12
Hotline 33 (0)4 70 03 73 01 D.18 Purificaon Process Tél 33 (0)4 70 03 88 55 - Hotline 33 (0)4 70 03 73 01 - Fax 33 (0)4 70 03 82 60 D.18 HPLC préparative Les grandeurs fondamentales Si dans le principe chromatographique, le mode analytique ne diffère pas du mode préparatif, les objectifs visés et les facteurs à considérer divergent. Le domaine préparatif doit en plus tenir compte de facteurs déterminant l'intérêt ou la faisabilité du projet : Réaliser une mise au point en mode analytique. Cet essai analytique se fait il en mode phase inverse ou normale, en iso-cratique ou gradient (coût des solvants, capacité de charge selon le mode) ? La sélectivité est elle suffisante ? La rétention est elle assez courte pour permettre une charge maximale en préparative ? Quelle taille de colonne et de granulométrie faut-il choisir pour la colonne préparative? Etre certain que la colonne préparative conduira à des résultats similaires à la colonne analytique. Le solvant utilisé est-il facile à évaporer ? etc. Tous ces facteurs doivent être considérés au cas par cas mais il demeure des grandes lignes directionnelles pour mieux conduire son développement préparatif. La préparative est un compromis entre le débit, le rendement et la pureté Transposition directe des masses injectées : m 2 = m 1 . (r 2 / r 1 ). (L 2 / L 1 ) Analytique Préparative Rayon de la colonne r 1 r 2 Longueur de la colonne L 1 L 2 Masse injectée m 1 m 2 Le but étant de purifier la quantité maximale de produit en un minimum d'injections, on cherchera en réalité à augmenter considérablement la masse m 2 en chargeant la colonne jusqu'à la limite de résolution des impuretés et du produit d'intérêt. On peut imager cet objectif par les tracés ci-contre. Transposition des résolutions : R Sprep = 1 /Dp . L / U . R Sana Analytique Préparative Résolution R Sana R Sprep Diamètre des particules dp ana dp prep Longueur de la colonne l ana l prep Vitesse linéaire de la colonne u ana u prep Masse injectée m 1 m 2 L : l prep / l ana , U : u prep / u ana , Dp : dp prep / dp ana Si la surcharge en concentration est en général préférable à la surcharge en volume, cette dernière reste plus simple à mettre en oeuvre. Il faut toutefois tenir compte de la solubilité limite des analytes dans le solvant choisi. Le tableau ci-dessous donne une idée très générale des grandeurs que l'on peut atteindre en chromatographie préparative. Ces indications ne sont toutefois pas exhaustives. Selon les composés, la résolution de la colonne et les conditions opératoires, les charges indiquées peuvent s'avérer plus faibles ou plus importantes. Diamètre colonne Débit standard Charge pour Charge pour sélectivité > 1,5 sélectivité proche 1,2 Correspondances entre diamètres, débits et charges 4,6 mm 1 ml/min 3 à 20 mg 0,5 à 3 mg 10 mm 5 ml/min 20 à 100 mg 5 à 20 mg 21,2 mm 20 ml/min 100 à 400 mg 30 à 100 mg 30 mm 40 ml/min 150 à 1000 mg 50 à 150 mg 50 mm 120 ml/min 500 à 2500 mg 100 à 500 mg Injections théoriques de quantités croissantes sur une même colonne La capacité de charge d'un adsorbant est directement lièe à ces paramètres : • La quantité de sites actifs • La surface spécifique • La porosité • La distribution de cette taille de pores Un résumé succint se présenterait comme suit : Analytique Préparative Diamètres des colonnes ≤ 4,6 mm > 4,6 mm Débits ≤ 1 ml/min > 4 ml/min But Identifier et quantifier Collecter, purifier et isoler Facteur important Coût final du produit Type m 1 > m 2 > m 3

HPLC préparative 33 (0)4 70 03 73 01 · email. [email protected] - e-mail [email protected] D.19 D.19 Purification Process HPLC préparative Les grandeurs fondamentales

  • Upload
    hatuong

  • View
    213

  • Download
    0

Embed Size (px)

Citation preview

Page 1: HPLC préparative 33 (0)4 70 03 73 01 · email. interfine@interchim.fr - e-mail interfine@interchim.fr D.19 D.19 Purification Process HPLC préparative Les grandeurs fondamentales

Hotline 33 (0)4 70 03 73 01

D.18

Purifi

catio

n Pr

oces

s

Tél 33 (0)4 70 03 88 55 - Hotline 33 (0)4 70 03 73 01 - Fax 33 (0)4 70 03 82 60

D.18

HPLC préparativeLes grandeurs fondamentales

Si dans le principe chromatographique, le mode analytique ne diffère pas du mode préparatif, les objectifs visés et les facteurs à considérer divergent.

Le domaine préparatif doit en plus tenir compte de facteurs déterminant l'intérêt ou la faisabilité du projet :Réaliser une mise au point en mode analytique.Cet essai analytique se fait il en mode phase inverse ou normale, en iso-cratique ou gradient (coût des solvants, capacité de charge selon le mode) ?La sélectivité est elle suffisante ?La rétention est elle assez courte pour permettre une charge maximale en préparative ?Quelle taille de colonne et de granulométrie faut-il choisir pour la colonne préparative?Etre certain que la colonne préparative conduira à des résultats similaires à la colonne analytique.Le solvant utilisé est-il facile à évaporer ? etc.

