dans la chaîne alkyle17 % C · USP L1 and L60

A stable avec des éluants 100 % aqueux, pH 1–9, utilisable en UHPLC et en MS NUC

LEO

DUR

®

(Si-

O2)

n

Si Si(CH3)3

Si

O

OH

Pol

Pol

Composés basiques pharmaceutiques, acides organiques, pesticides, acides aminés, vitamines hydrosolubles

NUCLEOSIL® C18 NautilusProntoSIL® C18, Zorbax® Bonus-RP, Polaris® Amide-C18 ; Ascentis® RP Amide, SymmetryShield™ RP18 ; SUPELCOSIL™ LC-ABZ+ ; HyPURITY™ ADVANCE


HO

Pol

Pol

Si(CH3)3124B

C

Modification pentafluoro phényl-propyle avec un multi-endcapping8 % C · USP L43


NUC

LEO

DUR

®

(Si-

O2)

n

Si O Si(CH3)3

F

F

F

F

F

OHSi

Composés aroma-tiques, insaturés, halogénés, phénols, isomères, composés polaires pharmaceu-tiques, antibiotiques

ACQUITY® CSH Fluoro-Phenyl ; Hypersil™ GOLD PFP ; Luna® PFP(2) ; Discovery® HS F5 ; Allure® PFP Propyl ; Ultra II PFP Propyl

Polaires (liaisons H), dipôle-di-pôle, π-π et hydrophobes

F

F

F

F

F

H

O

O

126B

C

Phase inverse bifonc-tionnelle, ligands propylphényle et C18 ; endcapped15 % C · USP L1 and L11


NUC

LEO

DUR

®

(Si-

O2)

n Composés aroma-tiques et systèmes de liaisons multiples

pas de phases similaires π-π et hydrophobes NO2

128B

C

Phase octadécyle de haute capacité, haute densité de greffage, multi-endcapping18 % C · USP L1


NUC

LEO

DUR

®

(Si-

O2)

n

Phase C18 robuste et bien désactivée ; toutes les séparations avec un potentiel préparatif

Xterra® RP18 / MS C18 / SunFire™ C18 ; Luna® C18(2), Gemini®, Synergi® Max RP ; Zorbax® Extend-C18 ; Inertsil® ODS III ; Purospher® STAR RP-18 ; Hypersil™ BDS


Si(CH3)3N

OH3C

CH3

130B

B

* A = sélectivité hydrophobe, B = sélectivité polaire / ionique, C = sélectivité stérique ** phases proches en sélectivité

www.mn-net.com 113



Aperçu des phases NUCLEODUR® Phase

NUCLEODUR®Spécifications Caractéristiques* Stabilité et

compatibilitéStructure Applications Phases similaires** Interactions · mécanismes de rétention Page

Phase octadécyle de haute densité, multi-endcapping 18 % C · USP L1

A pH 1-11, utilisable en UHPLC et en MS

NUC

LEO

DUR

®

(Si-

O2)

n

Composés avec une fonction ionisable (composés basiques pharmaceutiques, pesticides)

NUCLEOSIL® C18 HDXterra® RP18 / MS C18 ; Luna® C18(2), Gemini®, Synergi® Max RP ; Zorbax® Extend-C18 ; Inertsil® ODS III ; Purospher® STAR RP-18 ; Hypersil™ BDS


Si(CH3)3N

OH3C

CH3

116

B

C

Phase octyle de haute densité multi-endcapping11 % C · USP L7


NUC

LEO

DUR

®

(Si-

O2)

n

Comme C18 Gravity, cependant, en géné-ral temps de réten-tion plus courts pour composés apolaires

NUCLEOSIL® C8 HDXterra® RP8 / MS C8; Luna® C8 ; Zorbax® Eclipse XDB-C8

N

O

OH

OHCH3

CH3Si(CH3)3B

C

Phase octadécyle modification poly-mèrique endcapped20 % C · USP L1


NUC

LEO

DUR

®

(Si-

O2)

n

Haute sélectivité sté-rique, utilisable pour la séparation d’iso-mères de position ou de structure, de mo-lécules planes / non planes

NUCLEOSIL® C18 ABInertsil® ODS-P ; Pro C18 RS ; Zorbax® SB

Stériques et hydrophobes 120B

C

Phase octadécyle avec un endcapping polaire14 % C · USP L1


UCLE

OD

UR®

(Si-

O2)

n OH

OH

Composés basiques pharmaceutiques, composés très polaires, acides orga-niques

Aqua, Synergi® Hydro-RP ; AQ ; Atlantis® dC18


OHN

OH3C

CH3

122B

C

Phase octadécyle avec un groupe polaire dans la chaîne alkyle17 % C · USP L1 and L60


UCLE

OD

UR®

(Si-

O2)

n

Si Si(CH3)3

Si

O

OH

Pol

Pol

Composés basiques pharmaceutiques, acides organiques, pesticides, acides aminés, vitamines hydrosolubles

NUCLEOSIL® C18 NautilusProntoSIL® C18, Zorbax® Bonus-RP, Polaris® Amide-C18 ; Ascentis® RP Amide, SymmetryShield™ RP18 ; SUPELCOSIL™ LC-ABZ+ ; HyPURITY™ ADVANCE


HO

Pol

Pol

Si(CH3)3124B

C

Modification pentafluoro phényl-propyle avec un multi-endcapping8 % C · USP L43


NUC

LEO

DUR

®

(Si-

O2)

n

Si O Si(CH3)3

F

F

F

F

F

OHSi

Composés aroma-tiques, insaturés, halogénés, phénols, isomères, composés polaires pharmaceu-tiques, antibiotiques

ACQUITY® CSH Fluoro-Phenyl ; Hypersil™ GOLD PFP ; Luna® PFP(2) ; Discovery® HS F5 ; Allure® PFP Propyl ; Ultra II PFP Propyl

Polaires (liaisons H), dipôle-di-pôle, π-π et hydrophobes

F

F

F

F

F

H

O

O

126B

C

Phase inverse bifonc-tionnelle, ligands propylphényle et C18 ; endcapped15 % C · USP L1 and L11


NUC

LEO

DUR

®

(Si-

O2)

n Composés aroma-tiques et systèmes de liaisons multiples

pas de phases similaires π-π et hydrophobes NO2

128B

C

Phase octadécyle de haute capacité, haute densité de greffage, multi-endcapping18 % C · USP L1


NUC

LEO

DUR

®

(Si-

O2)

n

Phase C18 robuste et bien désactivée ; toutes les séparations avec un potentiel préparatif

Xterra® RP18 / MS C18 / SunFire™ C18 ; Luna® C18(2), Gemini®, Synergi® Max RP ; Zorbax® Extend-C18 ; Inertsil® ODS III ; Purospher® STAR RP-18 ; Hypersil™ BDS


Si(CH3)3N

OH3C

CH3

130B

B


[email protected]



Phase NUCLEODUR®

Spécifications Caractéristiques* Stabilité et compatibilité

Structure Applications Phases similaires** Interactions · mécanismes de rétention Page

Phase octadécyle, densité moyenne endcapping17,5 % C · USP L1

A

pH 1–9

NUC

LEO

DUR

®

(Si-

O2)

n

OSi Si(CH3)3

Si OHPhase C18 robuste pour des analyses de routine

NUCLEOSIL® C18 Spherisorb® ODS II ; Symmetry® C18 ; Hypersil™ ODS ; Inertsil® ODS II ; Kromasil C18 ; LiChrospher® RP-18

Hydrophobes(interactions van der Waals)légères inte-ractions avec des silanols résiduels

N

OH3C

CH3Si(CH3)3

SiOH

133

B

C

Phase octyle, densité moyenne endcapping10,5 % C · USP L7

A

pH 1–9

NUC

LEO

DUR

®

(Si-

O2)

n

OSi Si(CH3)3


NUCLEOSIL® C8 ec / C8Spherisorb® C8 ; Symmetry® C8 ; Hypersil™ MOS ; Kromasil C8 ; LiChrospher® RP-8

Si(CH3)3

SiOH

H3CCH3

CH3

O

O

N

NN

NB

C

Phase zwittérionique ammonium – acide sulfonique7 % C

ApH 2–8.5, utilisable en UHPLC et en MS

NUC

LEO

DUR

®

(Si-

O2)

n

Si OH

Si OH

CH3

CH3

+ N SO3 –

CH3

CH3

+ N SO3 –

Composés hydro-philes : acides et bases organiques polaires, composés naturelles polaires ; ions organiques

Sequant™ ZIC®-HILIC ; Obelisc™

Ioniques / hydrophiles et électrosta-tiques

H3C

CH3

H3C

CH3

N+

SO3 –

N+

SO3 –

N NH

NH2

OHO

CH3 136B

C –

Phase cyano (nitrile) pour séparations PN et RP7 % C · USP L10

ApH 1–8, stable avec des éluants aqueux

NUC

LEO

DUR

®

(Si-

O2)

n

OSi Si(CH3)3

Si OH

C N

C N

Composés polaires (médicaments basiques), molécules contenant des sys-tèmes d’électrons π

NUCLEOSIL® CN / CN-RP

π-π et polaires (liaisons H), hydrophobes

O

HOC≡N

C ≡ N

138B

C –

Phase amino pour séparations PN et RP2,5 % C · USP L8


NUC

LEO

DUR

®

(Si-

O2)

n

Si

Si

OH

OH

NH2

NH2

Sucres, alcools sucrés et autres composés hydroxy, bases de l’ADN, composés polaires en général

NUCLEOSIL® NH2 / NH2-RPPolaires / ioniques et hydrophobes

+NH3

OH

O

140B

C –

Silice de haute pureté non modifiéeUSP L3

A –

pH 2–8

NUC

LEO

DUR

®

(Si-

O2)

n

Si

Si

OH

OH Composés polaires en général NUCLEOSIL® SiOH Polaires /

ioniquesO2NSiOH 142B –

C –


Silice de haute pureté NUCLEODUR® Une phase optimale pour chaque domaine d’application

www.mn-net.com 115



Phase NUCLEODUR®

Spécifications Caractéristiques* Stabilité et compatibilité

Structure Applications Phases similaires** Interactions · mécanismes de rétention Page

Phase octadécyle, densité moyenne endcapping17,5 % C · USP L1

A

pH 1–9

NUC

LEO

DUR

®

(Si-

O2)

n

OSi Si(CH3)3


NUCLEOSIL® C18 Spherisorb® ODS II ; Symmetry® C18 ; Hypersil™ ODS ; Inertsil® ODS II ; Kromasil C18 ; LiChrospher® RP-18

Hydrophobes(interactions van der Waals)légères inte-ractions avec des silanols résiduels

N

OH3C

CH3Si(CH3)3

SiOH

133

B

C

Phase octyle, densité moyenne endcapping10,5 % C · USP L7

A

pH 1–9

NUC

LEO

DUR

®

(Si-

O2)

n

OSi Si(CH3)3


NUCLEOSIL® C8 ec / C8Spherisorb® C8 ; Symmetry® C8 ; Hypersil™ MOS ; Kromasil C8 ; LiChrospher® RP-8

Si(CH3)3

SiOH

H3CCH3

CH3

O

O

N

NN

NB

C

Phase zwittérionique ammonium – acide sulfonique7 % C

ApH 2–8.5, utilisable en UHPLC et en MS

NUC

LEO

DUR

®

(Si-

O2)

n

Si OH

Si OH

CH3

CH3

+ N SO3 –

CH3

CH3

+ N SO3 –

Composés hydro-philes : acides et bases organiques polaires, composés naturelles polaires ; ions organiques

Sequant™ ZIC®-HILIC ; Obelisc™

Ioniques / hydrophiles et électrosta-tiques

H3C

CH3

H3C

CH3

N+

SO3 –

N+

SO3 –

N NH

NH2

OHO

CH3 136B

C –

Phase cyano (nitrile) pour séparations PN et RP7 % C · USP L10


NUC

LEO

DUR

®

(Si-

O2)

n

OSi Si(CH3)3

Si OH

C N

C N

Composés polaires (médicaments basiques), molécules contenant des sys-tèmes d’électrons π

NUCLEOSIL® CN / CN-RP

π-π et polaires (liaisons H), hydrophobes

O

HOC≡N

C ≡ N

138B

C –

Phase amino pour séparations PN et RP2,5 % C · USP L8


NUC

LEO

DUR

®

(Si-

O2)

n

Si

Si

OH

OH

NH2

NH2

Sucres, alcools sucrés et autres composés hydroxy, bases de l’ADN, composés polaires en général

NUCLEOSIL® NH2 / NH2-RPPolaires / ioniques et hydrophobes

+NH3

OH

O

140B

C –

Silice de haute pureté non modifiéeUSP L3

A –

pH 2–8

NUC

LEO

DUR

®

(Si-

O2)

n

Si

Si

OH

OH Composés polaires en général NUCLEOSIL® SiOH Polaires /

ioniquesO2NSiOH 142B –

C –


Silice de haute pureté NUCLEODUR® Une phase optimale pour chaque domaine d’application

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NUCLEODUR® C18 Gravity ∙ C8 Gravity phases apolaires de haute densité Caractéristiques principales :

• Utilisables pour la LC/MS et la HPLC dans des pH extrêmes (pH 1–11), particules de 1,8 µm compatibles UHPLC

• Haute désactivation pour les bases• Idéales pour les développements de méthode

Caractéristiques techniques : Disponible avec les modifications octadécyle (C18) et octyle (C8), multi-endcapped

Taille des pores 110 Å ; tailles des particules 1,8 µm, 3 µm et 5 µm pour la C18, 1,8 et 5 µm pour la C8 ; 7, 10, 12 et 16 µm sur demande pour les applications en préparatives ; teneur en carbone 18 % pour la C18, 11 % pour la C8

Domaines d’applications : Recommandées pour toutes séparations analytiques sophistiquées

Classes de composés séparés : les composants pharmaceutiques, par ex. analgé-siques, médicaments anti-inflammatoires, antidépresseurs, herbicides, composés phytopharmaceutiques, immunosuppresseurs

USP L1 (C18) / USP L7 (C8)

Désactivée NUCLEODUR® C18 Gravity et NUCLEODUR® C8 Gravity sont à base de la silice ultra-pure NUCLEODUR®. Un procédé spécial de dérivatisation permet d’avoir une surface homogène avec une densité de silanes élevée (teneur en carbone ~ 18 % pour la C18, ~ 11 % pour la C8). Un endcapping bien adapté et soigné supprime toutes les interactions polaires non souhaitées entre la surface de la silice et l’échantillon ; par conséquent la Gravity est particulièrement bien adaptée pour les séparations de composés basiques et ionisables. Même les médica-ments fortement basiques comme l’amitriptyline sont élués sans traînées sous des conditions isocratiques. Concernant le comparatif des temps de rétention entre les phases octyles et octadécyles voir page 134.

Meilleure stabilité aux pHUn des points faible des phases à base de silice est leur résistance limitée aux pH acides et basiques. L’hydro-lyse des liaisons siloxane ou la dissolution de la silice conduit rapidement à une baisse de l’efficacité de sé-paration. Par conséquent, pour des phases RP tradi-tionnelles il ne faut pas utiliser longtemps des phases mobiles avec des pH > 8 ou pH < 2. En raison de la technique spéciale de greffage de la surface et de la faible concentration des éléments présents sous forme de trace, la NUCLEODUR® C8 Gravity et C18 Gravity peuvent être utilisées dans une gamme de pH comprise entre 1 et 11.

Les avantages d’une meilleure stabilité aux pHDans le cadre du développement de méthode on est souvent amené à travailler dans de larges gammes de pH. Beaucoup de composés azotés, notamment dans les composés pharmaceutiques basiques sont protonés en milieu acide ou neutre et montrent dans ce cas une faible rétention sur des phases C18 standards. On peut améliorer cette rétention en utilisant un pH plus élevé, du fait que les analytes ne soient plus protonés mais portent une charge neutre, comme c’est le cas entre pH 9–10. Pour les analytes acides l’inverse est vrai, la

rétention maximale est obtenue pour de faibles valeurs de pH.

Influence du pH sur les silanols

+NH2Me

Si

Si

Si

OHOHOOHOHOOHO

Si

Si

Si

O–

O–

OO–

O–

OO–

O

H+

H+

H+H+

OH–

OH–

OH–

OH–MeHN

–OOC

CH3

CH3

H3C

HOOC

CH3

CH3

H3C

mat

rice

de s

ilice

(Si-O

2) nm

atric

e de

silic

e (S

i-O2) n

La figure ci-dessus montre l’étendue de la protonation des silanols et deux exemples d’analytes en pH acide et basique. La courbe ci-dessous montre la corrélation entre la rétention et le pH.

Corrélation entre la rétention et le pH pour des composés acides et basiques

HA

A–

B

BH+

kʼ

0 4 8 12pH

www.mn-net.com 117



Un exemple ou la sélectivité peut être contrôlée par le pH, c’est la séparation de l’acide kétoprofène, de la base lidocaïne et du benzamide. Sous des conditions acides la lidocaïne protonée est éluée très rapidement, du fait qu’il n’y ait pas suffisamment d’interactions hydrophobes fortes entre l’analyte et les chaînes C18, alors que la forme neutre du kétoprofène est éluée seu-lement après 3 minutes. A pH 10, il y a inversion des ordres d’élution avec un temps de rétention beaucoup plus long pour la lidocaïne basique.

Influence de la valeur du pH sur la sélectivité Colonne : 125 x 4 mm NUCLEODUR® C18 Gravity, 5 μmEluant : A) acétonitrile – 10 mmol/L formiate d’ammo-

nium, pH 3,0 (50:50, v/v); B) acétonitrile – 10 mmol/L bicarbonate d’ammonium, pH 10,0 (50:50, v/v)

Débit : 1,0 mL/minTempérature : 30 °CDétection : UV, 230 nm Injection : 2 μLPics : 1. Lidocaine, 2. Benzamide, 3. Kétoprofène

1

2

3

pH 3

0 2 min4

1

2

3

pH 10

NH

O

CH3

H3C

CH3CH3

N

1NH2

O2

O

COOHH3C

3

�N application� 120860

Comme déjà mentionné précédemment, la stabilité aux pH de la phase stationnaire est très utile pour notam-ment accroître la sélectivité dans le cadre de déve-loppement de méthode. Les deux chromatogrammes montrent la séparation de 4 alcaloïdes sous des condi-tions acides et basiques.A pH 2,5 les analytes protonés montrent une faible ré-tention (élution très rapide) et en plus, la séparation entre la papavérine et la noscapine n’est pas satisfai-sante alors que les molécules non ionisées sont sépa-rées avec retour à la ligne de base du fait de leur meil-leure rétention en milieu alcalin.

Séparation d’alcaloïdes basiquesColonne : 125 x 4 mm NUCLEODUR® C18 Gravity, 5 μmEluant : A) acétonitrile B) 20 mmol/L (NH4)2HPO4, pH 2,5 / 10,0

10 % A (1 min) → 75 % A en 10 minDébit : 1,0 mL/minTempérature : 25 °CDétection : UV, 254 nmInjection : 2 μLPics :1. Lidocaine2. Papavérine3. Noscapine4. Diphénhydramine

0 5 min

1

2

34

2

13

4

pH 2,5

pH 10,0


Les chromatogrammes ci-dessous montrent la stabi-lité de la NUCLEODUR® C18 Gravity sous des conditions d’utilisation alcalines. La Gravity ultra-pure montre une exceptionnelle stabilité du fait de son étanchéité par-faite de la surface de la silice par rapport à des phases mobiles très alcalines.

Stabilité de la NUCLEODUR® C18 Gravity à pH 11 Colonne : 50 x 4,6 mm NUCLEODUR® Gravity, 5 μmEluant : méthanol – eau – ammoniaque (20:80:0,5,

v/v/v), pH 11Débit : 1,3 mL/minTempérature : 30 °CDétection : UV, 254 nmInjection : 2,0 μLPics : 1. Théophylline, 2. Caféine

0 1 2 min

1ère injection

après 300 injections


[email protected]



Aucune détérioration de la qualité de la séparation n’est constatée même après 300 injections, qui pourrait se remarquer par l’élargissement des pics ou la diminu-tion des temps de rétention. La stabilité du gel de silice aux pH sous conditions al-calines est le point essentiel d’un effet cinétique que se base sur la vitesse de dissolution du support silice. Il ne faut néanmoins pas oublier que ce phénomène est également dépendant de la nature et de la concentra-tion du tampon et de la température. Il est connu que l’utilisation de tampons phosphate plus particulière-ment dans des températures élevées écourtent la durée de vie des colonnes analytiques même sous des condi-tions d’utilisations modérées de valeur de pH. Il faudra si possible, remplacer les tampons phosphates par des alternatives moins corrosives.Le chromatogramme à droite montre l’exceptionnelle stabilité des colonnes NUCLEODUR® C18 Gravity uti-lisées sous des conditions très acides. Les temps de rétention des trois composés du test de colonne restent pratiquement inchangés même après utilisation de 5000 mL d’éluant. En raison de l’extrême stabilité de la modification de la surface, aucune rupture de liaisons Si–O–Si n’est remarquée, et de ce fait il n’y a pas de

dégradation du remplissage de la colonne dont l’effi-cacité demeure.

Stabilité de la NUCLEODUR® C18 Gravity à pH 1,5 Colonne : 125 x 4 mm NUCLEODUR® C18 Gravity, 5 μmEluant : acétonitrile – 1 % TFA dans l’eau (50:50, v/v),

pH 1,5 Débit : 1,0 mL/minTempérature : 30 °C, Détection : UV, 230 nmInjection : 5 μL Pics : 1. Pyridine, 2. Toluène, 3. Ethylbenzène

1 2

3

0 5 min10

1ère injection

après 5000 mL d’éluant


Références de commandeEluant dans la colonne� acétonitrile – eau

Longueur → 30 mm 50 mm 75 mm 100 mm 125 mm 150 mm 250 mm

NUCLEODUR® C18 Gravity, 1,8 µm phase octadécyle, taille des particules 1,8 µm, 18 % C

Colonnes analytiques EC2 mm DI 760078.20 760079.20 760071.20 760076.20 760075.203 mm DI 760078.30 760079.30 760076.304 mm DI 760078.40 760079.40 760076.40

4,6 mm DI 760078.46 760079.46 760076.46Précolonnes EC* 4 x 2 mm : 761901.20 4 x 3 mm : 761901.30

NUCLEODUR® C18 Gravity, 3 µm phase octadécyle, taille des particules 3 µm, 18 % C

Colonnes analytiques EC2 mm DI 760080.20 760084.20 760081.20 760083.20 760082.203 mm DI 760080.30 760084.30 760081.30 760083.30 760082.304 mm DI 760080.40 760084.40 760081.40 760083.40 760082.40

4,6 mm DI 760080.46 760086.46 760084.46 760081.46 760083.46 760082.46Précolonnes EC* 4 x 2 mm : 761902.20 4 x 3 mm : 761902.30Précolonnes CC** 8 x 3 mm : 761124.30 8 x 4 mm : 761124.40




www.mn-net.com 119




Colonnes VarioPrep10 mm DI 762103.100 762109.100 762113.10021 mm DI 762103.210 762109.210 762113.21032 mm DI 762113.32040 mm DI 762100.400 762113.400

Précolonnes VP*** 10 x 8 mm : 762160.80 10 x 16 mm : 762160.160 15 x 32 mm : 762163.320


Colonnes VarioPrep21 mm DI 762250.21040 mm DI 762250.400

Précolonnes VP*** 10 x 16 mm : 762160.160 15 x 32 mm : 762163.320

NUCLEODUR® C8 Gravity, 1.8 µm phase octyle, taille des particules 1.8 µm, 11 % C



NUCLEODUR® C8 Gravity, 5 µm phase octyle, taille des particules 5 µm, 11 % C



Colonnes VarioPrep10 mm DI 762081.100 762071.100 762070.10021 mm DI 762081.210 762071.210 762082.210 762070.210

Précolonnes VP*** 10 x 8 mm : 762097.80 10 x 16 mm : 762097.160Les colonnes EC et VarioPrep sont vendues par unité d’emballage, précolonnes voir ci-dessous

Systèmes de précolonnes Support de précolonnePrécolonnes pour colonnes EC de DI 2 mm 3 mm 4 mm 4,6 mm

* Système de protection des colonnes (Column Protection System) (unité)

EC 4/2 (3) 4/3 (3) 4/3 (3) 4/3 (3) 718966

** Système de précolonne ChromCart® (unité) CC 8/3 (3) 8/3 (3) 8/4 (3) 8/4 (3) 721359

Précolonnes pour colonnes VarioPrep de DI 8, 10 mm 16, 21 mm 32, 40 mm ≥ 50 mm*** Précolonnes VP (unité) VP 10/8 (2) 10/16 (2) 15/32 (1) 15/50 (1) Support de précolonne VP 718251 718256 718253 718255

Pour les détails sur nos systèmes de colonnes voir pages 189–196

[email protected]



NUCLEODUR® C18 Isis phase avec une haute sélectivité stérique Caractéristiques principales :

• Exceptionnelle sélectivité stérique• Excellente désactivation• Utilisable en LC/MS et HPLC à pH 1–10, particules de 1,8 µm compatibles UHPLC

Caractéristiques techniques : Phase C18 avec greffage spécial polymérique ; taille des pores 110 Å ; tailles des particules 1,8 µm, 3 µm et 5 µm ; teneur en carbone 20 %

Domaines d’applications : Stéroïdes, composés aromatiques substitués (o, m, p), vitamines liposolubles

USP L1

Modification de la surface (greffage)NUCLEODUR® C18 Isis est une phase HPLC constituée d’un polymère de silanes C18 spécial greffé à la surface de la silice. Un réseau étroit de chaînes alkyles protège la couche de gel de silice sous-jacente (avec une te-neur en carbone de 20 %). La mise en œuvre de réseaux transversaux présents ponctuellement permet de sé-parer des composés ayant des structures moléculaires semblables qui se différencient stéréochimiquement. Cette capacité est qualifiée de sélectivité stérique.

Modèle SlotSelon le modèle Slot de Sander et Wise [LCGC 8 (1990) 378–390] la surface de la phase polymérique est recou-verte d’une épaisse couche de groupes alkyles. La place entre les groupements C18 forme un espace dans la structure de la surface. Dans cet espace, seules les molécules planaires peuvent rentrer profondément en comparaison à des molécules plus encombrantes avec un poids moléculaire et un rapport longueur/largeur similaires. L’ordre d’élution du o-terphényl (en haut) avant le triphénylène (en bas) est ainsi expliqué.

Sélectivité stériqueLa séparation d’isomères de position et de structure ainsi que la séparation de molécules planaires et non planaires sont particulièrement appropriées avec cette phase, comme le montre le comparatif entre la phase NUCLEODUR® C18 Isis (rouge), une phase C18 monomé-

rique (vert) et une phase C18 avec un endcapping po-laire (bleu) du chromatogramme ci-dessous.

Sélectivité stérique de la NUCLEODUR® C18 IsisColonnes : 125 x 4 mm; NUCLEODUR® C18 Isis, phase C18 monomérique, phase C18 avec un endcapping polaireEluant : méthanol – eau (90:10, v/v)Débit : 1 mL/min, température 35 °CDétection : UV, 254 nmInjection : 5 μLPics : 1. o-Terphényl2. m-Terphényl3. p-Terphényl4. Triphénylène

0 1 2 3 4 min

1

2

3 4

C18, monomérique C18, endcapping polaire

C18 Isis

La séparation du o-terphényl et du triphénylène per-met de mettre en évidence les qualités sélectives d’une phase RP pour différencier deux molécules de formes moléculaires différentes. Le o-terphényl présente une structure spatiale et le triphénylène une structure plane. Le facteur de séparation (α) est une mesure pour la sélectivité stérique. Les chromatogrammes ci-dessous montrent la différence considérable entre la NUCLEODUR® C18 Isis et une phase C18 conventionnelle.

Sélectivité stérique de la NUCLEODUR® C18 IsisColonnes : 125 x 4 mmEluant : méthanol – eau (80:20, v/v)Débit : 1 mL/min, température 40 °CDétection : UV, 254 nm, injection 1 μLPics : 1. o-Terphényl, 2. Triphénylène

0 5 10

1

2

0 5 10 min

1

2

NUCLEODUR®

C18 Isis

α = 1,35

phase C18monomérique

α = 1,93

La structure complexe du greffage confère à la phase NUCLEODUR® C18 Isis une très bonne stabilité.

www.mn-net.com 121



Désactivation de la surfaceSeule une phase avec une haute densité de groupe-ments C18 à la surface de la silice avec une protection optimale de la surface permet de chromatographier les composés basiques. C’est uniquement sous ces condi-

tions que l’on obtient une forme symétrique des pics pour des composés basiques (voir application 121210 sur www.mn-net.com/apps).

Références de commande Eluant dans la colonne� acétonitrile – eau


NUCLEODUR® C18 Isis, 1,8 µm taille des particules 1,8 µm



NUCLEODUR® C18 Isis, 3 µm taille des particules 3 µm



NUCLEODUR® C18 Isis, 5 µm taille des particules 5 µm




Précolonnes VP*** 10 x 8 mm : 762420.80 10 x 16 mm : 762420.160 15 x 32 mm : 762422.320Les colonnes EC et VarioPrep sont vendues par unité d’emballage, précolonnes voir ci-dessous



EC 4/2 (3) 4/3 (3) 4/3 (3) 4/3 (3) 718966




[email protected]



NUCLEODUR® C18 Pyramid phase pour des éluants fortement aqueux Caractéristiques principales :

• Stable avec des phases mobiles 100 % aqueuses• Sélectivité intéressante pour des molécules polaires• Excellente désactivation pour les bases, utilisable en LC/MS grâce

à un faible bleeding, particules de 1,8 µm compatibles UHPLC Caractéristiques techniques : Phase spéciale avec un endcapping polaire ; taille des pores 110 Å ; tailles des particules 1,8, 3 et 5 µm (sur demande 7 et 10 µm pour la préparative) ; teneur en carbone 14 % ; stabilité aux pH 1–9

Domaines d’applications : Analgésiques, antibiotiques à base de pénicilline, les bases des acides nucléiques, les vitamines hydrosolubles, les agents com-plexants, les acides organiques

USP L1

HPLC RP avec des éluants fortement aqueuxAfin d’éviter l’activité indésirable des silanols résiduels, on utilise des phases hautement désactivées avec de fortes teneurs en carbone mais, celles-ci ont une sélec-tivitée limité en dehors des interactions apolaires. Les composés polaires comme les acides carboxyliques et les métabolites de médicaments présentent une très faible rétention sur les phases inverses fortement gref-fées en raison du caractère hydrophobe marqué et de la faible sélectivité polaire de celles-ci. Ils nécessitent pour leur solubilité et leur rétention des phases mobiles fortement aqueuses. Des colonnes de phase inverse conventionnelle présentent des problèmes de stabilité avec des phases mobiles contenant de forte teneur en eau (> 95 %). En effet, les temps de rétention diminuent soudainement et la reproductibilité de la séparation est mauvaise. Ce phénomène s’appelle collapse, la phase mobile est chassée des pores car la phase inverse hy-drophobe n’est pas complètement mouillée par la phase mobile [U. D. Neue et al., Chromatographia 54 (2001) 169–177].Afin d’augmenter la stabilité de la colonne avec des phases mobiles fortement aqueuses il existe diffé-rentes possibilités. Le concept le plus prometteur est d’incorporer un groupe polaire dans la chaîne alkyle hydrophobe, ou d’utiliser un endcapping hydrophile afin d’augmenter la mouillabilité de la phase inverse. La NUCLEODUR® PolarTec peut être prise comme exemple de technique de groupement polaire inclus dans la chaîne alkyle.