Tous ces facteurs doivent être considérés au cas par cas mais il demeure des grandes lignes directionnelles pour mieux conduire son développement préparatif.

La préparative est un compromis entre le débit, le rendement et la puretéTransposition directe des masses injectées : m2 = m1 . (r2 / r1). (L2 / L1)

Analytique PréparativeRayon de la colonne r1 r2Longueur de la colonne L1 L2Masse injectée m1 m2

Le but étant de purifier la quantité maximale de produit en un minimum d'injections, on cherchera en réalité à augmenter considérablement la masse m2 en chargeant la colonne jusqu'à la limite de résolution des impuretés et du produit d'intérêt. On peut imager cet objectif par les tracés ci-contre.

Transposition des résolutions : RSprep = 1 /√Dp . L / U . RSana

Analytique PréparativeRésolution RSana RSprepDiamètre des particules dpana dpprepLongueur de la colonne lana lprep Vitesse linéaire de la colonne uana uprepMasse injectée m1 m2

L : lprep / lana , U : uprep / uana, Dp : dpprep / dpana

Si la surcharge en concentration est en général préférable à la surcharge en volume, cette dernière reste plus simple à mettre en oeuvre. Il faut toutefois tenir compte de la solubilité limite des analytes dans le solvant choisi.Le tableau ci-dessous donne une idée très générale des grandeurs que l'on peut atteindre en chromatographie préparative. Ces indications ne sont toutefois pas exhaustives. Selon les composés, la résolution de la colonne et les conditions opératoires, les charges indiquées peuvent s'avérer plus faibles ou plus importantes.

Diamètre colonne Débit standard Charge pour Charge pour sélectivité > 1,5 sélectivité proche 1,2 Correspondances entre diamètres, débits et charges 4,6 mm 1 ml/min 3 à 20 mg 0,5 à 3 mg10 mm 5 ml/min 20 à 100 mg 5 à 20 mg21,2 mm 20 ml/min 100 à 400 mg 30 à 100 mg30 mm 40 ml/min 150 à 1000 mg 50 à 150 mg50 mm 120 ml/min 500 à 2500 mg 100 à 500 mg

Injections théoriques de quantités croissantes sur une même colonne

La capacité de charge d'un adsorbant est directement lièe à ces paramètres :• La quantité de sites actifs• La surface spécifique• La porosité• La distribution de cette taille de pores

Un résumé succint se présenterait comme suit :

Analytique PréparativeDiamètres des colonnes ≤ 4,6 mm > 4,6 mmDébits ≤ 1 ml/min > 4 ml/minBut Identifier et quantifier Collecter, purifier et isolerFacteur important Coût final du produit

Type m1 > m2 > m3

Page 2: HPLC préparative 33 (0)4 70 03 73 01 · email. interfine@interchim.fr - e-mail interfine@interchim.fr D.19 D.19 Purification Process HPLC préparative Les grandeurs fondamentales

email. [email protected] - www.interchim.com

[email protected]

D.19

D.19

Purification ProcessHPLC préparativeLes grandeurs fondamentales

HPLC préparativeColonne prep Interchrom

Modulo-cart Prep,Purification HPLC du mg au g.

Les Modulo-cart Prep sont disponibles en standard en quatre diamètres internes 10,0 - 21,2 - 28,0 et 50,0 mm et des longueurs de 50 et 250 mm pour une gamme de purification du mg au g.

Qualité des tubesLe Ra, valeur de surfaçage des tubes, a une importance critique en chromatographie préparative. Mesuré électroniquement ou optiquement, il représente la différence entre les pics et les vallées des surfaces de tube. Plus le Ra est faible, plus la surface est lisse. Les frottements contre la surface du tube conduisent la phase mobile à se déplacer plutôt en régime laminaire. Les molécules au centre du flot se déplacent plus rapidement que celles plus proche des bords du tube. C'est une des raisons majeures de l'élargissement des pics et d'une faible efficacité. Pour minimiser cet effet de bord, le processus de finition de fabrication des Modulo-cart Prep est une des clef de leur très haute qualité. Il permet d'obtenir une surface de tube extrêmement lisse (leur Ra typique est de 8 µinch), réduisant considérablement les effets de bords et augmentant ainsi l'efficacité des Modulo-cart Prep.

Les Modulo-cart Prep supportent des pressions de remplissage jusqu'à 550 bar, ce qui contribue fortement à une bonne stabilité et durée de vie.