Stabilité de la NUCLEODUR® C18 PyramidNUCLEODUR® C18 Pyramid est une phase à base de silice avec un endcapping hydrophile, recommandée pour une utilisation avec des phases mobiles jusqu’à 100 % aqueuses. La figure ci-joint montre le compor-tement des acides tartrique, acétique et maléique sous des conditions purement aqueuses sur la colonne NU-CLEODUR® C18 Pyramid en comparaison avec une phase inverse conventionnelle. La NUCLEODUR® C18 Pyramid présente des temps de rétention quasi inchangés entre l’injection initiale et le redémarrage de la colonne après 12 heures d’arrêt du débit, alors que la colonne de

phase inverse conventionnelle collapse complètement après 5 minutes.

Test de stabilité

0

12

3

12

12

3

3

5 min 0 5 min

Redémarrage après 12 h

Arrêt

Redémarrage après 5 min

Injection initiale

C18

con

vent

ionn

elle

Arrêt

C18

Pyr

amid

Les deux colonnes : 125 x 4 mmEluant : 50 mmol/L KH2PO4 pH 2,5Débit : 0,7 mL/min, température 25 °CDétection : UV, 210 nmInjection : 1 μL Pics : 1. Acide tartrique, 2. Acide acétique, 3. Acide maléique


Caractéristiques de rétention

Séparation de composés très polaires Colonne : 125 x 4 mm NUCLEODUR® C18 Pyramid, 5 μmEluant : 0,2 % H3PO4Débit : 1,0 mL/minTempérature : 22 °CDétection : UV, 202 nm

1

2

20 min

t0

Injection : 2 μLPics : 1. Acide formique2. Acide acétique


La NUCLEODUR® C18 Pyramid se différencie des phases stationnaires C18 conventionnelles par des caractéris-

www.mn-net.com 123



tiques de rétention polaires spécifiques. Le chroma-togramme ci-contre montre l’amélioration des temps de rétention sur la colonne NUCLEODUR® C18 Pyramid. En plus de son exceptionnelle sélectivité polaire elle présente des propriétés de rétention hydrophobe per-formantes (voir application 119190 sur www.mn-net.com/apps). Les facteurs de capacité des composés apolaires, c’est à dire des alkylbenzènes substitués

(toluène, éthylbenzène) seront comparables à ceux des phases standards C18. L’augmentation de la polarité est sans conséquence sur la rétention des composés ioni-sables. La NUCLEODUR® C18 Pyramid présente même pour des composés extrêmement basiques comme un mélange d’antidépresseurs tricycliques une excellente désacti-vation (voir application 119200 sur www.mn-net.com).



NUCLEODUR® C18 Pyramid, 1,8 µm taille des particules 1,8 µm



NUCLEODUR® C18 Pyramid, 3 µm taille des particules 3 µm



NUCLEODUR® C18 Pyramid, 5 µm taille des particules 5 µm




Précolonnes VP*** 10 x 8 mm : 762291.80 10 x 16 mm : 762291.160 15 x 32 mm : 762293.320Les colonnes EC et VarioPrep sont vendues par unité d’emballage, précolonnes voir ci-dessous



EC 4/2 (3) 4/3 (3) 4/3 (3) 4/3 (3) 718966




[email protected]



NUCLEODUR® PolarTec phase avec groupement polaire intégré Caractéristiques principales :

• Excellente désactivation• Utilisable en LC/MS et avec des éluants 100 % aqueux ;

particules de 1,8 µm compatibles UHPLC• Remarquable sélectivité stérique

Caractéristiques techniques : Phase avec groupe polaire intégré dans la chaîne alkyle ; taille des pores 110 Å ; tailles des particules 1,8 µm, 3 µm et 5 µm ; teneur en carbone 17 % ; stablilité aux pH 1–9

Domaines d’applications : Bonne sélectivité pour les phénols et les composés azotés, les composés polaires comme les médicaments basiques, les acides organiques, les pes-ticides, les acides aminés, les vitamines hydrosolubles, etc.

USP L1 et L60

HPLC en mode RP avec des conditions 100 % aqueusesLes interactions dominantes sur des phases C18 conven-tionnelles sont des forces de dispersion de London apolaires. En complément de ces interactions apolaires les phases avec des groupements polaires intégrés pré-sentent également des interactions polaires (dipôle-di-pôle, liaisons hydrogène, π-π, etc.) Ce type d’interac-tion améliore la rétention et la sélectivité des composés polaires comme les acides carboxyliques, les composés avec des groupements phénoliques et azotés.

Séparation des histidines Colonne : 150 x 3 mm NUCLEODUR® PolarTec, 3 μmEluant : 1,0 mmol/L d’acide perfluoropentanoïque

dans l’eau – 0,5 mmol/L d’acide perfluoropenta-noïque dans l’acétonitrile (99,5:0,5, v/v)

Débit : 0,4 mL/minTempérature : 20 °CDétection : UV, 230 nm Pics : 1. 3-�éthylhistidine R2 = CH32. Histidine R1 = H3. 1-�éthylhistidine R1 = CH3

0 2 4 6 8 min

1 2

3

NH2O

OHN

N

R2

R1


Afin d’augmenter la rétention des composés polaires il est souvent nécessaire de diminuer le ratio de la phase mobile organique à zéro. Dans de telles condi-tions un grand nombre de phases C18 conventionnelles présentent un effet de « démouillage ». En effet, ceci implique que la phase mobile est expulsée des pores. Ce phénomène induit une forte diminution des temps de rétention. NUCLEODUR® PolarTec est stable avec

des phases mobiles 100% aqueuses et par conséquent parfaitement adaptée pour la séparation de composés polaires comme les composés organiques.NUCLEODUR® PolarTec présente une excellente désac-tivation pour les bases en raison de l’effet de protection induit par le groupement polaire intégré. Celui-ci place cette phase parmi les meilleures phases du marché présentant un groupement polaire intégré. La sélec-tivité stérique marquée de la phase (voir le radar de Tanaka) est un outil complémentaire pour la séparation de mélanges complémentaires.En raison de son faible bleeding, NUCLEODUR® PolarTec est compatible pour la LC/MS et la UHPLC/MS.Même après plusieurs jours ou semaines dans des conditions purement aqueuses, les chaînes C18 de la phase NUCLEODUR® PolarTec ne se plient ou ne se col-lapsent. Une diminution des temps de rétention n’est pas observée.

Stabilité de la NUCLEODUR® PolarTec Colonne : 150 x 3 mm NUCLEODUR® PolarTec, 3 μmEluant : 30 mmol/L KH2PO4, pH 3,0Débit : 0,5 mL/minTempérature : 30 °CDétection : UV, 220 nm

1

2 3

4

5

0 1 2 3 4 5 6 7 min

198 h0 h

Pics : 1. Cytosine2. Uracile3. Adénine4. Guanine5. Thymine

�esures faites toutes les 14 h; entre chaque temps, le débit a été arrêté.


www.mn-net.com 125



Malgré le caractère polaire du groupement fonctionnel intégré, NUCLEODUR® PolarTec présente des propriétés

hydrophobes suffisantes et est parfaitement adaptée pour l’analyse de composés basiques.



NUCLEODUR® PolarTec, 1,8 µm taille des particules 1,8 µm



NUCLEODUR® PolarTec, 3 µm taille des particules 3 µm



NUCLEODUR® PolarTec, 5 µm taille des particules 5 µm





Les colonnes EC et VarioPrep sont vendues par unité d’emballage, précolonnes voir ci-dessous



EC 4/2 (3) 4/3 (3) 4/3 (3) 4/3 (3) 718966




[email protected]



NUCLEODUR® PFP phase hydrophobe pentafluorophényle Caractéristiques principales :

• Phase hydrophobe avec une sélectivité alternative aux phases C18 classiques

• Principe de séparation basé sur 4 mécanismes de rétention : interactions polaires (liaisons hydrogènes), dipôle-dipôle, π-π et hydrophobes

• Compatible en LC/MS et en UHPLC/MS du fait de son faible bleeding Caractéristiques techniques : Phase modifiée propyl-pentafluorophényl et multi-endcapping ; taille des pores 110 Å ; tailles des particules 1,8 µm, 3 µm et 5 µm; teneur en carbone 8 %; stabilité aux pH 1–9

Domaines d’applications : Composés aromatiques et insaturés (phénols, polyphénols dont flavo-noïdes), composés halogénés, isomères de position (stéréoisomères), substances polaires comme les composés pharmaceutiques, antibio-tiques ; fortes interactions avec les composés basiques

USP L43

Sélectivité orthogonaleDepuis ces dernières années, les phases stationnaires fluorées ont gagné en intérêt. La plus commune des phases fluorées est la modification pentafluorophényle (PFP ou F5). L’orthogonalité de la sélectivité comparée aux phases traditionnelles alkyles élargit les possibi-lités en HPLC analytique. La phase NUCLEODUR® PFP présente une excellente sélectivité tout particulière-ment pour les composés très polaires comme les com-posés aromatiques et insaturés, les phénols et les hy-drocarbures halogénés.

Séparation d’antihistaminiquesColonnes : 250 x 3 mm NUCLEODUR® PFP, 5 μm

250 x 3 mm NUCLEODUR® C18 Gravity, 5 μmEluant : acétonitrile – 20 mmol/L KH2PO4 (30:70, v/v)Débit : 0,563 mL/minTempérature : 30 °CDétection : UV, 210 nm

1 2 3 4 5 6 8 70 5 10 15 20 min

1

23

4

56

8

7

Pics : 1. Acide maléique2. Chlorphéniramine3. Bromphéniramine4. Triprolidine5. Diphénhydramine6. Prométhazine7. Cétirizine8. Hydroxyzine


NUCLEODUR® PFP présente 4 mécanismes de réten-tion : intéractions polaires (liaisons hydrogène), dipôle-dipôle, π-π et interactions hydrophobes. Les phases fluorées se distinguent particulièrement par leur capa-cité d’échange d’ions et par leur sélectivité stérique. En raison de son faible bleeding, NUCLEODUR® PFP est compatible pour la LC/MS et la UHPLC/MS.

NUCLEODUR® PFP présente une excellente stabilité à de faibles valeurs de pH, grâce à un procédé de greffage spécial.

Séparation de phénolsColonnes : 125 x 4 mm NUCLEODUR® PFP, 5 μm

125 x 4 mm NUCLEODUR® C18 HTec, 5 μmEluant : acétonitrile avec 0,1 % d’acide formique – eau

avec 0,1 % d’acide formique (35:65, v/v)Débit : 1 mL/min, température 35 °CDétection : UV, 280 nmPics : 1. o-Crésol2. m-Crésol3. 3,4-Diméthylphénol4. 3,5-Diméthylphénol5. 2,5-Diméthylphénol

6. 2,6-Dichlorophénol7. 2,3-Dichlorophénol8. 2,4-Dichlorophénol9. 3,4-Dichlorophénol10. 2,4-Dibromophénol11. 3,5-Dibromophénol

1 2

3

4

5

687

910

11

0 2 4 6 8 10 12 14 min

1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11


Les temps de rétention observés sur NUCLEODUR® PFP sont différents de ceux obtenus avec un gel de silice modifié alkyl. Ainsi cette phase permettra souvent de réaliser des séparations qui ne sont pas réalisables sur des phases C18 conventionnelles. Les domaines d’applications de cette phase couvrent la Bio-pharma, l’environnement, les substances natu-relles.

www.mn-net.com 127





NUCLEODUR® PFP, 1,8 µm taille des particules 1,8 µm



NUCLEODUR® PFP, 3 µm taille des particules 3 µm



NUCLEODUR® PFP, 5 µm taille des particules 5 µm








EC 4/2 (3) 4/3 (3) 4/3 (3) 4/3 (3) 718966




[email protected]



NUCLEODUR® Sphinx RP phase RP bifonctionnelle Caractéristiques principales :

• Sélectivité spécifique dûe à une couverture bifonctionnelle de la silice• Interactions π-π complémentaires pour accroître les possibilités de dévelop-

pement• Compatible en LC/MS du fait de son faible bleeding, particules de 1,8 µm

compatibles UHPLC Caractéristiques techniques : Silice modifiée octadécyl et propylphényl ; taille des pores 110 Å ; tailles des par-ticules 1,8 µm, 3 µm et 5 µm ; teneur en carbone 15 % ; stabilité aux pH 1–10 ; haute reproductibilité et qualité constante

Domaines d’applications : Antibiotiques à base de quinolone, sulfonamides, xanthines, les composés aro-matiques substitués

USP L1 et L11

Une alternative aux sélectivités RPLa NUCLEODUR® Sphinx RP est caractérisée par une ex-ceptionnelle sélectivité dûe à la bonne répartition des groupes octadécyles et phényles liés de façon cova-lente. La combinaison d’interactions hydrophobes clas-siques avec des interactions π-π (noyaux aromatiques) étend le domaine de sélectivité en comparaison avec des phases inverses classiques. NUCLEODUR® Sphinx RP est particulièrement recommandée pour la sépara-tion de molécules qui contiennent des noyaux aroma-tiques et des liaisons doubles et triples. La NUCLEODUR® Sphinx RP présente tout particuliè-rement pour des composés polaires un avantage avec ses interactions π-π en comparaison aux phases C18 conventionnelles. Un endcapping exhaustif minimise l’activité des silanols résiduels et garantit une excel-lente forme de pics même pour des composés basiques.

Stabilité de la NUCLEODUR® Sphinx RP à pH 10 Colonne : 50 x 4,6 mm NUCLEODUR® Sphinx RP, 5 μmEluant : méthanol – NH3 dilué, pH 10 (20:80, v/v)Débit : 1,0 mL/min, température 30 °CDétection : UV, 275 nm, injection 3 μL

0 1 2 3 4 5 min

1 2

après 300 injections(avec 5 L d’éluant)

1ère injection

Pics : 1. Théophylline 2. Caféine


Différente des phases standards phényles NUCLEODUR® Sphinx RP n’est pas sensible à l’hydrolyse et peut donc être utilisée pour des applications LC/MS et UHPLC/MS. En raison des interactions moléculaires supplémen-taires, NUCLEODUR® Sphinx RP est un bon complé-ment aux phases NUCLEODUR® C8 / C18 Gravity et NUCLEODUR® C18 Pyramid.

Séparation de flavonoïdes sur 3 différentes phases NUCLEODUR®

Colonnes : 150 x 4,6 mm NUCLEODUR® Sphinx RP, 5 μm NUCLEODUR® C18 Gravity, 5 μm NUCLEODUR® C8 Gravity, 5 μm

Eluant : eau – méthanol (40:60, v/v)Débit : 1 mL/minTempérature : 30 °CDétection : UV, 270 nmInjection : 3 μLPics :

O

OH

OH

HO

HO

OH

O

OH

R2

HO

R3 O

R12–61

1. Catéchine 2. Rutine R1 = R3 = OH, R2 = O-Rutinose3. Fisetine R1 = R2 = OH, R3 = H4. Quercetine R1 = R2 = R3 = OH5. Kaempférol R1 = H, R2 = R3 = OH6. Isorhamnétine R1 = OCH3, R2 = R3 = OH

1

2

34

56

C8 Gravity

C18 Gravity

Sphinx RP

0,0 2,5 5,0 7,5 min


www.mn-net.com 129





NUCLEODUR® Sphinx RP, 1,8 µm taille des particules 1,8 µm



NUCLEODUR® Sphinx RP, 3 µm taille des particules 3 µm



NUCLEODUR® Sphinx RP, 5 µm taille des particules 5 µm








EC 4/2 (3) 4/3 (3) 4/3 (3) 4/3 (3) 718966




[email protected]



NUCLEODUR® C18 HTec phase préparative désactivée pour les bases Caractéristiques principales :

• Phase RP standard et robuste pour la transposition en HPLC préparative, compatible en LC/MS, particules de 1,8 µm compatibles UHPLC

• Haute capacité de charge et excellente stabilité• Excellente désactivation pour les bases

Caractéristiques techniques : Modification octadécyle de haute densité ; taille des pores 110 Å ; tailles des particules 1,8 µm, 3 µm, 5 µm, 7 μm et 10 μm pour des séparations analytiques et préparatives ; teneur en carbone 18 %, stabilité aux pH 1–11

Domaines d’applications : Pour les séparations sophistiquées analytiques et préparatives des composés pharmaceutiques basiques, neutres et acides ; des acides aminés dérivatisés, des pesticides, des vitamines liposolubles, des aldéhydes, des cétones et des composés phénoliques

USP L1

Les séparations préparatives ont une forte demande en matériau HPLC à base de silice. Outre une excellente sélectivité et une désactivation pour les bases, la ro-bustesse (pH, stabilité aux pressions,…) et la capacité sont des critères vitaux pour une séparation optimale et efficace à l’échelle préparative.

Sélectivité et désactivation pour les basesLe procédé innovant de end-capping induit une ex-cellente désactivation de la phase pour les bases – le test d’Engelhardt démontre la superbe sélectivité de la phase, l’excellente symétrie et forme des pics sur une large gamme de polarité. D’autre part NUCLEODUR® C18 HTec présente un faible bleeding et est donc parfaite-ment adaptée en LC/MS.

Test EngelhardtColonne : 250 x 4 mm NUCLEODUR® C18 HTec, 5 μmEluant : méthanol – eau (49:51, v/v)Débit : 1 mL/minTempérature : 40 °CDétection : UV, 254 nmInjection : 5 μL

31

24

5

6 7

0 10 20 30 40 min

Pics :1. Uracile2. Aniline3. Phénol4. p-Ethylaniline5. N,N-Diméthylaniline6. Toluène7. Ethylbenzène


Stabilité et durée de vieBasée entièrement d’une silice NUCLEODUR® totale-ment synthétique robuste et sphérique, NUCLEODUR® C18 HTec présente une excellente stabilité mécanique. Cette phase est ainsi le choix parfait pour remplir soit même les colonnes préparatives.Le greffage spécial de la surface ainsi que le procé-dé de end-capping confèrent à la phase une stabilité chimique très élevée même dans des conditions chro-matographiques extrêmes comme des débits élevés, températures ou des solvants critiques (DMSO). D’autre part NUCLEODUR® C18 HTec présente une longue durée de vie à des pH acides (pH 1) et basiques (pH 10).

Test de stabilité aux pHColonne : 150 x 4 mm NUCLEODUR® C18 HTec, 5 μmDébit : 1 mL/minDétection : UV, 254 nmInjection : 5 μLpH 1:Eluant : acétonitrile –

1 % TFA dans l’eau (50:50, v/v); 80 °C

% de rétention initiale de l’éthylbenzène 693 injections

pH 10:Eluant : méthanol –

50 mmol/L triéthylamine (25:85, v/v); 50 °C

% de N initial de la théophylline 1034 injections

0

20

40

60

80

100%

20 40 60 80 h 40 80 120 160 200 h

En raison du procédé innovant de greffage, NUCLEODUR® C18 HTec présente d’excellentes propriétés de séparations analytiques et est la phase de premier choix pour les transpositions en préparative.

www.mn-net.com 131



TranspositionEn raison des hautes normes de qualité de notre pro-duction de gel de silice et de la chimie de la phase, combinées à des techniques de remplissage optimi-sées, NUCLEODUR® C18 HTec présente une excellente transposition entre l’analytique et la préparative. La taille des particules (ex. 5, 7 ou 10 µm) et la dimension des colonnes (ex. DI 4,6 à 21 mm) sont respectées.

Up-scaling avec NUCLEODUR® C18 HTecColonnes : EC 250 x 4,6 mm NUCLEODUR® C18 HTec, 5 μm

VP 250 x 21 mm NUCLEODUR® C18 HTec, 5 μmEluant : acétonitrile – eau (80:20, v/v)Débit : 1,3 mL/min / 27 mL/minTempérature : 22 °CPression : 84 bars / 109 barsDétection : UV, 254 nmInjection : 3 μL / 60 μLPics : (1 mg/mL de chaque) 1. Phénol2. Naphtalène3. Anthracène

2 4 6 8 min

12

3


CapacitéUn critère fondamental d’efficacité en HPLC prépara-tive est la capacité de séparation. NUCLEODUR® C18 HTec est caractérisée par une haute capacité de charge dans les deux conditions acides et basiques, alors que les colonnes concurrentes présentent déjà un ef-fet de surcharge même à des charges inférieures (x).

Capacité de charge sous des conditions acidesColonnes : VP 100 x 21 mm NUCLEODUR® C18 HTec, 5 μm

100 x 21.2 mm AXIA™ Gemini® 5 μm C18 110 ÅEluant : acétonitrile – acide formique dans l’eau pH 3,0

(30:70, v/v)Débit : 28 mL/minTempérature : 22 °CPression : 124 barsDétection : UV, 254 nmPics : charge totale 40 mg(échantillon dissout dans le D�SO)1. 4-Acétamidophénol (5 mg)2. 2-Acétamidophénol (10 mg)3. Acide acétylsalicylique (25 mg)

0 1 2 min

1

2

3




NUCLEODUR® C18 HTec, 1,8 µm taille des particules 1,8 µm



NUCLEODUR® C18 HTec, 3 µm taille des particules 3 µm



[email protected]







Colonnes préparatives VarioPrep10 mm DI 762551.100 762554.100 762556.10021 mm DI 762551.210 762553.210 762554.210 762556.21032 mm DI 762553.320 762555.320 762556.32040 mm DI 762555.400 762556.40050 mm DI 762553.500 762555.500 762556.500

Précolonnes VP*** 10 x 8 mm : 762591.80 10 x 16 mm : 762591.16015 x 32 mm : 762592.320 15 x 50 mm : 762592.500










EC 4/2 (3) 4/3 (3) 4/3 (3) 4/3 (3) 718966



Pour les détails sur nos systèmes de colonnes voir pages 189–196Retrouvez les phases en vrac NUCLEODUR® C18 HTec de 5, 7 et 10 µm pour la préparative page 198

www.mn-net.com 133



NUCLEODUR® C18 ec · C8 ec phases apolaires pour les analyses de routine Caractéristiques principales :

• Phases RP standards idéales pour des analyses de routine et pour la transposition en HPLC préparative

• Modification octadécyle (C18) et octyle (C8) de densité moyenne avec un end-cap-ping exhaustif

• Large spectre d’applications Caractéristiques techniques : Taille des pores 110 Å ; tailles des particules 3 µm et 5 µm ; 7 µm, 10 µm, 12 µm, 16 µm, 20 µm, 30 µm et 50 µm pour les séparations en préparatives ; teneur en carbone 17,5 % pour la C18, 10,5 % pour la C8

Stables aux pH 1–9, haute reproductibilité lot à lot Domaines d’applications : Drogues basiques, neutres et acides ; acides aminés derivés ; pesticides ; vitamines liposolubles ; aldéhydes et cétones ; composés phénoliques

USP L1 (C18) / L7 (C8)

NUCLEODUR® C18 ec pour les analyses de routine et pour la transposition à l’HPLC préparativeL’efficacité d’une séparation est contrôlée par la taille des particules et par la sélectivité de la phase station-naire. En raison de l’exceptionnelle couverture de la surface avec des alkylsilanes monomères combinée avec un endcapping exhaustif, la surface de la silice présente une faible activité des silanols. L’élution de composés critiques comme les médicaments basiques est possible sans adsorption ou déformation des pics. NUCLEODUR® C18 ec est disponible en 9 différentes tailles de particules (3, 5, 7, 10, 12, 16, 20, 30 et 50 µm), permettant une utilisation de la HPLC analytique ra-pide à la HPLC préparative moyenne et basse pression. NUCLEODUR® C18 ec est donc un outil idéal pour les ap-plications de transposition en chromatographie liquide.

Capacité de chargeLa capacité de charge est sûrement la caractéristique principale pour des applications en HPLC préparative. Celle-ci est déterminée par la taille des pores, le vo-lume des pores, et la surface spécifique du matériaux de remplissage. Cependant, elle peut aussi être influen-cée par le poids moléculaire des analytes. La figure ci-dessous décrit la corrélation entre l’augmentation de la charge de la colonne et la diminution de l’efficacité de séparation sur une colonne NUCLEODUR® 100-20 C18 ec pour l’acétophénone et le butyrophénone.

Courbe de chargeColonne : 250 x 4,6 mm NUCLEODUR® 100-20 C18 ec, Eluant : acétonitrile – H2O 80:20 (v/v), débit : 1,0 mL/min, température : 25 °C, détection : UV, 280–370 nm

3000

2000

2000

00 10 100 1000 10000Pl

atea

ux th

éoriq

ues

acétophénone

butyrophénone

μg / composé

Stabilité aux pH de NUCLEODUR® C18 ec

0 1 2 3 min

1000 Inj.750 Inj.500 Inj.250 Inj.

Start

5

4

32

1

Séparation de la théophylline et de la caféine à pH 10

Colonne : 30 x 3 mm NUCLEODUR® 100-5 C18 ec Eluant : méthanol – NH3 aqueux (20:80, v/v), pH 10 Débit : 0,5 mL/min Température : 25 °C Détection : UV, 254 nm

Séparation de l’uracile, vératrole, toluène et éthylben-zène à pH 1,5

Colonne : 30 x 3 mm NUCLEODUR® 100-5 C18 ec

Eluant : acétonitrile – H2O (65:35, v/v), TFA, pH 1,5

Débit : 1,0 mL/minTempérature : 25 °CDétection : UV, 254 nm

1000 Inj.

500 Inj.

1 2 3 4 5 min0

Stabilité chimiqueLa pureté de la silice de base ainsi que l’exceptionnelle chimie greffage des silanes minimisent considérable-ment le risque de dissolution, ou d’hydrolyse à des pH extrêmes. Les chromatogrammes ci-dessus montrent le comportement des temps de rétention à des valeurs de pH de 1,5 et 10,0 obtenus avec NUCLEODUR® 100-5 C18 ec.

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Phases octyles NUCLEODUR®

En complément de la large gamme des phases NUCLEODUR® C18, MACHEREY-NAGEL propose les phases NUCLEODUR® C8 Gravity et NUCLEODUR® C8 ec afin d’étendre les possibilités en phase inverse. A base de la même silice totalement sphérique et ultra pure, les phases C8 présentent les mêmes excellentes caractéristiques de stabilité mécanique et chimique que leurs homologues C18. Ainsi, la NUCLEODUR® C8 Gravity peut être utilisée dans des pH extrêmes (1–11) en choisissant des conditions d’élution appropriées. En raison de leur plus courte chaîne et d’une plus faible hydrophobicité de la phase stationnaire, la rétention des composés apolaires sur ces phases est réduite et par conséquent la durée de l’analyse est moindre. On observe d’autre part une plus forte sélectivité polaire, particulièrement pour la séparation d’analytes ioni-sables (en comparaison aux phases C18). NUCLEODUR® C8 ec et NUCLEODUR® C8 Gravity sont recommandées pour le développement de nouvelles méthodes mais aussi pour des analyses de routine robustes.Un grand nombre de chromatographistes se demandent qu’elle est la différence entre les phases C8 et C18 et dans quel cas utiliser plus l’une que l’autre. Bien qu’il n’y ait pas de guide général qui pourrait faciliter le choix de la colonne, il est néanmoins judicieux d’avoir ces deux types de phases dans son laboratoire.Des études comparatives révèlent des différences de sélectivité entre NUCLEODUR® C8 ec et NUCLEODUR® C18 ec. La séparation des phénols à droite montre la sé-paration sur une phase octyle avec retour à la ligne de

base entre le 2-éthoxyphénol et le diméthoxybenzène (vératrole) et en plus une inversion des ordres d’élution entre le phénol et le 4-méthoxyphénol.

Séparation des phénolsColonnes : 250 x 4 mm NUCLEODUR® 100-5 C8 ec / C18 ecEluant : A) eau, B) méthanol

C8: 20 % B (2 min) → 60 % B en 12 min C18: 25 % B (2 min) → 65 % B en 12 minDébit : 1.0 mL/min, température 25 °CDétection : UV, 275 nm, injection 10 μLPics :1. Résorcine2. Pyrocatéchol3. 4-�éthoxyphénol4. Phénol5. 2-�éthoxyphénol

6. 2-Ethoxyphénol7. Vératrole8. Biphenyl-2-ol9. Phénétole

0 5 10 15 min

1

2

4

3 5

6

7

89

C18 ec

1

2

3

4

5

6

7

89

C8 ec

�N application� s 120890 / 120891

C18 ou C8 · à chacune son avantage Les phases C8 et C18 de haute densité permettent d’avoir des pics symétriques sans tailing, également pour des composés très polaires.

Les phases octyles (C8) montrent une plus grande sélectivité polaire. Les phases octadécyles (C18) montrent une plus grande sélectivité hydrophobe. Les composés hydrophobes ont des temps de rétention plus courts sur des phases C8.


Longueur → 50 mm 75 mm 100 mm 125 mm 150 mm 250 mm

NUCLEODUR® 100-3 C18 ec phase octadécyle, 17,5 % C, taille des particules 3 µm



Systèmes de précolonnes : voir les phases NUCLEODUR® précédentesRetrouvez des informations détaillées concernant nos systèmes de colonnes voir pages 189–196Retrouvez les phases en vrac NUCLEODUR® C18 ec de 10–50 µm pour la préparative page 198

www.mn-net.com 135



Longueur → 50 mm 75 mm 100 mm 125 mm 150 mm 250 mm







Colonnes VarioPrep10 mm DI 762011.100 762302.100 762010.10021 mm DI 762011.210 762302.210 762010.21032 mm DI 762010.32040 mm DI 762303.400 762010.40050 mm DI 762010.500


NUCLEODUR® 100-3 C8 ec phase octyle, 10,5 % C, taille des particules 3 µm

Colonnes analytiques EC2 mm DI 760063.20 760059.20 760060.20 760062.203 mm DI 760063.30 760059.30 760060.30 760062.304 mm DI 760063.40 760059.40 760060.40 760062.40


NUCLEODUR® 100-5 C8 ec phase octyle, 10,5 % C, taille des particules 5 µm

Colonnes analytiques EC2 mm DI 760700.20 760704.20 760701.20 760703.203 mm DI 760700.30 760704.30 760701.30 760703.304 mm DI 760700.40 760704.40 760701.40 760703.40



Précolonnes VP*** 10 x 8 mm : 762092.80 10 x 16 mm : 762092.160 15 x 32 mm : 762321.320Les colonnes EC et VarioPrep sont vendues par unité d’emballage, précolonnes voir phases NUCLEODUR® précédentes

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NUCLEODUR® HILIC phase zwittérionique

NPC IC

HILIC

RPC

éluant

analyte

adso

rban

t Caractéristiques principales :

• Idéale pour une analyse chromatographique stable et reproductible des composés polaires

• Utilisable pour des applications analytiques et préparatives et parti-culièrement en LC/MS, particules de 1,8 µm compatibles UHPLC

• Rapide à conditionner Caractéristiques techniques : Silice modifiée ammonium – acide sulfonique ; taille des pores 110 Å ; tailles des particules 1,8, 3 et 5 µm ; teneur en carbone 7 % ; stabilité aux pH 2–8.5

Domaines d’applications : Composés hydrophiles comme les bases et les acides organiques polaires, composés naturels polaires, nucléosides, oligonucléotides, acides aminés, les peptides, les vitamines hydrosolubles

NUCLEODUR® HILICLes sciences séparatives sont toujours à la recherche de nouvelles méthodes et stratégies efficaces pour pouvoir répondre aux besoins des analyses modernes. En ef-fet, pour les composés polaires, la HPLC phase inverse (méthode analytique la plus courante) est souvent limi-tée. Dans ce cas les phases stationnaires hydrophiles proposent un outil supplémentaire pour la séparation des analytes polaires en HPLC. La notion HILIC (Chro-matographie à interactions hydrophiles) a été introduite en 1990 par Andrew Alpert [A. Alpert, J. Chromatography 499 (1990), 177–196] – depuis lors il a fallu beaucoup d’efforts pour développer des phases HPLC hydrophiles robustes et reproductibles pour la chromatographie HILIC.Le mode HILIC combine les caractéristiques de 3 mé-thodes majeures : phase inverse (RPC), phase normale (NPC), et chromatographie ionique (IC) :

Les phases stationnaires (adsorbants) sont la plu-part du temps des modifications polaires sur de la silice ou des polymères (SiOH, NH2, Diol, (zwitter) ions…) – comme en phase normale (NPC).

Les phases mobiles (éluants) sont des mélanges de tampons aqueux et de modifiants organiques comme l’acétonitrile ou le méthanol – comme en phase inverse (RPC).

Les domaines d’applications incluent les composés relativement polaires ainsi que les ions organiques et inorganiques – comme en chromatographie ionique (IC).

« Le mode HILIC est une chromatographie en phase normale de composés polaires et ioniques sous des conditions de phase inverse. »

CH3

CH3

SiO

2

+ N SO3 –

La NUCLEODUR® HILIC est une phase spéciale modifiée zwittérionique à base des particules NUCLEODUR® ul-tra-sphériques. Le caractère bétaïne du ligand ammo-

nium – acide sulfonique confère une répartition équiva-lente de charge, ainsi, une surface globalement neutre mais hautement polaire.

Caractéristique de rétentionGénéralement le mode HILIC est décrit comme de la chromatographie de partage ou comme un système d’extraction liquide-liquide entre la phase mobile et la phase stationnaire. En opposition avec une phase mo-bile pauvre en eau, une couche riche en eau se forme à la surface de la phase stationnaire polaire. Ainsi, se produira une distribution des analytes entre ces deux couches. D’autre part le mode HILIC inclut des méca-nismes électrostatiques faibles, ainsi que des donneurs d’hydrogène entre les molécules neutres polaires sous des conditions d’élution fortement organiques. Ceci distingue le mode HILIC de la chromatographie ionique - le grand principe de séparation HILIC est basé sur la polarité et le degré de solvatation du composé.

Séparation de l’uracile et du naphtalèneColonnes : 125 x 4 mm NUCLEODUR® C18 Pyramid, 3 μm

125 x 4 mm NUCLEODUR® HILIC, 3 μmEluant : acétonitrile – eau (90:10, v/v)Débit : 1,0 mL/min, température 25 °CDétection : UV, 254 nm

1

2

2

1

0 1 2 min

Pics :1. Uracile2. Naphtalène

�N application� s 122911 / 122912

Les composés les plus polaires auront une plus forte interaction avec la couche aqueuse stationnaire par rapport aux composés les moins polaires – il en résul-tera ainsi une plus forte rétention.

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Les composés apolaires présentent un profil d’élution plus rapide en raison des faibles interactions hydro-phobes. Ainsi, comme montré par la séparation de l’uracile et du naphtalène, l’ordre d’élution est souvent inversé sur les colonnes HILIC comparé aux colonnes RP.

Caractéristiques de stabilitéEn raison d’un procédé unique de modification de la surface (brevet en cours) les colonnes NUCLEODUR® HILIC présentent un court temps d’équilibration – après seulement 20 minutes d’équilibration la 2nde injection montre des résultats stables et reproductibles.Au-delà de ceci, les colonnes NUCLEODUR® HILIC sont caractérisées par une remarquable durée de vie – même après presque 800 séries la colonne ne présente pas de perte de performance – forme des pics et temps de rétention sont conservés. En raison de sa haute capacité de charge, la NUCLEODUR® HILIC est parfai-tement adaptée pour des applications préparatives et semi-préparatives. Globalement la NUCLEODUR® HILIC

présente d’excellentes caractéristiques chromatogra-phiques et est ainsi un choix parfait pour la séparation de composés polaires ou chargés.

Stabilité et équilibrationColonne : 250 x 4 mm NUCLEODUR® HILIC, 5 μmEluant : CH3CN – 5 mmol/L acétate d’ammonium (80:20, v/v)Débit : 0,6 mL/min, température 25 °CDétection : UV, 254 nm

0 2 4 6 8 10 12 14 16 min

1 Inj.

2 Inj.

378 Inj.

793 Inj.

54

32

1

Pics : 1. Thymine 2. Uracile 3. Adénine 4. Cytosine 5. Guanosine


Références de commande Eluant dans la colonne� acétonitrile – eau (80:20, v/v)


NUCLEODUR® HILIC, 1,8 µm taille des particules 1,8 µm

Colonnes EC2 mm DI 760521.20 760523.20 760525.20 760526.20 760528.203 mm DI 760521.30 760523.30 760526.304 mm DI 760521.40 760523.40 760526.40


NUCLEODUR® HILIC, 3 µm taille des particules 3 µm

Colonnes EC2 mm DI 760532.20 760534.20 760531.20 760533.20 760530.203 mm DI 760532.30 760534.30 760531.30 760533.30 760530.304 mm DI 760532.40 760534.40 760531.40 760533.40 760530.40

4,6 mm DI 760532.46 760534.46 760531.46 760533.46 760530.46Précolonnes EC* 4 x 2 mm : 761961.20 4 x 3 mm : 761961.30Précolonnes CC** 8 x 3 mm : 761580.30 8 x 4 mm : 761580.40

NUCLEODUR® HILIC, 5 µm taille des particules 5 µm

Colonnes EC2 mm DI 760552.20 760554.20 760551.20 760553.20 760550.203 mm DI 760552.30 760554.30 760551.30 760553.30 760550.304 mm DI 760552.40 760554.40 760551.40 760553.40 760550.40

4,6 mm DI 760552.46 760554.46 760551.46 760553.46 760550.46Précolonnes EC* 4 x 2 mm : 761962.20 4 x 3 mm : 761962.30Précolonnes CC** 8 x 3 mm : 761590.30 8 x 4 mm : 761590.40Les colonnes EC sont vendues par unité d’emballage, les précolonnes en paquets de 3 ; pour les détails voir page 189


* Système de protection des colonnes (Column Protection System)

EC 4/2 4/3 4/3 4/3 718966

** Système de précolonne ChromCart® CC 8/3 8/3 8/4 8/4 721359

[email protected]



NUCLEODUR® CN / CN-RP silice ultra pure greffée cyano Caractéristiques principales :

• Haute capacité de rétention particulièrement pour les composés très polaires et insaturés

• Colonne multi mode (RP et PN), accroît les possibilités de sélectivité• Stable aux hydrolyses à faible pH (domaine de travail pH 1–8)

Caractéristiques techniques : Silice de haute pureté modifiée cyanopropyle ; taille des pores 110 Å ; tailles des particules 3 µm et 5 µm ; teneur en carbone 7 % ; end-cap-ping spécial ; haute reproductibilité lot à lot ; caractéristiques de réten-tion différentes par rapport aux C8 et C18

Domaines d’applications : Antidépresseurs tricycliques,

stéroïdes, acides organiques

USP L10

Alternative aux phases hydrophobesEn HPLC phase inverse, il est courant de démarrer le développement d’une nouvelle méthode avec des co-lonnes de type C18 ou C8. Cependant, pour des sépa-rations plus délicates il est nécessaire d’avoir une plus forte polarité et des propriétés de sélectivité diffé-rentes. Ces caractéristiques ne sont pas toujours ob-tenues avec des phases inverses classiques, qui sont caractérisées par une couche hydrophobe d’alkylsilane monomère ou polymère. Afin d’améliorer la résolution de composés difficile-ment séparables sur des phases apolaires, il est pos-sible de changer de greffage. Les phases NUCLEODUR® CN-RP, parfaitement endcapped et très reproductibles, ont à leur surface des groupes cyanopropyles capables de générer des comportements de rétention différents comparés à des phases modifiées avec des groupe-ments alkyles purs (voir figure ci-dessous).

La polarité des phases NUCLEODUR® CN-RP peut être classifiée comme intermédiaire, basée sur des méca-nismes de rétention multiples comme les dipôle-di-pôle, π-π, et aussi les interactions hydrophobes [C. S. Young et R. J. Weigand, LCGC 20 (2002) 464–473]. C’est pour-quoi, cette phase présente une sélectivité distincte aussi bien pour les composés organiques polaires que pour les molécules qui contiennent des systèmes avec des électrons π (ex. analytes avec des double liaisons, antidépresseurs tricycliques) [V. R. �eyer, Practical High Performance Liquid Chromatography (John Wiley & Sons, New York, 3. Ed., 1999)]. Les phases greffées avec de courtes chaînes sont suspectées de ne pas être stables vis à vis des hydrolyses à faibles pH [J. J. Kirkland, LCGC 14 (1996) 486–500]. L’application 119350 montre que même après 100 injections d’échantillon et un stockage de 4 semaines à pH 1 (tracé bleu) aucun changement des temps de rétention et aucune modification au niveau de la symétrie des pics (tracé vert= nouvelle colonne) n’ont été observés.

Séparation de médicaments contre le refroidis-sement sur deux phases NUCLEODUR®

Colonnes : A) 250 x 4 mm NUCLEODUR® 100-5 C18 ec B) 250 x 4 mm NUCLEODUR® 100-5 CN-RP

Eluant : acétonitrile – 100 mmol/L citrate de sodium pH 2,5 (15:85, v/v)

Débit : 1,0 mL/min, température 25 °CDétection : UV, 270 nm, injection 10 μL

Pics : 1. Acide maléique 2. Noréphédrine 3. Ephédrine 4. Acétaminophène 5. Chlorphéniramine 6. Bromphéniramine

0 4 8 12 min

1

23

4

5

6

1

23

4

5

6


Stabilité de NUCLEODUR® CN-RP à pH 1Colonne : 125 x 4 mm NUCLEODUR® 100-5 CN-RPEluant : acétonitrile – eau, 2 % TFA pH 1 (50:50, v/v)Débit : 1,0 mL/minTempérature : 25 °CDétection : UV, 254 nmInjection : 5 μLPics : 1. Benzamide2. Phtalate de diméthyle3. Phénétole4. o-Xylène5. Biphényle

0 2 4 min

1

2 3

4

5

1ère injection

après 100 injections+ 4 semaines à pH 1


www.mn-net.com 139



Colonnes multi modeGrâce à ses particularités de polarité exceptionnelle, la phase cyano peut être utilisée dans des conditions de phase normale. Les colonnes NUCLEODUR® CN desti-nées à faire de la phase normale sont livrées dans du n-heptane. Le chromatogramme ci-dessous montre

le changement drastique de sélectivité et de l’ordre d’élution pour un mélange de différents stéroïdes en phase normale et en phase inverse. La haute densité de greffage combinée à un endcapping permettent à la NUCLEODUR® CN-RP d’être utilisée pour la sépara-tion de composés ioniques comme les médicaments basiques.

Séparation de stéroïdes en phase normale et phase inversePhase normaleColonne : 250 x 4 mm NUCLEODUR® 100-5 CNEluant : n-heptane – 2-propanol (90:10, v/v)Débit : 1,0 mL/min, température 25 °CDétection : UV, 254 nm, injection 10 μL

Phase inverseColonne : 250 x 4 mm NUCLEODUR® 100-5 CN-RPEluant : acétonitrile – eau (25:75, v/v)Autres conditions comme en phase normale

�N application� s 119271 / 119272

0 5 10 15 min

6+7

5 2

14

3

0 10 20 30 min

1

2

3

45

7

6

Pics : 1. �éthyltestostérone2. Testostérone3. Norgestrel4. �edrysone5. Cortisone6. Hydrocortisone7. Prednisolone

Références de commande Longueur → 50 mm 125 mm 150 mm 250 mm

NUCLEODUR® 100-3 CN-RP taille des particules 3 µm ; éluant dans la colonne acétonitrile – eauColonnes EC

2 mm DI 760159.20 760157.203 mm DI 760157.304 mm DI 760156.40

4,6 mm DI 760156.46Précolonnes EC* 4 x 2 mm : 761941.20 4 x 3 mm : 761941.30Précolonnes CC** 8 x 3 mm : 761430.30 8 x 4 mm : 761430.40

NUCLEODUR® 100-5 CN-RP taille des particules 5 µm ; éluant dans la colonne acétonitrile – eauColonnes EC

4 mm DI 760153.40 760152.404,6 mm DI 760153.46 760154.46 760152.46

Précolonnes EC* 4 x 3 mm : 761944.30Précolonnes CC** 8 x 4 mm : 761420.40

NUCLEODUR® 100-5 CN taille des particules 5 µm; éluant dans la colonne n-heptaneColonnes EC

4 mm DI 760151.40 760149.40 760150.404,6 mm DI 760151.46 760149.46 760150.46

Précolonnes EC* 4 x 3 mm : 761943.30Précolonnes CC** 8 x 4 mm : 761419.40Les colonnes EC sont vendues par unité d’emballage, les précolonnes en paquets de 3 ; pour les détails voir page 189



EC 4/2 4/3 4/3 4/3 718966


[email protected]



NUCLEODUR® NH2 / NH2-RP silice ultra pure greffée amino Caractéristiques principales :

• Colonne multi mode (RP, PN et CI)• Stable aux hydrolyses à faible pH (domaine de travail pH 2-8), 100 % stable dans l’eau ;

utilisable en LC/MS• Accroît les possibilités en HPLC analytique pour les composés polaires

Caractéristiques techniques : Silice de haute pureté modifiée aminopropyle ; taille des pores 110 Å ; tailles des particules 3, 5 et 7 µm ; teneur en carbone 2,5 % ; non endcapped

Domaines d’applications : Composés polaires sous des conditions RP (sucres, bases de l’ADN), hydrocarbures sous des conditions de PN

USP L8

• Chromatographie en phase normale (PN) avec de l’hexane, dichlorométhane ou 2-propanol comme phase mobile pour les composés polaires comme les anilines, les esters, les pesticides chlorés

• Chromatographie en phase inverse (RP) pour les composés polaires avec un éluant aqueux-organique• Chromatographie ionique (CI) pour les anions et les acides organiques avec les tampons usuels (ex. acé-

tate ou phosphate) additionnés de solvants organiques (ex. acétonitrile)

Certains composés, particulièrement les substances polaires, ne peuvent être analysés sur des phases C18. Les phases silices modifiées polaires sont des alterna-tives en termes de sélectivité et permettent ainsi d’ac-croître les possibilités de séparation en HPLC analytique dans le domaine polaire.

Colonnes multi-modeEn complément des phases modifiées cyano, les phases modifiées amino appartiennent aux phases polaires les plus couramment utilisées. Ces deux types de phases présentent un grand avantage. En effet, elles peuvent aussi bien être utilisées en mode RP en utilisant des mélanges d’éluant aqueux-organique qu’en mode PN avec ex. de l’hexane comme phase mobile.

Séparation des sucres en phase inverse Colonne : 250 x 4 mm NUCLEODUR® 100-5 NH2-RPEluant : acétonitrile – eau (79:21, v/v)Débit : 2 mL/minDétection : RIPics :1. Fructose2. Glucose3. Saccharose4. �altose

0 2 4 6 8 10 min

2

1

3

4 5

5. Lactose


La phase NUCLEODUR® NH2 appartient elle aussi aux colonnes multi-mode. Elle peut être utilisée en chro-matographie phase inverse (RP) pour les composés polaires comme les sucres avec des systèmes d’éluant aqueux-organiques, en chromatographie phase nor-male (PN) pour des composés aromatiques substi-tués ou les pesticides chlorés avec une phase mobile

organique comme l’hexane, le dichlorométhane ou le 2-propanol, ou encore en chromatographie ionique pour des anions ou des acides organiques en utilisant des tampons conventionnels et des modifiants orga-niques. Les principaux domaines d’applications de la NUCLEODUR® NH2 sont la séparation des sucres simples et complexes, les alcools sucrés et les autres composés hydroxy en conditions de phase inverse ainsi que les hydrocarbures en conditions de phase normale.

Séparation en phase normale de distillats moyens selon la norme DIN EN 12916

Colonnes : A) 250 x 4 mm NUCLEODUR® 100-5 NH2 B) phase aminopropyle conventionnelle

Eluant : heptaneDébit : 1 mL/minDétection : RIPics : 1. Cyclohexane2. 1-Phényldodécane3. 1,2-Diméthylbenzène4. Hexaméthylbenzène5. Naphtalène6. Dibenzothiophène7. 9-�éthylanthracène

0 2 4 6 8 min10

2

13

4 56 7

2

3

1

4


Grâce au procédé spécial de greffage, NUCLEODUR® NH2 présente une excellente stabilité aux pH élevés ou faibles. La figure suivante montre, que même après plusieurs jours d’exposition de la colonne à un pH de 1.75, l’efficacité de séparation et la forme des pics sont maintenus. Cette longue durée de vie permet de ré-duire la consommation de colonnes et par conséquent les coûts. Cet exemple montre la remarquable stabilité de la phase NUCLEODUR® NH2 et sa pertinence pour les séparations des herbicides totaux (AMPA, glyphosate,

www.mn-net.com 141



glufosinate) – voir application 122190 sur notre bases d’applications en ligne : www.mn-net.com/apps.

Résistance hydrolytique de la phase NUCLEODUR® NH2-RP

Colonne : 250 x 4 mm NUCLEODUR® 100-5 NH2-RPEluant : acétonitrile – 50 mmol/L KH2PO4, pH 1,75

(50:50, v/v)Débit : 0,6 mL/minDétection : UV, 254 nmPics :1. Acide aminométhyl-

phosphonique (A�PA)

0 1 2 3 4 5 min

1

1ère injection

après 3872 min

Séparation des bases de l’ADN Colonne : 250 x 4 mm

NUCLEODUR® 100-5 NH2-RP

Eluant : acétonitrile – eau (80:20, v/v)

Débit : 0,6 mL/minTempérature : 35 °CPression : 30 barsDétection : UV, 254 nmPics :1. Thymine2. Uracile3. Cytosine4. Adénine

�N application� 1221704 6 8 min

1

2

3

4

A base de gel de silice super sphérique NUCLEODUR®, cette phase présente une excellente stabilité aux pres-sions. Elle est donc parfaitement utilisable en prépara-

tive et en LC/MS. D’autre part la haute reproductibilité des lots de la phase NUCLEODUR® NH2, permet de réa-liser des analyses de routine fiables.

Références de commande Longueur → 100 mm 125 mm 150 mm 250 mm

NUCLEODUR® 100-3 NH2-RP taille des particules 3 µm ; éluant dans la colonne acétonitrile – eauColonnes EC

2 mm DI 760740.20 760741.204,6 mm DI 760742.46 760739.46

Précolonnes EC* 4 x 2 mm : 761951.20 4 x 3 mm : 761951.30Précolonnes CC** 8 x 3 mm : 761035.30 8 x 4 mm : 761035.40

NUCLEODUR® 100-5 NH2-RP taille des particules 5 µm ; éluant dans la colonne acétonitrile – eauColonnes EC

2 mm DI 760730.20 760732.203 mm DI 760730.30 760732.304 mm DI 760730.40 760732.40

4,6 mm DI 760730.46 760731.46 760732.46Précolonnes EC* 4 x 2 mm : 761953.20 4 x 3 mm : 761953.30Précolonnes CC** 8 x 3 mm : 761137.30 8 x 4 mm : 761137.40

NUCLEODUR® 100-5 NH2 taille des particules 5 µm ; éluant dans la colonne n-heptaneColonnes EC

4 mm DI 760720.40 760722.404,6 mm DI 760720.46 760721.46 760722.46

Précolonnes EC* 4 x 3 mm : 761952.30Précolonnes CC** 8 x 4 mm : 761130.40Les colonnes EC sont vendues par unité d’emballage, les précolonnes en paquets de 3 ; pour les détails voir page 189



EC 4/2 4/3 4/3 4/3 718966


[email protected]



NUCLEODUR® SiOH silice non modifiée pour des séparations en phase normale

Caractéristiques principales :• Silice de haute pureté totalement sphérique • Stable aux pressions jusqu’à 600 bars• Utilisable pour des séparations analytiques et préparatives de composés polaires et moyennement

polaires Caractéristiques techniques : Silice de haute pureté non modifiée ; taille des pores 110 Å ; tailles des particules 3 à 50 µm ; volume des pores 0,9 mL/g ; surface spécifique (BET) 340 m2/g ; stabilité aux pH 2–8 ; teneur en métaux < 10 ppm (voir page 110)

Domaines d’applications : Composés polaires et moyennement polaires sous des conditions de phase normale

USP L3

Références de commande Eluant dans la colonne� n-heptane

Longueur → 50 mm 125 mm 150 mm 250 mm

NUCLEODUR® 100-3 taille des particules 3 µm

Colonnes EC

4,6 mm DI 760170.46 760172.46 760173.46

Précolonnes EC* 4 x 3 mm : 761966.30Précolonnes CC** 8 x 4 mm : 761007.40

NUCLEODUR® 100-5 taille des particules 5 µm

Colonnes EC4 mm DI 760007.40

4,6 mm DI 760023.46 760012.46 760007.46Précolonnes EC* 4 x 3 mm : 761967.30Précolonnes CC** 8 x 4 mm : 761055.40

Colonnes VarioPrep10 mm DI 762077.100 762078.100 762007.10021 mm DI 762077.210 762078.210 762007.21040 mm DI 762075.400 762007.400

Précolonnes VP* 10 x 8 mm : 762094.80 10 x 16 mm : 762094.16015 x 32 mm : 762330.320

Les colonnes EC sont vendues par unité d’emballage, précolonnes voir ci-dessous



EC 4/2 (3) 4/3 (3) 4/3 (3) 4/3 (3) 718966



Pour les détails sur nos systèmes de colonnes voir pages 189–196Retrouvez les phases en vrac NUCLEODUR® non modifiée de 10–50 µm pour la préparative page 198

www.mn-net.com 143



Notre politique de contrôle qualité en HPLC Norme de production très élevée nos équipements sont certifiés EN ISO 9001:2008

Spécifications qualité strictes pour une exceptionnelle fiabilité

Parfaite reproductibilité dans le même lot et de lot à lot

Chaque colonne est testée individuellement et fournie avec son chromatogramme test et les conditions du test.

Mélange test pour les phases RPDescription Pqt de REFMélange test dans l’acétonitrile pour colonnes HPLC en phase inverse *

1 mL 722394

Vous retrouverez des informations complémen-taires ainsi que d’autres applications des phases NUCLEODUR® dans notre brochure « NUCLEODUR® – Professional solutions for HPLC ».

Notre guide d’applications HPLC présente une bonne introduction sur l’HPLC en phase inverse. Il présente également des exemples d’applica-tions réalisées avec nos phases NUCLEODUR® et NUCLEOSIL®.

Pour toute demande de littérature vous pouvez nous contacter à l’adresse suivante : [email protected].

* Ce produit contient des substances dangereuses, il est spécifiquement étiqueté. Pour plus d’informations merci de consulter la FDS.

[email protected]


NUCLEOSHELL® · Silice core-shell pour la HPLC

Technologie core-shell

Nouveau ! NUCLEOSHELL® 2,7 µm

0,5 μm

0,5 μm

enrobage de silice poreux

enrobage de silice poreux

1,7 μm noyau solide de dioxyde de silicium

Noyau solide en dioxyde de silicium, enrobage homogène de silice poreuse

Meilleure efficacité en comparaison à des matériaux traditionnels totalement poreux

Taille des pores 90 Å ; taille des particules 2,7 µm (noyau 1,7 µm) ; surface spécifique 130 m2/g Utilisable sur des systèmes conventionnels HPLC du fait de sa faible contre pression

Stable aux pressions jusqu’à 600 bars

Les exigences de séparation en HPLC sont en constante évolution, tant dans la séparation et les li-mites de détection que dans les durées des analyses. Afin de réaliser des séparations rapides sans perdre l’efficacité de séparation, différentes approches utili-sées. Une des stratégies est d’utiliser de très petites particules de silice, typiquement inférieures à 2 µm. Les colonnes HPLC remplies avec ce type de micropar-ticules présentent une très haute efficacité de sépara-tion (nombre de plateaux/mètre) et permettent de tra-vailler avec des colonnes plus petites. En complément de ces effets, elles permettent aussi de consommer beaucoup moins de solvant. Cependant, l’inconvénient de l’utilisation de telle colonne est la forte contrepres-sion observée sur les chaînes HPLC. D’autre part elles demandent souvent l’utilisation de systèmes HPLC plus couteux (solvants- détecteurs adaptés à l’UHPLC).

Observation NUCLEOSHELL® au microscope électroniqueLes particules de silice NUCLEOSHELL® sont constituées d’un noyau solide de 1,7 µm de diamètre et d’une sur-

face externe poreuse de 0,5 µm d’épaisseur. Le dia-mètre total de la particule est de 2,7 µm. NUCLEOSHELL® est synthétisée selon un processus breveté et présente une distribution de la taille des particules très étroite (d90/d10 ~1,1). Les colonnes remplies avec les particules core-shell NUCLEOSHELL® ont une excellente efficacité de séparation, avec un nombre de plateaux théoriques comparable aux particules totalement poreuses sub-2 µm.

Rs =N4

ki’+1ki’

1αα–

Rs = résolution α = sélectivitéki’ = rétention N = plateaux théoretiques N ∝ 1/dPdP = diamètre des particules

Résolution Rs par rapport à la taille des particulesColonnes : 50 x 4 mm

NUCLEOSHELL® RP 18, 2,7 μm NUCLEODUR® C18 Gravity, 3 μm NUCLEODUR® C18 Gravity, 1,8 μm

Eluant : acétonitrile – eau (60:40, v/v) Débit : 1 mL/minTempérature : 25 °CDétection : UV, 254 nmPics : 1. Naphtalène2. Ethylbenzène

Une meilleure résolution à deplus faibles contre-pressionsavec des temps de rétention plus courts


1

2

22

11

0,0 0,5 1,0 1,5 2,0 2,5 min

RS = 2,47104 bars

RS = 2,17190 bars

RS = 1,7188 bars

Efficacité théorique de la colonne (conditions optimales)Silice dp

[µm]L

[m]HETP [µm]

Efficacité [plateaux/m]

L [mm]

N Rs Temps d’analyse

NUCLEOSHELL® 2,7 1 4 250 000 100 25 000 112 % 40 %NUCLEODUR® 1,8 1 4,5 222 222 100 22 000 105 % 40 %

3 1 7,5 133 333 150 20 000 100 % 60 %5 1 12,5 80 000 250 20 000 100 % 100 %

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Avantages des particules Core-Shell Particules core-shell comparées à la silice complètement poreuse

Chemins de diffusion courts Transfert de masse rapide (terme C de l’équation de Van Deemter)

Débit élevé sans élargissement des pics pour la Fast LC et la UHPLC

Distribution étroite de la taille des particules (d90/d10 ~ 1,1) Stabilité de la colonne

Haute transmission de chaleur Echauffement par friction minime Efficacité de NUCLEOSHELL® ~ 250 000 m–1 (HETP ~ 4 µm)

Avec des particules totalement poreuses le transfert de masse entre la phase stationnaire et la phase mobile (Terme C de l’équation de Van-Deemter) induit un élar-gissement des pics à des débits élevés. Les courts che-

mins de diffusion dans la particule core-shell réduisent le temps de contact entre l’analyte et la phase station-naire. Ainsi, même à hauts débits de la phase mobile la séparation peut être obtenue.

0

2

4

6

8

10

12

14

16

18

20

0 2 4 6 8 10

Terme A :Terme B :Terme C :

diffusion de Eddy diffusion longitudinal transfert de masse

Colonne :Eluant :Température:Echantillon :

50 x 4,6 mmCH3CN – H2O (70:30, v/v)

Acénaphtène25 °C

Débit linéaire u [mm/s]

Hau

teur

des

pla

teau

x th

éoriq

ues

h [μ

m]

h = A + Bu--- + C · u

NUCLEOSHELL® RP 18

NUCLEODUR® C18 Gravity, 1,8 μm

Kinetex® C18

Ascentis® Express C18

Poroshell 120 EC-C18NUCLEODUR® C18 Gravity, 3 μm

12

Courbes de Van DeemterLes courbes de Van Deemter montrent comment l’efficacité de la séparation dépend du dé-bit. En comparaison avec du gel de silice poreux, les silices core-shell de différents fabricants conservent une efficacité opti-male (plateaux/m max.) sur une large gamme de débit linéaire de la phase mobile.

Baisse de pressionEn comparaison avec des particules de sub-2 µm, les colonnes remplies avec des particules core-shell présentent une contre pression de 60 % et peuvent ainsi être utilisées sur la plupart des chaînes HPLC conventionnelles. Afin d’obtenir la meilleure efficacité de séparation avec les colonnes NUCLEOSHELL®, nous recom-mandons de réduire les volumes morts ex-ternes à la colonne, d’utiliser des capillaires adaptés (<0,15 mm DI) et d’utiliser une cellule de détection adaptée. D’autre part les réglages du détecteur doivent être opti-misés en augmentant le débit de mesure ou en diminuant les constantes de temps.