Dispersion de l'échantillonLa capacité de charge est un élément important de l'HPLC préparative. Quelle quantité d'échantillon pouvons-nous injecter sur la colonne ? Surcharger la colonne ne conduit pas à l'obtention de fraction pure comme le ferait une colonne correctement chargée. Plusieurs facteurs peuvent affecter la capacité de charge : les dimensions de la colonne et la surface spécifique de la phase stationnaire employée. Un autre facteur affectant cette capacité est la façon dont est introduit l'échantillon sur la tête de la colonne. L'échantillon entre dans la colonne en un spot qui a la dimension du diamètre interne du capillaire 1/16 de connexion. Si l'échantillon n'est pas dispersé également à travers la tête du lit de phase, des régions de surcharge se créent quand d'autres sont en sous-charge. Par exemple, si l'on utilise une colonne de 50 mm i.d. et un capillaire de connexion de 500 µm de diamètre interne sans répartiteur, alors l'échantillon sera focalisé sur uniquement 0,01% de la surface de la tête de colonne. C'est évidemment une perte énorme en capacité. Sans compter que la tête de colonne s'encrasse prématurément au niveau de la zone d'arrivée de l'échantillon, ce qui va réduire la durée de vie de la colonne. Pour prévenir ce problème, les Modulo-cart Prep sont équipés de répartiteurs dont le design maximise la dispersion du volume et de la masse de l'échantillon injecté sur toute la surface de la tête de colonne.

Phase stationnaireNotre technologie de silice nous permet d’obtenir des particules de silice de 10 et 15 µm extrêmement stable mécaniquement. La surface de 425 m2/g d’Uptisphere® Strategy™ garantit une densité de greffage importante et conduit à des capacités de charge élevées.

Phase stationnaire disponible en Modulo-cart Prep :Nous avons sélectionné plusieurs supports en 10 et 15 µm qui nous semblent les plus adaptés à la chromatographie préparative :

Uptisphere® Strategy™ C18-3 Uptisphere® Strategy™ C18-2 Uptisphere® Strategy™ RP Uptisphere® Strategy™ SI puriFlash® C18HQ puriFlash® C18HC

Pour construire votre référence : voir chapitre "Purification Process"

Kit de transposition de méthode analytique /préparative

Ce kit est constitué de la colonne prépara-tive que vous souhaitez et d'une colonne analytique de même longueur et de diamètre interne 4,6 mm remplie avec le même lot de phase que votre colonne préparative. Ce kit est créé sur demande, contactez nous : 04 70 03 73 09 ou [email protected]

Page 3: HPLC préparative 33 (0)4 70 03 73 01 · email. interfine@interchim.fr - e-mail interfine@interchim.fr D.19 D.19 Purification Process HPLC préparative Les grandeurs fondamentales

Hotline 33 (0)4 70 03 73 01

D.20

Purifi

catio

n Pr

oces

s

Tél 33 (0)4 70 03 88 55 - Hotline 33 (0)4 70 03 73 01 - Fax 33 (0)4 70 03 82 60

D.20

HPLC préparativeColonnes prep Interchrom

Phase stationnaireLa technologies Upti-prep permet d’obtenir des particules de silice de 3 et 5 µm pour l’analytique mais aussi des particules de 10 et 15 µm pour la chromatographie préparative. Ces particules ont une excellente résistance mécanique. La surface spécifique de la silice Uptisphere® Strategy™ est de 425 m2/g. Les lots de silice sont parfaitement reproductibles, de même que les lots de silice greffés.

Uptisphere® Strategy™ 100 ÅDiamètre interne Longueur Granulométrie C18-3 C18-2 RP Silice10mm 50mm 5µm US5C183-050/100 US5C182-050/100 US5RP-050/100 US5SI-050/100

150mm 5µm US5C183-150/100 US5C182-150/100 US5RP-150/100 US5SI-150/100250mm 5µm US5C183-250/100 US5C182-250/100 US5RP-250/100 US5SI-250/100

21,2mm 50mm 10µm US10C183-050/212 US10C182-050/212 US10RP-050/212 US10SI-050/212150mm 10µm US10C183-150/212 US10C182-150/212 US10RP-150/212 US10SI-150/212250mm 10µm US10C183-250/212 US10C182-250/212 US10RP-250/212 US10SI-250/21250mm 15µm US15C183-050/212 US15C182-050/212 US15RP-050/212 US15SI-050/212

150mm 15µm US15C183-150/212 US15C182-150/212 US15RP-150/212 US15SI-150/212250mm 15µm US15C183-250/212 US15C182-250/212 US15RP-250/212 US15SI-250/212

30mm 50mm 10µm US10C183-050/300 US10C182-050/300 US10RP-050/300 US10SI-050/300150mm 10µm US10C183-150/300 US10C182-150/300 US10RP-150/300 US10SI-150/300250mm 10µm US10C183-250/300 US10C182-250/300 US10RP-250/300 US10SI-250/30050mm 15µm US15C183-050/300 US15C182-050/300 US15RP-050/300 US15SI-050/300

150mm 15µm US15C183-150/300 US15C182-150/300 US15RP-150/300 US15SI-150/300250mm 15µm US15C183-250/300 US15C182-250/300 US15RP-250/300 US15SI-250/300

50mm 50mm 10µm US10C183-050/500 US10C182-050/500 US10RP-050/500 US10SI-050/500150mm 10µm US10C183-150/500 US10C182-150/500 US10RP-150/500 US10SI-150/500250mm 10µm US10C183-250/500 US10C182-250/500 US10RP-250/500 US10SI-250/50050mm 15µm US15C183-050/500 US15C182-050/500 US15RP-050/500 US15SI-050/500

150mm 15µm US15C183-150/500 US15C182-150/500 US15RP-150/500 US15SI-150/500250mm 15µm US15C183-250/500 US15C182-250/500 US15RP-250/500 US15SI-250/500

Kit de transposition de méthode analytique à préparativeCe kit est constitué de la colonne préparative que vous souhaitez et d’une colonne analytique de même longueur et de diamètre interne 4,6 mm remplie avec le même lot de phase que votre colonne préparative.