0

100

200

300

400

500

600

0 2 4 6 8 10 12

Kinetex® C18

Ascentis® Express C18

Poroshell 120 EC-C18

NUCLEODUR® C18 Gravity, 3 μm

dp2

Φ · LC · η · uΔp =

NUCLEOSHELL® RP 18

Colonne :Eluant :Température :

50 x 4,6 mmCH3CN – H2O (70:30, v/v)25 °C

Pres

sion

[bar

s]

Débit linéaire [mm/s]

ΔpΦLCηu

dp

= baisse de pression= resistance au flux (sans dimension)= longeur de la colonne= viscosité= vitesse du flux

= diamètre deslinéaire

particules

NUCLEODUR® C18 Gravity, 1,8 μm

La technologie core-shell de MACHEREY-NAGEL est une alternative pour atteindre une haute efficacité de séparation et de résolution en HPLC avec des temps d’analyse courts et une contre pression modérée.

[email protected]



Caractéristiques des particules NUCLEOSHELL®

Un critère pour définir la stabilité à long terme d’une colonne dans des conditions extrêmes de pH est le pourcentage de diminution du temps de rétention et du nombre de plateaux théoriques. Les figures suivantes

montrent les tests de stabilité de NUCLEOSHELL® RP 18 avec une phase mobile à pH 1 et pH 10 en comparaison avec trois phases concurrentes.

Stabilité sous des conditions acides et basiquesColonnes : 50 x 4,6 mm NUCLEOSHELL® RP 18, 2,7 μm

50 x 4,6 mm Kinetex® 2,6 μm C18Eluant : acétonitrile – 1 % TFA dans l’eau,

pH 1 (50:50, v/v)Débit : 1,3 mL/minTempérature : 80 °CDétection : UV, 254 nmAnalyte : anthracène

0

20

40

60

80

100

0 5000 10000 15000 20000 25000 30000

pH 1

NUCLEOSHELL®

Kinetex®

Volumes de colonne

% ré

tent

ion

inita

le (a

nthr

acen

e)

�N application� s 125520 / 125530

Colonnes : 50 x 4,6 mm NUCLEOSHELL® RP 18, 2,7 μm 50 x 4,6 mm Ascentis® Express C18, 2,7 μm 50 x 4,6 mm Poroshell 120 EC-C18 50 x 4,6 mm Kinetex® 2,6 μm C18

Eluant : 20 mmol/L Na borate – 10 mmol/L NaOH – méthanol, pH 10 (21:49:30, v/v/v)

Débit : 1,5 mL/minTempérature : 40 °CDétection : UV, 220 nmAnalyte : toluidine

0

2000

4000

6000

8000

10000

12000

0 5000 10000 15000 20000

pH 10

Ascentis® ExpressNUCLEOSHELL®

Poroshell 120Kinetex®

Plat

eaux

(tol

uidi

ne)

Volumes de colonne

Stabilité thermiqueTest de stabilité :Colonne : 50 x 2 mm NUCLEOSHELL® RP 18, 2,7 μmEluant : A) 10 mmol/L formiate d’ammonium – méthanol

(9:1, v/v) + 120 μL d’acide formique, ~ pH 4 B) 10 mmol/L formiate d’ammonium – méthanol (1:9, v/v) + 120 μL d’acide formique, ~ pH 4 0–100 % B en 7 min

Débit : 0,5 mL/min, température 100 °CDétection : UV, 220 nmPics :1. Phénol2. Naphtalène

0

1

2

2 4 6 8 min

38 h34 h30 h26 h22 h

�N application� 125400Test d’efficacité :Eluant : acétonitrile – eau (60:40, v/v)Débit : 0,33 mL/min; température 25 °CDétection : UV, 254 nmAnalyte: anthracène

HETP [µm] AsymétrieDémarrage (t = 0) 5,2 0,98Fin (t = 40 h) 5,2 1,01

Les colonnes peuvent aussi être utilisées à hautes tem-pératures sans perdre de la rétention. La symétrie et la forme des pics restent inchangées.

Reproductibilité lot à lotColonne : 50 x 4 mm NUCLEOSHELL® RP 18, 2,7 μmEluant : méthanol – 25 mmol/L KH2PO4, pH 7

(70:30, v/v)Débit : 1 mL/minTempérature : 40 °CDétection : UV, 254 nmPics :1. Uracile2. Toluène3. Ethylbenzène4. Acénaphtène

5. Amitriptyline6. o-Terphényl7. Triphénylène

0 2 4 6 8 10

3

4

56

721

min

Lot 1

Lot 2

Lot 3


La taille uniforme des particules NUCLEOSHELL®, com-binée à une chimie de greffage optimale garantissent des colonnes bien remplies pour des résultats parfaite-ment reproductibles.

www.mn-net.com 147



Capacité des picsLa capacité des pics est une mesure qui permet de compter le nombre de substances qui peuvent être sé-parées sur une colonne par unité de temps. Des pics fins augmentent la capacité des pics et par conséquent améliore l’efficacité de séparation.

Capacité des picsColonnes : 100 x 4,6 mm

NUCLEOSHELL® RP 18, 2,7 μm NUCLEODUR® C18 Gravity, 1,8 μm NUCLEODUR® C18 Gravity, 3 μm NUCLEODUR® C18 Gravity, 5 μm

Eluant : A) acétonitrile, B) eau, 40–100 % A en 4 minDébit : 1,5 mL/minTempérature : 25 °CDétection : UV, 230 nmPics :

1. Acétophénone2. Benzoïne3. Propiophénone

4. Butyrophénone5. Benzophénone6. Valérophénone

0 1 2 3 4 min

3 4

56

2

1


Pression max. [bars]

Résolution (4, 5)

NUCLEOSHELL®, 2,7 µm 255 5,45NUCLEODUR®, 1,8 µm 450 4,14NUCLEODUR®, 3 µm 214 2,97NUCLEODUR®, 5 µm 142 2,30

100125

163

216

0

50

100

150

200

250

nc:tg:W:

NUCLEODUR®5 μm 3 μm

NUCLEOSHELL®

Wtgnc = 1 + ( )

capacité des pics temps du gradient largeur du pic (à la ligne de base)

1,8 μm 2,7 μm

n c (n

orm

é)

Cet exemple montre que NUCLEOSHELL® a une capacité de 33 % supérieure a celle de NUCLEODUR® (particule de 1,8 µm).

Capacité de chargeLes colonnes NUCLEOSHELL® permettent une quanti-fication fiable dans des domaines de détection analy-tiques étendus. Les temps de rétention et la largeur des pics à mi-hauteur restent constants avec des quantités de charge plus importantes, alors que l’on s’attendrait

en comparaison à des silices poreuses, à ce que les particules core-shell aient une plus petite capacité de charge.

Capacité de chargeColonne : 50 x 3 mm NUCLEOSHELL® RP 18, 2,7 μmEluant : acétonitrile – 25 mmol/L KH2PO4, pH 3

(70:30, v/v)Débit : 0,66 mL/min, température 30 °CDétection : UV, 285 nmPics :1. Valérophénone

9 μg

0 1 2 3 min

3 μg

0,9 μg0,3 μg

0

200

400

600

800

0 2 4 6 8 10

R2 = 0.9991Superficie

Charge sur la colonne [μg]

Paramètres de colonne normés

0 2 4 6 8 10

Largeur du pic(à 50 % hauteur du pic)

Temps de rétention

Efficacité(à 10 % hauteur du pic)

Charge sur la colonne [μg]

0

0,2

0,4

0,6

0,8

1

1,2

Greffages NUCLEOSHELL®

Le programme NUCLEOSHELL® comprend les gref-fages suivants :

NUCLEOSHELL® RP 18 NUCLEOSHELL® PFP NUCLEOSHELL® HILIC

[email protected]



NUCLEOSHELL® RP 18 phase apolaire de haute densité Caractéristiques principales :• Technologiecore-shellpouruneHPLCrapideetefficace• Utilisables pour la LC/MS, la UHPLC et dans des pH ex-

trêmes (pH 1–11)• Haute désactivation pour les bases, idéales pour les déve-

loppements de méthode Caractéristiques techniques : Modificationoctadécyle,multi-endcapping;tailledespores90Å,tailledesparticules2,7µm,teneurencarbone7,5%

Domaines d’applications : Recommandées pour toutes sépa-rationsanalytiquessophistiquées,parex.analgésiques,médicamentsanti-inflammatoires,antidépresseurs,herbicides,composésphytopharma-ceutiques,immunosuppresseurs

USP L1

NUCLEOSHELL® RP 18 est à base de silice core-shell. Unprocédédedérivatisationuniquegénèreunesur-facehomogèneavecunehautedensitédegreffagedesilanes(%C~7,5%).Unend-cappingminutieuxéliminetoutes interactions polaires entre la surface de la silice etl’échantillon.LaNUCLEOSHELL® RP 18 est donc par conséquentadaptéepourlaséparationdescomposésbasiques ou ionisables. La réduction conséquente de

l’activité silanoliquede laphasepeutêtredémontréeeninjectantdescomposésbasiquescommelesantidé-presseurstricycliques.Lechromatogrammeci-dessousmontreunprofild’élutionavecdespicstrèsfins(meil-leure résolution) de ces composés hautement polaires avecunexcellentfacteurd’asymétrie1,12pourl’ami-triptyline.

Antidépresseurs tricycliques · comparaison de la sélectivité et la résolutionColonnes : 50 x 4,6 mm

NUCLEOSHELL® RP 18, 2,7 μm Ascentis® Express C18 Kinetex® 2,6 μm C18 Poroshell 120 EC-C18

Eluant : méthanol – acétonitrile – 25 mmol/L KH2PO4, pH 7 (22,5:22,5:55, v/v/v)

Débit : 2 mL/min Pression : 224 bars, 239 bars, 248 bar, 212 barsTempérature : 40 °C Détection : UV, 220 nm

Asymétrie (amitriptyline)

Résolution (8, 9)

NUCLEOSHELL® 1,12 3,35Ascentis® Express 2,07 1,91Kinetex® 1,33 n.a.Poroshell 1,05 1,95

1

2

3

7

89

6

5

4

0 2 4 6 8 10 12 14 16 18 min

1

2

3

4

0 1 32 min

NUCLEOSHELL®

Ascentis®

Kinetex®

Poroshell

Pics :1. Protriptyline2. Désipramine3. Maprotiline4. Nortriptyline5. Doxépine6. Imipramine7. Amitriptyline8. Clomipramine9. Trimipramine

MN application� 124960

www.mn-net.com 149



La séparation des 13 antibiotiques de la famille des beta-lactame illustre la réduction des temps d’analyse en utilisant des particules core-shell, sans perdre de résolution et avec une contre pression modérée.

NUCLEOSHELL® RP 18 combine une technologie de silice innovante et une excellente désacti-vation de la surface. Elle dépasse ainsi les per-formances des silices C18 conventionnelles en terme, d’efficacité et résolution et de rapidité. En raison de la géométrie de la particule core-shell, la contre pression générée par des débits élevés est modérée, et permet ainsi son utilisation sur des chaînes HPLC conventionnelles. NUCLEOSHELL® RP 18 avec son excellente stabili-té aux pH, ses caractéristiques de faible bleeding en LC/MS et sa robustesse est un parfait outil de développement de méthodes et d’analyses de routine en HPLC moderne.

Séparation de 13 antibiotiques de type β-lactame en moins de 3 min

Colonnes : 50 x 4 mm NUCLEOSHELL® RP 18, 2,7 μm 150 x 4 mm NUCLEODUR® C18 Gravity, 5 μm

Eluant : A) acétonitrile; B) 20 mmol/L KH2PO4, pH 3,5 10 % A (0,5 min) → 50 % A en 1,5 min (0,5 min 50 % A) 10 % A (3 min) → 50 % A en 9 min (3 min 50 % A)

Débit : 2 mL/min, 1 mL/minPression : 270 bars, 110 barsTempérature : 25 °C Détection : UV, 220 nmPics :1. Amoxicilline2. Ampicilline3. Céfalexine4. Céfotaxime5. Céfoxitine

6. Céfamandole7. Céfalotine8. Pipéracilline9. Pénicilline V10. Oxacilline

11. Cloxacilline12. Nafcilline13. Dicloxacilline

0,0 0,4 0,8 1,2 1,6 2,0 min

2,5 min270 bar

0 2 4 6 8 10 12 min

1

23

46

5

7 8 9

1011

1213

1

23 4

6

5

7 89

10 11

12

13



Longueur → 50 mm 100 mm 150 mm

NUCLEOSHELL® RP 18, 2,7 µmColonnes EC

2 mm DI 763132.20 763134.20 763136.203 mm DI 763132.30 763134.30 763136.304 mm DI 763132.40 763134.40 763136.404,6 mm DI 763132.46 763134.46 763136.46

Précolonnes EC* 4 x 2 mm : 763138.20 4 x 3 mm : 763138.30

Les colonnes EC sont vendues par unité d’emballage, les précolonnes en paquets de 3.



EC 4/2 4/3 4/3 4/3 718966

Pour les détails du système de colonne EC voir page 189

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NUCLEOSHELL® PFP phase pentafluorophényle hydrophobe Caractéristiques principales :

• Technologie core-shell pour une HPLC rapide et efficace• Phase hydrophobe avec une sélectivité alternative aux phases C18

classiques• Principe de séparation basé sur 4 mécanismes de rétention : inte-

ractions polaires (liaisons hydrogènes), interactions dipôle-dipôle, interactions π-π et interactions hydrophobes

Caractéristiques techniques : Modification pentafluorophénylpropyle, multi-endcapped ; taille des pores 90 Å, taille des particules 2,7 µm, teneur en carbone ~ 3 %; stabilité aux pH 1–9 ; utilisables pour la LC/MS et la UHPLC

Domaines d’applications : Composés aromatiques et

insaturés, phénols (polyphé-nols dont flavonoïdes), com-posés halogénés, isomères de position (stéréoisomères), composés polaires comme les composés pharmaceu-tiques, antibiotiques ; fortes interactions avec les composés basiques

USP L43

Sélectivité orthogonaleDepuis ces dernières années, les phases stationnaires fluorées ont gagné en intérêt. La plus commune des phases fluorées est la modification pentafluorophényle (PFP ou F5). L’orthogonalité de la sélectivité compa-rée aux phases traditionnelles alkyles élargit les pos-sibilités en HPLC analytique. La phase NUCLEOSHELL® PFP présente une excellente sélectivité tout particu-lièrement pour les composés très polaires comme les composés aromatiques et insaturés, les phénols et les hydrocarbures halogénés.Alors que les phases C18 ne procurent que des inte-ractions hydrophobes entre la phase stationnaire et les analytes, la phase NUCLEOSHELL® PFP offre quatre mé-canismes de rétention : interactions polaires (liaisons hydrogène), dipôle-dipôle, π-π et interactions hydro-phobes. Les phases fluorées se distinguent particuliè-rement par leur capacité d’échange d’ions et par leur sélectivité stérique.

Stabilité de la NUCLEOSHELL® PFP à pH 1Colonne : 100 x 4,6 mm NUCLEOSHELL® PFP, 2,7 μmEluant : acétonitrile – 0,5 % TFA, pH 1 (50:50, v/v)Débit : 1,3 mL/min, température 60 °C Détection : UV, 254 nmAnalyte : éthylbenzène

0

20

40

60

80

100

120

0 2000 4000 6000

NUCLEOSHELL® PFP

% de la rétention initiale

% des plateaux initiaux


Bétabloquant · sélectivité orthogonale de la NUCLEOSHELL® PFPColonnes : 100 x 4,6 mm

NUCLEOSHELL® RP 18, 2,7 μm NUCLEOSHELL® PFP, 2,7 μm

Eluant : A) acétonitrile + 0,1 % d’acide formique B) 0,1 % d’acide formique 10–35 % A en 2,5 min, 35-50 % A en 2 min

Débit : 1,7 mL/min Température : 25 °C Détection : UV, 280 nmPics :1. Aténolol2. Pindolol3. �étroprolol4. Labétalol5. Alprénolol6. Propranolol

�N application� 125610 0 1 2 3 4 min

1

2

3

4

6

5

1

2

3

4 5

6

www.mn-net.com 151



MéthylacétophénonesColonnes : 100 x 4,6 mm NUCLEOSHELL® PFP, 2.7 μm

250 x 4 mm NUCLEODUR® PFP, 5 μm 100 x 4,6 mm Kinetex® 2.6 μm PFP

0 10 20 30 40 min

1

NUCLEODUR® PFP, 1 mL/min

2

3

0 5 10 min

1

2

31

NUCLEOSHELL® PFP3 mL/min

2

3

NUCLEOSHELL® PFP, 1,5 mL/min

Kinetex® PFP, 1,5 mL/min

Eluant : méthanol – eau (35:65, v/v) Débit : 1,5 mL/min, 3 mL/min, 1 mL/min, 1,5 mL/min Température : 35 °C Détection : UV, 254 nm Pics :1. o-�éthylacétophénone2. p-�éthylacétophénone3. m-�éthylacétophénone


NUCLEOSHELL® combine les avantages de la technologie core-shell, de la haute stabilité et de la sélecti-vité orthogonale. C’est un outil utile et complémentaire pour la séparation efficace de composés comme les isomères, les composés halogénés et les composés aromatiques et / ou polaires.



NUCLEOSHELL® PFP, 2,7 µmColonnes EC






EC 4/2 4/3 4/3 4/3 718966


[email protected]



NUCLEOSHELL® HILIC phase zwittérionique

NPC IC

HILIC

RPC

éluant

analyte

adso

rban

t Caractéristiques principales :

• Technologie core-shell pour une HPLC rapide et efficace• Idéale pour une analyse chromatographique stable et reproductible

des composés polaires• Rapide à conditionner

Caractéristiques techniques : Silice modifiée ammonium – acide sulfonique ; taille des pores 90 Å, taille des particules 2,7 µm, teneur en carbone 1,3 % ; stabilité aux pH 2–8,5 ; utilisable en LC/MS et en UHPLC

Domaines d’applications : Composés hydrophiles comme les bases et les acides organiques polaires, les composés naturels polaires, nucléosides, oligonucléotides, acides aminés, les peptides, les vitamines hydrosolubles

NUCLEOSHELL® HILICLa chromatographie liquide à interactions hydro-philes est une technique séparative utilisant une phase stationnaire polaire et une phase mobile oranique-aqueuse. Un miminum d’eau 2 % est indispensable afin d’obtenir une couche aqueuse permanente entre la surface de l’adsorbant et la fraction organique de la phase mobile. Les molécules de l’échantillon sont sé-parées par chromatographie de partage, dans laquelle les composés polaires seront plus fortement retenus que les composés neutres et moins hydrophiles. Par conséquent accroître la partie aqueuse de la phase mo-bile diminuera la rétention des composés polaires. Le profile particulier de rétention du mode HILIC permet de chromatographier des composés très polaires et des petites molécules qui ne présentent aucune rétention sur des phases inverses C8 ou C18.

Séparation ultra rapide avec une contre pression modéréeNUCLEOSHELL® HILIC est une phase stationnaire de technologie core-shell greffée covalement avec un li-gand acide sulfonique 3-N,N-diméthylaminopropane (breveté).Le caractère bétaïne de l’échangeur fort d’anions confère une répartition équivalente de charge et facilite les temps d’équilibration.

CH3

CH3

SiO

2

+ N SO3 –

Une bonne séparation des composés polaires comme la créatine et la créatinine (composés physiologiques importants) peut être réalisée sur une NUCLEOSHELL® HILIC ainsi que sur une NUCLEODUR® HILIC 1.8 µm avec des rétentions similaires mais avec beaucoup moins de contre pression.

Séparation de créatine et créatinineColonnes : 50 x 4 mm NUCLEOSHELL® HILIC, 2,7 μm

50 x 4 mm NUCLEODUR® HILIC, 1,8 μmEluant : acétonitrile – 10 mmol/L acétate d’ammonium,

pH 4,0 (90:10, v/v) Débit : 1,7 mL/minPression : 129 bars

180 barsTempérature : 25 °CDétection : UV, 210 nm Pics :1. Créatinine2. Créatine

1

2

0,0 0,2 0,4 0,6 0,8 1,0min�N application� 124990

www.mn-net.com 153



Le chromatogramme suivant montre la méthode de transfert d’une colonne totalement poreuse HILIC 3 µm vers une phase core-shell de 2,7 µm avec des caracté-ristiques de sélectivité équivalentes. Le temps d’analyse

a été réduit à 1 min. La contre pression de la colonne est modérée < 400 bars, tandis que la consommation de solvant est réduite à moins de 35 %.

Séparation des catécholamines

0 5 10 min

1

2

3

4

5

6

7

12 min12 mL1

2

3

4

56

7

4.5 min4.5 mL

1

1 min4 mL

2

3

4

56

7

Core-Shell {Totalement

poreux

(consommationdu solvantpar cours)

Colonnes : 100 x 4 mm NUCLEOSHELL® HILIC, 2.7 μm 100 x 4 mm NUCLEOSHELL® HILIC, 2.7 μm 250 x 4 mm NUCLEODUR® HILIC, 3 μm

Eluant : acétonitrile – 100 mmol/L formiate d’ammonium, pH 3,2 (80:20, v/v)

Débit : 4 mL/min, 1 mL/min, 1 mL/minDétection : 395 bar, 95 bar, 116 barTempérature : 25 °CDétection : UV, 280 nmPics :1. DOPAC2. Sérotonine3. Dopamine4. Epinéphrine5. Norépinéphrine6. DOPA7. DOPS


NUCLEOSHELL® HILIC présente une chromatographie stable et reproductible et comprend tous les avan-tages des technologies de pointe qu’offrent les particules core-shell.



NUCLEOSHELL® HILIC, 2,7 µmColonnes EC






EC 4/2 4/3 4/3 4/3 718966


Silice core-shell :

séparation en 1 min

pression < 400 bars

[email protected]


NUCLEOSIL® · Silice standard pour la HPLC

Les phases NUCLEOSIL® sont des gels de silice poreux sphériques. Elles se caractérisent par leur structure SiO2 très pure et régulière, et ont gagné une place importante en tant que matériau de remplissage dans tous les domaines de la chromatographie moderne.

Une des premières silices sphériques utilisée en chromatographie Développée dans les années 70 – un remplissage mondialement reconnu

Choix fiable pour les applications de routine Le plus grand choix de greffages sur le marché

Grâce à sa granulométrie NUCLEOSIL® peut être utilisée pour la chromato-graphie analytique et préparative.

Les avantages des silices NUCLEOSIL®

Grande stabilité de remplissage grâce aux parti-cules sphériques

Grande efficacité grâce à la distribution étroite de la taille des particules

Grande capacité de séparation grâce à la technique de greffage

Grande stabilité chimique et mécanique Grande capacité de charge et taux de recouvrement élevés

Grande reproductibilité d’une charge à l’autre

Caractéristiques physiquesNUCLEOSIL® est fabriquée avec différentes tailles de pores (50, 100, 120, 300, 500, 1000 et 4000 Å) et différentes tailles de particules de 3 µm (uniquement NUCLEOSIL® 50, 100 et 120) à 10 µm avec une distri-bution étroite de la taille des particules. Les phases NUCLEOSIL® à pores étroits montrent une résistance à la pression de 500 bars, les phases NUCLEOSIL® à larges pores sont stables jusqu’à des pressions de 300 ou 400 bars. Pour un résumé des propriétés des gels de silice NUCLEOSIL® voir page 199.

Les greffages NUCLEOSIL®

Les silices NUCLEOSIL® sont disponibles aussi bien non modifiées qu’avec de nombreuses phases chimique-ment liées :

Les phases inverses comme C18 AB, C18 HD, C18 Nautilus, C18 endcapped, Protect I, C8 HD, C8 ec, C8, C4, C2, et phényl séparant principalement par des interactions hydrophobes (forces de Van der Waals). Plus les molécules de l’échantillon seront apolaires, plus elles seront retenues – plus la molécule est polaire, moins il y a d’interactions hydrophobes et plus les temps de rétention seront courts.

Les phases modifiées chimiquement par des groupes polaires comme CN, NH2, N(CH3)2, OH se caractérisent par des séparations sélectives. En raison de la disponibilité de différents groupes fonctionnels, il est possible de varier les caractéris-tiques chimiques de la surface et par conséquence les caractéristiques d’adsorption de la phase sta-tionnaire.

Les échangeurs d’ions à base de silice (NUCLEOSIL® SA et SB) sont stables de pH 2 à 8. Ces échangeurs d’ions ne gonflent pas et présentent, par oppo-sition aux résines échangeuses d’ions classiques, une perméabilité constante, même en cas de chan-gement de la force ionique et/ou du pH de l’éluant. La séparation peut être influencée par : - le type de tampon - la force ionique et - la valeur du pH

www.mn-net.com 155



Aperçu des phases HPLC NUCLEOSIL®

Phase NUCLEOSIL® Spécifications Stabilité Structure Principe de séparation Page

Phases inverses NUCLEOSIL®

C18

Phase octadécyle, densité moyenne de greffage, end-capped15 % C · USP L1

pH 2–8

NU

CLE

OSI

L®

(Si-O

2) n

Si Si(CH3)3

Si

O

OH

Interactions hydrophobes

(van der Waals) légères interactions

avec des silanols résiduels

157

C18 HD

Phase octadécyle, haute densité de greffage monomé-rique, endcapped20 % C · USP L1

pH 2–9 N

UC

LEO

SIL®

(S

i-O2) n Interactions

hydrophobes (van der Waals)

158

C18 ABPhase octadécyle, greffage polymé-rique, endcapped25 % C · USP L1

pH 1–9

NU

CLE

OSI

L®

(Si-O

2) n Interactions stériques et hydrophobes 158

C18 Nautilus

Phase octadécyle, groupe polaire dans la chaîne alkyle, endcapped16 % C · USP L60

pH 2–8 jusqu’à 100 % H2O N

UC

LEO

SIL®

(S

i-O2) n

Si O Si(CH3)3

Pol

Pol

Si OH Interactions hydrophobes et

polaires158

Protect I

Phase inverse spé-ciale, groupement polaire protecteur, greffage monomé-rique, endcapped11 % C

pH 2–8

NU

CLE

OSI

L®

(Si-O

2) n

Si O Si(CH3)3

Si OH

pro

pro

Interactions hydrophobes et

polaires160

C8 ec

Phase octyle, densité moyenne de greffage, endcapped9 % C · USP L7

pH 2–8

NU

CLE

OSI

L®

(Si-O

2) n

Si O Si(CH3)3

Si OH


(van der Waals) légères interactions

avec des silanols résiduels

160

C8

Phase octyle, pas d’endcapping8,5 % C · USP L7

pH 2–8

NU

CLE

OSI

L®

(Si-O

2) n

Si

Si OH

OH


(van der Waals)interactions

perceptibles avec des silanols résiduels

160

C8 HD

Phase octyle, haute densité de greffage monomé-rique, endcapped13 % C · USP L7

pH 2–8

NU

CLE

OSI

L®

(Si-O

2) n Interactions hydrophobes

(van der Waals)161

C4

Phase butyle, densité moyenne de greffage, endcapped~ 2 % C · USP L26

pH 2–8

NU

CLE

OSI

L®

(Si-O

2) n

Si O Si(CH3)3

Si OH


(van der Waals)interactions avec des

silanols résiduels

161

C2Phase diméthyle3,5 % C · USP L16

pH 2–8

NU

CLE

OSI

L®

(Si-O

2) n

SiSi

OO

Si(CH3)2

Si OH

Si OH


(van der Waals)interactions


162

[email protected]



Phase NUCLEOSIL® Spécifications Stabilité Structure Principe de séparation Page

C6H5

Phase phényle, pas d’endcapping8 % C · USP L11

pH 2–8

NU

CLE

OSI

L®

(Si-O

2) n

Si

Si OH

OH

Interactions π–π et hydrophobes interactions


162

Polar NUCLEOSIL® phases and NUCLEOSIL® ion exchangers

CN / CN-RPPhase cyano (nitrile)USP L10

pH 2–8

NU

CLE

OSI

L®

(Si-O

2) n

Si

Si OH

C N

C NOH

Interactions π–π interactions polaires

et hydrophobes164

OH (Diol) Phase diolUSP L20

pH 2–8N

UC

LEO

SIL®

(S

i-O2) n

OHSi

Si

OH OH

OH

O

OHOHO

Interactions polaires (liaisons hydrogène) 162

NH2 / NH2-RP Phase aminoUSP L8

pH 2–8

NU

CLE

OSI

L®

(Si-O

2) n Si OH

Si OH

NH2

NH2 Interactions polaires, interaction hydro-

phobes, interactions ioniques faibles

163

N(CH3)2Phase diméthyl-amino pH 2–8

NU

CLE

OSI

L®

(Si-O

2) n Si OH

Si OHN

CH3

CH3

Interactions polaires, interaction hydro-

phobes, interactions ioniques faibles

163

SA

Acide sulfonique, échangeur de cations fortement acide(SCX) USP L9

pH 2–8

NU

CLE

OSI

L®

(Si-O

2) n

Si

Si OHSO3Na

SO3NaOH

Interactions ioniques fortes 164

SB

Ammonium quaternaire, échangeur d’anions fortement basique(SAX) USP L14

pH 2–8

NU

CLE

OSI

L®

(Si-O

2) n

Si

Si OH CH3

CH3CH3

OHN+

Cl– Interactions ioniques fortes 165

SiOHSilice sphérique non modifiée · USP L3

pH 2–8

NU

CLE

OSI

L®

(Si-O

2) n

Si

Si

OH

OHInteractions polaires 165

www.mn-net.com 157



Phases octadécyles NUCLEOSIL® (C18) - (CH2)17 – CH3

Phases octadécyles NUCLEOSIL® standards Phases apolaires · stabilité aux pH à 20 °C : 2–8 · teneur en carbone dépend de la taille des pores (voir tableau) · USP L1 Phase NUCLEODUR® correspondante voir C18 ec page 133

NUCLEOSIL® C18 HD Phases apolaires et hydrophobes avec une haute densité de greffage monomérique stabilité aux pH 2–9 ; teneur en carbone 20 % · USP L1 Phase NUCLEODUR® correspondante voir C18 Gravity page 116

NUCLEOSIL® C18 AB Phase hydrophobe, greffage polymérique, inerte face aux substances acides ou basiques ayant une grande affinité pour la silice, stabilité aux pH 1–9, teneur en carbone 25 %, sélectivité stérique prononcée · USP L1 Phase NUCLEODUR® correspondante voir C18 Isis page 120

NUCLEOSIL® C18 Nautilus Stable dans des éluants 100 % aqueux ; teneur en carbone 16 % · USP L60 Caractéristiques de sélectivité polaire intéressantes, très bonne désactivation Phase NUCLEODUR® correspondante voir PolarTec page 124

Phases octadécyles à larges pores Toutes les phases octadécyles sont endcapped

D’autres dimensions de colonnes sont disponibles sur demande (fabrication spéciale).