Ce kit est créé sur demande, contactez nous : 04 70 03 73 09 ou [email protected]

Page 4: HPLC préparative 33 (0)4 70 03 73 01 · email. interfine@interchim.fr - e-mail interfine@interchim.fr D.19 D.19 Purification Process HPLC préparative Les grandeurs fondamentales

email. [email protected] - www.interchim.com

[email protected]

D.21

D.21

Purification ProcessHPLC préparative

Silices préparatives Interchim

Silice préparatives InterchimInterchim propose une gamme de silices spécialement dédiées à la chromatographie préparative. Les silices Upti-prep Strategy, sphériques et ultrapures, garantissent une efficacité et une reproductibilité élevées gràce à une coupe granulométrique très serrée. La silice PuriFlash 15µm représente une alternative de bonne qualité pour les système de remplissage autonome ou les colonnes préparatives de laboratoire économiques.

Strategy™ Surface spécifique : 425 m2/g Porosité : 100 A Greffage C18-3 : 22% carbone Greffage C18-2 : 19% carbone Greffage RP : 16% carbone

PuriFlash® HQ Surface spécifique : 400 m2/g Porosité : 100 A Greffage C18 HQ : 20% carbone

Nom Granulométrie C18-3 C18-2 RP SiliceStrategy™ 10µm US100-10C18-3 US100-10C18-2 US100-10RP US100-10SIStrategy™ 15µm US100-15C18-3 US100-15C18-2 US100-15RP US100-15SI

C18 HQPuriFlash® 15µm PF-15C18HQ

Chaque lot de silice Strategy™ (conditionnement minimum 100g) est livré avec son certificat d'analyse précisant sa granulométrie exacte, sa porosité, sa surface spécifique et son pour-centage de carbone.

Silices Flash et SPE InterchimLes silices PuriFlash® de structure sphéroïde sont caractérisées par un excellent rapport qualité prix. De nombreuses porosités, granulométries et chimies de greffage sont disponibles. Elles sont particulièrement adaptées à la chromatographie basse pression.

Deux types sont disponibles :

PuriFlash® HC : 60 A, 680 m2/g, 20% carbone PuriFlash® HP : 60 A, 500m2/g, 21% carbone

Pour un coût encore moindre, les silices PuriFlash® IR se présentent comme le matériau idéal pour la chromatographie Flash sur colonne ouverte.

PuriFlash® IR : 60 A, 450 m2/g, 20% carbone

Nom Granulométrie C18 HC Silice HC C18 HP Silice HPPuriFlash 25µm PF-25C18HC PF-25SIHCPuriFlash 30µm PF-30C18HP PF-30SIHPPuriFlash 50µm PF-50C18HC PF-50SIHC PF-50C18HP PF-50SIHP

C18 SilicePuriFlash IR 50µm IR-50C18 IR-50SI

Page 5: HPLC préparative 33 (0)4 70 03 73 01 · email. interfine@interchim.fr - e-mail interfine@interchim.fr D.19 D.19 Purification Process HPLC préparative Les grandeurs fondamentales

Hotline 33 (0)4 70 03 73 01

D.22

Purifi

catio

n Pr

oces

s

Tél 33 (0)4 70 03 88 55 - Hotline 33 (0)4 70 03 73 01 - Fax 33 (0)4 70 03 82 60

D.22

HPLC préparativeColonnes et silices Agilent Prep LC

La purification des échantillons représente un point crucial dans le développement d'un médicament. La colonne préparative doit fournir performance et flexibilité pour correspondre aux besoins les plus larges des utilisateurs. Les colonnes Agilent Prep LC répondent à ces besoins par leur capacité de charge et par la facilité de transfert de l'analytique à la préparative. Elles assurent la purification des drogues recherchées du milligramme à plusieurs grammes.

Haute capacité de chargeC18 stable aux 2< pH <10

Spécifications de la phase Zorbax Prep

Phase Porosité Surface spécifique Temp limite pH Carbone End capping

C18 100 Å 400 m2/g 60 °C 2 à 10 24 % ouiSilice 100 Å 400 m2/g 60 °C 1 à 8

Le greffage unique C18 autorise une séparation de très haute pureté avec des composés à caractère basique, grâce à une forme de pic remarquable.

Les colonnes Agilent Prep C18 montrent une grande facilité de passage de l'échelle analytique aux différentes tailles préparatives.