Longueur → 100 mm 125 mm 150 mm 250 mm Précolonnes

NUCLEOSIL® 50-5 C18 ec taille des particules 5 µm, taille des pores 50 Å, endcapped, 14,5 % C

Colonnes EC Précolonnes EC* Précolonnes CC**

4,6 mm DI 720098.46 721473.30 721829.40

NUCLEOSIL® 100-3 C18 taille des particules 3 µm, taille des pores 100 Å, endcapped, 15 % C

Colonnes EC Précolonnes EC* Précolonnes CC**4 mm DI 720150.40 720133.40 721022.30 721866.40

4,6 mm DI 720841.46 720150.46 720949.46 720133.46 721022.30 721866.40


Colonnes EC Précolonnes EC* Précolonnes CC**2 mm DI 720002.20 720120.20 720014.20 721074.20 721602.303 mm DI 720002.30 720120.30 720014.30 721074.30 721602.304 mm DI 720141.40 720002.40 720120.40 720014.40 721074.30 721602.40

4,6 mm DI 720141.46 720002.46 720120.46 720014.46 721074.30 721602.40Colonnes VarioPrep Précolonnes VP***

10 mm DI 715340.100 715360.8021 mm DI 715340.210 715360.160


Colonnes EC4 mm DI 720018.40

4,6 mm DI 720951.46 720110.46 720018.46

Colonnes VarioPrep Précolonnes VP***8 mm DI 715332.80 715360.80

10 mm DI 715332.100 715360.8016 mm DI 715332.160 715360.16021 mm DI 715332.210 715360.160

[email protected]



Longueur → 100 mm 125 mm 150 mm 250 mm Précolonnes

NUCLEOSIL® 100-10 C18 taille des particules 10 µm, taille des pores 100 Å, endcapped, 15 % CColonnes EC

4 mm DI 720023.404,6 mm DI 720701.46 720140.46 720023.46

NUCLEOSIL® 120-3 C18 taille des particules 3 µm, taille des pores 120 Å, endcapped, 11 % CColonnes EC Précolonnes EC* Précolonnes CC**

4 mm DI 720149.40 720040.40 720055.40 721075.30 721606.404,6 mm DI 720149.46 720040.46 720740.46 720055.46 721075.30 721606.40

NUCLEOSIL® 120-5 C18 taille des particules 5 µm, taille des pores 120 Å, endcapped, 11 % CColonnes EC Précolonnes EC* Précolonnes CC**

4 mm DI 720051.40 720041.40 721070.30 721783.404,6 mm DI 720051.46 720730.46 720041.46 721070.30 721783.40


4 mm DI 720042.40


4 mm DI 720043.404,6 mm DI 720043.46

NUCLEOSIL® 100-3 C18 HD taille des particules 3 µm, taille des pores 100 Å, 20 % CColonnes EC Précolonnes EC* Précolonnes CC**

4 mm DI 720191.40 721196.30 721494.404,6 mm DI 720191.46 720193.46 721196.30 721494.40

NUCLEOSIL® 100-5 C18 HD taille des particules 5 µm, taille des pores 100 Å, 20 % CColonnes EC Précolonnes EC* Précolonnes CC**

4 mm DI 720296.40 720280.40 721072.30 721853.404,6 mm DI 720296.46 720294.46 720280.46 721072.30 721853.40

NUCLEOSIL® 100-5 C18 AB taille des particules 5 µm, taille des pores 100 Å, 25 % CColonnes EC Précolonnes EC* Précolonnes CC**

2 mm DI 720935.20 720936.20 721073.20 721603.303 mm DI 720935.30 720936.30 721073.30 721603.304 mm DI 720935.40 720936.40 721073.30 721603.40

4,6 mm DI 720935.46 720305.46 720936.46 721073.30 721603.40

NUCLEOSIL® 100-3 C18 Nautilus taille des particules 3 µm, taille des pores 100 Å, 16 % CColonnes EC Précolonnes EC* Précolonnes CC**

4 mm DI 720472.40 721649.30 721611.404,6 mm DI 720472.46 720471.46 721649.30 721611.40

NUCLEOSIL® 100-5 C18 Nautilus taille des particules 5 µm, taille des pores 100 Å, 16 % CColonnes EC Précolonnes EC* Précolonnes CC**

4 mm DI 720430.40 720431.40 721133.30 721140.404,6 mm DI 720430.46 720432.46 720431.46 721133.30 721140.40

www.mn-net.com 159



Gels de silice à larges poresUn grand nombre de molécules biologiques ne peuvent pas être séparées sur des silices de petites tailles de pores d’environ 100 Å.

MACHEREY-NAGEL offre ainsi une ligne complète de gels de silice à larges pores de 300, 500, 1000, et 4000 Å. Ces matériaux peuvent aussi être utilisés pour la chromatographie d’exclusion (SEC).

Length → 250 mm Précolonnes

NUCLEOSIL® 300-5 C18 taille des particules 5 µm, taille des pores 300 Å, endcapped, 6,5 % C

Colonnes EC Précolonnes EC* Précolonnes CC**4 mm DI 720065.40 721085.30 721608.40

4,6 mm DI 720065.46 721085.30 721608.40

NUCLEOSIL® 300-7 C18 taille des particules 7 µm, taille des pores 300 Å, endcapped, 6,5 % C

Colonnes VarioPrep Précolonnes VP***10 mm DI 715806.100 715360.8021 mm DI 715806.210 715360.160


Colonnes EC

4,6 mm DI 720074.46

NUCLEOSIL® 1000-7 C18 taille des particules 7 µm, taille des pores 1000 Å, endcapped, ~ 1 % C

Colonnes EC

4,6 mm DI 720077.46

NUCLEOSIL® 4000-7 C18 taille des particules 7 µm, taille des pores 4000 Å, endcapped, < 1 % C

Colonnes EC

4,6 mm DI 720085.46




EC 4/2 (3) 4/3 (3) 4/3 (3) 4/3 (3) 718966




[email protected]



NUCLEOSIL® 100 Protect I phase inverse spéciale avec groupement polaire protecteur

Phase inverse avec de remarquables propriétés hydrophiles, greffage monomérique, endcapped teneur en carbone 11 % C


Colonnes EC Longueur : 125 mm 150 mm 250 mm Précolonnes EC* Précolonnes CC**

NUCLEOSIL® 100-5 Protect I taille des particules 5 µm, taille des pores 100 Å4 mm DI 720175.40 720170.40 721157.30 721154.40

4,6 mm DI 720175.46 720174.46 720170.46 721157.30 721154.40

Phases octyles NUCLEOSIL® (C8) - (CH2)7 - CH3

Phases octyles NUCLEOSIL® standards Phases apolaires pour la chromatographie en phase inverse et la chromatographie de paires d’ions · USP L7 disponibles endcapped ou non-endcapped ; stabilité aux pH à 20 °C : 2–8 Teneur en carbone dépend de la taille des pores (voir tableau) Phase NUCLEODUR® correspondante voir C8 ec page 133

NUCLEOSIL® C8 HD Phase apolaire avec une haute densité de greffage monomérique, endcapped ; Phase NUCLEODUR® correspondante voir C8 Gravity page 116

Domaines d’applications : Recommandées pour la séparation de composés moyennement à fortement polaires (composés hydroso-lubles) : stéroïdes, nucléosides, cyclodextrines, substances pharmacologiques des plantes

D’autres dimensions de colonnes sont disponibles sur demande (fabrication spéciale).



NUCLEOSIL® 100-5 C8 ec taille des particules 5 µm, taille des pores 100 Å ; endcapped, 9 % C4,6 mm DI 720165.46 721096.30 721805.40

NUCLEOSIL® 100-5 C8 taille des particules 5 µm, taille des pores 100 Å ; non endcapped, 8,5 % C4 mm DI 720001.40 720013.40 721194.30 721601.40

4,6 mm DI 720001.46 720990.46 720013.46 721194.30 721601.40

NUCLEOSIL® 100-7 C8 taille des particules 7 µm, taille des pores 100 Å ; non endcapped, 8,5 % C4,6 mm DI 720017.46

NUCLEOSIL® 100-10 C8 taille des particules 10 µm, taille des pores 100 Å ; non endcapped, 8,5 % C4 mm DI 720022.40

4,6 mm DI 720022.46

www.mn-net.com 161




NUCLEOSIL® 120-3 C8 taille des particules 3 µm, taille des pores 120 Å ; non endcapped, 6,5 % C4 mm DI 720071.40 721093.30 721785.40

4,6 mm DI 720071.46 720214.46 721093.30 721785.40

NUCLEOSIL® 120-5 C8 taille des particules 5 µm, taille des pores 120 Å ; non endcapped, 6.5 % C4 mm DI 720050.40 720052.40 721095.30 721787.40

4,6 mm DI 720050.46 720735.46 720052.46 721095.30 721787.40

NUCLEOSIL® 300-5 C8 taille des particules 5 µm, taille des pores 300 Å ; non endcapped, ~ 3 % C4,6 mm DI 720062.46 721061.30 721101.40

NUCLEOSIL® 100-5 C8 HD taille des particules 5 µm, taille des pores 100 Å, 13 % C4 mm DI 720196.40 721071.30 721500.40

4,6 mm DI 720194.46 720196.46 721071.30 721500.40Les colonnes EC sont vendues par unité d’emballage, les précolonnes en paquets de 3.

Phases butyles NUCLEOSIL® (C4) - (CH2)3 – CH3

Phases endcapped pour la chromatographie en phase inverse et la chromatographie de paires d’ions · USP L26

Stabilité aux pH à 20 °C : 2–8 ; teneur en carbone ~ 2 % Recommandées pour la séparation de macromolécules et de substances hydrophobes Les temps de rétention sont plus courts que sur les phases C8 et C18

Les phases butyles pour les séparations biochimiques voir page 182.


Colonnes EC Longueur 250 mm Précolonnes EC* Précolonnes CC**

NUCLEOSIL® 120-5 C4 taille des particules 5 µm, taille des pores 120 Å4,6 mm DI 720096.46 721083.30 721889.40

NUCLEOSIL® 300-5 C4 taille des particules 5 µm, taille des pores 300 Å4 mm DI 720059.40 721916.30 721607.40

4,6 mm DI 720059.46 721916.30 721607.40Les colonnes EC sont vendues par unité d’emballage, les précolonnes en paquets de 3.



EC 4/2 4/3 4/3 4/3 718966



[email protected]



Phase diméthyle NUCLEOSIL® (C2) - (CH3)2

Phase non endcapped pour la chromatographie RP et la chromatographie de paires d’ions · USP L16 Stabilité aux pH à 20 °C : 2–8 ; teneur en carbone 3,5 % Les temps de rétention sont beaucoup plus courts que sur les autres phases inverses.



NUCLEOSIL® 100-7 C2 taille des particules 7 µm, taille des pores 100 Å4,6 mm DI 720089.46 721030.30 721069.40

Phases phényles NUCLEOSIL® (C6H5) - (CH2)3 Phases relativement apolaires pour la chromatographie en phase inverse et la chromatographie de paires d’ions ; non endcapped · USP L11

Polarité similaire à une C8, mais avec une différence de sélectivité pour les hydrocarbures polycycliques aromatiques, les aromatiques polaires, les acides gras etc.

Stabilité aux pH à 20 °C : 2–8 ; teneur en carbone 8 % Recommandées pour la séparation de composés moyennement polaires



NUCLEOSIL® 100-5 C6H5 taille des particules 5 µm, taille des pores 100 Å, non endcapped4,6 mm DI 720956.46 721137.30 721862.40

NUCLEOSIL® 100-7 C6H5 taille des particules 7 µm, taille des pores 100 Å, non endcapped4 mm DI 720019.40

4,6 mm DI 720019.46

Phase NUCLEOSIL® diol (CH2)3 O CH2 CH2CH

OH OH Silice modifiée dihydroxypropyle pour la chromatographie en phase inverse et en phase normale · USP L20

Moins polaire qu’une silice non modifiée, facilement mouillable à l’eau Stabilité aux pH à 20 °C : 2-8 ; teneur en carbone 5 %

Références de commandeEluant dans la colonne� n-heptane · Si vous voulez utiliser un éluant non miscible au n-heptane (ex. l’eau), il est indispensable de rincer la colonne préalablement au THF.


NUCLEOSIL® 100-5 OH (Diol) taille des particules 5 µm, taille des pores 100 Å4,6 mm DI 720143.46 721142.30 721478.40

www.mn-net.com 163



Phases NUCLEOSIL® amino -(CH2)3 – NH2

Phase polaire de silice modifiée aminopropyle · stabilité aux pH à 20 °C : 2–8 ; teneur en carbone 3,5 % · USP L8 Phase NUCLEODUR® correspondante voir page 140

Pour la chromatographie multi mode : Chromatographie en phase normale avec de l’hexane, dichlorométhane ou 2-propanol comme phase

mobile pour les composés polaires comme les anilines substituées, les esters, les pesticides chlorés Chromatographie en phase inverse pour les composés polaires comme les sucres avec un éluant

aqueux-organique Chromatographie ionique pour les anions et les acides organiques avec les tampons usuels (ex. acétate

ou phosphate) additionnés de solvants organiques (ex. acétonitrile)

Références de commandeEluant dans la colonne� n-heptane (sauf pour NUCLEOSIL® 100-5 NH2 RP) · Si vous voulez utiliser un élu-ant non miscible au n-heptane (ex. l’eau), il est indispensable de rincer la colonne préalablement au THF.


NUCLEOSIL® 100-3 NH2 taille des particules 3 µm, taille des pores 100 Å ; éluant dans la colonne n-heptane

4,6 mm DI 720275.46 721933.30 721122.40


4,6 mm DI 720095.46 721020.30 721605.40

NUCLEOSIL® 100-5 NH2-RP taille des particules 5 µm, taille des pores 100 Å ; éluant dans la colonne acétonitrile – eau (80:20)

4,6 mm DI 720095.46RP 721155.30 721605.40RP


4,6 mm DI 720025.46

Phase NUCLEOSIL® dimethylamino - (CH2)3 – N(CH3)2

Echangeur d’anions légèrement basique pour la séparation de différents anions ; stabilité aux pH à 20 °C : 2–8 ; teneur en carbone 4 % C

Elle peut être utilisée dans les conditions similaires à la NH2.



NUCLEOSIL® 100-5 N(CH3)2 taille des particules 5 µm, taille des pores 100 Å4,6 mm DI 720994.46 721158.30 721610.40

Les colonnes EC sont vendues par unité d’emballage, les précolonnes en paquets de 3.Pour les systèmes de précolonnes voir page 161, pour les détails sur nos systèmes de colonnes voir pages 189–196

[email protected]



Phases NUCLEOSIL® cyano -(CH2)3 – CN Phase polaire à moyennement polaire modifiée cyano (nitrile) · USP L10 Pour la chromatographie en phase inverse et la chromatographie en phase normale : Phase normale : avec des solvants relativement apolaires pour beaucoup de composés qui peuvent aussi être séparés sur silice non modifiée, mais plus appropriées pour les séparations par gradient grâce à un temps d’équilibration rapide Phase inverse : avec une autre sélectivité que les matériaux modifiés par C18, C8 ou phényl

Stabilité aux pH à 20 °C : 2–8 ; teneur en carbone 5 % pour les pores de 100 Å, ~ 3 % pour les pores de 120 Å Phase NUCLEODUR® correspondante voir page 164

Références de commandeEluant dans la colonne� n-heptane (sauf pour NUCLEOSIL® CN-RP) · Si vous voulez utiliser un éluant non miscible au n-heptane (ex. l’eau), il est indispensable de rincer la colonne préalablement au THF.


NUCLEOSIL® 100-5 CN taille des particules 5 µm, taille des pores 100 Å ; eluant dans la colonne n-heptane

4 mm DI 720090.40 721078.30 721604.404,6 mm DI 720090.46 721078.30 721604.40

NUCLEOSIL® 100-5 CN-RP taille des particules 5 µm, taille des pores 100 Å ; eluant dans la colonne acétonitrile – eau

4 mm DI 720205.40 721039.30 721917.404,6 mm DI 720205.46 721039.30 721917.40


4 mm DI 720024.404,6 mm DI 720024.46


4 mm DI 720057.404,6 mm DI 720057.46

Phases NUCLEOSIL® SA -(CH2)3 SO3Na Echangeur de cations fortement acide (SCX) modifié acide benzènesulfonique · USP L9 Capacité ~ 1 méq/g ; stabilité aux pH à 20 °C : 2–8 ; teneur en carbone 6,5 %

Références de commandeEluant dans la colonne� 0,15 mol/L (NH4)2HPO4, pH 5

Colonnes EC 125 mmLongueur : 150 mm 250 mm Précolonnes EC* Précolonnes CC**

NUCLEOSIL® 100-5 SA taille des particules 5 µm, taille des pores 100 Å4 mm DI 720097.40 721024.30 721487.40

4,6 mm DI 720709.46 720182.46 720097.46 721024.30 721487.40

www.mn-net.com 165




NUCLEOSIL® 100-10 SA taille des particules 10 µm, taille des pores 100 Å4,6 mm DI 720028.46

Phases NUCLEOSIL® SB -(CH2)3 CH2 – N+(CH3)3Cl–

Echangeur d’anions fortement basique (SAX) modifié ammonium quaternaire · USP L14 Capacité ~ 1 méq/g ; stabilité aux pH à 20 °C : 2–8 ; teneur en carbone 10 %

Références de commandeEluant dans la colonne� 0,15 mol/L (NH4)2HPO4, pH 5


NUCLEOSIL® 100-5 SB taille des particules 5 µm, taille des pores 100 Å4,6 mm DI 720989.46 720183.46 720996.46 721025.30 721885.40

NUCLEOSIL® 100-10 SB taille des particules 10 µm, taille des pores 100 Å4,6 mm DI 720029.46

NUCLEOSIL® SiOH silice non modifiée Silice sphérique, stabilité aux pH 2–8 · USP L3 Pour les caractéristiques physiques de la silice NUCLEOSIL® non modifiée veuillez voir la page 199 ; la pression maximale de travail pour les colonnes ci-dessous est de 400 bars.



NUCLEOSIL® 50-5 taille des particules 5 µm, taille des pores 50 Å4,6 mm DI 720093.46 721167.30 721600.40

NUCLEOSIL® 100-5 taille des particules 5 µm, taille des pores 100 Å4,6 mm DI 720099.46 721518.30 721872.40




EC 4/2 4/3 4/3 4/3 718966



[email protected]


Colonnes analytiques avec LiChrospher®

LiChrospher® matériaux de remplissage fabriqué par E. Merck (D)Phase USP Taille des

particules Taille des

pores Modification Endcapped Teneur en

carbone

LiChrospher® 100 RP 8, 5 μm L7 nom. 5 μm 100 Å octyl – 12,5 %LiChrospher® 100 RP 8 ec, 5 μm L7 nom. 5 μm 100 Å octyl ✓ 12,5 %LiChrospher® 100 RP 18, 5 μm L1 nom. 5 μm 100 Å octadecyl – 21 %LiChrospher® 100 RP 18 ec, 5 μm L1 nom. 5 μm 100 Å octadecyl ✓ 21 %LiChrospher® 60 RP select B, 5 μm L7 nom. 5 μm 60 Å octyl ✓ 12 %

Toutes les phases sont remplies dans des cartouches ChromCart® Les colonnes ChromCart® nécessitent le kit de montage REF 721690 (voir page 192).


Longueur → 125 mm 150 mm 250 mm Précolonnes

LiChrospher® 100 RP 8, 5 µm2 mm DI 728025.20 728026.20 728051.303 mm DI 728025.30 728026.30 728051.304 mm DI 728025.40 728026.40 728051.40

4,6 mm DI 728025.46 728027.46 728026.46 728051.40

LiChrospher® 100 RP 8 ec, 5 µm 2 mm DI 728028.20 728029.20 728052.303 mm DI 728028.30 728029.30 728052.304 mm DI 728028.40 728029.40 728052.40

4,6 mm DI 728028.46 728030.46 728029.46 728052.40

LiChrospher® 100 RP 18, 5 µm 2 mm DI 728031.20 728032.20 728053.303 mm DI 728031.30 728032.30 728053.304 mm DI 728031.40 728032.40 728053.40

4,6 mm DI 728031.46 728033.46 728032.46 728053.40

LiChrospher® 100 RP 18 ec, 5 µm 2 mm DI 728034.20 728035.20 728054.303 mm DI 728034.30 728035.30 728054.304 mm DI 728034.40 728035.40 728054.40

4,6 mm DI 728034.46 728036.46 728035.46 728054.40

LiChrospher® 60 RP select B, 5 µm 2 mm DI 728037.20 728038.20 728055.303 mm DI 728037.30 728038.30 728055.304 mm DI 728037.40 728038.40 728055.40

4,6 mm DI 728037.46 728039.46 728038.46 728055.40

Les précolonnes ChromCart® de 8 mm sont vendues par trois et les colonnes CC à l’unité.

www.mn-net.com 167


Colonnes HPLC pour des séparations spéciales

Aperçu Séparations / mécanismes Colonne recommandée Spécifications de la phase Page

Chimie analytique environnementaleChromatographie par échange d’anions, séparation d’anions minéraux

NUCLEOGEL® Anion I Echangeur d’anions très basique sur résine

171NUCLEOSIL® Anion II Echangeur d’anions très basique sur gel

de silice

Chromatographie RP des HAPNUCLEODUR® C18 PAH modification C18 polymérique sur

NUCLEODUR® · USP L1 168

NUCLEOSIL® 100-5 C18 PAH modification C18 polymérique sur NUCLEOSIL® 100 · USP L1 170

Séparations d’énantiomèresFormation de complexes d’inclusion

NUCLEODEX α-PM, β-PM, γ-PM and β-OH

Cyclodextrines perméthylées ou non modifiées liées au gel de silice · USP L45 172

Interactions polaires et π-π NUCLEOCEL DELTA Phases cellulose modifiées sur gel de silice · USP L40 174

Liaison énantiosélective à la surface chirale de protéines RESOLVOSIL BSA-7 Phase protéique (BSA) sur gel de silice 175

Echange de ligands NUCLEOSIL® CHIRAL-1 Complexes acides aminés – Cu(II) liées chimiquement · USP L32 176

Interactions de transfert de charge, dipôle-dipôle et autres

NUCLEOSIL® CHIRAL-2, NUCLEOSIL® CHIRAL-3

Phases de type « brosse » sur gel de silice · USP L36 177

Séparations biochimiques Chromatographie par échange d’anions des oligonucléotides et des acides nucléiques

NUCLEOGEN® DEAE Echangeur d’anions DEAE sur gel de silice 178

Chromatographie par échange d’anions des protéines et des peptides

NUCLEOSIL® 4000-7 PEI Poly éthylène imine chimiquement lié sur gel de silice 180

Chromatographie par échange d’anions des peptides, des protéines larges et des oligo-nucléotides

NUCLEOGEL® SAX Echangeur d’anions fortement basique sur résine · USP L23 181

Chromatographie par échange de cations des protéines, des peptides et des glucides

NUCLEOGEL® SCX Fort échangeur de cations sur résine · USP L22 181

Chromatographie en phase inverse des protéines, des peptides et des oligonucléotides

NUCLEOSIL® MPN Chaînes alkyles monomériques sur gel de silice · USP L1 / USP L26 182

NUCLEOSIL® PPN Chaînes alkyles polymériques sur gel de silice · USP L1 183

NUCLEOGEL® RP 300 Résine polystyrène – divinylbenzène USP L21 184

Chromatographie en phase inverse de petites molécules NUCLEOGEL® RP 100 Résine PS-DVB macroporeuse à pores

étroits · USP L21 184

Analyses alimentaires ∙ SucresChromatographie RP de mono- et oligosaccharides NUCLEOSIL® Carbohydrate Phase amino-modifiée spéciale sur gel

de silice · USP L8 185

Séparation de sucres, alcools, acides organiques par exclusion d’ions, échange d’ions, chroma-tographie d’exclusion, échange de ligands, et les effets PN et RP

NUCLEOGEL® SUGAR 810 H, Ca Résines PS-DVB modifiées par l’acide sulfonique sous différentes formes ioniques : forme H USP L17 · forme Ca L19 · forme Pb L34 · forme Na L58

186

Séparation de sucres, alcools, acides organiques par exclusion stérique, échange de ligands, et les effets de partage

NUCLEOGEL® SUGAR Ca, Na, Pb 187NUCLEOGEL® ION 300 OA

Chromatographie par perméation de gel (GPC)Séparation de substances non solubles dans l’eau NUCLEOGEL® GPC Résine polystyrène – divinylbenzène 188

[email protected]


Colonnes pour les analyses environnementales

NUCLEODUR® C18 PAH phase octadécyle spéciale pour l’analyse des HAP Silice de base NUCLEODUR®, tailles des particules 1,8 et 3 µm, taille des pores 110 Å ; greffage polymérique · USP L1

Permet une séparation efficace par gradient des 16 HAP selon EPA Détection de la séparation des HAP par UV (250 à 280 nm), avec un détecteur à barrettes de diodes ou par fluorescence à différentes longueurs d’ondes pour l’excitation et l’emission (L’acénaphtylène ne peut pas être analysé par fluorescence.)

Analyse de 16 HAP selon l’EPA avec ou sans l’acétonitrileSéparation avec l’acétonitrileColonne : 100 x 4 mm NUCLEODUR® C18 PAH,

3 μmEluant : A) méthanol – eau (80:20, v/v)

B) acétonitrile 2–20 % B en 1,2 min, 20–100 % B en 0,5 min, 100 % B pendant 2,5 min, 100–2 % B en 0,4 min

Débit : 2,5 mL/min, température 35 °CDétection : UV, 254 nm

fluorescence (voir chromatogramme)

λexλem

275350

375425

335440

315405

330420

375460

345420

300500

nmnm

1

2

36

5

4 7

8

9

10

1112

131415

16

0 1 2 3 min


Séparation sans l’acétonitrileColonne : 125 x 4 mm NUCLEODUR® C18 PAH,

3 μmEluant : A) eau

B) méthanol 65–97 % B en 6 min, 97 % B pendant 5 min, 97–65 % B en 0,5 min

Débit : 2 mL/min, température 35 °CDétection : fluorescence (voir chromatogramme)

0 2 4 6 8 10 min

1

3

4

5

6 7

8

9

10

11

12

1314

15

16

λexλem

275350

375425

335440

315405

330420

375460

345420

300500

nmnm


Pics : 1. Naphtalène 2. Acénaphtylène

(pas détectable par fluorescence)

3. Acénaphtène 4. Fluorène 5. Phénantrène 6. Anthracène 7. Fluoranthène 8. Pyrène 9. Benz[a]anthracène10. Chrysène11. Benzo[b]fluoranthène12. Benzo[k]fluoranthène13. Benzo[a]pyrène14. Dibenz[ah]anthracène15. Benzo[ghi]pérylène16. Indéno[1,2,3-cd]pyrène

Références de commande · Colonnes EC Eluant dans la colonne� acétonitrile – eau (70:30, v/v)

Longueur → 100 mm 125 mm 150 mm 250 mm Précolonnes EC* Précolonnes CC**

NUCLEODUR® C18 PAH, 1,8 µm2 mm DI 760773.20 761970.203 mm DI 760773.30 761970.304 mm DI 760773.40 761970.30

NUCLEODUR® C18 PAH, 3 µm3 mm DI 760783.30 760784.30 760785.30 760786.30 761971.30 761780.304 mm DI 760783.40 760784.40 760785.40 760786.40 761971.30 761780.40



EC 4/2 4/3 4/3 4/3 718966


www.mn-net.com 169



Séparation de 18 HAP sur NUCLEODUR® C18 PAH

Colonne : 125 x 4 mm NUCLEODUR® C18 PAH, 3 μm

Eluant : A) méthanol – eau (70:30, v/v) B) acétonitrile 0–20 % B en 1,5 min, 20–50 % B en 1,5 min, 50–100 % B en 1,0 min, 100 % B pendant 3 min, 100–0 % B en 0,5 min

Débit : 1,5 mL/minTempérature : 35 °CInjection : UV : 1 μL,

fluorescence : 0,5 μLDétection : UV, 254 nm

fluorescence (voir chromatogramme)

Pics :(concentrations 10 ng/μL par composé)1.–16. voir page précédente1-me-n: 1-méthylnaphtalène2-me-n: 2-méthylnaphtalène

�N application� 1238400 1 2 3 4 5 6 7 min

1

2

1-me-n2-me-n

3

4

5

6

78

910

1112

13

14 15

16

λexλem

275350

375425

335440

315405

330420

375460

345420

300500

nmnm

Analyse des hydrocarbures polycycliques aromatiques (HAP) par HPLCLes hydrocarbures polycycliques aromatiques (HAP) sont des composés chimiques dont la structure contient des cycles aromatiques condensés qui ne contiennent pas d’hétéroatomes ou autres substituants. En tant que substances polluantes, ils sont préoccupants car un certain nombre de ces substances ont été identi-fiées comme cancérigènes, mutagènes et tératogènes. Les HAP sont des composants naturels du charbon et du gaz. Ils sont libérés dans notre environnement par pyrolyse (combustion incomplète) de matériaux orga-niques comme le charbon, l’huile, les carburants, le bois, le tabac … et peuvent donc être trouvés globale-ment partout. Aujourd’hui la plupart des HAP s’accu-mulent à partir des procédés anthropogéniques mais aussi à partir d’origines naturelles (feu de forêt). Les pollutions passées étaient surtout liées à la produc-tion de charbon et de gaz provenant du pétrole. Les déchets (ex. goudron) de la cokéfaction ou issus des usines produisant du gaz sont souvent à l’origine de pollutions sérieuses de l’eau souterraine.Depuis qu’un certain nombre de ces HAP (ex. benzo[a]pyrene, 3-méthylcholanthrène et benzanthracène) a été identifiés comme cancérigènes, le contrôle de ces HAP dans les aliments, l’eau et les sols a pris une place considérable dans les analyses de routine. Nous nous référons aux règlementations gouvernementales qui existent dans de nombreux pays (ex. Méthode EPA 610 du ministère de l’environnement des Etats-Unis) pour déterminer les valeurs limites de ces polycycles.Les HAP peuvent être déterminés par différentes mé-thodes chromatographiques (CCM, CPG, HPLC). Il est ainsi possible de déterminer les 6 HAP selon la régle-mentation Allemande concernant les eaux potables (TVO) à l’aide d’une méthode CCM (voir la norme DIN Allemande 38 409) ou encore un nombre plus impor-tant de polycycles à l’aide de la CPG ou de la HPLC.

Benz[a]anthracène Benzo[a]pyrène

Colonnes HPLC pour l’analyse des HAPPour l’analyse des HAP nous avons développé des phases C18 spéciales à base de NUCLEODUR® et de NUCLEOSIL®. Ces phases permettent la séparation ef-ficace des 16 HAP selon la norme EPA. La séparation des HAP peut être détectée par UV (250-280 nm), avec un détecteur à barrette de diode ou avec un détecteur à fluorescence à différentes longueurs d’onde pour l’excitation et l’émission. L’acénaphtylène ne peut pas être détecté par fluorescence. Afin de réduire les coûts d’analyses nous recommandons d’utiliser des applica-tions utilisant le méthanol comme solvant d’élution à la place de l’acétonitrile. Pour des analyses rapides, la co-lonne NUCLEODUR® C18 PAH (3 µm) en courtes dimen-sions (100 mm) présente d’excellents résultats avec un débit élevé. Dans ces conditions, la séparation des 16 HAP selon la norme EPA peut être réalisée en moins de 3 minutes.Les règlementations plus strictes imposent la déter-mination de 2 HAP supplémentaires (1- and 2-mé-thylnaphthalène) – ainsi nous avons développé des méthodes efficaces pour la séparation des 18 HAP sur notre phase NUCLEODUR® C18 PAH.

Références bibliographiquesDetermination of PASH in Diesel fuel by HPLC and photo-diode-array detection; J. Bunot, W. Herbel, H. Steinhart, J. High Res. Chrom. 15 (1992) 682–685GIT Spezial Chromat. 2 (1992) 80–85

[email protected]



NUCLEOSIL® 100-5 C18 PAH phase octadécyle spéciale pour l’analyse des HAP

Silice de base NUCLEOSIL®, taille des particules 5 µm, taille des pores 100 Å ; greffage polymérique · USP L1

Permet une séparation efficace par gradient des 16 HAP selon EPA Détection de la séparation des HAP par UV (250 à 280 nm), avec un détecteur à barrettes de diodes ou par fluorescence à différentes longueurs d’ondes pour l’excitation et l’emission (L’acénaphthylène ne peut pas être analysé par fluorescence.)

Séparation du test de HAP selon l’EPA (REF 722393)Colonne : 150 x 4 mm NUCLEOSIL® 100-5 C18 PAHEluant : A) méthanol – eau (80:20)

B) acétonitrile – tétrahydrofurane (93:7) 0–100 % B en 10 min, 5 min 100 % B

Débit : 1 mL/minPression : 140 barsTempérature : 20 °CDétection : UV, 260 nmPics : (10 μg/mL chacun dans l’acétonitrile) 1. Naphtalène 2. Acénaphtylène 3. Acénaphtène 4. Fluorène 5. Phénantrène 6. Anthracène 7. Fluoranthène 8. Pyrène 9. Benz[a]anthracène10. Chrysène11. Benzo[b]fluoranthène12. Benzo[k]fluoranthène13. Benzo[a]pyrène14. Dibenz[ah]anthracène15. Benzo[ghi]pérylène16. Indéno[1,2,3-cd]pyrène

�N application� 115040 0 5 10 15 min

5

12

3

4

6

7

8

9

10

1112

13

14

1516

Références de commandeEluant dans la colonne� acétonitrile – eau (70:30, v/v)

Colonnes EC Longueur → 150 mm 250 mm Précolonnes EC* Précolonnes CC**

NUCLEOSIL® 100-5 C18 PAH2 mm DI 720117.20 721168.20 721599.303 mm DI 720923.30 720117.30 721168.30 721599.304 mm DI 720923.40 720117.40 721168.30 721599.40

4,6 mm DI 720117.46 721168.30 721599.40

Etalon de HAP selon l'EPA pour la HPLC Etalon de HAP pour la HPLC # 16 HAP selon la méthode EPA 610 dans l’acétonitrile (1 mL))

Pour la composition voir le chromatogramme ci-dessus722393



EC 4/2 4/3 4/3 4/3 718966


Les colonnes EC sont vendues par unité d’emballage, les précolonnes en paquets de 3.Pour les détails sur nos systèmes de colonnes voir pages 189–196# Ce produit contient des substances dangereuses, il est spécifiquement étiqueté. Pour plus d’informations merci de consulter

la FDS.

www.mn-net.com 171



Colonnes pour anions pour l’analyse des anions inorganiquesNUCLEOGEL® Anion I

Echangeur d’anions fortement basique sur polymère, taille des particules 10 µm ; stabilité aux pH 1–14 Eluant dans la colonne 4 mmol/L de tampon salicylate pH 7,8 Recommandée pour l’analyse des ions fluorures (contrairement aux phases à base de silice)

NUCLEOSIL® Anion II Silice de base NUCLEOSIL®, taille des particules 10 µm, taille des pores 300 Å Echangeur d’anions fortement basique, capacité d’échange 50 µéq/g, stabilité aux pH 2–7,5

Eluant dans la colonne 0,15 mol/L de tampon (NH4)2HPO4 pH 5,2 pour la séparation des anions inorganiques la concentration de tampon recommandée est de 2 mmol/L phtalate

Mode de détection le plus approprié : conductimétrie ou détection UV négative

Séparation d’étalons d’anions Colonne : 250 x 4 mm NUCLEOSIL® Anion IIEluant : 2 mmol/L hydrogénophtalate de potassium,

pH 5,7Débit : 2 mL/min

0 10 min

5

1

23

4

Détection : UV, 280 nmPics : 1. H2PO4

–

2. Cl–3. NO2

–

4. NO3–

5. SO42–


Separation d’anions inorganiquesColonne : 120 x 4,6 mm NUCLEOGEL® Anion IEluant : 4 mmol/L acide salicylique – Tris pH 7,8Débit : 1 mL/minDétection : UV, 254 nmPics :1. F–

2. Cl–3. NO2

–

0 10 min

5

6 71

2 34

4. Br–

5. NO3–

6. PO43–

7. SO42–


Références de commandeLongueur → 120 mm 250 mm Précolonnes

NUCLEOGEL® Anion IColonnes type Valco 4,6 mm DI 719533 719543

NUCLEOSIL® Anion IIColonnes EC 4 mm DI 720094.40 721452.40

Les précolonnes type Valco NUCLEOGEL® Anion I font 21 x 4 mm et nécessitent le support de précolonne C (REF 719538, voir page 193). Les précolonnes sont vendues par deux et les colonnes sont livrées à l’unité.Pour les colonnes EC NUCLEOSIL® Anion II utiliser les précolonnes ChromCart® 8 x 4 mm avec l’adaptateur de précolonne EC (REF 721359, voir page 191). Les précolonnes et les colonnes EC sont vendues à l’unité.

[email protected]


Colonnes pour la séparation d’énantiomères

Colonnes NUCLEODEX séparation d’énantiomères à base de cyclodextrines

Silice de base NUCLEOSIL®, taille des particules 5 μm, taille des pores 100 Å cyclodextrines modifiées comme sélecteurs chiraux

NUCLEODEX β-OH : β-cyclodextrine (R = H; n = 2) · USP L45 Séparation à base des interactions hydrogènes et dipolaires entre les groupes fonctionnels de l’analyte et

les groupements hydroxyles de la cyclodextrine Exemples de séparations d’énantiomères : chlorthalidone et autres composés, qui nécessitent des groupe-

ments hydroxyles libres pour des interactions énantiosélectives Eluant dans la colonne CH3OH – 0,1 % TEAA pH 4 (55:45)Pour toutes les phases perméthylées la possibilité de créer des liaisons hydrogènes est réduite, l’hydrophobicité de la phase est augmentée comparément à la β-OH, de ce fait les temps de rétention sont plus courts.

NUCLEODEX α-PM : α-cyclodextrine perméthylée (R = CH3; n = 1) Exemples de séparations d’énantiomères :

OR

RO

RO

O

O

OR

ORRO

O

OOR

ROO OR

O

OR

OR

O

O

ORRO

OOR

O

OR

RO

ROO

O

n

X(SiO2)n Spacer

mécoprop et dichlorprop sous forme d’acides libres, oxydes du trans-stilbène et du styrène

Eluant dans la colonne CH3OH – 50 mmol/L phosphate pH 3 (70:30) NUCLEODEX β-PM : β-cyclodextrine perméthylée (R = CH3; n = 2) · USP L45

Exemples de séparations d’énantiomères : méphobarbital (prominal), pesticides dérivés mécoprop-méthyl et fénoxaprop-éthyl

Eluant dans la colonne CH3OH – 0,1 % TEAA pH 4 (65:35) NUCLEODEX γ-PM : γ-cyclodextrine perméthylée (R = CH3; n = 3)

Exemples de séparations d’énantiomères : les stéroïdes ou autres plus grosses molécules Eluant dans la colonne CH3OH – 0,1 % TEAA pH 4 (55:45)Les phases NUCLEODEX sont particulièrement recommandées pour le contrôle de pureté optique, mais aussi pour des séparations semi-préparatives et pour l’analyse d’isomères positionels et cis-trans.Vous trouverez de nombreuses applications sur NUCLEODEX sur notre site internet : www.mn-net.com/apps.

Séparation des isomères positionels de la nitroanilineColonne : 200 x 4 mm NUCLEODEX β-OHEluant : méthanol – 0,1 % acétate de triéthylammonium pH 4,0

(50:50, v/v)Débit : 0,7 mL/minPression : 180 barsDétection : UV, 254 nmInjection : 1 μLPics :1. m-Nitroaniline2. o-Nitroaniline3. p-Nitroaniline


1

2

3

0 10 20 min

www.mn-net.com 173



Séparation énantiomérique de l’oxyde du styrèneColonne : 200 x 4 mm NUCLEODEX α-P�Eluant : méthanol – 0.1 % triéthylammonium acetate

pH 4,0 (60:40, v/v)Débit : 0,7 mL/minPression : 160 barsDétection : UV, 230 nmInjection : 2 μL

0 4 8 min

O


Séparation énantiomérique du méphobarbital Colonne : 200 x 4 mm NUCLEODEX β-PMEluant : méthanol – 0.1 % triéthylammonium acetate

pH 4,0 (55:45, v/v)Débit : 0,7 mL/minPression : 180 barsDétection : UV, 254 nmInjection : 1 μL

0 4 8 min

N

NH

O O

O

CH3

H5C2


Références de commande


NUCLEODEX β-OH 4 mm DI 720124.40 721171.30 721460.40

NUCLEODEX α-PM4 mm DI 720127.40 721469.30 721464.40

NUCLEODEX β-PM4 mm DI 720125.40 721176.30 721462.40

NUCLEODEX γ-PM4 mm DI 720752.40 721178.30 721466.40

NUCLEODEX CC screening kit 721920

Contenu : 1 kit de montage CC 30 mm et une colonne CC 30/4 de chaque phase NUCLEODEX

* Les précolonnes EC 4/3 s’utilisent avec les colonnes EC de DI 4 mm, avec le système de protection des colonnes (Column Protection System, REF 718966, voir page 190).** Les précolonnes CC 8/4 s’utilisent avec les colonnes EC de DI 4 mm, avec l’adaptateur de précolonne EC (REF 721359, voir page 191).Toutes les colonnes et précolonnes sont livrées à l’unité.

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NUCLEOCEL DELTA séparation d’énantiomères basée sur un dérivé de la cellulose

Matériel de base : silice, Sélecteur chiral cellulose tris-(3,5-diméthylphénylcarbamate) · USP L40

Taille des particules de 5 μm pour une haute résolution, des colonnes plus courtes (150 mm) pour des séparations plus rapides Stabilité aux pressions jusqu’à ~150 bars, stabilité aux pH 1–9

NUCLEOCEL DELTA pour les applications en phase normale : éluant dans la colonne n-heptane – 2-propanol (90:10, v/v) éluants les plus utilisés sont des mélanges d’heptane – propanol

NUCLEOCEL DELTA-RP pour les applications en phase inverse : éluant dans la colonne acétonitrile – eau (40:60, v/v) recommandées pour être utilisées en mode organique ou avec des éluants à forte concentration en sels chaotropes comme le perchlorate

O

OR

OR nRO O

O

NR =

HCH3

CH3

Phases similaires : Chiralcel® OD, Kromasil® CelluCoat™, Eurocel® 01, Lux™ Cellulose-1 Domaines d’applications : composés pharmaceutique actifs, polluants chiraux (par ex. herbicides, PCB), composés chiraux dans les aliments (colorants, conservateurs), cataliseurs chiraux et les composés bioorganiques

Séparation énantiomérique du flavanoneColonne : 250 x 4,6 mm NUCLEOCEL DELTA SEluant : n-heptane – 2-propanol (90:10, v/v)Débit : 1 mL/minTempérature : 25 °CDétection : UV, 254 nm

O

OInjection : 5 μL, 1 μg/μL

α = 1,29 Rs = 2,6

0 10 min


Séparation énantiomérique de l’indapamideColonne : 250 x 4,6 mm NUCLEOCEL DELTA-RP SEluant : acétonitrile – eau (40:60, v/v)Débit : 0,5 mL/minTempérature : 40 °CDétection : UV, 254 nm Injection : 5 μL, 1 μg/μL

N O

Cl

SO2NH2

HN

CH3

α = 1,3 Rs = 2,6

0 10 20 min


Références de commandeLongueur → 150 mm 250 mm Précolonnes EC* Précolonnes CC**

Colonnes ECNUCLEOCEL DELTA S, 5 µm éluant n-heptane – 2-propanol (90:10, v/v)

4,6 mm DI 720445.46 721185.30 721002.40

NUCLEOCEL DELTA-RP S, 5 µm éluant acétonitrile – eau (40:60, v/v)4,6 mm DI 720451.46 720450.46 721186.30 721003.40

* Les précolonnes EC 4/3 s’utilisent avec les colonnes EC de DI 4,6 mm, avec le système de protection des colonnes (Column Protection System, REF 718966, voir page 190).** Les précolonnes CC 8/4 s’utilisent avec les colonnes EC de DI 4,6 mm, avec l’adaptateur de précolonne EC (REF 721359, voir page 191). Toutes les colonnes et précolonnes sont livrées à l’unité.

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RESOLVOSIL BSA-7 phase protéique pour la séparation d’énantiomères Silice de base NUCLEOSIL®, taille des particules 7 µm, taille des pores 300 Å Sélecteur chiral albumine de sérum bovin (BSA)

La séparation est basée sur l’interaction sélective entre protéines et composés de faible poids moléculaire, sur le principe de bio-affinité, incluant des interactions hydrophobes (similaire à une vrai phase inverse), interactions de groupes polaires et les effets stériques.

Domaines d’applications : dérivés d’acides aminés, acides aminés aromatiques, sulfoxydes aromatiques, barbiturates, benzodiazépinones, benzoïne et dérivés de la benzoïne, β-bloquants, dérivés de la couma-rine, et pour le contrôle de réactions microbiennes et enzymatiques stéréosélectives

Séparation des énantiomères de dérivés N-benzoyles d’acides aminés D,LS. Allenmark et al. dans “Affinity chromatography and biological recognition” (I. Chaiken, M. Wilchek, et I. Parikh. Eds.), Academic Press, New York, 1983, 259–260Colonne : 150 x 4 mm RESOLVOSIL BSA-7Eluant : 50 mmol/L de tampon phosphate pH 6,5 + 1 %

1-propanolDébit : 0,70 mL/minDétection : UV, 225 nmPics :1. Sérine2. Alanine3. Phénylalanine

3

L

D

2

L

D

1

L

D

0 20 40 60 mL


Références de commandeEluant dans la colonne� 0,1 mol/L de tampon phosphate pH 7,5, 2 % 1-propanol


RESOLVOSIL BSA-74 mm DI 720046.40 721402.30 721702.40

* Les précolonnes EC 4/3 s’utilisent avec les colonnes EC de DI 4 mm avec le système de protection des colonnes (Column Protection System, REF 718966, voir page 190).** Les précolonnes CC 8/4 s’utilisent avec les colonnes EC de DI 4 mm avec l’adaptateur de précolonne EC (REF 721359, voir page 191). Toutes les colonnes et précolonnes sont livrées à l’unité.

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NUCLEOSIL® CHIRAL-1 séparation d’énantiomères par échange de ligands

Silice de base NUCLEOSIL®, taille des particules 5 μm, taille des pores 120 Å,

Cu

(SiO2)n

N

O

HO

O RH2N

O O*

*

*

sélecteur chiral complexe L-hydroxyproline – Cu2+ · USP L32 Principal mode d’interaction : formation des complexes ternaires entre un mélange de ligands et les ions Cu(II) Les différences de stabilité des complexes diastéréoisomères réalisent la séparation chromatographique

Domaines d’applications : les énantiomères avec deux groupements fonctionnels polaires, à distance convenable, comme les acides α-aminés, les acides α-hydroxycarboxyliques (ex. acide lactique), les acides N-alkyl-α-aminés etc.

Enantiomères de D,L-alanine Enantiomères de D,L-threonine Enantiomères de l’acide lactiqueColonne : 250 x 4 mm

NUCLEOSIL® CHIRAL-1Eluant : 0,5 mmol/L CuSO4Débit : 1 mL/minPression : 60 barsTempérature : 60 °CDétection : UV, 250 nm

0 10 min


Colonne : 250 x 4 mm NUCLEOSIL® CHIRAL-1

Eluant : 0,25 mmol/L CuSO4Débit : 0,8 mL/minPression : 65 barsTempérature : 60 °CDétection : UV, 240 nm

0 10 min


Colonne : 250 x 4 mm NUCLEOSIL® CHIRAL-1

Eluant : 0,5 mmol/L CuSO4Débit : 0,8 mL/minTempérature : 80 °CDétection : UV, 240 nmInjection : 1 μL

0 10 min


Références de commande Eluant dans la colonne� 0,5 mmol/L de sulfate de cuivre

Longueur 250 mm Précolonnes EC* Précolonnes CC**

NUCLEOSIL® CHIRAL-1Colonnes EC 4 mm DI 720081.40 721188.30 721455.40

* Les précolonnes EC 4/3 s’utilisent avec les colonnes EC de DI 4 mm, avec le système de protection des colonnes Column Protection System (REF 718966, voir page 190).** Les précolonnes CC 8/4 s’utilisent avec les colonnes EC de DI 4 mm, avec l’adaptateur de précolonne EC (REF 721359, voir page 191).Toutes les colonnes et précolonnes sont livrées à l’unité.

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NUCLEOSIL® CHIRAL-2 / séparation d’énantiomères NUCLEOSIL® CHIRAL-3 avec des éluants organiques

Silice de base NUCLEOSIL®, taille des particules 5 μm, taille des pores 100 Å, sélecteur chiral pour NUCLEOSIL® CHIRAL-2 : N-(3,5-dinitrobenzoyl)-D-phénylglycine, pour NUCLEOSIL® CHIRAL-3 l’antipode optique est utilisé, X Spacer

NO2

O2N (SiO2)n

O

HN

O

phases de type « brosse » · CHIRAL-3 = USP L36

Principaux modes d’interactions : interactions par transfert de charge, liaisons hydrogènes, interactions dipôle-dipôle et effets stériques

Domaines d’applications : analyses des stéréoisomères comme la séparation d’énantiomères et de diastéréoisomères, contrôle de la pureté optique de produits de protection phytosanitaires (pesticides, ex. herbicides dérivés de l’acide pro-pionique), médicaments et pour le contrôle de produits de synthèse chirale organique

Pour le contrôle de la pureté optique d’un composé, l’utilisateur a ainsi la possibilité avec les deux co-lonnes NUCLEOSIL® CHIRAL-2 et NUCLEOSIL® CHIRAL-3 d’éluer l’énantiomère apparaissant sous forme d’impureté à faible concentration, avant le pic principal. La superposition des pics peut ainsi être évitée. Ceci permet avec plus de facilité la quantification exacte de l’impureté.

Contrôle de la pureté optique du mécoprop méthylColonnes : a) 250 x 4 mm NUCLEOSIL® CHIRAL-2 b) 250 x 4 mm NUCLEOSIL® CHIRAL-3Eluant : n-heptane – 2-propanol – TFA (100:0,05:0,05,

v/v/v)Débit : 1 mL/min, température ambianteDétection : UV, 230 nmInjection : 1 μL (échantillon avec 90 % ee)

95 % D 95 % D

5 % L5 % L

0 10 min 0 10 min

b)a)


Séparation énantiomérique du D,L-supidimideColonne : 250 x 4 mm NUCLEOSIL® CHIRAL-2Eluant : tétrahydrofurane – n-heptane (10:3, v/v)Débit : 1,0 mL/minDétection : UV, 220 nm

0 10 20 min

NSN

OOO

O


Références de commandeEluant dans la colonne� n-heptane – 2-propanol – TFAA (100:0,05:0,05, v/v/v)

Longueur 250 mm Précolonnes EC* Précolonnes CC**

Colonnes EC NUCLEOSIL® CHIRAL-2 4 mm DI 720088.40 721190.30 721458.40

NUCLEOSIL® CHIRAL-34 mm DI 720350.40 721190.30 721458.40

Les précolonnes pour les NUCLEOSIL® CHIRAL-2 et CHIRAL-3 sont identiques. * Les précolonnes EC 4/3 s’utilisent avec les colonnes EC de DI 4 mm, avec le système de protection des colonnes Column Protection System (REF 718966, voir page 190).** Les précolonnes CC 8/4 s’utilisent avec les colonnes EC de DI 4 mm, avec l’adaptateur de précolonne EC (REF 721359, voir page 191).Les colonnes EC et les précolonnes EC sont livrées à l’unité, les précolonnes CC en paquets de 3.

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Colonnes pour séparations biochimiques

Colonnes NUCLEOGEN® échange d’anions des acides nucléiques Matériau de base : silice, taille des particules 7 µm N CH3

CH3

Spacer(SiO2)n

Echangeur d’anions DEAE NUCLEOGEN® 60-7 DEAE : taille des pores 60 Å Séparation des oligonucléotides avec une longueur de chaîne jusqu’à 40 bases, avec un taux de recouvrement > 95 % Capacité 200 A260/mL (~ 300 A260 pour une colonne 125 x 4 mm DI, 1875 A260 pour une colonne 125 x 10 mm DI) ; Des séparations préparatives sont possibles en augmentant le débit et la durée du gradient.

NUCLEOGEN® 500-7 DEAE : taille des pores 500 Å Séparation des ARNt, ARN 5S, viroïdes et ARNm d’un poids moléculaire inter-médiaire (25 000–1 000 000 Da) avec un taux de recouvrement > 95 % Capacité 730 A260 pour une colonne 125 x 6 mm DI, 1940 A260 pour une colonne 125 x 10 mm DI

NUCLEOGEN® 4000-7 DEAE : taille des pores 4000 Å Séparation des plasmides, des fragments de restriction d’ADN, des ARN riboso-miques, des ARN messagers et ARN viraux, c’est-à-dire des acides nucléiques de haut poids moléculaire (ex. 1–50 MDa) Capacité 120 A260 pour une colonne 125 x 6 mm DI, 350 A260 pour une colonne 125 x 10 mm DI

Pour d’autres séparations de desoxyoligonucléotides, plasmides et des frag-ments de restriction d’ADN visitez notre site internet www.mn-net.com/apps

Séparation d’oligo(rA)nColonne : 125 x 4 mm NUCLEOGEN® 60-7 DEAEEluant : A) 20 mmol/L de tampon phosphate, pH 5,5,

5 mol/L d’urée ; B) tampon A + 1 mol/L KCl; 0–100 % B en 200 min

Débit : 2 mL/min, 110 barsTempérature : ambianteDétection : UV, 260 nm

0 50 100 min

0

A260

4

10

20

3037

0,020.02


Séparation préparative d’un extrait brut d’ARN de viroïde (PSTV) infectants des plants de tomates

D. Riesner, BioEngineering 1 (1988) 42–48Colonne : 125 x 6 mm NUCLEOGEN® 500-7 DEAEEluant : A) 250 mmol/L KCl, 20 mmol/L de tampon phos-

phate pH 6,6, 5 mol/L d’urée ; B) 1 mol/L KCl, 20 mmol/L de tampon phosphate pH 6,6, 5 mol/L d’urée 0–50 % B en 120 min, 50–100 % B en 250 min

Débit : 3 mL/min, 40 bars, température ambianteDétection : 260 nm

tRNA

5S RNA

7S RNA

PSTV

0

0

A260

50 100 min

0,040.04


Pour des kits pour la purification d’ADN/ARN demandez notre catalogue « Bioanalysis »

www.mn-net.com 179



Séparation de plasmide pBR 322�. Colpan, D. Riesner, communication particulièreA) Isolement d’un ADN plasmidique à partir d’un lysat brut de cellulesEchantillon: 5 μg de plasmide pBR 322 contenu dans un

lysat clair d’E. coliColonne : 125 x 6 mm NUCLEOGEN® 4000-7 DEAEEluant : A) 20 mmol/ K de tampon phosphate pH 6,9 ;

5 mol/L d’urée ; B) éluant A + 1,5 mol/L KCl, 20–100 % B en 50 min; flèche = force ionique de 850 mmol/L

Débit : 1,0 mL/min, 70 bars, température ambianteDétection : UV, 260 nm

0

0

A260

20 40 min

0,1ARN

plasmide


B) Séparation du plasmide superenroulé des formes relâchée et linéaireEchantillon: plasmide pBR 322, superenroulé, relâché et

linéaireColonne : 125 x 6 mm NUCLEOGEN® 4000-7 DEAEEluant : A) 20 mmol/L de tampon phosphate pH 6,8 ;

6 mol/L d’urée ; B) éluent A + 2 mol/L KCl 42–100 % B en 230 min

Débit : 1,5 mL/min, 45 bars, température ambiante

0

0

A260

15 30 min

0,04

supe

renr

oulé

relâ

ché

linéa

ireRéférences de commande Eluant dans la colonne� méthanol

Longueur 125 mm Précolonnes

Colonnes EC Colonnes type Valco Colonnes VarioPrep

NUCLEOGEN® 60-7 DEAE taille des pores 60 Å

Colonnes analytiques EC 4 mm DI 736596.40 736400.40

Colonnes préparatives VarioPrep 10 mm DI 736597.100 736400.40


Colonnes analytiques type Valco6 mm DI 736598 736400.40



Colonnes analytiques type Valco6 mm DI 736601 736400.40


Les précolonnes NUCLEOGEN® font 30 x 4 mm et sont vendues par 2. Elles nécessitent un kit de montage CC 30 mm (REF 721823, voir page 192). Toutes les autres colonnes sont vendues par l’unité.

[email protected]



NUCLEOSIL® 4000-7 PEI échange d’anions des protéines et des peptides Silice de base NUCLEOSIL®, taille des particules 7 µm, taille des pores 4000 Å phase polymérique, polyéthylène imine lié covalement, échangeur d’anions faiblement basique Capacité d’échange ionique 0,15 mmol/g ; capacité de liaison protéique 61 mg BSA/g ; stabilité aux pH 2–8,5 ; pression maximale de travail 250 bars

Principe de séparation : adsorption réversible des substances chargées négativement aux groupements chargés positivement du matériau échangeur puis de leur déplacement, soit par augmentation de la force ionique soit par un changement de pH dans la phase mobile

Haute sélectivité pour de nombreuses protéines : ex. les β-lactoglobulines A et B, deux protéines différants juste par deux acides aminés, peuvent être séparées en seulement 10 minutes ; l’activité biologique des protéines purifiées est préservée

Bonne cinétique de liaison et de désorption pour les nucléotides Pour d’autres exemples de purification de différents peptides et protéines visitez notre base de donnés en ligne sous www.mn-net.com/apps

Recouvrement des protéinesColonne : 50 x 4 mm NUCLEOSIL® 4000-7 PEIEluant : 10 mmol/L NaH2PO4, 1,5 mol/L NaCl, pH 7,0Débit : 1 mL/minEchantillon : 50 μg de chaque protéine

Séparation de protéines standardsColonne : 125 x 4 mm NUCLEOSIL®

4000-7 PEIEluant : A) 2 mmol/L Tris – acétate

pH 8,0; B) 20 mmol/L Tris – acétate pH 8,0 + 1.5 mol/L KCl 0–40 % B en 20 min

1

2

3

4

5

67

0 10 20 min

Débit : 1 mL/minPression : 76 barsDétection : UV, 280 nmInjection : 20 μLPics : 1. Catalase2. �yoglobin3. α-Amylase4. Transferrin5. α-Lactalbumin6. Glucose oxydase7. Inhibiteur de la trypsine de soja


Protéine Recouvrement [%]Myoglobine 100Transferrine 95Ovalbumine 98Albumine de sérum bovin 100Glucose oxydase 100α-Amylase 100Inhibiteur de la trypsine de soja 100β-Lactoglobuline 97Ferritine 85

Recouvrement de l’activité enzymatique spécifique après HPLC

Colonne : 50 x 4 mm NUCLEOSIL® 4000-7 PEIEluant : A) 20 mmol/L Tris-HCl pH 8,5 ; B) A + 1,5 mol/L

NaCl ; 0–100 % B en 5 min, 1 mL/min, 30 barsDétection : UV, 280 nm

Enzyme Recouvrement [%]Catalase (foie de bovin) 93Isoenzyme de L-lactate-déshydrogénase LDH-1 (cœur de porc)

102

Kallicréine (pancréas de porc) 98Glucose oxydase (Aspergillus niger) 104Peroxydase (raifort) 100

Références de commandeEluant dans la colonne� méthanol

Colonnes EC Longueur 125 mm Précolonnes CC

NUCLEOSIL® 4000-7 PEI4 mm DI 720402.40 721091.40

Les précolonnes CC 8/4 s’utilisent avec les colonnes EC de DI 4 mm, avec l’adaptateur de précolonne EC (REF 721359, voir page 191). Les précolonnes sont vendues par deux et les colonnes par unité d’emballage.

www.mn-net.com 181



NUCLEOGEL® SAX échange d’anions des macromolécules biologiques Echangeur d’anions fortement basique -N+(CH3)3 à base de polymère, gel PEI quaternisé ; taille des particules 8 µm, taille des pores 1000 Å · USP L23

Domaine de pH 1–13, pression maximale de travail 200 bars Domaines d’applications : purification de peptides, grosses protéines et oligonucléotides, haute capacité pour les protéines même à pH 10

Références de commandeEluant dans la colonne� Eluant dans la colonne 0,1 mol/L Na2SO4 + 0,2 % NaN3

Colonnes de type Valco Longueur 50 mm Précolonnes

NUCLEOGEL® SAX4,6 mm DI 719469 719600

Séparation du blanc d’œuf de pouleEchantillon : blanc d’œuf gelé et

dégelé, filtré et dilué 1:8 dans l’éluant A

Colonne : 50 x 4,6 mm NUCLEOGEL® SAX 1000-8

Eluant : A) 0,01 mol/L Tris-HCl, pH 7,5 ; B) A + 0,5 mol/L NaAc, pH 7,5 ; 0–100 % B en 20 min

Débit : 1 mL/minInjection : 50 μLDétection : UV, 280 nm

1

2

3

0 min20

Pics :1. Conalbumine2. Ovalbumine3. non identifié


Separation of protein standardsColonne : 50 x 4,6 mm

NUCLEOGEL® SCX 1000-8

Eluant : A) 0,02 mol/L KH2PO4, pH 6,0

B) A + 0,5 mol/L NaCl, pH 6,0 0–100 % B en 20 min

Débit : 1 mL/minDétection : UV, 280 nm

12

3

4

0 min10

Pics :1. �yoglobine2. α-Chymotrypsinogène A3. Cytochrome C4. Lysozyme


NUCLEOGEL® SCX échange de cations des macromolécules biologiques Echangeur de cations fortement acide -SO3

– à base de polymère, gel hydrophile ; taille des particules 8 µm, taille des pores 1000 Å · USP L22

Domaine de pH 1–13, pression maximale de travail 200 bars Domaines d’applications : protéines, peptides et glucides avec un haut point isoélectrique

Références de commandeEluant dans la colonne� 0,1 mol/L Na2SO4 + 0,2 % NaN3

Colonnes type Valco Longueur 50 mm Précolonnes

NUCLEOGEL® SCX4,6 mm DI 719475 719540

Les précolonnes NUCLEOGEL® SAX et NUCLEOGEL® SCX de type Valco font 5 x 3 mm et nécessitent le support de précolonne B, REF 719539 (voir page 193). Les précolonnes sont vendues par deux et les colonnes par unité d’emballage.