Les colonnes Agilent Prep C18 montrent une grande facilité de passage de l'échelle analytique aux différentes tailles préparatives

ID Flow Rate ID Flow Rate

4.6mm 0.7 mL/min

21.2 mm 14.87 mL/min

30.0 mm 29.77 mL/min

50.8 mm 85.37 mL/min

2 µL

42.4 µL

170 µL

488 µL

α = 1.6

Agilent Prep C18 Scalability - Steroids

Echantillon : 1. Uracil2. Hydrocortisone3. Testosterone (in MeOH @ 1 mg/mL)

Le greffage unique C18 autorise une séparation de très haute pureté avec des composés à caractère basique, grâce à une forme de pic remarquable

Colonne : 4.6 x 150 mm, 5µmPhase mobile : 50% 0.1%TFA: 50% ACNDébit : 1mL/minVolume d'injection : 10µLEchantillon : Doxepin/Amitriptyline 0.5 - 50 mg/mL

Agilent Prep C18

Conditions : Système : Système de purification Agilent 1100 Colonne : 10µmPhase mobile : 55% Water : 45% ACNTempérature : Room Temp.Détection : UV 240 nm

Page 6: HPLC préparative 33 (0)4 70 03 73 01 · email. interfine@interchim.fr - e-mail interfine@interchim.fr D.19 D.19 Purification Process HPLC préparative Les grandeurs fondamentales

email. [email protected] - www.interchim.com

[email protected]

D.23

D.23

Purification ProcessHPLC préparative

Colonnes et silices Agilent Prep LC

Colonnes et silices Agilent Prep LC

Colonnes Agilent Prep LC

Description Granulométrie SI C18Colonnes analytique Prep LC 250 x 4,6 mm 5 µm 440905-901 440905-902150 x 4,6 mm 5 µm 443905-901 443905-902100 x 4,6 mm 5 µm 449905-901 449905-90250 x 4,6 mm 5 µm 446905-901 446905-902

Cartouches préparatives Prep HT (raccords indispensables)250 x 21,2 mm 10 µm 410910-101 410910-102150 x 21,2 mm 10 µm 413910-101 413910-102150 x 21,2 mm 5 µm 443905-101 443905-102100 x 21,2 mm 5 µm 449905-101 449905-10250 x 21,2 mm 5 µm 446905-101 446905-102Cart de garde 10 x 21,2 mm 10 µm 420212-901 420212-902Kit montage cart de garde 820444-901 820444-901Raccords pour col 21,2 mm 820400-901 820400-901

Colonnes préparatives Prep LC250 x 30 mm 10 µm 410910-301 410910-302150 x 30 mm 10 µm 413910-301 413910-302100 x 30 mm 10 µm 419910-301 419910-302100 x 30 mm 5 µm 449905-301 449905-30250 x 30 mm 5 µm 446905-301 446905-302250 x 50 mm 10 µm 410910-501 410910-502150 x 50 mm 10 µm 413910-501 413910-502100 x 50 mm 10 µm 419910-501 419910-502100 x 50 mm 5 µm 449905-501 449905-50250 x 50 mm 5 µm 446905-501 446905-502Kit montage cart de garde 420420-901 420420-901

Silices Agilent Prep LCDescription Granulométrie SI C18

1 kg bulk 10 µm 420910-901 420910-902

La silice est aussi disponible en vrac pour vos systèmes de remplissage autonomes.

Page 7: HPLC préparative 33 (0)4 70 03 73 01 · email. interfine@interchim.fr - e-mail interfine@interchim.fr D.19 D.19 Purification Process HPLC préparative Les grandeurs fondamentales

Hotline 33 (0)4 70 03 73 01

D.24

Purifi

catio

n Pr

oces

s

Tél 33 (0)4 70 03 88 55 - Hotline 33 (0)4 70 03 73 01 - Fax 33 (0)4 70 03 82 60

D.24

HPLC préparativeColonnes préparatives Inertsil Série 3, 2 & Econo Prep

Colonnes préparatives Inertsil série 3La plupart des silices Inertsil série 3 sont aussi disponibles en colonnes préparatives. Elles garantissent un transfert d'échelle sans problème.

Silice Ultra-pure à 99,999 %Haute inertieExcellente reproductibilité

Description Granulométrie ODS-3 C8-3 PH-3 CN-3 Sil 100 Å

Colonnes analytiques250 x 20mm 6 µm 5020-06822 5020-84966 5020-85166 5020-85366 5020-84366250 x 30mm 6 µm 5020-06832 5020-84976 5020-85176 5020-85376 5020-84376250 x 50mm 8 µm 5020-06852 5020-84986 5020-85186 5020-85386 5020-8438650 x 20mm 6 µm 5020-07014 5020-84962 5020-85162 5020-85362 5020-8436250 x 30mm 8 µm 5020-07015 5020-84972 5020-85172 5020-85372 5020-372

Colonnes de garde 50 x 20 mm 6 µm 5020-06821 5020-84967 5020-85167 5020-85367 5020-8436750 x 30 mm 6 µm 5020-06831 5020-84977 5020-85177 5020-85377 5020-84377

Colonnes préparatives Inertsil série 2Les silices Inertsil série 2 sont elles aussi déclinées en colonnes préparatives + colonnes de garde.