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NUCLEOSIL® MPN chromatographie RP des macromolécules biologiques Phases inverses à base de silice greffée avec des chaînes alkyles monomériques, structure de type «brosse» forces hydrophobes prédominantes avec une faible proportion d’interactions hydrophiles

NUCLEOSIL® 100-5 C18 MPN : · USP L1 phase octadécyle, taille des particules 5 µm, taille des pores 100 Å Capacité de fixation des protéines par g de remplissage : 6 mg BSA, 110 mg cytochrome C

NUCLEOSIL® 300-5 C4 MPN : · USP L26 phase butyle, taille des particules 5 µm, taille des pores 300 Å Capacité de fixation des protéines par g de remplissage : 14 mg BSA, 27 mg cytochrome C ; particulière-ment recommandée pour la purification de grands peptides hydrophobes et de différentes protéines

Domaine de pH 2–8, pression maximale de travail 250 bars L’efficacité de séparation maximale peut être atteinte lorsque la masse de protéine injectée n’excède pas 1–2 % de la capacité maximale de fixation des protéines.

Séparation des chaînes de l’hémoglobine1 3

2

5

4

6

0 20 40 min

Colonne : 250 x 4 mm NUCLEOSIL® 300-5 C4 �PNEluant : A) 20 % acétonitrile, 80 % eau, 0,1 % TFA B) 60 % acétonitrile, 40 % eau, 0,1 % TFA

40–60 % B en 60 minDébit : 1 mL/minDétection : UV, 220 nmPics :1. Hémoglobine2. β-globine3. α-globine4. AγT-globine5. Gγ-globine6. AγI-globine


Références de commandeEluant dans la colonne� méthanol

Longueur 250 mm Précolonnes CC

Colonnes EC NUCLEOSIL® 100-5 C18 MPN phase octadécyle, taille des pores 100 Å

4 mm DI 720231.40

NUCLEOSIL® 300-5 C4 MPN phase butyle, taille des pores 300 Å4 mm DI 720245.40 721113.40


www.mn-net.com 183



NUCLEOSIL® PPN chromatographie RP des macromolécules biologiques Phases inverses à base de silice greffée avec des chaînes alkyles poly-mériques ; interactions exclusivement hydrophobes

NUCLEOSIL® 100-5 C18 PPN : · USP L1 phase octadécyle, taille des particules 5 µm, taille des pores 100 Å Capacité de fixation des protéines par g de remplissage : 8 mg BSA, 64 mg cytochrome C ; Recommandée pour la séparation des peptides et des protéines jusqu’à 40 kDa, recommandée également pour des peptides basiques

NUCLEOSIL® 500-5 C18 PPN : · USP L1 phase octadécyle, taille des particules 5 µm, taille des pores 500 Å Capacité de fixation des protéines par g de remplissage : 22 mg BSA, 40 mg cytochrome C ; recommandée pour la séparation de gros pep-tides et des protéines hydrophiles de taille moyenne

Domaine de pH 1–9, pression maximale de travail 250 bar

Séparation de protéines standardsColonne : 125 x 4 mm NUCLEOSIL® 100-5 C18 PPNEluant : A) 0,1 % TFA dans l’eau

B) 0,08 % TFA dans l’acétonitrile 20–60 % B en 10 min

Débit : 1,0 mL/minDétection : UV, 280 nmPics :1. Ribonuclease2. Cytochrome C3. Lysozyme4. β-Lactoglobuline5. Ovalbumine

30 min0

1

23 4

5


Séparation de sécrétions pancréatiques de porceletColonne : 125 x 4 mm NUCLEOSIL® 500-5 C18 PPNEluant : A) 0.1 % TFA dans l’eau

B) 0.08 % TFA dans l’acétonitrile 30–50 % B en 14 min, 50–65 % B en 6 min

Débit : 1 mL/minDétection : UV, 215 nmPics :1. Trypsine + trypsinogène2. Proélastase3. Lipase

+ α-chymotrypsine4. Chymotrypsinogène5. α-Amylase

min100 20

1

2

3

45

6

7

6., 7. Procarboxypeptidase


Références de commande Eluant dans la colonne� méthanol

Longueur → 125 mm 250 mm Précolonnes CC

Colonnes EC NUCLEOSIL® 100-5 C18 PPN taille des pores 100 Å

4 mm DI 720251.40 720252.40 721594.40

NUCLEOSIL® 500-5 C18 PPN taille des pores 500 Å4 mm DI 720257.40 720258.40 721687.40


[email protected]



NUCLEOGEL® RP colonnes RP pour des applications biochimiques Polystyrène – divinylbenzène, tailles des particules disponibles 5 μm et 8 μm, tailles des pores disponibles 100 Å et 300 Å · USP L21 Domaine de pH 1–13, pression maximale de travail 180 bars

Les colonnnes avec de petites tailles de pores sont utilisées pour des séparation en phase inverse de petites molécules comme les composés pharmaceutiques ayant des propriétés basiques, par ex. les hétérocycles organiques. Recommandées également pour la séparation de nucléosides et nucléotides jusqu’à 5 000 Da Peuvent être utilisées en gradient et en mode isocratique

Les colonnes avec de larges pores sont particulièrement recommmandées pour de grosses biomolécules (protéines, peptides etc.). Comparée à des phases à base de silice elles présentent une plus grande hydrophobicité.

Analyse de la protéine porteuse d’acyle ACP(65-74)Colonne : 150 x 4,6 mm

NUCLEOGEL® RP 100-8Eluant : A) 0,1 % TFA dans acétonitrile – eau

(1:99, v/v); B) 0,1 % TFA dans acétonitrile – eau (99:1, v/v) 10–60 % B en 20 min

Débit : 1 mL/minDétection : UV, 220 nm

1

2

3

4

0 5 10 min

Pics :1. ACP(66-74)(H-Gln)2. ACP(65-74)3. ACP(66-74)(Glp)4. Thioanisole



Longueur → 50 mm 150 mm 250 mm Précolonnes

Colonnes analytiques type Valco

NUCLEOGEL® RP 100-5 taille des particules 5 µm, taille des pores 100 Å4,6 mm DI 719454 719455 719542

NUCLEOGEL® RP 100-8 taille des particules 8 µm, taille des pores 100 Å4,6 mm DI 719456 719520 719542

NUCLEOGEL® RP 300-5 taille des particules 5 µm, taille des pores 300 Å4,6 mm DI 719459 719542

NUCLEOGEL® RP 300-8 taille des particules 8 µm, taille des pores 300 Å4,6 mm DI 719460 719542

Les précolonnes type Valco font 5 x 3 mm et nécessitent le support de précolonne B (REF 719539, voir page 193).Les précolonnes sont vendues par deux et les colonnes par unité d’emballage.

www.mn-net.com 185


Colonnes pour l’analyse des sucres

NUCLEOSIL® Carbohydrate séparation des mono- et disaccharides Matrice : silice NUCLEOSIL® avec une modification amino, taille des particules 10 µm · USP L8 Domaines d’applications : séparation en mode RP des mono- et disaccharides

Séparation des sucresColonne : 250 x 4 mm NUCLEOSIL® CarbohydrateEluant : acétonitrile – eau (79:21, v/v)Débit : 2 mL/minTempérature : 25 °CDétection : RIInjection : 10 μLPics :1. Fructose2. Glucose3. Saccharose4. �altose5. Lactose

1

2 3

45

0 5 10 min


Notre phase NUCLEOSIL® 300-5 C18 peut être utilisée pour la séparation d’oligosaccharides à longues chaînes (10 < n < 40), voir application 102730 sur notre site in-ternet www.mn-net.com). Dans ce cas un gradient très plat permet d’obtenir une bonne résolution. Pour les ré-férences de commande de cette phase voir page 159.

Références de commandeEluant dans la colonne� acétonitrile – eau (79:21, v/v)


NUCLEOSIL® Carbohydrate4 mm DI 720905.40 721170.30 721595.40

* Les précolonnes EC 4/3 s’utilisent avec les colonnes EC de DI 4 mm, avec le système de protection des colonnes (Column Protection System, REF 718966, voir page 190).** Les précolonnes CC 8/4 s’utilisent avec les colonnes EC de DI 4 mm avec l’adaptateur de précolonne EC (REF 721359, voir page 191). Toutes les colonnes et précolonnes sont vendues par l’unité d’emballage.

[email protected]



NUCLEOGEL® SUGAR 810 séparation des sucres Résine polystyrène – divinylbenzène sulfonée sous différentes formes ioniques En raison de la sélectivité différente en comparaison aux colonnes NUCLEOGEL® SUGAR, le domaine d’application est très étendu.

Les mécanismes de séparation incluent : l’exclusion ionique, l’échange d’ions, la chromatographie d’exclu-sion, l’échange de ligand comme la chromatographie NP et RP.

Forme H+ : séparation de sucres, d’alcools sucrés et d’acides organiques · USP L17 éluant dans la colonne 5 mmol/L H2SO4

Forme Ca2+ : séparation de mono-, di- et oligosaccharides · USP L19 éluant dans la colonne eau

Acides organiques et alcoolsColonne : 300 x 7.8 mm NUCLEOGEL® SUGAR 810 HEluant : 5 mmol/L H2SO4 Débit : 0,6 mL/minTempérature : 35 °CDétection : RIInjection : 5 μL

Acide oxaliqueAcide citriqueAcide orotiqueAcide maléiqueAcide tartriqueAcide pyruviqueAcide maliqueAcide succiniqueAcide lactiqueAcide formiqueAcide acétiqueAcide fumarique�éthanolAcide propioniqueAcide pyroglutamiqueEthanolAcide i-butyriqueAcide butyrique

0 5 10 15 20 25 temps de rétention [min] �N application 113870

Sucres et alcools sucrésColonne : 300 x 7.8 mm NUCLEOGEL® SUGAR 810 CaEluant : eau, débit 0,6 mL/minDétection : RI

�altotrioseRaffinoseCellobioseTréhalose�altoseSucroseLactosePalatinose�élibioseLactuloseGlucoseGalactoseXyloseSorboseLactitol�altitol�annoseRhamnosePalatitolFructoseArabinosemeso-Erythritol�annitolArabitolXylitolSorbitol

0 5 10 15 20 temps de rétention [min] �N application 114160

Ribose



NUCLEOGEL® SUGAR 810 H7,8 mm DI 719574 719575

NUCLEOGEL® SUGAR 810 Ca7,8 mm DI 719570 719571

Les précolonnes ChromCart® NUCLEOGEL® SUGAR 810 font 30 x 4 mm, nécessitent un kit de montage 30 mm (REF 721823, voir page 192) et sont vendues par 2. Les colonnes type Valco sont vendues par l’unité d’emballage.

www.mn-net.com 187



NUCLEOGEL® ION 300 OA / SUGAR séparation des sucres Résine sphérique PS/DVB sous différentes formes ioniques taille moyenne des particules 10 µm, taille des pores 100 Å

Les mécanismes de séparation incluent : l’exclusion stérique, l’échange de ligands et des effets de partage. L’échange de ligand est la force prédominante puisque la forme hydratée des ions métalliques interagit avec les groupements hydroxyles de l’échantillon. L’intensité de ces interactions diminue dans l’ordre sui-vant : Pb, Ca, Na

NUCLEOGEL® ION 300 OA : Forme H+ pour la séparation des sucres, des alcools et des acides orga-niques · USP L17 · éluant dans la colonne 5 mmol/L H2SO4

NUCLEOGEL® SUGAR : Forme Ca2+ : séparation des mono- et oligosaccharides, alcools sucrés · USP L19 Forme Pb2+ :

séparation des mono- et disaccharides à partir des aliments et des échantillons biologiques · USP L34 Forme Na+ : séparation des oligosaccharides à partir d’hydrolysat d’amidon et d’aliments · USP L58

Eluant dans la colonne pour les phases Ca, Na et Pb : eau + 0,02 % d’azide Températures de travail recommandées : 60–95 °C; pression maximale 70 bar

Séparation des sucresColonne : 300 x 7,8 mm

NUCLEOGEL® SUGAR PbEluant : eau déioniséeDébit : 0,4 mL/minTempérature : 80 °CDétection : RIPics :1. Sucrose2. �altose3. Glucose4. Xylose5. Galactose6. Arabinose7. �annose


1 2

34

56

7

0 10 20 30 min



NUCLEOGEL® ION 300 OA7,8 mm DI 719501 719537

NUCLEOGEL® SUGAR Ca 6,5 mm DI 719531 719535

NUCLEOGEL® SUGAR Pb7,8 mm DI 719530 719534

NUCLEOGEL® SUGAR Na7,8 mm DI 719532 719536

Les précolonnes type Valco font 21 x 4 mm et nécessitent le support de précolonne C (REF 719538, voir page 193). Les précolonnes sont vendues par deux et les colonnes par unité d’emballage.

[email protected]


Colonnes pour la GPC

NUCLEOGEL® GPC pour la chromatographie par perméation de gel de composés non solubles dans l’eau

Polymère macroporeux, polystyrène–divinylbenzène sphérique avec une bonne stabilité mécanique

Chromatogramme des oligomères du styrène

VE

VZ V0

1

2

3

4

56

7

8

9

10

11

1213

14

C4H9– CH2– CH – H

n

Volume d’exclusion Temps mort

Domaine de travail pour le polystyrène

NUCLEOGEL® GPC

50

100

500

103

104

102 103 104 105 106 107

[MW in Da]

Références de commandeEluant dans la colonne� toluène

Phase Limite d’exclusion [kDa]

Application Colonne 300 x 7,7 mm

Colonnes type Valco

Taille des particules 5 µmNUCLEOGEL GPC 50 2 composés organiques de faible poids molé-

culaire719402

NUCLEOGEL GPC 100 4 oligomères, huiles 719403NUCLEOGEL GPC 500 25 polymères de faible poids moléculaire 719404NUCLEOGEL GPC 103 60 polymères de faible poids moléculaire 719405NUCLEOGEL GPC 104 500 polymères jusqu’à 500 kDa 719406

précolonnes 50 x 7,7 mm 719409

Taille des particules 10 µmNUCLEOGEL GPC 50 2 composés organiques de faible poids molé-

culaire719410

NUCLEOGEL GPC 100 4 oligomères, huiles 719411NUCLEOGEL GPC 500 25 polymères de faible poids moléculaire 719412NUCLEOGEL GPC 103 60 polymères de faible poids moléculaire 719413NUCLEOGEL GPC 104 500 polymères jusqu’à 500 kDa 719414

précolonnes 50 x 7,7 mm 719418

Toutes les colonnes et précolonnes sont vendues par unité d’emballage.

www.mn-net.com 189


Systèmes de colonnes MN

Colonnes EC standards pour la HPLC analytique Système de colonne analytique en inox Filetage extérieur M 8 aux deux extrémités Combinaison d’éléments d’étanchéité et de tamis très fin en inox, joint PTFE et adaptateur de fitting Tête de colonne SW 12 avec filetage intérieur M8 x 0,75 et UNF 10-32 (= connexion 1/16″)

Pour un montage direct du système de précolonnes, nous recom-mandons le « Column Protection System » (voir la page suivante) pour l’utilisation avec des précolonnes EC de 4 mm de longueur.

Les précolonnes de 8 mm de long du système ChromCart® sont utilisées avec l’adaptateur de précolonne EC (voir page 191).

Disponibles avec les silices sphériques NUCLEODUR®, NUCLEOSHELL® et NUCLEOSIL®

Disponibilité des dimensions standards de colonnes EC DI

[mm]Longueur [mm] Schéma de la tête de colonne

20 30 50 75 100 125 150 200 250 300

2 + + + + + + + + + +3 + + + + + + + + + +4 + + + + + + + + + +

4,6 + + + + + + + + + +

Demandez la disponibilité des phases individuelles

Précolonnes pour colonnes ECColonnes EC de DI Utilisez le support de

précolonne(paquets de 3 précolonnes) 2 mm 3 mm 4 mm 4,6 mm

Précolonnes EC pour le support de précolonne du système de protection des colonnes (Column Protection System)

EC 4/2 4/3 4/3 4/3 REF 718966

Précolonnes ChromCart® pour l’adaptateur de précolonnes EC CC 8/3 8/3 8/4 8/4 REF 721359

Accessoires et pièces de rechange pour colonnes EC · Références de commandeDescription Pqt de REF

Adaptateur de fitting pour colonnes EC 1 718987

Tête de colonne EC (écrou) 1 718988

Bague d’étanchéité en PTFE pour colonnes EC 4 718992

Combinaison d’étanchéité, 3 pièces, pour colonnes EC 5 jeux 718998

[email protected]



Column Protection System Système de protection des colonnes : Support de précolonnes à visser innovant et universel Utilisable avec toutes les colonnes HPLC analytiques avec des connectiques de 1/16″

Cartouches remplies avec des adsorbants HPLC spécifiés NUCLEODUR®, NUCLEOSIL® et NUCLEOSHELL®

Protection idéale pour votre colonne analytique → durée de vie de la colonne significativement accrue

Volume mort minimisé → compatible en ultra fast HPLC Ferrules spéciales → stabilité aux pressions jusqu’à 1034 bars (15 000 psi)

Contrôle visuel des contaminations → remplacement de la précolonne dans les temps

Précolonnes de 4 mm de longueur, DI 2 mm (pour colonnes analytiques de 2 mm DI) et DI 3 mm (pour colonnes analytiques de 3, 4 et 4,6 mm DI)

Précolonnes UNIVERSAL RP utilisables pour toutes les colonnes HPLC sous des conditions RP

Contenu du système de protection des colonnes (Column Protection System)Description REF

Column Protection System 718966

Contenu

Support de précolonne 1

Capillaires 2

Ferrules 3

Clés plates 2

Manuel 1

Pièces de rechange pour le Column Protection System · Références de commandeDescription Pqt de REF

Ferrules spéciales 5 718967Ecrou de connexion à la colonne principale (joint torique inclu) 1 718968Tubes capillaires, écrous et ferrules en métal 3 718969Clés plates (tailles 12 et 14 mm) 1 718970

Précolonnes EC 4/2 UNIVERSAL RP (pour colonnes analytiques de 2 mm DI) 3 728777.20Précolonnes EC 4/2 UNIVERSAL RP (pour colonnes analytiques de 2 mm DI), paquet économique 9 728778.20

Précolonnes EC 4/3 UNIVERSAL RP (pour colonnes analytiques de 3, 4 et 4,6 mm DI) 3 728777.30Précolonnes EC 4/3 UNIVERSAL RP (pour colonnes analytiques de 3, 4 et 4,6 mm DI), paquet économique

9 728778.30

Contrôle visuel des contaminationsLa précolonne est équipée d’une membrane filtrante spéciale :

Si la membrane est contaminée (colorée), il est nécessaire de changer la précolonne.

Si les contaminants sont incolores, remplacez la précolonne si la pression augmente ou si les performances chromatographiques diminuent.

www.mn-net.com 191



Adaptateur de précolonnes ECPrécolonnes standards avec adaptateur « built-in » Conviennent pour colonnes EC

Cartouches remplies avec des adsorbants HPLC NUCLEODUR® et NUCLEOSIL® spécifiés

Protection idéale pour votre colonne analytique → durée de vie prolongée de la colonne

Précolonnes de 8 mm de longueur, DI 3 mm (pour colonnes de 2 et 3 mm DI) et DI 4 mm (pour colonnes de 4 et 4,6 mm DI)

Adaptateur de précolonne EC · Références de commandeDescription Pqt de REF

Adaptateur de précolonne EC 1 721359

Installation de l’adaptateur de précolonne EC

1. Dévissez le tête de colonne2. Enlevez l’adaptateur de

fitting

3. Disloquez l’adaptateur de précolonne EC

4. Vissez la douille de l’adaptateur sur la colonne

5. Insérez la précolonne CC

6. Revissez l’adaptateur de précolonne

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Colonnes ChromCart® (CC) pour la HPLC analytique Système de colonnes analytiques en inox (brevet US 5,342,515) Installation rapide et facile Les colonnes se changent sans enlever les capillaires Les écrous se serrent à la main Facilité d’installation des précolonnes sans adaptateur spécial Même kit de connexion pour toutes les longueurs et diamètres de colonne (voir ci-dessous)

Disponibles avec les silices LiChrospher® fabriquées par E. Merck

Disponibilité des dimensions standards des colonnes ChromCart®

DI [mm]

Longueur [mm] Schéma de la tête de colonne8* 125 150 250

2 – + + +3 + + + +4 + + + +

4,6 – + + +* Attention : les précolonnes de DI de 3 mm s’utilisent avec les colonnes CC de 2 et 3 mm et les précolonnes de 4 mm de DI s’utilisent avec des colonnes CC de 4 et 4,6 mm DI.

Installation du kit de connexion ChromCart® et des précolonnes

Utilisation d’une colonne analytique

43121

Utilisation d’une colonne avec une précolonne

453121

Légende

1 Colonne analytique2 Douille avec pas de vis3 Clavette demi-lune

4 Ecrou de serrage5 Précolonne

Accessoires pour le système ChromCart® · Références de commande

Description Pqt de REF

Kit de connexion CC (composé de 2 écrous de serrage avec endfitting, 2 douilles avec pas de vis et 2 clavettes)

1 kit 721690

Ecrou de serrage CC avec endfitting 1 jeu 721691Douille CC avec pas de vis 1 721692Clavette CC demi-lune 1 721693

Kit de montage « stand-alone » pour précolonnes CC de 8 mm 1 721820Kit de montage « stand-alone » pour précolonnes CC de 30 mm 1 721823

www.mn-net.com 193



Colonnes de type Valco Colonnes analytiques en inox

Diamètres disponibles : 4,6 mm DI (1/4″ DE) et 7,7 mm (3/8″ DE)

Principalement utilisées pour quelques phases avec des applications spéciales

Accessoires pour colonnes de type Valco · Références de commandeDescription Pqt de REFSupport de précolonne B pour précolonnes 5 x 3 mm

1 719539

Support de précolonne C pour précolonnes 21 x 4 mm

1 719538

Frittés 2 µm pour les colonnes de 4,6 mm DI

5 719485

Frittés 2 µm pour les colonnes de 7,7 mm DI

5 719486

BC

[email protected]



Colonnes VarioPrep (VP) pour la HPLC préparative Système de colonnes préparatives fabriquées en inox avec deux pistons ajustables en tête de colonne (idéal pour une utilisation fréquente des techniques de rinçage inverse ou backflushing)

Elles permettent la compensation du volume mort, qui peut appa-raître en tête de colonne après plusieurs analyses, sans avoir besoin d’ouvrir la colonne.

Peuvent être remplies avec toutes les silices sphériques NUCLEODUR® et NUCLEOSIL®

Dimensions standards disponibles des colonnes VarioprepDI

[mm]Longueur [mm] Longueur [mm] Schéma de la tête de colonne

10* 15* 50 75 100 125 150 250 5008 + + + + + +10 + + + + +16 + + + + + +21 + + + + + +32 + + + +40 + + + + + +50 + + + +80 + +

* Les colonnes 10 x 8, 10 x 16, 15 x 32 et 15 x 50 mm DI sont utilisées comme précolonnes et nécessitent le support respec-tif, voir page suivante.

Le principe VarioPrepA B

Volume mort

C

Réajustage du fitting

D

Les colonnes VarioPrep sont produites avec une haute qualité et une haute densité de remplissage (A). Le lit de phase étant soumis à une exposition intensive aux pro-duits chimiques et / ou mécanique, il est possible que la phase se tasse en tête de colonne (B : tracé orange). Dans ce cas, il est possible d’éliminer ce volume mort

crée en réajustant la tête de colonne de la Varioprep (C : en tournant l’écrou d’entrée dans le sens des ai-guilles d’une montre). La performance de la colonne Varioprep est totalement restaurée et par conséquent sa durée de vie augmentée.

Restauration de la colonne

810ème injection justement après réajustage du fitting

800 injections

750 injections

~ 100 injections

Restauration des performances des co-lonnes VarioPrep

Déformation et léger élargissement des pics après 800 injections sous des condi-tions extrêmes (pH 11; 50 °C; échantillon dans le DMSO)

Réajustement de la tête de colonne : performances de la colonne restaurée et durée de vie prolongée

www.mn-net.com 195



VP 15/32 pour

colonnes de DI 32 et 40 mm

VP 10/16 pour


VP 10/8 pour


VP 15/50 pour

colonnes de DI ≥ 50 mm

Système de précolonne pour la HPLC (semi-) préparative

Facilité de manipulation, changement de cartouche simplifié

Robustesse du matériel Raccords libre du piston –joint torique résistant à l’abrasion

Bon rapport coût-efficacité des cartouches Faible perturbation sur l’efficacité de la séparation de la colonne principale

Faible contre pression Conçu pour des pressions jusqu’à 400 bars

Performance de la colonne sans et avec précolonneColonnes : 125 x 16 mm NUCLEODUR® C18 HTec, 5 μm 125 x 16 mm NUCLEODUR® C18 HTec, 5 μm + précolonne 10 x 16 mm NUCLEODUR® C18 HTecEluant : acétonitrile – eau (80:20, v/v)Débit : 16 mL/minTempérature : 22 °C

1 2

3

0

50

100

150

200

250

0 2 4 6 min

Valeur H : 14,1Asymétrie : 1,12Pression : 62 bars

12

3

0

50

100

150

200

250

0 2 4 6 min

Pics : 1. Phénol2. Naphtalène3. Anthracène

Valeur H : 13.9Asymétrie : 1,20Pression : 71 bars

Les précolonnes VarioPrep offrent une protection idéale à votre colonne principale – symétrie, pression et rétention restent presque constantes.

Caractéristiques techniques Pas de vis 1/16″ Raccords libre du piston –joint torique résistant à l’abrasion Inox

Précolonne REF du support

DI du support

Recommandé pour une DI de colonne

DI capillaire préféré Débit typique

VP 10/8 718251 8 mm 8 et 10 mm DI 0,17 et 0,25 mm 1–12 mL/minVP 10/16 718256 16 mm 16 et 21 mm DI 0,17, 0,25 et 0,5 mm 2–32 mL/minVP 15/32 718253 32 mm 32 et 40 mm DI 0,25, 0,5 et 1,0 mm 5–150 mL/minVP 15/50 718255 50 mm ≥ 50 mm DI 0,5 et 1,0 mm 20–250 mL/min

Supports de précolonne pour colonnes VarioPrep · Références de commandePrécolonnes VP pour colonnes VarioPrep de DI Pqt de

[précolonnes]Joints toriques de rem-placement (pqt de 2)

Support8, 10 mm 16, 21 mm 32, 40 mm ≥ 50 mm DI REF

VP 10/8 2 718975 8 mm 718251VP 10/16 2 718976 16 mm 718256VP 15/32 1 718977 32 mm 718253VP 15/50 1 718978 50 mm 718255

Pour les REF des précolonnes VP voir les phases NUCLEODUR® et NUCLEOSIL®.

[email protected]


Accessoires HPLC et tubes capillaires

Pièces de remplacement pour colonnes VarioPrep · Références de commandeDescription Pqt de REF

pour colonnes VarioPrep de DI 10 mm Fitting piston VP 10 mm sans bagues d’étanchéité

1 718837

Ecrou VP 10 mm 1 718842Jeu d’éléments d’étanchéité 10 mm 1 jeu 718931Jeu de bagues d’étanchéité 10 mm 1 jeu 718852Assemblage d’étanchéité VP MN Inert 10 mm 1 jeu 718848

pour colonnes VarioPrep de DI 21 mmFitting piston VP 21 mm sans bagues d’étanchéité

1 718861

Ecrou VP 21 mm 1 718862Jeu d’éléments d’étanchéité 21 mm 1 jeu 718853Jeu de bagues d’étanchéité 21 mm 1 jeu 718854Assemblage d’étanchéité VP MN Inert 21 mm 1 jeu 718870

Accessoires pour les colonnes HPLC en inox Les colonnes HPLC en inox sont les plus couramment utilisées. Le matériel en inox est garanti contre le risque de corrosion, stable aux pressions et il est facile à usiner.

Tube capillaire en inoxLongueur DE DI Pqt de REF

Tubes capillaires en inox, bobines3 m x 1/16″ x 0,25 mm 1 coil 7187373 m x 1/16″ x 0,5 mm 1 coil 7187381 m x 1/16″ x 0,12 mm 1 coil 7187901 m x 1/16″ x 0,25 mm 1 coil 7187351 m x 1/16″ x 0,5 mm 1 coil 718736

Capillaires proprement coupés, prêt à l’emploi50 mm x 1/16″ x 0,12 mm 2 718731

100 mm x 1/16″ x 0,12 mm 2 718732200 mm x 1/16″ x 0,12 mm 2 718733300 mm x 1/16″ x 0,12 mm 2 718734100 mm x 1/16″ x 0,25 mm 5 718588200 mm x 1/16″ x 0,25 mm 5 718635300 mm x 1/16″ x 0,25 mm 5 718589100 mm x 1/16″ x 0,5 mm 5 718516300 mm x 1/16″ x 0,5 mm 5 718517

50 mm x 1/32″ x 0,12 mm 2 718670100 mm x 1/32″ x 0,12 mm 2 718671200 mm x 1/32″ x 0,12 mm 2 71867250 mm x 1/32″ x 0,25 mm 2 718673

100 mm x 1/32″ x 0,25 mm 2 71867450 mm x 1/32″ x 0,5 mm 2 718676

100 mm x 1/32″ x 0,5 mm 2 718677200 mm x 1/32″ x 0,5 mm 2 718678

Accessoires pour colonnes en inox

Description Pqt de REF

Accessoires pour capillairesBouchons à vis 1/16″ en plastique 4 718582Vis de raccordement pour capillaires 1/16″

5 718583

Ferrules 1/16″ 5 718584Raccord pour capillairesType 1 : 100 mm x 1/16″ x 0,25 mm 1 718637Type 2 : 100 mm x 1/16″ x 0,12 mm 1 719489Lime-couteau 1 706121Pince coupante pour capillaires 1/16″ 1 706290

Filtres à phase mobile en inox pour tubes 1/16″ avec fritte 2 µm 1 718750pour tubes 1/16″ avec fritte 10 µm 1 718752pour tubes 1/8″ avec fritte 2 µm 1 718751pour tubes 1/8″ avec fritte 10 µm 1 718753

Pour des accessoires et pièces de remplacement pour colonnes EC voir page 189, pour des accessoires et pièces de rempla-cement pour colonnes ChromCart® voir page 192, pour des accessoires et pièces de remplacement pour colonnes VarioPrep voir la page précédente et ci-dessus.

www.mn-net.com 197


Accessoires HPLC et tubes capillaires

Accessoires en PEEK PEEK (= polyétheréthercétone) est un polymère de haute performance de la famille des polyaryléthercétones (PAEK), qui présente une haute résistance chimique tout en étant stable mécaniquement, et qui répond à toutes les exigences d’une colonne HPLC.

Dans quelques applications, comme dans le cas de la chromatogra-phie ionique et des biopolymères, le PEEK présente un environnement exempt de toutes traces de métaux.

O CO

nO

PEEK

Tous les raccords peuvent être fixés manuellemement. Pour les références de commande des produits disponibles en PEEK voir ci-dessous.

Références de commandeDescription Pqt de REF

Fittings en PEEKFitting 1/16″ en PEEK à serrer à la main, combinaison ferrule + écrou en 1 pièce

1 718770

Ecrou 1/16″ en PEEK à serrer à la main (fingertight) 1 718771Ferrule 1/16″ en PEEK pour REF 718771 1 718772Ferrule double 1/16″ en PEEK 1 718775

Raccord 1/16″ en PEEK, filetage intérieur des deux côtés, équipé avec 2 écrous à serrer à la main et 2 ferrules doubles

1 718766

Raccord 1/16″ en PEEK, filetage intérieur des deux côtés, mais sans écrous et ans ferrules doubles

1 718767

Raccord 1/16″ en PEEK, filetage extérieur des deux côtés 1 718768

Capillaires standard en PEEK DE DI [mm] Longueur

1/16″ 0,13 1 m 1 7187651/16″ 0,17 1 m 1 7187601/16″ 0,25 1 m 1 7187611/16″ 0,5 1 m 1 7187621/16″ 0,75 1 m 1 718763

Outils pour capillaires en PEEK Pince coupante guillotine pour capillaires en PEEK et en PTFE 1 718769

Pince coupante Clean-Cut pour différents diamètres de capil-laires

1 718755

[email protected]

Adsorbants pour la chrom

atographie liquide

NUCLEODUR® · silice HPLC de haute pureté

Principes de la HPLC préparativeEn principe, l’HPLC préparative répond aux mêmes règles que la chromatographie analytique. Cependant, le but de ces deux techniques présente d’importantes différences. En HPLC analytique les chromatographistes se focalisent sur la forme des pics, et la résolution de tous les analytes élués, alors qu’en chromatographie préparative le rendement et la pureté du produit final, comme le coût de la méthode sont accentués.

Débit

Rendement

Exigences d’une

séparation en préparative

Pureté

Facteurs de transposition et paramètres pour des dimensions caractéristiques de colonnes MN

DI x longueur [mm] 4 x 250 8 x 250 10 x 250 16 x 250 21 x 250 32 x 250 40 x 250 50 x 250 80 x 250Facteur linéaire de transposition

1 4 6,25 16 27,6 64 100 156,3 400

Masse typique de l’échantillon* [mg]

0,02–2 0,08–8 0,13–13 0,3–35 0,6–60 1,3–130 2–210 3–350 10–850

Débit typique [mL/min] 0,5–1,5 2–6 3–9 8–24 14–40 32–96 50–150 80–250 200–600* Pour les matériaux de remplissage RP ; les quantités maximales données dépendent du problème de séparation et de la

composition de l’échantillon. Dans bien des cas, la moitié des quantités indiquées peuvent causer des surcharges drama-tiques, dans d’autres cas les quantités maximales peuvent encore donner des séparations acceptables.

Matériaux de remplissage NUCLEODUR® Silice sphérique de haute pureté Taille des pores size 110 Å, volume des pores 0,9 mL/g, surface spécifique (BET) 340 m2/g, densité 0,47 g/mL, pression maximale 600 bars

Particules plus grosses pour applications préparatives

Références de commandePhase Endcapped Teneur en carbone Taille des particules Pqt de 100 g Pqt de 1000 g

NUCLEODUR® C18 HTec · phases octadécyles premium (voir page 130)NUCLEODUR® 100-5 C18 HTec oui 18 % C 5 µm 713830.0100 713830.1NUCLEODUR® 100-7 C18 HTec oui 18 % C 7 µm 713831.0100 713831.1NUCLEODUR® 100-10 C18 HTec oui 18 % C 10 µm 713832.0100 713832.1

NUCLEODUR® C18 ec · phases octadécyles standards (voir page 133)NUCLEODUR® 100-10 C18 ec oui 17,5 % C 10 µm 713611.0100 713611.1NUCLEODUR® 100-12 C18 ec oui 17,5 % C 12 µm 713618.0100 713618.1NUCLEODUR® 100-16 C18 ec oui 17,5 % C 16 µm 713621.0100 713621.1NUCLEODUR® 100-20 C18 ec oui 17,5 % C 20 µm 713601.0100 713601.1NUCLEODUR® 100-30 C18 ec oui 17,5 % C 30 µm 713631.0100 713631.1NUCLEODUR® 100-50 C18 ec oui 17,5 % C 50 µm 713550.0100 713550.1

Silice NUCLEODUR® non modifiée (voir page 142) NUCLEODUR® 100-10 10 µm 713610.0100 713610.1NUCLEODUR® 100-12 12 µm 713615.0100 713615.1NUCLEODUR® 100-16 16 µm 713620.0100 713620.1NUCLEODUR® 100-20 20 µm 713600.0100 713600.1NUCLEODUR® 100-30 30 µm 713630.0100 713630.1NUCLEODUR® 100-50 50 µm 713551.0100 713551.1

www.mn-net.com 199


atographie liquideNUCLEOSIL® · silice standard pour la HPLC

Silice standard NUCLEOSIL®

Silice sphérique Stabilité aux pH 2–8 (pour NUCLEOSIL® 100-5 C18 AB pH 1–9) Pour les caractéristiques de la silice NUCLEOSIL® voir page 154

Propriétés physiques des matériaux de remplissage NUCLEOSIL® non modifiésPhase Taille

des poresVolume

des poresSurface

spécifique (BET)Densité Stabilité aux

pressions*NUCLEOSIL® 50 50 Å 0,8 mL/g 420 m2/g 0,45 g/mL 500 barsNUCLEOSIL® 100 100 Å 1 mL/g 350 m2/g 0,36 g/mL 500 barsNUCLEOSIL® 120 120 Å 0,65 mL/g 200 m2/g 0,55 g/mL 500 barsNUCLEOSIL® 300 300 Å 0,8 mL/g 100 m2/g 0,45 g/mL 400 barsNUCLEOSIL® 500 500 Å 0,8 mL/g 35 m2/g 0,45 g/mL 400 barsNUCLEOSIL® 1000 1000 Å 0,8 mL/g 25 m2/g 0,45 g/mL 300 barsNUCLEOSIL® 4000 4000 Å 0,7 mL/g 10 m2/g 0,48 g/mL 300 bars

Pour un descriptif détaillé de chacune des modifications voir le chapitre « Colonnes remplies avec NUCLEOSIL® » à partir de la page 157.* Pression maximale pour le remplissage de colonne

Caractéristiques des silices NUCLEOSIL®

Phase Endcapped Teneur en carbone Taille des pores Taille des particules

Phases octadécyles – (CH2)17 – CH3

NUCLEOSIL® 50-5 C18 ec oui 14,5 % C 50 Å 5 µmNUCLEOSIL® 100-5 C18 AB oui 24 % C 100 Å 5 µmNUCLEOSIL® 100-3 C18 oui 15 % C 100 Å 3 µmNUCLEOSIL® 100-5 C18 oui 15 % C 100 Å 5 µmNUCLEOSIL® 100-7 C18 oui 15 % C 100 Å 7 µmNUCLEOSIL® 100-10 C18 oui 15 % C 100 Å 10 µmNUCLEOSIL® 120-3 C18 oui 11 % C 120 Å 3 µmNUCLEOSIL® 120-5 C18 oui 11 % C 120 Å 5 µmNUCLEOSIL® 120-7 C18 oui 11 % C 120 Å 7 µmNUCLEOSIL® 120-10 C18 oui 11 % C 120 Å 10 µmNUCLEOSIL® 300-5 C18 oui 6,5 % C 300 Å 5 µmNUCLEOSIL® 300-7 C18 oui 6,5 % C 300 Å 7 µmNUCLEOSIL® 500-7 C18 oui 2 % C 500 Å 7 µmNUCLEOSIL® 1000-7 C18 oui ~ 1 % C 1000 Å 7 µmNUCLEOSIL® 4000-7 C18 oui <1 % C 4000 Å 7 µm

Phases octyles – (CH2)7 – CH3

NUCLEOSIL® 100-5 C8 ec oui 9 % C 100 Å 5 µmNUCLEOSIL® 100-5 C8 non 8,5 % C 100 Å 5 µmNUCLEOSIL® 100-7 C8 non 8,5 % C 100 Å 7 µmNUCLEOSIL® 100-10 C8 non 8,5 % C 100 Å 10 µmNUCLEOSIL® 120-3 C8 non 6,5 % C 120 Å 3 µmNUCLEOSIL® 120-5 C8 non 6,5 % C 120 Å 5 µmNUCLEOSIL® 300-5 C8 non ~ 3 % C 300 Å 5 µm

Phases phényles – (CH2)3 – C6H5 NUCLEOSIL® 100-5 C6H5 non 8 % C 100 Å 5 µmNUCLEOSIL® 100-7 C6H5 non 8 % C 100 Å 7 µm

Phases butyles – (CH2)3 – CH3

NUCLEOSIL® 120-5 C4 oui ~ 4 % C 120 Å 5 µmNUCLEOSIL® 300-5 C4 oui ~ 2 % C 300 Å 5 µm

[email protected]


atographie liquide

NUCLEOSIL® · silice standard pour la HPLC

Phase Endcapped Teneur en carbone Taille des pores Taille des particules

Phases diméthyles – (CH3)2

NUCLEOSIL® 100-7 C2 non 3,5 % C 100 Å 7 µm

Phases cyano (nitrile) – (CH2)3 – CNNUCLEOSIL® 100-5 CN 5 % C 100 Å 5 µmNUCLEOSIL® 100-10 CN 5 % C 100 Å 10 µmNUCLEOSIL® 120-7 CN ~ 3 % C 120 Å 7 µm

Phases diol – (CH2)3 – O – CH2 – CH(OH) – CH2OHNUCLEOSIL® 100-7 OH (Diol) 5 % C 100 Å 7 µm

Phases amino – (CH2)3 – NH2

NUCLEOSIL® 100-5 NH2 3,5 % C 100 Å 5 µmNUCLEOSIL® 100-10 NH2 3,5 % C 100 Å 10 µm

Phases diméthylamino – (CH2)3 – N(CH3)2

NUCLEOSIL® 100-5 N(CH3)2 4 % C 100 Å 5 µm

Echangeur de cations, fortement acide (SCX) – (CH2)3 – C6H4 – SO3 NaNUCLEOSIL® 100-5 SA 6,5 % C 100 Å 5 µmNUCLEOSIL® 100-10 SA 6,5 % C 100 Å 10 µm

Echangeur d'anions, fortement basique (SAX) – (CH2)3 – C6H4 – CH2 – N+(CH3)3Cl-

NUCLEOSIL® 100-5 SB 10 % C 100 Å 5 µmNUCLEOSIL® 100-10 SB 10 % C 100 Å 10 µm

Silice non modifiée SiOHNUCLEOSIL® 50-5 50 Å 5 µmNUCLEOSIL® 100-5 100 Å 5 µm

POLYGOSIL® matériaux de remplissage Silice irrégulière pour des applications analytiques Stabilité aux pH 2–8

Propriétés physiques des matériaux de remplissage POLYGOSIL® non modifiésPhase Taille des pores Volume des

poresSurface


pressions

POLYGOSIL® 60 60 Å 0,75 mL/g 350 m2/g 0,45 g/mL 600 barsPOLYGOSIL® 100 100 Å 1 mL/g 280 m2/g 0,35 g/mL 400 barsPOLYGOSIL® 300 300 Å 0,8 mL/g 100 m2/g 0,45 g/mL 400 barsPOLYGOSIL® 1000 1000 Å 0,8 mL/g 25 m2/g 0,45 g/mL 300 bars

Le procédé de modification des silices POLYGOSIL® est identique à celui des silices NUCLEOSIL®

www.mn-net.com 201


atographie liquideSilices irrégulières pour la HPLC

Références de commandePhase Endcapped Teneur en car-

boneTaille des

poresTaille des particules

Pqt de 10 g Pqt de 100 g


POLYGOSIL® 60-5 C18 oui 12 % C 60 Å 5 µm 711330.10 711330.100POLYGOSIL® 60-7 C18 oui 12 % C 60 Å 7 µm 711340.10 711340.100POLYGOSIL® 60-10 C18 oui 12 % C 60 Å 10 µm 711350.10 711350.100POLYGOSIL® 100-5 C18 oui 14 % C 100 Å 5 µm 711560.10 711560.100POLYGOSIL® 100-7 C18 oui 14 % C 100 Å 7 µm 711570.10 711570.100POLYGOSIL® 100-10 C18 oui 14 % C 100 Å 10 µm 711580.10 711580.100POLYGOSIL® 300-7 C18 oui 4 % C 300 Å 7 µm 711710.10 711710.100POLYGOSIL® 1000-7 C18 oui ~ 1 % C 1000 Å 7 µm 711992.10 711992.100


POLYGOSIL® 60-5 C8 non 7 % C 60 Å 5 µm 711300.10 711300.100POLYGOSIL® 60-7 C8 non 7 % C 60 Å 7 µm 711310.10 711310.100POLYGOSIL® 60-10 C8 non 7 % C 60 Å 10 µm 711320.10 711320.100


POLYGOSIL® 300-7 C4 oui ~ 1 % C 300 Å 7 µm 711680.10 711680.100POLYGOSIL® 1000-7 C4 oui < 1 % C 1000 Å 7 µm 711991.10 711991.100

Phases cyano (nitrile) – (CH2)3 – CNPOLYGOSIL® 60-5 CN ~ 5 % C 60 Å 5 µm 711380.10 711380.100POLYGOSIL® 60-10 CN ~ 5 % C 60 Å 10 µm 711390.10 711390.100

Phases nitro – (CH2)3 – C6H4 – NO2

POLYGOSIL® 60-5 NO2 ~ 4,5 % C 60 Å 5 µm 711400.10 711400.100POLYGOSIL® 60-10 NO2 ~ 4,5 % C 60 Å 10 µm 711410.10 711410.100

Silice non modifiée SiOHPOLYGOSIL® 60-5 60 Å 5 µm 711010.10 711010.100POLYGOSIL® 60-7 60 Å 7 µm 711280.10 711280.100POLYGOSIL® 60-10 60 Å 10 µm 711020.10 711020.100POLYGOSIL® 100-5 100 Å 5 µm 711510.10 711510.100POLYGOSIL® 100-7 100 Å 7 µm 711520.10 711520.100POLYGOSIL® 100-10 100 Å 10 µm 711530.10 711530.100POLYGOSIL® 300-7 300 Å 7 µm 711600.10 711600.100POLYGOSIL® 1000-7 1000 Å 7 µm 711890.10 711890.100


POLYGOSIL® 60-5 NH2 ~ 3 % C 60 Å 5 µm 711360.10 711360.100POLYGOSIL® 60-10 NH2 ~ 3 % C 60 Å 10 µm 711370.10 711370.100

Phases diméthylamino – (CH2)3 – N(CH3)2

POLYGOSIL® 60-5 N(CH3)2 ~ 3,5 % C 60 Å 5 µm 711420.10 711420.100POLYGOSIL® 60-10 N(CH3)2 ~ 3,5 % C 60 Å 10 µm 711430.10 711430.100

[email protected]


atographie liquide

Silices irrégulières pour la HPLC

Matériaux de remplissage POLYGOPREP Silice irrégulière pour des applications en préparative Stabilité aux pH 2–8

Propriétés physiques des matériaux POLYGOPREP non modifiésPhase Taille des pores Volume des

poresSurface


pressions

POLYGOPREP 60 60 Å 0,75 mL/g 350 m2/g 0,45 g/mL 600 barsPOLYGOPREP 100 100 Å 1 mL/g 280 m2/g 0,35 g/mL 400 barsPOLYGOPREP 300 300 Å 0,8 mL/g 100 m2/g 0,45 g/mL 400 barsPOLYGOPREP 1000 1000 Å 0,8 mL/g 35 m2/g 0,45 g/mL 300 bars

Le procédé de modification des silices POLYGOPREP est identique à celui des silices NUCLEOSIL®

Références de commandePhase Endcapped Teneur en car-

boneTaille des

poresTaille des particules

Pqt de 100 g Pqt de 1 kg


POLYGOPREP 60-12 C18 non* 12 % C 60 Å 10–15 µm 711009.100 711009.1000POLYGOPREP 60-20 C18 non* 12 % C 60 Å 15–25 µm 711031.100 711031.1000POLYGOPREP 60-30 C18 non* 12 % C 60 Å 25–40 µm 711480.100 711480.1000POLYGOPREP 60-50 C18 non* 12 % C 60 Å 40–63 µm 711500.100 711500.1000POLYGOPREP 60-80 C18 non* 12 % C 60 Å 63–100 µm 711011.100 711011.1000POLYGOPREP 60-130 C18 non* 12 % C 60 Å 63–200 µm 711590.100 711590.1000POLYGOPREP 100-12 C18 non* 14 % C 100 Å 10–15 µm 711018.100 711018.1000POLYGOPREP 100-20 C18 non* 14 % C 100 Å 15–25 µm 711019.100 711019.1000POLYGOPREP 100-30 C18 non* 14 % C 100 Å 25–40 µm 711032.100 711032.1000POLYGOPREP 100-50 C18 non* 14 % C 100 Å 40–63 µm 711021.100 711021.1000POLYGOPREP 300-12 C18 oui 4 % C 300 Å 10–15 µm 711024.100 711024.1000POLYGOPREP 300-20 C18 oui 4 % C 300 Å 15–25 µm 711025.100 711025.1000POLYGOPREP 300-30 C18 oui 4 % C 300 Å 25–40 µm 711720.100 711720.1000POLYGOPREP 300-50 C18 oui 4 % C 300 Å 40–63 µm 711730.100 711730.1000POLYGOPREP 1000-30 C18 oui ~ 1 % C 1000 Å 25–40 µm 711028.100 711028.1000POLYGOPREP 1000-50 C18 oui ~ 1 % C 1000 Å 40–63 µm 711029.100 711029.1000


POLYGOPREP 60-12 C8 non* 7 % C 60 Å 10–15 µm 711007.100 711007.1000POLYGOPREP 60-20 C8 non* 7 % C 60 Å 15–25 µm 711008.100 711008.1000POLYGOPREP 60-30 C8 non* 7 % C 60 Å 25–40 µm 711470.100 711470.1000POLYGOPREP 60-50 C8 non* 7 % C 60 Å 40–63 µm 711490.100 711490.1000


POLYGOPREP 300-12 C4 oui ~ 1 % C 300 Å 10–15 µm 711022.100 711022.1000POLYGOPREP 300-20 C4 oui ~ 1 % C 300 Å 15–25 µm 711023.100 711023.1000POLYGOPREP 300-30 C4 oui ~ 1 % C 300 Å 25–40 µm 711690.100 711690.1000POLYGOPREP 300-50 C4 oui ~ 1 % C 300 Å 40–63 µm 711700.100 711700.1000POLYGOPREP 1000-30 C4 oui < 1 % C 1000 Å 25–40 µm 711026.100 711026.1000POLYGOPREP 1000-50 C4 oui < 1 % C 1000 Å 40–63 µm 711027.100 711027.1000* Sur demande, avec surcoût ces phases RP POLYGOPREP peuvent être endcapped.

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atographie liquideSilices irrégulières pour la HPLC

Phase Endcapped Teneur en car-bone

Taille des pores

Taille des particules

Pqt de 100 g Pqt de 1 kg

Phases cyano (nitrile) – (CH2)3 – CNPOLYGOPREP 60-12 CN ~ 4.5 % C 60 Å 10–15 µm 711015.100 711015.1000POLYGOPREP 60-20 CN ~ 4.5 % C 60 Å 15–25 µm 711016.100 711016.1000POLYGOPREP 60-30 CN ~ 4.5 % C 60 Å 25–40 µm 711017.100 711017.1000


POLYGOPREP 60-12 NH2 ~ 3 % C 60 Å 10–15 µm 711012.100 711012.1000POLYGOPREP 60-20 NH2 ~ 3 % C 60 Å 15–25 µm 711013.100 711013.1000POLYGOPREP 60-30 NH2 ~ 3 % C 60 Å 25–40 µm 711014.100 711014.1000

Phase Taille des pores Taille des particules Pqt de 100 g Pqt de 1 kg Pqt de 5 kg

Silice POLYGOPREP non modifiée SiOHPOLYGOPREP 60-12 60 Å 10–15 µm 711001.1000 711001.5000POLYGOPREP 60-20 60 Å 15–25 µm 711240.1000 711240.5000POLYGOPREP 60-30 60 Å 25–40 µm 711250.1000 711250.5000POLYGOPREP 60-50 60 Å 40–63 µm 711260.1000 711260.5000POLYGOPREP 60-80 60 Å 63–100 µm 711270.1000 711270.5000POLYGOPREP 60-130 60 Å 63–200 µm 711037.1000 711037.5000POLYGOPREP 100-12 100 Å 10–15 µm 711002.1000 711002.5000POLYGOPREP 100-20 100 Å 15–25 µm 711003.1000 711003.5000POLYGOPREP 100-30 100 Å 25–40 µm 711540.1000 711540.5000POLYGOPREP 100-50 100 Å 40–63 µm 711550.1000 711550.5000POLYGOPREP 100-80 100 Å 63–100 µm 711033.1000 711033.5000POLYGOPREP 100-130 100 Å 63–200 µm 711034.1000 711034.5000POLYGOPREP 300-12 300 Å 10–15 µm 711004.100 711004.1000POLYGOPREP 300-20 300 Å 15–25 µm 711610.100 711610.1000POLYGOPREP 300-30 300 Å 25–40 µm 711620.100 711620.1000POLYGOPREP 300-50 300 Å 40–63 µm 711630.100 711630.1000POLYGOPREP 1000-12 1000 Å 10–15 µm 711035.100 711035.1000POLYGOPREP 1000-20 1000 Å 15–25 µm 711036.100 711036.1000POLYGOPREP 1000-30 1000 Å 25–40 µm 711005.100 711005.1000POLYGOPREP 1000-50 1000 Å 40–63 µm 711006.100 711006.1000

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atographie liquide

Adsorbants pour la chromatographie basse pression

Gels de silice pour la chromatographie à basse pression Silice 60 standard, taille des pores ~ 60 Å ; volume des pores ~ 0,75 mL/g ; surface spécifique BET ~ 500 m2/g

Silice acide hautement poreuse et amorphe se présentant sous forme de particules opalescentes, préparée par la précipitation du silicate de potassium avec l’acide sulfurique

Pour des demandes de performances plus pointues nous recomman-dons nos silices POLYGOPREP irrégulières de haute pureté (voir ci-des-sus).

Gel de silice pour la méthode FIA (« fluorescent indicator adsorption ») pour la détermination de la teneur en différents groupes d’hydro-carbures lors du contrôle des carburants liquides selon les normes DIN 51791 et ASTM D 1319-58T

La méthode FIA permet de déterminer les hydrocarbures saturés, les oléfines et les composés aromatiques séparés par chromatographie sur colonne remplie avec de la silice FIA, en présence d’un mélange de colorants fluorescents.

Références de commandeDesignation Particle size Pqt de 1 kg Pqt de 5 kg Pqt de 25 kgSilice 60, 0,015–0,04 mm – 815650.1 815650.5 815650.25Silice 60, 0,025–0,04 mm – 815300.1 815300.5 815300.25Silice 60, 0,04–0,063 mm 230–400 mesh 815380.1 815380.5 815380.25Silice 60 M, 0,04–0,063 mm 230–400 mesh 815381.1 815381.5 815381.25Silice 60, 0,05–0,1 mm 130–270 mesh 815390.1 815390.5 815390.25Silice 60, 0,05–0,2 mm 70–270 mesh 815320.1 815320.5 815320.25Silice 60, 0,063–0,2 mm 70–230 mesh 815330.1 815330.5 815330.25Silice 60, < 0,063 mm +230 mesh 815400.1 815400.5 815400.25Silice 60, < 0,08 mm +190 mesh 815310.1 815310.5 815310.25Silice 60, 0,1–0,2 mm 70–130 mesh 815340.1 815340.5Silice 60, 0,2–0,5 mm 35–70 mesh 815350.1 815350.5 815350.25Silice 60, 0,5–1,0 mm 18–35 mesh 815360.1 815360.5 815360.25Silice FIA fin 0,071–0,16 mm 815410.1Silice FIA gros 0,071–0,63 mm 815430.1

Oxyde d’aluminium (alumine) Oxydes d’aluminium produits par la deshydratation de différents hydroxydes d’aluminium, ex. hydrargillite entre 400 et 500 °C

Degré d’activité I, taille des particules 50–200 μm, surface spécifique (BET) ~ 130 m2/g

Références de commandeType pH Pqt de 1 kg Pqt de 5 kg Pqt de 25 kgAlumine 90 basique pH 9,5 ± 0,3 815010.1 815010.5 815010.25Alumine 90 neutre pH 7 ± 0,5 815020.1 815020.5 815020.25Alumine 90 acide pH 4 ± 0,3 815030.1 815030.5 815030.25

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atographie liquideAdsorbants pour la chromatographie basse pression

Kieselguhr Acide silicique naturel d’origine fossile et amorphe, il est plus connu sous les noms de diatomite ou terre de diatomée ; purifié pour des applications en chromatographie

Comparé à la silice, le kieselguhr a une petite surface de faible activité → application en chromatographie de partage ; imprégné avec différentes substances (paraffine, huile de silicone, undécane) il peut être uti-lisé pour la chromatographie en phase inverse.

Les différentes qualités de kieselguhr sont fabriquées par Johns-Manville. Elles présentent des granulomé-tries très étroites et homogènes et une haute pureté.

Pour les colonnes remplies avec du kieselguhr voir CHROMABOND® XTR pour l’extraction liquide-liquide, page 56.

Références de commandeDésignation Facteur relatif de

purificationDébit relatif Pqt de 1 kg Pqt de 5 kg

Filter-Cel 100 100 815510.1 815510.5Hyflo Super-Cel 58 534 815530.1 815530.5Celite 503 42 910 815540.1 815540.5Celite 535 35 1269 815550.1 815550.5Celite 545 32 1830 815560.1 815560.5

Florisil® Silicate de magnésium granulaire : MgO 15,5 ± 0,5 % · SiO2 84,0 ± 0,5 % · Na2SO4 ≤ 1,0 % ; 60 / 100 mesh

Applications classiques : préparation d’échantillon (voir le chapitre « Extraction sur phase solide », page 34) ; clean-up de résidus de pesticides, séparation des pesticides chlorés, extraction des stéroïdes, hor-mones sexuelles, antibiotiques, lipides etc.

Références de commandeDescription Taille des particules Pqt de 1 kg Pqt de 5 kgFlorisil® standard 60 / 100 mesh 0,15 / 0,25 mm 815710.1 815710.5

Polyamide Polyamide 6 = ε-aminopolycaprolactam Mécanisme de séparation à base principalement de liaisons hydrogènes

Domaines d’applications : séparation de composés phénoliques (ex. isolement de produits naturels), acides carboxyliques, composés nitroaromatiques

Pour les colonnes SPE remplies avec du polyamide voir CHROMABOND® PA page 34.

Références de commandeDescription Taille des particules Pqt de 1 kgPolyamide CC 6, < 0,07 mm < 0,07 mm 815610.1Polyamide CC 6, 0,05–0,16 mm 0,05–0,16 mm 815620.1Polyamide CC 6, 0,10–0,30 mm 0,10–0,30 mm 815600.1

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atographie liquide

Adsorbants pour la chromatographie basse pression

Cellulose non modifiée Cellulose MN 100 : cellulose fibreuse native, qualité standard Degré moyen de polymérisation 620–680, longueur de fibres (85 %) 20–100 µm, Surface spécifique selon Blaine ~ 6500 cm2/g ; résidu après calcination à 850 °C < 10 000 ppm, < 20 ppm Fe, < 5 ppm Cu, < 7 ppm P, extrait de dichlorométhane < 0,20 %

Cellulose MN 2100 : Cellulose fibreuse native, purifiée (lavée avec différents éluants) Degré moyen de polymérisation 620–680, longueur de fibres (85 %) 20–75 µm, Surface spécifique selon Blaine ~ 5500 cm2/g ; résidu après calcination à 850 °C < 1 000 ppm, < 2 ppm Fe, < 1 ppm Cu, < 2 ppm P, extrait de dichlorométhane < 0,15 %

La cellulose MN 2100ff est une cellulose MN 2100 dégraissée avec un extrait de dichlorométhane < 0,02 %

Références de commandeDésignation Pqt de 1 kg Pqt de 5 kg Pqt de 25 kgCellulose MN 100 815050.1 815050.5 815050.25Cellulose MN 2100 815060.1 815060.5 815060.25Cellulose MN 2100ff (cellulose MN 2100 dégraissée) 815070.1

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Colonnes pour la HPLC / UHPLCftp.mn-net.com/francais/Flyer_Catalogs/Chromatographie/... · 2013-02-27 · NUCLEODUR® · Silice de haute pureté pour la HPLC 110 ... mum de la courbe