Description Granulométrie ODS-2 C8 C4

250 x 20mm 5 µm 5020-15342 5020-15642 5020-15645

50 x 20 mm 5 µm 5020-15632 5020-15633 5020-15635

Description Granulométrie PH Sil 150 Å

250 x 20mm 5 µm 5020-15644 5020-15641

50 x 20 mm 5 µm 5020-15634 5020-15631

Colonnes préparatives Inertsil Econo PrepPour des formats de colonne importants la silice Econo Prep offre performance et économie. Cet adsorbant de granulométrie 40 µm et de porosité 80 Å est proposé en silice nue ou greffée C18. Description Granulométrie ODS Sil

100 x 100 mm 40 µm 5020-36081 5020-36181500 x 50 mm 40 µm 5020-36055 5020-36155500 x 100 mm 40 µm 5020-36085 5020-36185

Page 8: HPLC préparative 33 (0)4 70 03 73 01 · email. interfine@interchim.fr - e-mail interfine@interchim.fr D.19 D.19 Purification Process HPLC préparative Les grandeurs fondamentales

email. [email protected] - www.interchim.com

[email protected]

D.25

D.25

Purification Process

Le choix d'une colonne préparative se fait d'abord en déterminant sur une colonne analytique la méthode et l'adsorbant les plus adaptés. Il faut ensuite que l'adsorbant et la taille de la colonne préparative correspondent aux critères de capacité de charge et de rapidité de séparation. Pour répondre à ces demandes, YMC propose une grande variété d'adsorbants différents aussi bien en granulométrie qu'en sélectivité.

Très large choix d'adsorbants

Comment trouver la colonne appropriée

Comment passer à l'échelle supérieure

HPLC préparativeColonnes YMC pour la préparative

Vérifier que votre machine est configurée pour la préparative :

• Diamètre des tubulures• Volume de la cellule de détection• Débit maxi de la pompe

Page 9: HPLC préparative 33 (0)4 70 03 73 01 · email. interfine@interchim.fr - e-mail interfine@interchim.fr D.19 D.19 Purification Process HPLC préparative Les grandeurs fondamentales

Hotline 33 (0)4 70 03 73 01

D.26

Purifi

catio

n Pr

oces

s

Tél 33 (0)4 70 03 88 55 - Hotline 33 (0)4 70 03 73 01 - Fax 33 (0)4 70 03 82 60

D.26

HPLC préparativeColonnes YMC pour la préparative

Exemple de transfert analytique-préparative

Description Granulométrie µm Pro C18 120A Pack Sil 60A ODS-A 120A Pack C4 120A Pack CN 120A

250 x 50 mm * 15 SL06S162551DR AA12S162551DR BU12S162551DR CN12S162551DR250 x 30 mm 15 SL06S162530 AA12S162530 BU12S162530 CN12S162530250 x 50 mm * 10 AS12S112551DR SL06S112551DR AA12S112551DR BU12S112551DR CN12S112551DR250 x 30 mm 10 AS12S112530 SL06S112530 AA12S112530 BU12S112530 CN12S112530150 x 30 mm 10 AS12S111530 SL06S111530250 x 20 mm 10 AS12S112520 SL06S112520 AA12S112520 BU12S112520 CN12S112520150 x 20 mm 10 AS12S111520 SL06S111520 AA12S111520 BU12S111520 CN12S111520100 x 20 mm 10 AS12S111020 SL06S111020250 x 50 mm * 5 SL06S052552DR AA12S052552DR BU12S052552DR CN12S052552DR250 x 30 mm 5 AS12S052530 SL06S052530 AA12S052530 BU12S052530 CN12S052530150 x 30 mm 5 AS12S051530 SL06S051530 AA12S051530 BU12S051530 CN12S051530100 x 30 mm 5 AS12S051030 SL06S051030 AA12S051030 BU12S051030 CN12S051030250 x 20 mm 5 AS12S052520 SL06S052520 AA12S052520 BU12S052520 CN12S052520150 x 20 mm 5 AS12S051520 SL06S051520 AA12S051520 BU12S051520 CN12S051520100 x 20 mm 5 AS12S051020 SL06S051020 AA12S051020 BU12S051020 CN12S051020100 x 20 mm 3 AS12S03102050 x 20 mm 3 AS12S030520

Cartouche de garde 10 x 20 mm # 5 AS12S050120FC SL06S050120FC AA12S050120FC BU12S050120FC10 x 30 mm # 5 AS12S050130FC SL06S050130FC AA12S050130FC BU12S050130FC CN12S050130FC

Support de cartouche 20 mm id XPGCE20 XPGCE20 XPGCE20 XPGCE20 XPGCE2030 mm id XPGCE30 XPGCE30 XPGCE30 XPGCE30 XPGCE30

Colonne de garde 50 x 50 mm * 15 SL06S160551DR AA12S160551DR BU12S160551DR50 x 50 mm * 10 AS12S110551DR SL06S110551DR AA12S110551DR BU12S110551DR50 x 50 mm * 5 SL06S050552DR AA12S050552DR BU12S050552DR* colonnes équipées de connexions 1/8". # Support de cartouche indispensable.

Page 10: HPLC préparative 33 (0)4 70 03 73 01 · email. interfine@interchim.fr - e-mail interfine@interchim.fr D.19 D.19 Purification Process HPLC préparative Les grandeurs fondamentales

email. [email protected] - www.interchim.com

[email protected]

D.27

D.27

Purification ProcessHPLC préparative

Silices YMC pour la préparative

YMC propose en bulk la majeure partie de ses silices. Depuis 25 ans, sa réputation n'est plus à faire en matière de qualité et de reproductibilité pour ses phases stationnaires. Tout au long de la fabrication, des contrôles rigoureux de la pureté, de la taille des particules, de la porosité, et du greffage sont mis en oeuvre.Depuis l'inauguration de son nouveau site en 2004, YMC est capable de produire des lots de 200kg de silice greffée. La capacité annuelle totale atteint plusieurs tonnes.

Phases stationnaires pour la préparativeDésignation Code Phase Pore size Particule size Carbon load pH Applications

(silica unless noted) (nm) (µm spherical) (%C)Pro C18 AS latest génération C18 using ultrapure 12 3,5, 10 16 2-8 pharmaceuticals, vitamins, amino adids,

silica base (99.999%), with very low peptides, PTC-amino acids, basicresidual non-specifsc interactions compounds, général purpose phase

ODS-A AA one of YMC’s international bestsellers, 12 3, 5, 10, 15, 20, 50 17 2-7 pharmaceuticals, vitamins, amino acids, traditional high perfomance C18 column 20 5, 10, 15 12 peptides, PTC-amino acids, général

30 5, 10, 15 7 purpose phaseODS-AQ AQ "hydrophilic" endcapping, for 100% 12 3, 5, 10, 15, 20, 50 14 2-7 strongly polar compounds. pharma-

aqueous eluent systems, substantially 20 5, 15 10 ceuticals, antibiotics, peptides and increased rétention of polar compounds proteins, nucleic acids

Polymer C18 PC polymethacrylate-matrix, stable towards - 6, 10, 50 C18 = 10% 2-13 phenols, anilines, peptides in high pH, shrinking and swelling, wide pH applicability

pharmaceuticals, quarternary aminés

C8 (Octyl) OC traditional C8, high coverage monomeric 12 20 30 3, 5, 10, 15 10 2-7 proteins and peptides, estrogens, bonding chemistry 5, 10 7 général purpose phase

5 4YMCbasfc BA specifically designed for the separation proprietary 3,6,10,15,20 7 2-7 basic molecules w/o modifiers,

of basic compounds anilines, alkaloids, antidepressantsPhenyl PH monomeric bonded phenyl 12 30 3, 5, 15 5 9 3 2-7 phenols, fullerenes, sweeteners

C4 (Butyl) BU traditional G4, high coverage 12 3, 5, 10 7 2-7 biological separations, polar compoundsmonomeric bonding chemistry 20 5, 10, 15 5

30 5, 10, 15 3C1 (TMS) TM trimethyl silane. excellent hydrolytic 12 3, 5, 10 5 4 2 2-7 water soluble vitamins

stability 30Chiral CD ST ST cydodextrin based stationary phase 12 10, 20, 50 - 2-7 chiral separations, structural isomeres

for chiral compoundsChiral CD PM PM phenyl modified cyclodextrin based 12 10, 20, 50 - 2-7 chiral separations, structural isomères

phase with different selectivity compared to ST

Amino1;3 NH primary amino derivative. high 12 5, 10 3 2-7 saccharides, nucleotides, water coverage monomeric bonding chemistry soluble vitamins

Cyano1;3 CN traditional cyano derivative, useful also 12 3, 5, 10, 15 7 2-7 proteins, steroids, catechols, for for SFC applications 30 5 3 SFC applications

Diol1;3 DN for aqueous G PC or normal phase 6 5 - 2-7 polar natural, products, pharmaceuticalsapplications, high recovery for 12 5, 10, 15 biological material 20 5, 15

30 5Silica2;3 SL ultra high purity, high mechanical stability 6 5, 10,15,30 - n.a. small organic molécules, fat

12 3, 5, 10, 15, 20, 50 soluble vitamins, tocopherols20 5, 10, 15 30 5, 10, 15 100 10, 50

Colonnes YMC préparativesGranulométrie Porosité Sil ODS-A C4 CN10 µm 120 Å SL12S11 AA12S11 BU12S11 CN12S1115 µm 120 Å SL12S16 AA12S16 BU12S16 CN12S1620 µm 120 Å SL12S21 AA12S21 BU12S2150 µm 120 Å SL12S50 AA12S5010 µm 300 Å SL30S11 AA30S11 BU30S1115 µm 300 Å SL30S16 AA30S16 BU30S1620 µm 300 Å SL30S21 AA30S21 BU30S21

YMCpour toute demande de prix, de sélectivités ou de granulométries différentesNous contacter au 04 70 03 73 09 [email protected]

Page 11: HPLC préparative 33 (0)4 70 03 73 01 · email. interfine@interchim.fr - e-mail interfine@interchim.fr D.19 D.19 Purification Process HPLC préparative Les grandeurs fondamentales

Hotline 33 (0)4 70 03 73 01

D.28

Purifi

catio

n Pr

oces

s

Tél 33 (0)4 70 03 88 55 - Hotline 33 (0)4 70 03 73 01 - Fax 33 (0)4 70 03 82 60

D.28

HPLC préparativeSilice ZEOprep

La société Zeochem est un fabricant important de silices irrégulières connues sous l'appellation C-Gel depuis 1939. Aujourd'hui, son offre se renouvelle grâce aux silices ZEOprep spécialement adaptées à la chromatographie préparative.

Silices pour la préparativeProcédés contrôlés de la synthèse de la silice jusqu'au greffage

La maîtrise des procédés conduit à la réalisation de silices de grande qualité et reproductibilité. La technologie employée permet de synthétiser une silice irrégulière moins abrasive de par sa forme, contenant moins de fines, minimisant la contrepression et les passages préférentiels. Plus de 90% des particules correspondent aux limites de la coupe granulométrique indiquée.

Silices Zeoprep

Caractéristiques ZEOprep 40 ZEOprep 60 ZEOprep 90 ZEOprep 110 ZEOprep 300

Porosité 40 Å 60 Å 90 Å 110 Å 300 Å Surface spécifique 600 m2/g 500 m2/g 400 m2/g 360 m2/g 90 m2/gVolume poreux 0,6 ml/g 0,8 ml/g 0,9 ml/g 1 ml/g 0,7 ml/gHydratation 2 à 4 %Granulométries disponibles 15/25 µm, 25/40µm, 40/63µm, 60/200 µm, 200/500 µm

ZEOCHEM procède aussi au greffage de ses propres silices. Toutes les silices vierges produites sont modifiables chimiquement indépendamment de leur porosité ou taille de particule. La clé du succès de ZEOCHEM réside dans la maîtrise de toutes les étapes de la fabrication, de la synthèse de la silice à la technologie de greffage.

La longue expérience de ZEOCHEM et sa capacité à produire des lots de quantité importante (170 kg/lot) lui donne une position unique pour répondre aux exigences de ses clients.

Caractéristiques ZEOprep ZEOprep ZEOprep ZEOprep ZEOprep ZEOprep 60 C18 60 C8 90 C18 90 NH2 90 CN 90 C8

Taux de carbone 19,5 % 13,5 % 18,5 % 5,6 % 7 % 11 %Taux de couverture 2,3 µmol/g 2,9 µmol/g 2,6 µmol/g 2 µmol/g 2,3 µmol/g 2,8 µmol/gTeneur Na/Ca/Fe/Pb ppm 50/50/5/ <1Granulométries disponibles 15/25 µm 40/63 µm 60/200 µm

Adsorbants Zeochem

Type Nature Greffon Porosité Surface 15/25µm 35/70µm 40/63µm 60/200µmZEOprep 40 silice irrégulière aucun 40 Å 600 m2/g 3200500.610 3200500.620 3200500.630 3200500.650ZEOprep 60 silice irrégulière aucun 60 Å 500 m2/g 3200100.610 3200100.620 3200100.630 3200100.650ZEOprep 90 silice irrégulière aucun 90 Å 400 m2/g 3200300.610 3200300.620 3200300.630 3200300.650ZEOprep 60 silice irrégulière C18 60 Å 500 m2/g 3201000.610 ND 3201000.630 3201000.650ZEOprep 90 silice irrégulière C18 90 Å 400 m2/g 3201100.610 ND 3201100.630 3201100.650ZEOprep 90 silice irrégulière C8 90 Å 400 m2/g 3201110.610 ND 3201110.630 NDZEOprep 90 silice irrégulière amino 90 Å 400 m2/g 3201130.610 ND 3201130.630 NDZEOprep 90 silice irrégulière cyano 90 Å 400 m2/g 3201140.610 ND 3201140.630 ND

La reproductibilité de lot à lot de ZEOprep est remarquable. Elle en fait le matériau de choix pour le process et la flash chromatographie.

Autres phases disponibles sur demande.

Page 12: HPLC préparative 33 (0)4 70 03 73 01 · email. interfine@interchim.fr - e-mail interfine@interchim.fr D.19 D.19 Purification Process HPLC préparative Les grandeurs fondamentales

email. [email protected] - www.interchim.com

[email protected]

D.29

D.29

Purification ProcessHPLC préparative

ZEOprep

Silice ZEOprep ECO

ZEOprep ECO présente un rapport qualité prix imbattable. Il est une alternative directe aux silices les plus vendues sur le marché de la chromatographie basse pression et Flash.

Silice ZEOsphere

Dédiée à la chromatographie préparative, la silice ZEOsphere répond à tous les critères de qualité. Disponible en deux porosités 70A et 100A, elle est livrable par quantité minimale de 100g.

Désignation Granulométrie Porosité Surface m2/g Silice

ZEOprep ECO 40/63µm 60 A 500 3200250.630ZEOprep ECO 60/200µm 60 A 500 3200250.650

Désignation Granulométrie Réf. Réf.70 Å 100 Å

ZEOsphere SI 10µ 3202500.771 3202600.771ZEOsphere SI 15µ 3202500.772 3202600.772ZEOsphere SI 20µ 3202500.773 3202600.773ZEOsphere C18 10µ 3201500.771 3201600.771ZEOsphere C18 15µ 3201500.772 3201600.772ZEOsphere C18 20µ 3201500.773 3201600.773